JPH10513351A

JPH10513351A - 受容体チロシンキナーゼに関する修飾配位子

Info

Publication number: JPH10513351A
Application number: JP8523758A
Authority: JP
Inventors: エヌハーキンス，リチャード; セト，マリアン; エーカッツ，ブラッドレー
Original assignee: バーレックスラボラトリーズ，インコーポレイティド
Priority date: 1995-02-02
Filing date: 1996-02-02
Publication date: 1998-12-22
Also published as: AU4913696A; CA2211099A1; WO1996023883A2; WO1996023883A3; AU699562B2; EP0807174A1; US5840687A

Abstract

(57)【要約】本発明は、クラスＩ受容体チロシンキナーゼと結合する合成配位子を提供する。本配位子は天然配位子と構造が類似する。しかしながら、修飾配位子は元の配位子に存在する中間配列（Ｂ）ドメインを削除し、その代わりにアミノ（Ａ）及びカルボキシ（Ｃ）ドメインを連結するペプチド架橋を置く。

Description

【発明の詳細な説明】受容体チロシンキナーゼに関する修飾配位子産業上の利用分野本発明は、受容体チロシンキナーゼに関する元の配位子の類似体である化合物を提供する。これらの類似体は受容体チロシンキナーゼと結合し、元の配位子の活性を阻害するのに、又は元の配位子の非存在下で受容体を活性化するのに用い得る。発明の背景成長因子、分化因子及びホルモンのようなポリペプチドは、多細胞生物の発生を協同的に働かせる調節系の決定的成分である。これらの因子の多くは、固有のチロシンキナーゼ活性を有する細胞表面受容体と結合し、それを活性化することにより、それらの作用を媒介する（即ち、配位子により結合及び活性化された場合に細胞内ポリペプチド上のチロシン残基をリン酸化する）。受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）として公知のチロシンキナーゼ活性を有する細胞表面受容体は、特徴的分子トポロジーを有する。ＲＴＫは、概して、細胞外配位子結合ドメイン、単一経膜ドメイン、単一チロシンキナーゼドメイン、及びＲＴＫのキナーゼ機能の触媒活性を調節するのに役立つ少なくとも１つの調節ドメインヲ特徴とする。配列類似性及び他とは異なる構造特性を基礎にして、これらの受容体をさらに種々のクラスに分けることができる。クラスＩとして公知の群のＲＴＫは、特にこれらの受容体の細胞外ドメイン内の２つの富システイン配列反復領域を特徴とする。クラスＩ受容体に含まれるものとしては、ＥＧＦ、ＤＥＲ、ｌｅｔ２３、ＨＥＲ２／ｃ−ｅｒｂＢ−２／ｎｅｕ、ＨＥＲ３／ｃ−ｅｒｂＢ−３、ＨＥＲ４／ｃ −ｅｒｂＢ−４及びＸｍｒｋが挙げられる。クラスＩＲＴＫは細胞と形質転換成長因子（ＴＧＦ−α）、上皮成長因子（ＥＧＦ）及びヘレグリン heregulinを含めた多数の成長因子との相互作用を媒介する。これらの受容体は異なる組織に広く分布し、細胞型及び生理学的環境に依って、成長阻害又は細胞増殖及び分化の誘導を媒介するよう作用する。クラスＩＲＴＫ（例えば、ＴＧＦ−α、ＥＧＦ、ヘレグリン）と結合する配位子は、ポリペプチドの高度保存基である（表１参照）。しかしながら、これらの配位子に対する細胞反応は、配位子、活性化されたＲＴＫ、標的組織、及び配位子に曝露された場合の組織の発生段階に依って、大いに変化する。十分に理解されていないけれども、ＲＴＫ／配位子相互作用は、発生中の胚における胚芽層の分化のような重要な発生工程を媒介する誘導という出来事に大きな役割を有する、と思われる（Wilks，Adv．Cancer．Res.，60:43-73(1993)）。十分公知のクラスＩＲＴＫであるＥＧＦは、非常に種々の細胞型又は組織に関して検出可能であるが、但し造血細胞だけは例外である。証拠は、ＥＧＦ受容体が、ＥＧＦだけでなくその他のＥＧＦ様成長因子、例えば形質転換成長因子α （ＴＧＦ−α）及びワクチンウイルス成長因子（ＶＧＦ）（Carpenter，Ann．Re v．Biochem., 56; 881-914(1987)）、並びに表１に示されるその他のものの生物学的シグナルを媒介することを示す。ＥＧＦ受容体の活性化は、細胞増殖を増強することが示されている（同上）。増殖及び分化の他に、ＲＴＫは種々の癌の病因に関係がある。癌様症状において、ＲＴＫはしばしば、過剰発現される（Slamon et al.，Science，235:177-18 2(1987); Slamon et al.，Science，244 :707-712(1989); Hung，Cancer Bull.，40:300-303(1988); Zhang et al.，Onco gene，6:2113-2120(1991): O'Bryan et al.，Mol．Cell．Biol.，11:5016-5031( 1991)）か、又は配位子とは無関係の活性化形態で発現される（Martin-Zanca et al.，Nature，319:743-748(1986)）。ＥＧＦ受容体の過剰発現又は変形発現は、乳房、肝臓、膀胱、膵臓、神経膠芽腫、肉腫、肺を含めた種々のヒト腫瘍（癌）組織に関して、そして扁平上皮癌に関して最も頻繁に報告されている（Carpen ter，Ann．Rev．Biochem.，56:881-914(1987)）。同様に、別の成長因子、ＨＥＲ２／ｎｅｕの増幅は、乳癌の病因と相関していた（Slamon et al.，Science，244:707-712(1989)）。多数の研究が、その腫瘍から採取したＤＮＡ中のＨＥＲ２／ｎｅｕ遺伝子の多数のコピーを有することが判明した患者は再発までの時間がより短く且つ全体的生存率がより短いということを示したが、これはＨＥＲ２／ｎｅｕ受容体に関する遺伝子の増幅がこれらの個体における疾病行動に関する予後徴候であったことを示す（同上:707）。本発明の化合物は、クラスＩＲＴＫと特異的に結合する修飾ＲＴＫ配位子である。本発明の修飾ＲＴＫ配位子は一般に元のＲＴＫ配位子と類似しているが、しかしポリペプチドの非必須領域を削除する修飾を有する。したがって修飾ＲＴＫ配位子は元のＲＴＫ配位子より短く、したがって化学的に合成するのがより容易である。修飾は配位子の活性を変えることもある。したがって、修飾ＲＴＫ配位子は作働性又は拮抗性生物学的活性を有し得る。修飾ＲＴＫ配位子は標識すると、ＲＴＫの存在、非存在又は過剰発現に関して検定するためのプローブとして有用である。受容体過剰発現は癌の病因と関連があるので、標識化修飾ＲＴＫ配位子の使用は研究的及び臨床的情況ともに有用な検定を提供し得る。さらに、本発明の修飾ＲＴＫ配位子は、それらを活性化せずにＲＴＫと結合する。したがって、in vitro又はin vivo での受容体の活性化を遮断するための拮抗阻害剤として用い得る。修飾ＲＴＫ配位子は、したがってＲＴＫの生物学の研究のための、並びにＲＴＫの過剰発現に関連した疾患の治療における有力な治療薬として強力な道具である。多数のＲＴＫが同定された一方で、いくつかのＲＴＫに関する対応配位子の同定はずっと遅れている（Wilks，Adv．Cancer Res.,60:43-73(1993)）。特定の受容体を活性化する特異的配位子がないと、その受容体の生物学的機能の研究は困難になる。本発明の修飾ＲＴＫ配位子は、もとの配位子が未知の受容体を活性化又は阻害するのに用い得る。これは、特定の受容体の生物学的活性の確認、そしてその結果として対応する元の配位子の確認の助けとなり得る。本発明の要約本発明は、クラスＩＲＴＫに特異的な修飾配位子を提供する。修飾ＲＴＫ配位子は、作働的又は拮抗的活性を有する。さらに、それらは容易に標識化されて、特定の細胞のＲＴＫの存在又は非存在に関する迅速な検定を提供する。したがって、本発明は、クラスＩＲＴＫに対する特異性を有し、そして３つのシステイン結合を形成するアミノ酸を有する元のＲＴＫ配位子に対応する修飾ＲＴＫ配位子であって、上記のシステイン結合が元のＲＴＫ配位子のアミノ末端に関してその最初のシステインの相対的位置に関して上行順に番号を付けられ、この場合、元のＲＴＫ配位子の第一、第二及び第三システイン結合はドメインＡ、ドメインＢ及びドメインＣを限定し、３つの結合は第１、第２、第３、第４、第５及び第６システインから成り、第１結合は第１及び第３システイン間、第２結合は第２及び第４システイン間、そして第３結合は第５及び第６システイン間であり；ドメインＡは第１システインにより限定され、そのアミノ酸は第１及び第２システイン間に位置し；ドメインＢは第２システインにより限定され、そのアミノ酸は第２及び第４システイン間に位置し；第４システインにより限定されるドメインＣはそのアミノ酸が第４システインのカルボキシ末端に付着し；並びに修飾ＲＴＫ配位子はシステイン２及び４の間、そして５及び６の間にそれぞれ２つの結合を形成する４つのシステインアミノ酸を有し、元のＲＴＫ配位子のドメインＡ及びＣに対応する２つのドメインＡ₁及びＣ₁を有し；ここで、ドメインＡ₁は元のＲＴＫ配位子のドメインＡの生物学的に活性なアミノ酸配列で本質的に構成され；そしてドメインＣ₁は元のＲＴＫ配位子のドメインＣの生物学的に活性なアミノ酸配列で本質的に構成され；そしてドメインＡ₁のカルボキシ末端であるシステイン２及びドメインＣ₁のアミノ末端であるシステイン４はプレ架橋サブドメイン及び架橋サブドメインを包含するペプチド架橋により連結され、この場合、ペプチド架橋内には、元のＲＴＫ配位子のドメインＢ内に存在するβ−ターンに対応するβ−ターンが存在する修飾ＲＴＫ配位子に関する。本発明の別の局面は、特異的結合検定に標識化修飾ＲＴＫ配位子を用いて、細胞における受容体チロシンキナーゼの存在を定量する方法を提供する。本発明の第三の局面は、それを必要とする患者に治療的有効量の修飾ＲＴＫ配位子を投与することを包含する悪性疾患又は異常発現の治療に関する。本発明の詳細な説明定義本明細書中で用いる場合、以下の用語及び語句は、別記しないかぎり、以下に示した意味を有する：「元のＲＴＫ配位子」とは、チロシンキナーゼ活性を有するタンパク質と結合する天然分子、典型的には細胞表面の受容体を示す。概して、配位子は特定のタンパク質と特異的に結合する。しかしながら、それらがそうする必要があるわけではない。「修飾ＲＴＫ配位子」とは、元のＲＴＫ配位子中に普通に見いだされる１つ又はそれ以上のアミノ酸残基の付加、削除又は置換により変えられた配位子を指す。修飾ＲＴＫ配位子はさらに、特定のアミノ酸残基の側鎖基が化学的に修飾又は置換される修飾を含む。修飾ＲＴＫ配位子は新規に合成され、先在する元のＲＴＫ配位子の実際の修飾を必ずしも必要としない。「特異的に結合する」とは、特定の分子との、及び配位子が生物中で普通では曝露される以外の分子との配位子の結合を示す。「残基」とは、ペプチド中に取り込まれるアミノ酸を示し、別に限定しないかぎりは、天然アミノ酸と同様に機能し得る天然アミノ酸の公知の類似体を包含する。この開示のために、アミノ酸残基は、それらの一般に認められた３文字又は１文字省略形で、又は記号「ＡＡ」（アミノ酸の存在を示す）により本明細書中では示される。本明細書中に示されるアミノ酸は、以下のような速記呼称で記載される：「ペプチド」及び「ポリペプチド」とは、あるアミノ酸のα炭素カルボキシル基ともう一つのアミノ酸のアミノ基との間の縮合反応により形成されるペプチド結合を介してα炭素が結合されるアミノ酸の鎖を示す。したがって、鎖の一方の端（アミノ末端）の末端アミノ酸は遊離アミノ基を有し、一方、鎖の他方の端（カルボキシ末端）の末端アミノ酸は遊離カルボキシル基を有する。「アミノ末端」（Ｎ−末端と略記）とは、ペプチドのアミノ末端のアミノ酸上の遊離αアミノ基を、又はペプチド内の任意の他の位置のアミノ酸のαアミノ基（ペプチド結合に関与する場合にはイミノ基）を指す。同様に、「カルボキシ末端」とは、ペプチドのカルボキシ末端の遊離カルボキシル基を、又はペプチド内の任意の他の位置のアミノ酸のカルボニル基を示す。典型的には、ポリペプチドを構成するアミノ酸は順次番号を付けられて、ポリペプチドのアミノ末端からカルボキシ末端に向けて数が大きくなる。したがって、あるアミノ酸がもう一つのアミノ酸の「後に続く」という場合には、そのアミノ酸は「先行する」アミノ酸よりポリペプチドのカルボキシ末端に近い方に位置する。「ドメイン」という用語は、ポリペプチドの特徴的領域を示す。ドメインは特定の構造的特徴、例えばβ−ターン、α−螺旋、又はβ−プリーツシートを；特徴的構成成分アミノ酸（例えば優勢的疎水性又は親水性アミノ酸、又は反復アミノ酸配列）を；あるいは折り畳まれた三次元ポリペプチドの特定領域中のその位置を特徴とする。ドメインは、一連の隣接するアミノ酸で、又は鎖中の互いに別々のアミノ酸配列により構成されるが、しかしポリペプチドの折り畳みにより近接させ得る。「サブドメイン」という用語は、ドメイン内の特徴的領域を示す。サブドメインはさらに、特定の構造的特徴、特徴的構成成分アミノ酸又は反復アミノ酸配列、あるいは折り畳まれた三次元ポリペプチドの特定領域中のそれらの位置を特徴とする。例えば、普通は細胞表面に位置するポリペプチドは、疎水性アミノ酸を特徴とする経膜ドメインを有する。このドメインは、鎖中で隣接しないが、分子が折り畳まれると互いに横に並んで疎水性ドメインを形成するいくつかの他とは異なった疎水性領域から成る。各々の疎水性配列は、特定の非極性アミノ酸、例えばロイシン及びバリンの反復で構成されるサブドメインを特徴とする。「システイン結合」という語句は、ペプチド中の２つのシステインアミノ酸を直接又は一連の共有結合分子を介して連結する共有結合である。最も一般的なシステイン結合は、２つの硫黄原子を介しての共有結合を特徴とするジスルフィド結合である。結合が同一アミノ酸鎖中の２つのシステインを連結する場合、結合は鎖内結合と呼ばれる。「ペプチド架橋」という用語は、２つの他のアミノ酸配列を一緒に連結するアミノ酸配列を示す。ペプチド架橋は自然に生じるけれども、より一般的にはペプチド架橋は、２つの異なるアミノ酸配列を連結させるために、人工的に作られる。ペプチド架橋は、特定の生物学的活性に不可欠でないポリペプチドの部分を削除しながらポリペプチドの生物学的活性領域を連結するのに用い得る。ペプチド架橋は、ポリペプチドの活性領域間の決定的空間的（配座的）関係を保持するために「指名」される。「βターン」とは、ポリペプチドの方向を逆にするのに役立つｉ、ｉ＋１、ｉ＋２及びｉ＋３と呼ばれる４つの残基により限定され、残基ｉ及びｉ＋３は互いに水素結合される。「第１システイン」とは、鎖内ジスルフィド結合の形成に関与する元の配位子のアミノ末端に最も近いシステインを示す。鎖内ジスルフィド結合の形成に関与するクラスＩＲＴＫに関する元の配位子中には６つのシステインが存在する。これらのシステインは、ポリペプチドのアミノ末端からカルボキシ末端に向かって、システイン１〜システイン６と、あるいは第１システイン〜第６システイン呼ばれる。ジスルフィド結合はシステイン１と３、システイン２と４、そしてシステイン５と６をそれぞれ連結する。したがって、例えば元の配位子においては、形質転換成長因子α（ＴＧＦ−α）、即ち「第１システイン」は、アミノ末端から８番目の残基の位置のシステインを指す（Ｃｙｓ８と呼ばれる）。同様に、「第２システイン」「第３システイン」「第４システイン」「第５システイン」及び「第６システイン」は、それぞれ「Ｃｙｓ１６」「Ｃｙｓ２１」「Ｃｙｓ３２」「Ｃｙｓ３４」及び「Ｃｙｓ４３」に対応する。本発明の修飾ＲＴＫ配位子では、システイン１は削除され、２つのジスルフィド架橋のみを残す。しかしながら、システインは元の配位子と同じ番号を有する。したがって、修飾配位子のカルボキシ末端に一番近いジスルフィド結合を形成するシステインは、システイン結合に関与するシステインは４つだけであっても、依然としてそれぞれ５番目と６番目である。「生物学的に活性な」という語句は、天然の生物学的分子と相互作用してその分子の機能をin vitro又はin vivo に活性化又は阻害するペプチド配列を指す。この語句は、本明細書中では、成長因子のＲＴＫとの結合に又はＲＴＫの活性化又は阻害に関与する成長因子ポリペプチドの領域を示すのに最も一般的に用いられる。「受容体チロシンキナーゼ（単数又は複数）」又は「ＲＴＫ」とは、チロシンキナーゼ活性を有する細胞表面受容体であるポリペプチドを示す。元の配位子により結合される場合、それらは典型的には細胞内ポリペプチドのチロシン残基をリン酸化するよう作用する。「〜に対応する」とは、元の配位子と修飾配位子との両方に共通の構造的特徴が存在することを示す。したがって、元のＲＴＫ配位子のドメインＣ中のシステイン５と６の間の第３ジスルフィド架橋は、修飾ＲＴＫ配位子のドメインＣ₁のシステイン５及び６間のジスルフィド架橋に対応する。元のＲＴＫ配位子と修飾ＲＴＫ配位子との間の対応は、細胞内ジスルフィド架橋を形成するシステイン（例えば、元の配位子中にも修飾配位子中にも常に存在するシステイン５及び６）を参照して確定するのが最も容易である。「治療的有効量」とは、それを必要とする哺乳類に投与した場合に、腫瘍成長を防止又は停止すると明示された治療をなし遂げるのに十分な修飾ＲＴＫ配位子の量を示す。「治療的有効量」を構成する修飾配位子の量は、配位子、疾病状態及びその重症度、並びに治療される哺乳類に依って変わるが、しかし自身の知識及び本開示に関心を有する等業者にはルーチンに確定し得る。「治療する」又は「治療」とは、哺乳類、特にヒトにおける疾病状態の治療を指し、この疾病状態は特定のＲＴＫの阻害又は活性化により軽減される。「製薬上許容可能な賦形剤」とは、生理学的状態に近づけるのに必要な、非毒性でその中に懸濁されるか又は含まれる製剤組成物の生物学的活性に影響を及ぼさない許容可能な担体、及びあらゆる製薬上許容可能な補助物質を指す。図面の簡単な説明図１は、形質転換成長因子α（ＴＧＦ−α）（元のＲＴＫ配位子）の構造を示す。ＴＧＦ−αは、同一ポリペプチドの異なる領域を連結する３つのジスルフィド架橋を形成する６つのシステイン残基の存在を特徴とする。ジスルフィド架橋は、アミノ末端から数えて第１番目と第３番目、第２番目と第４番目、並びに第５番目と第６番目のシステイン間に形成される。さらに、ＴＧＦ−αは、Ａ、Ｂ及びＣと呼ばれる３つのドメインを特徴とする。ドメインＡは、第１システイン、第１及び第２システイン間に位置するアミノ酸、並びに第２システインから成る。ドメインＣは、システイン４、及びシステイン４のカルボキシ末端に連結されるアミノ酸から成る。ドメインＢは、第２及び第４システイン間のアミノ酸から成り、β−ターンの存在を特徴とする。図２は、本発明の修飾ＲＴＫ配位子の構造を示す。修飾ＲＴＫ配位子のＡ₁ドメインは元のＲＴＫ配位子のＡドメインに対応する。ここに示した修飾ＲＴＫ配位子においては、Ａ₁ドメインの、システイン１を含めた最初の１０個のアミノ酸が除去される。システイン３も除去され、元のＲＴＫ配位子に対比して、最初のシステイン結合（ジスルフィド架橋）が存在しない。システイン２及び４は、予備架橋サブドメイン（Ｘ２_A）及び架橋サブドメイン（Ｘ２_B）を含むペプチド架橋により連結される。ペプチド架橋内には、元のＲＴＫ配位子中に存在するβ ターンに対応する構造が存在する。同様に、Ｃ₁ドメインは元のＲＴＫ配位子のＣドメインに対応し、２つの残りのシステイン結合は元のＲＴＫ配位子の結合２及び３に対応する。図３は、実施例２に記載されているような特異的結合検定に関する標準曲線の結果を示す。修飾ＲＴＫ配位子の構造本発明の修飾ＲＴＫ配位子は元のＲＴＫ配位子と構造的に対応しており、したがって、ポリペプチドの構造的高度保存基である元のＲＴＫ配位子を参照しながら、本明細書で説明する。形質転換成長因子α（ＴＧＦ−α）は、このような元のＲＴＫ配位子の１つである。それは、５０アミノ酸長のポリペプチドである。それは、３つの鎖内システイン結合（ジスルフィド架橋）を形成する６つのシステインを含有する。結合に関与するシステイン残基をポリペプチドのアミノ末端から順に数を増して数えると、システイン１と３の間、システイン２と４の間、及びシステイン５と６の間に結合が形成される。３つのシステイン結合は分子を効果的に折り畳んで３つのループ、即ち；アミノ末端Ａループ、中間のＢループ及びカルボキシ末端Ｃループにする。これら３つのループは、３つのドメイン、即ち；第１システイン、第１及び第２システイン間に位置するアミノ酸、並びに第２システインから成るドメインＡ；第２及び第４システイン間に位置するアミノ酸から成るドメインＢ；そしてシステイン４とシステイン４のカルボキシ末端に付着するアミノ酸から成るドメインＣに対応する（図１参照）。本発明の修飾ＲＴＫ配位子は元のＲＴＫ配位子のドメインＢを削除し、その代わりにシステイン２とシステイン４を連結するペプチド架橋を置く。これらの修飾ＲＴＫ配位子を説明するに際しては、修飾ＲＴＫ配位子のドメインＡ₁は元のＲＴＫ配位子のドメインＡに対応し、修飾ＲＴＫ配位子のドメインＣ₁は元のＲＴＫ配位子のドメインＣに対応する。ペプチド架橋は、予備架橋サブドメイン及び架橋サブドメインから成る。これら２つのサブドメインからの残基の組合せにより、元のＲＴＫ配位子中のβターンに対応するβターンの形成が可能になる。 βターンはシステイン４のアミノ末端に連結される。したがって、元のＲＴＫ配位子中に認められる第１システイン結合（システイン１及び３の間）は削除される。さらに、修飾ＲＴＫ配位子のＡ₁ドメインは、元のＲＴＫ配位子の対応するＡドメイン中に存在する１０個までのアミノ末端アミノ酸の削除により切断される（図２参照）。要するに、本発明の修飾ＲＴＫ配位子は、次の点で上記の元のＲＴＫ配位子に類似している：１）元のＲＴＫ配位子のシステイン２、４、５、及び６に対応する４つのシステインアミノ酸を有する；２）システイン２と４の間、及びシステイン５と６の間にそれぞれ２つのシステイン結合を含有する；３）元のＲＴＫ配位子のそれぞれＡ及びＣ領域に本質的に対応するアミノ酸配列を有するドメインＡ₁及びＣ₁を有する；そして４）ともにβ−ターンを含有する。好ましい実施態様本発明の修飾ＲＴＫ配位子は、本質的に次式から成る：Ｘ１−Ｘ２_A−Ｘ２_B−Ｘ３（ここで、式の各部分は本発明の要約の項に上記した修飾ＲＴＫ配位子のドメインに対応する。特にＸ１（アミノ酸残基ＡＡ₁−１〜ＡＡ₁−６から成る）はドメインＡ₁に対応し；Ｘ２_Aは予備架橋サブドメイン（アミノ酸残基ＡＡ_2A−１〜ＡＡ_2A−５）であり；Ｘ２_Bは架橋サブドメイン（１〜３個のアミノ酸残基ＡＡ₂₈ 〜ＡＡ₂₈−３から成る）であり；そしてＸ３（アミノ酸残基ＡＡ₃−１〜ＡＡ₃− １９）はドメインＣ₁に対応する。サブドメインＸ２_A及びＸ２_Bは一緒にペプチド架橋ドメインを構成する）。本式中のアミノ酸残基の好ましい群を以下に示す：Ｘ１に関しては、ＡＡ₁−１はＳｅｒ、Ｌｙｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ又はＧｌｕ；ＡＡ₁−２はＨｉｓ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｇｌｎ又はＧｌｕであり；ＡＡ₁ −３はＴｈｒ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｖａｌ又はＧｌｎであり；ＡＡ₁−４はＧｌｎ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ又はＡｓｎであり；ＡＡ₁ −５はＰｈｅ又はＴｙｒであり；そしてＡＡ₁−６はＣｙｓであり；Ｘ２_Aに関しては、ＡＡ_2A−１はＶａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ又はＬｅｕ；ＡＡ_2A−２はＡｓｎ、Ｈｉｓ又はＩｌｅ；ＡＡ_2A−３はＧｌｙ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ又はＡｓｎ；ＡＡ_2A−４はＧｌｙ、Ａｓｐ、Ｔｈｒ、Ｇｌｕ又はＡｒｇ；そしてＡＡ_2A−５はＶａｌ、Ｔｈｒ、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ｇｌｎ又はペプチド結合であり；Ｘ２_Bに関しては、Ｘ２_Bが１個のアミノ酸残基から成る場合は、ＡＡ_2B−１はＧｌｙ又はＳｅｒであり；あるいはＸ２_Bが２個のアミノ酸残基から成る場合は、１）ＡＡ_2B−１はＡｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ又はＰｒｏであり、そしてＡＡ_2B −２はＡｓｐ、Ｓｅｒ、Ａｓｎ又はＡｒｇであるか；もしくは２）ＡＡ_2B−１はＰｒｏであり、ＡＡ_2B−２はＧｌｙ又はＡｓｎであるか；もしくは３）ＡＡ_2B−１はＧｌｙ、Ａｓｎ又はＡｓｐであり、ＡＡ_2B−２はＧｌｙであるか，もしくは４）ＡＡ_2B−１はＧｌｙであり、ＡＡ_2B−２はＳｅｒ、Ｇｌｕ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ａｓｐ又はＬｙｓであり、Ｘ２_Bが３個のアミノ酸残基から成る場合には、ＡＡ_2B−１はあらゆるアミノ酸残基であり、そして：１）ＡＡ_2B−２はＡｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ又はＰｒｏであり、そしてＡＡ_2B −３はＡｓｐ、Ｓｅｒ、Ａｓｎ又はＡｒｇであるか；もしくは２）ＡＡ_2B−２はＰｒｏであり、ＡＡ_2B−３はＧｌｙ又はＡｓｎであるか；もしくは３）ＡＡ_2B−２はＧｌｙ、Ａｓｎ又はＡｓｐであり、ＡＡ_2B−３はＧｌｙであるか；もしくは４）ＡＡ_2B−２はＧｌｙであり、ＡＡ_2B−３はＳｅｒ、Ｇｌｕ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ａｓｐ又はＬｙｓであり；Ｘ３に関しては、ＡＡ₃−１はＣｙｓであり；ＡＡ₃−２はＶａｌ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ａｌａ、Ｈｉｓ、Ｔｈｒ又はＩｌｅであり；ＡＡ₃−３はＣｙｓであり；ＡＡ₃−４はＨｉｓ、Ｖａｌ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｌａ又はＧｌｎであり；ＡＡ₃−５はＳｅｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｐｒｏ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ又はＧｌｎであり；ＡＡ₃−６はＧｌｙ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｐｈｅ又はＧｌｕであり；ＡＡ₃−７はＴｙｒ、Ｓｅｒ又はＰｈｅであり；ＡＡ₃−８はＶａｌ、Ｉｌｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｐｈｅ、Ｇｌｕ、Ｔｙｒ又はＨｉｓであり；ＡＡ₃−９はＧｌｙであり；ＡＡ₃−１０はＡｌａ、Ｇｌｕ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｉｌｅ、Ｓｅｒ、Ａｒｇ又はＶａｌであり；ＡＡ₃ −１１はＡｒｇ又はＡｓｎであり；ＡＡ₃−１２はＣｙｓであり；ＡＡ₃−１３はＧｌｕ、Ｇｌｙ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ又はＨｉｓであり；ＡＡ₃−１４はＨｉｓ、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｐｈｅ、Ａｒｇ、Ｌｅｕ又はＡｓｎであり；ＡＡ₃−１５はＡｌａ、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ａｓｎ、Ａｓｐ又はＴｙｒであり；ＡＡ₃−１６はＡｓｐ、Ｖａｌ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｇｌｙ又はＳｅｒであり；ＡＡ₃−１７はＬｅｕ、Ｍｅｔ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ｖａｌ又はＰｒｏであり；ＡＡ₃−１８はＬｅｕ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ又はＡｌａであり；ＡＡ₃−１９はＡｌａ、Ｔｒｐ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｌｙｓ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ又はＳｅｒである。この好ましい群の中で、好ましい一亜群は次式を有するＥＧＦ受容体に対して向けられる修飾ＲＴＫ配位子である：Ｘ１に関しては、ＡＡ₁−１はＳｅｒ、Ｌｙｓ、Ｇｌｎ、Ａｓｐ又はＧｌｕ；ＡＡ₁−２はＨｉｓ、Ｔｙｒ、Ｇｌｙ又はＰｈｅであり；ＡＡ₁−３はＴｈｒ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ又はＧｌｎであり；ＡＡ₁−４はＧｌｎ、Ｇｌｙ、Ａｓｎ、Ｈｉｓ又はＡｓｐであり；ＡＡ₁−５はＰｈｅ又はＴｙｒであり；そしてＡＡ₁−６はＣｙｓであり；Ｘ２_Aに関しては、ＡＡ_2A−１はＰｈｅ、Ｉｌｅ又はＬｅｕであり；ＡＡ_2A− ２はＨｉｓ、Ｉｌｅ又はＡｓｎであり；ＡＡ_2A−３はＧｌｙ、Ａｓｎ又はＡｓｐであり；ＡＡ_2A−４は、Ｔｈｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ａｒｇ又はＧｌｙであり；そしてＡＡ_2A−５はＶａｌ、Ｔｈｒ又はペプチド結合であり；Ｘ２_Bに関しては、アミノ酸残基は好ましい群の場合と同一であり；そしてＸ３に関しては、ＡＡ₃−１はＣｙｓであり；ＡＡ₃−２はＶａｌ、Ｌｙｓ、Ｉｌｅ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ又はＡｓｎであり；ＡＡ₃−３はＣｙｓであり；ＡＡ₃−４はＨｉｓ、Ｇｌｎ、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ又はＶａｌであり；ＡＡ₃−５はＳｅｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｐｒｏ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ又はＧｌｎであり；ＡＡ₃−６はＧｌｕ、Ａｓｎ、Ａｓｐ又はＧｌｙであり；ＡＡ₃−７はＴｙｒであり；ＡＡ₃ −８はＶａｌ、Ｉｌｅ、Ｓｅｒ、Ｐｈｅ、Ｇｌｕ、Ｔｈｒ又はＨｉｓであり；ＡＡ₃−９はＧｌｙであり；ＡＡ₃−１０はＡｌａ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｉｌｅ又はＶａｌであり；ＡＡ₃−１１はＡｒｇであり；ＡＡ₃−１２はＣｙｓであり；ＡＡ₃−１３はＧｌｕ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ又はＧｌｙであり；ＡＡ₃−１４はＨｉｓ、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ａｒｇ又はＧｌｙであり；ＡＡ₃−１５はＡｌａ、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ又はＬｙｓであり；ＡＡ₃ −１６はＡｓｐ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ａｓｎ又はＳｅｒであり；ＡＡ₃−１７はＬｅｕ又はＭｅｔであり；ＡＡ₃−１８はＬｅｕ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ又はＰｒｏであり；ＡＡ₃−１９はＡｌａ、Ｔｒｐ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ａｓｐ又はＴｙｒである。この亜群の中で、好ましいクラスは次式を有する修飾ＲＴＫ配位子である：Ｘ１に関しては、ＡＡ₁−１はＳｅｒであり；ＡＡ₁−２はＨｉｓであり；ＡＡ₁ −３はＴｈｒであり；ＡＡ₁−４はＧｌｎであり；ＡＡ₁−５はＰｈｅであり；そしてＡＡ₁−６はＣｙｓであり；Ｘ２_Aに関しては、ＡＡ_2A−１はＰｈｅであり；ＡＡ_2A−２はＨｉｓであり；ＡＡ_2A−３はＧｌｙであり；ＡＡ_2A−４はＴｈｒであり；そしてＡＡ_2A−５はペプチド結合であり；Ｘ２_Bに関しては、アミノ酸は好ましい群の場合と同一であり；そしてＸ３に関しては、ＡＡ₃−１はＣｙｓであり；ＡＡ₃−２はＶａｌであり；ＡＡ₃ −３はＣｙｓであり；ＡＡ₃−４はＨｉｓであり；ＡＡ₃−５はＳｅｒであり；ＡＡ₃−６はＧｌｙであり；ＡＡ₃−７はＴｙｒであり；ＡＡ₃−８はＶａｌであり；ＡＡ₃−９はＧｌｙであり；ＡＡ₃−１０はＡｌａであり；ＡＡ₃−１１はＡｒｇであり；ＡＡ₃−１２はＣｙｓであり；ＡＡ₃−１３はＧｌｕであり；ＡＡ₃ −１４はＨｉｓであり；ＡＡ₃−１５はＡｌａであり；ＡＡ₃−１６はＡｓｐであり；ＡＡ₃−１７はＬｅｕであり；ＡＡ₃−１８はＬｅｕであり；ＡＡ₃−１９はＡｌａである。このクラスの中で、本発明の最も好ましい修飾ＲＴＫ配位子を以下に示す：上記の修飾ＲＴＫ配位子の好ましい群の中で、別の好ましい亜群は、次式を有する他のＲＴＫに関する修飾ＲＴＫ配位子である：Ｘ１に関しては、ＡＡ₁−１はＬｙｓであり；ＡＡ₁−２はＧｌｕ又はＧｌｎであり；ＡＡ₁−３はＬｙｓ、Ｖａｌ又はＧｌｕであり；ＡＡ₁−４はＴｈｒ、Ａｌａ、Ａｓｎ又はＧｌｙであり；ＡＡ₁−５はＰｈｅ又はＴｙｒであり；そしてＡＡ₁−６はＣｙｓであり；Ｘ２_Aに関しては、ＡＡ_2A−１はＶａｌ、Ｌｅｕ、Ｔｙｒ又はＨｉｓであり；ＡＡ_2A−２はＡｓｎであり；ＡＡ_2A−３はＨｉｓ又はＧｌｙであり；ＡＡ_2A−４はＧｌｙであり；そしてＡＡ_2A−５はＨｉｓ、Ｇｌｎ、Ｔｈｒ又はＧｌｕであり；Ｘ２_Bに関しては、アミノ酸は好ましい群の場合と同一であり；そしてＸ３に関しては、ＡＡ₃−１はＣｙｓであり；ＡＡ₃−２はＡｒｇ、Ｔｈｒ、Ａｌａ又はＬｙｓであり；ＡＡ₃−３はＣｙｓであり；ＡＡ₃−４はＰｒｏ、Ａｌａ又はＧｌｎであり；ＡＡ₃−５はＡｓｎ、Ｔｈｒ又はＰｒｏであり；ＡＡ₃−６はＧｌｙ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｓｅｒ又はＰｈｅであり；ＡＡ₃−７はＰｈｅ又はＳｅｒであり；ＡＡ₃−８はＩｌｅ、Ｔｙｒ又はＴｈｒであり；ＡＡ₃−９はＧｌｙであり；ＡＡ₃−１０はＡｌａ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ又はＡｓｐであり；ＡＡ₃−１１はＡｓｎ又はＡｒｇであり；ＡＡ₃−１２はＣｙｓであり；ＡＡ₃−１３はＧｌｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｎ又はＴｈｒであり；ＡＡ₃−１４はＧｌｕ、Ｌｅｕ、Ｈｉｓ又はＡｓｎであり；ＡＡ₃−１５はＡｓｎ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ａｓｐ又はＴｈｒであり；ＡＡ₃−１６はＧｌｙ、Ｓｅｒ又はＶａｌであり；ＡＡ₃−１７はＭｅｔ、Ａｓｎ、Ｖａｌ、Ａｒｇ又はＰｒｏであり；ＡＡ₃−１８はＭｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ又はＡｌａであり；ＡＡ₃−１９はＬｙｓ、Ｐｈｅ、Ｇｌｕ又はＳｅｒである。この亜群の中で、好ましいクラスは次式を有する修飾ＲＴＫ配位子である：Ｘ１に関しては、ＡＡ₁−１はＬｙｓであり；ＡＡ₁−２はＧｌｕであり；ＡＡ₁ −３はＬｙｓであり；ＡＡ₁−４はＴｈｒであり；ＡＡ₁−５はＰｈｅであり；そしてＡＡ₁−６はＣｙｓであり；Ｘ２_Aに関しては、ＡＡ_2A−１はＶａｌであり；ＡＡ_2A−２はＡｓｎであり；ＡＡ_2A−３はＧｌｙであり；ＡＡ_2A−４はＧｌｙであり；そしてＡＡ_2A−５はＧｌｕであり；Ｘ２_Bに関しては、アミノ酸は好ましい群の場合と同一であり；そしてＸ３に関しては、ＡＡ₃−１はＣｙｓであり；ＡＡ₃−２はＬｙｓであり；ＡＡ₃ −３はＣｙｓであり；ＡＡ₃−４はＧｌｎであり；ＡＡ₃−５はＰｒｏであり；ＡＡ₃−６はＧｌｙであり；ＡＡ₃−７はＰｈｅであり；ＡＡ₃−８はＴｈｒであり；ＡＡ₃−９はＧｌｙであり；ＡＡ₃−１０はＡｌａであり；ＡＡ₃−１１はＡｒｇであり；ＡＡ₃−１２はＣｙｓであり；ＡＡ₃−１３はＴｈｒであり；ＡＡ₃ −１４はＧｌｕであり；ＡＡ₃−１５はＡｓｎであり；ＡＡ₃−１６はＶａｌであり；ＡＡ₃−１７はＰｒｏであり；ＡＡ₃−１８はＭｅｔであり；ＡＡ₃−１９はＬｙｓである。このクラスの中で、本発明の最も好ましい修飾ＲＴＫ配位子を以下に示す：修飾ＲＴＫ配位子の調製Ａ．修飾配位子の化学合成本発明の修飾ＲＴＫ配位子は、典型的には１００以上のアミノ酸長である。したがって、溶液法及び固相法を含めた当業者に十分公知の多数のあらゆる化学的ペプチド合成技術を用いて配位子を調製することが可能であり、固相合成が好ましい。配列のＣ末端アミノ酸を不溶性支持体に付着させ、その後引き続いて配列中の残りのアミノ酸を付加する固相合成は、本発明の修飾ＲＴＫ配位子を調製するのに好ましい方法である。固相合成のための技術は、Barany and Merrifield，Sol id-Phase Peptide Synthesis，pp.3-284 in The Peptides: Analysis，Synthesi s，Biology，Vol.2: Special Methods in Peptide Synthesis，Part A.，Merrif ield，et al.，J．Am．Chem．Soc．85，2149-2156(1963)及びGross and Melenho fer，eds．Academic Press．N.Y.，1980 及びStewart et al.，Solid Phase Pep tide Synthesis，2nd ed．Pierce Chem．Co.，Rockford，III(1984)に記載されている（これらの記載内容は、参照により本明細書中に含まれる）。固相合成は、保護化アミノ酸をそのカルボキシ基を介して適切な固体支持体に結合することにより、ペプチドのＣ末端から開始される。固体支持体は、それがカルボキシル基と結合できる限り特に限定されないが、一方ペプチド合成手順に用いられる試薬に対して実質的に不活性のままである。例えば、アミノ保護化アミノ酸ヲベンジルエステル結合を介してクロロメチル化樹脂又はヒドロキシメチル樹脂に、あるいはアミド結合を介してベンズヒドリルアミン（ＢＨＡ）次子又はｐ−メチルベンズヒドリルアミン（ＭＢＨＡ）樹脂に結合することにより、出発物質を調製し得る。固体支持体物質は当業者には十分公知であって、その例としては、例えばクロロメチル樹脂又はブロモメチル樹脂；ヒドロキシメチル樹脂、フェノール樹脂、ｔｅｒｔ−アルキルオキシカルボニルヒドラジド化樹脂等が挙げられるが、これらに限定されない。樹脂は市販されており、それらの調製は当業者には公知である。固体支持体としてベンジルエステル樹脂を用いて、固相ペプチド合成法により、酸形態のペプチドを調製し得る。対応するアミドは、固体支持体としてベンズヒドリルアミン又はメチルベンズヒドリルアミン樹脂を用いることにより生成し得る。ＢＨＡ又はＭＢＨＡ樹脂を用いる場合、固体支持体からポリペプチドを生成するために無水フッ化水素酸で処理して末端アミド基を有するポリペプチドを得ると、当業者は認識する。合成に用いられる各々のアミノ酸のαアミノ基は、反応性α−アミノ作用を伴う副反応を防止するためにカップリング反応中は保護される必要がある。ある種のアミノ酸はさらに、ポリペプチド合成中に化学反応がその部位で起きるのを防止するために適切な保護基で保護化されねばならない反応性側鎖官能基（例えば、スルフヒドリル、アミノ、カルボキシル及びヒドロキシル）を含有する。保護基は、当業者には十分公知である（例えば、Gross and Melenhofer ，The Peptides: Analysis，Synthesis，Biology，Vol.3: Protection of Funct ional Groups in Peptide Synthesis，Academic Press，N.Y.(1981)参照。この記載内容は、参照により本明細書中に含まれる）。適切に選択されたα−アミノ保護基は、カップリング反応中α−アミノ作用を不活性にし、側鎖保護基を除去しない条件下でカップリング後に容易に除去可能で、ペプチド断片の構造を変えず、カップリング直前の活性化時にラセミ化を防止する。側鎖保護基は、側鎖官能基を合成中は不活性にさせるよう選択されねばならず、α−アミノ保護基を除去するために用いられる条件下で安定でなければならず、そしてポリペプチドの構造を変えない条件下でポリペプチド合成完了後に除去可能でなければならない。 α−アミノ基のための保護基の実例としては、芳香族ウレタン型基、例えばフルオレニルメチルオキシカルボニル（Ｆｍｏｃ）、Ｃｂｚ、置換ベンジルオキシカルボニル、例えばｐ−クロロベンジルオキシカルボニル、ｏ−クロロベンジルオキシカルボニル、２，４−ジクロロベンジルオキシカルボニル、２，６−ジクロロベンジルオキシカルボニル等；脂肪族ウレタン型、例えばＢｏｃ、ｔ−アミルオキシカルボニル、イソプロピルオキシカルボニル、２−（ｐ−ビフェニル）イソプロピルオキシカルボニル、アリルオキシカルボニル等、シクロアルキルウレタン型基、例えばシクロペンチルオキシカルボニル、シクロヘキシルオキシカルボニル、シクロヘプチルオキシカルボニル、アダマンチルオキシカルボニル等が挙げられる。好ましいα−アミノ保護基は、ｔ−ブチルオキシカルボニル（Ｂｏｃ）である。Ｌｙｓ中に存在する側鎖アミノ基に関しては、α−アミノ基の保護のための上記のあらゆる保護基が適している。典型的基としては、Ｂｏｃ、ｐ−クロロベンジルオキシカルボニル、ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニル、ｏ−クロロベンジルオキシカルボニル、２，６−ジクロロベンジルオキシカルボニル、２，４−ジクロロベンジルオキシカルボニル、ｏ−ブロモベンジルオキシカルボニル、ｐ−ニトロベンジルオキシカルボニル、ｔ−ブチルオキシカルボニル、イソプロピルオキシカルボニル、ｔ−アミルオキシカルボニル、シクロペンチルオキシカルボニル、シクロヘキシルオキシカルボニル、シクロヘプチルオキシカルボニル、アダマンチルオキシカルボニル、ｐ−トルエンスルホニル等が挙げられるが、これらに限定されない。好ましい側鎖アミノ保護基は、ｏ−クロロベンジルオキシカルボニル（２−ＣｌＺ）である。Ａｒｇのグアニジノ基の保護に関しては、適切な保護基の例としてニトロ、トシル、Ｃｂｚ、アダマンチルオキシカルボニル、及びＢｏｃが挙げられるが、これらに限定されない。好ましい保護基はトシル（Ｔｏｓ）である。Ｓｅｒ、Ｔｈｒ又はＴｙｒの側鎖上のヒドロキシル基は、Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル、例えばメチル、エチル及びｔ−ブチル；置換ベンジル、例えばｐ−メトキシベンジル、ｐ−ニトロベンジル、ｐ−クロロベンジル、ｏ−クロロベンジル及び２，６−ジクロロベンジルにより保護され得る。Ｓｅｒ及びＴｈｒのための好ましい脂肪族ヒドロキシル保護基はベンジルであり、一方Ｔｙｒ芳香族ヒドロキシルは２，６−ジクロロベンジルエーテルとして最も一般的に保護される。Ａｓｐ又はＧｌｕのカルボキシル基は、例えばベンジル、ｔ−ブチル、シクロヘキシル、シクロペンチル等のような基を用いてエステル化することにより保護し得る。好ましい基はベンジル及びシクロヘキシルである。アミノ酸のカップリングは、当業者に公知の種々の化学的方法により達成し得る。典型的アプローチとしては、ポリペプチド断片のＮ末端アミノ基との反応をカルボキシル基が受けやすくする誘導体へのアミノ酸の変換、あるいは適切なカップリング剤、例えばＮ，Ｎ’−ジクロロヘキシルカルボジイミド（ＤＣＣ）又はＮ，Ｎ’−ジイソプロピルカルボジイミド（ＤＩＰＣＤＩ）の使用が挙げられる。適切な合成化学技法は、Gross and Melenhofer，The Peptides: Analysis， Synthesis，Biology，Vol.1: Methods of Peptide Bond Formation，Academic P ress，N.Y.(1979)及びIzumiya，et al.，Synthesis of Peptides，Maruzen Pub ．Co.，Ltd.,(1975)（これらの記載内容は、参照により本明細書中に含まれる）に開示されている。ポリペプチド合成は、ｔ−ブチルオキシカルボニルのような保護基によりＮα −アミノ位置で保護化されるＣ末端アミノ酸を固体支持体に先ず結合させることにより開始する。例えば、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨは、イソプロピルカルボジイミドを用いて、攪拌しながら25℃で２時間、ベンズヒドリルアミン樹脂と結合させ得る。Ｂｏｃ保護化アミノ酸の樹脂支持体とのカップリング後、塩化メチルに溶解したトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）又はＴＦＡ単独を用いて、α−アミノ保護基を除去する。この脱保護化は、約０℃〜室温で実施する。 α−アミノ保護基の除去後、残りのＢｏｃ−保護化アミノ酸を所望の順序で順次結合させる。適切にも、保護化アミノ酸は多数の供給元（例えば、Applied Bi osystems，Foster City，CA）から市販されている。個々のアミノ酸の段階的付加に代わるものとして、１つ以上のアミノ酸で構成される適切に保護化されたペプチド断片ヲ「成長中の」ポリペプチドと結合させ得る。上記のような適切なカップリング剤の選択は、当業者には十分公知である。各保護化アミノ酸又はアミノ酸配列を余分に固相反応器中に入れ、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）又は塩化メチレン（ＣＨ₂Ｃｌ₂）の媒質又はその混合物中でカップリングを実施する。カップリングが不十分である場合には、Ｎα−アミノ基の脱保護化及び次のアミノ酸の付加前にカップリング反応を反復させ得る。カップリング効率は、当業者に十分公知の多数の方法によりモニタリングし得る。カップリング効率をモニタリングする好ましい方法は、ニンヒドリン反応による方法である。ポリペプチド合成反応は、多数の市販のペプチド合成機（例えば Biosearch 9500，Biosearch，San Raphael，CA）を用いて自動的に実施し得る。選択する保護基に依って、約 0℃で約20〜90分、好ましくは60分間、アニソール及びジメチルスルフィドの存在下で無水液体フッ化水素（ＨＦ）中の不溶性担体又は固体支持体を攪拌することにより、あるいはほぼ室温で30〜60分間トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）中の樹脂の１mg/10 ml懸濁液に臭化水素（ＨＢｒ）を連続的に発泡させることにより、ペプチドを切断して、保護基を除去し得る。当業者に十分公知のその他の脱保護化法を用いてもよい。脱保護化及び切断後、遊離アミノ末端をアセチル化剤、例えば無水酢酸でアセチル化する。当業者に十分公知のペプチド精製法により、反応混合物から本発明の修飾配位子を単離し、精製し得る。例えば、ゲル電気泳動、又は公知のクロマトグラフィー法、例えば逆相ＨＰＬＣ、ゲル浸透、イオン交換、サイズ排除、アフィニティー、分配又は向流分配クロマトグラフィーを用いてポリペプチドを精製し得る。Ｂ．修飾配位子の生物学的合成１．修飾配位子をコードするＤＮＡ配列の単離組換えＤＮＡ法を用いて、本発明の修飾ＲＴＫ配位子を調製し得る。一般に、これは、特定のＲＴＫ配位子をコードするＤＮＡ配列を合成又は単離し、転写プロモーターの制御下にあるようにＤＮＡ配列をプラスミド又は他のベクター中に入れ、ベクターを適切な生物、例えば細菌細胞、酵母菌細胞又は哺乳類細胞中に挿入して、所望のポリペプチドの発現を得た後、宿主細胞からポリペプチドを単離することを包含する。特定の修飾ＲＴＫ配位子をコードするＤＮＡ配列は、一緒に集合して所望の配列を生成するオリゴヌクレオチドを合成することにより新規に、あるいは先在する元のＤＮＡ配列の修飾により、生成し得る。ＤＮＡを新規に合成する場合、構成成分オリゴヌクレオチドは、当業者に公知の種々の方法により化学的に合成し得る。これらの例としては、Beaucage and C arruthers，Tetra．Letts．22:1859-1862(1981)記載の固相ホスホラミダイト法、Matteucci，et al.，J．AM．Chem．Soc.，103:3185(1981)記載のトリエステル法（これらの記載内容は、参照により本明細書中に含まれる）、又は当業者に公知の他の方法が挙げられる。標準プロトコールを用いて、市販のＤＮＡ合成機（例えば、Applied Biosystems，Foster City，CA から販売）を用いてＤＮＡを合成するのが好ましい。必要な場合には、当業者に十分公知の技法により、オリゴヌクレオチドを精製する。典型的精製方法としては、サイズ排除クロマトグラフィー、ゲル電気泳動、陰イオン交換クロマトグラフィー（例えば、Mono-Qカラム、Pharmacia-LKB、P iscataway，N.J.）、又は逆相高速液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）が挙げられるが、これらに限定されない。次に、オリゴヌクレオチドをその補体とアニーリングして二本鎖ＤＮＡ配列を生成する。あるいは、適切なプライマーを有する鋳型として一本鎖を用いてＤＮＡポリメラーゼにより二本鎖配列を生成する。相補的オリゴヌクレオチドを化学的に合成する場合には、オリゴヌクレオチドをアニーリングする時に張出しを提供するよう設計し得る。次に、二本鎖ＤＮＡ配列を張出しを介して一緒にアニーリングして長い二本鎖ＤＮＡ分子を生成し、リガーゼを用いて張出しのニックを一緒に結紮し得る。ＤＮＡハイブリダイゼーション及び結紮の方法は、当業者には十分公知である（例えばSambrook et al.，Molecular Cloning-A Laboratory Manual，Cold Spring Harbor Laboratory，Cold Spring Harbor，N .Y.(1985)参照。この記載内容は、参照により本明細書中に含まれる）。あるいは、元のＲＴＫ配位子をコードする先在ＤＮＡ配列を変えることにより、修飾ＲＴＫ配位子をコードするＤＮＡ配列が得られる。多数の元の配位子をコードするＤＮＡ配列が公知である。ＲＴＫ配位子をコードする配列を含有する多数のＤＮＡ構築物が利用できる（例えば、Holmes，W.E．et al.，Science 256， 1205-1210(1992); Derynk，R．et al.，Cell 38，287-297(1984)参照）か、あるいはＤＮＡ中の配列に特異的な標識化オリゴヌクレオチドプローブを用いて、ゲノム又はｃＤＮＡライブラリーからＤＮＡを単離できる。元のＲＴＫ配位子をコードする遺伝子を含有するゲノムＤＮＡ又はｃＤＮＡの制限エンドヌクレアーゼ消化を用いて、これらのポリペプチドをコードするＤＮＡを単離し得る。制限エンドヌクレアーゼ消化後、例えばサザーンブロットで、核酸プローブとハイブリダイズするその能力により、ＲＴＫ配位子をコードするＤＮＡを同定し、当業者になじみの標準的方法を用いてこれらのＤＮＡ領域を単離し得る（Sambrook等参照）。普通は元のＲＴＫ配位子をコードするＤＮＡを修飾して本発明の修飾ＲＴＫ配位子を作らねばならない。例えば特定部位の突然変異誘発のような種々の方法により、元のＤＮＡ配列を修飾する。これらの方法は当業者には十分公知である（例えば、Botstein and Shortle，Science，229:1193-1201(1985); Zoller and Smith，pp.468-500 in Methods in Enzymology，Vol.100: Mutagene sis，Academic Press，Inc.，N.Y.(1987)参照。これらの記載内容は、参照により本明細書中に含まれる）。アミノ酸挿入、置換、欠失等により一次構造レベルでポリペプチド配列を変えるよう修飾を設計する。これらの修飾を多数の組合せで用いて、最終修飾ポリペプチドをコードするＤＮＡを生成する。ポリメラーゼ連鎖反応を用いて、ＲＴＫ配位子をコードするＤＮＡを調製し得る。ポリメラーゼ連鎖反応法（ＰＣＲ）を用いて、ｍＲＮＡから、ｃＤＮＡから、及びゲノムライブラリー又はｃＤＮＡライブラリーから直接、ＲＴＫ配位子をコードする核酸配列を増幅する。ＲＴＫ配位子をコードする単離配列は、ＰＣＲ増幅用の鋳型として用い得る。ＲＴＫ配位子を増幅するための適切なプライマー及びプローブは、ＤＮＡ配列の分析から生成される。要するに、増幅されるＤＮＡ領域の２つの３’縁と相補的なオリゴプライマーを合成する。次に、２つのプライマーを用いてポリメラーゼ連鎖反応を実施する（ＰＣＲプロトコール： A Guide to Methods and Appli cations，Innis，et al.，Academic Press，San Diego(1990)参照）。プライマーを選択して、ＥＩ−２７をコードする全領域を増幅するか、又は所望の場合にはより小さいＤＮＡセグメントを増幅し得る。プローブとして使用するためのオリゴヌクレオチドは、上記と同様に化学的に合成する。２．修飾配位子の発現修飾ＲＴＫ配位子をコードするＤＮＡを一旦単離し、クローニングすれば、一般に組み換え工学処理した細胞、例えば細菌、酵母菌、昆虫（特にバキュロウイルスベクターを用いる）及び哺乳類細胞中に配位子を発現し得る。当業者は、ＲＴＫ配位子の発現に利用可能な多数の発現系の知識があると予測される。原核生物又は真核生物におけるタンパク質の発現に関して公知の種々の方法の詳細な説明は行わない。要するに、ＲＴＫ配位子をコードする天然又は合成核酸の発現は、典型的には、ＤＮＡ又はｃＤＮＡをプロモーター（構成成分性であるか又は誘導可能である）に操作可能的に連結し、次いでプロモーター−ＤＮＡ構築物を発現ベクター中に組み入れることにより成し遂げられる。ベクターは、原核生物又は真核生物中での複製及び組込みに適している必要がある。典型的発現ベクターは、ＲＴＫ配位子ポリペプチドをコードするポリヌクレオチド配列の発現の調節に有用な転写及び翻訳ターミネーター、開始配列、及びプロモーターを含有する。クローン化遺伝子、例えばＲＴＫ配位子をコードするポリヌクレオチド配列の高レベル発現を得るためには、転写を指示する強力なプロモーター、翻訳開始のためのリボソーム結合部位、及び転写／翻訳ターミネーターを最小限に含有する発現プラスミドを構築するのが望ましい。ａ．原核生物における発現：細菌におけるクローン化遺伝子の発現方法は、十分公知である（例えば、Maniatis et al.，Molecular Cloning，A Labora tory Manual，Cold Spring Harbor Laboratory，Cold Spring Harbor，N.Y.(198 2)参照。この記載内容は、参照により本明細書中に含まれる）。一般に、原核生物系におけるクローン化遺伝子の高レベルの発現を得るためには、ｍＲＮＡ転写及び終結を指示する強力なプロモーター及びレギュレーターを最小限含有する発現ベクターを構築することが不可欠である。この目的に適した調節領域の例としては、大腸菌β−ガラクトシダーゼ遺伝子のプロモーター及びオペレーター領域、大腸菌トリプトファン生合成経路、又はラムダファージからの左方プロモーターが挙げられる。大腸菌中で形質転換されるＤＮＡベクター中に選択マーカーを封入すると、形質転換細菌の単離に役立つ。このようなマーカーの例としては、アンピシリン、テトラサイクリン又はクロラムフェニコールに対する耐性を特定する遺伝子が挙げられる。好ましい実施態様では、ｐＵＣ１９を所望の遺伝子配列のサブクローニング及び増幅のためのベクターとして用い得る。原核細胞により産生されるＲＴＫ配位子は適正に折り畳めない。大腸菌からの精製中、発現ポリペプチドを先ず変性させ、次いで再結合させる。これは、塩酸グアニジンのようなカオトロピック剤中に細菌産生タンパク質を溶解し、β−メルカプトエタノールのような還元剤でシステイン残基を還元することにより成し遂げられる。次に、緩徐透析により、又はゲル濾過によって、ポリペプチドを再結合させる（米国特許第4,511,503 号参照）。ｂ．真核生物における発現：種々の真核生物発現系、例えば酵母菌、昆虫細胞株及び哺乳類細胞が当業者に公知である。以下で簡単に説明するように、修飾ＲＴＫ配位子はこれらの真核生物系においても発現され得る。ｃ．酵母菌細胞における発現：酵母菌における異種タンパク質の合成は十分に公知であり且つ説明されている。Methods in Yeast Genetics，Sherman， F.，et al.,Cold Spring Harbor Laboratory,(1982)は十分認識された研究で、酵母菌におけるＲＴＫ配位子ポリペプチドを産生するのに利用できる種々の方法を記載する。酵母菌に用いられるプロモーターの例としては、ＧＡＬＩＩＯ（ Johnson and Davies，Mol．Cell．Biol.，4:1440-1448(1984)）、ＡＤＨ２（Rus sell et al.，J．Biol．Chem.，258:2674-2682(1983)）、ＰＨＯ５（E.M.B.O.J. ，6:675-680,(1982)）及びＭＦα１（Herskowitz and Oshima，pp.181-209 in T he Molecular Biology of the Yeast Saccharomyces，Strathern et al.，eds． Cold Spring Harbor Laboratory,(1982)）が挙げられる。Ｌｅｕ−２、ＵＲＡ− ３、Ｔｒｐ−１及びＨｉｓ−３のような選択マーカーを有する多重コピープラスミドも望ましい。ベクターとして、ＹＥｐ６、ＹＥｐ１３、ＹＥｐ４のような多数の酵母菌発現プラスミドを用い得る。当該遺伝子を種々の酵母菌ベクター中で任意のプロモーターに融合し得る。上記のプラスミドは文献に十分に説明されている（例えば、 Botstein，et al.，Gene，8: 17-24（1979）及び Broach et al.，Gene，8: 121 -133（1979）参照）。酵母菌細胞を形質転換するには、２つの手法を用いる。第一のの方法では、チモリアーゼ、リチカーゼ又はグルスラーゼを用いて酵母菌細胞を先ずプロトプラストに変換し、その後ＤＮＡ及びポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を付加する。ＰＥＧ処理プロトプラストを次に、選択的条件下で3 % 寒天培地中で再生させる。この手順の詳細は、論文に記載されている（Beggs，Nature,275:104-109(19 78)及びHinnen，et al.，Proc．Natl．Acad．Sci．USA，75:1929-1933(1978)）。第二の手法は、細胞壁の除去を伴わない。その代わりに、細胞を塩化リチウム又は酢酸リチウム及びＰＥＧで処理して、選択プレート上に置く（Ito et al.， J．Bact.，153:163-168(1983)）。細胞を溶解し、溶解物に標準タンパク質単離技法を適用して、ＲＴＫ配位子を酵母菌から単離し得る。精製工程のモニタリングは、ウエスタンブロット法又はラジオイムノアッセイ又はその他の標準イムノアッセイ法を用いて成し得る。ｄ．哺乳類及び昆虫細胞培養における発現：宿主細胞培養を形質転換するのに用いるために、修飾ＲＴＫ配位子をコードするＤＮＡ配列を種々の発現ベクターに結紮し得る。ベクターは、好ましくはジヒドロフォレートレダクターゼ又はメタロチオネインのようなマーカーを含有して、形質転換宿主細胞の選択のための表現型特性を提供する。ＲＴＫ配位子の産生に有用な細胞培養は、昆虫又は哺乳類起源の細胞である。哺乳類細胞系はしばしば単層の細胞の形態をとるが、しかし哺乳類細胞懸濁液を用いてもよい。哺乳類細胞株の実例としては、ＶＥＲＯ及びＨｅＬａ細胞、チャイニーズハムスター卵巣（ＣＨＯ）細胞株、ＷＩ３８、ＢＨＫ、Ｃｏｓ−７又はＭＤＣＫ細胞株が挙げられる。上記のように、宿主細胞を形質転換するのに用いるベクター、例えばプラスミドは、好ましくは修飾配位子をコードするＤＮＡ配列の転写を開始するためのＤＮＡ配列及び翻訳を制御するための配列を含有する。宿主細胞が昆虫又は哺乳類起源のものである場合、発現制御配列は、例えばＳＶ−４０プロモーター（Scie nce，222:524-527(1983)）、ＣＭＶＩ．Ｅ．プロモーター（Proc．Natl．Acad． Sci.，81:659-663(1984)）又はメタロチオネインプロモーター（Nature，296:39 -42(1982)）から得られる。発現制御配列を含有するクローニングベクターを制限酵素を用いて切断して、必要な場合や望ましい場合にはサイズを調整し、当業界で公知の方法によりＲＴＫ配位子をコードするポリヌクレオチドと結紮する。酵母菌の場合と同様に、高等動物宿主を用いる場合には、公知の哺乳類遺伝子からのポリアデニル化又は転写ターミネーター配列をベクターに組み入れる必要がある。ターミネーター配列の例としては、ウシ成長ホルモン遺伝子からのポリアデニル化配列がある。転写物の正確なスプライシングのための配列も含有し得る。スプライシング配列の例は、ＳＶ４０からのＶＰ１イントロンである（Sprague et al.，J．Virol.，45:773-781(19 83)）。さらに、ウシ乳頭腫ウイルス型ベクター中に見いだされるような宿主細胞中の複製を制御する遺伝子配列をベクター中に組み入れる（例えば、Saveria-Campo ，pp.2133-238 in DNA Cloning Vol．II A Practical Approach．D.M．Glover,e d.IRL Press，Arington，VA(1985)参照）。宿主細胞はコンピテントであるか、又は種々の手段により形質転換に対してコンピテントにさせる。ＤＮＡを動物細胞中に導入するにはいくつかの十分公知の方法がある。これらの例としては、リン酸カルシウム沈殿法、受容体細胞とＤＮＡを含有する細菌プロトプラストとの融合、受容体細胞のＤＮＡを含有するリポソームによる処理、ＤＥＡＥデキストラン、エレクトロポレーション、及び細胞中への直接的ＤＮＡの微量注入が挙げられる。当業界で十分公知の方法により、形質転換細胞を培養する（例えば、Kuchler et al.，Biochemical Methods in Cell Culture and Virology，(1977)参照）。発現ＲＴＫ配位子を、懸濁液として又は単層として増殖した細胞から単離する。十分公知の機械的、化学的又は酵素的手段により、それらを回収する。ｅ．組換え体ワクシニアウイルス又はアデノウイルス感染細胞における発現：組換え体発現系に用いる他に、ＲＴＫ配位子をコードするＤＮＡを用いて、in vitro又はin vivo で宿主細胞を感染させるウイルスを形質転換し得る。これらの形質転換宿主細胞は、次いで、修飾配位子を発現する（上記の真核細胞における修飾ＲＴＫ配位子の発現の項を参照）。本発明に用いるのに適したウイルスとしては、天然痘ウイルス、例えばポックスウイルス、例えばカナリア痘及び牛痘ウイルス、並びにワクシニアウイルス、アルファウイルス、アデノウイルス、並びにその他の動物ウイルスが挙げられるが、これらに限定されない。当業界で十分公知の方法により、例えば同種組換えを用いて、又は２つのプラスミドを結紮して、組換え体ウイルスを生成し得る。例えば、両側でウイルス配列に側面を接するようにＲＴＫ配位子ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドをプラスミド中に挿入して、組換え体カナリア痘又は牛痘ウイルスを作り得る。次に、ＲＴＫ配位子結合ドメインをコードするポリヌクレオチドを同種組換えによりウイルスゲノム中に挿入する。例えば、各々約50％のウイルス配列及びＲＴＫ配位子ポリペプチドをコードするヌクレオチド配列を含有する２つのプラスミドを一緒に結紮することにより、組換え体アデノウイルスを生成し得る。当業界で公知の方法を用いて、ｃＤＮＡ中間体を介して、アルファウイルスのような組換え体ＲＮＡウイルスを作製し得る。ワクシニアウイルス（例えばＷＲ株）の場合には、転移ベクターｐＴＫｇｐｔ−ＯＦＩＳ（Kaslow et al.，Science，252:1310-1313(1991)）（この記載内容は参照により本明細書中に含まれる）を用いた同種組換えを含めた多数の方法により、ＲＴＫ配位子をコードするヌクレオチド配列をゲノム中に挿入し得る。あるいは、ＲＴＫ配位子をコードするＤＮＡを、組換え体ワクシニアを産生するために設計された別のプラスミド、例えばｐＧＳ62中に挿入し得る（Langford et al.，Mol．Cell．Biol．6: 3191-3199(1986)）。このプラスミドは、外来遺伝子の挿入のためのクローニング部位、挿入遺伝子の合成を指示するワクシニアのＰ７．５プロモーター、及び外来遺伝子の両端を側面に接するワクシニアＴＫ遺伝子で構成される。組換え体ウイルス生成の確認は、ＲＴＫ配位子をコードするｃＤＮＡを用いたＤＮＡハイブリダイゼーションにより、そして発現ＰＴＫ配位子に特異的な抗体を用いた免疫検出法により成し得る。ウイルスストックは、細胞を感染させて、ウイルスの子孫を収穫することにより調製し得る。３．修飾配位子の精製組換えＤＮＡ法により生成した修飾ＲＴＫ配位子を、当業者に十分公知の標準技法により精製し得る。組換え体タンパク質が培地中に直接分泌される場合には、培地を直接収集する。タンパク質が細胞内の溶液中に又は封入体として保持される場合には、細胞を溶解してタンパク質を回収しなければならない。これは、典型的には、音波処理又は単離により成し得る。いずれの場合も、次に、濾過、遠心分離又は当業者に公知の他の方法により、通常は濾過又は遠心分離により、細胞破砕屑からタンパク質を典型的には単離する。次いで、任意の適切な樹脂、例えばQ-Sepharose 又は金属キレート化剤への吸着により、硫酸アンモニウム分別、ポリエチレングリコール沈殿、透析により、或いは限外濾過により、タンパク質を濃縮する。当業界で公知の他の手段も同様に適している。修飾ＲＴＫ配位子が融合タンパク質として発現される場合、融合タンパク質を適切なタンパク質分解酵素でタンパク質を消化するか、又は化学的切断（即ち臭化シアン）を用いて所望の修飾ＲＴＫ配位子を放出する必要がある。修飾ＲＴＫ配位子の精製は、例えばゲル電気泳動、毛管電気泳動、逆相ＨＰＬＣ、アフィニティークロマトグラフィー、イオン交換クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、又は当業者に十分公知の他のタンパク質精製法をさらに用いる必要がある（例えば、Scopes ，Protein Purification: Principles and Practice, Springer-Verlag: New Yo rk(1982), Methods in Enzymology，Vol.182: Guide to Protein Purification ，Deutscher，ed．Academic Press，Inc.，N.Y.(1990)参照。これらの記載内容は、参照により本明細書中に含まれる）。修飾ＲＴＫ配位子の生物学的活性の確定修飾ＲＴＫ配位子が作働性活性を示すためには、ＲＴＫに結合し、その受容体を活性化しなければならない。逆に言えば、修飾ＲＴＫ配位子は、受容体と結合し、それを活性化しないことにより拮抗剤活性を示し得る。したがって、修飾ＲＴＫ配位子の作動性又は拮抗性活性を評価するためには、結合親和力及び結合受容体を活性化する能力を検定するのが望ましい。Ａ．結合親和力検定細胞表面タンパク質に対する特定の配位子の結合親和力の検定手段は、当業者には十分公知である。典型的結合検定では、推定上の配位子を固定化し、標識化受容体に曝露するか、あるいは固定化受容体を標識化配位子に曝露する。次いで、固定化部分を洗浄してあらゆる非結合物質を除去して、標識を検出する。固定化標識の量は、受容体と推定上の配位子との間の結合の程度に比例する。好ましい実施態様では、ＲＴＫを保有する細胞膜を単離し、固体支持体（例えばポリビニルクロリドプレート，Dynatch，Arlington，VA）と結合させる。放射能（例えば¹²⁵Ｉ）で、又は蛍光（例えばフルオレセイン又はローダミン）標識化した修飾ＲＴＫ配位子を結合受容体保有膜に曝露する。洗浄後、膜を単離し、結合修飾ＲＴＫ配位子の量を、シンチレーション計数器で放射能を測定することにより確定する。結合は、直接的に、又は別のＲＴＫ配位子と競争させて確定する。直接確定では、修飾ＲＴＫ配位子を標識し、結合修飾ＲＴＫ配位子の量を直接測定する。検定を競合的阻害として実施する場合は、元のＲＴＫ配位子を標識する。次にＲＴＫを保有する膜を、種々の量の非標識化修飾ＲＴＫ配位子の存在下で標識化配位子に曝露する。修飾ＲＴＫ配位子がＲＴＫに対して高親和力を有する場合、それは元のＲＴＫ配位子に競り勝ち、その結果、元のＲＴＫ配位子による結合の低減を生じる。競合的結合検定を説明する詳細なプロトコールは、実施例２に示す。Ｂ．受容体活性化検定元のＲＴＫ配位子は、多数の細胞における有力な分裂促進物質である。例えば、ＥＧＦ受容体は種々の種類の細胞で検出可能で、細胞増殖の増強によりＥＧＦと反応する（Carpenter，Ann．Rev．Biochem.，56:881-914(1987)）。したがって、ＲＴＫ配位子の作働性活性は、適切な受容体を保有する細胞を活性化する配位子の能力を測定することにより簡単に確定し得る。活性化を測定する方法は、当業者には十分公知である。好ましい実施態様では、活性化は、曝露細胞によるトリチウム化チミジン取込み速度を確定することにより測定する。代謝的活性細胞はより多量のチミジンを取込み、したがって、より強力なシグナルを示す。トリチウム化チミジンの取込みを測定することによる受容体活性化の検定のためのプロトコールは、下記の実施例３に示す。あるいは、特定の標的細胞の成長速度に及ぼす配位子の作用を測定することにより、修飾配位子の分裂促進活性を検定し得る。細胞成長研究を実行する方法は、当業者には十分公知である（例えば、Cohen and Carpenter，Proc．Natl．Aca d．Sci.(U.S.A.)，72:1317 -1321(1975)参照）。要するに、この種の検定は、適切なＲＴＫを保有する細胞株の培養を確立することを必要とするだけである。細胞を、推定上のＲＴＫ配位子の存在下で、又は非存在下で、適切な期間培養する。当業界で十分公知の多数の任意の手段（例えばサブサンプリング、手動計数又はcoulter 計数器により自動計数）により、周期的に細胞数を測定する。配位子を含有する培養中の細胞増殖速度又は最終細胞数を配位子を含まない細胞培養と比較することにより、相対的分裂促進活性を確定し得る。細胞増殖試験の例を下記の実施例２に示す。ＲＴＫ配位子の他の公知の生物学的活性を活用することにより、修飾ＲＴＫ配位子の作働活性を検定し得る。例えば、ＥＧＦは、マウス新生仔における早発性眼瞼開放、並びに器官培養中の角膜上皮細胞の肥厚及び過形成を誘発することが公知である。作働特性を有するＥＧＦ受容体に特異的な修飾配位子も同様の活性を示すと予測される。したがって、Cohen，J．Biol．Chem.，237:1555-1562(197 3)、及びCohen and Carpenter，Proc．Natl．Acad．Sci.(U.S.A.), 72:1317-132 1(1975)に記載されているように、修飾配位子を新生仔マウスに皮下注射することにより、眼瞼開放活性を検定し得る。肥厚及び過形成の誘発は、Savage and C ohen，Exp．Eye Res.，15:361-366(1973)に記載の方法を用いて、ヒヨコ胚角膜の器官培養により検定し得る。これらの例が説明のためのものに過ぎないことを、当業者は認識し得る。修飾ＲＴＫ配位子の作働性活性は、対応する元のＲＴＫ配位子のあらゆる公知の生物学的特性を検定することにより、測定し得る。受容体増倍に関する検定としての修飾ＲＴＫ配位子の使用ＲＴＫの増幅は、多数の癌の病因に関連している。特に、ＨＥＲ２／ｎｅｕ（ｃ−ｅｒｂＢ２とも呼ばれる）の増幅は、乳癌の病因と相関していた。実際、ＨＥＲ２／ｎｅｕ増幅は、陽性リンパ節を除いて、他のすべての公知の予後判定物よりも臨床結果に関して予言的である（Slamon et al .，Science，244:707-712(1989)）。したがって、ｃ−ｅｒｂＢ２受容体の存在又は非存在に関する検定は、臨床的に有用な診断具を提供する。伝統的に、これらの受容体は、固体ブロティング法を用いて検定されてきた（例えば、サザーン、ウエスターン又はノーザンブロティング）。しかしながら、サザーン及びノーザンブロティングは、それぞれＤＮＡ及びＲＮＡレベルでの過剰発現を検定するに過ぎない。ウエスターンブロッティングは、タンパク質発現を測定する一方で、細胞内並びに表面結合タンパク質を取り上げる。したがって、これらの技法は無傷ＲＴＫを結合した膜の増幅に関する直接検定を提供しない。さらに、ヒト腫瘍組織中の非悪性細胞の存在のために、これらの技法は観察された変化又は増幅が組織中の悪性細胞のみに特異的であるのか、あるいは全細胞に共通するのかを確定できない（同上。p.708 ）。ＨＥＲ２／ｎｅｕ（ｅｒｂ）受容体に特異的な標識化配位子の使用は、これらの受容体の増幅の検定を可能にする。細胞を標識化修飾ＲＴＫ配位子と接触させて、細胞スミア中の又は組織切片中のin situ での特異的結合の量を視覚化するだけでよい。あるいは、受容体を保有する膜を当該細胞から単離し、その受容体に特異的な標識化配位子の結合を測定することにより、受容体濃度を定量し得る（下記の実施例４参照）。ポリペプチド配位子を標識するのに適した標識は、当業者には十分公知である。分光測光的、光化学的、生化学的、免疫化学的又は化学的手段により検出可能な組成物は、適切な標識を提供し得る。例えば、有用な標識としては、³²Ｐ、¹² ⁵ Ｉ、蛍光染料、電子密度の高い試薬、酵素（ＥＬＩＳＡに一般に用いられるような）、ビオチン、ジオキシゲニン、又は抗血清またはモノクローナル抗体が利用可能なハプテン及びタンパク質が挙げられる。癌治療における修飾ＲＴＫ配位子の使用上記のように、ＲＴＫの異常発現（特に増幅）は多数の癌の病因に関連し、ＲＴＫ活性化が腫瘍形成に関連するということを示唆する。本発明の修飾配位子は、腫瘍細胞におけるＲＴＫ活性の調節又は遮断に治療的用途を有する。したがって、本発明は、類似体の量が治療効果を提供するのに不十分な場合に製薬上許容可能な賦形剤と組合せて本明細書中の類似体を包含する治療組成物又は薬剤を提供する。治療的適用においては、本発明の修飾ＲＴＫ配位子は、非経口、局所、経口又は限局投与を意図された製剤組成物中に包含される。好ましくは、製剤組成物は非経口的に、例えば静脈内、皮下、皮内又は筋内に投与される。したがって、本発明は、許容可能な担体、好ましくは水性担体中に溶解又は懸濁される上記の薬剤の溶液を包含する非経口投与のための組成物を提供する。種々の水性担体、例えば水、緩衝水、0.4 ％食塩水、0.3 ％グリシン、ヒアルロン酸等を用い得る。慣用的な十分公知の滅菌法によりこれらの組成物を滅菌するか、又は滅菌濾過する。その結果生じる水性溶液を現状のままで使用するために包装するか、又は凍結乾燥し、投与前に凍結乾燥製剤を滅菌溶液と併合する。組成物は、生理学的条件に近づけるのに必要な場合に、製薬上許容可能な補助物質、例えばpH調整剤及び緩衝剤、張度調整剤、湿潤剤等、例えば酢酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、塩化ナトリウム、塩化カリウム、塩化カルシウム、ソルビタンモノラウレート、トリエタノールアミンオレエート等を含有し得る。固体組成物に関しては、慣用的非毒性固体担体を用い得る。その例としては、例えば製剤等級のマンニトール、ラクトース、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、ナトリウムサッカリン、タルク、セルロース、グルコース、スクロース、炭酸マグネシウム等が挙げられる。経口投与に関しては、一般に用いられる任意の賦形剤、例えば前述の担体、及び一般的に10〜95％の、さらに好ましくは25％〜75％の活性成分を組み入れることにより、製薬上許容可能な非毒性組成物を生成する。エーロゾル投与に関しては、修飾ＲＴＫ配位子は、好ましくは微粉砕形態で、界面活性剤及び噴射剤とともに供給される。界面活性剤は、もちろん非毒性であり、好ましくは噴射剤に可溶性でなければならない。このような薬剤の代表例は、６〜２２個の炭素原子を含有する脂肪酸のエステル又は部分エステル、例えば脂肪族多価アルコール又はその環式無水物を伴うカプロン酸、オクタン酸、ラウリン酸、パルミチン酸、ステアリン酸、リノレン酸、オレステリン酸及びオレイン酸である。混合エステル、例えば混合又は天然グリセリドを用い得る。担体も、所望の場合には、例えば鼻腔内供給のためのレシチンのように、含有し得る。治療的適用においては、本発明の修飾配位子を、腫瘍成長を防止するのに十分な量と本明細書で定義された治療的有効量で患者に投与する。腫瘍成長の査定方法は、当業者には十分公知である。この用途に有効な量は、例えば特定の修飾配位子、投与様式、健常者又は患者の体重及び全身状態、並びに処方する医師の判断に依っている。概して、その量は、100 mg〜１g の範囲である。以下の実施例で本発明を説明するが、本発明はこれらに限定されない。本質的に同様の結果を生じるために変更又は修正され得る種々の非決定的パラメーターを、当業者は容易に認識する。実施例１修飾ＲＴＫ配位子の化学合成及び精製Ａ．本発明の修飾ＲＴＫ配位子の自動ペプチド合成を、標準Ｆｍｏｃ−ＤＩＰＣＤＩ／ＨＯＢＴプロトコールを用いてMilligen/Biosearch 9600 型ペプチド合成機で実施したが、但しいくつかの場合には、特異的残基に関するカップリング時間を修正した。0.4 mmolスケールで反応を実施し、最初の残基を、ヒドロキシメチルフェノキシ酢酸リンカーを経てメチルベンズヒドリルアミンポリスチレン樹脂に誘導した。このＦｍｏｃ−アラニン−ＰＡＣ支持体（0.33mmol／g 負荷）は、Milligen/Biosearchから購入した。修飾ＲＴＫ配位子の合成後、90：5 ：3 ：2（ v/v）のトリフルオロ酢酸（ＴＦＡ）：チオアニソール：１，２−エタンジチオール：アニソール（1.0 g ／20 ml）の溶液中に樹脂を再懸濁して、乾燥樹脂結合ペプチドの切断を成し遂げた。その結果生じたスラリーを室温で3.5 時間、静かに攪拌した後、濾過し、ＴＦＡ（4 x 5 ml）で洗浄した。併合濾液を真空蒸発した。残渣をＴＦＡ（7 ml）に再溶解させ、ジエチルエーテル（200 ml）を攪拌しながら滴下した。その結果生じた白色沈殿物を15分間激しく攪拌し、濾過した。フィルターケーキをエーテル（ 4 x ）で洗浄し、50％水性ＡＣＮに溶解し、凍結乾燥して、白色粉末を得た。切断ペプチドをＨＰＬＣにより分析し、精製した。分析的ＨＰＬＣ（Ｖｙｄａｃ；Ｃ₁₈，0.46 x 15 cm，5 mm，300A）は、６８０型自動勾配コントローラーに連結した２つの５１０型ポンプで構成されるWatersシステムで実施した。カラム流出液を４９０型分光光度計により220 nmでモニタリングし、７４５Ｂデータモジュールでピーク域を測定した。分取ＨＰＬＣ（Ｖｙｄａｃ；Ｃ₁₈，5 x 25 c m ，15〜20 mm，300A）を、延長流頭（99ml／分の最大流量が可能）を装備し、８０３型マノメーターモジュール及び８１１型ミキサーに連結されたた２つの３０３型ポンプで構成されるGilsonシステムで実施した。カラム流出液をHolochrome型分光光度計により220nm でモニタリングした。水（Ａ）及びアセトニトリル（Ｂ）（ともに0.05％ＴＦＡを含有）から成る２成分溶媒系を用いて、勾配を流れさせた。ペプチド中のシステインをその対応するＳ−スルホネートに変換することにより、合成ＲＴＫ配位子をその元のジスルフィド結合配置に折り畳んだ。典型的反応では、還元凍結乾燥ペプチドを159 μl の水及び81μl の1.5 M Tris-HCl，pH 8.8 に溶解した。ペプチド中のシステインを、室温に90分間放置して、自発的にジスルフィドに酸化させた。この溶液に960 μl の10M 尿素を、その後150 μ l の1 M Ｎａ₂ＳＯ₃を、次いで150 μl の0.2 M Ｎａ₂Ｓ₄Ｏ₆を付加して、亜硫酸塩分解を実行した。反応混合物を室温に２時間保持し、その後、溶液を1 M 尿素、20mM Tris-HCl，pH7.1 に対して透析した。亜硫酸塩分解反応に用いた余分量の試薬を、Ｇ−25上で脱塩するか又は透析により除去した。0.2 〜3 mg/ml の濃度のＳ−スルホン化ペプチドをpH 8.5〜8.8 に調整した。ＥＤＴＡを付加して、最終濃度を1 mMとし、システインを付加して最終濃度を3 mMにすることにより折り畳みを開始した。一般に、反応を16〜24時間進行させた。１/10容量の10％ＴＦＡを付加して溶液を酸性にした。Ｂ．この手法を用いて、以下の配列を有する修飾ＲＴＫ配位子を作った：実施例２修飾ＲＴＫ配位子の結合及び拮抗性活性に関する検定本実施例では、実施例１に記載されたように合成した修飾ＲＴＫ配位子（Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ（配列番号：１））を、Kimbal and Warren（Biochem．Biop hys.Acta.,771:82-88(1984)）（この記載内容はすべて、参照により本明細書中に含まれる）が記載した方法を用いて、表皮成長因子（ＥＧＦ）のＥＧＦ受容体との結合を阻害するその能力に関して検定した。市販のマウスＥＧＦ（Collaborative Research，Inc.,Waltham，MA）をKimbal and Warren（上記）の方法により精製した。Greenwood 等（Biochem．J.,89:11 4-123(1963)）（この記載内容は、参照により本明細書中に含まれる）が記載したようにして、単離ＥＧＦを¹²⁵Ｉ（Amersham,Arlington Helghts，IL）で放射性ヨウ素処理して、特異的活性を約21.5μCi／μg タンパク質とした。高密度のＥＧＦ受容体を有するＡ−４３１ヒト類表皮癌細胞（ＡＴＣＣ）を、回転瓶中で集合体に増殖させた。その後、Thom等（Biochem．J.,168:187-194( 1977)）（この記載内容は、参照により本明細書中に含まれる）が記載した方法を用いて、低張性溶解により細胞膜を得た。膜を、ダルベッコリン酸塩緩衝食塩水 100 μl 中で、2.5 μg 膜タンパク質／ウエルで96ウエルポリビニルクロリドプレート（Dynatch，Arlington，VA）中に分散させた。プレートを37℃で一夜乾燥させて、密封し、次いで必要になるまで4 ℃で保存した。使用前に、乾燥細胞膜を結合緩衝液（ダルベッコの変法イーグル培地。ウシ血清アルブミン1 mg／ml及び 50mM 2−〔ビス（2 −ヒドロキシエチル）アミノ〕エタン，pH 6.8を含有） 150 μl で4 回洗浄し、次いで、結合緩衝液 150μl とともに23℃で30分予備インキュベートした。 4 ng／mlの¹²⁵Ｉ−ＥＧＦを含有する結合緩衝液 100 μl を、付加して、修飾ＲＴＫ配位子（Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ− Ｈｉｓ−Ｇｌｙ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ− Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ− Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ（配列番号：１））を用いた場合と用いない場合とで、結合を開始した。混合物を固定化膜とともに23℃で1 時間インキュベートし、次いで吸引により除去した。ウエルを新鮮な結合緩衝液 200μl で４回洗浄し、熱ワイヤでプレートから分離し、試験管中に沈殿させて、これをシンチレーション計数器に入れて、結合¹²⁵Ｉ−配位子の量を確定した。100 倍余分量の非標識化修飾ＲＴＫ配位子で膜を処理して受容体部位を飽和させ、残留活性を測定して、非特異的結合を確定した。次式にしたがって、結合の％阻害を算出した：（式中、cpm は、シンチレーション計数器を用いて測定された計数／分を表す）。100 ％阻害では、修飾ＲＴＫ配位子はすべての利用可能なＲＴＫと結合し、したがってＥＧＦに関するタンパク質結合部位を遮断する。０％阻害では、逆のことが言える。この実験に関する標準曲線を図３に示す。実施例３修飾ＲＴＫ配位子の作働性活性に関する検定Ａ．〔³Ｈ〕−チミジン取込みの確定多数の元のＲＴＫ配位子が、種々の細胞中で有力な分裂促進物質として作用する。したがって、修飾ＲＴＫ配位子の作働性活性は、標的細胞を修飾ＲＴＫ配位子に曝露して、代謝活性の増大を検定することにより確かめ得る。これは、典型的には標的細胞によるトリチウム化チミジン取込みの増大として測定される。ＮＲＫ細胞を、5 mlのダルベッコ培地＋10％仔ウシ血清を含有する60 mm 培養皿に入れた。細胞が集密的になったら、培地を除去し、細胞単層をハンクの平衡塩溶液で２回洗浄した。5 mlのダルベッコ培地＋１％仔ウシ血清を各皿に付加し、細胞を48時間インキュベートした。修飾ＲＴＫ配位子を、それぞれ0.5、１、２、５、10及び50 ng ／mlの濃度で各培養皿に付加した。元の配位子を用いた同様の処理により陽性対照を提供し、一方、配位子を含まない処理により陰性対照を提供した。20時間後、１μCi／mlの〔メチル−³Ｈ〕−チミジンを付加した。細胞を４時間標識させた。細胞を冷トリクロロ酢酸（ＴＣＡ）で処理して標識を停止させた。ＴＣＡをデカントし、細胞を再び冷ＴＣＡで洗浄し、これをデカントして、残留冷ＴＣＡ不溶性物質中の放射能をシンチレーション計数器を用いて計数した。修飾ＲＴＫ配位子で処理した細胞のチミジン取込みを、それぞれ陽性及び陰性対照と比較した。陰性対照に対して修飾ＲＴＫ配位子処理細胞によるトリチウム化チミジン取込みの有意の増大により、作働性活性が明示された。活性の程度は、陽性対照（元の配位子）を用いて得られた結果と比較することにより確かめた。Ｂ．細胞増殖率の確定あるいは、修飾ＲＴＫ配位子の作働性特性は、標的細胞の成長に及ぼす修飾ＲＴＫ配位子の作用を測定することにより検定し得る。ＮＲＫ細胞を、10％仔ウシ血清、10％仔ウシ血清＋元の配位子（例えばＥＧＦ）及び10％仔ウシ血清＋修飾ＲＴＫ配位子（12.5ng／ml）を補充したダルベッコの変法培地を含有する60 mm 培養皿にプレート化した。培養を10〜21日間維持した。２枚の培養皿中の総細胞数をCoulter 計数器で確定した。最終細胞数を処理の場合と対照とで比較して、分裂促進活性を確定した。相対分裂促進活性は、対照を差し引いた後の修飾ＲＴＫ配位子処理と元のＲＴＫ配位子処理との比較により確定した。修飾ＲＴＫ配位子が分裂促進性である場合、細胞は、対照処理と比較して修飾ＲＴＫ配位子処理においては、より迅速に、又はより高い最終濃度に増殖した。Ｃ．早発性眼瞼開放の誘発配位子の天然類似体中に認められることが公知の生物学的特性に関して、in v ivo 及びin vitro で検定することにより、修飾ＲＴＫ配位子の作働性活性を確かめ得る。ＥＧＦは、マウス新生仔における早発性眼瞼開放活性を誘発することが公知である。作働性活性を有するＥＧＦ受容体に特異的な修飾ＲＴＫ配位子も同様の活性を示すことが予測される。 Cohen，J．Biol.Chem.,237:1555-1562(1973)（この記載内容は、参照により本明細書中に含まれる）に記載されているように、新生仔マウスに修飾ＲＴＫ配位子を皮下注射して、眼瞼開放活性を検定した。新生仔マウスを修飾ＲＴＫ配位子の皮下注射（1 μg ／g ／日又は0.25μg ／g ／日）で処理した。修飾配位子処理マウスにおける眼瞼開放までの期間を、中性対照マウス（処理中に配位子を含まない）及び陽性対照マウス（元の配位子を注射）と比較した。早発性眼瞼開放は、作働性活性を示す。実施例４癌細胞におけるＥｒｂ受容体チロシンキナーゼの定量上記の実施例１で調製したのと同様の精製修飾ＲＴＫ配位子を、Greenwood 等（Biochem．J.,89:114-123(1963)）（この記載内容は、参照により本明細書中に含まれる）が記載したようにして、¹²⁵Ｉ（Amersham,Arlington Helghts，IL）で放射性ヨウ素処理して、特異的活性を約21.5μCi／μg タンパク質とした。生検により、ヒト癌細胞を得た。Thom等（Biochem．J.,168:187-194(1977)）（この記載内容は、参照により本明細書中に含まれる）が記載した方法を用いて、組織を破裂させた後、低張性溶解により細胞膜を得た。膜を、ダルベッコリン酸塩緩衝食塩水 100 μl 中で、2.5 μg 膜タンパク質／ウエルで96ウエルポリビニルクロリドプレート（Dynatch，Arlington，VA）中に分散させた。プレートを 37℃で一夜乾燥させた。乾燥細胞膜を結合緩衝液（ダルベッコの変法イーグル培地。ウシ血清アルブミン1 mg／ml及び 50mM 2−〔ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ〕エタン，pH 6.8を含有） 150μl で４回洗浄し、次いで、結合緩衝液 150μl とともに23℃で30分予備インキュベートした。 4 ng／mlの¹²⁵Ｉ−配位子を含有する結合緩衝液 100 μl を付加して、結合を開始した。陰性対照は、非腫瘍細胞により提供された。混合物を固定化膜とともに23℃で１時間インキュベートし、次いで吸引により除去した。ウエルを新鮮な結合緩衝液 200μl で４回洗浄し、熱ワイヤでプレートから分離し、試験管中に沈殿させて、結合¹²⁵Ｉ−配位子の量を確定した。100 倍余分量の非標識化配位子で膜を処理して受容体部位を飽和させ、残留活性を測定して、非特異的結合を確定した。特異的結合は、総数／分 − 非特異的結合に関与した数／分として確定した。ＲＴＫ増幅は、腫瘍細胞から得られた数値と非腫瘍細胞から得られた数値の差として確定した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者セト，マリアンアメリカ合衆国，カリフォルニア 94080, サウスサンフランシスコ，ワンアピアンウエイ 702−10 (72)発明者カッツ，ブラッドレーエーアメリカ合衆国，カリフォルニア 94117, サンフランシスコ，アシュベリーストリート 1019，アパートメント３

Claims

【特許請求の範囲】１．クラスＩ受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）に対する特異性を有し、３つのシステイン結合を形成するアミノ酸を有する元のＲＴＫ配位子に対応する修飾配位子であって、上記結合が元のＲＴＫ配位子のアミノ末端に関してその最初のシステインの相対的位置に関して上行順に番号を付けられ、この場合、元のＲＴＫ配位子の第１、第２及び第３システイン結合はドメインＡ、ドメインＢ及びドメインＣを限定し、３つの結合は第１、第２、第３、第４、第５及び第６システインから成り、第１結合は第１及び第３システイン間、第２結合は第２及び第４システイン間、そして第３結合は第５及び第６システイン間であり；ドメインＡは第１システインにより限定され、そのアミノ酸は第１及び第２システイン間に位置し；ドメインＢは第２システインに限定され、そのアミノ酸が第２及び第４システイン間に位置し；第４システインにより限定されるドメインＣはそのアミノ酸が第４システインのカルボキシ末端に付着し；並びに、修飾ＲＴＫ配位子はシステイン２及び４の間、そして５及び６の間にそれぞれ２つの結合を形成する４つのシステインアミノ酸を有し、元のＲＴＫ配位子のドメインＡ及びＣに対応する２つのドメインＡ₁及びＣ₁を有し；ここで、ドメインＡ₁は元のＲＴＫ配位子のドメインＡの生物学的に活性なアミノ酸配列で本質的に構成され；そしてドメインＣ₁は元のＲＴＫ配位子のドメインＣの生物学的に活性なアミノ酸配列で本質的に構成され；そしてドメインＡ₁のカルボキシ末端であるシステイン２及びドメインＣ₁のアミノ末端であるシステイン４はプレ架橋サブドメイン及び架橋サブドメインを包含するペプチド架橋により連結され、この場合、ペプチド架橋内には、元のＲＴＫ配位子のドメインＢ内に存在するβ−ターンに対応するβ−ターンが存在する修飾配位子。２．上記架橋サブドメインが１〜３個のアミノ酸残基である請求項１記載の配位子。３．上記架橋サブドメインがＰｒｏ−Ｇｌｙである請求項２記載の配位子。４．上記架橋サブドメインがＰｒｏ又はＳｅｒである請求項２記載の配位子。５．上記ドメインＡ₁が対応する元のＲＴＫ配位子中のドメインＡの最初の１０個のアミノ酸残基に対応するアミノ酸配列を含有しない請求項１記載の配位子。６．上記ドメインＣ₁が以下の：ヒト、ラット、ネズミ又はギニアピッグＥＧＦ；ヒトヘパリン結合ＥＧＦ；ヒト又はラットＴＧＦ−α；ヒトアンフィレグリン；ラットアシアロプロテオグリカン２；ネズミβセルリン；ウイルス性痘疹成長因子；ウイルス性ショープ繊維腫成長因子；又はウイルス性粘液腫成長因子のすべての第四システインの後のアミノ酸配列と同一である請求項１記載の配位子。７．本質的に次式：Ｘ１−Ｘ２_A−Ｘ２_B−Ｘ３（式中、Ｘ１はドメインＡ₁であり、アミノ酸残基ＡＡ₁−１〜ＡＡ₁−６から成り、ここで、ＡＡ₁−１はＳｅｒ、Ｌｙｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ又はＧｌｕであり；ＡＡ₁−２はＨｉｓ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｇｌｎ又はＧｌｕであり；ＡＡ₁−３はＴｈｒ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｖａｌ又はＧｌｎであり；ＡＡ₁−４はＧｌｎ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ又はＡｓｎであり；ＡＡ₁−５はＰｈｅ又はＴｙｒであり；そしてＡＡ₁−６はＣｙｓであって；Ｘ２_A及びＸ２_Bは一緒になってペプチド架橋ドメインを構成し、Ｘ２_Aは予備架橋サブドメインであってアミノ酸残基ＡＡ_2A−１〜ＡＡ_2A−５から成り、ここで、ＡＡ_2A−１はＶａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ又はＬｅｕであり；ＡＡ_2A−２はＡｓｎ、Ｈｉｓ又はＩｌｅであり；ＡＡ_2A−３はＧｌｙ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ又はＡｓｎであり；ＡＡ_2A−４はＧｌｙ、Ａｓｐ、Ｔｈｒ、Ｇｌｕ又はＡｒｇ；そしてＡＡ_2A−５はＶａｌ、Ｔｈｒ、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ｇｌｎ又はペプチド結合であって；Ｘ２Bは１〜３個のアミノ酸残基（ＡＡ_2B−１、ＡＡ_2B−２、ＡＡ_2B−３）から成っていて、Ｘ２_Bが１アミノ酸残基である場合、ＡＡ_2B−１はＧｌｙ又はＳｅｒであり；あるいはＸ２_Bが２個のアミノ酸残基から成る場合は、ＡＡ_2B−１はＡｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ又はＰｒｏであり、そしてＡＡ_2B−２はＡｓｐ、Ｓｅｒ、Ａｓｎ又はＡｒｇであるか；もしくはＡＡ_2B−１はＰｒｏであり、ＡＡ_2B−２はＧｌｙ又はＡｓｎであるか；もしくはＡＡ_2B−１はＧｌｙ、Ａｓｎ又はＡｓｐであり、ＡＡ_2B−２はＧｌｙであるか；もしくはＡＡ_2B−１はＧｌｙであり、ＡＡ_2B−２はＳｅｒ、Ｇｌｕ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ａｓｐ又はＬｙｓであり；Ｘ２_Bが３個のアミノ酸残基から成る場合には、ＡＡ_2B−１はあらゆるアミノ酸残基であり、そして：ＡＡ_2B−２はＡｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ又はＰｒｏであり、そしてＡＡ_2B−３はＡｓｐ、Ｓｅｒ、Ａｓｎ又はＡｒｇであるか；もしくはＡＡ_2B−２はＰｒｏであり、ＡＡ_2B−３はＧｌｙ又はＡｓｎであるか；もしくはＡＡ_2B−２はＧｌｙ、Ａｓｎ又はＡｓｐであり、ＡＡ_2B−３はＧｌｙであるか；もしくはＡＡ_2B−２はＧｌｙであり、ＡＡ_2B−３はＳｅｒ、Ｇｌｕ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ａｓｐ又はＬｙｓであり；Ｘ３がドメインＣ₁であってアミノ酸残基ＡＡ₃−１〜ＡＡ₃−１９から成る場合には、ＡＡ₃−１はＣｙｓであり；ＡＡ₃−２はＶａｌ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ａｌａ、Ｈｉｓ、Ｔｈｒ又はＩｌｅであり；ＡＡ₃−３はＣｙｓであり；ＡＡ₃−４はＨｉｓ、Ｖａｌ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｌａ又はＧｌｎであり；ＡＡ₃−５はＳｅr、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｔｈr、Ｐｒｏ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ又はＧｌｎであり；ＡＡ₃−６はＧｌｙ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｐｈｅ又はＧｌｕであり；ＡＡ₃−７はＴｙｒ、Ｓｅｒ又はＰｈｅであり；ＡＡ₃−８はＶａｌ、Ｉｌｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｐｈｅ、Ｇｌｕ、Ｔｙｒ又はＨｉｓであり；ＡＡ₃−９はＧｌｙであり；ＡＡ₃−１０はＡｌａ、Ｇｌｕ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｉｌｅ、Ｓｅｒ、Ａｒｇ又はＶａｌであり；ＡＡ₃−１１はＡｒｇ又はＡｓｎであり；ＡＡ₃−１２はＣｙｓであり；ＡＡ₃−１３はＧｌｕ、Ｇｌｙ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ又はＨｉｓであり；ＡＡ₃−１４はＨｉｓ、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｐｈｅ、Ａｒｇ、Ｌｅｕ又はＡｓｎであり；ＡＡ₃−１５はＡｌａ、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ａｓｐ、Ａｓｎ又はＴｙｒであり；ＡＡ₃−１６はＡｓｐ、Ｖａｌ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｇｌｙ又はＳｅｒであり；ＡＡ₃−１７はＬｅｕ、Ｍｅｔ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ｖａｌ又はＰｒｏであり；ＡＡ₃−１８はＬｅｕ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ又はＡｌａであり；ＡＡ₃−１９はＡｌａ、Ｔｒｐ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｌｙｓ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ又はＳｅｒであるから成る請求項１記載の配位子。８．Ｘ１に関しては、ＡＡ₁−１はＳｅｒ、Ｌｙｓ、Ｇｌｎ、Ａｓｐ又はＧｌｕであり；ＡＡ₁−２はＨｉｓ、Ｔｙｒ、Ｇｌｙ又はＰｈｅであり；ＡＡ₁−３はＴｈｒ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ又はＧｌｎであり；ＡＡ₁−４はＧｌｎ、Ｇｌｙ、Ａｓｎ、Ｈｉｓ又はＡｓｐであり；ＡＡ₁−５はＰｈｅ又はＴｙｒであり；ＡＡ₁−６はＣｙｓであり；Ｘ２_Aに関しては、ＡＡ_2A−１はＰｈｅ、Ｉｌｅ又はＬｅｕであり；ＡＡ_2A−２はＨｉｓ、Ｉｌｅ又はＡｓｎであり；ＡＡ_2A−３はＧｌｙ、Ａｓｎ又はＡｓｐであり；ＡＡ_2A−４は、Ｔｈｒ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ａｒｇ又はＧｌｙであり；ＡＡ_2A−５はＶａｌ、Ｔｈｒ又はペプチド結合であって；Ｘ２_Bに関しては、配列選択物質は請求項７においてＸ２_Bに関して示したものであり；そしてＸ３に関しては、ＡＡ₃−１はＣｙｓであり；ＡＡ₃−２はＶａｌ、Ｌｙｓ、Ｉｌｅ、Ｈｉｓ、Ａｒｇ又はＡｓｎであり；ＡＡ₃−３はＣｙｓであり；ＡＡ₃−４はＨｉｓ、Ｇｌｎ、Ｓｅr、Ａｒｇ、Ｇｌｕ又はＶａｌであり；ＡＡ₃−５はＳｅｒ、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｐｒｏ、Ｈｉｓ、Ｌｙｓ又はＧｌｎであり；ＡＡ₃−６はＧｌｕ、Ａｓｎ、Ａｓｐ又はＧｌｙであり；ＡＡ₃−７はＴｙｒであり；ＡＡ₃−８はＶａｌ、Ｉｌｅ、Ｓｅｒ、Ｐｈｅ、Ｇｌｕ、Ｔｈｒ又はＨｉｓであり；ＡＡ₃−９はＧｌｙであり；ＡＡ₃−１０はＡｌａ、Ｇｌｕ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｉｌｅ又はＶａｌであり；ＡＡ₃−１１はＡｒｇであり；ＡＡ₃−１２はＣｙｓであり；ＡＡ₃−１３はＧｌｕ、Ｇｌｎ、Ｈｉｓ又はＧｌｙであり；ＡＡ₃−１４はＨｉｓ、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ、Ａｒｇ又はＧｌｙであり；ＡＡ₃−１５はＡｌａ、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｌｅｕ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ又はＬｙｓであり；ＡＡ₃−１６はＡｓｐ、Ｔｈｒ、Ｖａｌ、Ａｓｎ又はＳｅｒであり；ＡＡ₃−１７はＬｅｕ又はＭｅｔであり；ＡＡ₃−１８はＬｅｕ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ又はＰｒｏであり；そしてＡＡ₃−１９はＡｌａ、Ｔｒｐ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ａｓｐ又はＴｙｒであって、上記ＲＴＫがＥＧＦ受容体である請求項７記載の配位子。９．Ｘ１に関しては、ＡＡ₁−１はＳｅｒであり；ＡＡ₁−２はＨｉｓであり；ＡＡ₁−３はＴｈｒであり；ＡＡ₁−４はＧｌｎであり；ＡＡ₁−５はＰｈｅであり；ＡＡ₁−６はＣｙｓであって；Ｘ２_Aに関しては、ＡＡ_2A−１はＰｈｅであり；ＡＡ_2A−２はＨｉｓであり；ＡＡ_2A−３はＧｌｙであり；ＡＡ_2A−４はＴｈｒであり；そしてＡＡ_2A−５はペプチド結合であって；Ｘ２_Bに関しては、配列選択物質は請求項７においてＸ２_Bに関して示したものであり；そしてＸ３に関しては、ＡＡ₃−１はＣｙｓであり；ＡＡ₃−２はＶａｌであり；ＡＡ₃−３はＣｙｓであり；ＡＡ₃−４はＨｉｓであり；ＡＡ₃−５はＳｅｒであり；ＡＡ₃−６はＧｌｙであり；ＡＡ₃−７はＴｙｒであり；ＡＡ₃−８はＶａｌであり；ＡＡ₃−９はＧｌｙであり；ＡＡ₃−１０はＡｌａであり；ＡＡ₃−１１はＡｒｇであり；ＡＡ₃−１２はＣｙｓであり；ＡＡ₃−１３はＧｌｕであり；ＡＡ₃−１４はＨｉｓであり；ＡＡ₃−１５はＡｌａであり；ＡＡ₃−１６はＡｓｐであり；ＡＡ₃−１７はＬｅｕであり；ＡＡ₃−１８はＬｅｕであり；ＡＡ₃−１９はＡｌａである請求項８記載の配位子。１０．Ｘ２_Bが１個のアミノ酸から成る場合で、ＡＡ_2B−１がＧｌｙである請求項９記載の配位子であって、以下の配列：Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ− Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ− Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ａｓｐ− Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ（配列番号：１）を有する配位子。１１．ＡＡ_2B−１がＳｅｒである請求項１０記載の配位子であって、以下の配列：Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ− Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ− Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ａｓｐ− Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ（配列番号：２）を有する配位子。１２．Ｘ２_Bが２個の残基から成り、その場合、ＡＡ_2B−１がＰｒｏであり、ＡＡ_2B−２がＧｌｙである請求項９記載の配位子であって、以下の配列：Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ− Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ− Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ− Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ（配列番号：３）を有する配位子。１３．Ｘ２_Bが３個の残基から成り、その場合、ＡＡ_2B−１がＳｅｒであり、ＡＡ_2B−２がＰｒｏであり、ＡＡ_2B−３がＧｌｙであるある請求項９記載の配位子であって、以下の配列：Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ− Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ− Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ− Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ（配列番号：４）を有する配位子。１４．ＡＡ_2B−３がＡｓｎである請求項１３記載の配位子であって、以下の配列：Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ− Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ− Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ− Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ（配列番号：５）を有する配位子。１５．Ｘ１に関して、ＡＡ₁−１はＬｙｓであり；ＡＡ₁−２はＧｌｕ又はＧｌｎであり；ＡＡ₁−３はＬｙｓ、Ｖａｌ又はＧｌｕであり；ＡＡ₁−４はＴｈｒ、Ａｌａ、Ａｓｎ又はＧｌｙであり；ＡＡ₁−５はＰｈｅ又はＴｙｒであり；ＡＡ₁−６はＣｙｓであって；Ｘ２_Aに関しては、ＡＡ_2A−１はＶａｌ、Ｌｅｕ、Ｔｙｒ又はＨｉｓであり；ＡＡ_2A−２はＡｓｎであり；ＡＡ_2A−３はＨｉｓ又はＧｌｙであり；ＡＡ_2A−４はＧｌｙであり；ＡＡ_2A−５はＨｉｓ、Ｇｌｎ、Ｔｈｒ又はＧｌｕであり；そしてＸ２_Bに関しては、配列選択物質は請求項７に示されたものであって；そしてＸ３に関しては、ＡＡ₃−１はＣｙｓであり；ＡＡ₃−２はＡｒｇ、Ｔｈｒ、Ａｌａ又はＬｙｓであり；ＡＡ₃−３はＣｙｓであり；ＡＡ₃−４はＰｒｏ、Ａｌａ又はＧｌｎであり；ＡＡ₃−５はＡｓｎ、Ｔｈｒ又はＰｒｏであり；ＡＡ₃−６はＧｌｙ、Ｇｌｕ、Ａｌａ、Ｓｅｒ又はＰｈｅであり；ＡＡ₃−７はＰｈｅ又はＳｅｒであり；ＡＡ₃−８はＩｌｅ、Ｔｙｒ又はＴｈｒであり；ＡＡ₃−９はＧｌｙであり；ＡＡ₃−１０はＡｌａ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ又はＡｓｐであり；ＡＡ₃−１１はＡｓｎ又はＡｒｇであり；ＡＡ₃−１２はＣｙｓであり；ＡＡ₃−１３はＧｌｕ、Ｐｈｅ、Ｇｌｎ又はＴｈｒであり；ＡＡ₃−１４はＧｌｕ、Ｌｅｕ、Ｈｉｓ又はＡｓｎであり；ＡＡ₃−１５はＡｓｎ、Ａｌａ、Ｌｅｕ、Ａｓｐ又はＴｈｒであり；ＡＡ₃−１６はＧｌｙ、Ｓｅｒ又はＶａｌであり；ＡＡ₃−１７はＭｅｔ、Ａｓｎ、Ｖａｌ、Ａｒｇ又はＰｒｏであり；ＡＡ₃−１８はＭｅｔ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ又はＡｌａであり；ＡＡ₃−１９はＬｙｓ、Ｐｈｅ、Ｇｌｕ又はＳｅｒであって；上記ＲＴＫがＥＧＦ受容体以外のＲＴＫ受容体である請求項７記載の配位子。１６．Ｘ１に関して、ＡＡ₁−１はＬｙｓであり；ＡＡ₁−２はＧｌｕであり；ＡＡ₁−３はＬｙｓであり；ＡＡ₁−４はＴｈｒであり；ＡＡ₁−５はＰｈｅであり；ＡＡ₁−６はＣｙｓであって；Ｘ２_Aに関しては、ＡＡ_2A−１はＶａｌであり；ＡＡ_2A−２はＡｓｎであり；ＡＡ_2A−３はＧｌｙであり；ＡＡ_2A−４はＧｌｙであり；ＡＡ_2A−５はＧｌｕであって；Ｘ２_Bに関しては、配列選択物質は請求項７でＸ２_Bに関して示したものであり；そしてＸ３に関しては、ＡＡ₃−１はＣｙｓであり；ＡＡ₃−２はＬｙｓであり；ＡＡ₃−３はＣｙｓであり；ＡＡ₃−４はＧｌｎであり；ＡＡ₃−５はＰｒｏであり；ＡＡ₃−６はＧｌｙであり；ＡＡ₃−７はＰｈｅであり；ＡＡ₃−８はＴｈｒであり；ＡＡ₃−９はＧｌｙであり；ＡＡ₃−１０はＡｌａであり；ＡＡ₃−１１はＡｒｇであり；ＡＡ₃−１２はＣｙｓであり；ＡＡ₃−１３はＴｈｒであり；ＡＡ₃−１４はＧｌｕであり；ＡＡ₃−１５はＡｓｎであり；ＡＡ₃−１６はＶａｌであり；ＡＡ₃−１７はＰｒｏであり；ＡＡ₃−１８はＭｅｔであり；ＡＡ₃−１９はＬｙｓである請求項１５記載の配位子。１７．Ｘ２_Bが１個の残基から成り、その場合、ＡＡ_2BがＧｌｙである請求項１６記載の配位子であって、以下の配列：Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ− Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ− Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｍｅｔ−Ｌｙｓ（配列番号：６）を有する配位子。１８．ＡＡ_2BがＳｅｒである請求項１７記載の配位子であって、以下の配列：Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ− Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ− Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｍｅｔ−Ｌｙｓ（配列番号：７）を有する配位子。１９．Ｘ２_Bが２個の残基から成り、その場合、ＡＡ_2B−１がＰｒｏであり、ＡＡ_2B−２がＧｌｙである請求項１６記載の配位子であって、以下の配列：Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ− Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ− Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｍｅｔ−Ｌｙｓ（配列番号：８）を有する配位子。２０．Ｘ２_Bが３個の残基から成り、その場合、ＡＡ_2B−１がＳｅｒであり、ＡＡ_2B−２がＰｒｏであり、ＡＡ_2B−３がＧｌｙであるある請求項１６記載の配位子であって、以下の配列：Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｇｌｎ− Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ− Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｍｅｔ−Ｌｙｓ（配列番号：９）を有する配位子。２１．ＡＡ_2B−３がＡｓｎである請求項２０記載の配位子であって、以下の配列：Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｇｌｎ− Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ− Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｍｅｔ−Ｌｙｓ（配列番号：１０）を有する配位子。２２．以下の：（ａ）クラスＩ受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）に対する特異性を有し、３つのシステイン結合を形成するアミノ酸を有する元のＲＴＫ配位子に対応する修飾配位子であって、上記結合が元のＲＴＫ配位子のアミノ末端に関してその最初のシステインの相対的位置に関して上行順に番号を付けられ、この場合、元のＲＴＫ配位子の第１、第２及び第３システイン結合はドメインＡ、ドメインＢ及びドメインＣを限定し、３つの結合は第１、第２、第３、第４、第５及び第６システインから成り、第１結合は第１及び第３システイン間、第２結合は第２及び第４システイン間、そして第３結合は第５及び第６システイン間であり；ドメインＡは第１システインにより限定され、そのアミノ酸は第１及び第２システイン間に位置し；ドメインＢは第２システインにより限定され、そのアミノ酸が第２及び第４システイン間に位置し；第４システインにより限定されるドメインＣはそのアミノ酸が第４システインのカルボキシ末端に付着し；並びに、修飾ＲＴＫ配位子はシステイン２及び４の間、そして５及び６の間にそれぞれ２つの結合を形成する４つのシステインアミノ酸を有し、元のＲＴＫ配位子のドメインＡ及びＣに対応する２つのドメインＡ₁及びＣ₁を有し；ここで、ドメインＡ₁は元のＲＴＫ配位子のドメインＡの生物学的に活性なアミノ酸配列で本質的に構成され；そしてドメインＣ₁は元のＲＴＫ配位子のドメインＣの生物学的に活性なアミノ酸配列で本質的に構成され；そしてドメインＡ₁のカルボキシ末端であるシステイン２及びドメインＣ₁のアミノ末端であるシステイン４はプレ架橋サブドメイン及び架橋サブドメインを包含するペプチド架橋により連結され、この場合、ペプチド架橋内には、元のＲＴＫ配位子のドメインＢ内に存在するβ−ターンに対応するβ−ターンが存在する修飾配位子と上記の細胞を接触させ；そして（ｂ）上記細胞と結合した上記修飾ＲＴＫ配位子量を検出する工程から成るヒト細胞におけるＲＴＫの存在の定量方法。２３．上記配位子が本質的には次式：Ｘ１−Ｘ２_A−Ｘ２_B−Ｘ３（式中、Ｘ１はドメインＡ₁であり、アミノ酸残基ＡＡ₁−１〜ＡＡ₁−６から成り、ここで、ＡＡ₁−１はＳｅｒ、Ｌｙｓ、Ａｓｐ、Ｇｌｎ又はＧｌｕであり；ＡＡ₁−２はＨｉｓ、Ｔｙｒ、Ｐｈｅ、Ｇｌｙ、Ｇｌｎ又はＧｌｕであり；ＡＡ₁−３はＴｈｒ、Ａｓｐ、Ｌｙｓ、Ｇｌｕ、Ｖａｌ又はＧｌｎであり；ＡＡ₁−４はＧｌｎ、Ｇｌｙ、Ｔｈｒ、Ａｌａ、Ｈｉｓ、Ａｓｐ又はＡｓｎであり；ＡＡ₁−５はＰｈｅ又はＴｙｒであり；そしてＡＡ₁−６はＣｙｓであって；Ｘ２_A及びＸ２_Bは一緒になってペプチド架橋ドメインを構成し、Ｘ２_Aは予備架橋サブドメインであってアミノ酸残基ＡＡ_2A−１〜ＡＡ_2A−５から成り、ここで、ＡＡ_2A−１はＶａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ、Ｈｉｓ、Ｔｙｒ又はＬｅｕであり；ＡＡ_2A−２はＡｓｎ、Ｈｉｓ又はＩｌｅであり；ＡＡ_2A−３はＧｌｙ、Ａｓｐ、Ｈｉｓ又はＡｓｎであり；ＡＡ_2A−４はＧｌｙ、Ａｓｐ、Ｔｈｒ、Ｇｌｕ又はＡｒｇ；そしてＡＡ_2A−５はＶａｌ、Ｔｈｒ、Ｇｌｕ、Ｈｉｓ、Ｇｌｎ又はペプチド結合であって；Ｘ２_Bは１〜３個のアミノ酸残基（ＡＡ_2B−１、ＡＡ_2B−２、ＡＡ_2B−３）から成っていて、Ｘ２_Bが１アミノ酸残基である場合、ＡＡ_2B−１はＧｌｙ又はＳｅｒであり；あるいはＸ２_Bが２個のアミノ酸残基から成る場合は、ＡＡ_2B−１はＡｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ又はＰｒｏであり、そしてＡＡ_2B−２はＡｓｐ、Ｓｅｒ、Ａｓｎ又はＡｒｇであるか；もしくはＡＡ_2B−１はＰｒｏであり、ＡＡ_2B−２はＧｌｙ又はＡｓｎであるか；もしくはＡＡ_2B−１はＧｌｙ、Ａｓｎ又はＡｓｐであり、ＡＡ_2B−２はＧｌｙであるか；もしくはＡＡ_2B−１はＧｌｙであり、ＡＡ_2B−２はＳｅｒ、Ｇｌｕ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ａｓｐ又はＬｙｓであり；Ｘ２_Bが３個のアミノ酸残基から成る場合には、ＡＡ_2B−１はあらゆるアミノ酸残基であり、そして：ＡＡ_2B−２はＡｓｐ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ又はＰｒｏであり、そしてＡＡ_2B−３はＡｓｐ、Ｓｅｒ、Ａｓｎ又はＡｒｇであるか；もしくはＡＡ_2B−２はＰｒｏであり、ＡＡ_2B−３はＧｌｙ又はＡｓｎであるか；もしくはＡＡ_2B−２はＧｌｙ、Ａｓｎ又はＡｓｐであり、ＡＡ_2B−３はＧｌｙであるか；もしくはＡＡ_2B−２はＧｌｙであり、ＡＡ_2B−３はＳｅｒ、Ｇｌｕ、Ｔｈｒ、Ａｓｎ、Ａｌａ、Ｇｌｙ、Ａｓｐ又はＬｙｓであり；Ｘ３がドメインＣ₁であってアミノ酸残基ＡＡ₃−１〜ＡＡ₃− １９から成る場合には、ＡＡ₃−１はＣｙｓであり；ＡＡ₃−２はＶａｌ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ、Ａｒｇ、Ａｌａ、Ｈｉｓ、Ｔｈｒ又はＩｌｅであり；ＡＡ₃−３はＣｙｓであり；ＡＡ₃−４はＨｉｓ、Ｖａｌ、Ｐｒｏ、Ｓｅｒ、Ａｒｇ、Ｇｌｕ、Ａｌａ又はＧｌｎであり；ＡＡ₃−５はＳｅr、Ｉｌｅ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｐｒｏ、Ｈｉｓ、Ａｓｎ、Ｌｙｓ又はＧｌｎであり；ＡＡ₃−６はＧｌｙ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ａｌａ、Ｐｈｅ又はＧｌｕであり；ＡＡ₃−７はＴｙｒ、Ｓｅｒ又はＰｈｅであり；ＡＡ₃−８はＶａｌ、Ｉｌｅ、Ｓｅｒ、Ｔｈｒ、Ｐｈｅ、Ｇｌｕ、Ｔｙｒ又はＨｉｓであり；ＡＡ₃−９はＧｌｙであり；ＡＡ₃−１０はＡｌａ、Ｇｌｕ、Ａｓｎ、Ａｓｐ、Ｉｌｅ、Ｓｅｒ、Ａｒｇ又はＶａｌであり；ＡＡ₃−１１はＡｒｇ又はＡｓｎであり；ＡＡ₃−１２はＣｙｓであり；ＡＡ₃−１３はＧｌｕ、Ｇｌｙ、Ｇｌｎ、Ｐｈｅ、Ｔｈｒ又はＨｉｓであり；ＡＡ₃−１４はＨｉｓ、Ｔｙｒ、Ｔｈｒ、Ｇｌｕ、Ｇｌｙ、Ｐｈｅ、Ａｒｇ、Ｌｅｕ又はＡｓｎであり；ＡＡ₃−１５はＡｌａ、Ａｒｇ、Ｇｌｎ、Ｌｅｕ、Ｌｙｓ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ａｓｐ、Ａｓｎ又はＴｙｒであり；ＡＡ₃−１６はＡｓｐ、Ｖａｌ、Ａｓｎ、Ｔｈｒ、Ｇｌｙ又はＳｅｒであり；ＡＡ₃−１７はＬｅｕ、Ｍｅｔ、Ａｒｇ、Ａｓｎ、Ｖａｌ又はＰｒｏであり；ＡＡ₃−１８はＬｅｕ、Ｌｙｓ、Ａｓｎ、Ａｒｇ、Ａｓｐ、Ｍｅｔ、Ｐｒｏ、Ｖａｌ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ又はＡｌａであり；ＡＡ₃−１９はＡｌａ、Ｔｒｐ、Ｖａｌ、Ｔｈｒ、Ｌｙｓ、Ｔｙｒ、Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｐｈｅ又はＳｅｒであるから成る請求項２２記載の方法。２４．上記配位子が以下の配列：Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ− Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ− Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ａｓｐ− Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ（配列番号：１）を有する請求項２２記載の方法。２５．上記配位子が以下の配列：Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ− Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ−Ｔｙｒ− Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ−Ａｓｐ− Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ（配列番号：２）を有する請求項２２記載の方法。２６．上記配位子が以下の配列：Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ− Ｔｈｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ−Ｇｌｙ− Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ−Ａｌａ− Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ（配列番号：３）を有する請求項２２記載の方法。２７．上記配位子が以下の配列：Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ− Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ− Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ− Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ（配列番号：４）を有する請求項２２記載の方法。２８．上記配位子が以下の配列：Ｓｅｒ−Ｈｉｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｎ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｐｈｅ−Ｈｉｓ−Ｇｌｙ− Ｔｈｒ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ｃｙｓ−Ｈｉｓ−Ｓｅｒ− Ｇｌｙ−Ｔｙｒ−Ｖａｌ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｇｌｕ−Ｈｉｓ− Ａｌａ−Ａｓｐ−Ｌｅｕ−Ｌｅｕ−Ａｌａ（配列番号：５）を有する請求項２２記載の方法。２９．上記配位子が以下の配列：Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ− Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ− Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｍｅｔ−Ｌｙｓ（配列番号：６）を有する請求項２２記載の方法。３０．上記配位子が以下の配列：Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ− Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ−Ａｓｎ− Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｍｅｔ− Ｌｙｓ（配列番号：７）を有する請求項２２記載の方法。３１．上記配位子が以下の配列：Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｇｌｎ−Ｐｒｏ− Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ−Ｇｌｕ− Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｍｅｔ−Ｌｙｓ（配列番号：８）を有する請求項２２記載の方法。３２．上記配位子が以下の配列：Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｇｌｎ− Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ− Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｍｅｔ−Ｌｙｓ（配列番号：９）を有する請求項２２記載の方法。３３．上記配位子が以下の配列：Ｌｙｓ−Ｇｌｕ−Ｌｙｓ−Ｔｈｒ−Ｐｈｅ−Ｃｙｓ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｇｌｙ− Ｇｌｙ−Ｇｌｕ−Ｓｅｒ−Ｐｒｏ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｌｙｓ−Ｃｙｓ−Ｇｌｎ− Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−Ｐｈｅ−Ｔｈｒ−Ｇｌｙ−Ａｌａ−Ａｒｇ−Ｃｙｓ−Ｔｈｒ− Ｇｌｕ−Ａｓｎ−Ｖａｌ−Ｐｒｏ−Ｍｅｔ−Ｌｙｓ（配列番号：１０）を有する請求項２２記載の方法。３４．クラスＩ受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）に対する特異性を有し、３つのシステイン結合を形成するアミノ酸を有する元のＲＴＫ配位子に対応する修飾配位子であって、上記結合が元のＲＴＫ配位子のアミノ末端に関してその最初のシステインの相対的位置に関して上行順に番号を付けられ、この場合、元のＲＴＫ配位子の第１、第２及び第３システイン結合はドメインＡ、ドメインＢ及びドメインＣを限定し、３つの結合は第１、第２、第３、第４、第５及び第６システインから成り、第１結合は第１及び第３システイン間、第２結合は第２及び第４システイン間、そして第３結合は第５及び第６システイン間であり；ドメインＡは第１システインにより限定され、そのアミノ酸は第１及び第２システイン間に位置し；ドメインＢは第２システインにより限定され、そのアミノ酸が第２及び第４システイン間に位置し；第４システインにより限定されるドメインＣはそのアミノ酸が第４システインのカルボキシ末端に付着し；並びに、修飾ＲＴＫ配位子はシステイン２及び４の間、そして５及び６の間にそれぞれ２つの結合を形成する４つのシステインアミノ酸を有し、元のＲＴＫ配位子のドメインＡ及びＣに対応する２つのドメインＡ₁及びＣ₁を有し；ここでドメインＡ₁は元のＲＴＫ配位子のドメインＡの生物学的に活性なアミノ酸配列で本質的に構成され；そしてドメインＣ₁は元のＲＴＫ配位子のドメインＣの生物学的に活性なアミノ酸配列で本質的に構成され；そしてドメインＡ₁のカルボキシ末端であるシステイン２及びドメインＣ₁のアミノ末端であるシステイン４はプレ架橋サブドメイン及び架橋サブドメインを包含するペプチド架橋により連結され、この場合、ペプチド架橋内には、元のＲＴＫ配位子のドメインＢ内に存在するβ−ターンに対応するβ−ターンが存在する治療的有効量の修飾配位子を、それを必要とする患者に投与することを包含する悪性疾患の治療方法。３５．クラスＩ受容体チロシンキナーゼ（ＲＴＫ）に対する特異性を有し、３つのシステイン結合を形成するアミノ酸を有する元のＲＴＫ配位子に対応する修飾配位子であって、上記結合が元のＲＴＫ配位子のアミノ末端に関してその最初のシステインの相対的位置に関して上行順に番号を付けられ、この場合、元のＲＴＫ配位子の第１、第２及び第３システイン結合はドメインＡ、ドメインＢ及びドメインＣを限定し、３つの結合は第１、第２、第３、第４、第５及び第６システインから成り、第１結合は第１及び第３システイン間、第２結合は第２及び第４システイン間、そして第３結合は第５及び第６システイン間であり；ドメインＡは第１システインにより限定され、そのアミノ酸は第１及び第２システイン間に位置し；ドメインＢは第２システインにより限定され、そのアミノ酸が第２及び第４システイン間に位置し；第４システインにより限定されるドメインＣはそのアミノ酸が第４システインのカルボキシ末端に付着し；並びに、修飾ＲＴＫ配位子はシステイン２及び４の間、そして５及び６の間にそれぞれ２つの結合を形成する４つのシステインアミノ酸を有し、元のＲＴＫ配位子のドメインＡ及びＣに対応する２つのドメインＡ₁及びＣ₁を有し；ここでドメインＡ₁は元のＲＴＫ配位子のドメインＡの生物学的に活性なアミノ酸配列で本質的に構成され；そしてドメインＣ₁は元のＲＴＫ配位子のドメインＣの生物学的に活性なアミノ酸配列で本質的に構成され；そしてドメインＡ₁のカルボキシ末端であるシステイン２及びドメインＣ₁のアミノ末端であるシステイン４はプレ架橋サブドメイン及び架橋サブドメインを包含するペプチド架橋により連結され、この場合、ペプチド架橋内には、元のＲＴＫ配位子のドメインＢ内に存在するβ−ターンに対応するβ−ターンが存在する修飾配位子、並びに製薬上許容可能な賦形剤から成る製剤組成物。３６．請求項１記載の修飾配位子をコードするＤＮＡ配列。