JPH1067680A - 魚介類の幼生用細菌感染予防剤及び魚介類の幼生の飼育方法 - Google Patents

魚介類の幼生用細菌感染予防剤及び魚介類の幼生の飼育方法

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JPH1067680A
JPH1067680A JP8225007A JP22500796A JPH1067680A JP H1067680 A JPH1067680 A JP H1067680A JP 8225007 A JP8225007 A JP 8225007A JP 22500796 A JP22500796 A JP 22500796A JP H1067680 A JPH1067680 A JP H1067680A
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larva
bacterial infection
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勝義 森
Keisuke Takahashi
計介 高橋
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KAKI KENKYUSHO
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Abstract

(57)【要約】 【課題】 新規で効果的な魚介類の幼生用細菌感染予防
剤を提供すること。 【解決手段】 オボマクログロブリン、α2マクログロ
ブリン又はこれらの類縁体などのプロテアーゼ阻害剤を
含有する魚介類の幼生用細菌感染予防剤。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【発明の属する技術分野】本発明は、各種魚介類の幼
生、特に海産魚介類、中でもアワビ、カキ、ホタテ貝の
ような貝類の幼生が養殖時に細菌に感染するのを予防す
ることができる魚介類の幼生用細菌感染予防剤及び魚介
類の幼生の飼育方法に関するものである。
【従来の技術】各種魚介類の水産養殖における細菌感染
症に対する対処方法として最も一般的なのは、抗生物質
などの抗菌剤の投与である。例えば、二枚貝幼生に病原
性を示す細菌、主としてVibrioであるが、これらに対し
て一部の抗生物質は高い殺菌効果を示すことが明らかさ
れている。もう1つの方法は流水式飼育法である。例え
ば、二枚貝の幼生飼育は止水式飼育法、つまり、いった
ん飼育水槽に水を満たしたあとは注水も循環濾過も行わ
ない飼育法であって水の汚れを防ぐために定期的に全換
水を行う飼育法が主体であるが、流水式飼育法は常に新
鮮な水を供給することができるため、細菌の繁殖(異常
増殖)を防ぐ効果があると考えられる。
【0002】上記方法によれば、どちらの場合でも細菌
の感染予防に関してある程度の効果は期待できるもの
の、次の問題がある。抗菌剤を投与する場合、病原細菌
の殺菌には大きな効果があるものの、同時に水素内の水
質の安定に寄与している細菌相まで変化させてしまうと
いった問題がある。通常の場合でも飼育水槽内には1ml
あたり100万個のオーダーで細菌が存在しているの
で、そこに抗生物質を投与すると、短時間のうちに細菌
の現存量が1000分の1から1万分の1に減少し、薬
剤の投与を止めると24時間で最初のオーダーにまで戻
ることが知られている。すなわち、抗生物質に対して感
受性の高い種類の細菌は死滅して生き残った種類の細菌
だけが増殖しているわけである。本来多くの種類で構成
され、互いに制御しあうことで安定な状態を保っている
細菌相がくずれて少数の細菌種が優占した状態では、2
次感染が発生したり、幼生の活性が極度に低下するなど
望ましくない事態が発生する可能性が高い。また、抗菌
剤を長時間あるいは繰り返して使用すると薬剤耐性菌が
出現するという問題もある。
【0003】一方、流水式飼育法には幼生飼育に関して
すぐれた点が多くあるが、細菌感染への対処法として考
えた場合、あくまで細菌が増殖しにくい条件(止水式飼
育法と比較して)であるというだけで、いったん疾病が
発生した場合は、これを改善する手だてはほとんどな
い。すなわち、水槽内で安定した細菌相を形成するとい
う方式ではないため、細菌同士による相互制御作用を期
待することはできない。また、前に述べた抗菌剤の投与
も行うことはできず、大量斃死を防ぐには、常に良い水
質の水を供給して幼生の高い活性を維持しておくことに
より、細菌に対する抵抗力をつけさせる以外に方法はな
い。仮に病原性の非常に強い細菌が出現して、斃死が始
まってしまった場合には、止水式飼育法よりもコントロ
ールが困難であろう。
【0004】従って、従来のいずれの対処方法でも、細
菌感染のしくみあるいは病原性の発現のしくみについ
て、ほとんど考慮されていない。すなわち、どの方法も
飼育水槽から細菌をなくす、あるいは少なくすることに
のみ力点がおかれている。効果的な感染防御法や治療法
を見い出すためには、細菌本体だけを扱うのではなく、
感染のしくみや病原物質を明らかにして、疾病に至る過
程の個々の要素に対して効果的な対処方法があるかどう
かを検討するべきであり、効果的な魚介類の幼生用細菌
感染予防方法が求められている。
【発明が解決しようとする課題】本発明は、新規で効果
的な魚介類の幼生用細菌感染予防剤を提供することを目
的とする。本発明は、又、魚介類の幼生が養殖時に細菌
に感染するのを予防して効率的に飼育できる魚介類の幼
生の飼育方法を提供することを目的とする。
【0005】
【課題を解決するための手段】本発明は、プロテアーゼ
阻害剤が、魚介類の幼生の細菌感染の予防に極めて効果
的であるとの知見に基づいてなされたのである。すなわ
ち、本発明は、プロテアーゼ阻害剤を含有することを特
徴とする魚介類の幼生用細菌感染予防剤を提供する。本
発明は、又、上記魚介類の幼生用細菌感染予防剤の存在
下、飼育溶液中で魚介類の幼生を飼育することを特徴と
する魚介類の幼生の飼育方法を提供する。本発明は、
又、魚介類の幼生の飼育用水溶液に酸素又は空気を十分
暴気して酸素を飽和させた後、上記魚介類の幼生用細菌
感染予防剤の存在下、魚介類の幼生を無通気下で飼育す
ることを特徴とする魚介類の幼生の飼育方法を提供す
る。
【発明の実施の形態】本発明で対象する魚介類の幼生と
しては、海水及び淡水の各種魚介類の幼生があげられる
が、特に海産魚介類の幼生を対象とするのが好ましく、
中でもアワビ、カキ、ホタテ貝のような貝類(特に二枚
貝)や車エビなどのエビ類を対象とするのが好ましい。
本発明では、特に個体の大きさが300μ以下の幼生を
対象とするのが好ましい。
【0006】本発明で用いるプロテアーゼ阻害剤として
は、各種のプロテアーゼに対する阻害剤があげられる。
このうち、セリンプロテアーゼ阻害剤、メタロプロテア
ーゼ阻害剤及びシステインプロテアーゼ阻害剤が好まし
い。ここで、セリンプロテアーゼ阻害剤としては、α1
アンチトリプシン、アンチキモトリプシン、アンチトロ
ンビン、α2アンチプラスミン、プラスミノーゲン活性
化因子インヒビター、膵臓分泌トリプシンインヒビタ
ー、ヒルジンなどの動物由来のセリンプロテアーゼ阻害
剤(この阻害剤は、反応特異性が高く、反応が可逆的で
ある。)、トリプシンインヒビター、サブチリシンイン
ヒビター、ロイペプチン、キモスタチン、エラスタチナ
ールなどの植物や微生物由来のセリンプロテアーゼ阻害
剤(この阻害剤も、反応特異性が高く、反応が可逆的で
ある。)、α2マクログロブリンやオボマクログロブリ
ンなどの生物由来のセリンプロテアーゼ阻害剤(この阻
害剤は多くの種類を阻害し、反応は不可逆的で、いちど
結合すると酵素を失活させる働きがある。)、ベンズア
ミジン、アミノカプロン酸、トラネキサム酸、ペプチド
性クロロメチンケトン体などが例示される。又、メタロ
プロテアーゼ阻害剤としては、EDTA、フェナンスロ
リン、DTPAなどの金属キレート剤、α2マクログロ
ブリン、オボマクログロブリン、コラゲナーゼインヒビ
ター(TIMP)などの生物由来のメタロプロテアーゼ
阻害剤があげられ、システインプロテアーゼ阻害剤とし
ては、ステフィン、シスタチンやキニノーゲンなどの生
物由来のものがあげられる。これらは一種又は二種以上
の混合物として使用することができる。
【0007】本発明においては、上記プロテアーゼ阻害
剤のうち、安全性及び細菌の増殖抑制効果に優れる点か
ら、特にオボマクログロブリン、α2マクログロブリン
又はこれらの類縁体を用いるのが好ましい。ここで、オ
ボグロブリンは、鳥の卵白に含まれる複数の蛋白質の総
称で、卵白から蛋白質を分離する際の操作でグロブリン
分画のなかに含まれるためこの名前がある。卵白の蛋白
質の約10%を占める。その主成分は、オボマクログロ
ブリンであり、その分子量は約72万、四量体構造で、
約18万の分子量を有する4つのサブユニットから構成
される。この機能分子は、高等動物の血液に存在する強
力なプロテアーゼインヒビターであるα2マクログロブ
リンと相同分子であることが明らかにされている。ま
た、類縁体としては、分子量が10万〜20万程度のマ
クログロブリンなどがあげられる。
【0008】本発明の魚介類の幼生用細菌感染予防剤
は、魚介類の幼生用の水溶液又は海水に、対象となる魚
介類の幼生の種類に応じた量を添加することができる
が、上記プロテアーゼ阻害剤の量が、水溶液又は海水1
Kg当たり1mg〜100mg程度となるように使用す
るのがよく、より好ましくは5mg〜50mg程度、最
も好ましくは10mg〜30mg程度である。本発明の
細菌感染予防剤は、魚介類の幼生用の水溶液又は海水に
予め添加溶解させておいてもよく、又魚介類の幼生用の
水溶液又は海水に、魚介類の幼生を入れた後に、添加溶
解することも、又予め溶解させておいた溶液を添加する
こともできる。このようにして本発明の細菌感染予防剤
を含む水溶液又は海水中で、魚介類の幼生を飼育するの
が好ましい。これらのうち、魚介類の幼生を飼育するた
めの飼育水槽に、魚介類の幼生を収容する前に、飼育用
水溶液に酸素又は空気を十分暴気し、飼育水を酸素飽和
の状態にし、次いで、本発明の細菌感染予防剤をここに
溶解し、その後、魚介類の幼生を収容して無通気下で飼
育し、1日又は数日置きに水溶液を交換して飼育を続け
るのが好ましい。飼育中にエアストーンなどから飼育槽
に空気を導入する方法では、飼育中に泡が発生する可能
性があるが、この方法によると泡の発生を抑制すること
ができ、かつ本発明の細菌感染予防剤の予防効果を効率
的に持続させることができる。
【0009】より具体的に魚介類の幼生としてマガキの
幼生を用いる場合について説明すると、例えば100リ
ットルの水槽に、70リットルの海水を入れ(温度 約
22℃)、ここに酸素を酸素ボンベから導管により5〜
10分間程度導入して、海水を酸素で飽和させ、次いで
本発明の細菌感染予防剤をプロテアーゼ阻害剤の濃度が
0.005〜0.01重量%程度となるように攪拌溶解す
る。次ぎに、ここにマガキの幼生を1リットル当たり1
000〜2000個程度入れ、無通気で1日間又は数日
間飼育し、その後、上記と同様の操作によって調製した
本発明の細菌感染予防剤を溶解してなる海水に移して飼
育を継続するのがよい。
【発明の効果】本発明によれば、新規で効果的な魚介類
の幼生用細菌感染予防剤を提供することができる。又、
この幼生用細菌感染予防剤を用いることにより、効率的
に各種魚介類の幼生を飼育することができる。次に本発
明を実施例により説明する。
【0010】
【実施例】
実施例1 容量が7リットルの小型飼育水槽を用い、ここに海水を
5リットル加え、マガキ幼生(孵化後5日程度のもの
で、平均殻高150μmのもの)を収容密度が1個体/
mlとなるように入れ、強力な病原細菌である Vibrio tu
biashii (ATCC19106:最終密度 10万CFU/ml) を幼生の
飼育水槽に接種して、すぐにアメリカ・シグマ社製の実
験用試薬オボグロブリン(ovoglobulins:ニワトリ卵白
由来)を最終濃度が5μg/mlとなるように溶解し、飼
育水温21−23℃で飼育し、幼生の生残率を3時間ご
とに測定した。同様にして、オボグロブリンを用いない
場合(比較例)、及び Vibrio tubiashii を接種せず、
かつオボグロブリンを用いない場合(コントロール)に
ついても、飼育試験を行い、幼生の生残率を3時間ごと
に測定した。結果をまとめて図1に示す。この結果から
明らかなように、細菌のみの区(比較例)では12時間
前後から死亡個体がみられるようになり、その死亡率は
15時間後から急激に高くなり、21時間には100%
死亡した。一方、オボグロブリンを併せて添加した区
(本発明)では、死亡はほとんど認められず、24時間
後でも90%以上が生残しており、運動にも異常はみら
れなかった。
【0011】実施例2 100リットルの飼育水槽と70リットルの海水を用い
た以外は、実施例1と同様にして1週間の飼育を行い、
対照区との幼生の生残と成長を比較した。換水は1日お
きに行った。その結果、本発明には、小型水槽の時と同
様の明確な効果が認められた。
【0012】実施例3 100リットルの水槽に、70リットルの海水を入れ、
酸素を酸素ボンベから導管により5〜10分間程度導入
して、海水を酸素で飽和させ、次いで実施例1で用いた
のと同じオボグロブリンを最終濃度が10μg/mlとな
るように攪拌溶解した。ここにマガキ幼生(孵化後3日
程度平均殻高100〜110μmのもの)を収容密度が
1個体/mlとなるように入れ、 Vibrio tubiashii (AT
CC19106:最終密度 10万CFU/ml) を幼生の飼育水槽に接
種して、飼育水温21−23℃で無通気で1日間又は数
日間飼育し、その後、上記と同様の操作によって調製し
た本発明の細菌感染予防剤を溶解してなる海水に移して
飼育を1週間継続した。その結果、幼生の生残と成長
は、コントロールと同様であった。
【図面の簡単な説明】
【図1】マガキ幼生の飼育における本発明の細菌感染予
防剤の効果を生存率で示したものである。

Claims (5)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】 プロテアーゼ阻害剤を含有することを特
    徴とする魚介類の幼生用細菌感染予防剤。
  2. 【請求項2】 プロテアーゼ阻害剤が、セリンプロテア
    ーゼ阻害剤、メタロプロテアーゼ阻害剤及びシステイン
    プロテアーゼ阻害剤からなる群から選ばれる請求項1記
    載の細菌感染予防剤。
  3. 【請求項3】 プロテアーゼ阻害剤が、オボマクログロ
    ブリン、α2マクログロブリン又はこれらの類縁体であ
    る請求項1記載の細菌感染予防剤。
  4. 【請求項4】 請求項1〜3のいずれか1項記載の魚介
    類の幼生用細菌感染予防剤の存在下、飼育溶液中で魚介
    類の幼生を飼育することを特徴とする魚介類の幼生の飼
    育方法。
  5. 【請求項5】 魚介類の幼生の飼育用水溶液に酸素又は
    空気を十分暴気して酸素を飽和させた後、請求項1〜3
    のいずれか1項記載の魚介類の幼生用細菌感染予防剤の
    存在下、魚介類の幼生を無通気下で飼育することを特徴
    とする魚介類の幼生の飼育方法。
JP8225007A 1996-08-27 1996-08-27 魚介類の幼生用細菌感染予防剤及び魚介類の幼生の飼育方法 Pending JPH1067680A (ja)

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