JPH11193211A - 化粧料 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 天然植物由来の安全で副作用がなく、しかも
抗チロシナーゼ活性作用のある美白作用と保湿作用に優
れた化粧料を提供する。 【解決手段】 エビネ属植物からの圧搾物及び／又は抽
出物を有効成分として化粧料を構成する。前記エビネ属
植物からの圧搾物や抽出物において、例えばアルコール
抽出物には、用量依存的に抗チロシナーゼ活性作用があ
る。したがって、本発明の化粧料は皮膚に存在するタン
パク質構成アミノ酸の一種であるチロシンのチロシナー
ゼ活性酵素に基づくメラニン色素（黒褐色）の生成を効
果的に抑制することができ、優れた美白効果を有する。
また、本発明の化粧料は、保湿効果にも優れている。こ
のため、本発明の化粧料は、美白剤、クリーム、石鹸等
に広く使用でき、かつ、皮膚を刺激する作用も認められ
ず、安全に使用することができる。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、化粧料、特に天然
植物からの圧搾物及び／又は抽出物を有効成分とする保
湿作用と美白作用に優れた化粧料に関するものである。

【０００２】更に詳しくは、本発明は、エビネ属に属す
る植物（以下、エビネ属植物という。）からの圧搾物及
び／又は抽出物を有効成分とする保湿作用と美白作用に
優れた天然植物由来の安全性に富んだ化粧料に関するも
のである。

【０００３】

【従来の技術】一般に、化粧料には保湿作用と美白作用
が強く望まれている。前記した化粧料に対する要求特性
のうち、前者の保湿作用については明らかであるために
説明を省略するが、後者の美白作用について、以下に説
明する。

【０００４】皮膚、特に顔面におけるシミ、ソバカス、
日焼等による色素沈着は、皮膚に存在するタンパク質構
成アミノ酸の一種であるチロシン（ｔｙｒｏｓｉｎｅ，
Ｃ₉Ｈ₁₁ＮＯ₃）がチロシナーゼ（チロシン酸化酵素、ｔ
ｙｒｏｓｉｎａｓｅ）により酸化されて黒褐色のメラニ
ンとなり、これが皮膚に沈着するために起るものであ
る。このため、化粧料や美白剤などにおいて、前記した
メラニン生成に関与するチロシナーゼを阻害するチロシ
ナーゼ活性阻害作用を有する成分を用いることが行なわ
れている。

【０００５】この種の美白剤として、化学的な合成物質
を有効成分とするものがあるが、これらはチロシナーゼ
活性阻害作用が強いものの副作用などの安全性に問題が
あるものが多い。このため、近年、前記した合成物質を
使用する代わりに、皮膚に親しく安全で、しかもメラニ
ン色素の生成抑制効果のある天然植物からの抽出物を有
効成分とする美白剤が提案され始めている。

【０００６】前記した天然植物から抽出物を有効成分と
する美白剤として、例えば、カミツレ（特開平７−２０
６６５７号）、カヤツリグサ（特開平６−６２１７６０
号）、パンノキ（特開平８−２７７２２５号）、ウスベ
ニタチアオイ（特開平８−３２５１３２号）などを利用
するもの、あるいは複数の漢方生薬などを組み合わせた
ものを使用するもの（特開平６−１２８１３８号、特開
平７−２７７９４４号、特開平８−９２０５５号、特開
平８−９２０５６号、特開平８−２０８４５１号）、な
どが知られている。

【０００７】しかしながら、今日まで有効性と安全性の
両面で十分に満足し得る天然植物由来の美白剤等に有効
な成分が見い出されていないのが現状である。特に、美
白作用に有効であるとともに化粧料として要求される保
湿効果をも兼備する天然植物由来の成分が見い出されて
いないのが現状である。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】前記した従来技術の限
界に鑑み、本発明者らは、化粧水や美白剤などの化粧料
の有効成分として天然素材で古くから医療品などに使用
され、かつ安全性の高い薬草類を中国、東南アジア、イ
ンド、アフリカ、南米などに求めて研究開発を進めてい
る。

【０００９】特に、本発明者らは、ラン科に属するエビ
ネ（Ｃａｌａｕｔｈｅ ｄｉｓｃｏｌｏｒ）が、わが国
において広く分布していること、かつ未利用医薬用素材
であることに注目し、エビネ成分の薬理特性について鋭
意検討を進めている。この過程で、本発明者らは、エビ
ネ属植物から得られる圧搾汁や抽出エキスが美白作用
（チロシナーゼ活性阻害作用）や保湿作用に極めて優れ
ていることを見い出している。

【００１０】本発明は、前記知見をベースにして完成さ
れたものである。本発明は、植物由来の美白作用や保湿
作用に優れた安全性の高い化粧料を提供することを目的
とする。

【００１１】本発明におい、「化粧料」という用語は、
前記した説明及び以下の説明から明らかのように、化粧
水、美白剤、化粧石鹸、クリームなど化粧に関する用途
全体を包含するものである、と最広義に解釈されるべき
である。別言すれば、本発明でいう「化粧料」は、基礎
化粧品ということができるものである。

【００１２】

【課題を解決するための手段】本発明を概説すれば、本
発明は、エビネ属植物、典型的にはラン科に属するエビ
ネ（Ｃａｌａｎｔｈｅ ｄｉｓｃｏｌｏｒ）からの圧搾
物及び／又は抽出物を有効成分とする化粧料に関するも
のである。なお、本発明において、「圧搾物」及び「抽
出物」という用語は、圧搾汁（液）や抽出液のみなら
ず、これらを濃縮したものや精製したものなどを包含す
るものである、と最広義に解釈されるべきである。

【００１３】以下、本発明の技術的構成及び実施態様に
ついて詳しく説明する。

【００１４】前記したように、顔面などの皮膚における
シミの発生は、タンパク質構成アミノ酸の一種であるチ
ロシン（ｔｙｒｏｓｉｎｅ，Ｃ₉Ｈ₁₁ＮＯ₃）がチロシナ
ーゼ（チロシン酸化酵素、ｔｙｒｏｓｉｎａｓｅ）によ
り酸化されて黒褐色のメラニンとなり、これが皮膚に沈
着してシミとなるものである。

【００１５】本発明は、前記したシミ発生のメカニズム
を念頭に入れ、古い医書や本草書から美白効果を言及も
しくは示唆する情報、あるいは民間伝承の情報を入取す
るとともに、成分検討から含有される類似成分を持つ植
物などを入手し、チロシンからメラニンを合成する酵素
チロシナーゼの阻害活性（以下、抗チロシナーゼ活性と
もいう。）の強さを指標とする研究開発の中から生み出
されたものである。

【００１６】エビネ（Ｃａｌｏｎｔｈｅ ｄｉｓｃｏｌ
ｏｒ、ラン科）は、日本国内においても北海道西南部か
ら九州まで広く分布しているが、国内で薬用とされた例
は無い。一方、中国では九子連環草という名前で、エビ
ネ属植物、例えばＣ．ａｌｉｓｍｉｆｏｌｉａ，Ｃ．ｂ
ｒｅｖｉｃｏｒｎｕ，Ｃ．ｄｅｌａｖａｙｉ，Ｃ．ｆｉ
ｍｂｒｉａｔａ，Ｃ．ｈａｎｃｏｃｋｉｉ，Ｃ．ｍａｎ
ｎｉｉ，Ｃ．ｔｒｉｃａｒｉｎａｔａ及びＣ．ｄｉｓｃ
ｏｌｏｒなど多数の基源の異なる植物が生薬として皮膚
疾患や痔病に外用されている。

【００１７】本発明の化粧料は、前記エビネの全草部及
び根茎部の圧搾物もしくは抽出物を有効成分として構成
されるものである。エネビ類は、変種が多く種々のもの
が知られているが、成分上の研究からこれら変種は美白
効果において同様の効果を奏する。このため、本発明で
いうエビネは、これら変種を含むものであると解される
べきである。また、本発明において、エビネ類の採集時
期は年間を通じて行ない得るものであり、採集時期は、
特段に制約されるものではない。

【００１８】エビネ属植物から得られる有効成分におい
て、その抗チロシナーゼ活性は、後述の実施例で示され
るようにエビネのアルコール抽出エキス、特にエビネ属
植物からのアルコール抽出エキスを酢酸エチルと水で分
配抽出した後の水相移行部に強くあらわれる。水相移行
部含有物質を分析すると、インドール化合物の一種であ
る下記化１で示されるカラントサイドＡの存在が認めら
れる。なお、前記カラントサイドＡ単独は、抗チロシナ
ーゼ活性が認められる物質である。

【００１９】

【化１】

【００２０】本発明の化粧料において、その出発材料と
なるエビネ属植物、即ち、ラン科のエビネ（Ｃａｌａｎ
ｔｈｅ ｄｉｓｃｏｌｏｒ）としては、次のものを例示
することができる。

【００２１】（１）．ジエビネ型：ジエビネ（Ｃ．ｄｉ
ｓｃｏｌｏｒ）、キエビネ（Ｃ．ｓｉｅｂｏｌｄｉ
ｉ）、キリシマエビネ（Ｃ．ａｒｉｓｔｕｌｉｆｅｒ
ａ）、アマミエビネ（Ｃ．ａｍａｍｉａｎａ）、ニオイ
エビネ（Ｃ．ｉｚｕ−ｉｎｓｕｌａｒｉｓ）、サルメン
エビネ（Ｃ．ｔｒｉｃａｒｉｎａｒａ）、トクノシマエ
ビネ（Ｃ．ｔｏｋｕｎｏｓｈｉｍａｅｎｓｉｓ）、アリ
サンエビネ（Ｃ．ａｒｉｓａｎｅｎｓｉｓ）、ホソバナ
エビネ（Ｃ．ｈｒａｃｉｌｉｆｌｏｒａ）、ヒマラヤニ
オイエビネ（Ｃ．ｐｌａｎｔａｇｉｎｅａ）、クロロン
ウカ（Ｃ．ｃｈｌｏｒｏｌｅｕｃａ）、トガリバエビネ
（Ｃ．ｃａｕｄａｔｉｉａｂｅｌｌａ）。 （２）．スズフリエビネ型：スズフリエビネ（Ｃ．ｌｉ
ｕｋｉｕｅｎｓｉｓ）、タマザキエビネ（Ｃ．ｄｅｎｓ
ｉｆｌｏｒａ）、テルクラ（Ｃ．ｐｕｌｃｈｒａ）。 （３）．タガネラン型：タガネラン（Ｃ．ｂｕｎｇｏａ
ｎａ）、ホワイテアナ（Ｃ．ｗｈｉｔｅａｎａ）。 （４）．サクラジマエビネ型：サクラジマエビネ（Ｃ．
ｏｂｌａｎｃｅｏｌａｔａ）、マンニイ（Ｃ．ｍａｎｎ
ｉ）。 （５）．キソエビネ型：キソエビネ（Ｃ．ｓｈｌｅｃｈ
ｔｅｒｉ）、アルピナ（Ｃ．ａｌｐｉｎａ）。 （６）．キンセイラン型：キンセイラン（Ｃ．ｎｉｐｐ
ｏｎｉｃａ）。 （７）．ヒロハノカラン型：ヒロハノカラン（Ｃ．ｊａ
ｐｏｎｉｃａ）。 （８）．アサヒエビネ型：アサヒエビネ（Ｃ．ｈａｔｔ
ｏｒｉｉ）。 （９）．ナツエビネ型：ナツエビネ（Ｃ．ｒｅｆｌｅｘ
ａ）。 （１０）．ツルラン型：ツルラン（Ｃ．ｆｕｒｃａｔ
ａ）、オナガエビネ（Ｃ．ｌｏｎｇｉｃａｌｃａｒａｔ
ａ）、オキナワエビネ（Ｃ．ｏｋｉｎａｗａｅｎｓｉ
ｓ）、マスカ（Ｃ．ｍａｓｕｃａ）、マダガスカリエン
シス（Ｃ．ｍａｄａｇａｓｃａｒｉｅｎｓｉｓ）、ナタ
ンンシス（Ｃ．ｎａｔａｌｅｎｓｉｓ）。 （１１）．トクサラン型：トクサラン（Ｃ．ｖｅｎｕｓ
ｔａ）、シロトクサラン（Ｃ．ｌｏｎｇｉｐｅｓ）、ビ
ロバ（Ｃ．ｂｉｌｏｂａ）。 （１２）．ベステイタ型：ベステイタ（Ｃ．ｖｅｓｔｉ
ｔａ）、ロゼア（Ｃ．ｒｏｓｅａ）、エルメリ（Ｃ．ｅ
ｌｍｅｒｉ）、ルベンス（Ｃ．ｒｕｂｅｎｓ）、カージ
オグロッサ（Ｃ．ｃａｒｄｉｏｇｌｏｓｓａ）。

【００２２】本発明の化粧料の出発材料となる前記した
エビネ属植物において、特にジエビネ（Ｃａｌａｎｔｈ
ｅ ｄｉｓｃｏｌｏｒ Ｌｉｎｄｌ）、キエビネ（Ｃ．
ｓｉｅｂｏｌｄｉｉ）、ナツエビネ（Ｃ．ｒｅｆｌｅｘ
ａ）などが有効である。

【００２３】本発明の化粧料は、前記したエビネ属植物
（以下、単にエビネというとがある。）から得た圧搾物
及び／又は抽出物を有効成分として構成されるものであ
る。本発明において、前記エビネの花、根、茎、葉など
の全草部及び根茎部が有効利用される。

【００２４】エビネから圧搾物を製造するには、採集し
たエビネを水洗、水切りし、次いで粗切りした後、圧搾
機（例えば、駒形製作所社製Ｍ−Ｉ型）にけかけて圧搾
汁（液）を得るようにすればよい。前記したプレスによ
り圧縮圧搾する方式により１ｋｇのエビネから約１２０
ｍｌの圧搾汁（液）を得ることができる。なお、プレス
圧縮圧力は、所望に設定すればよく、例えば５００〜
５，０００ｋｇ／ｃｍ²程度に設定すればよい。

【００２５】エビネから抽出物を製造するには、通常の
溶媒抽出法に従えばよい。抽出溶媒としては、水、含水
アルコール、アルコールなどを使用することができる。
前記アルコールとは、低級アルキルアルコール、特に安
全性の面からエチルアルコールが望ましい。エチルアル
コールとしては純粋のエチルアルコールでもよいが、工
業的には含水エチルアルコールが好適である。また、蒸
留酒のような酒清を用いることもできる。前記した含水
エチルアルコールにおいて、そのアルコール濃度は、特
に限定されないが、約３０〜９０％、望ましくは約４０
〜７０％程度が実用的である。

【００２６】エビネから抽出物を製造するには、採集し
た生の状態あるいは乾燥したエビネを粗切りし、水、含
水アルコール、アルコールなどの溶媒で抽出すればよ
い。

【００２７】例えば、エビネの地下茎などに付着した泥
を落とし、全草を水洗する。次いで、カッター、ミキサ
ーなどで粗切して、プレスにより圧縮搾汁する。本発明
は、前記したように、搾汁液そのものを使用することも
できるが、搾汁液に対して２０〜９０％の含水エチルア
ルコールを約１：１（容量）の割合で混合し、溶媒抽出
する。

【００２８】あるいは、前記したと同様に泥を落とし水
洗したエビネの全草をカッターで粗切し、次いでミキサ
ーですりつぶし、搾汁することなしに、タンク内でエビ
ネ約１０，０００ｇに対して約２０〜９０％エチルアル
コール約２０，０００ｍｌを混合し、７〜１０日間冷暗
所において密閉保存した後、固液分離し濾過してもよ
い。前記した方法により得られる抽出液は、約１〜２週
間、冷暗所において密封熟成することによりさらに効果
的になる。

【００２９】本発明の前記圧搾物及び／又は抽出物は、
前記したように抗チロシナーゼ活性物質である前記化１
で示されるカラントサイドＡを含有するものである。前
記カラントサイドＡは、次のようにして単離することが
できる。エビネの根茎を細切りした後、例えば、メタノ
ールで熱時抽出し、メタノール抽出エキスを得る。得ら
れたメタノール抽出エキスを酢酸エチルと水（１：１）
で分配抽出する。次いで、水相移行部を逆相シリカゲル
カラムクロマトグラフィーに付し、水、メタノールで順
次溶出し、メタノール溶出部を得る。更に、前記メタノ
ール溶出部を順相シリカゲルカラムクロマトグラフィー
で分画し、更に順相シリカゲルカラムガスクロマトグラ
フィーで分画する。次に、逆相高速液体クロマトグラフ
ィーを用いて繰り返し分離することにより、カラントサ
イドＡを単離することができる。

【００３０】前記カラントサイドＡは、単体として抗チ
ロシナーゼ活性が認められる物質であり、本発明の化粧
料における美白作用も前記カラントサイドＡに由来する
ものと認められる。なお、本発明のエビネの圧搾物及び
／又は抽出物において、後述する実施例が示すように、
特にアルコール抽出エキスを酢酸エチルと水で分配抽出
した際の水相移行部は、強い抗チロシナーゼ活性を示
す。本発明のエビネの圧搾物及び／又は抽出物は、前記
した美白効果のほかに、保湿効果にも優れており、美白
剤のほか、一般の化粧品、クリーム、乳液、石鹸として
も添加、使用することができるため、基礎化粧料として
特に有用なものである。

【００３１】本発明の前記エビネ属植物からの圧搾物及
び／又は抽出物は、一般に化粧料などに用いられる他の
合成化学物質や植物抽出物質との反応性がなければ、こ
れらを適宜混合して化粧料とすることができるものであ
る。また、本発明の前記エビネ属植物からの圧搾物及び
／又は抽出物を有効成分とする化粧料は、その組成物の
種類に応じて、例えばビタミン類には水溶性のものもあ
れば油溶性のものもあるが、使用動植物油との関係も含
めて、溶媒には水（精製水）、温水、エチルアルコール
またはそれらの混合液を用いることができるものであ
る。

【００３２】

【実施例】以下、本発明を実施例により更に詳しく説明
する。なお、以下の実施例の説明は、(1).エビネ属植物
からの圧搾物及び／又は抽出物の有効成分の確認、(2).
エビネ属植物からの圧搾物及び／又は抽出物の美白効果
（チロシナーゼ阻害活性）の評価（その１）、(3).エビ
ネ属植物からの圧搾物及び／又は抽出物の美白効果（チ
ロシナーゼ阻害活性）の評価（その２）、(4).エビネ属
植物からの圧搾物及び／又は抽出物の皮膚一次刺激性試
験、(5).エビネ属植物からの圧搾物及び／又は抽出物由
来の化粧水とその評価、の順で行なうことにする。

【００３３】（実施例１） （１）．有効成分（カラントサイドＡ）の確認：宮崎産
エビネの新鮮根茎（７．５ｋｇ）を細切りした後、Ｍｅ
ＯＨ（１８リットル）で熱時抽出を計３回おこなった。
ＭｅＯＨ抽出液３回分をあわせて減圧下溶媒留去し、Ｍ
ｅＯＨ抽出エキス（３３０ｇ，４．４％）を得た。この
エビネＭｅＯＨ抽出エキス（３００ｇ）をＡｃＯＥｔ−
Ｈ₂Ｏ（１：１）で分配して、ＡｃＯＥｔ相移行部（７
５ｇ，１．０％）、Ｈ₂Ｏ相移行部（２２５ｇ，３．０
％）を得た。

【００３４】得られたＨ₂Ｏ層移行部エキスを逆相シリ
カゲルカラムクロマトグラフィー［１．０ｋｇ，Ｈ₂Ｏ
→ＭｅＯＨ］で糖除去し、ＭｅＯＨ流出部エキス（１３
ｇ，１．７％）を得た。このＭｅＯＨ流出部エキス１３
ｇを順相シリカゲルカラムクロマトグラフィー｛１．０
ｋｇ，［ＣＨＣｌ₃：ＭｅＯＨ＝１０：１→３：１→
１：１］→［ＣＨＣｌ₃：ＭｅＯＨ：Ｈ₂Ｏ＝６５：３
５：１０（下層）→６：４：１］→ＭｅＯＨ｝で分離
し、Ｆｒ．１（１７０ｍｇ，０．００２３％）、Ｆｒ．
２（４１ｍｇ，０．０００５％）、Ｆｒ．３（４８ｍ
ｇ，０．０００６％）、Ｆｒ．４（２３４ｍｇ，０．０
０３１％）、Ｆｒ．５（４１００ｍｇ，０．０５５
％）、Ｆｒ．６（２７００ｍｇ，０．０３６％）、Ｆ
ｒ．７（２０００ｍｇ，０．０２７％）、Ｆｒ．８（４
０００ｍｇ，０．０５３％）を得た。

【００３５】次に、前記Ｆｒ．７（４３００ｍｇ．０．
０５７％）を順相シリカゲルカラムクロマトグラフィー
［４０ｇ、ＣＨＣｌ₃：ＭｅＯＨ：Ｈ₂Ｏ＝７：３：１：
（下層）→６：４：１］で分画し、さらに逆相高速液体
クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）［カラム：ＹＭＣ−Ｐ
ａｃｋ Ｒ＆Ｄ ＯＤＳ−５（２５０×２０ｍ、ｉ．
ｄ．）、溶媒：ＭｅＣＮ−Ｈ₂Ｏ（３０：７０，ｖ／
ｖ），流速：９．０ｍｌ／ｍｉｎ］、逆相高速液体クロ
マトグラフィー（ＨＰＬＣ）［カラム：ＹＭＣ−Ｐａｃ
ｋ Ｒ＆Ｄ ＯＤＳ−５（２５０×２０ｍｍ ｉ．
ｄ．），溶媒：ＭｅＯＨ−Ｈ₂Ｏ（２５：７５，ｖ／
ｖ），流速：９．０ｍｌ／ｍｉｎ］で繰り返し分離精製
し、カラントサイドＡ（８１．９ｍｇ，０．００１１
％）を得た。

【００３６】カラントサイドＡは、前記化１に示す構造
を有する淡黄色粉末のインドール配糖体であり、正の旋
光性を示す。なお、参考までに主な分析結果を示すと、
下記の通りである。 カラントサイドＡ：非晶粉末 旋光性：［α］_D ²⁵＋１６４．０°（ｃ＝０．０１，Ｍ
ｅＯＨ） 高分解能ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／ｚ） 次式計算値 Ｃ₂₀Ｈ₂₃ＮＯ₁₁（Ｍ＋Ｈ）−：４５８．１６３８ 実測値 ：４５８．１６５０

【００３７】ＩＲ［ＫＢｒ，ｃｍ^-2］：３４９０，１６
１８，１５５４，１４５８，１０２８ ＵＶ（ｃ＝０．０００６，ＭｅＯＨ，ｎｍ，ｌｏｇ
ε）：２８２（４．７），２２４（５．１）

【００３８】Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ，５００ＭＨｚ，
δ）：４．４０（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１"−
Ｈ），４．７４（１Ｈ，ｄ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，１' −
Ｈ），６．９７（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝１．３，６．９，
７．９Ｈｚ，５−Ｈ），７．０７（１Ｈ，ｄｄｄ，Ｊ＝
１．３，６．９，８．３Ｈｚ，６−Ｈ），７．１５（１
Ｈ，ｓ，２−Ｈ），７．２７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ＝１．
３，８．３Ｈｚ，７−Ｈ），７．６７（１Ｈ，ｄｄ，Ｊ
＝１．３，７．９Ｈｚ，４−Ｈ）．

【００３９】¹³Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤ₃ＯＤ，１２５ＭＨ
ｚ，δｃ）： Ｃ−１ Ｃ−２ １１２．２， Ｃ−３ １３８．８， Ｃ−４ １１８．６， Ｃ−５ １１９．５， Ｃ−６ １２２．８， Ｃ−７ １１２．４， Ｃ−８ １３５．４， Ｃ−９ １２１．３， Ｃ−１０ Ｃ−１´ １０５．４， Ｃ−２´ ７５．０， Ｃ−３´ ７７．９， Ｃ−４ ７１．５， Ｃ−５´ ７７．３， Ｃ−６´ ６９．９， Ｃ−１” １０４．７， Ｃ−２” ７５．１， Ｃ−３” ７７．９， Ｃ−４” ７１．５， Ｃ−５” ７７．９， Ｃ−６” ６２．７．

【００４０】Ｐｏｓｉｔｉｖｅ−ｍｏｄｅ ＦＡＢ−Ｍ
Ｓ（ｍ／ｚ）：４８０（Ｍ＋Ｎａ）^- Ｎｅｇａｔｉｖｅ−ｍｏｄｅ ＦＡＢ−ＭＳ（ｍ／
ｚ）：４５６（Ｍ−Ｈ）^-

【００４１】（実施例２） （２）．美白効果（チロンシナーゼ阻害活性）の評価
（その１）：ＭａｓｏｎとＰｅｔｅｒｓｏｎの方法に準
じて、美白効果について以下の通り実験した。 (i).被験液の調製 原料として宮崎県の山野に自生するエビネを使用した。
まず、前記エビネの地下茎などに付着した泥を洗い落
し、全草を水洗した。次いで、ミキサーで破片にした。
この破片１０，０００ｇを圧搾機（駒形製作所製Ｍ−１
型）により圧縮搾汁し、搾汁液を得た。なお前記圧搾機
（プレス機）の圧力条件は１，０００ｋｇ／ｃｍ²であ
った。次に、被験液として前記圧搾汁をそのまま使用す
るケースと、前記圧搾汁に各種含水アルコールを加え、
冷暗所で１０日間熟成して得たアルコール抽出液を使用
するケース、とについて美白効果について調べた。 (ii).美白効果の試験 皮膚のシミ発生は、チロシンからＬ−ドーパーが合成さ
れ、これがチロシナーゼ（チロシン酸化酵素）の作用を
受けて黒褐色のメラニンとなり、これが皮膚に沈着する
ことにより発生するものである。このため、美白作用の
試験は、４０ｍＭリン酸緩衝液（ＰＨ６．８）に対して
エビネ圧搾汁及び各種濃度のアルコール抽出物（被験
液）を添加し、これに基質としてＬ−ドーパー（最終濃
度０．１ｍｇ／ｍｌ）を含む混合液（１．９ｍｌ）に
０．２ｍｇ／ｍｌのチロシナーゼを０．１ｍｌ添加し
て、２５℃で３０分間反応させることにより行なった。
反応後、４７５ｎｍの吸光度（Ｄ₁）を測定した。別
に、Ｌ−ドーパー溶液を添加せずに同様な操作を行な
い、吸光度（Ｄ₂）を測定するとともに、更に被験液無
添加におけるドーパークロムの生成量としての吸光度
（Ｄ₃）を測定した。

【００４２】前記Ｄ₁，Ｄ₂，Ｄ₃用い、かつ下式により
ドーパークロム生成阻害率（阻害率％）を求め、チロシ
ナーゼが阻害活性の指標とした。 阻害率（％）＝｛［Ｄ₃−（Ｄ₁−Ｄ₂）］／Ｄ₃｝×１０
０ 結果を下記の表１に示す。

【００４３】

【表１】

【００４４】（実施例３） （３）．美白効果（チロシナーゼ阻害活性）の評価（そ
の２）：前記と同様にして美白効果について、以下によ
うに実験した。被験液０．５ｍｌにＬ−ドーパー溶液
（ＰＨ６．８，ＰＢＳ中、０．０３％）０．５ｍｌを加
え、２５℃、１０分間インベキュートし、更にマッシュ
ルーム由来のチロシナーゼ溶液（ＰＨ６．８，ＰＢＳ中
０．２ｍｇ／ｍｌ）０．５ｍｌを添加し、２５℃、５分
間インベキュートした。そして、前記と同様に、Ｄ₁，
Ｄ₂，Ｄ₃を求め、ドーパクロム生成阻害率（阻害率％）
を求めた。

【００４５】前記被験液として、実施例１のエビネＭｅ
ＯＨ抽出エキス（ＣＤＭ−ｅｘｔ）、同酢酸エチル相移
行部（ＡｃＯＥｔ−ｐｈａｓｅ）、同水相移行部（Ｈ₂
Ｏ−ｐｈａｓｅ）、カラントサイドＡ（ＣＤＨ₂）、及
び対照群として陽性対照薬のコウジ酸（ｋｏｕｊｉｃ
ａｃｉｄ）を用いた。結果を表２及び表３に示す。な
お、表２〜表３において、Ｏ．Ｄは光学的濃度、また
Ｓ．Ｅ．は標準誤差のことである。

【００４６】

【表２】

【００４７】

【表３】

【００４８】前記表１〜表３から明らかのように、エビ
ネ圧搾汁（液）、エビネＭｅＯＨ抽出エキス、酢酸エチ
ル相移行部、水相移行部は、ともに用量依存的に強い抗
チロシナーゼ活性を示した。陽性対照群のコウジ酸及び
カラントサイドＡ単体も強い抗チロシナーゼ活性を示し
た。なお、本発明のエビネＭｅＯＨ抽出エキスを酢酸エ
チルと水で分配抽出したものにおいて、抗チロシナーゼ
活性有効成分は、水相移行部に多く存在することがわか
る。

【００４９】（実施例４） （４）．皮膚一次刺激性試験：外用として使用するエビ
ネ抽出物の安全性について、モルモットを用いて皮膚刺
激性の試験を行なった。ハートレー系モルモットは雌性
３００ｇ前後を６匹一群として用いた。試験前にエーテ
ルで麻酔し背部を広く電気バリカンで剃毛し、更にシェ
ーバーで剃毛した。除毛部を消毒用アルコールでよく拭
き、図１に示すように試料の塗布部位の一方を注射針で
格子状の傷を入れた。検体の抽出１０．５ｍｌを２．５
×２５ｃｍの濾紙上に吸着させ、しっかりと防水フィル
ム（森下仁丹社製）で固定し、その上を伸縮粘着包帯で
固定した。貼布後２４時間目にパッチをはがし、紅斑や
浮腫の程度を観察した。ブランクはアルコールとした。
その結果、特に皮膚を刺激する反応は認められず、ブラ
ンクの場合と同様であった。

【００５０】（実施例５）次に、本発明のエビネ抽出物
を利用した化粧水の代表的な配合例を示す。

【００５１】（１）．化粧水（配合例１）：全草エビネ
３０％含有エタノール抽出液を使用した化粧水の第１配
合例を下記に示す。なお、各成分の配合割合は、重量％
である。 パントテン酸 ……………………………… ０．２５（重量％） ニコチン酸アミド ………………………… ０．１８ 酢酸トコフェロール ……………………… ０．８ 塩酸ピリドキシン ………………………… ０．１ エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム … ０．０８ 全草エビネ３０％含有エタノール抽出液 …９．０ エタノール ………………………………… ７．８５ 精製水 ……………………………………… 残量

【００５２】（２）．化粧水（配合例２） 全草エビネ３０％含有エタノール抽出液を使用した化粧
水の第２配合例を下記に示す。なお、各成分の使用量は
グラム（ｇ）であり、かつ（ ）内は、当該成分を
溶解するための溶剤とその使用量（ｍｌ）を示す。 パントテン酸ナトリウム …… ５．０（糖製水，６００ｍｌ） ニコチン酸アミド …………… ３．６ 胚芽油 ………………………… ８．０（無水エタノール，１００ｍｌ） 酢酸トコフェロール …………１７．０ 馬油 ……………………………１２．０（無水エタノール，１００ｍｌ） アスコルビン酸 ………………１１．２（糖製水，６００ｍｌ） グリコール酸 ………………… ２．０ ビタミンＢ６ ………………… ２．０（糖製水，３００ｍｌ） エチレンジアミン四酢酸二ナトリウム…０．１５（糖製水，３００ｍｌ） 全草エビネ３０％含有エタノール抽出液 …１８０．０ （注）溶媒合計は、糖製水１８００ｍｌ、無水アルコール２００ｍｌである。

【００５３】（化粧水の評価テスト）前記化粧水（配合
例２）につてい５人に試用してもらい、美白効果及び保
湿効果を中心に聴取した。結果を表４に示す。

【００５４】

【表４】

【００５５】被験者等によると、この化粧水を４〜５日
続けると、美白効果に加え、毎朝翌朝でも肌がつるつる
して保湿感の持続性に優れ、洗顔後でも一定の保湿性を
維持できる、との感想が寄せられた。

【００５６】

【発明の効果】本発明のエビネ属植物からの圧搾物及び
／又は抽出物を有効成分とする化粧料は、強い抗チロシ
ナーゼ活性を示すためメラニンの生成を効果的に抑制す
る優れた美白作用を有する。加えて、本発明の化粧料
は、保湿効果にも優れている。更に、本発明の化粧料
は、天然物利用型であるため、安全性が極めて高い。前
記諸特性に優れる本発明の化粧料は、化粧水をはじめ、
美白剤、乳液、クリーム、化粧石鹸などいろいろな用途
に有用なものであり、別言すれば基礎化粧品として有用
なものである。

【図面の簡単な説明】

【図１】 皮膚一次刺激性試験におけるハートレー系モ
ルモットに対する試料の皮膚塗布部位を示す模式図であ
る。

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 エビネ属植物からの圧搾物及び／又は抽
   出物を含むことを特徴とする化粧料。
2. 【請求項２】 エビネ属植物からの圧搾物が、エビネ属
   植物を圧搾して得た圧搾汁である請求項１に記載の化粧
   料。
3. 【請求項３】 エビネ属植物からの抽出物が、エビネ属
   植物からのアルコール抽出液である請求項１に記載の化
   粧料。
4. 【請求項４】 エビネ属植物からの抽出物が、エビネ属
   植物からのアルコール抽出液を酢酸エチルと水で分配抽
   出して得られる酢酸エチル移行部又は水相移行部である
   請求項１に記載の化粧料。
5. 【請求項５】 エビネ属植物からの圧搾物及び／又は抽
   出物が、カラントサイドＡを含有している請求項１に記
   載の化粧料。