JPH1123555A - 液体クロマトグラフ用示差屈折率検出器 - Google Patents
液体クロマトグラフ用示差屈折率検出器Info
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- JPH1123555A JPH1123555A JP17731097A JP17731097A JPH1123555A JP H1123555 A JPH1123555 A JP H1123555A JP 17731097 A JP17731097 A JP 17731097A JP 17731097 A JP17731097 A JP 17731097A JP H1123555 A JPH1123555 A JP H1123555A
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Abstract
(57)【要約】
【課題】単一送液ポンプで試料セル、参照セルに溶媒を
送液することを可能とし、注入した試料をロスすること
なく検知でき、さらに安定した連続測定が行える液体ク
ロマトグラフ用示差屈折率検出器を提供すること。 【解決手段】試料セルと参照セルの屈折率差の変化を検
知する示差屈折率検出器において、試料セルからの溶出
液を希釈し、参照溶液として利用するために試料セルと
参照セルの間に少なくとも試料セル容積の１０倍以上の
容積を有する攪拌チャンバーを挿入した液体クロマトグ
ラフ用示差屈折率検出器。
送液することを可能とし、注入した試料をロスすること
なく検知でき、さらに安定した連続測定が行える液体ク
ロマトグラフ用示差屈折率検出器を提供すること。 【解決手段】試料セルと参照セルの屈折率差の変化を検
知する示差屈折率検出器において、試料セルからの溶出
液を希釈し、参照溶液として利用するために試料セルと
参照セルの間に少なくとも試料セル容積の１０倍以上の
容積を有する攪拌チャンバーを挿入した液体クロマトグ
ラフ用示差屈折率検出器。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、液体クロマトグラ
フ用示差屈折率検出器に関し、さらに詳細には単一送液
ポンプで試料セルと参照セルに溶媒を送り成分を検出す
るための液体クロマトグラフ用示差屈折率検出器に関す
るものである。
フ用示差屈折率検出器に関し、さらに詳細には単一送液
ポンプで試料セルと参照セルに溶媒を送り成分を検出す
るための液体クロマトグラフ用示差屈折率検出器に関す
るものである。
【０００２】
【従来の技術】試料セルと参照セルを有する液体クロマ
トグラフ用示差屈折率検出器では、試料セルと参照セル
に同一溶媒を流すことにより安定したベースラインが得
られ、安定した測定を行うことができる。しかし、試料
セルと参照セルに同一の溶媒を流すには、それぞれに送
液ポンプが必要であるため、クロマトグラフ装置が高価
になるばかりでなく、トラブル発生頻度の高いチェック
弁等の可動部品数が増えるため、頻繁なメンテナンスが
必要になる。
トグラフ用示差屈折率検出器では、試料セルと参照セル
に同一溶媒を流すことにより安定したベースラインが得
られ、安定した測定を行うことができる。しかし、試料
セルと参照セルに同一の溶媒を流すには、それぞれに送
液ポンプが必要であるため、クロマトグラフ装置が高価
になるばかりでなく、トラブル発生頻度の高いチェック
弁等の可動部品数が増えるため、頻繁なメンテナンスが
必要になる。
【０００３】このため、１台の送液ポンプで送液した溶
媒を試料セルに至る前で分岐するとともに、参照セルの
前の配管に溶媒を満たしておき、分岐された溶媒（測定
されるべき成分の一部を含む）を該配管に送ることで満
たしておいた溶媒を参照セルに押し流す方式提案されて
いる。
媒を試料セルに至る前で分岐するとともに、参照セルの
前の配管に溶媒を満たしておき、分岐された溶媒（測定
されるべき成分の一部を含む）を該配管に送ることで満
たしておいた溶媒を参照セルに押し流す方式提案されて
いる。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】しかし、分岐の割合は
分岐配管の抵抗に依存しているため、溶媒粘度が変化す
れば分流比が変化することになる。特にサイズ排除クロ
マトグラフィーでは、測定される高分子物質はその重合
度によって粘度が異なるため、単に溶媒のみの場合と該
成分を含んだ溶媒、さらには含まれている種々成分の重
合度によって分流比が微妙に変化する。液体クロマトグ
ラフィーの手法では、クロマトグラムピークの溶出時間
により成分を同定し、該ピークの面積や高さに基づき各
成分の定量を行うため、分流比変化に起因する流量変化
は、測定精度に影響を与える。
分岐配管の抵抗に依存しているため、溶媒粘度が変化す
れば分流比が変化することになる。特にサイズ排除クロ
マトグラフィーでは、測定される高分子物質はその重合
度によって粘度が異なるため、単に溶媒のみの場合と該
成分を含んだ溶媒、さらには含まれている種々成分の重
合度によって分流比が微妙に変化する。液体クロマトグ
ラフィーの手法では、クロマトグラムピークの溶出時間
により成分を同定し、該ピークの面積や高さに基づき各
成分の定量を行うため、分流比変化に起因する流量変化
は、測定精度に影響を与える。
【０００５】例えばサイズ排除クロマトグラフィーで
は、カラムからの流量（溶出容量）が１％変化すると、
測定結果（前記のようにして同定される、各種成分の平
均分子量）に２０％以上の誤差を生むという報告もある
（D.D.Bly,H.J.Stoklosa,J.J.kirkland and W.W.Yau,An
al.Chem.47(11),181 0(1975)）。
は、カラムからの流量（溶出容量）が１％変化すると、
測定結果（前記のようにして同定される、各種成分の平
均分子量）に２０％以上の誤差を生むという報告もある
（D.D.Bly,H.J.Stoklosa,J.J.kirkland and W.W.Yau,An
al.Chem.47(11),181 0(1975)）。
【０００６】さらに、溶媒の分岐により、微量とはいえ
成分の１部を含む溶媒が参照セル側に流れるため、測定
に供した試料のすべてが検出に利用されないという課題
もある。
成分の１部を含む溶媒が参照セル側に流れるため、測定
に供した試料のすべてが検出に利用されないという課題
もある。
【０００７】この課題を解決するために、１台の送液ポ
ンプで送液した溶媒を試料セルの後で分岐し、参照セル
の前の配管に溶媒で満たしておき、試料セルを通過後の
溶媒を分岐させ、該配管内の溶媒を押し流すことも考え
られるが、十分に攪拌、希釈されない成分が分岐流路か
ら参照セルまでの配管容量と分流比に応じて参照セルに
送り込まれることになり、長時間測定を行うとクロマト
グラムのベースラインにドリフトまたは負ピークを生じ
ることになる。
ンプで送液した溶媒を試料セルの後で分岐し、参照セル
の前の配管に溶媒で満たしておき、試料セルを通過後の
溶媒を分岐させ、該配管内の溶媒を押し流すことも考え
られるが、十分に攪拌、希釈されない成分が分岐流路か
ら参照セルまでの配管容量と分流比に応じて参照セルに
送り込まれることになり、長時間測定を行うとクロマト
グラムのベースラインにドリフトまたは負ピークを生じ
ることになる。
【０００８】従って、前記２つの方式では、一定時間毎
に分岐配管以降の参照セル側の流路の溶媒を置換する必
要があるため、溶媒置換後のベ−スラインに乱れを生
じ、多数の試料を測定する場合、測定以外に安定化のた
めの時間を要していた。
に分岐配管以降の参照セル側の流路の溶媒を置換する必
要があるため、溶媒置換後のベ−スラインに乱れを生
じ、多数の試料を測定する場合、測定以外に安定化のた
めの時間を要していた。
【０００９】かかる課題を解決するために、単に試料セ
ルと参照セルを直列に接続することも試みられている
が、試料セル側に参照セル及び接続配管、更には出口配
管等による背圧がかかり、ベースラインを安定化するこ
とは困難である。また、試料セルと参照セルとでは検出
信号が逆転するため、通常試料セルで検知されるピーク
と、両セルを接続する配管容量分遅れて参照セルで検知
される負ピークの２本の相反するピークが得られるた
め、測定結果の解析作業が複雑になる。このため、溶出
に要する時間が、溶媒が試料セル容量、両セルの接続配
管容量そして参照セル容量を通過するのに必要な時間以
上である成分では、測定に適するピーク形状として検出
することができない。
ルと参照セルを直列に接続することも試みられている
が、試料セル側に参照セル及び接続配管、更には出口配
管等による背圧がかかり、ベースラインを安定化するこ
とは困難である。また、試料セルと参照セルとでは検出
信号が逆転するため、通常試料セルで検知されるピーク
と、両セルを接続する配管容量分遅れて参照セルで検知
される負ピークの２本の相反するピークが得られるた
め、測定結果の解析作業が複雑になる。このため、溶出
に要する時間が、溶媒が試料セル容量、両セルの接続配
管容量そして参照セル容量を通過するのに必要な時間以
上である成分では、測定に適するピーク形状として検出
することができない。
【００１０】本発明は、かかる従来技術の課題に鑑み、
単一送液ポンプで試料セル、参照セルに溶媒を送液する
ことを可能とし、注入した試料をロスすることなく検知
でき、さらに安定した連続測定が行える液体クロマトグ
ラフ用示差屈折率検出器を提供することにある。
単一送液ポンプで試料セル、参照セルに溶媒を送液する
ことを可能とし、注入した試料をロスすることなく検知
でき、さらに安定した連続測定が行える液体クロマトグ
ラフ用示差屈折率検出器を提供することにある。
【００１１】
【課題を解決するための手段】本発明者は、上記のごと
き従来課題を解決すべく検討を行った結果、本発明を完
成するに至った。即ち本発明は、試料セルからの溶出液
を希釈し、参照溶液として利用するために試料セルと参
照セルの間に少なくとも試料セル容積の１０倍以上の容
積を有する攪拌チャンバーを挿入した液体クロマトグラ
フ用示差屈折率検出器である。
き従来課題を解決すべく検討を行った結果、本発明を完
成するに至った。即ち本発明は、試料セルからの溶出液
を希釈し、参照溶液として利用するために試料セルと参
照セルの間に少なくとも試料セル容積の１０倍以上の容
積を有する攪拌チャンバーを挿入した液体クロマトグラ
フ用示差屈折率検出器である。
【００１２】本発明の示差屈折率検出器では、試料セル
の後に設けられた分岐流路の一方は廃液槽に接続されて
いるため、試料セル内の圧力は、接続配管による背圧と
廃液槽内の大気圧で決まり、ほぼ一定に保たれる。ま
た、該分岐流路の他方は参照セル側へ流れる試料成分を
減ずるための希釈効果も担っている。例えば、廃液槽側
と参照セル側とで９９：１の分岐を行えば、参照セル側
へは試料セルで検知した成分の１／１００の濃度しか流
れないことになる。
の後に設けられた分岐流路の一方は廃液槽に接続されて
いるため、試料セル内の圧力は、接続配管による背圧と
廃液槽内の大気圧で決まり、ほぼ一定に保たれる。ま
た、該分岐流路の他方は参照セル側へ流れる試料成分を
減ずるための希釈効果も担っている。例えば、廃液槽側
と参照セル側とで９９：１の分岐を行えば、参照セル側
へは試料セルで検知した成分の１／１００の濃度しか流
れないことになる。
【００１３】分岐流路で参照セル側に分岐された溶媒中
の成分は、適当容積を有する攪拌チャンバーに送られ、
該攪拌チャンバーで更に希釈及び均一化される。攪拌チ
ャンバーは、瞬時にしかも均一に攪拌できることが好ま
しいため、動的に撹拌（希釈）を行うダイナミックミキ
サーが特に好ましい。
の成分は、適当容積を有する攪拌チャンバーに送られ、
該攪拌チャンバーで更に希釈及び均一化される。攪拌チ
ャンバーは、瞬時にしかも均一に攪拌できることが好ま
しいため、動的に撹拌（希釈）を行うダイナミックミキ
サーが特に好ましい。
【００１４】ここで、攪拌チャンバーより参照セルに送
られる溶媒中の成分濃度について考えると、瞬時にチャ
ンバー内成分濃度が均一に攪拌される場合、参照セルに
送られる成分濃度と攪拌チャンバー内の濃度は等しくな
り、その濃度変化は以下の式により計算できる。
られる溶媒中の成分濃度について考えると、瞬時にチャ
ンバー内成分濃度が均一に攪拌される場合、参照セルに
送られる成分濃度と攪拌チャンバー内の濃度は等しくな
り、その濃度変化は以下の式により計算できる。
【００１５】
【数１】
【００１６】ここで、ｘ（ｔ）は時間ｔにおける攪拌チ
ャンバー内の成分濃度でありかつ攪拌チャンバーから流
出する成分濃度、ｘ０は攪拌チャンバー内の初期成分濃
度（従って測定開始時は０となる）である。Ｖ０は攪拌
チャンバーの容積、ｖは流入溶媒量、ａは流入溶媒中の
成分濃度を示し、「exp 」はエクスポネンシャルであ
る。例えば、攪拌チャンバーの容積を１ｍｌとし、水で
満たし、送液ポンプから有機溶媒を１ｍｌ／分で流し、
廃液側と参照セル側の分岐比を９９：１つまり攪拌チャ
ンバーには毎分１０μｌの有機溶媒が流れ込んでくると
仮定した場合、６０分後の攪拌チャンバー内の有機溶媒
濃度は、以下のように計算できる。
ャンバー内の成分濃度でありかつ攪拌チャンバーから流
出する成分濃度、ｘ０は攪拌チャンバー内の初期成分濃
度（従って測定開始時は０となる）である。Ｖ０は攪拌
チャンバーの容積、ｖは流入溶媒量、ａは流入溶媒中の
成分濃度を示し、「exp 」はエクスポネンシャルであ
る。例えば、攪拌チャンバーの容積を１ｍｌとし、水で
満たし、送液ポンプから有機溶媒を１ｍｌ／分で流し、
廃液側と参照セル側の分岐比を９９：１つまり攪拌チャ
ンバーには毎分１０μｌの有機溶媒が流れ込んでくると
仮定した場合、６０分後の攪拌チャンバー内の有機溶媒
濃度は、以下のように計算できる。
【００１７】
【数２】
【００１８】即ち、６０分で攪拌チャンバー内の溶媒
（水）が45.12 ％（451.2 μｌ）置換されることにな
る。
（水）が45.12 ％（451.2 μｌ）置換されることにな
る。
【００１９】同様の条件で、１％の試料濃度を５０μ
ｌ、その成分が１０分の広がりをもってカラムから溶出
すると仮定し、１０分毎に６回注入した後、つまり６０
分後の攪拌チャンバー内の成分濃度を計算する。まず、
カラムから溶出した時点での成分濃度は、１％、５０μ
ｌの成分が１０分、つまり１０ｍｌに広がるので、０．
０５ｍｇ／ｍｌと計算できる。さらにその後１／１００
に分岐されるので０．５μｇ／ｍｌとなる。上記計算式
により攪拌チャンバーの置換率は４５．１２％なので
０．２２５６μｇ／ｍｌと計算できる。つまり６０分後
の攪拌チャンバー内の成分濃度は、０．００００２２５
６％と計算される。これをＧＰＣで多用されている標準
ポリスチレンの屈折率濃度係数ｄｎ／ｄｃ＝０．１９５
ｍｌ／ｇより、ＲＩ信号に換算すると４．４×１０-8Ｒ
ＩＵとなる。実際のクロマトグラフィーでは成分が含ま
れている領域と含まれていない領域があるため、ベース
ラインへの影響はこの計算値よりもさらに小さくなる。
ベースラインへの影響がこの程度に抑えられるため十分
参照溶液としても使用できることがわかる。
ｌ、その成分が１０分の広がりをもってカラムから溶出
すると仮定し、１０分毎に６回注入した後、つまり６０
分後の攪拌チャンバー内の成分濃度を計算する。まず、
カラムから溶出した時点での成分濃度は、１％、５０μ
ｌの成分が１０分、つまり１０ｍｌに広がるので、０．
０５ｍｇ／ｍｌと計算できる。さらにその後１／１００
に分岐されるので０．５μｇ／ｍｌとなる。上記計算式
により攪拌チャンバーの置換率は４５．１２％なので
０．２２５６μｇ／ｍｌと計算できる。つまり６０分後
の攪拌チャンバー内の成分濃度は、０．００００２２５
６％と計算される。これをＧＰＣで多用されている標準
ポリスチレンの屈折率濃度係数ｄｎ／ｄｃ＝０．１９５
ｍｌ／ｇより、ＲＩ信号に換算すると４．４×１０-8Ｒ
ＩＵとなる。実際のクロマトグラフィーでは成分が含ま
れている領域と含まれていない領域があるため、ベース
ラインへの影響はこの計算値よりもさらに小さくなる。
ベースラインへの影響がこの程度に抑えられるため十分
参照溶液としても使用できることがわかる。
【００２０】なお、上記計算は分流比を９９：１、攪拌
チャンバー容積を１ｍｌつまり試料セル（通常は１０μ
ｌ）の１００倍として計算したが、攪拌チャンバー容積
を１００μｌつまり試料セルの１０倍とするとベースラ
イン信号への影響は４．４×１０-7ＲＩＵと計算でき
る。この様に、攪拌チャンバーの溶液容積を試料セルの
１０倍以上とすることが好ましく、特に１００倍以上と
することが好ましい。
チャンバー容積を１ｍｌつまり試料セル（通常は１０μ
ｌ）の１００倍として計算したが、攪拌チャンバー容積
を１００μｌつまり試料セルの１０倍とするとベースラ
イン信号への影響は４．４×１０-7ＲＩＵと計算でき
る。この様に、攪拌チャンバーの溶液容積を試料セルの
１０倍以上とすることが好ましく、特に１００倍以上と
することが好ましい。
【００２１】攪拌チャンバーからの溶媒は参照セルに送
られた後、廃液槽に送られるため、参照セル内の圧力は
廃液槽への接続配管による背圧と廃液槽内の大気圧でほ
ぼ一定に保たれる。なお、試料セルと廃液槽、参照セル
と廃液槽への接続に同一サイズ（管径）の配管を用いれ
ば、試料セルと参照セルの背圧を等しくするすることが
できる。
られた後、廃液槽に送られるため、参照セル内の圧力は
廃液槽への接続配管による背圧と廃液槽内の大気圧でほ
ぼ一定に保たれる。なお、試料セルと廃液槽、参照セル
と廃液槽への接続に同一サイズ（管径）の配管を用いれ
ば、試料セルと参照セルの背圧を等しくするすることが
できる。
【００２２】分岐流路における分流比及び攪拌チャンバ
ーの溶液容積を変えることにより、希釈及び均一化の度
合いを自由にコントロールすることができる。
ーの溶液容積を変えることにより、希釈及び均一化の度
合いを自由にコントロールすることができる。
【００２３】
【発明の実施の形態】以下、本発明を、図面に示した実
施の形態に基づき詳細に説明する。
施の形態に基づき詳細に説明する。
【００２４】図１は、本発明の液体クロマトグラフ用示
差屈折率検出器を有する液体クロマトグラフ装置の概略
図を示すものである。溶媒だめ１中の溶媒２は配管３を
経て送液ポンプ４に吸引され、配管５、試料注入口（六
方バルブ）６、配管７を経て分離カラム８に供される。
カラム８からの溶出液は配管９を経て示差屈折率検出器
の試料セル１０に入り、配管１１を経て流路分岐部１２
で２流路に分岐される。 流路分岐部１２で分岐された
溶媒の一方は、配管１３、電磁弁１４、配管１５を経て
廃液槽２３に廃液される。他方の流路に分岐された溶媒
は、配管１６、ニードルバルブ１７、配管１８、攪拌チ
ャンバー１９、配管２０を経て示差屈折率検出器の参照
セル２１に入る。電磁弁１４は測定時には開放の状態に
なっており、流路分岐部１２での分岐の割合はニードル
バルブ１７の絞り具合に依存する。参照セル２１からの
溶媒は配管２２を経て廃液槽２３に廃液される。
差屈折率検出器を有する液体クロマトグラフ装置の概略
図を示すものである。溶媒だめ１中の溶媒２は配管３を
経て送液ポンプ４に吸引され、配管５、試料注入口（六
方バルブ）６、配管７を経て分離カラム８に供される。
カラム８からの溶出液は配管９を経て示差屈折率検出器
の試料セル１０に入り、配管１１を経て流路分岐部１２
で２流路に分岐される。 流路分岐部１２で分岐された
溶媒の一方は、配管１３、電磁弁１４、配管１５を経て
廃液槽２３に廃液される。他方の流路に分岐された溶媒
は、配管１６、ニードルバルブ１７、配管１８、攪拌チ
ャンバー１９、配管２０を経て示差屈折率検出器の参照
セル２１に入る。電磁弁１４は測定時には開放の状態に
なっており、流路分岐部１２での分岐の割合はニードル
バルブ１７の絞り具合に依存する。参照セル２１からの
溶媒は配管２２を経て廃液槽２３に廃液される。
【００２５】試料注入口６から注入された試料は分離カ
ラム８で各成分に分離され、示差屈折率検出器の試料セ
ル１０に導入され検出される。試料セル１０から出た成
分は配管１１を経て流路分岐部１２で一定の割合に分岐
される。例えば、９９：１の割合で分岐された場合、一
方の流路での成分濃度は試料セルで検出された時の１／
１００に希釈されることになる。この希釈された成分は
攪拌チャンバー１９にてさらに希釈、均一化され、配管
２０を経て、参照セル２１に送られる。
ラム８で各成分に分離され、示差屈折率検出器の試料セ
ル１０に導入され検出される。試料セル１０から出た成
分は配管１１を経て流路分岐部１２で一定の割合に分岐
される。例えば、９９：１の割合で分岐された場合、一
方の流路での成分濃度は試料セルで検出された時の１／
１００に希釈されることになる。この希釈された成分は
攪拌チャンバー１９にてさらに希釈、均一化され、配管
２０を経て、参照セル２１に送られる。
【００２６】この結果、参照セル２１を流れる成分濃度
は流路分岐部での希釈と攪拌チャンバーでの希釈によ
り、通常測定される試料濃度における参照溶媒として使
用するに際して悪影響を与えない濃度にすることができ
る。また、測定対象成分濃度に較べて非測定対象成分濃
度が高い場合には、当然参照セル側で非対象成分に起因
する濃度勾配が発生し、クロマトグラム上においてドリ
フトとして観測される恐れがあるが、ニードルバルブ１
７を絞り込み、流路分岐部１２から攪拌チャンバー側に
分流する溶媒量を減ずることによりドリフトを低減させ
ることが可能となる。
は流路分岐部での希釈と攪拌チャンバーでの希釈によ
り、通常測定される試料濃度における参照溶媒として使
用するに際して悪影響を与えない濃度にすることができ
る。また、測定対象成分濃度に較べて非測定対象成分濃
度が高い場合には、当然参照セル側で非対象成分に起因
する濃度勾配が発生し、クロマトグラム上においてドリ
フトとして観測される恐れがあるが、ニードルバルブ１
７を絞り込み、流路分岐部１２から攪拌チャンバー側に
分流する溶媒量を減ずることによりドリフトを低減させ
ることが可能となる。
【００２７】電磁バルブ１４は、溶媒交換用に設けたも
ので、電磁バルブ１４を閉じ、ニードルバルブ１７を開
放することにより、送液ポンプ４からの溶媒すべてが攪
拌チャンバー１９、参照セル２１に流れ込むため、溶媒
交換を容易に行うことができる。
ので、電磁バルブ１４を閉じ、ニードルバルブ１７を開
放することにより、送液ポンプ４からの溶媒すべてが攪
拌チャンバー１９、参照セル２１に流れ込むため、溶媒
交換を容易に行うことができる。
【００２８】図２及び図３は、ＴＨＦ溶媒を１．０ml／
分の流速で流した時の示差屈折率検出器の出力を記録し
たものであり、図２は試料セルと参照セルを直接接続し
た場合の出録記録を、図３は本発明の示差屈折率検出器
による出力記録である。図２及び図３から、本発明の流
路により安定したベースラインが得られていることがわ
かる。
分の流速で流した時の示差屈折率検出器の出力を記録し
たものであり、図２は試料セルと参照セルを直接接続し
た場合の出録記録を、図３は本発明の示差屈折率検出器
による出力記録である。図２及び図３から、本発明の流
路により安定したベースラインが得られていることがわ
かる。
【００２９】図４及び５は、液体クロマトグラフ装置に
示差屈折率検出器を組み込み測定した標準ポリスチレン
のクロマトグラムを示すものであり、図４は試料セルと
参照セルを直接接続した場合のクロマトグラムを、図５
は本発明の示差屈折率検出器によるクロマトグラムであ
る。図４及び５から、試料セルと参照セルを直接接続し
ただけでは測定に適したクロマトグラムが得られないこ
とがわかる。
示差屈折率検出器を組み込み測定した標準ポリスチレン
のクロマトグラムを示すものであり、図４は試料セルと
参照セルを直接接続した場合のクロマトグラムを、図５
は本発明の示差屈折率検出器によるクロマトグラムであ
る。図４及び５から、試料セルと参照セルを直接接続し
ただけでは測定に適したクロマトグラムが得られないこ
とがわかる。
【００３０】本発明において、０．００１％濃度の標準
ポリスチレン５０μｌを繰り返し注入した際の測定結果
は重量平均分子量の再現性でＣＶ値で０．５％前後、ベ
ースラインドリフトで５×１０-7ＲＩＵ／ｈ程度が得ら
れ、２台の送液ポンプを用いた構成と同等の測定安定性
が得られた。
ポリスチレン５０μｌを繰り返し注入した際の測定結果
は重量平均分子量の再現性でＣＶ値で０．５％前後、ベ
ースラインドリフトで５×１０-7ＲＩＵ／ｈ程度が得ら
れ、２台の送液ポンプを用いた構成と同等の測定安定性
が得られた。
【００３１】
【発明の効果】本発明によれば、試料セルでは測定に供
した試料のすべてがカラムで分離された分離能を保ちな
がら通過するが、参照セルでは検出に影響を及ぼさな
い、同一液性の溶媒により希釈された試料成分が通過す
ることになる。従来方法のように別のカラムもしくは分
岐を通過した液性を参照セルに導く場合、カラムまたは
分岐等の問題で同一の液性にならないことが経験的に認
識されているが、本発明では、この問題が回避できるば
かりでなく、試料セルと参照セルを直列に接続した構成
でも、２台のポンプで試料セル、参照セルにそれぞれ溶
媒を送液するのと同等の安定性が得られるため、安価な
装置構成が可能となる。また、参照セルに別途溶媒を送
液する必要がないので溶媒消費量が抑えられる。
した試料のすべてがカラムで分離された分離能を保ちな
がら通過するが、参照セルでは検出に影響を及ぼさな
い、同一液性の溶媒により希釈された試料成分が通過す
ることになる。従来方法のように別のカラムもしくは分
岐を通過した液性を参照セルに導く場合、カラムまたは
分岐等の問題で同一の液性にならないことが経験的に認
識されているが、本発明では、この問題が回避できるば
かりでなく、試料セルと参照セルを直列に接続した構成
でも、２台のポンプで試料セル、参照セルにそれぞれ溶
媒を送液するのと同等の安定性が得られるため、安価な
装置構成が可能となる。また、参照セルに別途溶媒を送
液する必要がないので溶媒消費量が抑えられる。
【図１】図１は、本発明による液体クロマトグラフ用示
差屈折率検出器を示す図である。
差屈折率検出器を示す図である。
【図２】図２は、試料セルと参照セルを直列に接続した
だけの時のベースライン信号の様子を示す図である。
だけの時のベースライン信号の様子を示す図である。
【図３】図３は、図１に示した示差屈折率検出器でのベ
ースライン信号の様子を示す図である。
ースライン信号の様子を示す図である。
【図４】図４は、試料セルと参照セルを直列に接続して
測定した標準ポリスチレンのクロマトグラムを示す図で
ある。
測定した標準ポリスチレンのクロマトグラムを示す図で
ある。
【図５】図５は、図１に示した示差屈折率検出器により
測定した標準ポリスチレンのクロマトグラムを示す図で
ある。
測定した標準ポリスチレンのクロマトグラムを示す図で
ある。
１溶媒だめ ２溶媒 ３配管 ４送液ポンプ ５配管 ６試料注入口 ７配管 ８分離カラム ９配管 １０試料セル １１配管 １２流路分岐部 １３配管 １４電磁弁 １５配管 １６配管 １７ニードルバルブ １８配管 １９攪拌チャンバー ２０配管 ２１参照セル ２２配管 ２３廃液槽
Claims (4)
- 【請求項１】試料セルと参照セルの屈折率差の変化を検
知する示差屈折率検出器において、試料セルからの溶出
液を希釈し、参照溶液として利用するために試料セルと
参照セルの間に少なくとも試料セル容積の１０倍以上の
容積を有する攪拌チャンバーを挿入した液体クロマトグ
ラフ用示差屈折率検出器。 - 【請求項２】試料セルと参照セル内の圧力差を同一にす
るための分岐流路、空気ダンパーを有する請求項１の液
体クロマトグラフ用示差屈折率検出器。 - 【請求項３】攪拌チャンバー内の温度を溶媒だめまたは
カラム恒温槽の温度と一致させるための温度調節機構を
有する請求項１の液体クロマトグラフ用示差屈折率検出
器。 - 【請求項４】攪拌チャンバー内溶液容積が試料セル容積
の１００倍以上であることを特徴とする請求項１の液体
クロマトグラフ用示差屈折率検出器。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17731097A JP3785469B2 (ja) | 1997-07-02 | 1997-07-02 | 液体クロマトグラフ用示差屈折率検出器 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP17731097A JP3785469B2 (ja) | 1997-07-02 | 1997-07-02 | 液体クロマトグラフ用示差屈折率検出器 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH1123555A true JPH1123555A (ja) | 1999-01-29 |
| JP3785469B2 JP3785469B2 (ja) | 2006-06-14 |
Family
ID=16028756
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP17731097A Expired - Fee Related JP3785469B2 (ja) | 1997-07-02 | 1997-07-02 | 液体クロマトグラフ用示差屈折率検出器 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3785469B2 (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008209156A (ja) * | 2007-02-23 | 2008-09-11 | Tosoh Corp | Ｒｉ背圧の変化防止方法 |
| WO2015118668A1 (ja) * | 2014-02-07 | 2015-08-13 | 株式会社島津製作所 | 示差屈折率計を用いた測定方法、その測定方法を使用する示差屈折率計及び液体クロマトグラフ |
-
1997
- 1997-07-02 JP JP17731097A patent/JP3785469B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008209156A (ja) * | 2007-02-23 | 2008-09-11 | Tosoh Corp | Ｒｉ背圧の変化防止方法 |
| WO2015118668A1 (ja) * | 2014-02-07 | 2015-08-13 | 株式会社島津製作所 | 示差屈折率計を用いた測定方法、その測定方法を使用する示差屈折率計及び液体クロマトグラフ |
| JP6037057B2 (ja) * | 2014-02-07 | 2016-11-30 | 株式会社島津製作所 | 示差屈折率計を用いた測定方法、その測定方法を使用する示差屈折率計及び液体クロマトグラフ |
| US10024789B2 (en) | 2014-02-07 | 2018-07-17 | Shimadzu Corporation | Measurement method using differential refractometer, differential refractometer using the measurement method, and liquid chromatograph |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3785469B2 (ja) | 2006-06-14 |
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