JPH11239609A - 血小板含有生体組織用接着剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 より高い創傷治癒促進作用を有すると共に、
より高い組織接合効果をもつ生体組織用接着剤を提供す
る。 【解決手段】 生体組織用接着剤に血小板が含有されて
いることを特徴とする血小板含有生体組織用接着剤。血
小板が自己の血小板であることを特徴とする上記の血小
板含有生体組織用接着剤。生体組織用接着剤が生分解性
材料から構成されていることを特徴とする上記の血小板
含有生体組織用接着剤。生体組織用接着剤がフィブリン
接着剤又はゼラチン系接着剤であることを特徴とする上
記の血小板含有生体組織用接着剤。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は生体組織用接着剤に
関する。

【０００２】

【従来の技術】外科手術などにおいて、皮膚、臓器、血
管などの創部の閉鎖・接合は、最も基本的な手技のひと
つであり、現在では、糸による縫合が一般的になってい
る。しかし、創部の閉鎖・接合を縫合糸を用いずに、迅
速に、適度な張力に耐えうる生物学的適合性のよい接着
剤にて行うことが考えられ、いくつかの生体組織用接着
剤が臨床的に用いられている。従来より、臨床的に使用
され、または開発されている生体組織用接着剤として
は、シアノアクリレート系接着剤、ポリウレタン系接着
剤、ゼラチン系接着剤、フィブリン接着剤などがある。

【０００３】上記シアノアクリレート系接着剤は、瞬間
接着剤として工業的にも広く使用されているが、接着剤
の適用方法としては、接合しようとする組織間に直接塗
布して接着する直接法と、組織同士を密着させた上から
布片をおいて被膜し接着する間接法とがある。しかしな
がら、シアノアクリレート系接着剤は、接着速度が速い
点や接着強度が大きい点では優れているが、硬化物が硬
すぎるため創面の止血が不完全になり易いこと、硬化し
たポリマーの加水分解生成物であるホルムアルデヒドが
毒性を有し組織の修復を阻害することなどの欠点がある
（木村 肇：日本接着学会誌、２２（２）、７７頁（１
９８６年））。このため、中枢神経や血管に直接触れる
部位には使用できず、適応箇所に制限がある。また、分
解速度が遅いため異物となって創傷治癒を妨げ易いとい
う問題もある。

【０００４】上記ポリウレタン系接着剤としては、硬化
後の接合部の柔軟性が維持されるよな弾性接着剤として
開発された反応性ウレタンプレポリマー接着剤がある。
反応性ウレタンプレポリマー接着剤は、その合成原料で
ある芳香族ジイソシアネートが生体毒性を有するという
問題がある。そのため、硬化速度の多少の遅延にもかか
わらず、無毒性のフッ素化脂肪族ジイソシアネートを用
いることが試みられている（松田 武久：生体材料、７
（１）、３２頁（１９８９年））。

【０００５】上記ゼラチン系接着剤に用いられるゼラチ
ンは、コラーゲンを加水分解して得られる蛋白質であ
り、単独でも接着作用があるが、重合剤としてホルムア
ルデヒドやグルタルアルデヒドを加えると速やかにゲル
化して収縮する。また、レゾシノールをゼラチンに添加
すると接着層を疎水化し接着強度が高まる。このゼラチ
ン系接着剤は、組織に対して有害であるホルムアルデヒ
ドを重合剤として用いるため、術野に直接、該接着剤を
塗布する場合に組織にホルムアルデヒドが触れ、生体毒
性を示すという問題がある。

【０００６】上記フィブリン接着剤は、高濃度のヒトフ
ィブリノーゲンを基材とし、フィブリノーゲンをフィブ
リンに転換する酵素であるトロンビン、フィブリンを安
定化させる因子である血液凝固第XIII因子、これらの反
応に必要なカルシウムイオンおよび生成したフィブリン
塊をプラスミンやトリプシンなどの線溶系酵素による分
解から保護して接着力を持続させるための線維素溶解活
性阻害物質であるアプロチニンが配合されている。フィ
ブリン接着剤は、使用時に、これらの物質を混合し、使
用局所でフィブリン塊を生成させるようになっている。
このフィブリン接着剤は、異物となり難く、毒性もな
く、創面の創傷治癒過程を阻害せず、むしろ促進的に働
くなどの利点も多いが、しかしながら、柔軟であるため
固定力および接着力が弱いという問題がある。また、副
作用としてフィブリン糊が細菌の培地となりうるため感
染の危険がある。また、調製時間が長いため手術時間が
長くなるという問題もある。

【０００７】このように、シアノアクリレート系接着
剤、ポリウレタン系接着剤、ゼラチン系接着剤などの生
体組織用接着剤は、生体組織に対し生体毒性を有し、組
織の創傷治癒を妨げるという問題点がある。また、フィ
ブリン接着剤は、創面の創傷治癒過程を阻害せず、むし
ろ促進的に働くが、固定力および接着力が弱いという問
題がある。現状ではより積極的に創傷治癒を促進する作
用を有する生体組織用接着剤はなく、創傷治癒を促進さ
せ、より接着力の高い生体組織用接着剤が望まれてい
る。

【０００８】近年、創傷治癒過程においても様々なサイ
トカインや細胞増殖因子が重要な役割をもっていること
が明らかとなってきた。最近では、創傷治癒促進のため
線維芽細胞増殖因子の投与などが臨床応用されている。
しかしながら、サイトカインや細胞増殖因子においては
複雑なネットワークを形成しているため、単独のサイト
カインや細胞増殖因子を生体に高容量投与することは副
作用の増大をもたらす。また、白血球や血小板、骨髄細
胞などは主要なサイトカインの産生細胞であるが、これ
らの細胞を局所に移植しても、目的とする患部に滞留せ
ず、拡散し、効果の減少と副作用の増大を引き起こす可
能性がある。細胞外マトリックスであるコラーゲン等の
投与は、高齢者等の生体の創傷治癒力が衰えている場合
には十分な治癒促進作用が発揮されない。人工皮膚にお
いても、創傷治癒の初期過程である白血球の浸潤、肉芽
形成の後では有効であるが、創傷初期からの治癒促進に
は強い効果が発揮されない。

【０００９】このように、創傷治癒においては、より強
く創傷治癒を促進する生体組織用接着剤が望まれてい
る。このような創傷治癒作用を有するものとして、特表
平７−５０５０７６号公報には、血小板因子に富む生物
接着剤が提案されている。しかしながら、これは血小板
に富む血漿を開始原料血漿として用いて、生物接着剤の
構成要素となる寒冷沈殿物を回収して生物接着剤を調製
するものであり、調製過程で血小板含有の細胞増殖因子
などが失われる、又は失活する恐れがあるという問題が
ある。

【００１０】

【発明が解決しようとする課題】本発明は上記問題点を
解決するものであり、その目的は、より高い創傷治癒促
進作用を有すると共に、より高い組織接合効果をもつ生
体組織用接着剤を提供することにある。

【００１１】

【課題を解決するための手段】血小板中には、血小板由
来成長因子（ＰＤＧＦ）、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥ
ＧＦ）、上皮成長因子（ＥＧＦ）など種々の細胞増殖因
子が含まれていることが知られており、血小板は創傷治
癒過程において、これらの因子を介して重要な役割をも
っていることが知られてきている。本発明者は、血小板
を従来の生体組織用接着剤に含有させることにより、よ
り高い創傷治癒促進作用を有すると共に、より高い組織
接合効果をもつ生体組織用接着剤が得られることを見出
し、本発明を完成させた。

【００１２】すなわち、請求項１記載の発明は、生体組
織用接着剤に血小板が含有されていることを特徴とする
血小板含有生体組織用接着剤である。

【００１３】請求項２記載の発明は、血小板が自己の血
小板であることを特徴とする請求項１記載の血小板含有
生体組織用接着剤である。

【００１４】請求項３記載の発明は、生体組織用接着剤
が生分解性材料から構成されていることを特徴とする請
求項１又は２記載の血小板含有生体組織用接着剤であ
る。

【００１５】請求項４記載の発明は、生体組織用接着剤
がフィブリン接着剤又はゼラチン系接着剤であることを
特徴とする請求項３記載の血小板含有生体組織用接着剤
である。

【００１６】以下、本発明を詳細に説明する。本発明の
血小板含有生体組織用接着剤は、生体組織用接着剤に血
小板が含有されている。上記の含有とは、例えば、生体
組織用接着剤に血小板が埋入又は付着されていることを
指す。

【００１７】本発明で用いられる生体組織用接着剤とし
ては、従来から生体組織用接着剤として使用されてきた
もののいずれも使用可能であり、特に限定されず、例え
ば、従来技術の項で詳細に説明したフィブリン接着剤、
ゼラチン系接着剤、シアノアクリレート系接着剤が挙げ
られる。特に、接着剤基材が生分解性材料である場合に
は、組織接合が進行した後も剥がすなどによる接着剤除
去の必要がないために、より組織接合にとって有用であ
り好ましい。このような接着剤基材としては、フィブリ
ン、ゼラチン（コラーゲン）、キチン、キトサンなどが
挙げられる。また、接着剤基材がフィブリン、コラーゲ
ン、キチン、キトサンなどのような場合には、それ自身
が治癒を促進する効果を発揮するため、治癒促進は相乗
的に発揮される。

【００１８】本発明で用いられる血小板としては、ヒ
ト、動物由来のものなど、特に限定されない。血小板は
公知の方法で採取、分離することができる。例えば、ク
エン酸ナトリウム採血した血液から、遠心分離法、密度
勾配液中での遠心分離法、ゲル濾過法などを用いて分離
する方法が挙げられる。また、培養されたものでもよ
い。血小板としては、特に自己の血小板、すなわち、本
発明の血小板含有生体組織用接着剤が適用される本人の
血小板が最も好ましい。自己の血小板である場合には、
移植後の血小板に対する宿主の拒絶反応もなく、安全に
創傷の治癒が促進され、組織接合が良好に促進されるか
らである。

【００１９】本発明の血小板含有生体組織用接着剤中に
含有すべき血小板の量は、特に限定されず広範囲に適宜
選択されるが、血小板含有生体組織用接着剤１ｇ中に、
好ましくは、１０³ 〜１０¹²個の範囲である。

【００２０】本発明の血小板含有生体組織用接着剤中に
は、必要に応じて、サイトカイン、細胞増殖因子、刺激
剤などを含有させてもよい。刺激剤を含有させると、血
小板が容易に活性化される。

【００２１】また、本発明の血小板含有生体組織用接着
剤において、血小板は必要に応じて、既知の人工皮膚で
用いられている線維芽細胞や表皮細胞などの細胞と混在
されて使用されてもよい。

【００２２】

【作用】本発明の血小板含有生体組織用接着剤において
は、接合部局所において血小板から種々の細胞増殖因子
などの創傷治癒促進因子が放出・産生されるので、治癒
が促進される。また、血小板が生体組織用接着剤に含有
されているため、局部での滞留性にも優れている。

【００２３】

【発明の実施の形態】実施例１ ７週齢のウイスター系ラットからクエン酸ナトリウムを
抗凝固剤として用いて心臓採血し、その血液から遠心分
離法により血小板を採取した。この血小板を１ｍｌあた
り５×１０⁷ 個の濃度でカルシウム・マグネシウム不含
リン酸緩衝液に浮遊させ、血小板浮遊液を作製した。フ
ィブリノーゲン末および血液凝固第XIII因子をアプロチ
ニン溶液に溶解したＡ液と、トロンビン末を塩化カルシ
ウム溶液に溶解したＢ液から構成されるフィブリン糊
（ヘキスト社製、商品名 ベリプラストＰ）に、上記血
小板浮遊液を以下の方法で添加することにより、血小板
含有生体組織用接着剤を得た。すなわち、上記フィブリ
ン糊のＢ液に、Ｂ液１ｍｌに対して上記血小板浮遊液が
１０μｌの割合になるように添加混合し、次いで、得ら
れた血小板添加Ｂ液と上記Ａ液を混合し、本発明の血小
板含有生体組織用接着剤とした。後述の性能評価におい
ては、この血小板含有生体組織用接着剤を調製直後に切
創に０．１ｇ塗布する方法により切創に投与した。

【００２４】実施例２ 実施例１と同様に作製した血小板浮遊液を、ゼラチン糊
（Ｅ．Ｈ．Ｓ．社（フランス）製、商品名 ＧＲＦグル
ー）の中のゼラチン・レゾルシン混合液に、ゼラチン・
レゾルシン混合液１ｍｌに対して血小板浮遊液が１０μ
ｌの割合になるように添加混合した。後述の性能評価に
おいては、この液を切創に０．１ｇ塗布し、その上にホ
ルムアルデヒド添加液を数滴滴下する方法により切創に
投与した。

【００２５】実施例３ 実施例１と同様に作製した血小板浮遊液を、シアノアク
リレート系生体組織用接着剤（三共社製、商品名 Ａｒ
ｏｎ Ａｌｐｈａ Ａ）に、シアノアクリレート系生体
組織用接着剤１ｍｌに対して血小板浮遊液が１０μｌの
割合になるように混合し、本発明の血小板含有生体組織
用接着剤とした。後述の性能評価においては、この血小
板含有生体組織用接着剤を調製直後に切創に０．１ｇ塗
布する方法により切創に投与した。

【００２６】比較例１ フィブリン糊（ヘキスト社製、商品名 ベリプラスト
Ｐ）のＡ液とＢ液を混合し、生体組織用接着剤とした。
後述の性能評価においては、この生体組織用接着剤を調
製直後に切創に０．１ｇ塗布する方法により切創に投与
した。

【００２７】比較例２ 生体組織用接着剤としてゼラチン糊（Ｅ．Ｈ．Ｓ．社
（フランス）製、商品名ＧＲＦグルー）を用いた。後述
の性能評価においては、この生体組織用接着剤液を切創
に０．１ｇ塗布し、その上にホルムアルデヒド添加液を
数滴滴下する方法により切創に投与した。

【００２８】比較例３ 生体組織用接着剤としてシアノアクリレート系生体組織
用接着剤（三共社製、商品名 Ａｒｏｎ Ａｌｐｈａ
Ａ）を用いた。後述の性能評価においては、この生体組
織用接着剤を切創に０．１ｇ塗布する方法により切創に
投与した。

【００２９】性能評価 実施例１〜３の血小板含有生体組織用接着剤および比較
例１〜３の生体組織用接着剤について、以下の方法によ
り性能評価した。

【００３０】１０週齢のウイスター系ラットの背部を毛
刈りし、背部正中線に垂直な方向に背部皮膚にメスで長
さ２ｃｍの切創を作成した。この切創部を等間隔で３ケ
所で縫合した後、実施例１〜３および比較例１〜３の接
着剤を前記のようにして投与処置した。処置の３日後に
ラットを犠牲死させ、抜糸後、切創中央部から左右に１
ｃｍ幅の短冊状の皮膚切片を切り取った。レオメーター
を用いて切創部の耐抗張力（ｇ／ｃｍ）を測定した。そ
れぞれの実施例および比較例について５匹のラットを用
いて行い、耐抗張力（ｇ／ｃｍ）はこれらラットについ
て得られた値の平均値を取った。結果を表１に示した。

【００３１】

【表１】

【００３２】表１より、実施例１の血小板含有生体組織
用接着剤を投与した群では、比較例１の生体組織用接着
剤を投与した群よりも、耐抗張力が大きく上昇したこと
が分かる。実施例２と比較例２、および実施例３と比較
例３の関係においても同じことが言える。

【００３３】

【発明の効果】本発明の請求項１記載の発明の構成は、
上記の通りであり、本発明によれば、より高い創傷治癒
促進作用を有すると共に、より高い組織接合効果をもつ
生体組織用接着剤が提供される。本発明の請求項２記載
の発明の構成は、上記の通りであり、本発明によれば、
移植後の血小板に対する宿主の拒絶反応がなく、より一
層高い創傷治癒促進作用を有すると共に、より一層高い
組織接合効果をもつ生体組織用接着剤が提供される。

【００３４】本発明の請求項３記載の発明の構成は、上
記の通りであり、本発明によれば、組織接合が進行した
後も剥がすなどによる接着剤除去の必要がないために、
組織接合効果がより一層高い請求項１又は２記載の血小
板含有生体組織用接着剤が提供される。

【００３５】本発明の請求項４記載の発明の構成は、生
体組織用接着剤がフィブリン接着剤又はゼラチン系接着
剤である請求項３記載の血小板含有生体組織用接着剤で
あるので、本発明によれば組織接合効果がより一層高い
血小板含有生体組織用接着剤が提供される。

【００３６】また、請求項１〜４記載の発明は、その高
い創傷治癒促進効果からみて、従来の生体組織用接着剤
に見られた毒性も緩和しているものと推定される。

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 生体組織用接着剤に血小板が含有されて
   いることを特徴とする血小板含有生体組織用接着剤。
2. 【請求項２】 血小板が自己の血小板であることを特徴
   とする請求項１記載の血小板含有生体組織用接着剤。
3. 【請求項３】 生体組織用接着剤が生分解性材料から構
   成されていることを特徴とする請求項１又は２記載の血
   小板含有生体組織用接着剤。
4. 【請求項４】 生体組織用接着剤がフィブリン接着剤又
   はゼラチン系接着剤であることを特徴とする請求項３記
   載の血小板含有生体組織用接着剤。