JPH11240896A - ［（ｓ）−１−［（ｓ）−２−［（トランス−４−アミノシクロヘキシルメチル）カルバモイル］ピロリジン−１−カルボニル］−２−イソプロピルチオ−２−メチルプロピル］カルバミックアシド プロピルエステルの１／２硫酸塩 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 （修正有） 【課題】 吸湿性がなく、かつ安定な結晶を与える
［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（トランス−４−アミ
ノシクロヘキシルメチル）カルバモイル］ピロリジン−
１−カルボニル］−２−イソプロピルチオ−２−メチル
プロピル］カルバミックアシド プロピルエステルが望
まれていた。 【解決手段】 式Ｉの［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−
［（トランス−４−アミノシクロヘキシルメチル）カル
バモイル］ピロリジン−１−カルボニル］−２−イソプ
ロピルチオ−２−メチルプロピル］カルバミックアシド
プロピルエステルの１／２硫酸塩。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、［（Ｓ）−１−
［（Ｓ）−２−［（トランス−４−アミノシクロヘキシ
ルメチル）カルバモイル］ピロリジン−１−カルボニ
ル］−２−イソプロピルチオ−２−メチルプロピル］カ
ルバミックアシド プロピルエステルの１／２硫酸塩に
関する。

【０００２】

【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】
［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（トランス−４−アミ
ノシクロヘキシルメチル）カルバモイル］ピロリジン−
１−カルボニル］−２−イソプロピルチオ−２−メチル
プロピル］カルバミックアシド プロピルエステルは塩
酸塩の形態で、ＷＯ９７／０５１０８号の実施例１とし
て開示されている。この化合物は、蛋白分解酵素、特に
トロンビンに対し強力な阻害作用を有すため、例えば、
血栓症等の治療薬として有用である。

【０００３】しかしながら、［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−
２−［（トランス−４−アミノシクロヘキシルメチル）
カルバモイル］ピロリジン−１−カルボニル］−２−イ
ソプロピルチオ−２−メチルプロピル］カルバミックア
シド プロピルエステルの塩酸塩は、結晶化しないた
め、その製造において充分な純度に向上させるには、大
量合成が困難なカラムクロマトグラフィーによらなけれ
ばならない。

【０００４】さらに、［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−
［（トランス−４−アミノシクロヘキシルメチル）カル
バモイル］ピロリジン−１−カルボニル］−２−イソプ
ロピルチオ−２−メチルプロピル］カルバミックアシド
プロピルエステルの塩酸塩は高い吸湿性があり、この
形態を含有する組成物から安定な錠剤等を製造するには
問題がある。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは上記の問題
を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、本発明を完成する
に至った。すなわち、本発明の要旨は下記式（Ｉ）

【０００６】

【化２】

【０００７】で表される［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−
［（トランス−４−アミノシクロヘキシルメチル）カル
バモイル］ピロリジン−１−カルボニル］−２−イソプ
ロピルチオ−２−メチルプロピル］カルバミックアシド
プロピルエステルの１／２硫酸塩、その水和物もしく
は溶媒和物に存する。本発明化合物の好ましい実施形態
としては上記化合物のうち、１／２硫酸塩が挙げられ
る。

【０００８】また、本発明の別の実施形態としては、上
記式（Ｉ）の化合物および薬学的に許容される担体を含
有してなる医薬組成物；上記式（Ｉ）の化合物を有効成
分とする蛋白分解酵素阻害剤；上記式（Ｉ）の化合物を
有効成分とする抗凝固剤が提供される。

【０００９】

【発明の実施の形態】本発明化合物における結晶形態に
は複数の形態があり（それぞれを、Ａ形結晶、Ｂ形結晶
・・・等、と命名する）、それぞれ単一または複数の結
晶形態を医薬組成物として使用できるが、好ましくは単
一の結晶として製造可能なＡ形結晶（実施例１の物質）
の使用である。

【００１０】上記式（Ｉ）で表される化合物は水和物を
形成する場合もあり、また、メタノール、エタノール、
イソプロパノール、アセトン、酢酸エチル、塩化メチレ
ン等と溶媒和物を形成する場合もあるが、これらも本発
明の範囲に含まれる。本発明化合物を医薬として用いる
場合、それ自体を用いてもよいが、通常は有効成分であ
る本発明化合物と製薬上許容される添加物とを含む医薬
組成物の形態で用いることが好ましい。有効成分の製薬
上許容される添加物に対する割合は、例えば、１重量％
から９０重量％の間で変動することができる。例えば、
本発明化合物を含む医薬組成物として、顆粒剤、細粒
剤、散剤、錠剤、硬カプセル剤、軟カプセル剤、シロッ
プ剤、乳剤、懸濁剤または液剤等の経口用組成物を投与
してもよいし、注射剤として静脈内投与、筋肉内投与ま
たは皮下投与してもよい。また、坐剤として用いること
もできる。また、注射用の粉末にして用時調製して使用
してもよい。

【００１１】製薬上許容される添加物として、経口、経
腸、非経口に適した医薬用の有機または無機の、固体ま
たは液体の担体若しくは希釈剤を用いることができる。
固形の医薬組成物を製造する際に用いられる賦形剤とし
ては、例えば乳糖、蔗糖、デンプン、タルク、セルロー
ス、デキストリン、カオリン、炭酸カルシウム等が用い
られる。経口投与のための液体組成物、即ち、乳剤、シ
ロップ剤、懸濁剤、液剤等は、一般的に用いられる不活
性な希釈剤、例えば水または植物油等を含んでいてもよ
い。この液体組成物は、不活性な希釈剤以外に補助剤、
例えば湿潤剤、懸濁補助剤、甘味剤、芳香剤、着色剤ま
たは保存剤等を含むことができる。液体組成物にしてゼ
ラチンのような吸収されうる物質のカプセル中に含ませ
てもよい。非経口投与の医薬組成物、即ち、注射剤、坐
剤等の製造に用いられる溶剤または懸濁化剤としては、
例えば水、プロピレングリコール、ポリエチレングリコ
ール、ベンジルアルコール、オレイン酸エチル、レシチ
ン等が挙げられる。坐剤に用いられる基剤としては、例
えばカカオ脂、乳化カカオ脂、ラウリン脂、ウィテップ
ゾール等が挙げられる。医薬組成物の調製方法は常法に
よればよい。

【００１２】臨床投与量は、経口投与により用いられる
場合には、成人に対し本発明の化合物として、一般に
は、１日量０．０１〜１０００ｍｇ、好ましくは１０〜
１０００ｍｇであるが、年令、病態、症状により適宜増
減することが更に好ましい。前記１日量の本発明薬剤
は、１日に１回、または適当な間隔をおいて１日に２若
しくは３回に分けて投与してもよいし、間欠投与しても
よい。

【００１３】また、注射剤として用いる場合には、成人
に対し本発明の化合物として、１回量０．００１〜１０
０ｍｇを連続投与または間欠投与することが望ましい。
以下、実施例により本発明を説明するが、本発明はその
要旨を越えない限り、以下の実施例に限定されるもので
ない。なお、物性値におけるＮＭＲは核磁気共鳴スペク
トルを表し、数字は通常化学シフトを表示するのに用い
られるδ（デルタ）値であり単位はｐｐｍである。内部
標準としてはテトラメチルシランを用いた。なお、δ値
の次に表示したカッコ内の記号はｓが単一線、ｄが二重
線、ｔが三重線、ｍが多重線、ｂｓが幅広い吸収ピーク
を意味し、それに続く数字は水素原子の数である。

【００１４】また、ＩＲは赤外吸収スペクトルを表し、
臭化カリウム錠剤として測定した。数字は波数を表し、
単位はｃｍ^-1である。吸収ピークは主なもののみを示し
た。

【００１５】実施例１ ビス［［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（トランス−４
−アミノシクロヘキシルメチル）カルバモイル］ピロリ
ジン−１−カルボニル］−２−イソプロピルチオ−２−
メチルプロピル］カルバミックアシド プロピルエステ
ル］スルフェイトの合成

【００１６】ＷＯ９７／０５１０８号の実施例１に記載
の方法にて合成した［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−
［（トランス−４−ｔ−ブトキシカルボニルアミノシク
ロヘキシルメチル）カルバモイル］ピロリジン−１−カ
ルボニル］−２−イソプロピルチオ−２−メチルプロピ
ル］カルバミックアシド プロピルエステル２００ｇに
４規定塩化水素−酢酸エチル溶液１２００ｍｌを加えて
０℃で１時間攪拌した。この溶液をロータリーエバポレ
ーターで濃縮し、得られた残渣にジエチルエーテル１８
００ｍｌを加えて室温下攪拌した。２４時間後固体をろ
取し、これをジクロロメタン１０００ｍｌに溶解し、水
酸化カリウム２５ｇを水４００ｍｌに溶かした溶液を加
えた。有機層を分離し、水層をジクロロメタンで２回抽
出した後、有機層を硫酸マグネシウムで乾燥した。ろ過
して得られた溶液をロータリーエバポレーターで濃縮
後、室温下約５ｍｍＨｇで減圧乾燥して［（Ｓ）−１−
［（Ｓ）−２−［（トランス−４−アミノシクロヘキシ
ルメチル）カルバモイル］ピロリジン−１−カルボニ
ル］−２−イソプロピルチオ−２−メチルプロピル］カ
ルバミックアシド プロピルエステル１６４ｇを得た。

【００１７】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：０．８
６−１．１４（ｍ，７Ｈ），１．２５（ｄ，Ｊ＝６．９
Ｈｚ，３Ｈ），１．３２（ｄ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，３
Ｈ），１．４０（ｓ，３Ｈ），１．４７（ｓ，３Ｈ），
１．６２（ｍ，６Ｈ），１．６９（ｍ，２Ｈ），１．８
８（ｍ，２Ｈ），２．０３（ｍ，２Ｈ），２．４０
（ｍ，１Ｈ），２．６１（ｍ，１Ｈ），２．９０−３．
１５（ｍ，３Ｈ），３．７５（ｍ，１Ｈ），３．９７
（ｍ，１Ｈ），４．０４（ｍ，１Ｈ），４．３７（ｄ，
Ｊ＝６．６Ｈｚ，１Ｈ），４．５９（ｄ，Ｊ＝８．１Ｈ
ｚ，１Ｈ），５．５７（ｂｓ，１Ｈ），７．１０（ｂ
ｓ，１Ｈ）． ＩＲ：３３４７，２９６７，１６９０，１６３８，１５
２８，１４４７，１２４２，１０６１．

【００１８】次いで［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−
［（トランス−４−アミノシクロヘキシルメチル）カル
バモイル］ピロリジン−１−カルボニル］−２−イソプ
ロピルチオ−２−メチルプロピル］カルバミックアシド
プロピルエステル１６４ｇをエタノール２０００ｍｌ
に溶かし、硫酸１５．８ｇを水８０ｍｌに溶かした溶液
を０〜５℃で滴下した。この溶液をロータリーエバポレ
ーターで濃縮し、約５ｍｍＨｇ、室温にて乾燥させた。
この固体にエタノール６００ｍｌおよびヘキサン１００
０ｍｌを加え、室温にて６時間攪拌した後、ろ取し表題
化合物を１４６ｇ得た。

【００１９】融点：２３８〜２４０℃¹ Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：０．８０−０．９４
（ｍ，５Ｈ），１．１０−１．３２（ｍ，１２Ｈ），
１．３６（ｓ，３Ｈ），１．５５（ｍ，２Ｈ），１．６
８（ｍ，２Ｈ），１．７８−２．０６（ｍ，６Ｈ），
２．７４（ｍ，１Ｈ），２．８６（ｍ，２Ｈ），２．９
８（ｍ，１Ｈ），３．７１（ｍ，２Ｈ），３．９２−
４．００（ｍ，２Ｈ），４．２２（ｄ，Ｊ＝７．９Ｈ
ｚ，１Ｈ），４．４５（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），
７．３６（ｄ，Ｊ＝８．５Ｈｚ，１Ｈ），７．５０（ｂ
ｓ，１Ｈ）． 元素分析結果 実測値：Ｃ ５３．８、Ｈ ８．６０、Ｎ １０．５０、Ｓ ８．９０ 理論値：Ｃ ５４．０、Ｈ ８．５９、Ｎ １０．４９、Ｓ ９．０１ ＩＲデータならびに粉末Ｘ線データを各々図１、図２に
示す。

【００２０】実施例２ ビス［［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（トランス−４
−アミノシクロヘキシルメチル）カルバモイル］ピロリ
ジン−１−カルボニル］−２−イソプロピルチオ−２−
メチルプロピル］カルバミックアシド プロピルエステ
ル］スルフェイトの合成

【００２１】ＷＯ９７／０５１０８号の実施例１に記載
の方法にて合成した［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−（ト
ランス−４−ｔ−ブトキシカルボニルアミノシクロヘキ
シルメチルカルバモイル）ピロリジン−１−カルボニ
ル］−２−イソプロピルチオ−２−メチルプロピル］カ
ルバミックアシド プロピルエステル１０ｇをジクロロ
メタン７３ｍｌに溶解し、濃塩酸１０ｍｌを加えて室温
で４時間攪拌した。ここに塩化ナトリウム６．６ｇおよ
び水酸化ナトリウム５．８ｇを水６６ｍｌに溶かした溶
液を加えて室温下１時間攪拌した。有機層を分離し、水
層をジクロロメタンで１回抽出後、水で洗浄し、硫酸ナ
トリウムで乾燥し、ろ過して得られた溶液をロータリー
エバポレーターで約３０ｍｌまで濃縮した。ここに１規
定硫酸１７．１ｍｌおよびイソプロパノール１００ｍｌ
を加えてろ過し、得られた溶液を約４０ｍｌまで濃縮し
た。ここにイソプロパノール１１０ｍｌを加えた後４０
ｍｌまで濃縮し、さらにこの操作を１回繰り返した。得
られた溶液にイソプロパノール１１０ｍｌを加えて２時
間加熱還流し、室温まで冷却した後さらに２時間攪拌し
た。固体をろ取し、６０℃、約５ｍｍＨｇで減圧乾燥し
て表題化合物８．３ｇを得た。

【００２２】融点：２４５〜２４６℃（分解） 元素分析結果 実測値：Ｃ ５３．９５、Ｈ ８．７２、Ｎ １０．５３、Ｓ ８．９８ 理論値：Ｃ ５４．０、 Ｈ ８．５９、Ｎ １０．４９、Ｓ ９．０１ 粉末Ｘ線データを図３に示す。

【００２３】試験例１ 吸湿性試験 吸湿性データは、飽和酢酸ナトリウム水溶液の入ったデ
シケーター中に被検物質の入った容器を室温にて放置
し、被検物質の性状の変化及び重量変化率を観察するこ
とで評価した。実施例１で得た本発明化合物を上記条件
下で３日間放置したところ、化合物の性状は白色粉体の
まま一定であり、重量変化率は±０％であった。その後
上記条件下でさらに４日間放置したが、性状は白色粉体
で変わらず、重量変化率は±０％であった。

【００２４】実施例２および下記に示す参考例３、４、
１２および１３で得た物質について同様の吸湿性試験を
行った。結果を表−１に示す。

【００２５】

【表１】

【００２６】参考例１ ［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（トランス−４−アミ
ノシクロヘキシルメチル）カルバモイル］ピロリジン−
１−カルボニル］−２−イソプロピルチオ−２−メチル
プロピル］カルバミックアシド プロピルエステル 塩
酸塩の合成 実施例１中で得た［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（ト
ランス−４−アミノシクロヘキシルメチル）カルバモイ
ル］ピロリジン−１−カルボニル］−２−イソプロピル
チオ−２−メチルプロピル］カルバミックアシド プロ
ピルエステル０．４９ｇをエタノール５ｍｌに溶解し、
ここに１規定塩酸１．０ｍｌを加えて室温下３０分撹拌
した。減圧下溶媒を留去した後トルエン５ｍｌを加えて
減圧下これを留去した。この残渣を室温下約１０ｍｍＨ
ｇで減圧乾燥し、０．５４ｇの白色非晶状物質を得た。

【００２７】試験例２ 塩酸塩の結晶化（１） 参考例１で得た化合物０．２０ｇをエタノール１ｍｌに
溶解し、ここにヘキサン３ｍｌを加えて室温下撹拌した
が、１日後、結晶は得られなかった。

【００２８】試験例３ 塩酸塩の結晶化（２） 参考例１で得た化合物０．２０ｇをテトラヒドロフラン
２ｍｌに溶解し、ここにヘキサン１ｍｌを滴下したとこ
ろ、溶液はわずかに白濁し飽和状態となった。室温下撹
拌し、析出した物質を濾取し６０℃、約１０ｍｍＨｇで
減圧乾燥して、０．１９ｇの白色粉体を得た。

【００２９】試験例４ 塩酸塩の結晶化（３） 参考例１で得た化合物０．２０ｇを塩化メチレン１ｍｌ
に溶解し、ここにヘキサン２ｍｌを滴下したところ、溶
液はわずかに白濁し飽和状態となった。室温下撹拌し、
析出した物質を濾取し６０℃、約１０ｍｍＨｇで減圧乾
燥して、０．１５ｇの白色粉体を得た。

【００３０】参考例２ ［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（トランス−４−アミ
ノシクロヘキシルメチル）カルバモイル］ピロリジン−
１−カルボニル］−２−イソプロピルチオ−２−メチル
プロピル］カルバミックアシド プロピルエステル 硝
酸塩の合成 実施例１中で得た［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（ト
ランス−４−アミノシクロヘキシルメチル）カルバモイ
ル］ピロリジン−１−カルボニル］−２−イソプロピル
チオ−２−メチルプロピル］カルバミックアシド プロ
ピルエステル０．４９ｇをエタノール５ｍｌに溶解し、
ここに１規定硝酸１．０ｍｌを加えて室温下３０分撹拌
した。減圧下溶媒を留去した後トルエン５ｍｌを加えて
減圧下これを留去した。この残渣を室温下約１０ｍｍＨ
ｇで減圧乾燥し、０．５６ｇの白色非晶状物質を得た。

【００３１】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：０．８
２−１．０４（ｍ，５Ｈ），１．１０−１．３５（ｍ，
１２Ｈ），１．３７（ｓ，３Ｈ），１．５７（ｍ，２
Ｈ），１．７０（ｍ，２Ｈ），１．７８−２．１０
（ｍ，６Ｈ），２．７４（ｍ，１Ｈ），２．９０（ｍ，
２Ｈ），３．００（ｍ，１Ｈ），３．７７（ｍ，２
Ｈ），３．９０（ｍ，１Ｈ），３．９５（ｍ，１Ｈ），
４．２２（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），４．４５
（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝
８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５７（ｂｓ，１Ｈ）． ＩＲ：３３４７，２９６７，１６９２，１６４０，１５
４１，１４３９，１３８３，１２４２，１０６１．

【００３２】試験例５ 硝酸塩の結晶化（１） 参考例２で得た化合物０．２０ｇをエタノール１ｍｌに
溶解し、ここにヘキサン３ｍｌを加えて室温下撹拌した
が、１日後、結晶は得られなかった。

【００３３】試験例６ 硝酸塩の結晶化（２） 参考例２で得た化合物０．２０ｇを塩化メチレン１ｍｌ
に溶解し、ここにヘキサン１．５ｍｌを滴下したところ
溶液はわずかに白濁し飽和状態となった。これを室温下
１日間撹拌したところ、油状物質が遊離し、結晶は得ら
れなかった。

【００３４】参考例３ ［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（トランス−４−アミ
ノシクロヘキシルメチル）カルバモイル］ピロリジン−
１−カルボニル］−２−イソプロピルチオ−２−メチル
プロピル］カルバミックアシド プロピルエステル 酢
酸塩の合成 実施例１中で得た［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（ト
ランス−４−アミノシクロヘキシルメチル）カルバモイ
ル］ピロリジン−１−カルボニル］−２−イソプロピル
チオ−２−メチルプロピル］カルバミックアシド プロ
ピルエステル０．４９ｇを塩化メチレン５ｍｌに溶解
し、ここに酢酸６３ｍｇを加えて室温下３０分撹拌し
た。減圧下溶媒を留去し、この残渣を室温下約１０ｍｍ
Ｈｇで減圧乾燥し、０．５５ｇの白色非晶状物質を得
た。

【００３５】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：０．７
９−０．９６（ｍ，５Ｈ），１．０２−１．３２（ｍ，
１２Ｈ），１．３７（ｓ，３Ｈ），１．５０−１．７２
（ｍ，４Ｈ），１．７６（ｓ，２Ｈ），１．７８−２．
０８（ｍ，６Ｈ），２．６２（ｍ，１Ｈ），２．８５
（ｍ，２Ｈ），３．００（ｍ，１Ｈ），３．７２（ｍ，
２Ｈ），３．８４−４．０１（ｍ，２Ｈ），４．２２
（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），４．４５（ｄ，Ｊ＝
８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３６（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，
１Ｈ），７．５５（ｂｓ，１Ｈ）． ＩＲ：３３２２，２９６５，１６４２，１５４９，１２
４２，１０６１．

【００３６】試験例７ 酢酸塩の結晶化（１） 参考例３で得た化合物０．２０ｇをエタノール１ｍｌに
溶解し、ここにヘキサン３ｍｌを加えて室温下撹拌した
が、１日後、結晶は得られなかった。

【００３７】試験例８ 酢酸塩の結晶化（２） 参考例３で得た化合物０．２０ｇを塩化メチレン１ｍｌ
に溶解し、ここにヘキサン２ｍｌを滴下したところ溶液
はわずかに白濁し飽和状態となった。これを室温下１日
間撹拌したところ、油状物質が遊離し、結晶は得られな
かった。

【００３８】参考例４ ［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（トランス−４−アミ
ノシクロヘキシルメチル）カルバモイル］ピロリジン−
１−カルボニル］−２−イソプロピルチオ−２−メチル
プロピル］カルバミックアシド プロピルエステル 硫
酸塩の合成 実施例１中で得た［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（ト
ランス−４−アミノシクロヘキシルメチル）カルバモイ
ル］ピロリジン−１−カルボニル］−２−イソプロピル
チオ−２−メチルプロピル］カルバミックアシド プロ
ピルエステル０．４９ｇをエタノール５ｍｌに溶解し、
ここに１規定硫酸２ｍｌを加えて室温下３０分撹拌し
た。減圧下溶媒を留去した後トルエン５ｍｌを加えて減
圧下これを留去した。この残渣を室温下約１０ｍｍＨｇ
で減圧乾燥し、０．６０ｇの白色非晶状物質を得た。

【００３９】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：０．８
４−１．０４（ｍ，５Ｈ），１．１２−１．３４（ｍ，
１２Ｈ），１．３８（ｓ，３Ｈ），１．５８（ｍ，２
Ｈ），１．７０（ｍ，２Ｈ），１．８０−２．０６
（ｍ，６Ｈ），２．８９（ｍ，３Ｈ），３．００（ｍ，
１Ｈ），３．７７（ｍ，２Ｈ），３．９１（ｍ，１
Ｈ），３．９６（ｍ，１Ｈ），４．２２（ｄ，Ｊ＝６．
８Ｈｚ，１Ｈ），４．４５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１
Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，１Ｈ），７．６
０（ｂｓ，１Ｈ），７．７２（ｂｓ，３Ｈ）． ＩＲ：３３９９，２９６７，１６９６，１６３８，１５
２４，１４４７，１２２５，１１９２，１０４９，８８
９．

【００４０】試験例９ 硫酸塩の結晶化（１） 参考例４で得た化合物０．２０ｇをエタノール１ｍｌに
溶解し、ここにヘキサン３ｍｌを加えて室温下撹拌した
が、１日後、結晶は得られなかった。

【００４１】試験例１０ 硫酸塩の結晶化（２） 参考例４で得た硫酸塩０．２０ｇを塩化メチレン１ｍｌ
に溶解し、ここにヘキサン１．２ｍｌを滴下したところ
溶液はわずかに白濁し飽和状態となった。これを室温下
１日間撹拌したところ、油状物質が遊離し、結晶は得ら
れなかった。

【００４２】参考例５ ［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（トランス−４−アミ
ノシクロヘキシルメチル）カルバモイル］ピロリジン−
１−カルボニル］−２−イソプロピルチオ−２−メチル
プロピル］カルバミックアシド プロピルエステル ｐ
−トルエンスルホン酸塩の合成 実施例１中で得た［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（ト
ランス−４−アミノシクロヘキシルメチル）カルバモイ
ル］ピロリジン−１−カルボニル］−２−イソプロピル
チオ−２−メチルプロピル］カルバミックアシド プロ
ピルエステル０．４９ｇを塩化メチレン５ｍｌに溶解
し、ここにｐ−トルエンスルホン酸１水和物０．１９ｇ
を加えて室温下３０分撹拌した。減圧下溶媒を留去し、
室温下約１０ｍｍＨｇで減圧乾燥し、０．６６ｇの白色
非晶状物質を得た。

【００４３】¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）：０．８
２−１．０４（ｍ，５Ｈ），１．１０−１．３４（ｍ，
１２Ｈ），１．３６（ｓ，３Ｈ），１．５７（ｍ，２
Ｈ），１．７０（ｍ，２Ｈ），１．７８−２．１０
（ｍ，６Ｈ），２．２９（ｓ，３Ｈ），２．８９（ｍ，
３Ｈ），３．００（ｍ，１Ｈ），３．７７（ｍ，２
Ｈ），３．９０（ｍ，１Ｈ），３．９６（ｍ，１Ｈ），
４．２２（ｄ，Ｊ＝６．８Ｈｚ，１Ｈ），４．４５
（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１２（ｄ，Ｊ＝
８．０Ｈｚ，２Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．３Ｈｚ，
１Ｈ），７．４８（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，２Ｈ），７．
６０（ｂｓ，１Ｈ），７．７３（ｂｓ，３Ｈ）． ＩＲ：３４４５，３３４７，３０６１，２９６７，１６
７０，１６４０，１５３５，１４４９，１２１５，１１
８８，１１２５，１０３６，１０１１，６８５．

【００４４】試験例１１ ｐ−トルエンスルホン酸塩の結晶化（１） 参考例５で得たｐ−トルエンスルホン酸塩０．２０ｇを
エタノール１ｍｌに溶解し、ここにヘキサン３ｍｌを加
えて室温下撹拌したが、１日後、結晶は得られなかっ
た。

【００４５】試験例１２ ｐ−トルエンスルホン酸塩の結晶化（２） 参考例５で得た化合物０．２０ｇをテトラヒドロフラン
１ｍｌに溶解し、ここにヘキサン１ｍｌを滴下したとこ
ろ溶液はわずかに白濁し飽和状態となった。室温下撹拌
し、析出した物質を濾取し５５℃、約１０ｍｍＨｇで減
圧乾燥して、０．１８ｇの白色粉体を得た。

【００４６】試験例１３ ｐ−トルエンスルホン酸塩の結晶化（３） 参考例５で得た化合物０．２０ｇを塩化メチレン１ｍｌ
に溶解し、ここにヘキサン１．４ｍｌを滴下したところ
溶液はわずかに白濁し飽和状態となった。室温下撹拌
し、析出した物質を濾取し５５℃、約１０ｍｍＨｇで減
圧乾燥して、０．１６ｇの白色粉体を得た。

【００４７】試験例１４ 抗トロンビン活性の測定 ｉ）合成基質（Ｓ−２２３８）の加水分解抑制の測定法 Ｓ−２２３８（ｋａｂｉ社）をトリス塩酸緩衝液（ｐＨ
８．３）にて溶解し、濃度８０μＭのＳ−２２３８
０．４Ｍトリス塩酸溶液を調整する。その１７５μｌに
対して本発明化合物の水溶液５１５μｌを加え、３７℃
で１分間インキュベートした後に牛トロンビン（持田
社）４．４ユニット／ｍｌ溶液を１０μｌ添加する。３
７℃において４０５ｎｍの吸光度変化を測定することに
より基質の加水分解反応速度を求める。

【００４８】阻害剤（本発明化合物）を入れない場合の
１／２の吸光度を示す阻害剤濃度をＩ₅₀（μＭ）として
求めた。

【００４９】ii）ラット血漿の凝固抑制の測定法 本発明化合物を水または生理食塩水に溶かし全体を０．
１ｍｌとし、これにラット血漿０．１ｍｌを加えて３７
℃で３０秒間インキュベートする。これに牛トロンビン
（持田社）８ユニット／ｍｌ溶液０．１ｍｌを加えて、
３７℃で凝固時間を測定する。阻害剤（本発明化合物）
を入れない場合の凝固時間を２倍に延長する阻害剤の濃
度をＩ₅₀（ｍＭ）として求めた。

【００５０】iii)ラット経口投与時の血漿中抗トロンビ
ン活性の測定法 一晩絶食させたラットに対し、本発明化合物３０ｍｇ／
ｋｇを水溶液または懸濁液で経口ゾンデを用いて経口投
与する。１時間後および３時間後に腹部大静脈より血液
２ｍｌを採取し、その血漿中の抗トロンビン活性を前記
ii）の方法を用いて測定する。阻害剤（本発明化合物）
を投与しないラット血液と比較し、凝固時間の延長効果
をコントロールを１とした数値でトロンビン時間延長率
として表した。

【００５１】試験例３ 抗トリプシン活性の測定 i ）合成基質（Ｓ−２２２２）の加水分解抑制の測定法 Ｓ−２２２２（ｋａｂｉ社）をトリス塩酸緩衝液（ｐＨ
８．３）にて溶解し、濃度４００ｍＭのＳ−２２２２
０．４Ｍトリス塩酸溶液を調整する。その１７５μｌに
対して本発明化合物の水溶液５１５μｌを加え、３７℃
で１分間インキュベートした後に牛トリプシン（Ｓｉｇ
ｍａ社）１ないし２ｍｇ／ｍｌ溶液を１０μｌ添加す
る。３７℃において４０５ｎｍの吸光度変化を測定する
ことにより基質の加水分解反応速度を求める。

【００５２】阻害剤（本発明化合物）を加えない場合の
１／２の吸光度を示す阻害剤濃度をＩ₅₀（μＭ）として
求めた。以上の結果をまとめて表−２に示す。

【００５３】

【表２】

【００５４】

【発明の効果】本発明化合物は蛋白分解酵素、特にトロ
ンビンに対し強力な阻害作用を有することから、血栓症
等の治療薬として有用である。また同化合物は吸湿性が
なく、かつ物理化学的に安定な結晶として得られること
から、その大量合成および各種製剤化が容易である。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明化合物のＩＲデータを示す図である。

【図２】本発明化合物の粉末Ｘ線データを示す図であ
る。

【図３】本発明化合物の粉末Ｘ線データを示す図であ
る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 穴吹 淳 神奈川県横浜市青葉区鴨志田町1000番地 三菱化学株式会社横浜総合研究所内 (54)【発明の名称】 ［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（トランス−４−アミノシクロヘキシルメチル）カルバモイル ］ピロリジン−１−カルボニル］−２−イソプロピルチオ−２−メチルプロピル］カルバミック アシド プロピルエステルの１／２硫酸塩

Claims (5)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 下記式（Ｉ） 【化１】 で表される［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（トランス
   −４−アミノシクロヘキシルメチル）カルバモイル］ピ
   ロリジン−１−カルボニル］−２−イソプロピルチオ−
   ２−メチルプロピル］カルバミックアシド プロピルエ
   ステルの１／２硫酸塩、その水和物もしくは溶媒和物。
2. 【請求項２】 ［（Ｓ）−１−［（Ｓ）−２−［（トラ
   ンス−４−アミノシクロヘキシルメチル）カルバモイ
   ル］ピロリジン−１−カルボニル］−２−イソプロピル
   チオ−２−メチルプロピル］カルバミックアシド プロ
   ピルエステル１／２硫酸塩。
3. 【請求項３】 請求項１または２に記載の化合物および
   薬学的に許容される担体を含有してなる医薬組成物。
4. 【請求項４】 請求項１または２に記載の化合物を有効
   成分とする蛋白分解酵素阻害剤。
5. 【請求項５】 請求項１または２に記載の化合物を有効
   成分とする抗凝固剤。