JPH11246594A - 二環式デプシペプチド - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 神経損傷治療薬、特に痴呆症治療薬として有
用な化合物を提供することにある。 【解決手段】 下記の式を有する二環式デプシペプチド
により上記の課題が達成される。 【化１】 上記式中、ＲはＣ₅〜Ｃ₂₀アルキルまたはＣ₅〜Ｃ₁₅アル
コキシメチルを示し、Ａ、Ｄ、ＥおよびＪは、アラニ
ン、バリン、ロイシン等を示し、ＢおよびＦは同一また
は異なってシステイン、アスパラギン酸、リシン、セリ
ン等を示し、Ｗはアスパラギン酸またはグルタミン酸を
示し、Ｚはアスパラギン酸、アスパラギン、グルタミン
酸またはグルタミンを示し、Ｇはジスルフィド結合、ア
ミド結合またはエステル結合を示し、ｌ、ｍ、ｎ、ｐお
よびｑは０または１を示す。上記化合物は、アポプロテ
インＥの産生を促進し、神経損傷治療薬、特に痴呆症治
療薬として有用であり、さらに高脂血症の治療薬として
も有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、二環式デプシペプ
チドおよびこれを有効成分とする医薬に関する。本発明
の二環式デプシペプチドは、アポリポプロテインＥの産
生促進作用を有する。アポリポプロテインＥは神経損傷
の修復作用を有するので、本発明の二環式デプシペプチ
ドは、神経損傷治療薬、特に痴呆症治療薬として有用で
あり、さらに高脂血症の治療薬としても有用である。

【０００２】

【従来の技術】老人性痴呆症の治療薬として、脳循環代
謝改善薬が主として使用されているが、これらの薬物
は、老人性痴呆症の原因と考えられている中枢神経系の
崩壊には何ら改善作用を示さない。その結果痴呆の中核
的症状というべき記憶障害や計算能力障害に対しても何
ら改善作用を示さない。他方、アポリポプロテインＥ
は、損傷し回復しつつある神経系部位で高レベルで発現
することが報告されており（例えば、M.J. Igunalius e
t al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 83：1125（19
86）参照）、神経系の修復に重要な役割を担うであろう
ことが示唆されている。

【０００３】さらに最近、アポリポプロテインＥをヒト
の家族性高コレステロール血症ホモ接合体のモデル動物
であるＷＨＨＬウサギに静脈投与すると、血漿コレステ
ロール濃度の著明な減少が認められることが報告され(Y
amada, et. al., Proceedingof National Academy Scie
nce USA, Vol.86, pp665-669, 1989)、また、マウス肝
臓にラットアポリポプロテインＥの遺伝子を導入してア
ポリポプロテインＥを大量に発現させると、血漿コレス
テロールとトリグリセリドが顕著に低下することが報告
された（Shimano, H. et. al., Journal of Clinical I
nvestigation,Vol.90, pp2084-2091, 1992)。これらの
報告で明らかになったように、血漿アポリポプロテイン
Ｅ濃度を上昇させることは、高脂血症、特に今までの薬
剤では治療が困難だとされてきた家族性高コレステロー
ル血症ホモ接合体の治療法として極めて有効とされてい
る。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】上記したところから、
新しいタイプの老人性痴呆症の治療薬として、脳循環代
謝改善薬以外の神経系の修復、成長を促進し、中枢神経
の崩壊を抑制する薬物が求められている。また高脂血
症、特に今までの薬剤では治療が困難だとされてきた家
族性高コレステロール血症ホモ接合体の治療法として血
漿アポリポプロテインＥ濃度を上昇させる薬物の解明も
求められているところである。かかる状況下において、
本発明者らはアポリポプロテインＥの産生を促進する薬
物を提供すべく鋭意研究の結果、ある種の二環式デプシ
ペプチドがこれらの作用を有することを見いだして、本
発明を完成するに至ったのである。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明は、一般式（１）

【化２】 （式中、Ｒは炭素数５〜２０の直鎖状もしくは有枝鎖状
のアルキル基または炭素数５〜１５の直鎖状もしくは有
枝鎖状のアルコキシメチル基を示し、Ａ、Ｄ、Ｅおよび
Ｊはそれぞれ独立して、アラニン、バリン、ロイシン、
イソロイシン、セリン、トレオニン、リシン、ヒドロキ
シリシン、アルギニン、システイン、メチオニン、フェ
ニルアラニン、チロシン、トリプトファン、ヒスチジ
ン、プロリン、４−ヒドロキシプロリン、アスパラギン
酸、グルタミン酸、ピペリジン−４−カルボン酸、ホモ
プロリン、オクタヒドロインドール−２−カルボン酸、
ノルバリン、ノルロイシン、α−ｔ−ブチルグリシン、
シクロヘキシルグリシン、アゼチジン−２−カルボン
酸、３−(３−ピリジル)アラニン、（３−Ｎ−メチル）
ピペリジルアラニン、３−（２−ナフチル）アラニン、
β−シクロヘキシルアラニン、β−ｔ−ブチルアラニ
ン、９−アントラセニルアラニン、α−メチルアラニ
ン、および２−アミノブタン酸から選ばれるアミノ酸残
基またはこれらアミノ酸残基のＮ−Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル体
を示し、ＢおよびＦは同一または異なってシステイン、
アスパラギン酸、グルタミン酸、リシン、ヒドロキシリ
シンまたはセリンから選ばれるアミノ酸残基を示し、Ｇ
はジスルフィド結合、アミド結合またはエステル結合を
示し、Ｗはアスパラギン酸またはグルタミン酸から選ば
れるアミノ酸残基を示し、Ｚはアスパラギン酸、アスパ
ラギン、グルタミン酸およびグルタミンから選ばれるア
ミノ酸残基を示し、ｌ、ｍ、ｎ、ｐおよびｑはそれぞれ
独立して０または１を示す。但し、結合Ｇはアミノ酸残
基ＢおよびＦにそれぞれ含まれるチオール基、カルボニ
ル基、水酸基またはアミノ基が相互に結合して形成され
るものであり、上記アミノ酸残基における遊離のアミノ
基、カルボキシル基、水酸基、メルカプト基またはω−
カルバミド基が存在する場合はそれらの基の保護基とし
てペプチド化学で通常用いられる基でそれぞれ保護され
ていてもよく、そして、上記Ａ、Ｂ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｊ、
ＷおよびＺにおけるアミノ酸残基がリシン、ヒドロキシ
リシン、グルタミン酸またはアスパラギン酸である場合
は、それらのアミノ酸のα−またはω−位のアミノ基ま
たはカルボキシル基で隣接するアミノ酸とペプチド結合
を形成することができる。）で示される二環式デプシペ
プチドまたはその薬理学的に許容される塩に関する。

【０００６】本発明は特に先の一般式（１）において、
Ａ、Ｊ、Ｄ、およびＥがそれぞれ独立して、アラニン、
バリン、ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニ
ン、リシン、アルギニン、システイン、メチオニン、フ
ェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、ヒスチジ
ン、プロリン、アスパラギン酸およびグルタミン酸から
選ばれるアミノ酸残基またはこれらアミノ酸残基のＮ−
Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル体である二環式デプシペプチドまたは
その薬理学的に許容される塩に関する。

【０００７】本発明の好ましい化合物は、前記一般式
（１）において、Ｂがシステイン残基、Ｊがロイシン、
アラニン、β−ｔ−ブチルアラニン、バリンまたはフェ
ニルアラニンから選ばれるアミノ酸残基、Ｄがバリンま
たはアラニンから選ばれるアミノ酸残基、Ｅがロイシン
残基、イソロイシン、アラニン、β−ｔ−ブチルアラニ
ン、バリンまたはフェニルアラニンから選ばれるアミノ
酸残基、Ｆがシステイン残基、Ｗがアスパラギン酸また
はグルタミン酸から選ばれるアミノ酸残基、そしてＺが
アスパラギン酸、グルタミン酸、グルタミンまたはアス
パラギンから選ばれるアミノ酸残基であり、Ｇがジスル
フィド結合であり、ｌ、ｍ、およびｎが０または１であ
り、ｐが０であり、ｑが１であり、そしてＲが炭素数６
〜１２の直鎖状または有枝鎖状のアルキル若しくはアル
コキシメチル基である二環状デプシペプチドまたはその
薬理学的に許容される塩である。

【０００８】本発明の好ましい他の化合物は、前記一般
式（１）において、Ａがイソロイシン、ロイシン、アラ
ニン、β−ｔ−ブチルアラニン、バリンまたはフェニル
アラニンから選ばれるアミノ酸残基、Ｂがシステイン残
基、Ｄがバリンまたはアラニンから選ばれるアミノ酸残
基、Ｅがロイシン、イソロイシン、アラニン、β−ｔ−
ブチルアラニン、バリンまたはフェニルアラニンから選
ばれるアミノ酸残基、Ｆがシステイン残基、Ｗがアスパ
ラギン酸またはグルタミン酸から選ばれるアミノ酸残
基、そしてＺがアスパラギン酸、グルタミン酸、グルタ
ミンまたはアスパラギンから選ばれるアミノ酸残基であ
り、Ｇがジスルフィド結合で連結であり、ｌ、ｍおよび
ｎが０または１であり、ｐが１であり、ｑが０であり、
そしてＲが炭素数６〜１２の直鎖状または有枝鎖状のア
ルキル若しくはアルコキシメチル基である二環式デプシ
ペプチドまたはその薬理学的に許容される塩に関する。
前記一般式において、ｎは１であり、ｐ＋ｑ＝１である
ことが好ましい。

【０００９】また本発明は、上記した二環式デプシペプ
チドまたはその薬理学的に許容される塩を有効成分とす
る医薬に関する。また本発明は上記した二環式デプシペ
プチドまたはその薬理学的に許容される塩を有効成分と
するアポリポプロテインＥ産生促進薬に関する。また本
発明は、上記した二環式デプシペプチドまたはその薬理
学的に許容される塩を有効成分とする神経損傷治療薬に
関する。また本発明は、上記した二環式デプシペプチド
またはその薬理学的に許容される塩を有効成分とする痴
呆症治療薬に関する。また本発明は上記した二環式デプ
シペプチドまたはその薬理学的に許容される塩を有効成
分とする高脂血症治療薬に関する。上記した本発明の式
(１)を有する二環式デプシペプチドを構成する上記アミ
ノ酸はＬ−体またはＤ−体のいずれであってもよいが、
Ａ、Ｄ、Ｊ、Ｗ、およびＺのアミノ酸はＬ−体が好まし
く、ＢおよびＥのアミノ酸はＤ−体であるのが好まし
い。

【００１０】本発明の前記一般式(１)で示される二環式
デプシペプチドの好ましい例として、Ｒが炭素数６〜１
２の直鎖状のアルキル若しくはアルコキシメチル基であ
り、ｌ、ｍ、ｎ、ｐおよびｑは０または１（但しｐ＋ｑ
＝１）であり、そして Ｂ＝Cys、Ｊ＝Leu、 Ｗ＝Asp、 Ｄ＝Ala、Ｅ＝Leu、Ｆ＝C
ys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｓ−Ｓの化合物：Ｂ＝Cys、 Ｊ＝Ala、
Ｗ＝Asp、 Ｄ＝Val、Ｅ＝Leu、Ｆ＝Cys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝
Ｓ−Ｓの化合物：Ｂ＝Cys、 Ｊ＝Leu、 Ｗ＝Asp、 Ｄ＝Va
l、Ｅ＝Ile、Ｆ＝Cys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｓ−Ｓの化合物：
Ｂ＝Cys、 Ｊ＝Leu、Ｗ＝Asp、Ｄ＝Val、Ｅ＝Ala、Ｆ＝C
ys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｓ−Ｓの化合物：Ｂ＝Cys、Ｊ＝Le
u、Ｗ＝Asp、 Ｄ＝Val、Ｅ＝Leu、Ｆ＝Cys、Ｚ＝Gln、Ｇ
＝Ｓ−Ｓの化合物：Ａ＝Ile、 Ｂ＝Cys、 Ｗ＝Asp、 Ｄ＝A
la、Ｅ＝Leu、Ｆ＝Cys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｓ−Ｓの化合
物：Ａ＝Ile、 Ｂ＝Cys、 Ｗ＝Asp、 Ｄ＝Val、Ｅ＝Leu、
Ｆ＝Cys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｓ−Ｓの化合物：Ａ＝Ala、 Ｂ
＝Cys、 Ｗ＝Asp、 Ｄ＝Val、Ｅ＝Ile、Ｆ＝Cys、Ｚ＝Gl
n、Ｇ＝Ｓ−Ｓの化合物：Ａ＝Ile、 Ｂ＝Cys、Ｗ＝Asp、
Ｄ＝Val、Ｅ＝Ala、Ｆ＝Cys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｓ−Ｓの化
合物：Ｂ＝Cys、 Ｊ＝Leu、 Ｗ＝Glu、 Ｄ＝Ala、Ｅ＝Le
u、Ｆ＝Cys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｓ−Ｓの化合物：Ｂ＝Cys、
Ｊ＝Ala、 Ｗ＝Glu、 Ｄ＝Val、Ｅ＝Leu、Ｆ＝Cys、Ｚ＝G
ln、Ｇ＝Ｓ−Ｓの化合物：Ｂ＝Cys、 Ｊ＝Leu、 Ｗ＝Glu、
Ｄ＝Val、Ｅ＝Ile、Ｆ＝Cys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｓ−Ｓの
化合物：Ｂ＝Cys、 Ｊ＝Leu、Ｗ＝Glu、Ｄ＝Val、Ｅ＝Al
a、Ｆ＝Cys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｓ−Ｓの化合物：Ａ＝Ile、
Ｂ＝Cys、 Ｗ＝Glu、 Ｄ＝Ala、Ｅ＝Leu、Ｆ＝Cys、Ｚ＝G
ln、Ｇ＝Ｓ−Ｓの化合物：Ａ＝Ile、 Ｂ＝Cys、 Ｗ＝Glu、
Ｄ＝Val、Ｅ＝Leu、Ｆ＝Cys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｓ−Ｓの
化合物：Ａ＝Ala、 Ｂ＝Cys、 Ｗ＝Glu、 Ｄ＝Val、Ｅ＝Il
e、Ｆ＝Cys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｓ−Ｓの化合物：Ａ＝Ile、
Ｂ＝Cys、Ｗ＝Glu、Ｄ＝Val、Ｅ＝Ala、Ｆ＝Cys、Ｚ＝G
ln、Ｇ＝Ｓ−Ｓの化合物：Ｂ＝Ser、 Ｊ＝Leu、 Ｗ＝Asp、
Ｄ＝Ala、Ｅ＝Leu、Ｆ＝Glu、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｏ−ＣＯ
の化合物：Ｂ＝Ser、 Ｊ＝Ala、 Ｗ＝Asp、 Ｄ＝Val、Ｅ＝
Leu、Ｆ＝Glu、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｏ−ＣＯの化合物：Ｂ＝S
er、 Ｊ＝Leu、 Ｗ＝Asp、 Ｄ＝Val、Ｅ＝Ile、Ｆ＝Glu、
Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｏ−ＣＯの化合物：Ｂ＝Ser、 Ｊ＝Leu、
Ｗ＝Asp、Ｄ＝Val、Ｅ＝Ala、Ｆ＝Glu、Ｚ＝Gln、Ｇ＝
Ｏ−ＣＯの化合物：Ｂ＝Ser、Ｊ＝Leu、Ｗ＝Asp、 Ｄ＝V
al、Ｅ＝Leu、Ｆ＝Glu、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｏ−ＣＯの化合
物：Ａ＝Ile、 Ｂ＝Ser、 Ｗ＝Asp、 Ｄ＝Ala、Ｅ＝Leu、
Ｆ＝Glu、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｏ−ＣＯの化合物：Ａ＝Ile、
Ｂ＝Ser、 Ｗ＝Asp、 Ｄ＝Val、Ｅ＝Leu、Ｆ＝Glu、Ｚ＝G
ln、Ｇ＝Ｏ−ＣＯの化合物：Ａ＝Ala、 Ｂ＝Ser、 Ｗ＝As
p、 Ｄ＝Val、Ｅ＝Ile、Ｆ＝Glu、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｏ−Ｃ
Ｏの化合物：Ａ＝Ile、 Ｂ＝Ser、Ｗ＝Asp、Ｄ＝Val、Ｅ
＝Ala、Ｆ＝Glu、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｏ−ＣＯの化合物：Ｂ
＝Glu、 Ｊ＝Leu、 Ｗ＝Glu、 Ｄ＝Ala、Ｅ＝Leu、Ｆ＝Ly
s、Ｚ＝Gln、Ｇ＝ＣＯＮＨの化合物：Ｂ＝Glu、 Ｊ＝Al
a、 Ｗ＝Glu、 Ｄ＝Val、Ｅ＝Leu、Ｆ＝Lys、Ｚ＝Gln、Ｇ
＝ＣＯＮＨの化合物：Ｂ＝Glu、 Ｊ＝Leu、 Ｗ＝Glu、 Ｄ
＝Val、Ｅ＝Ile、Ｆ＝Lys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝ＣＯＮＨの化
合物：Ｂ＝Glu、 Ｊ＝Leu、Ｗ＝Glu、Ｄ＝Val、Ｅ＝Al
a、Ｆ＝Lys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝ＣＯＮＨの化合物：Ｂ＝Gl
u、Ｊ＝Leu、Ｗ＝Glu、 Ｄ＝Val、Ｅ＝Leu、Ｆ＝Lys、Ｚ
＝Gln、Ｇ＝ＣＯＮＨの化合物：Ａ＝Ile、 Ｂ＝Glu、 Ｗ
＝Asp、 Ｄ＝Ala、Ｅ＝Leu、Ｆ＝Lys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝Ｃ
ＯＮＨの化合物：Ａ＝Ile、 Ｂ＝Glu、 Ｗ＝Asp、 Ｄ＝Va
l、Ｅ＝Leu、Ｆ＝Lys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝ＣＯＮＨの化合
物：Ａ＝Ala、 Ｂ＝Glu、 Ｗ＝Asp、 Ｄ＝Val、Ｅ＝Ile、
Ｆ＝Lys、Ｚ＝Gln、Ｇ＝ＣＯＮＨの化合物：Ａ＝Ile、
Ｂ＝Glu、Ｗ＝Asp、Ｄ＝Val、Ｅ＝Ala、Ｆ＝Lys、Ｚ＝G
ln、Ｇ＝ＣＯＮＨの化合物：Ａ＝Ile、 Ｂ＝Lys、 Ｗ＝Gl
u、 Ｄ＝Ala、Ｅ＝Leu、Ｆ＝Glu、Ｚ＝Gln、Ｇ＝ＮＨＣ
Ｏの化合物：Ａ＝Ile、 Ｂ＝Lys、 Ｗ＝Glu、 Ｄ＝Val、Ｅ
＝Leu、Ｆ＝Glu、Ｚ＝Gln、Ｇ＝ＮＨＣＯの化合物：Ａ
＝Ala、 Ｂ＝Lys、 Ｗ＝Glu、 Ｄ＝Val、Ｅ＝Ile、Ｆ＝Gl
u、Ｚ＝Gln、Ｇ＝ＮＨＣＯの化合物：Ａ＝Ile、 Ｂ＝Ly
s、Ｗ＝Glu、Ｄ＝Val、Ｅ＝Ala、Ｆ＝Glu、Ｚ＝Gln、Ｇ
＝ＮＨＣＯの化合物：Ａ＝Ile、Ｂ＝Lys、Ｗ＝Glu、 Ｄ
＝Val、Ｅ＝Leu、Ｆ＝Glu、Ｚ＝Gln、Ｇ＝ＮＨＣＯの化
合物：などが挙げられる。

【００１１】ここで述べた本化合物の説明および以下に
述べる実施例などにおいて、ペプチドを構成するアミノ
酸またはアミノ酸残基については、アミノ酸の表示に一
般に用いられている三文字表記による。すなわち、アラ
ニン＝Ala、バリン＝Val、ロイシン＝Lue、イソロイシ
ン＝Ile、セリン＝Ser、トレオニン＝Thr、アスパラギ
ン酸＝Asp、アスパラギン＝Asn、グルタミン酸＝Glu、
グルタミン＝Gln 、リシン＝Lys、システイン＝Cyｓ、
などの表示方法を用いる。

【００１２】本発明の二環式デプシペプチドは、例え
ば、次に述べる通常のペプチド合成の手法により製造し
た環状デプシペプチドをジスルフィド結合、アミド結合
またはエステル結合によって分子内架橋することにより
製造することができる。すなわち、前記一般式(１)にお
いてｐ＝０、ｑ＝１である二環式デプシペプチドは、つ
ぎの工程：一般式(２)

【化３】 （式中、Ｒは上記の意味を有する）で示される３−ヒド
ロキシプロピオン酸誘導体のカルボキシル基を適当な保
護基で保護して得られる、一般式(３)

【化４】 （式中、Ｘはカルボキシル基の保護基であり、Ｒは上記
の意味を有する）で示されるカルボキシル基が保護され
た３−ヒドロキシプロピオン酸誘導体と、Ｂのα−位の
アミノ基および側鎖のアミノ基、カルボキシル基、水酸
基またはメルカプト基が保護されたアミノ酸Ｙ−Ｂ′−
ＯＨを縮合させて、一般式(４)

【化５】 （式中、Ｂ′はＢの側鎖のアミノ基、カルボキシル基、
水酸基またはメルカプト基が保護されたアミノ酸残基を
示し、ＹはＢ′のα−位のアミノ基の保護基を示し、Ｘ
およびＲは上記の意味を有する）で示される化合物と
し、

【００１３】この化合物のアミノ基の保護基Ｙを脱離し
て、一般式(５)

【化６】 （式中、Ｂ′、ＸおよびＲは上記の意味を有する）で示
される化合物とし、この化合物と、α−位のアミノ基が
保護されたアミノ酸Ｙ−Ｊ−ＯＨを縮合させて、一般式
(６)

【化７】 （式中、Ｂ′、Ｊ、Ｙ、Ｘ、およびＲは上記の意味を有
する）で示されるデプシペプチドとし、

【００１４】このデプシペプチドのアミノ基の保護基Ｙ
を脱離して、一般式(７)

【化８】 （式中、Ｂ′、Ｊ、Ｘ、およびＲは上記の意味を有す
る）で示されるデプシペプチドとし、

【００１５】このデプシペプチドと、アミノ基とβ−位
置のカルボキシル基とが保護されたアスパラギン酸また
は、アミノ基とγ−位置のカルボキシル基とが保護され
たグルタミン酸を縮合させて、一般式(８)

【化９】 （式中、Ｘ′はアスパラギン酸のβ−位置のカルボキシ
ル基またはグルタミン酸のγ−位置のカルボキシル基の
保護基であり、Ｂ′、Ｊ、Ｗ、Ｘ、ＹおよびＲは上記の
意味を有する）で示されるデプシペプチドとし、

【００１６】このデプシペプチドのアミノ基の保護基Ｙ
を脱離して、一般式(９)

【化１０】 （式中、Ｂ′、Ｊ、Ｗ、Ｘ、Ｘ′およびＲは上記の意味
を有する）で示されるデプシペプチドとし、このデプシ
ペプチドと、α−位のアミノ基が保護されたアミノ酸Ｙ
−Ｄ−ＯＨを縮合させて、一般式(１０)

【化１１】 （式中、Ｂ′、Ｊ、Ｗ、Ｄ、Ｙ、Ｘ、Ｘ′およびＲは上
記の意味を有する）で示されるデプシペプチドとし、

【００１７】このデプシペプチドのアミノ基の保護基Ｙ
を脱離して、一般式(１１)

【化１２】 （式中、Ｂ′、Ｊ、Ｗ、Ｄ、Ｘ、Ｘ′およびＲは上記の
意味を有する）で示されるデプシペプチドとし、このデ
プシペプチドと、α−位のアミノ基が保護されたアミノ
酸Ｙ−Ｅ−ＯＨを縮合させるか、または上記アミノ酸残
基Ｄの結合工程を経ないで一般式(９)のデプシペプチド
と上記アミノ酸Ｙ−Ｅ−ＯＨを縮合させて、一般式（１
２）

【化１３】 （式中、Ｂ′、Ｊ、Ｗ、Ｄ、Ｅ、Ｙ、Ｘ、Ｘ′、および
Ｒは上記の意味を有し、ｍは０または１を示す）で示さ
れるデプシペプチドとし、

【００１８】このデプシペプチドのアミノ基の保護基Ｙ
を脱離して、一般式（１３）

【化１４】 （式中、Ｂ′、Ｊ、Ｗ、Ｄ、Ｅ、Ｘ、Ｘ′、Ｒおよびｍ
は上記の意味を有する）で示されるデプシペプチドと
し、このデプシペプチドと、Ｆのα−位のアミノ基およ
び側鎖のアミノ基、カルボキシル基、水酸基またはメル
カプト基が保護されたアミノ酸Ｙ−Ｆ′−ＯＨを縮合さ
せるか、または上記アミノ酸残基Ｅの結合工程を経ない
で一般式(１１)または一般式(９)のデプシペプチドと、
上記アミノ酸Ｙ−Ｆ′−ＯＨを縮合させて、一般式(１
４)

【化１５】 （式中、Ｂ′、Ｊ、Ｗ、Ｄ、Ｅ、Ｆ′、Ｙ、Ｘ、Ｘ′、
Ｒおよびｍは上記の意味を有し、ｎは０または１を示
す）で示されるデプシペプチドとし、

【００１９】このデプシペプチドのアミノ基の保護基Ｙ
を脱離して、一般式（１５）

【化１６】 （式中、Ｂ′、Ｊ、Ｗ、Ｄ、Ｅ、Ｆ′、Ｘ、Ｘ′、Ｒ、
ｍおよびｎは上記の意味を有する）で示されるデプシペ
プチドとし、このデプシペプチドと、アミノ基とβ−位
置のカルボキシル基とが保護されたアスパラギン酸、ア
ミノ基とβ−位置のカルバミド基が保護されたアスパラ
ギン、アミノ基とγ−位置のカルボキシル基とが保護さ
れたグルタミン酸、またはアミノ基とγ−位置のカルバ
ミド基が保護されたグルタミン等を縮合させて、一般式
（１６）

【化１７】 （式中、Ｘ″はアスパラギン酸のβ−位置のカルボキシ
ル基またはグルタミン酸のγ−位置のカルボキシル基、
アスパラギンのβ−位置のカルバミド基またはグルタミ
ンのγ−位置のカルバミド基の保護基であり、Ｂ′、
Ｊ、Ｗ、Ｄ、Ｅ、Ｆ′、Ｚ、Ｘ、Ｘ′、Ｙ、Ｒ、ｍおよ
びｎは上記の意味を有する）で示されるデプシペプチド
とし、

【００２０】このデプシペプチドのカルボキシル基の保
護基Ｘを脱離し、一般式(１７)

【化１８】 （式中、Ｂ′、Ｊ、Ｗ、Ｄ、Ｅ、Ｆ′、Ｚ、Ｘ′、
Ｘ″、Ｙ、Ｒ、ｍおよびｎは上記の意味を有する）で示
されるデプシペプチドとし、このデプシペプチドのアス
パラギン酸、アスパラギン、グルタミン酸またはグルタ
ミンのアミノ基の保護基を脱離し、その後自己縮合させ
て、一般式(１８)

【化１９】 （式中、Ｂ′、Ｊ、Ｗ、Ｄ、Ｅ、Ｆ′、Ｚ、Ｘ′、
Ｘ″、Ｒ、ｍおよびｎは上記の意味を有する）で示され
る環状デプシペプチドとし、

【００２１】そして、Ｂ′とＦ′がシステインである環
状デプシペプチドの場合には、酸化剤、例えば酸性ヨウ
素溶液などを用いて、二つのシステインの間にジスルフ
ィド結合を形成させ、Ｂ′がセリンで、Ｆ′がグルタミ
ン酸またはアスパラギン酸の場合、またはＢ′がグルタ
ミン酸またはアスパラギン酸でＦ′がセリンの場合に
は、側鎖のカルボキシル基および水酸基の保護基を脱離
した後、酸性触媒と処理するか、ジシクロヘキシルカル
ボジイミドなどと処理することにより、エステル結合を
形成させ、またＢ′がグルタミン酸またはアスパラギン
酸でＦ′がリシンである場合、またはＢ′がリシンで
Ｆ′がグルタミン酸またはアスパラギン酸である場合に
は、側鎖のアミノ基およびカルボキシル基の保護基を脱
離した後、脱水反応によるアミド基形成反応によってア
ミド結合を形成させ、二環式デプシペプチドとすること
ができる。

【００２２】次いでこの環状デプシペプチドのＷおよび
Ｚの保護基を脱離して一般式（１９）

【化２０】 （式中、Ｂ、Ｊ、Ｗ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｚ、Ｒ、ｍおよびｎ
は上記の意味を有し、Ｇはジスルフィド結合、エステル
結合またはアミド結合を示す）で示される二環式デプシ
ペプチドを得ることができる。また、前記一般式(１)に
おいて、ｐ＝１、ｑ＝０である式(２０)

【化２１】 （式中、Ａ、Ｂ、Ｗ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｚ、Ｇ、Ｒ、ｍおよ
びｎは上記の意味を有する）で示される二環式デプシペ
プチドも上記の合成法に準じて得ることができる。

【００２３】また、固相合成等により得られた式(２１)

【化２２】 （式中、Ｂ′、Ｊ、Ｗ、Ｄ、Ｅ、Ｆ′、Ｚ、Ｘ、Ｘ′、
Ｒ、ｍおよびｎは上記の意味を有する）で示されるデプ
シペプチドを自己縮合することによって本発明の二環式
デプシペプチドを得ることもできる。

【００２４】上記した二環式デプシペプチドの製造法
は、典型的な製造方法を例示しただけのもので、このも
のを製造する方法としては種々の変法が可能であって、
例えば一般式(1８)の環状デプシペプチドを上記したペ
プチド合成の常法に従ってアミノ酸を１個ずつ段階的に
縮合して製造する他に、あらかじめ合成したいくつかの
オリゴペプチドを縮合させ次いで自己縮合する方法によ
って製造することができる。上記した本発明の二環式デ
プシペプチドを得るための合成工程には、ペプチド合成
において採用される慣用方法のいずれを用いることもで
きる。例えば、ペプチド結合を形成するための方法とし
ては、縮合剤法、アジド法、酸無水物法、活性エステル
法、酸化還元法および酵素法などが挙げられる。

【００２５】縮合剤法を用いてペプチド合成を行う場合
は、Ｎ,Ｎ−ジシクロヘキシルカルボジイミド（以下、
「ＤＣＣ」という）、または１−エチル−３−（３−ジ
メチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩、すなわ
ち水溶性カルボジイミド（以下、「ＷＳＣＩ」とい
う）、Ｏ−（１Ｈ−ベンゾトリアゾール−１−イル）−
Ｎ,Ｎ,Ｎ′,Ｎ′−テトラメチルウロニウム テトラフル
オロボレート（以下、「ＴＢＴＵ」という）、ベンゾト
リアゾール−１−イル−オキシ−トリス（ジメチルアミ
ノ）ホスホニウム ヘキサフルオロホスフェート（以
下、「ＢＯＰ」という）Ｏ−（７−アザベンゾトリアゾ
ール−１−イル）−１,２,３−テトラメチルウロニウム
ヘキサフルオロホスフェート（以下、「ＨＡＴＵ」と
いう）等を用いることが好ましい。また、同時に、ラセ
ミ化を抑制するために通常用いられる添加剤、例えばＮ
−ヒドロキシスクシンイミド、Ｎ−ヒドロキシベンゾト
リアゾール（以下、「ＨＯＢｔ」という）、１−ヒドロ
キシ−７−アザベンゾトリアゾール（以下「ＨＯＡｔ」
という）、Ｎ−ヒドロキシ−５−ノルボネン−２,３−
ジカルボジイミド等を加えることも好ましい。

【００２６】また、アジド法で用いられる主な縮合剤と
しては、ジフェニルリン酸アジド（以下、「ＤＰＰＡ］
という）が挙げられる。なお、縮合反応を行う前に、通
常公知の手段によって当該縮合反応に関与しないカルボ
キシル基、アミノ基、水酸基、メルカプト基およびω−
カルバミド基等へ保護手段を施すことが好ましい。この
場合、保護手段に用いる保護基としては、例えば、アミ
ノ基の保護基としてはｔ−ブトキシカルボニル（以下、
「Ｂｏｃ」という）基、ベンジルオキシカルボニル基、
ｐ−メトキシ−ベンジルオキシカルボニル基または９−
フルオレニルメトキシカルボニル（以下、「Ｆｍｏｃ」
という）基等が、また、カルボキシル基の保護基として
はベンジルオキシ（以下、「ＯＢｚｌ」という）基また
はｔ−ブトキシ（以下、「ＯｔＢｕ」という）基等が、
末端カルバミド基の保護基としては、４,４−ジメトキ
シベンズヒドリル（以下、「Ｍｂｈ」という）基または
トリチル（以下、「Ｔｒｔ」という）基等が挙げられ
る。水酸基の保護基としては、ＯＢｚｌ基、ＯｔＢｕ基
等があげられる。メルカプト基の保護基としてはベンジ
ル（以下、「Ｂｎ」という）基、Ｔｒｔ基、アセタミド
メチル（以下、「Ａｃｍ」という）基等が挙げられる。

【００２７】本発明の二環式デプシペプチドの製造工程
における保護基の脱離反応は、ペプチド結合に影響を与
えずに保護基を脱離できるものが必要であり、用いる保
護基の種類に応じて適宜選択すればよい。前記の各ペプ
チド合成に用いる溶媒としては、例えば、無水または含
水のクロロホルム、ジクロロメタン、酢酸エチル、Ｎ,
Ｎ−ジメチルホルムアミド（以下、「ＤＭＦ」とい
う）、ジメチルスルホキシド、ピリジン、ジオキサン、
テトラヒドロフラン（以下、「ＴＨＦ」という）、ジメ
トキシエタン、アセトニトリルなどが挙げられ、必要に
応じて２種以上の溶媒を合わせて用いても良い。また、
この縮合反応は通常の場合と同様に、約−２０〜５０℃
の範囲で行われる。また、ペプチド合成は、液相法およ
び固相法のいずれによっても製造でき、更にカラム法、
バッチ法のいずれを用いてもよい。

【００２８】本発明に用いる二環式デプシペプチドは、
それ自体公知の方法で、ナトリウム塩、カリウム塩、カ
ルシウム塩等の金属塩、アンモニウム塩、あるいはトリ
エチルアミン塩等の有機アミンとの塩など、薬理学的に
許容されうる塩を形成させることができ、これらの薬理
学的に許容されうる塩も本発明のアポリポプロテインＥ
産生促進剤として用いることができる。上記した本発明
の一般式(１)で示される二環式デプシペプチドの合成に
用いられる出発原料の一般式(２)の３−ヒドロキシプロ
ピオン酸誘導体の具体例としては、３−ヒドロキシ−カ
プリン酸、３−ヒドロキシ−ラウリン酸、３−ヒドロキ
シ−ミリスチン酸などがあげられる。この３−ヒドロキ
シプロピオン酸誘導体はＤ−体、Ｌ−体またはラセミ体
のいずれでもよい。

【００２９】本発明の二環式デプシペプチドはアポリポ
プロテインＥ産生細胞であるHep Ｇ２細胞に対してアポ
リポプロテインＥ産生を強力に促進することから、神経
損傷治療剤として有用であり、また抗痴呆剤として有用
である。さらには、その神経損傷治療作用により、末梢
神経障害、例えば糖尿病性神経障害、ビタミンＢ群（Ｂ
₁、Ｂ₂、Ｂ₁₂等）の欠乏による末梢神経障害などの治療
に有用である。また、本発明の二環式デプシペプチドま
たはその薬理学的に許容される塩はアポリポプロテイン
Ｅを強力に促進するので、高脂血症薬として有用であ
る。

【００３０】本発明の二環式デプシペプチドまたはその
薬理学的に許容し得る塩は種々の投与形態の製剤とする
ことができる。すなわち、この製剤は経口投与剤として
は例えば、錠剤、硬質カプセル剤、軟質カプセル剤、顆
粒剤、散剤のような固形製剤、および溶液、エマルジョ
ンまたは懸濁液のような液体製剤などがあげられる。ま
た、非経口投与の剤型としては注射剤、坐剤などがあげ
られる。これらの製剤の調製にあたっては製剤化のため
の慣用の添加剤、例えば賦形剤、安定剤、防腐剤、溶解
剤、湿潤剤、乳化剤、滑沢剤、甘味剤、着色剤、香味
剤、張度調製剤、緩衝剤、酸化防止剤などを添加して製
剤化することができる。添加剤としては、例えばデンプ
ン、白糖、果糖、乳糖、ブドウ糖、マンニトール、ソル
ビトール、沈降性炭酸カルシウム、結晶セルロース、カ
ルボキシメチルセルロース、デキストリン、ゼラチン、
アラビアゴム、ステアリン酸マグネシウム、タルク、ヒ
ドロキシプロピルメチルセルロース等が挙げられる。

【００３１】本発明の二環式デプシペプチドを液剤、注
射剤として用いるときは、有効成分である二環式デプシ
ペプチドまたはその薬理学的に許容される塩を慣用の希
釈剤中に溶解または懸濁して用いることができる。希釈
剤としては、生理食塩水、リンゲル液、ブドウ糖水溶
液、アルコール類、脂肪酸エステル類、グリコール類、
グリセリン、動植物由来の油脂、パラフィン類などが含
まれる。また、これらの製剤は、通常の方法で製造する
ことができる。そして通常の臨床投与量として、成人一
人１日当たり経口の場合、０.５〜５０００mgの範囲で
用いられる。さらに好ましくは５〜５００mgの範囲で用
いられる。また、成人一人１日あたり非経口の場合は
０.０５〜５０００mgの範囲で用いられる。

【００３２】

【実施例】次に本発明の二環式デプシペプチドの製造方
法の具体例を合成例として、本発明の二環式デプシペプ
チドのアポリポプロテインＥ産生促進作用についての効
果例を試験例として、また本発明の二環式デプシペプチ
ドを有効成分とする製剤についての具体例を製剤例とし
て説明することにする。以下の実施例において、デプシ
ペプチドおよび二環式デプシペプチドを構成するアミノ
酸がＤ体である場合についてはその旨を特記することと
し、かかる特記のない場合はアミノ酸はＬ体であるもの
とする。

【００３３】合成例 １

【化２３】 アルコール（１.３２ｇ）、Fmoc-Cys(Acm)（１.８０
ｇ)、ＤＭＡＰ（３４mg）のジクロロメタン（２５mL）
溶液に氷冷下ＤＣＣ（１.２２ｇ）を加えた。反応液を
氷冷下２時間、室温で一晩攪拌した。析出した結晶を濾
別した後、溶媒を留去し、酢酸エチルと１０％クエン酸
水溶液を加えた。分液して得られた有機層を水、５％炭
酸水素ナトリウム水溶液、水で順番に洗浄後、無水硫酸
ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去した後、得られた粗
生成物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し
目的のエステルを２.８８ｇ得た。¹ H-NMR (δ ppm、CHCl₃）7.76 (d, J=7.3Hz, 2H), 7.61
(t, J=6.3Hz, 2H), 7.41 (t, J=7.6Hz, 2H), 7.27-7.3
7 (m, 7H), 6.43 (br s, 1H), 5.76 (d, J=5.9Hz, 1H),
5.27-5.35 (m, 1H), 5.11 (s, 2H), 4.43 (d, J=6.8H
z, 2H), 4.40-4.53 (m, 1H), 4.35 (d, J=5.9Hz, 2H),
4.24 (t, J=6.8Hz, 1H), 3.01-3.10 (m,1H), 2.86 (dd,
J=6.6, 15Hz, 1H), 2.68 (dd, J=7.6, 16Hz, 1H), 2.6
2 (dd, J=4.9, 16Hz, 1H)，1.97 (s，3H)，1.51-1.73
(m, 2H), 1.06-1.38 (m, 18H), 0.88 (t, J=6.8Hz, 3H)

【００３４】合成例２

【化２４】 合成例１で得られたエステル（２.８５ｇ）のＤＭＦ
（３９mL）溶液にジエチルアミン（３.９mL）を加え
た。この反応液を室温で１時間攪拌後、溶媒を留去し、
酢酸エチルを加えた。水で洗浄後、無水硫酸ナトリウム
で乾燥した。溶媒を留去した後、得られた粗生成物をシ
リカゲルカラムクロマトグラフィーで精製しアミンを
１.４０ｇ得た。

【００３５】得られたアミン（０.５３ｇ）、Fmoc-Gln
(Trt)-Cys(Acm)-DLeu-Val-Asp(OtBu)-DLeu-OH(１.３３
ｇ）およびＨＯＢｔ（０.１４ｇ）のジクロロメタン
（２５mL）溶液に氷冷下ＷＳＣＩ（０.２０ｇ）を加え
た。得られた反応液を氷冷下で２時間、室温で一晩攪拌
した。溶媒を留去した後、クロロホルムと１０％クエン
酸水溶液を加えた。分液して得られた有機層を水、５％
炭酸水素ナトリウム水溶液、水で順番に洗浄後、無水硫
酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去した後、得られた
粗生成物をクロロホルム−エーテルで結晶化して目的の
ベンジルエステルを１.３１ｇ得た。¹ H-NMR (δ ppm、DMSO-d6) 8.51 (s, 1H), 8.43-8.47
(m, 2H), 8.40 (d, J=7.8Hz, 1H), 8.26 (d, J=7.3Hz,
1H), 8.02-8.08 (m, 2H), 7.99 (d, J=8.3Hz, 1H), 7.8
7 (d, J=7.8Hz, 2H), 7.74 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.70
(t, J=6.3Hz, 2H),7.51 (d, J=8.3Hz, 1H), 7.39 (t, J
=7.3Hz, 2H), 7.14-7.36 (m, 22H), 5.07(s, 2H), 5.02
-5.13 (m, 1H), 4.50-4.65 (m, 2H), 4.28-4.47 (m, 4
H), 4.09-4.27 (m, 7H), 3.96-4.05 (m, 1H), 2.94 (d
d, J=4.9, 14Hz, 1H), 2.84 (dd, J=4.9, 14Hz, 1H),
2.77 (dd, J=8.5, 14Hz, 1H), 2.57-2.71 (m, 4H)，2.2
5-2.39(m, 2H), 1.81 (s, 3H), 1.79 (s, 3H), 1.29
(s, 9H), 1.10-1.99 (m, 30H),0.66-0.88 (m, 21H)

【００３６】合成例３

【化２５】 合成例２で得られたベンジルエステル（１.２０ｇ）と
１０％パラジウム炭素（５ｇ）のメタノール−ＤＭＦ懸
濁液を水素雰囲気下室温で一時間反応させた。反応後、
パラジウム炭素を濾別した後、溶媒を留去し、カルボン
酸を得た。

【００３７】得られたカルボン酸をＤＭＦの２０％ピペ
リジン溶液（１５mL）に溶解させ３０分攪拌した。溶媒
を留去した後、得られた粗生成物をシリカゲルカラムク
ロマトグラフィーで精製しアミノカルボン酸を０.６４
ｇ得た。得られたアミノカルボン酸のＤＭＦ（６００m
L）溶液にジイソプロピルエチルアミン（０.３１mL）、
ＨＯＡｔ（０.１８ｇ）、ＨＡＴＵ（０.５０ｇ）を加え
室温で一晩攪拌した。溶媒を留去した後、酢酸エチルと
５％硫酸水素カリウム水溶液を加えた。分液して得られ
た有機層を水と飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸ナトリウ
ムで乾燥した。溶媒を留去した後、得られた粗生成物を
シリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し目的の化
合物を０.４４ｇ得た。¹ H-NMR (δ ppm、CDCl₃）8.90 (s, 1H), 8.13 (d, J=8.
8Hz, 1H), 7.99 (t, J=6.3Hz, 1H), 7.63 (d, J=6.8Hz,
1H), 7.56 (d, J=8.8Hz, 1H), 7.13-7.38 (m,16H), 6.
91 (s, 1H), 6.75 (d, J=9.3Hz, 1H), 6.53 (br s, 1
H), 6.08 (br s,1H), 5.08-5.15 (m, 1H), 4.86-4.96
(m, 1H), 4.55-4.64 (m, 2H), 4.38-4.53(m, 3H), 3.9
7-4.18 (m, 4H), 3.84-3.92 (m, 1H), 3.22-3.42 (m, 2
H), 3.06-3.18 (m, 2H), 2.52-2.81 (m, 2H), 2.30-2.4
5 (m, 2H), 1.99 (2s, 6H), 1.10-2.22 (m, 30H), 1.44
(s, 9H), 0.81-1.10 (m, 21H)

【００３８】合成例４

【化２６】 合成例３で得られた化合物のTFA溶液（１０mL）を室温
で３０分攪拌した。溶媒を留去した後、得られた粗生成
物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで精製し目的
の化合物を０.２８ｇ得た。

【００３９】

【化２７】 得られた化合物（５０mg）を８０％メタノール（５０m
L）に溶解し、これをメタノール（５０mL）と６Ｍ塩酸
（２０mL）およびヨウ素溶液（ヨウ素３８０mgをメタノ
ール７５mLに溶解したもの）の混合溶液中に、氷冷下滴
下して加えた。氷冷下１０分間攪拌した後、アスコルビ
ン酸水溶液（アスコルビン酸４００mg／１００mL）をヨ
ウ素の色が消えるまで滴下して加えた。メタノールを除
いた後、クロロホルムの１０％メタノール溶液で２回抽
出した。得られた抽出液を無水硫酸ナトリウムで乾燥し
た。溶媒を留去した後、得られた粗生成物をエーテルで
結晶化して目的の二環式デプシペプチド（化合物１）を
２３mg得た。 MS(M⁺); 998¹ H-NMR (δ ppm、CDCl₃）12.2 (s, 1H), 8.82 (d, J=9.
3Hz, 1H), 8.60 (d, J=6.8Hz, 1H), 8.48 (d, J=6.8Hz,
1H), 8.53 (br s, 1H), 8.17 (d, J=4.4Hz, 1H), 7.92
(d, J=8.8Hz, 1H), 7.47 (d, J=6.8Hz, 1H), 7.27 (s,
1H), 6.72 (s,1H), 5.40 (s, 1H), 5.07 (br s, 1H),
4.90-5.01 (m, 1H), 4.53-4.66 (m, 1H), 3.97-4.51
(m, 4H), 3.51-3.64 (m, 2H), 2.57-3.06 (m, 6H), 1.9
9-2.18 (m, 3H), 1.69-1.96 (m, 3H), 1.34-1.68 (m, 7
H), 1.10-1.22 (m, 18H), 0.67-0.95 (m, 21H)

【００４０】試験例 １ 以下に合成例４によって得られた化合物１がHep Ｇ２細
胞において、アポリポプロテインＥ産生促進作用を有す
ることを、試験方法とともに記す。まず、Hep Ｇ２細胞
１×１０⁵個／ml〔ダルベッコ変法イーグル培地（日水
製薬社製；以後「Ｄ−ＭＥＭ培地」と呼ぶ）に10％の牛
胎児血清を加えたものに懸濁〕を２４穴組織培養用プレ
ートに１mlずつ注入し、３７℃で炭酸ガス５％および空
気９５％の混合ガス雰囲気下で３日間培養した。その後
培地をピペッターにて除去し、新たにＤ−ＭＥＭ培地１
mlを加え、再び、３７℃で炭酸ガス５％および空気９５
％の混合ガス雰囲気下で１日培養した後に培地をピペッ
ターにて除去し、新たにＤ−ＭＥＭ培地０.５mlで３回
洗浄した。新たなＤ−ＭＥＭ培地１mlを加え、さらに本
発明の二環式デプシペプチドである化合物１を表３に示
す濃度でメタノールに溶解したメタノール溶液１０μl
を加え、さらに３７℃で７時間培養し、培養液とした。
培養液中に生成したアポリポプロテインＥを定量した。
アポリポプロテインＥの定量法は以下に示すエンザイム
イムノアッセイ法により行った。なお、エンザイムイム
ノアッセイ法で使用した緩衝液の組成を以下の表１に示
す。なお、ＰＢＳとはリン酸緩衝液を、ＰＢＳ−ＴはTw
een２０を添加したリン酸緩衝液を示し、ブッロキング
液は大日本製薬社製の乳タンパク質由来の免疫ブロック
剤「Block Ace」を含むリン酸緩衝液である。

【００４１】

【表１】 表 １ ＰＢＳ（pH 7.2) KH₂PO₄ 0.2ｇ Na₂HPO₄・12H₂O 2.9ｇ NaCl 8.Oｇ KCl 0.2ｇ 蒸留水 適量 全量 1000ml ＰＢＳ-Ｔ（pH 7.2) KH₂PO₄ 0.2ｇ Na₂HPO₄・12H₂O 2.9ｇ NaCl 8.Oｇ KCl 0.2ｇ Tween 20 0.5ｇ 蒸留水 適量 全量 1000ml ブロッキング液(pH 7.2) Block Ace 250ml KH₂PO₄ 0.2ｇ Na₂HPO₄・12H₂O 2.9ｇ NaCl 8.Oｇ KCl 0.2ｇ 蒸留水 適量 全量 1000ml

【００４２】マウス抗ヒトアポリポプロテインＥモノク
ローナル抗体（仏国BYOSIS, S.A.社製）を０.０５Ｍ炭
酸水素ナトリウム水溶液（pH９.５）に５μｇ／mlの濃
度で溶解した。この５０μlをヌンクイムノプレートに
分注し、４℃で１６時間静置した。ＰＢＳ ３００μlで
３回洗浄後、ブロッキング液３００μlを加え、３７℃
で２時間静置した。再びＰＢＳ ３００μlで３回洗浄
し、前記の培養液１を５０μl加え、室温で２時間静置
した。ＰＢＳ−Ｔ ３００μlで３回洗浄後、ヤギ抗アポ
リポプロテインＥポリクローナル抗体（米国ケミコン社
製）の３０００倍希釈液（１０％Block Ace水溶液）５
０μlを加え、室温で２時間静置した。PBS-T 300μlで
３回洗浄し、ペルオキシダーゼ標識抗ヤギＩｇＧポリク
ローナル抗体 （英国バインディングサイト社製）の５
０００倍希釈液（10％ Block Ace水溶液）を加え、室温
で２時間静置した。ＰＢＳ−Ｔ ３００μlで５回洗浄
後、発色液〔組成：0.1Ｍクエン酸カリウム（pH 4.5）
１ml、30％過酸化水素水0.4μl、オルトフェニレンジア
ミン１mg〕１００μlを加え、そのまま２分間放置し
た。２Ｎ硫酸１００μlを加え反応を止め、６５０nmを
対照としたときの４９０nmの吸光度を測定した。市販の
アポリポプロテインＥ（米国ケミコン社製）を標品とし
た場合の検量線より培養液１〜６のアポリポプロテイン
Ｅの絶対量を求めた。

【００４３】本発明の二環式デプシペプチドのメタノー
ル溶液の代わりに単にメタノールを加えた以外はこの試
験例の操作と同一の操作を行い、アポリポプロテインＥ
量を測定し、これをコントロールとした。各サンプルの
相対アポリポプロテインＥ量はこれとコントロールを１
００とした時の相対値（％）で表した。表２に示すよう
に、本発明の化合物１は、１ないし５μMでアポリポプ
ロテインＥの産生量を強力に促進する活性を有すること
が認められた。

【００４４】

【表２】 表 ２ 化合物 濃度（μM) 相対アポリポプロテインＥ量（％） １ １ １９６ ５ ２３０ 以上の結果より、本発明の二環式デプシペプチドは、He
p Ｇ２細胞のアポリポプロテインＥの産生を低濃度で強
力に促進することから、新しいタイプの神経損傷治療
薬、抗痴呆薬としてまた、高脂血症の治療薬として有用
である。

【００４５】 （製剤例） （製剤例１） 錠剤（１錠） 化合物１ 20mg けい酸マグネシウム 20mg 乳糖 98.5mg ヒドロキシプロピルセルロース 7.5mg ステアリン酸マグネシウム 1mg 植物硬化油 3mg 計 150mg 化合物１、けい酸マグネシウム及び乳糖を混合し、これ
をヒドロキシプロピルセルロースを溶解したアルコール
液で練合し、次いで適当な粒度に造粒し、乾燥、整粒後
さらにステアリン酸マグネシウム及び植物硬化油を添加
混合し均一な顆粒とする。次いでロータリー式打錠機に
より直径７.０mm、重量１５０mgおよび硬度６kgの錠剤
を調製した。

【００４６】（製剤例２） 顆粒剤 化合物１ 10mg 酸化マグネシウム 40mg りん酸水素カルシウム 38mg 乳糖 10mg ヒドロキシプロピルセルロース 20mg 上記処方例中ヒドロキシプロピルセルロースを除いた各
原料を均一に混合し、これにヒドロキシプロピルセルロ
ースを溶解したアルコール溶液を加えて練合した後押出
造粒機により造粒し、乾燥して顆粒を得た。この顆粒を
整粒して１２メッシュの篩を通過し４８メッシュの篩上
に残留するものを顆粒剤とした。

【００４７】 白糖、Ｄ−ソルビトール７０w／v％、パラオキシ安息香
酸エチル、パラオキシ安息香酸プロピル及び化合物１を
精製水（温水）６０ｇに溶解した。冷却後香味料を溶解
したグリセリン及び９６％エタノールの溶液を加えた。
次にこの混合物に精製水を加えて１００mlにした。

【００４８】 炭酸水素ナトリウム、塩化ナトリウム及びこの化合物１
のナトリウム塩を蒸留水に加えて溶解し、全量を１０.
０mlとした。

【００４９】 化合物１にグリセリンを加えて溶解した。そこへ、マク
ロゴール４０００を加えて加温し溶解後、坐剤型に注入
して冷却固化し１個あたり1.5ｇの坐剤を製造した。

【００５０】

【本発明の効果】本発明の二環式デプシペプチドは、ア
ポリポプロテインＥ産生促進作用を有する。アポリポプ
ロテインＥは神経損傷の修復作用を有するので、神経損
傷治療薬、特に抗痴呆薬として有用であり、また、アポ
リポプロテインＥはコレステロールおよびトリグリセリ
ドの血中濃度を低下させる作用を有するので本発明のデ
プシペプチドは高脂血症の治療薬として有用である。

フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 38/00 Ｃ０７Ｋ 11/00 Ｃ０７Ｋ 11/00 Ａ６１Ｋ 37/02 (72)発明者 川村 恒二 埼玉県入間郡大井町鶴ヶ岡５丁目３番１号 日清製粉株式会社創薬研究所内 (72)発明者 平本 茂 埼玉県入間郡大井町鶴ヶ岡５丁目３番１号 日清製粉株式会社創薬研究所内 (72)発明者 保田 織恵 埼玉県入間郡大井町鶴ヶ岡５丁目３番１号 日清製粉株式会社創薬研究所内 (72)発明者 木下 宣祐 埼玉県入間郡大井町鶴ヶ岡５丁目３番１号 日清製粉株式会社創薬研究所内 (72)発明者 真貝 明子 埼玉県入間郡大井町鶴ヶ岡５丁目３番１号 日清製粉株式会社創薬研究所内 (72)発明者 高須 雅子 埼玉県入間郡大井町鶴ヶ岡５丁目３番１号 日清製粉株式会社創薬研究所内

Claims (9)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 一般式（１） 【化１】 （式中、Ｒは炭素数５〜２０の直鎖状もしくは有枝鎖状
   のアルキル基または炭素数５〜１５の直鎖状もしくは有
   枝鎖状のアルコキシメチル基を示し、Ａ、Ｄ、Ｅおよび
   Ｊはそれぞれ独立して、アラニン、バリン、ロイシン、
   イソロイシン、セリン、トレオニン、リシン、ヒドロキ
   シリシン、アルギニン、システイン、メチオニン、フェ
   ニルアラニン、チロシン、トリプトファン、ヒスチジ
   ン、プロリン、４−ヒドロキシプロリン、アスパラギン
   酸、グルタミン酸、ピペリジン−４−カルボン酸、ホモ
   プロリン、オクタヒドロインドール−２−カルボン酸、
   ノルバリン、ノルロイシン、α−ｔ−ブチルグリシン、
   シクロヘキシルグリシン、アゼチジン−２−カルボン
   酸、３−(３−ピリジル)アラニン、（３−Ｎ−メチル）
   ピペリジルアラニン、３−（２−ナフチル）アラニン、
   β−シクロヘキシルアラニン、β−ｔ−ブチルアラニ
   ン、９−アントラセニルアラニン、α−メチルアラニン
   および２−アミノブタン酸から選ばれるアミノ酸残基ま
   たはこれらアミノ酸残基のＮ−Ｃ₁〜Ｃ₄アルキル体を示
   し、ＢおよびＦは同一または異なってシステイン、アス
   パラギン酸、グルタミン酸、リシン、ヒドロキシリシン
   またはセリンから選ばれるアミノ酸残基を示し、Ｇはジ
   スルフィド結合、アミド結合またはエステル結合を示
   し、Ｗはアスパラギン酸またはグルタミン酸から選ばれ
   るアミノ酸残基を示し、Ｚはアスパラギン酸、アスパラ
   ギン、グルタミン酸およびグルタミンから選ばれるアミ
   ノ酸残基を示し、ｌ、ｍ、ｎ、ｐおよびｑはそれぞれ独
   立して０または１を示す。但し結合Ｇはアミノ酸残基Ｂ
   およびＦにそれぞれ含まれるチオール基、カルボキシル
   基、水酸基またはアミノ基が相互に結合して形成される
   ものであり、上記アミノ酸残基における遊離のアミノ
   基、カルボキシル基、水酸基、メルカプト基またはω−
   カルバミド基が存在する場合はそれらの基の保護基とし
   てペプチド化学で通常用いられる基でそれぞれ保護され
   ていてもよく、そして、上記Ａ、Ｂ、Ｄ、Ｅ、Ｆ、Ｊ、
   ＷおよびＺにおけるアミノ酸残基がリシン、ヒドロキシ
   リシン、グルタミン酸またはアスパラギン酸である場合
   は、それらのアミノ酸のα−またはω−位のアミノ基ま
   たはカルボキシル基で隣接するアミノ酸とペプチド結合
   を形成することができる。）で示される二環式デプシペ
   プチドまたはその薬理学的に許容される塩。
2. 【請求項２】 前記一般式（１）において、Ａ、Ｊ、
   Ｄ、およびＥがそれぞれ独立して、アラニン、バリン、
   ロイシン、イソロイシン、セリン、トレオニン、リシ
   ン、アルギニン、システイン、メチオニン、フェニルア
   ラニン、チロシン、トリプトファン、ヒスチジン、プロ
   リン、アスパラギン酸およびグルタミン酸から選ばれる
   アミノ酸残基またはこれらアミノ酸残基のＮ−Ｃ₁〜Ｃ₄
   アルキル体である請求項１に記載の二環式デプシペプチ
   ドまたはその薬理学的に許容される塩。
3. 【請求項３】 前記一般式（１）において、Ｂがシステ
   イン残基、Ｊがロイシン、アラニン、β−ｔ−ブチルア
   ラニン、バリンまたはフェニルアラニンから選ばれるア
   ミノ酸残基、Ｄがバリンまたはアラニンから選ばれるア
   ミノ酸残基、Ｅがロイシン、イソロイシン、アラニン、
   β−ｔ−ブチルアラニン、バリンまたはフェニルアラニ
   ンから選ばれるアミノ酸残基、Ｆがシステイン残基、Ｗ
   がアスパラギン酸またはグルタミン酸から選ばれるアミ
   ノ酸残基、そしてＺがアスパラギン酸、グルタミン酸、
   グルタミンまたはアスパラギンから選ばれるアミノ酸残
   基であり、Ｇがジスルフィド結合であり、ｌ、ｍおよび
   ｎが０または１であり、ｐが０であり、ｑが１であり、
   そしてＲが炭素数６〜１２の直鎖状または有枝鎖状のア
   ルキル若しくはアルコキシメチル基である請求項１およ
   び２記載の二環式デプシペプチドまたはその薬理学的に
   許容される塩。
4. 【請求項４】 前記一般式（１）において、Ａがイソロ
   イシン、ロイシン、アラニン、β−ｔ−ブチルアラニ
   ン、バリンまたはフェニルアラニンから選ばれるアミノ
   酸残基、Ｂがシステイン残基、Ｄがバリンまたはアラニ
   ンから選ばれるアミノ酸残基、Ｅがロイシン、イソロイ
   シン、アラニン、β−ｔ−ブチルアラニン、バリンまた
   はフェニルアラニンから選ばれるアミノ酸残基、Ｆがシ
   ステイン残基、Ｗがアスパラギン酸またはグルタミン酸
   から選ばれるアミノ酸残基、そしてＺがアスパラギン
   酸、グルタミン酸、グルタミンまたはアスパラギンから
   選ばれるアミノ酸残基であり、Ｇがジスルフィド結合で
   あり、ｌ、ｍおよびｎが０または１であり、ｐが１であ
   り、ｑが０であり、そしてＲが炭素数６〜１２の直鎖状
   または有枝鎖状のアルキル若しくはアルコキシメチル基
   である請求項１および２記載の二環式デプシペプチドま
   たはその薬理学的に許容される塩。
5. 【請求項５】 請求項１〜４に記載の二環式デプシペプ
   チドまたはその薬理学的に許容される塩を有効成分とす
   る医薬。
6. 【請求項６】 請求項５記載の医薬が、アポリポプロテ
   インＥ産生促進薬である医薬。
7. 【請求項７】 請求項５記載の医薬が、神経損傷治療薬
   である医薬。
8. 【請求項８】 請求項５記載の医薬が、痴呆症治療薬で
   ある医薬。
9. 【請求項９】 請求項５記載の医薬が、高脂血症治療薬
   である医薬。