JPH11285391A - 抗ｈｉｖ剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【解決手段】 ＣＸＣＲ４蛋白をコードする染色体ＤＮ
Ａおよび／またはＲＮＡと特異的にハイブリダイズし
て、ＣＸＣＲ４蛋白の発現を阻害することを特徴とする
アンチセンスオリゴヌクレオチドおよびこのアンチセン
スオリゴヌクレオチドを含む抗ＨＩＶ剤が提供される。 【効果】 本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドお
よび抗ＨＩＶ剤は、ＣＸＣＲ４蛋白の発現を抑制し、Ｈ
ＩＶの感染阻害活性を有するので、ＨＩＶ感染症の治療
および予防薬として有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、ＣＸＣＲ４蛋白を
コードする染色体ＤＮＡおよび／またはＲＮＡに対する
アンチセンスオリゴヌクレオチドとそれを含む抗ＨＩＶ
剤に関するものである。さらに詳しく言うと、本発明
は、エイズ感染に関与する細胞側のレセプターであるＣ
ＸＣＲ４蛋白の染色体ＤＮＡおよび／またはＲＮＡと特
異的にハイブリダイズして、その発現を抑制することに
より、ＨＩＶ感染を阻害し得るアンチセンスオリゴヌク
レオチドとそれを含む抗ＨＩＶ剤に関するものである。

【０００２】

【従来の技術】エイズは、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩ
Ｖ）感染によって引き起こされ、細胞性免疫が著しい障
害を受ける結果、種々の日和見感染、リンパ腫、神経障
害等を発症して、最終的には確実に死に至る疾患であ
る。現在の治療法としては、アジドチミジン（ＡＺ
Ｔ）、ジデオキシイノシン（ｄｄＩ）、ジデオキシシチ
ジン（ｄｄＣ）等の逆転写酵素阻害剤と、サクシナビ
ル、リトナビル、インディナビル等のプロテアーゼ阻害
剤の単独または併用療法が報告されている（Ｈａｍｍｅ
ｒ,Ｓ.Ｍ. ｅｔ ａｌ．，Ｎｅｗ Ｅｎｇｌ.Ｊ.Ｍｅ
ｄ．,３３５,１０８１−１０９０,１９９６）。ヌクレ
オシド系逆転写酵素阻害剤は、ＨＩＶが細胞に侵入した
後、ウイルス自身の持つ逆転写酵素がウイルスの遺伝情
報をＲＮＡからＤＮＡに変換する段階に作用して、ウイ
ルスの染色体への組み込みを阻止するものである。しか
し、これら逆転写酵素阻害剤およびプロテアーゼ阻害剤
は、長期投与によって容易に耐性ウイルスが出現し、薬
剤が無効となる例がある（Ｓｈｉｒａｓａｋａ,Ｔ. ｅ
ｔ ａｌ.,Ｐｒｏｃ.Ｎａｔｌ.Ａｃａｄ.Ｓｃｉ.ＵＳＡ,
９２,２３９８−２４０２,１９９５；Ｃｏｎｄｒａ,Ｊ.
Ｈ.ｅｔ ａｌ.,Ｎａｔｕｒｅ,３７４,５６９−５７１,
１９９５）。さらに、細胞側のＤＮＡ代謝にも異常を引
き起こすため、長期投与による貧血、白血球減少、悪
心、頭痛、倦怠感、昏迷や筋炎等の副作用も数多く報告
されており、新しい治療法の開発が強く望まれている。

【０００３】ＨＩＶの主な標的細胞は、ＣＤ４陽性Ｔ細
胞とマクロファージである。ＨＩＶは大きく分けて、Ｃ
Ｄ４陽性Ｔ細胞に感染するがマクロファージには感染し
ない株（Ｔ細胞指向性ＨＩＶ）、マクロファージに感染
するがＣＤ４陽性Ｔ細胞には感染しない株（マクロファ
ージ指向性ＨＩＶ）、およびいずれの細胞にも感染でき
る株（両指向性ＨＩＶ）の３種類に分類される。以前よ
りＨＩＶの細胞側のレセプターとしてＣＤ４が知られて
いるが、このＨＩＶのＴ細胞指向性に関与する第２のレ
セプター（セカンドレセプター）が１９９６年に同定さ
れ、ＣＸＣＲ４と命名された（Ｆｅｎｇ,Ｙ.,ｅｔ ａ
ｌ.,Ｓｃｉｅｎｃｅ,２７２,８７２−８７７（１９９
６））。また、同時期にマクロファージ指向性ＨＩＶの
セカンドレセプターとしてＣＣＲ５が同定された（Ａｌ
ｋｈａｔｉｂ,Ｇ.ｅｔ ａｌ.,Ｓｃｉｅｎｃｅ,２７２,
１９５５−１９５８,１９９６）。これらセカンドレセ
プターはＣＤ４と共にＨＩＶが感染するために必須の細
胞側因子であるが、本来は生体内で分泌されるケモカイ
ンに対する受容体であり、ＣＸＣＲ４のリガンドはＳＤ
Ｆ１、ＣＣＲ５のリガンドはＭＩＰ−１α、ＭＩＰ−１
βおよびＲＡＮＴＥＳであることも明らかにされてい
る。

【０００４】ＨＩＶ感染症に対する治療法に関しては、
これまで多くの報告があるが、ＨＩＶのゲノム遺伝子の
変異は哺乳動物由来の細胞のゲノム遺伝子に比べて非常
に高い確率で起こるために、ＨＩＶに対して特異的に作
用する薬物を考案しても変異したＨＩＶには作用できな
くなってしまうという欠点があった。このようなＨＩＶ
側の因子を対象とした研究の方向性に対して、ＨＩＶの
感染に関わる細胞側の因子を制御することでＨＩＶ感染
症の治療を行なおうとする試みがなされるようになって
きた。この方法は、細胞のゲノム遺伝子が変異を起こし
にくいため、逆転写酵素阻害剤にみられるような耐性ウ
イルスが出現して薬剤が無効となる可能性が少ない。ま
た、従来の抗ＨＩＶ薬は細胞に感染後のウイルス自身に
作用するものであったのに対し、この方法はＨＩＶの感
染段階を阻害するため、細胞自身にＨＩＶの侵入がな
く、細胞の生存率およびその機能を損なう可能性が少な
い。

【０００５】近年、これらセカンドレセプターに着目し
たＨＩＶ感染症治療の基礎的検討も数多く報告されるよ
うになってきた。例えば、ＳＤＦ１、ＭＩＰ−１α、Ｍ
ＩＰ−１βおよびＲＡＮＴＥＳは、レセプターを競合す
ることによる拮抗阻害の様式で、それぞれＴ細胞指向性
ＨＩＶおよびマクロファージ指向性ＨＩＶの感染を阻害
すること（Ｂｌｅｕｌ,Ｃ.Ｃ.,ｅｔ ａｌ.,Ｎａｔｕｒ
ｅ,８２９−８３３,１９９６；Ｃｏｃｃｈｉ,Ｆ.,ｅｔ
ａｌ.,Ｓｃｉｅｎｃｅ,２７０,１８１１−１８１５,１
９９５）、そのアンタゴニストがＨＩＶの感染を阻害す
ることや、標的細胞内でケモカインを過剰発現させるこ
とで、細胞表面にレセプターを発現させない方法等が考
えられている（Ｃｈｅｎ,Ｊ.Ｄ.,ｅｔ ａｌ.,Ｎａｔｕ
ｒｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ,３,１１１０−１１１６,１９９
７）。しかし、ケモカインの大量投与は、ＨＩＶ感染細
胞を刺激する結果、大量のＨＩＶを放出する可能性があ
り（Ｓｃｈｍｉｄｔｍａｙｅｒｏｖａ,Ｈ.,ｅｔ ａｌ.,
Ｎａｔｕｒｅ,３８２,７６７,１９９６）、実際に治療
に応用しようとする場合には効果に疑問がある。

【０００６】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記事情に
鑑みてなされたものであり、ＨＩＶに感染する際の標的
細胞のＣＸＣＲ４蛋白の発現を抑制することにより、Ｈ
ＩＶ感染を阻害し、エイズ感染を予防、治療することが
できるアンチセンスオリゴヌクレオチドおよびそれを含
む抗ＨＩＶ剤を提供することを目的とする。

【０００７】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上述の課
題を解決するために鋭意研究した結果、ＣＸＣＲ４蛋白
の発現を特異的に抑制し、ＨＩＶの細胞への感染を阻害
するアンチセンス遺伝子配列を見い出すことに成功し、
本発明を完成した。なお、本アンチセンス核酸配列は、
ＣＸＣＲ４蛋白をコードする遺伝子を標的遺伝子とし、
標的遺伝子が部分的に高次構造を形成する場合には、そ
の高次構造を形成する部分に対してアンチセンス核酸が
ハイブリダイズしにくいことを考慮して、標的遺伝子が
１本鎖状態である確立が高い配列部分を、内多らの開発
した「アンチセンスの調整方法」（特開平１０−５２２
８５号公報）を応用した「アンチセンス核酸標的部位検
索ソフト（ＰＡＳ^ＴＭ）」により選択し、本発明の完成
に至った。

【０００８】本発明は、ＣＸＣＲ４蛋白をコードする染
色体ＤＮＡおよび／またはＲＮＡと特異的にハイブリダ
イズして、ＣＸＣＲ４蛋白の発現を阻害する、下記
（Ａ）〜（Ｃ）のいずれか１以上の配列を含むことを特
徴とするアンチセンスオリゴヌクレオチドに関する。 （Ａ）配列表の配列番号１に記載の配列 （Ｂ）配列表の配列番号２に記載の配列 （Ｃ）配列表の配列番号３に記載の配列 本発明はさらに、前記アンチセンスオリゴヌクレオチド
を含む抗ＨＩＶ剤に関する。

【０００９】

【発明の実施の形態】以下、本発明を詳しく説明する。
本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＣＸＣＲ
４蛋白をコードする染色体ＤＮＡおよび／またはＲＮＡ
の一部の塩基配列に相補的なアンチセンスオリゴヌクレ
オチドである。本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチ
ドは、ＤＮＡであってもＲＮＡであってもよい。本発明
のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、ＣＸＣＲ４蛋白
をコードするｍＲＮＡの遺伝子転写開始点を＋１とした
場合、＋４２９から＋７５８までの塩基配列に対して相
補性を有するとともに、該配列と安定に特異的にハイブ
リダイズして蛋白への翻訳を遮断する結果、ＣＸＣＲ４
蛋白の生合成を抑制する作用を有する。

【００１０】本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチド
は、配列表の配列番号１〜３に記載の配列のいずれか１
以上を含むことが好ましい。配列番号１〜３に記載の配
列は、ＣＸＣＲ４蛋白遺伝子のアンチセンスＤＮＡ鎖を
示しており、配列番号１は、配列番号５（Ｎｏｍｕｒ
ａ,Ｈ.,ｅｔ ａｌ.,Ｉｎｔ.Ｉｍｍｕｎｏｌ.,５,１２３
９−１２４９,１９９３）に記載のＣＸＣＲ４蛋白のｃ
ＤＮＡの塩基配列の＋４２９から＋４５２に、配列番号
２は同じく配列番号５の＋７１５から＋７３６に、配列
番号３は同じく配列番号５の＋７３５から７５８に、そ
れぞれ対応している。

【００１１】本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチド
の長さの上限は、ＤＮＡ／ＲＮＡ合成機での遺伝子合成
効率が塩基数の増加と共に低下することや、合成コスト
の問題から、好ましくは１００塩基以下であり、より好
ましくは３０塩基以下である。また、遺伝子の長さの下
限は、アンチセンスオリゴヌクレオチドの特異性を保持
させるために、好ましくは８塩基以上であり、より好ま
しくは１２塩基以上であり、特に好ましくは１５塩基以
上である。

【００１２】本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチド
の合成方法は特に限定されず、例えば、通常のオリゴヌ
クレオチド合成機を用いたホスホロアミダイト法によ
り、ホスホロチオエート型やホスホトリエステル型のオ
リゴヌクレオチドを得ることができる。このような合成
方法により得られるアンチセンスオリゴヌクレオチドの
例としては、ホスホジエステル型のオリゴヌクレオチ
ド、生体に投与した場合のヌクレアーゼによる分解を防
ぐためにリン酸基がイオウ原子により共有結合で修飾さ
れたホスホロチオエート型のオリゴヌクレオチド、リン
酸骨格をメチル化したメチルホスホネート型オリゴヌク
レオチド、リン酸骨格の代わりにモルホリンが導入され
たモルホリン骨格オリゴヌクレオチド、膜透過性を高め
る目的で脂溶性物質のゲラニオールで修飾したオリゴヌ
クレオチド等を挙げることができる。

【００１３】本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチド
は、抗ＨＩＶ剤として用いることができる。この場合、
本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドを単独で用い
ることもできるが、目的細胞に確実に導入し、生体内に
おける分解を防ぐために、薬学的に許容される担体と組
み合わせた組成物として使用することが可能である。担
体は薬学的に許容される物質であれば特に制限されない
が、例えば、正電荷を有する高分子、リポソーム、マイ
クロスフィア等を好適に用いることができる。正電荷を
有する高分子としては、ＴｆＸ−５０（−１０、−２
０）（プロメガ社製）、トランスフェクタム（和光純薬
工業社製）、ＥｘＧｅｎ ５００（和光純薬工業社
製）、合成ポリアミノ酸またはその誘導体、具体的に
は、ＷＯ９５／０９００９号に記載のポリ−リジン：セ
リン（ＰＬＳ）、特開平９−１７６０３８号に記載のＰ
ＬＳのＰＥＧブロック修飾体等を挙げることができる。
リポソームとしては、リポフェクチン（ＧＩＢＣＯ社
製）、リポフェクトアミン（ＧＩＢＣＯ社製）、セルフ
ェクチン（ＧＩＢＣＯ社製）、ＤＭＲＩＥ−Ｃ（ＧＩＢ
ＣＯ社製）等を挙げることができる。マイクロスフィア
としては、スーパーフェクト（ＱＩＡＧＥＮ社製）等を
挙げることができる。これらの薬学的に許容され得る担
体と本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、公知
の方法により複合体を形成することができる。尚、本発
明のアンチセンスオリゴヌクレオチドおよび抗ＨＩＶ剤
の使用方法は特に限定はされないが、in vivo、in vitr
o、ex vivo等のいずれも使用可能である。

【００１４】本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチド
は、遺伝子発現をプロモーションする遺伝子配列を含む
遺伝子発現ベクターに挿入することにより、遺伝子治療
用アンチセンスＲＮＡ発現構築物として使用することも
できる。遺伝子発現ベクターとしては、プラスミド、組
み換えウイルス等を使用することができる。プラスミド
を遺伝子発現ベクターとして選択した場合は、プラスミ
ド単独で用いることもできるが、ヌクレアーゼによる分
解の防止および遺伝子発現効率の向上のためには、薬学
的に許容される担体との複合体を形成した組成物として
使用することが好ましい。また、組み換えウイルスは、
哺乳動物由来の細胞、好ましくはヒト由来の細胞に感染
可能であれば特に制限なく使用することが可能であり、
マウス白血病ウイルス、アデノウイルス、アデノ関連ウ
イルス、ヒト免疫不全ウイルス、シンドビスウイルス、
ヘルペスウイルス、センダイウイルス、エプスタインバ
ーウイルスより選択することができ、これらの中でもマ
ウス白血病ウイルス、アデノウイルス、アデノ関連ウイ
ルス、ヒト免疫不全ウイルスは好ましく、ヒト免疫不全
ウイルスは特に好ましい。アンチセンスＲＮＡ発現遺伝
子構築物の使用方法は特に限定されず、in vivo、in vi
tro、ex vivoのいずれも使用可能である。

【００１５】

【実施例】以下、本発明を実施例によりさらに詳しく説
明するが、これらの実施例は本発明の理解を助けるため
のものであり、本発明の範囲を限定するものではない。
実施例において、配列番号５は、ＣＸＣＲ４蛋白のｃＤ
ＮＡの塩基配列（Ｎｏｍｕｒａ,Ｈ.,ｅｔ ａｌ.,Ｉｎ
ｔ.Ｉｍｍｕｎｏｌ.,５,１２３９−１２４９,１９９
３）を示す。また、配列番号４は、陰性対照群であるＣ
ＣＲ５遺伝子のアンチセンスＤＮＡ鎖の配列を示す（比
較例）。

【００１６】（実施例１） （アンチセンスオリゴヌクレオチドの合成および精製）
配列表の配列番号１〜３のアンチセンスオリゴヌクレオ
チドは、ＤＮＡ合成機（Expedite PerSeptive社製）を
用いて、ホスホロアミダイト法により公知の条件下でホ
スホロチオエート型を合成し、次いで、逆相ＨＰＬＣ
（Waters社製）を用いて公知の条件下で精製することに
より得た。配列番号１〜３は、ＣＸＣＲ４蛋白遺伝子の
アンチセンスＤＮＡ鎖であり、配列番号１は配列番号５
の＋４２９から＋４５２に、配列番号２は配列番号５の
＋７１５から＋７３６に、配列番号３は配列番号５の＋
７３５から７５８にそれぞれ対応する。

【００１７】（実施例２） アンチセンスオリゴヌクレオチドと遺伝子導入試薬との
複合体（抗ＨＩＶ剤）の調製 遺伝子導入製剤（薬学的に許容される担体）としてＧＩ
ＢＣＯ社製のＤＭＲＩＥ−Ｃ試薬を用いた。５００μｌ
のＯｐｔｉ−ＭＥＭ培地（ＧＩＢＣＯ社製）に、配列番
号１〜３のアンチセンスオリゴヌクレオチドをそれぞれ
２μＭとなるように調製し、Ａ液とした。また、５００
μｌのＯｐｔｉ−ＭＥＭ培地に、ＤＭＲＩＥ−Ｃ試薬を
２０μｇ／ｍｌとなるように調製し、Ｂ液とした。Ａ液
にＢ液を加え、緩やかに振盪した後、３０分間室温で放
置することにより、アンチセンスオリゴヌクレオチド／
ＤＭＲＩＥ−Ｃ複合体を得た。また、比較例として、配
列番号４のアンチセンスオリゴヌクレオチドを用い、同
様の複合体を得た。

【００１８】（試験例１） ＣＸＣＲ４蛋白発現抑制効果試験 （Ａ）培養細胞へのアンチセンスオリゴヌクレオチドの
導入 配列番号１〜４のアンチセンスオリゴヌクレオチドのＣ
ＸＣＲ４蛋白発現抑制効果を、培養細胞系において検討
した。細胞は内因性のＣＸＣＲ４蛋白を恒常的に発現
し、ＣＤ４蛋白を恒常的に発現するようにＣＤ４蛋白を
コードする遺伝子を組み込んだＨｅＬａ細胞を用いた
（以下、ＣＤ４ＨｅＬａ細胞と言う）。ＣＤ４ＨｅＬａ
細胞を、３７℃、５％ＣＯ _２条件下で１０％牛胎児血清
（ＦＣＳ：ＧＩＢＣＯ社製）および抗生物質を添加した
ダルベッコ改良イーグル培地（ＤＭＥＭ：ＧＩＢＣＯ社
製）中において維持した。このＣＤ４ＨｅＬａ細胞を、
６ウェルプレートに５×１０^５個／ウェルとなるように
播種し、１晩培養した後、細胞をＯｐｔｉ−ＭＥＭで２
回洗浄し、実施例２で調製たアンチセンスオリゴヌクレ
オチド／ＤＭＲＩＥ−Ｃ複合体を１ｍｌ添加した。３７
℃、５％ＣＯ_２の条件下で４時間培養した後、１０％Ｆ
ＣＳを含む５ｍｌのＤＭＥＭを加え、３７℃、５％ＣＯ
_２の条件下でさらに培養した。

【００１９】（Ｂ）ＣＸＣＲ４蛋白の蛍光抗体法による
検出 上記（Ａ）においてアンチセンスオリゴヌクレオチドを
導入した細胞を、６、１２、２４、４８時間ごとに採取
し、ＣＸＣＲ４に対するモノクロナール抗体（ＰＨＡＲ
ＭＩＮＧＥＮ社製）で処理した後、ＦＩＴＣ標識した２
次抗体（Ｊａｃｋｓｏｎ ＩｍｍｕｎｏＲｅｓｅａｒｃ
ｈ社製）で染色した。染色した細胞を、ＦＡＣＳ Ｃａ
ｌｉｂｕｒフローサイトメーター（Ｂｅｃｔｏｎ Ｄｉ
ｃｋｉｎｓｏｎ社製）を用いてＣＸＣＲ４陽性細胞の比
率を解析した。結果を図１に示す。アンチセンスオリゴ
ヌクレオチド非投与群および配列番号４（比較例）で
は、４８時間の培養期間においてＣＸＣＲ４陽性細胞の
比率に変化がなかったが、配列番号１〜３のアンチセン
スオリゴヌクレオチド投与群では、２４時間以降におい
てＣＸＣＲ４陽性細胞の比率が著しく減少した。この結
果から、本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドは、
ＣＸＣＲ４蛋白の発現抑制効果が非常に優れていること
が判明した。

【００２０】

【発明の効果】以上説明した通り、本発明のアンチセン
スオリゴヌクレオチドは、ＣＸＣＲ４蛋白の発現を抑制
し、ＨＩＶの感染を阻害することができる。従って、本
発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドおよびそれを含
む抗ＨＩＶ剤は、ＨＩＶ感染の予防及び治療薬として非
常に有効である。

【図面の簡単な説明】

【図１】本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチドのＣ
ＸＣＲ４蛋白発現抑制効果を示すグラフである。

【配列表】配列番号：1 配列の長さ：24 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：他の核酸 合成DNA アンチセンス：YES 配列の特徴：配列番号5の+429から+452に対応 配列 TGAGGACACTGCTGTAGAGGTTGA 配列番号：2 配列の長さ：22 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：他の核酸 合成DNA アンチセンス：YES 配列の特徴：配列番号5の+715から+736に対応 配列 GCAATAGCAGGACAGGATGACA 配列番号：3 配列の長さ：24 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：他の核酸 合成DNA アンチセンス：YES 配列の特徴：配列番号5の+735から+758に対応 配列 GTGACAGCTTGGAGATGATAATGC 配列番号：4 配列の長さ：26 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：他の核酸 合成DNA アンチセンス：YES 配列 TAAAGTCCTAGAATGTATTTAGTTGC 配列番号：5 配列の長さ：1664 配列の型：核酸 鎖の数：一本鎖 トポロジー：直鎖状 配列の種類：cDNA アンチセンス：NO 配列の特徴：CXCR4のcDNA 配列 CGGCAGCAGG TAGCAAAGTG ACGCCGAGGG CCTGAGTGCT CCAGTAGCCA CCGCATCTGG 60 AGAACCAGCG GTTACCATGG AGGGGATCAG TATATACACT TCAGATAACT ACACCGAGGA 120 AATGGGCTCA GGGGACTATG ACTCCATGAA GGAACCCTGT TTCCGTGAAG AAAATGCTAA 180 TTTCAATAAA ATCTTCCTGC CCACCATCTA CTCCATCATC TTCTTAACTG GCATTGTGGG 240 CAATGGATTG GTCATCCTGG TCATGGGTTA CCAGAAGAAA CTGAGAAGCA TGACGGACAA 300 GTACAGGCTG CACCTGTCAG TGGCCGACCT CCTCTTTGTC ATCACGCTTC CCTTCTGGGC 360 AGTTGATGCC GTGGCAAACT GGTACTTTGG GAACTTCCTA TGCAAGGCAG TCCATGTCAT 420 CTACACAGTC AACCTCTACA GCAGTGTCCT CATCCTGGCC TTCATCAGTC TGGACCGCTA 480 CCTGGCCATC GTCCACGCCA CCAACAGTCA GAGGCCAAGG AAGCTGTTGG CTGAAAAGGT 540 GGTCTATGTT GGCGTCTGGA TCCCTGCCCT CCTGCTGACT ATTCCCGACT TCATCTTTGC 600 CAACGTCAGT GAGGCAGATG ACAGATATAT CTGTGACCGC TTCTACCCCA ATGACTTGTG 660 GGTGGTTGTG TTCCAGTTTC AGCACATCAT GGTTGGCCTT ATCCTGCCTG GTATTGTCAT 720 CCTGTCCTGC TATTGCATTA TCATCTCCAA GCTGTCACAC TCCAAGGGCC ACCAGAAGCG 780 CAAGGCCCTC AAGACCACAG TCATCCTCAT CCTGGCTTTC TTCGCCTGTT GGCTGCCTTA 840 CTACATTGGG ATCAGCATCG ACTCCTTCAT CCTCCTGGAA ATCATCAAGC AAGGGTGTGA 900 GTTTGAGAAC ACTGTGCACA AGTGGATTTC CATCACCGAG GCCCTAGCTT TCTTCCACTG 960 TTGTCTGAAC CCCATCCTCT ATGCTTTCCT TGGAGCCAAA TTTAAAACCT CTGCCCAGCA 1020 CGCACTCACC TCTGTGAGCA GAGGGTCCAG CCTCAAGATC CTCTCCAAAG GAAAGCGAGG 1080 TGGACATTCA TCTGTTTCCA CTGAGTCTGA GTCTTCAAGT TTTCACTCCA GCTAACACAG 1140 ATGTAAAAGA CTTTTTTTTA TACGATAAAT AACTTTTTTT TAAGTTACAC ATTTTTCAGA 1200 TATAAAAGAC TGACCAATAT TGTACAGTTT TTATTGCTTG TTGGATTTTT GTCTTGTGTT 1260 TCTTTAGTTT TTGTGAAGTT TAATTGACTT ATTTATATAA ATTTTTTTTG TTTCATATTG 1320 ATGTGTGTCT AGGCAGGACC TGTGGCCAAG TTCTTAGTTG CTGTATGTCT CGTGGTAGGA 1380 CTGTAGAAAA GGGAACTGAA CATTCCAGAG CGTGTAGTTA ATCACGTAAA GCTAGAAATG 1440 ATCCCCAGCT GTTTATGCAT AGATAATCTC TCCATTCCCG TGGAACGTTT TTCCTGTTCT 1500 TAAGACGTGA TTTTGCTGTA GAAGATGGCA CTTATAACCA AAGCCCAAAG TGGTATAGAA 1560 ATGCTGGTTT TTCAGTTTTC AGGAGTGGGT TGATTTCAGC ACCTACAGTG TACAGTCTTG 1620 TATTAAGTTG TTAATAAAAG TACATGTTAA ACTTAAAAAA AAAA 1664

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 島田 隆 東京都文京区向丘１−20−６−801 (72)発明者 内多 潔 茨城県つくば市大久保２ 東亞合成株式会 社つくば研究所内

Claims (2)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ＣＸＣＲ４蛋白をコードする染色体ＤＮ
   Ａおよび／またはＲＮＡと特異的にハイブリダイズし、
   ＣＸＣＲ４蛋白の発現を阻害する、下記（Ａ）〜（Ｃ）
   のいずれか１以上の配列を含むことを特徴とするアンチ
   センスオリゴヌクレオチド。 （Ａ）配列表の配列番号１に記載の配列 （Ｂ）配列表の配列番号２に記載の配列 （Ｃ）配列表の配列番号３に記載の配列
2. 【請求項２】 請求項１記載のアンチセンスオリゴヌク
   レオチドを含む抗ＨＩＶ剤。