JPH11335267A - 水難溶性薬物を含有するポリマーミセル系 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 水難溶性薬物を封入したポリマーミセルの調
製方法およびそのようなポリマーミセルを含む組成物。 【解決手段】 ポリオキシエチレンセグメントを有する
親−疎水性ブロックコポリマーを用いる薬物含有ポリマ
ーミセルの調製方法であって、水混和性の有機溶媒中
で、ポリマーと薬物を混合し、次いで透析し、さらに超
音波照射にかける方法。および、このような方法で得る
ことのできる水難溶性薬物を封入したポリマーミセル組
成物。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、水難溶性薬物を含
有するポリマーミセル系に関し、より具体的には、実質
的に相互に凝集したポリマーミセルを含まない薬物含有
ポリマーミセル組成物の調製方法及びかような組成物に
関する。

【０００２】

【従来の技術】水難溶性または疎水性の薬物の生物学的
利用能を高めるべく、薬物をリポゾームやポリマーミセ
ル中に封入した系が知られている。これらのうち、親水
性ポリマーセグメントと疎水性ポリマーセグメントを有
するブロックコポリマーを用い、疎水性ポリマーセグメ
ントと薬物との疎水性結合形成能を始めとする相互作用
を介して薬物を該ポリマーのミセル中に封入する方法
は、広範な薬物への適用が可能であり、しかもサブミク
ロンの非常に小さな、薬物含有ポリマーミセルを提供で
きることから、特に興味深い。

【０００３】本発明者らの一部も、親水性ポリマーセグ
メントとして、ポリオキシエチレンセグメントを有し、
疎水性ポリマーセグメントとしてポリ−α−アミノ酸セ
グメントを有するブロックコポリマーが、疎水性薬物の
封入に適する薬物担持用担体として有用であることを見
い出し、かような担体それ自体およびそれらから形成さ
れるポリマーミセル中に多種多様な薬物を封入した薬物
含有ポリマーミセルを提供した（例えば、特開平６−１
０７５６５号公報または米国特許第５，４４９，５１３
号明細書参照）。かような薬物担持用担体は、一定の疎
水性薬物、特に、抗ガン剤、アドリアマイシン（ドキソ
ルビシン）、ダウノマイシン（ダウノルビシン）、メソ
トレキセート、マイトマイシンＣ等を効率よく封入する
ことができる点で注目に値いする。

【０００４】しかしながら、例えば、酸性水に対して溶
解性が高まるアドリアマイシンとは異なり、ｐＨの変動
等にかかわらず、実質的に水に溶解しないような水難溶
性薬物を上記薬物担持用担体のポリマーミセル中へ封入
する場合には、薬物含有ミセル相互間で凝集または会合
する可能性があり、目的とする大きさの薬物含有ポリマ
ーミセルを効率よく調製できない場合がある。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】したがって、本発明の
目的は、上記特開平６−１０７５６５号公報およびその
他の先行技術文献に記載の手段により、ある程度良好に
封入しうる疎水性薬物だけでなく、さらに水に実質的に
不溶性の水難性薬物をも効率よくポリマーミセル中に封
入しうる手段を提供することにある。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、それ自体
既知のポリマーミセル形成性ブロックコポリマーまたは
それらの修飾ポリマーを用いて、例えば上記のアドリア
マイシン等より遥かに水に難溶性である、ＫＲＮ５５０
０（６−［４−デオキシ−４−［（２Ｅ，４Ｅ）−テト
ラデカジエノイルグリシル］アミノ−Ｌ−グリセロ−β
−Ｌ−マンノヘプトピラノシル］アミノ−９Ｈ−プリ
ン、すなわち、スピカマイシン（spicamycin）の脂肪酸
鎖を有する半合成誘導体）を特定の有機溶媒中でポリマ
ーミセルを形成させる工程、次いで超音波処理工程を実
施すると、効率よく所望の薬物含有ポリマーミセルを提
供できることを見い出した。また、本発明者らは、該ブ
ロックコポリマーの修飾は、薬物のポリマーミセル中へ
の封入収率やポリマーミセルサイズを制御しうることも
見い出した。さらにまた、ＫＲＮ５５００のような実質
的に水不溶性のものに限定されることなく、従来の方法
によりある程度効率よくポリマーミセルに封入すること
のできた水難溶性（ＫＲＮ５５００程水難性ではない
が、いまだ水難溶性または疎水性といえるような）薬物
に適用した場合でも上記のような作用効果が得られるこ
とを見い出した。

【０００７】したがって、本発明によれば、水難溶性薬
物が親水性ポリマーセグメントと疎水性ポリマーセグメ
ントを有するブロックコポリマーのポリマーミセルのコ
アに主として存在する薬物含有ポリマーミセル組成物の
調製方法であって、（Ａ）水混和性有機溶媒中で、親水
性ポリマーセグメントとしてポリオキシエチレンセグメ
ントを有するブロックコポリマーと水難溶性薬物を混合
し、（Ｂ）得られた混合物を透析膜を介して水に透析す
ることにより薬物含有ポリマーミセルを形成し、そして
（Ｃ）該薬物含有ポリマーミセルを含む溶液または分散
液を超音波処理する、ことを特徴とする薬物含有ポリマ
ーミセル組成物の調製方法が提供される。

【０００８】上記親水性ポリマーセグメントとしてポリ
オキシエチレンセグメントを有するブロックコポリマー
のうち、下記式（Ｉ）または（ＩＩ）

【０００９】

【化３】

【００１０】［上記各式中Ｒ₁及びＲ_３は、それぞれ水
素原子または低級アルキル基を表し、Ｒ_２は水素原子、
飽和もしくは不飽和のＣ₁〜₂₉脂肪族カルボニル基また
はアリールカルボニル基を表し、Ｒ_４は水酸基、飽和も
しくは不飽和のＣ₁〜₃₀脂肪族オキシ基またはアリール
−低級アルキルオキシ基を表し、Ｌ_１は、−ＮＨ−、−
Ｏ−および−ＯＣＯ−Ｚ−ＮＨ−（ここで、ＺはＣ₁〜₄
アルキレン基である）からなる群より選ばれる連結基を
表し、Ｌ_２は、−ＯＣＯ−Ｚ−ＣＯ−および−ＮＨＣＯ
−Ｚ−ＣＯ−（ここで、ＺはＣ₁〜₄アルキレン基であ
る）の連結基を表し、Ｒは、水素原子または飽和もしく
は不飽和のＣ₁〜₃₀脂肪族基を表し、ｎは４〜２５００
の整数であり、ｘおよびｙは、同一もしくは異なり、そ
れらの合計が２〜３００となる整数であり、そしてｘお
よびｙを付した単位は、それらの単位がともに存在する
場合には、それぞれランダムに存在するか、またはブロ
ックを形成して存在することができる］で表されるブロ
ックコポリマーは、特に上記調製方法に好適に用いるこ
とができる。こうして調製されうる薬物含有ポリマーミ
セルが、相互に凝集したものを実質的に伴うことなく
（含んだとしても、最大１０％までである）薬物含有ポ
リマーミセルのみからなるか、或いは薬物として、ＫＲ
Ｎ５５００、タキソールおよびカンプトテシンならびに
それらの水難溶性誘導体からなる群より選ばれる薬物を
効率よくポリマーミセル中に有しており、かつ物理的に
安定であるので、かような薬物含有ポリマーミセルを含
む組成物の提供も可能となる。したがって、かような組
成物自体も本発明のもう一つの態様として提供される。

【００１１】

【発明の具体的な態様】本発明の調製方法に用いること
のできるブロックコポリマーは、親水性ポリマーセグメ
ントとしてポリオキシエチレンセグメントを有するブロ
ックコポリマーであって、本発明の目的（すなわち水難
溶性薬物を本発明の調製方法に従って、所望の特性を有
する薬物含有ポリマーミセル組成物を提供できる）を達
成できる如何なるポリマーも包含する。具体的には、限
定されるものでないが上記式（Ｉ）または（ＩＩ）で表
されるブロックコポリマーを始めとし、上記特開平６−
１０７５６５号公報に記載されるものや、ポリオキシエ
チレンセグメントとポリプロピレンオキシセグメントか
らなる米国特許第５，６９８，５２９号明細書に記載さ
れるようなものも本発明にいうブロックコポリマーに包
含される。なお、本明細書で用いる、「ポリマーセグメ
ント」または接頭辞「ポリ」の語は、本発明の目的に沿
う限り、オリゴマーまたはオリゴの意を包含する概念で
用いている。

【００１２】かようなブロックコポリマーを用いて、ポ
リマーミセル中に封入される水難性薬物は、該ポリマー
ミセル中に封入することで、薬物の生物学的利用能（バ
イオアベイラビリティー）を高めうる如何なる薬物をも
包含し、後述する抗腫瘍剤のような薬効により限定され
るものでなく、またステロイド（例、コルチゾン、テス
トステロン等）、アルカロイド（例、ビンクリスチン、
ビンブラスチン、コルヒチン等）、ペプチド（例、イン
スリン、カルシトニン等）、その他の水難溶性または疎
水性化合物等の化合物の種類によっても限定されるもの
でない。しかしながら、上記調製方法によれば、サブミ
クロン、より具体的に数十ｎｍ〜数百ｎｍの直径を有す
る薬物含有ポリマーミセルを効率よく調製することがで
きること、ならびにかような大きさのポリマーミセルは
腎性排出と網内皮細胞系による非特異的な捕捉とを回避
しうる可能性があること（例えば、Ｌ．Ｗ．Ｓｅｙｍｏ
ｕｒら、Ｊ．Ｂｉｏｍｅｄ．Ｍａｔｅｒ．Ｒｅｓ.，２
１（１９８７）、１３４１−１３５８、Ｄ．Ｃ．Ｌｉｔ
ｚｉｎｇｅｒら、Ｂｉｏｃｈｉｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ａ
ｃｔａ、１１９０、９９−１０７（１９９４）参照）、
また、ポリオキシエチレンセグメントがポリマーミセル
のシェルを形成するあるブロックコポリマーは薬物を高
い選択性で固型腫瘍部位へ送達しうる（例えば、Ｇ．
Ｓ．Ｋｗｏｎら、Ｊ．Ｃｏｎｔｒ．Ｒｅｌ.，２９（１
９９４）１７−２３参照）可能性があること等を考慮す
れば、上記薬物として、特に水難溶性または疎水性の抗
腫瘍性薬物を好適なものとして挙げることができる。か
ような抗腫瘍性薬物としては、限定されるものでない
が、アドリアマイシン、ダウノマイシン、メソトレキセ
ート、マイトマイシンＣ、ＫＲＮ５５００、タキソール
（taxol）、カンプトテシン（camptothecin：４−エチ
ル−４−ヒドロキシ−１Ｈ−ピラノ［３′，４′：６，
７］インドリジノ［１，２−ｂ］キノリン−３，１４
［４Ｈ，１２Ｈ］］ジオン）等、およびこれらの水難溶
性誘導体が挙げられる。本発明の調製方法により特に都
合よく用いることのできる薬物は、従来法では、必ずし
も効率よく薬物含有ポリマーミセル組成物を調製するこ
とができなかった、ＫＲＮ５５００、タキソール、カン
プトテシンを挙げることができる。

【００１３】本発明にいう組成物とは、薬物含有ポリマ
ーミセルを含有する如何なる組成物をも包含し、通常、
該ポリマーミセルを含有する水性媒体（例えば、滅菌
水、生理食塩水）または乳糖などの糖類を含めた液状物
もしくは凍結乾燥物等を意味する。これらの組成物は、
本発明の調製方法により得られたポリマーミセルをそれ
自体既知の処方により、場合によって医薬製剤の調製に
常用されている賦形剤、希釈剤等を用いて調製すること
ができる。

【００１４】本発明の調製方法で、使用しうる水混和性
有機溶媒は、ポリマーミセルに封入される薬物の種類に
よって最適のものが変りうるが、少なくとも、上記ブロ
ックコポリマーと薬物を溶解ないし均質に分散できる有
機溶媒、例えば、ジメチルホルムアミド（ＤＭＦ）、ジ
メチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）、アセトニトリル、テ
トラヒドロフラン（ＴＨＦ）等の極性溶媒である。これ
らの溶媒は、薬物の溶解性に悪影響を及ぼさない範囲、
例えば、５０［容量／容量％］まで水を含みうるが、水
が５容量／容量％以下のものが好ましく、さらに実質的
に水を加えていないものがより好ましい。「実質的に水
を加えていない」とは、これらの溶媒の工業的グレード
または試薬グレードに水を意図的に加えていないことを
意味する。したがって、「実質的に水を加えていない」
溶媒とは、絶対的な非水溶媒系であることに限定される
ものでない。

【００１５】かような溶媒中での上記ブロックコポリマ
ーと薬物の混合は、それぞれ別個にブロックコポリマー
含有液と薬物含有液を用意しておき、それらを混合する
か、あるいは、溶媒にブロックコポリマーと薬物を同時
に、または順次加えた後に混合してもよい。混合は、振
盪、機械的撹拌や超音波処理により行うことができる。
混合される薬物とブロックコポリマーの好適な含有比率
は、使用する溶媒、薬物およびブロックコポリマーに応
じて変動しうるが、通常、ブロックコポリマーに対する
薬物の比率は、重量基準で、１〜３００％、好ましくは
５〜５０％、特に好ましくは５〜３０％である。混合液
中の薬物およびブロックコポリマーの濃度は、それらが
使用され溶媒中で溶解または均質な状態で存在しうる濃
度であることができるが、通常、ブロックコポリマーに
ついて、０．０１〜４０（重量／容量）％、好ましくは
０．０５〜２５（重量／容量）％特に好ましくは０．１
〜１０（重量／容量）％である。混合処理は、混合液が
液体状であって、薬物を不活化しない温度であれば、如
何なる温度であってもよいが、通常、−５℃〜６０℃、
好ましくは室温付近（１５〜２５℃）において、混合液
が均質な状態になる時間、をかけて行う。

【００１６】こうして調製した混合液は、次いで、透析
膜を介し水に対して透析する。透析膜は、形成された薬
物含有ポリマーミセルを使用された原料、溶媒、薬物お
よびブロックコポリマー等から効率よく分離できるもの
であれば、材質および細孔の大きさ等により限定されな
い。しかしながら、通常、使用されるブロックコポリマ
ーの分子量に等しいか、それより大きい分子量の分離
（カット−オフ）能を有するセルロース系の透析膜を使
用することが好ましい。この処理は、上記混合処理温度
と同様の温度下で、少なくとも５時間行うことが好まし
い。

【００１７】上記透析後の薬物含有ポリマーミセルを含
む水性分散液を、次に、超音波処理にかける。超音波処
理は、通常、細胞等の破砕等に常用されているプローブ
式のソニケーター（sonicator）を使用して行うのが好
都合である。一般に、上記分散液を氷冷下（約４℃）で
行うことが好ましいが、薬物含有ポリマーミセルに悪影
響を及ぼさない温度であれば、如何なる温度であっても
よい。処理時間は、照射する音波の強度等により変動す
るが、分散液中に存在する薬物含有ミセルが目的とする
大きさ、通常、ミセルの平均直径が１μｍ未満、好まし
くは８００ｎｍ以下、あるいはミセル間で会合した状態
のものが存在しなくなるのに十分な時間を選ぶ。例え
ば、プローブ式ソニケーターの標準的な６ｍｍプローブ
を備えたモデルＶＣ１００（Ｓｏｎｉｃｓ ＆ Ｍａｔ
ｅｒｉａｌｓ Ｉｎｃ., Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ，Ｕ
ＳＡ）を用いる場合、１秒間音波照射と１秒間静置のサ
イクルで、数１０秒〜１２時間、好ましくは１〜１８０
分間の超音波処理を行う。

【００１８】こうして得られる薬物含有ポリマーミセル
は、透析処理により形成される可能性のあるミセルどう
しが会合した状態にある会合（凝集）ミセルを実質的に
含まず、各ミセルが独立に分離した状態で混合液中に存
在する。これらの分離した状態で存在するミセルは、熱
力学的に安定であるため、通常の保存条件下では、実質
的に相互に会合ミセルを形成しないし、凝集も起こし難
い。したがって、ミセルの径が有意に狭い分布をもつミ
セル混合物を提供できる。

【００１９】以上のように、本発明に従う調製方法は、
例えば、特開平６−１０７５６９号公報告に記載される
ような「加温処理、超音波照射処理または有機溶媒処
理」とは明確に区別でき、またそれらからは予期できな
かった作用効果を奏する。

【００２０】上記薬物含有ポリマーミセルを形成するの
に特に適するブロックコポリマーは、上記（Ｉ）または
（ＩＩ）で表される。これらの式（Ｉ）または（ＩＩ）
で表されるブロックコポリマーを用い、上記薬物含有ポ
リマーの調製方法で得ることのできるポリマーミセル組
成物は、該ポリマーミセルが相互に会合ないしは凝集し
ていない（または、ミセルのコアが単一のほぼ球形を有
する）もののみからなるか、或いは薬物がＫＲＮ５５０
０、タキソールおよびカンプトテシンならびにそれらの
水難溶性誘導体であることに特徴があり、それ自体、先
行技術文献に未載であり、新規なものである。

【００２１】式（Ｉ）および（ＩＩ）で表されるブロッ
クコポリマーは、それぞれの式で特定され、本目的に沿
うものであれば、如何なるものであってもよいが、最適
なものは、使用する薬物との組み合わせに応じて変動し
うる。例えば、薬物が、ＫＲＮ５５００のように長鎖脂
肪族基を有する場合には、ポリマーミセルのコア形成性
セグメントに相当するポリマー部に、長鎖脂肪族基を有
するものが好ましいであろう。すなわち、該コア形成性
セグメントに相当するポリマー部を修飾することによ
り、薬物の封入特性（例えば、薬物とコア部との親和
性）やポリマーミセルの径等を制御しうる場合がある。

【００２２】したがって、式（Ｉ）および（ＩＩ）にお
ける、

【００２３】

【化４】

【００２４】部は、ｘまたはｙのいずれか一方が存在し
ない（整数０である）か、あるいはｘおよびｙは両者と
も整数０以外の正数であることができる。

【００２５】上記式中の、Ｒは上述したとおり、ポリマ
ーミセルに封入する薬物に応じて、水素原子または飽和
もしくは不飽和のＣ₁〜₃₀脂肪族基であることができ
る。飽和のＣ₁〜₃₀脂肪族基としては、直鎖もしくは分
枝のアルキル基を挙げることができ、例えば、メチル、
エチル、プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔ−ブ
チル、ｎ−ヘキシル等の低級アルキル基であるか、或い
は、炭素原子数が３０［トリアコンチル（もしくはミリ
シル）］までの直鎖もしくは分枝の中ないし高級アルキ
ル基である。中級ないし高級アルキル基の例としては、
限定されるものでないが、オクチル、デカニル、ラウリ
ル、ミリスチル、セチル、１４−メチルヘキサデカニ
ル、１６−メチルオクタデカニル、ドコシル、テトラコ
シル、ヘキサコシル、およびミリシル等を挙げることが
できる。上記のようなＫＲＮ５５００と組み合わせて用
い、ｘが整数０以外の場合には、Ｒは水素原子以外であ
り中級もしくは高級アルキル基であることが好ましい。
また、不飽和の脂肪族基としては炭素原子数が２以上で
あり、ドデセル（Ｃ₁₂）、フィセテリル（Ｃ₁₄）、ゾー
マリル（Ｃ₁₆）、オレイル（Ｃ₁₈）、カタドニル
（Ｃ₂₀）、等を挙げることができる。これらの脂肪族基
の説明は、Ｒ_４を定義するＣ₁〜₃₀脂肪族オキシ基の脂
肪族部分にも共通する。また、アリール−低級アルキル
オキシ基にいう、アリール低級アルキルとしては、フェ
ニルメチル（ベンジル）、フェニルエチル（フェネチ
ル）等が挙げられる。

【００２６】Ｒ_１およびＲ_３は、水素原子または低級ア
ルキル基であることができる。

【００２７】Ｒ_２は水素原子または上記Ｃ₁〜₃₀脂肪族
基に対応するアシル基、あるいはアリールカルボニル基
（例、ベンゾイル）であることができる。アシル基の具
体的なものとしては、アセチル、プロピオニル、イソプ
ロピオニル、デカノイル、ドテカノイル（ラウリリ
ル）、テトラデカノイル（ミリスチル）、ヘキサデカノ
イル（パルミチリル）、オクタデカノイル、９，１２−
オクタデカジエノイル（リノリル）、イコサノイル（ア
ラキドニル）等を挙げることができる。

【００２８】Ｌ_１およびＬ_２は、一般的に、式（Ｉ）お
よび（ＩＩ）のブロックコポリマーの製造方法によっ
て、自由に変わりうる連結基である。式（Ｉ）のＬ_１が
−ＮＨ−、−Ｏ−または−ＯＣＯ−Ｚ−ＮＨ−であるポ
リマーは、例えば、ポリオキシエチレンセグメントをア
ニオン−リビング重合により形成した後、ω−末端の水
酸基をアミノ基または−ＯＣＯ−Ｚ−ＮＨ_２基（Ｚは、
Ｃ₁〜₄アルキレン基である）に転化した後、β−ベンジ
ルアスパルテートのＮ−カルボン酸無水物を用いる二酸
化炭素脱離重合法（所謂、ＮＣＡ法）により、α−アミ
ノ酸鎖を上記アミノ基を介して伸長させた場合に得るこ
とができる。同様にＬ_１が−Ｏ−のポリマーは、ポリオ
キシエチレンセグメントをアニオン−リビング重合法に
よって形成し、そのω−末端にポリアミノ酸セグメント
をＮＣＡ法により伸長させるか、あるいはＮＣＡ法によ
り別途に製造したポリ−β−ベンジルアスパルテート
と、ポリオキシエチレンとの縮合による得られるものを
挙げることができる。

【００２９】式（ＩＩ）で表されるブロックコポリマー
は、通常、ポリオキシエチレンとポリ−β−ベンジルア
スパルテートを個別に製造した後、それらをポリオキシ
エチレンのω−末端をカルボキシル基に転化するか、必
要により、Ｃ₁〜₆のアルキレンジカルボン酸のを介して
カルボキシル基とポリアミノ酸のＮ−末端アミノ基を連
結することにより提供できるものを挙げることができ
る。

【００３０】また、上記のｘまたはｙを付した、例え
ば、式（Ｉ）における、

【００３１】

【化５】

【００３２】部分と式（ＩＩ）の対応する部分は、ｘお
よびｙがともに存在する場合には、それらはランダムま
たはブロックを形成した状態で存在しうる。

【００３３】ランダムな状態で存在する場合には、ポリ
−β−ベンジルアスパルテート部分を形成した後、ベン
ジル基を部分加水分解するか、またはベンジル基の一部
を他のアシル基とエステル交換することによって提供で
きる。このエステル交換反応は、酸触媒の存在下でＲに
相当するＣ₁〜₃₀アルコールで上記ポリ−β−ベンジル
アスパルテートセグメントを有するブロックコポリマー
を処理することにより、行うことができる。別法とし
て、β−ベンジルアスパルテートとβ−アシル（ベンジ
ル以外）アスパルテートのＮ−カルボン酸無水物を混合
した状態でＮＣＡ法を実施することにより、製造するこ
ともできる。

【００３４】一方、ブロックを形成した状態で存在する
場合には、例えばＮＣＡ法により、ｘ部分またはｙ部分
のセグメントを形成した後、次いでｙ部分またはｘ部分
のセグメントを形成することにより、目的とするブロッ
クコポリマーを提供できる。以上のようなブロックコポ
リマーにおけるｎ、ｘおよびｙは、本発明の目的を達成
しうるブロックコポリマーを提供するものであれば、い
ずれの整数であることもできる。しかしながら、通常、
ｎは４〜２５００の整数であり、より好ましくは５０〜
１５００整数である。一方、ｘおよびｙは、いずれか一
方が０であることができるが、その場合ｘが０であるこ
とが好ましい。また、ｘおよびｙは、同一または異な
り、合計が２〜３００、好ましくは５〜５０の整数であ
ることができる。この際、ｘ対ｙの比は、如何なる値を
とってもよいが、例えば、１：７〜７：１の値をとるこ
とができる。

【００３５】以上のような、式（Ｉ）および（ＩＩ）の
ブロックコポリマーのうち、製造の容易性からは、式
（Ｉ）のものが都合よく使用でき、特に、かようなブロ
ックコポリマーとＫＲＮ５５００、タキソールおよびカ
ンプトテシンならびにそれらの水難性誘導からなる群よ
り選ばれる薬物の組み合わせ使用が、好ましいものであ
る。また、式（Ｉ）のＲが中級ないしは高級脂肪族基で
あって、ｘおよびｙの両者が０以上の正数であるもの、
ならびにｘが０であるものと、上記薬物との組み合わせ
に係る薬物含有ポリマーミセルを含んでなる組成物が特
に好ましい。なお、上記水難性誘導体は、ＫＲＮ５５０
０、タキソールおよびカンプトテシンとほぼ近似する水
に対する溶解度を有する如何なる誘導体も包含する。

【００３６】こうして提供される薬物含有ポリマーミセ
ルを含んでなる組成物は、ポリマーミセルが１μｍ以上
の径を有するものを含まず、平均径が約数１０ｎｍ〜８
００ｎｍがあり、かつ通常の状態（例えば、注射液等に
分散した状態）で極めて安定であり、ミセル相互間での
会合または凝集が殆ど生じない。また、かような大きさ
のミセルは、上述したように、腎性排出や網内皮細胞系
による非特異的な捕捉を避けることができるので薬物の
高度な利用効率が達成できる。

【００３７】かような薬物含有ミセルを含んでなる組成
物は、薬物に応じて、経口投与用製剤または非経口投与
用製剤とすることができるが、非経口投与用製剤とする
場合に、特に有利である。非経口投与用製剤、例えば注
射剤とする場合には、血液に対して等張性となるよう
に、必要により、塩および糖類その他の化合物を加え
て、医薬製剤で常用されている液状希釈剤、例えば、
水、エチルアルコールまたはプロピレングリコール中に
上記薬物含有ポリマーミセルを配合し、さらに必要によ
り、沈殿防止剤、例えば、エトキシル化イソステアリル
アルコール、ポリオキシエチレンソルビトール等を配合
して調製できる。

【００３８】

【実施例】以下、具体例を挙げて本発明をさらに具体的
に説明するが、これらに本発明の範囲を限定することを
意図するものでない。

【００３９】例１：ブロックコポリマーの製造

【００４０】

【化６】

【００４１】特開平６−１０７５６５号公報の実施例１
またはＭ．Ｙｏｋｏｙａｍａら、Ｂｉｏｃｏｎｊｕｇａ
ｔｅ Ｃｈｅｍ., ３（１９９２）２９５−３０１に記
載の方法に従って製造し、ポリ−（β−ベンジルＬ−ア
スパルテート）セグメント（以下、ＰＢＬＡ鎖ともい
う）のフェニルプロトンとポリ（オキシエチレン）セグ
メント（以下、ＰＥＧ鎖ともいう）のメチレンプロトン
の¹Ｈ−ＮＭＲ測定により、ＰＢＬＡ鎖およびＰＥＧ鎖
の分子量が、それぞれ約３，５００および約１２，００
０であるブロックコポリマー（以下、ＰＥＧ−ＰＢＬＡ
ともいう）を用意した。

【００４２】（１）部分加水分解 上記ＰＥＧ−ＰＢＬＡ（１．００ｇ）をクロロホルム１
０ｍｌに溶解した。次いで、水、メタノールおよび２−
プロパノール（容量比１：２：２）の混合液中ＮａＯＨ
溶液（０．４３Ｎ）１．５ｍｌを加えた。１５分間、０
℃で激しく撹拌し、次いで、上記溶液に氷酢酸２００μ
ｌを加えて中和した後、反応混合物をジエチルエーテル
１００ｍｌ中に注ぎ込み、沈殿物を生じさせた。沈殿物
を濾取し、蒸留水１０ｍｌに溶解した。こうして得られ
た溶液に濃塩酸水溶液（１２Ｎ）０．６ｍｌを加え、次
いでスペクトラポアー（Spectrapor）３透析膜（分子量
カットオフ＝３，５００）を用い、０．１ＮＨＣｌ水溶
液に対して３時間、さらに蒸留水に対して一夜透析し
た。次いで、透析バッグ中のポリマーを凍結乾燥して、
０．５５ｇの部分加水分解されたブロックコポリマー
［上記Ｒ＝Ｈ、以下、ＰＥＧ−Ｐ（Ａｓｐ，ＢＬＡ）と
もいう］を得た。

【００４３】（２）セチルアルコールによるエステル交
換 フラスコ中にＰＥＧ−ＰＢＬＡ（２．００ｇ）、セチル
アルコール（１．０６ｇ）およびｐ−トルエンスルホン
酸一水和物（２００ｍｇ）を入れ、次いでトルエン４０
ｍｌを加えた。この溶液を撹拌しながら、２４時間、８
０℃で加熱した。反応液をジエチルエーテル４００ｍｌ
中に注ぎ込んだ。生じた沈殿をジエチルエーテルで洗浄
し、次いで減圧下で乾燥した。こうして、ＰＥＧ−ＰＢ
ＬＡのベンジル基が部分的にセチル基で交換されたブロ
ックコポリマー［上記Ｒ＝Ｃ₁₆Ｈ₃₃、以下、ＰＥＧ−Ｐ
（Ｃ₁₆，ＢＬＡ）ともいう］１．７７ｇが得られた。

【００４４】なお、ＰＥＧ−Ｐ（Ａｓｐ，ＢＬＡ）およ
びＰＥＧ−Ｐ（Ｃ₁₆，ＢＬＡ）におけるＢＬＡ単位の含
有量は、これらのブロックコポリマーのＢＬＡ単位の完
全アルカリ加水分解することにより生じるベンジルアル
コールの吸光度を２５７．５ｎｍにて測定し、未処理Ｐ
ＥＧ−ＰＢＬＡのベンジルアルコール含有量と対比する
ことにより決定することができる。

【００４５】結果：上記（１）により得られた、ＰＥＧ
−Ｐ（Ａｓｐ，ＢＬＡ）の式（Ｉ）のｘおよびｙの換算
値は、それぞれ９．５および７．４であり、そして上記
（２）により得られた、ＰＥＧ−Ｐ（Ｃ₁₆，ＢＬＡ）の
同ｘおよびｙの換算値は、それぞれ４．１および１２．
８であった。

【００４６】例２：ポリマーミセル中へのＫＲＮ５５０
０の封入（透析） ＫＲＮ５５００：

【００４７】

【化７】

【００４８】透析は、Ｇ．Ｓ．Ｋｗｏｎら、Ｐｈａｒ
ｍ．Ｒｅｓ., １２（１９９５）１９２−１９５に記載
の方法に従って行った。概述すれば、次のとおりであ
る。各ブロックコポリマーを、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルム
アミド（ＤＭＦ）またはジメチルスルホキシド（ＤＭＳ
Ｏ）に溶解した溶液を、別にそれらの溶媒にそれぞれＫ
ＲＮ５５００を溶解した溶液と混合した。混合は室温で
１０分間撹拌して行った。次に、セルロース透析膜（分
子量カットオフ＝１２，０００〜１４，０００）を用
い、蒸留水に対して一夜透析した。

【００４９】（１）使用したブロックコポリマーは、上
記ＰＥＧ−ＰＢＬＡ、ＰＥＧ−Ｐ（Ａｓｐ，ＢＬＡ）お
よびＰＥＧ−Ｐ（Ｃ₁₆，ＢＬＡ）であった。一方、これ
らのブロックコポリマーに対するＫＲＮ５５００の使用
割合は、重量基準で３０％となるように調節した。透析
後の透析バッグ中の残存物の状態は、次の表１に示すと
おりであった。

【００５０】

【表１】

【００５１】表１の実験Ｎｏ．６の均質液はほんのわず
かな不透明性を示すだけであった。すなわち、特に、こ
の実験系によれば、ポリマーミセル中への効率のよい薬
物の取込み（または封入）により、ＫＲＮ５５００の水
への溶解度が著しく高まるものとみなせる。

【００５２】（２）ブロックコポリマーに対するＫＲＮ
５５００の使用割合を１０重量％とし、２種のブロック
コポリマーを用いて上記の透析による封入実験を行っ
た。なお、透析後、溶液を５Ｃ濾過膜（細孔の大きさ約
１μｍ）で濾過し、動的光散乱法によりキュムラントの
平均粒径と分散指数（dispersion index）を測定し
た。結果を表２に示す。

【００５３】

【表２】

【００５４】１）５Ｃ濾過膜で濾過後に測定された値 なお、上記の濾過処理により、透明度の変化が観察され
るように、表１に沈殿と記載された大きな粒子のかなり
の部分が、除去されるようである。

【００５５】（３）ブロックコポリマーに対するＫＲＮ
５５００の使用割合を、５、１０および３０重量％と
し、ＰＥＧ−Ｐ（Ｃ₁₆，ＢＬＡ）を用いて薬物の封入試
験を行った。結果を表３に示す。

【００５６】

【表３】

【００５７】１）５Ｃ濾過膜で濾過後の測定値 ２）表２と同じ実験 例３：大きな粒子の除去（音波処理） 透析処理により調製したＫＲＮ５５００封入ポリマーミ
セル含有液５０ｍｌを、表３の実験Ｎｏ．４と同様の条
件で調製し、プローブ式ソニケーター（probetype son
icator）モデルＶＣ１００（Ｓｏｎｉｃｓ ＆ Ｍａｔ
ｅｒｉａｌｓ Ｉｎｃ., Ｃｏｎｎｅｃｔｉｃｕｔ，Ｕ
ＳＡ）の標準的な６ｍｍプローブを備えた装置を用い、
４℃で１秒間超音波照射および１秒間静置のサイクルで
処理した。６０分間まで超音波処理を行った結果を図１
に示す。図１は、分散指数とともに、キュムラントの平
均直径が１０分の超音波処理により、著しく低下するこ
とを示す。なお、この６０分間の処理を行った場合も、
ＫＲＮ５５００は全く分離することなく、処理によって
得られた透明液に変化はみられなかった。

【００５８】この透明液の粒子サイズ分布をマークワッ
ト（Marquadt）のヒストグラム法で解析した結果を、図
２の（ａ）および（ｂ）に示す。なお、散乱強度（ガン
マ）分布により２つのピークがみられ、第一のピークは
８１ｎｍにあり、第二のピークは３９０ｎｍにある。
（１μｍ以上の粒子は全く観察されなかった。）第二の
ピークの大きな粒子は直径約２００〜８００ｎｍに起因
するミセルの凝集体（または会合体）とみなせるが、図
２の（ｂ）の重量分画分布（weight−fractioneddistri
bution）からみられるように、１００ｎｍを越える直径
の粒子の割合は、ほんの８．２％にすぎない。この重量
分画平均直径は、７１ｎｍである。

【００５９】例４：薬物としてＫＲＮ５５００に代えカ
ンプトテシン（Camptothecin）を用いた薬物含有ポリマ
ーミセルの調製 上記例２および３と同様のブロックコポリマーを用い、
このポリマー（５．０ｍｇ）に対する薬物の使用量を１
０重量％（０．５ｍｇ）としたこと以外、上記例２およ
び３を繰り返した。なお、例３に従う超音波処理は、例
２に従って得られたキュムラントのアリコートを使用し
て行った。結果を、表４に示す。

【００６０】

【表４】

【００６１】なお、超音波照射は５分間行ない、透析膜
中のカンプトテシン量は３７０ｎｍにおける吸光度によ
り測定し、そして粒径は動的光散乱法により決定した。

【００６２】超音波処理により、薬物含有ポリマーミセ
ルの粒径を有意に低減できることがわかる。

【図面の簡単な説明】

【図１】図１は例３におけるキュムラントに超音波照射
を行った場合の平均粒子直径と分散指数の変化を表すグ
ラフである。

【図２】図２は超音波処理後（例３）の散乱強度分画と
粒径の関係を表すグラフ（ａ）および重量分画と粒径の
関係を表すグラフ（ｂ）である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 横山 昌幸 千葉県松戸市新松戸３−222 新松戸中央 プラザハイツ205 (72)発明者 片岡 一則 千葉県柏市大室1083−４ 柏ビレジ141− ９

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 水難溶性薬物が親水性ポリマーセグメン
   トと疎水性ポリマーセグメントを有するブロックコポリ
   マーのポリマーミセルのコアに主として存在する薬物含
   有ポリマーミセル組成物の調製方法であって、（Ａ）水
   混和性有機溶媒中で、親水性ポリマーセグメントとして
   ポリオキシエチレンセグメントを有するブロックコポリ
   マーと水難溶性薬物を混合し、（Ｂ）得られた混合物を
   透析膜を介して水に透析することにより薬物含有ポリマ
   ーミセルを形成し、そして（Ｃ）該薬物含有ポリマーミ
   セルを含む溶液または分散液を超音波処理する、ことを
   特徴とする薬物含有ポリマーミセル組成物の調製方法。
2. 【請求項２】 ポリオキシエチレンセグメントを有する
   ブロックコポリマーが、下記式（Ｉ）または（ＩＩ） 【化１】 ［上記各式中Ｒ₁及びＲ_３は、それぞれ水素原子または
   低級アルキル基を表し、 Ｒ_２は水素原子、飽和もしくは不飽和のＣ₁〜₂₉脂肪族
   カルボニル基またはアリールカルボニル基を表し、 Ｒ_４は水酸基、飽和もしくは不飽和のＣ₁〜₃₀脂肪族オ
   キシ基またはアリール−低級アルキルオキシ基を表し、 Ｌ_１は、−ＮＨ−、−Ｏ−および−ＯＣＯ−Ｚ−ＮＨ−
   （ここで、ＺはＣ₁〜₄アルキレン基である）からなる群
   より選ばれる連結基を表し、 Ｌ_２は、−ＯＣＯ−Ｚ−ＣＯ−および−ＮＨＣＯ−Ｚ−
   ＣＯ−（ここで、ＺはＣ₁〜₄アルキレン基である）の連
   結基を表し、 Ｒは、水素原子または飽和もしくは不飽和のＣ₁〜₃₀脂
   肪族基を表し、 ｎは４〜２５００の整数であり、 ｘおよびｙは、同一もしくは異なり、それらの合計が２
   〜３００となる整数であり、そしてｘおよびｙを付した
   単位は、それらの単位が存在する場合には、それぞれラ
   ンダムに存在するか、またはブロックを形成して存在す
   ることができる］で表される、請求項１記載の調製方
   法。
3. 【請求項３】 ポリオキシエチレンセグメントを有する
   ブロックコポリマーが、式（Ｉ）で表され、そしてｘが
   ０であるか、あるいはｘおよびｙを付した単位がともに
   存在する場合には、それぞれランダムに存在するもので
   ある請求項１または２記載の調製方法。
4. 【請求項４】 水難溶性薬物がＫＲＮ５５００、タキソ
   ールおよびカンプトテシンならびにそれらの水難溶性誘
   導体からなる群より選ばれる請求項１〜３のいずれかに
   記載の調製方法。
5. 【請求項５】 下記式（Ｉ）または（ＩＩ） 【化２】 ［上記各式中Ｒ₁及びＲ_３は、それぞれ水素原子または
   低級アルキル基を表し、 Ｒ_２は水素原子、飽和もしくは不飽和のＣ₁〜₂₉脂肪族
   カルボニル基またはアリールカルボニル基を表し、 Ｒ_４は水酸基、飽和もしくは不飽和のＣ₁〜₃₀脂肪族オ
   キシ基またはアリール−低級アルキルオキシ基を表し、 Ｌ_１は、−ＮＨ−、−Ｏ−および−ＯＣＯ−Ｚ−ＮＨ−
   （ここで、ＺはＣ₁〜₄アルキレン基である）からなる群
   より選ばれる連結基を表し、 Ｌ_２は、−ＯＣＯ−Ｚ−ＣＯ−および−ＮＨＣＯ−Ｚ−
   ＣＯ−（ここで、ＺはＣ₁〜₄アルキレン基である）の連
   結基を表し、 Ｒは、水素原子または飽和もしくは不飽和のＣ₁〜₃₀脂
   肪族基を表し、 ｎは４〜２５００の整数であり、 ｘおよびｙは、同一もしくは異なり、それらの合計が２
   〜３００となる整数であり、そしてｘおよびｙを付した
   単位は、それらの単位がともに存在する場合には、それ
   ぞれランダムに存在するか、またはブロックを形成して
   存在することができる］で表されるブロックコポリマー
   に由来するポリマーミセル中に水難溶性薬物が封入され
   た薬物含有ポリマーミセルであって、実質的に相互に凝
   集していない薬物含有ポリマーミセルのみを含んでなる
   か、或いは薬物がＫＲＮ５５００、タキソールおよびカ
   ンプトテシンならびにそれらの水難溶性誘導体からなる
   群より選ばれる薬物含有ポリマーミセルを含んでなるポ
   リマーミセル組成物。
6. 【請求項６】 ブロックコポリマーが式（Ｉ）で表さ
   れ、ｘおよびｙがそれぞれランダムに存在するものであ
   る請求項５記載の組成物。
7. 【請求項７】 ブロックコポリマーが式（Ｉ）で表わさ
   れ、かつ式（Ｉ）中のＬ_１が−ＮＨ−であり、ｎが５０
   〜１５００の整数であり、ｘおよびｙの合計が５〜５０
   の整数である請求項５または６記載の組成物。