JPH1149802A - 慢性進行性血管瘢痕疾患を治療するための医薬組成物 - Google Patents
慢性進行性血管瘢痕疾患を治療するための医薬組成物Info
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 アテローム性動脈硬化症などの動脈硬化疾患
及び、糖尿病性腎臓病症を含む慢性進行性血管瘢痕疾患
（ＣＰＶＳＤ）にかかった哺乳動物患者を治療するため
の医薬組成物で、このような疾患の進行を停止又は少な
くとも実質的に遅延させ、既に形成された瘢痕及び病変
の軽減及び／又は減少をもたらすものを提供する。 【解決手段】 上記の患者に投与される本発明の組成物
は、有効量のペントザンポリスルフェート（ＰＰＳ）又
は製薬学的に受容可能なその塩を含有する。ＰＰＳ又は
ＰＰＳ塩の１日の総投薬量として、患者の体重１ｋｇ当
たり約５〜約３０ｍｇの範囲、又は、成人患者に１日当
たり約３５０〜約２０００ｍｇを含む経口投与形態であ
る組成物が好ましい。
及び、糖尿病性腎臓病症を含む慢性進行性血管瘢痕疾患
（ＣＰＶＳＤ）にかかった哺乳動物患者を治療するため
の医薬組成物で、このような疾患の進行を停止又は少な
くとも実質的に遅延させ、既に形成された瘢痕及び病変
の軽減及び／又は減少をもたらすものを提供する。 【解決手段】 上記の患者に投与される本発明の組成物
は、有効量のペントザンポリスルフェート（ＰＰＳ）又
は製薬学的に受容可能なその塩を含有する。ＰＰＳ又は
ＰＰＳ塩の１日の総投薬量として、患者の体重１ｋｇ当
たり約５〜約３０ｍｇの範囲、又は、成人患者に１日当
たり約３５０〜約２０００ｍｇを含む経口投与形態であ
る組成物が好ましい。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、慢性進行性血管瘢
痕疾患(chronic progressive vascular scarringdiseas
es)を治療するのに使用される医薬組成物及び方法に関
する。
痕疾患(chronic progressive vascular scarringdiseas
es)を治療するのに使用される医薬組成物及び方法に関
する。
【０００２】
【従来の技術】慢性進行性血管瘢痕疾患（ＣＰＶＳＤ）
は、糖尿病、高血圧、種々の脂質過多血症などの先進国
を悩ます最も一般的な疾病の幾つかの合併症である。Ｃ
ＰＶＳＤを扱う現在の治療法は、もとの原因に向けられ
ている。残念ながら、大部分において既知の治療法はな
く、その一般集団における達成のための制御は非常に困
難である。そのうえ、ＣＰＶＳＤはもとの原因が医師の
注意を引いた時点で、確定しているだけでなく、ずっと
進行している場合が多い。すなわち、二次的合併症を処
置するしかなく、そのなかでＣＰＶＳＤは最も過酷なも
のである。何故なら腎不全、発作、心臓疾患および失明
をもたらすからである。
は、糖尿病、高血圧、種々の脂質過多血症などの先進国
を悩ます最も一般的な疾病の幾つかの合併症である。Ｃ
ＰＶＳＤを扱う現在の治療法は、もとの原因に向けられ
ている。残念ながら、大部分において既知の治療法はな
く、その一般集団における達成のための制御は非常に困
難である。そのうえ、ＣＰＶＳＤはもとの原因が医師の
注意を引いた時点で、確定しているだけでなく、ずっと
進行している場合が多い。すなわち、二次的合併症を処
置するしかなく、そのなかでＣＰＶＳＤは最も過酷なも
のである。何故なら腎不全、発作、心臓疾患および失明
をもたらすからである。
【０００３】一般に、ＣＰＶＳＤは血管平滑筋細胞内の
変化によって特徴づけられる。主な変化の一つは、それ
らが合成する連結組織の量の増加と種類の変化である。
この結果、傷痕と機能の変化が起こる。血管内では、こ
れは弾性の喪失をもたらし、血管が膨張収縮しなくな
り、血管壁が厚くなり管腔が狭くなる。最終的には血流
が減り、或いは完全に閉塞が起こる。これらの病理生理
学的な過程によって特徴づけられる血管瘢痕疾患の例
は、慢性進行性腎糸球体疾病、例えば糖尿誘起の糸球体
硬変（傷痕）、腎臓移植後の進行性腎臓不全、血液透析
で治療される末期腎臓病をもつ患者に血管のアクセスを
与えるのに使用される吻合の閉塞、他の小さい血管疾病
（高血圧をもつ患者におけるような）、冠状動脈バイパ
ス手術を受けた患者の狭窄症の再発、および糖尿性の網
膜症である。
変化によって特徴づけられる。主な変化の一つは、それ
らが合成する連結組織の量の増加と種類の変化である。
この結果、傷痕と機能の変化が起こる。血管内では、こ
れは弾性の喪失をもたらし、血管が膨張収縮しなくな
り、血管壁が厚くなり管腔が狭くなる。最終的には血流
が減り、或いは完全に閉塞が起こる。これらの病理生理
学的な過程によって特徴づけられる血管瘢痕疾患の例
は、慢性進行性腎糸球体疾病、例えば糖尿誘起の糸球体
硬変（傷痕）、腎臓移植後の進行性腎臓不全、血液透析
で治療される末期腎臓病をもつ患者に血管のアクセスを
与えるのに使用される吻合の閉塞、他の小さい血管疾病
（高血圧をもつ患者におけるような）、冠状動脈バイパ
ス手術を受けた患者の狭窄症の再発、および糖尿性の網
膜症である。
【０００４】ＣＰＶＳＤの治療の治療目標は、正常な血
管の開存と機能を回復するために、すでに生成した過剰
の細胞外マトリックス（傷痕）を減少させるか、または
少なくともそれ以上の進行を防ぐか、実質上遅らせるこ
とでなければならない。しかし、慢性進行性疾病におけ
るその重要性にも係わらず、円滑な筋肉組織の代謝にお
ける異常を妨げ、連結組織を調節する直接の方法は現在
のところ無い。
管の開存と機能を回復するために、すでに生成した過剰
の細胞外マトリックス（傷痕）を減少させるか、または
少なくともそれ以上の進行を防ぐか、実質上遅らせるこ
とでなければならない。しかし、慢性進行性疾病におけ
るその重要性にも係わらず、円滑な筋肉組織の代謝にお
ける異常を妨げ、連結組織を調節する直接の方法は現在
のところ無い。
【０００５】従って、確定された病巣の退縮や減成を起
こすことによってＣＰＶＳＤを治療し逆進させるのに有
効な、低毒性の医薬の経口投与を好ましくは含む、ＣＰ
ＶＳＤのための治療法を開発することは特に重要であ
る。
こすことによってＣＰＶＳＤを治療し逆進させるのに有
効な、低毒性の医薬の経口投与を好ましくは含む、ＣＰ
ＶＳＤのための治療法を開発することは特に重要であ
る。
【０００６】ペントザンポリスルフェート（ＰＰＳ）
は、単離の方法によって約１，５００〜６，０００ダル
トンの範囲の分子量をもつ高度に硫酸化された半合成の
多糖類である。ＰＰＳはヘパリン及びヘパリノイドと同
じ一般分類に入るが、ＰＰＳとヘパリンの間には化学構
造、誘導の方法および物理化学性に多くの差異がある。
ヘパリンは普通、牛肉および豚肉の筋肉、肝臓および腸
のような哺乳類の組織から単離されるが、ＰＰＳは、そ
の多糖類の骨格であるキシラン(xylan) がブナの木また
は他の植物源から抽出され、ついでクロルスルホン酸ま
たは三塩化スルフリルのような硫酸化剤で処理された半
合成の化合物である。硫酸化の後、ＰＰＳは普通水酸化
ナトリウムで処理してナトリウム塩とする。
は、単離の方法によって約１，５００〜６，０００ダル
トンの範囲の分子量をもつ高度に硫酸化された半合成の
多糖類である。ＰＰＳはヘパリン及びヘパリノイドと同
じ一般分類に入るが、ＰＰＳとヘパリンの間には化学構
造、誘導の方法および物理化学性に多くの差異がある。
ヘパリンは普通、牛肉および豚肉の筋肉、肝臓および腸
のような哺乳類の組織から単離されるが、ＰＰＳは、そ
の多糖類の骨格であるキシラン(xylan) がブナの木また
は他の植物源から抽出され、ついでクロルスルホン酸ま
たは三塩化スルフリルのような硫酸化剤で処理された半
合成の化合物である。硫酸化の後、ＰＰＳは普通水酸化
ナトリウムで処理してナトリウム塩とする。
【０００７】下記の式に示すように、ヘパリンは、
（Ｄ）−グルコサミンおよび（Ｄ）−グルクロン酸（両
方とも６−炭素ヘキソーズ糖）の繰り返しの二重糖モノ
マーの硫酸化ポリマーであり、グルコサミン上にアミン
機能がある。ＰＰＳは、５−炭素ペントースをそのピラ
ノース環にもつ繰り返しの単一（Ｄ）−キシロースモノ
マーの硫酸化線状ポリマーである。ヘパリンは板状の偏
光を右旋性の方向に回転させるが、ＰＰＳは左旋性の方
向に回転させる。
（Ｄ）−グルコサミンおよび（Ｄ）−グルクロン酸（両
方とも６−炭素ヘキソーズ糖）の繰り返しの二重糖モノ
マーの硫酸化ポリマーであり、グルコサミン上にアミン
機能がある。ＰＰＳは、５−炭素ペントースをそのピラ
ノース環にもつ繰り返しの単一（Ｄ）−キシロースモノ
マーの硫酸化線状ポリマーである。ヘパリンは板状の偏
光を右旋性の方向に回転させるが、ＰＰＳは左旋性の方
向に回転させる。
【０００８】
【化１】
【０００９】
【化２】
【００１０】生物学的性質については、ＰＰＳは部分的
トロンボプラスチン時間を延長し、静脈血栓症を防ぐの
に使用されてきたが、ヘパリンの抗凝固力の僅か１５分
の１しかない（一般的にワードル、J. Int. Med. Res.,
20 巻：第 361-370頁、1992年参照）。ＰＰＳは、尿管
感染及び間質膀胱炎の治療（米国特許第５，１８０，７
１５号）および、血管性ステロイドと併用して、血管発
生および毛細血管、細胞または膜の漏洩を抑制（米国特
許第４，８２０，６９３号）するのに有用なことが開示
されている。
トロンボプラスチン時間を延長し、静脈血栓症を防ぐの
に使用されてきたが、ヘパリンの抗凝固力の僅か１５分
の１しかない（一般的にワードル、J. Int. Med. Res.,
20 巻：第 361-370頁、1992年参照）。ＰＰＳは、尿管
感染及び間質膀胱炎の治療（米国特許第５，１８０，７
１５号）および、血管性ステロイドと併用して、血管発
生および毛細血管、細胞または膜の漏洩を抑制（米国特
許第４，８２０，６９３号）するのに有用なことが開示
されている。
【００１１】研究者の何人かは、ＰＰＳが円滑筋肉細胞
の増殖を阻害し、高脂質血症を減少させることを示し、
これに基づいて、ＰＰＳがアテローム性動脈硬化症のプ
ラーク生成を制限し、脈管膜細胞の増殖を阻害し、コラ
ーゲン生成と糸球体硬変を阻害するのに予防的に有用で
あることを示唆している（ポールら、Thromb. Res.,46
巻：第 793-801頁、1987年；ワードル、前記）。しかし
ながら、アテローム性動脈硬化症のようなＣＰＳＶＤの
傷痕の観点（細胞増殖の阻害の逆として）に焦点を当て
たものはなく、又、血管の傷痕を停止し、及び／又は逆
転することが可能であることを示したものも無く、すな
わちＰＰＳはこの内容において考慮されてこなかった。
更に、瘢痕疾患におけるＰＰＳの使用の可能性を示唆し
た先行技術は無く、これらはいずれも、もとのままの動
物に発生した実質的な科学的効率データによって支持す
るものではなく、インビボにおける効果を予測できない
ことの多い動物組織のインビトロ研究に基づくものであ
った。
の増殖を阻害し、高脂質血症を減少させることを示し、
これに基づいて、ＰＰＳがアテローム性動脈硬化症のプ
ラーク生成を制限し、脈管膜細胞の増殖を阻害し、コラ
ーゲン生成と糸球体硬変を阻害するのに予防的に有用で
あることを示唆している（ポールら、Thromb. Res.,46
巻：第 793-801頁、1987年；ワードル、前記）。しかし
ながら、アテローム性動脈硬化症のようなＣＰＳＶＤの
傷痕の観点（細胞増殖の阻害の逆として）に焦点を当て
たものはなく、又、血管の傷痕を停止し、及び／又は逆
転することが可能であることを示したものも無く、すな
わちＰＰＳはこの内容において考慮されてこなかった。
更に、瘢痕疾患におけるＰＰＳの使用の可能性を示唆し
た先行技術は無く、これらはいずれも、もとのままの動
物に発生した実質的な科学的効率データによって支持す
るものではなく、インビボにおける効果を予測できない
ことの多い動物組織のインビトロ研究に基づくものであ
った。
【００１２】線維症及び傷痕生成の抑制においてＰＰＳ
を使用することについては最近開示されてきている（例
えば、ルーファら、米国特許第５，６０５，９３８号参
照）が、これらの教示は皮膚および関連の組織部分への
線維母細胞の侵入の抑制を扱ってはいるが、病因学及び
病理学において、非常に異なる円滑筋肉細胞の瘢痕疾患
を扱ったものではない。
を使用することについては最近開示されてきている（例
えば、ルーファら、米国特許第５，６０５，９３８号参
照）が、これらの教示は皮膚および関連の組織部分への
線維母細胞の侵入の抑制を扱ってはいるが、病因学及び
病理学において、非常に異なる円滑筋肉細胞の瘢痕疾患
を扱ったものではない。
【００１３】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、疾病
の過程を停止するだけでなく、実際にその過程を逆行さ
せ、存在する傷痕または病巣の退行を起こすＣＰＶＳＤ
の治療法を提供することである。本発明の別の目的は、
非毒性であり酷い副作用を起こさず、ＣＰＶＳＤの治療
に高い効果のある従来法で投与できる市販の医薬を使っ
た治療法を提供することである。
の過程を停止するだけでなく、実際にその過程を逆行さ
せ、存在する傷痕または病巣の退行を起こすＣＰＶＳＤ
の治療法を提供することである。本発明の別の目的は、
非毒性であり酷い副作用を起こさず、ＣＰＶＳＤの治療
に高い効果のある従来法で投与できる市販の医薬を使っ
た治療法を提供することである。
【００１４】これらの目的及びここに明らかとなる他の
目的を達成するために、本発明は要約すれば、疾病の進
行を停止し、罹病した臓器又は血管にすでに形成された
傷痕又は線維症の病変の解消又は減少を起こさせること
にあり、その方法はペントザンポリスルフェート又はそ
の医薬的に受容される塩の血管瘢痕疾患の治療に有効な
量を含む医薬組成物を患者に投与することから成る。例
えば錠剤の形態でのＰＰＳの経口投与は、好ましい投与
形態である。
目的を達成するために、本発明は要約すれば、疾病の進
行を停止し、罹病した臓器又は血管にすでに形成された
傷痕又は線維症の病変の解消又は減少を起こさせること
にあり、その方法はペントザンポリスルフェート又はそ
の医薬的に受容される塩の血管瘢痕疾患の治療に有効な
量を含む医薬組成物を患者に投与することから成る。例
えば錠剤の形態でのＰＰＳの経口投与は、好ましい投与
形態である。
【００１５】
【課題を解決するための手段】本発明は、罹病した血
管、特に大動脈のような動脈に慢性進行性血管瘢痕疾患
（ＣＰＶＳＤ）を受けた哺乳類の患者を治療して、疾病
の進行を停止または実質上遅延させ、既成の傷痕病巣を
解消及び／又は減少させるための医薬組成物に関するも
のである。本方法は、血管瘢痕疾患に有効な量のペント
ザンポリスルフェート（ＰＰＳ）又はその医薬的に受容
できる塩を含む医薬組成物を患者へ投与することから成
る。
管、特に大動脈のような動脈に慢性進行性血管瘢痕疾患
（ＣＰＶＳＤ）を受けた哺乳類の患者を治療して、疾病
の進行を停止または実質上遅延させ、既成の傷痕病巣を
解消及び／又は減少させるための医薬組成物に関するも
のである。本方法は、血管瘢痕疾患に有効な量のペント
ザンポリスルフェート（ＰＰＳ）又はその医薬的に受容
できる塩を含む医薬組成物を患者へ投与することから成
る。
【００１６】この新規な方法で治療される疾病は、慢性
進行性血管瘢痕疾患に限定されるものではなく、傷痕型
糖尿性腎糸球体硬変および糖尿性腎臓病を含む慢性進行
性腎糸球体疾病、アテローム性動脈硬化症を含む動脈硬
化による動脈傷痕、移植後の細胞間傷痕による進行性腎
不全、血液透析で治療される末期腎臓病の患者に血管ア
クセスを与えるのに使用される吻合の傷痕による閉塞、
他の慢性小血管疾病（例えば若干の高血圧患者における
ような）、冠状動脈バイパス手術を受けた患者の傷痕に
よる狭窄症の再発、及び糖尿性網膜症も含まれる。
進行性血管瘢痕疾患に限定されるものではなく、傷痕型
糖尿性腎糸球体硬変および糖尿性腎臓病を含む慢性進行
性腎糸球体疾病、アテローム性動脈硬化症を含む動脈硬
化による動脈傷痕、移植後の細胞間傷痕による進行性腎
不全、血液透析で治療される末期腎臓病の患者に血管ア
クセスを与えるのに使用される吻合の傷痕による閉塞、
他の慢性小血管疾病（例えば若干の高血圧患者における
ような）、冠状動脈バイパス手術を受けた患者の傷痕に
よる狭窄症の再発、及び糖尿性網膜症も含まれる。
【００１７】特に重要なのは、疾病の普遍性と有害な性
質のゆえに、疾病の進行を逆行させ防止し、現存する血
管傷痕および傷害を消散させるための慢性の動脈硬化性
傷痕病変のこの新規な方法による治療である。例えば、
本発明によるＰＰＳの投与は、主要な血管中のアテロー
ム性動脈硬化症の進行を止め逆行させ、アテローム性動
脈硬化プラークによって影響された動脈壁を含む既成の
傷痕を解消および／または縮小し、内膜断面積を実質的
に増加して血管管腔を通る血流を多くする。
質のゆえに、疾病の進行を逆行させ防止し、現存する血
管傷痕および傷害を消散させるための慢性の動脈硬化性
傷痕病変のこの新規な方法による治療である。例えば、
本発明によるＰＰＳの投与は、主要な血管中のアテロー
ム性動脈硬化症の進行を止め逆行させ、アテローム性動
脈硬化プラークによって影響された動脈壁を含む既成の
傷痕を解消および／または縮小し、内膜断面積を実質的
に増加して血管管腔を通る血流を多くする。
【００１８】ここに使用する「血管瘢痕疾患治療の有効
量」という語は、ＣＰＶＳＤの進行性症候群を停止及び
逆行させるのに所定の期間の間、日に一回以上与えられ
る場合に有効な医薬組成物に配合されるＰＰＳ又はその
塩の量をいう。ヒトの患者では、患者体重１ｋｇ当たり
約５〜約３０ｍｇという１日の総投与量、又は成人患者
に１日当たり約３５０〜約２，０００ｍｇ、及び好まし
くは約５００〜約１，５００ｍｇのＰＰＳ又はＰＰＳ塩
で、その１日当たりの投与は１回〜同一投与量で４回の
投与される場合、ＣＰＶＳＤの治療と逆転の治療目標の
達成に有効である。小さい哺乳類においては、この投与
量は体重、種および症状の性質によって少なく調節され
ても良い。
量」という語は、ＣＰＶＳＤの進行性症候群を停止及び
逆行させるのに所定の期間の間、日に一回以上与えられ
る場合に有効な医薬組成物に配合されるＰＰＳ又はその
塩の量をいう。ヒトの患者では、患者体重１ｋｇ当たり
約５〜約３０ｍｇという１日の総投与量、又は成人患者
に１日当たり約３５０〜約２，０００ｍｇ、及び好まし
くは約５００〜約１，５００ｍｇのＰＰＳ又はＰＰＳ塩
で、その１日当たりの投与は１回〜同一投与量で４回の
投与される場合、ＣＰＶＳＤの治療と逆転の治療目標の
達成に有効である。小さい哺乳類においては、この投与
量は体重、種および症状の性質によって少なく調節され
ても良い。
【００１９】
【発明の実施の形態】治療のこの新しい方法の好ましい
実施態様は、ＰＰＳの有効量と、少なくとも一つの医薬
的に受容できる不活性の成分とを含む医薬組成物の患者
への投与である。この組成物は、どのような標準的な医
薬の投与形態でもよいが、経口投与の形態であることが
好ましい。
実施態様は、ＰＰＳの有効量と、少なくとも一つの医薬
的に受容できる不活性の成分とを含む医薬組成物の患者
への投与である。この組成物は、どのような標準的な医
薬の投与形態でもよいが、経口投与の形態であることが
好ましい。
【００２０】経口投与のための投与形態には従来の錠
剤、被覆錠剤、カプセルまたはカプレット、徐放性錠
剤、カプセルまたはカプレット、ドロップ、液体、エリ
キシル剤または医薬技術に公知の他の経口投与形態が含
まれる。
剤、被覆錠剤、カプセルまたはカプレット、徐放性錠
剤、カプセルまたはカプレット、ドロップ、液体、エリ
キシル剤または医薬技術に公知の他の経口投与形態が含
まれる。
【００２１】医薬的に受容可能な不活性の成分として
は、ＰＰＳのＣＰＶＳＤ治療活性を阻害しない予想され
る充填剤、結合剤、溶剤などがある。また、要すれば粘
度または珪藻土のような充填剤を使って投与形態のサイ
ズを調節してもよい。
は、ＰＰＳのＣＰＶＳＤ治療活性を阻害しない予想され
る充填剤、結合剤、溶剤などがある。また、要すれば粘
度または珪藻土のような充填剤を使って投与形態のサイ
ズを調節してもよい。
【００２２】さらに他の不形剤や担体のような成分が投
与形態の好ましい物理的性質を付与するのに必要であ
る。そのような物理的性質は例えば放出速度、質感およ
びサイズである。経口投与形態に有用な不形剤や担体の
例は、蜜蝋、ヒマシ蝋、糖蝋およびカルナウバ蝋のよう
な蝋、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキ
シメチルセルロース、セルロース−アセテートフタレー
ト、ヒドロキシプロピルセルロースおよびヒドロキシプ
ロピルメチルセルロースのようなセルロース化合物、ポ
リ塩化ビニル、ポリビニルピロリドン、ステアリルアル
コール、グリセリンモノステアレート、ポリメタクリレ
ート、メチルメタクリレートおよびエチレングリコール
ジメタクリレートのようなメタクリレート化合物、ポリ
エチレングリコールおよび親水性ガムである。
与形態の好ましい物理的性質を付与するのに必要であ
る。そのような物理的性質は例えば放出速度、質感およ
びサイズである。経口投与形態に有用な不形剤や担体の
例は、蜜蝋、ヒマシ蝋、糖蝋およびカルナウバ蝋のよう
な蝋、メチルセルロース、エチルセルロース、カルボキ
シメチルセルロース、セルロース−アセテートフタレー
ト、ヒドロキシプロピルセルロースおよびヒドロキシプ
ロピルメチルセルロースのようなセルロース化合物、ポ
リ塩化ビニル、ポリビニルピロリドン、ステアリルアル
コール、グリセリンモノステアレート、ポリメタクリレ
ート、メチルメタクリレートおよびエチレングリコール
ジメタクリレートのようなメタクリレート化合物、ポリ
エチレングリコールおよび親水性ガムである。
【００２３】本発明の組成物中には好ましくはＰＰＳ活
性成分は投与単位あたり約５０〜約３００ｍｇの量で存
在する。各患者に投与される正確な投与量は、治療され
るべき病状および年令や体重のような患者の身体的特性
の関数となる。
性成分は投与単位あたり約５０〜約３００ｍｇの量で存
在する。各患者に投与される正確な投与量は、治療され
るべき病状および年令や体重のような患者の身体的特性
の関数となる。
【００２４】有効な医薬成分はＰＰＳ又はその医薬的に
受容できる塩、例えばナトリウム塩とすることができ
る。本発明の方法に使用するための一つの好ましい経口
投与形態は、エルミロン（登録商標）ゼラチンカプセル
（ベーカーノートンファーマシューティカルズ社、マイ
アミ、フロリダ）であり、これは１００ｍｇのＰＰＳ
と、不形剤としてのミクロクリスタリンセルロースおよ
びステアリン酸マグネシウムを含む。
受容できる塩、例えばナトリウム塩とすることができ
る。本発明の方法に使用するための一つの好ましい経口
投与形態は、エルミロン（登録商標）ゼラチンカプセル
（ベーカーノートンファーマシューティカルズ社、マイ
アミ、フロリダ）であり、これは１００ｍｇのＰＰＳ
と、不形剤としてのミクロクリスタリンセルロースおよ
びステアリン酸マグネシウムを含む。
【００２５】経口の投与経路が好ましいが、この治療法
はまた非経口、経皮、粘膜経由の経路によって、または
医療および医薬の技術において公知で従来から使用され
ている他の投与経路によってのＰＰＳ又はその塩の投与
をも含む。同様に、本発明の組成物は医薬的に受容でき
る非経口、経皮、粘膜経由のまたは他の従来の媒体中の
ＰＰＳを適切な不活性溶剤、不形剤および添加剤と一緒
に含んでもよい。そのような医薬的に受容できる媒体の
多くの例が、レミントンの医薬科学（第１７版（1985
年））及び他のテキストに記載されている。どのような
投与経路又は医薬的投与形態であっても、ＰＰＳ活性成
分の投与量は、患者の体重１ｋｇ当たり約５〜約３０ｍ
ｇであり、即ち約３５０〜約２，０００ｍｇ、好ましく
は約５００〜約１，５００ｍｇである。ただし、このよ
うな範囲の下限の投与量は、非経口投与において用いら
れるものである。
はまた非経口、経皮、粘膜経由の経路によって、または
医療および医薬の技術において公知で従来から使用され
ている他の投与経路によってのＰＰＳ又はその塩の投与
をも含む。同様に、本発明の組成物は医薬的に受容でき
る非経口、経皮、粘膜経由のまたは他の従来の媒体中の
ＰＰＳを適切な不活性溶剤、不形剤および添加剤と一緒
に含んでもよい。そのような医薬的に受容できる媒体の
多くの例が、レミントンの医薬科学（第１７版（1985
年））及び他のテキストに記載されている。どのような
投与経路又は医薬的投与形態であっても、ＰＰＳ活性成
分の投与量は、患者の体重１ｋｇ当たり約５〜約３０ｍ
ｇであり、即ち約３５０〜約２，０００ｍｇ、好ましく
は約５００〜約１，５００ｍｇである。ただし、このよ
うな範囲の下限の投与量は、非経口投与において用いら
れるものである。
【００２６】本発明の方法に使用される医薬組成物はＰ
ＰＳ又はＰＰＳ塩以外の活性成分、例えばＣＰＶＳＤの
処理に有用な他の薬剤を含んでもよい。
ＰＳ又はＰＰＳ塩以外の活性成分、例えばＣＰＶＳＤの
処理に有用な他の薬剤を含んでもよい。
【００２７】この新しい方法は、多くの場合生命や器官
を脅かすＣＰＶＳＤの種々の形態に罹った患者の便利で
安全で有効な治療を可能にする。本方法によって、長ら
く慢性血管瘢痕疾患の容赦ない進行と考えられてきたも
のを停止するだけでなく、実際に既成の傷痕病巣を阻止
し、及び／又は逆転して、正常な血管の開放と機能を回
復するのに、低毒性で副作用の発生が少ないことの証明
された医薬製剤を使うことができる。
を脅かすＣＰＶＳＤの種々の形態に罹った患者の便利で
安全で有効な治療を可能にする。本方法によって、長ら
く慢性血管瘢痕疾患の容赦ない進行と考えられてきたも
のを停止するだけでなく、実際に既成の傷痕病巣を阻止
し、及び／又は逆転して、正常な血管の開放と機能を回
復するのに、低毒性で副作用の発生が少ないことの証明
された医薬製剤を使うことができる。
【００２８】下記の実施例は、（ａ）傷痕型のコラーゲ
ンｍＲＮＡ及び腎糸球体中の関連因子の定量のための、
ある種の競合ＰＣＲ技術の使用を実証し、相対的な腎糸
球体細胞数が傷痕型のコラーゲンの生成と相関しないこ
とを示す医学文献に既に公表された実験の説明、（ｂ）
傷痕型のコラーゲン及び細胞成長因子の生成を下方調整
し、コラーゲナーゼ活性を上方調整して傷痕コラーゲン
の既存の沈降を分解することにおけるＰＰＳの効果を、
インビトロ及びインビボにて示す、発明者により、又は
発明者の監督下に行われた実験、及び（ｃ）罹病した血
管内のアテローム性動脈硬化プラークの量と分布を実質
的に減少させることを含む、アテローム性動脈硬化症の
逆転におけるＰＰＳの効果をインビボにて示す、発明者
により、又は発明者の監督下に行われた実験を含んでい
る。しかしながら、これらの実験は、本発明を実施する
ために使用しなければならない材料、技法または投与量
を説明することを意図したものではなく、又、本発明を
限定することを意図したものでもない。
ンｍＲＮＡ及び腎糸球体中の関連因子の定量のための、
ある種の競合ＰＣＲ技術の使用を実証し、相対的な腎糸
球体細胞数が傷痕型のコラーゲンの生成と相関しないこ
とを示す医学文献に既に公表された実験の説明、（ｂ）
傷痕型のコラーゲン及び細胞成長因子の生成を下方調整
し、コラーゲナーゼ活性を上方調整して傷痕コラーゲン
の既存の沈降を分解することにおけるＰＰＳの効果を、
インビトロ及びインビボにて示す、発明者により、又は
発明者の監督下に行われた実験、及び（ｃ）罹病した血
管内のアテローム性動脈硬化プラークの量と分布を実質
的に減少させることを含む、アテローム性動脈硬化症の
逆転におけるＰＰＳの効果をインビボにて示す、発明者
により、又は発明者の監督下に行われた実験を含んでい
る。しかしながら、これらの実験は、本発明を実施する
ために使用しなければならない材料、技法または投与量
を説明することを意図したものではなく、又、本発明を
限定することを意図したものでもない。
【００２９】
【実施例】実施例１ コラーゲンの定量 ペテンら、Am. J. Physiol., 32 巻、Ｆ 951-957頁（19
92年）に記載されているように、マウス腎糸球体内のα
1 ＩＶ及びα2 ＩＶコラーゲンは、下記の方法によって
定量できる。正常な５週令のマウスからの腎糸球体の１
／１０中のｍＲＮＡを示すｃＤＮＡの量及び標準量のα
1 ＩＶ又はα2 ＩＶコラーゲンプライマーを、GeneAmp
ＤＮＡ増幅キット（パーキンエルマー・セータス、ノー
ウォーク、コネチカット）から、すべてのＰＣＲ試薬を
含む数個の管のそれぞれに添加した。新しい制限酵素分
解部位または欠失のいずれかを含む変異ｃＤＮＡの一連
の希釈物を、増幅の前にこの混合物に添加した（図１の
最上部のパネルに示されている図）。突然変異体の濃度
は等価点（ｙ＝１）を組分けするように設計された前の
実験で決定した。
92年）に記載されているように、マウス腎糸球体内のα
1 ＩＶ及びα2 ＩＶコラーゲンは、下記の方法によって
定量できる。正常な５週令のマウスからの腎糸球体の１
／１０中のｍＲＮＡを示すｃＤＮＡの量及び標準量のα
1 ＩＶ又はα2 ＩＶコラーゲンプライマーを、GeneAmp
ＤＮＡ増幅キット（パーキンエルマー・セータス、ノー
ウォーク、コネチカット）から、すべてのＰＣＲ試薬を
含む数個の管のそれぞれに添加した。新しい制限酵素分
解部位または欠失のいずれかを含む変異ｃＤＮＡの一連
の希釈物を、増幅の前にこの混合物に添加した（図１の
最上部のパネルに示されている図）。突然変異体の濃度
は等価点（ｙ＝１）を組分けするように設計された前の
実験で決定した。
【００３０】ＰＣＲ増幅の後、全反応混合物を、Ｈ５ホ
リゾンゲル装置（ライフ・テクノロジース）内で４％ヌ
シーブ(Nusieve) ：シーケム(Seakem)（３：１）（ＦＭ
Ｃバイオプロダクツ、ロックランド、ＭＥ）アガロース
ゲルの上に直接負荷させ、電気透析にかけた。ＤＮＡバ
ンドは、臭化エチジウム染色および紫外線（ＵＶ）透過
で視覚化した。ポジ／ネガ５５ポラロイドフィルム（ポ
ラロイド、ケンブリッジ、ＭＡ）で写真を撮影した（図
１、中央のパネル参照）。競合ＰＣＲ分析のために、一
次元レーザーデンシトメトリーでゲルネガチブを走査し
た（シマヅ、サイエンティフィック・インスツルーメン
ト、コロンビア、ＭＤ）。
リゾンゲル装置（ライフ・テクノロジース）内で４％ヌ
シーブ(Nusieve) ：シーケム(Seakem)（３：１）（ＦＭ
Ｃバイオプロダクツ、ロックランド、ＭＥ）アガロース
ゲルの上に直接負荷させ、電気透析にかけた。ＤＮＡバ
ンドは、臭化エチジウム染色および紫外線（ＵＶ）透過
で視覚化した。ポジ／ネガ５５ポラロイドフィルム（ポ
ラロイド、ケンブリッジ、ＭＡ）で写真を撮影した（図
１、中央のパネル参照）。競合ＰＣＲ分析のために、一
次元レーザーデンシトメトリーでゲルネガチブを走査し
た（シマヅ、サイエンティフィック・インスツルーメン
ト、コロンビア、ＭＤ）。
【００３１】試験及び変異体バンドの濃度測定値を計算
し、各反応管についてのそれらの比を添加した変異体鋳
型の量の関数としてプロットした（図１、最下部パネ
ル）。α2 ＩＶコラーゲン変異体については、変異体／
試験バンド比をプロットする前に、測定した濃度測定バ
ンド強度を５６２／４７９という係数で補正した。α2
ＩＶ変異体バンドについては、それらの濃度測定値を、
野性型（試験）バンド値で割る前に加えた。線状回帰分
析によって直線を引いた。試験試料中のｃＤＮＡの量
は、変異体／試験バンド密度比が１に等しいところの量
として計算した。競合ＰＣＲ分析は２回または３回行っ
た。
し、各反応管についてのそれらの比を添加した変異体鋳
型の量の関数としてプロットした（図１、最下部パネ
ル）。α2 ＩＶコラーゲン変異体については、変異体／
試験バンド比をプロットする前に、測定した濃度測定バ
ンド強度を５６２／４７９という係数で補正した。α2
ＩＶ変異体バンドについては、それらの濃度測定値を、
野性型（試験）バンド値で割る前に加えた。線状回帰分
析によって直線を引いた。試験試料中のｃＤＮＡの量
は、変異体／試験バンド密度比が１に等しいところの量
として計算した。競合ＰＣＲ分析は２回または３回行っ
た。
【００３２】実施例２ 硬化性糸球体における変化 ペテン等の J. Exp. Med., 176巻、第1571〜1576頁（19
92年）に記載されているように、腎腫瘍を有する一側性
腎切除試料を、人間の患者から採得した。これらの患者
は、糖尿病、高血圧症又は、糸球体疾患に関連する他の
全身疾患の病歴を有していなかった。明らかな腫瘍から
離れた所にある皮質組織のサンプルを、カルヌア固定液
(Carnoy's fixative) 中に入れ、メタクリレート又はパ
ラフィン中に包埋させ、過ヨウ素酸シッフ反応(periodi
c acid-Schiff, PAS) を用いて切片を染色した。糸球体
間質（メサンギウム）マトリックスの拡大として規定さ
れている糸球体硬化症の存在は、ＰＡＳ−染色物質の組
織学的試験により（図２Ａ及び図２Ｂ）、及び、タイプ
ＩＶコラーゲンに対する抗体（ＰＨＭ−１２、シレノ
ス、ウエストバリー、ＮＹ）に曝した後の凍った切片の
免疫螢光顕微鏡検査法により（図２Ｃ及び図２Ｄ）別々
に評価した。
92年）に記載されているように、腎腫瘍を有する一側性
腎切除試料を、人間の患者から採得した。これらの患者
は、糖尿病、高血圧症又は、糸球体疾患に関連する他の
全身疾患の病歴を有していなかった。明らかな腫瘍から
離れた所にある皮質組織のサンプルを、カルヌア固定液
(Carnoy's fixative) 中に入れ、メタクリレート又はパ
ラフィン中に包埋させ、過ヨウ素酸シッフ反応(periodi
c acid-Schiff, PAS) を用いて切片を染色した。糸球体
間質（メサンギウム）マトリックスの拡大として規定さ
れている糸球体硬化症の存在は、ＰＡＳ−染色物質の組
織学的試験により（図２Ａ及び図２Ｂ）、及び、タイプ
ＩＶコラーゲンに対する抗体（ＰＨＭ−１２、シレノ
ス、ウエストバリー、ＮＹ）に曝した後の凍った切片の
免疫螢光顕微鏡検査法により（図２Ｃ及び図２Ｄ）別々
に評価した。
【００３３】競合ＰＣＲ分析は、α2 ＩＶ（瘢痕タイ
プ）細胞外基質コラーゲンの量を定量化するために、実
施例１に記載されるようにして行った。正常であるか又
は硬化性であることが以前に確認されている糸球体中の
コラーゲン種の相対濃度は、図３に示されるように測定
された。
プ）細胞外基質コラーゲンの量を定量化するために、実
施例１に記載されるようにして行った。正常であるか又
は硬化性であることが以前に確認されている糸球体中の
コラーゲン種の相対濃度は、図３に示されるように測定
された。
【００３４】糸球体硬化症に罹っていない（正常な）５
名の患者における糸球体中の相対細胞数を、硬化症に罹
っている５名と比較した。図４に示されるように、糸球
体相対細胞数に関するグループ間の差は有意なものでは
なかったが（ｐ＞０．８）、α2 ＩＶコラーゲンｃＤＮ
Ａレベルについては、この差は統計学的に有意なもので
あった（０．０１＜ｐ＜０．０２５）。
名の患者における糸球体中の相対細胞数を、硬化症に罹
っている５名と比較した。図４に示されるように、糸球
体相対細胞数に関するグループ間の差は有意なものでは
なかったが（ｐ＞０．８）、α2 ＩＶコラーゲンｃＤＮ
Ａレベルについては、この差は統計学的に有意なもので
あった（０．０１＜ｐ＜０．０２５）。
【００３５】実施例３ 正常な腎臓と病気に罹っている腎臓からの糸球体におけ
る相対コラーゲンｍＲＮＡ比 実施例１及び２に記載されている方法学を利用して、α
2 ／α3 ＩＶコラーゲンｍＲＮＡの相対比を、膜性糸球
体腎炎（ＭＮ）と糖尿病性腎臓病症（ＤＭ）に罹ってい
る人間の患者の診断生検法から採得した糸球体中と、糸
球体硬化症に罹っている（ＮＸ ＧＳ）腎切除及び糸球
体硬化症に罹っていない（ＮＸ Ｎ１）腎切除から採得
した糸球体中において定量化した。図５に示されるよう
に、α2／α3 ＩＶコラーゲンｍＲＮＡの相対比は、Ｎ
Ｘ Ｎ１においてよりもＤＭとＮＸ ＧＳにおいては有
意に高いものであった（**Ｐ＝０．０００２、 *Ｐ＝
０．２）。
る相対コラーゲンｍＲＮＡ比 実施例１及び２に記載されている方法学を利用して、α
2 ／α3 ＩＶコラーゲンｍＲＮＡの相対比を、膜性糸球
体腎炎（ＭＮ）と糖尿病性腎臓病症（ＤＭ）に罹ってい
る人間の患者の診断生検法から採得した糸球体中と、糸
球体硬化症に罹っている（ＮＸ ＧＳ）腎切除及び糸球
体硬化症に罹っていない（ＮＸ Ｎ１）腎切除から採得
した糸球体中において定量化した。図５に示されるよう
に、α2／α3 ＩＶコラーゲンｍＲＮＡの相対比は、Ｎ
Ｘ Ｎ１においてよりもＤＭとＮＸ ＧＳにおいては有
意に高いものであった（**Ｐ＝０．０００２、 *Ｐ＝
０．２）。
【００３６】実施例４ ＰＰＳを用いたインビトロ実験 実験Ａ 実験計画： 正常なメサンギウム細胞(mesangial cell)
（８）を、２４個のウエルプレート（ヌンク、ＰＧＣサ
イエンティフィック コーポレイション、ガイザースバ
ーグ、ＭＤ）内にある、２０％胎児牛血清（ギブコ、グ
ランドアイランド、ＮＹ）が添加された基本培地に、２
−２．５×１０4 細胞／ウエルの濃度で薄くのせた。２
４時間の時点で、この培地を捨て、細胞をＰＢＳで２回
洗浄し、０．１％の牛血清アルブミン（ＲＩＡグレー
ド、Sicjma）を含む血清を含まない培地中で２４〜７２
時間培養した。この培地を、５〜１００μｇ／ｍｌのＰ
ＰＳを含むかあるいは含まない、２０％胎児牛血清が添
加された新鮮な基礎培地に置き換えるか、標準ヘパリン
（１００μｇ／ｍｌ）と比較した。重複ウエルの細胞
は、抗トリプシン性を破壊し、＋３日と＋５日の時点
で、エルゾーン（登録商標）細胞計数器（パーティクル
データ インコーポレイテッド、エルムハースト、Ｉ
Ｌ）で数えた。平行ウエルにおいては、チミジン取り込
みは、〔 3Ｈ〕チミジン（〔メチル− 3Ｈ〕チミジ
ン）；２．０Ｃｉ／ｍＭ；デュポンＮＥＮ、ボストン、
ＭＡ）の１μＣｉ／ウエルを添加することによって測定
した。総数は、１日目の時点又は３日目の時点で測定し
た。
（８）を、２４個のウエルプレート（ヌンク、ＰＧＣサ
イエンティフィック コーポレイション、ガイザースバ
ーグ、ＭＤ）内にある、２０％胎児牛血清（ギブコ、グ
ランドアイランド、ＮＹ）が添加された基本培地に、２
−２．５×１０4 細胞／ウエルの濃度で薄くのせた。２
４時間の時点で、この培地を捨て、細胞をＰＢＳで２回
洗浄し、０．１％の牛血清アルブミン（ＲＩＡグレー
ド、Sicjma）を含む血清を含まない培地中で２４〜７２
時間培養した。この培地を、５〜１００μｇ／ｍｌのＰ
ＰＳを含むかあるいは含まない、２０％胎児牛血清が添
加された新鮮な基礎培地に置き換えるか、標準ヘパリン
（１００μｇ／ｍｌ）と比較した。重複ウエルの細胞
は、抗トリプシン性を破壊し、＋３日と＋５日の時点
で、エルゾーン（登録商標）細胞計数器（パーティクル
データ インコーポレイテッド、エルムハースト、Ｉ
Ｌ）で数えた。平行ウエルにおいては、チミジン取り込
みは、〔 3Ｈ〕チミジン（〔メチル− 3Ｈ〕チミジ
ン）；２．０Ｃｉ／ｍＭ；デュポンＮＥＮ、ボストン、
ＭＡ）の１μＣｉ／ウエルを添加することによって測定
した。総数は、１日目の時点又は３日目の時点で測定し
た。
【００３７】結果：１日（２４時間）の時点で、最大投
与量−応答は、５０μｇ／ｍｌにて平坦化されたが（図
６）、３日目において、最大抑制応答が２５μｇ／ｍｌ
にて示された（図７）。無添加（対照）とヘパリン（１
００μｇ／ｍｌ）とＰＰＳ（１００μｇ／ｍｌ）との間
の比較から、モル基準として、ＰＰＳは、純粋なヘパリ
ンよりもほぼ２倍の効果のあることが明らかである（図
８）。これらの応答は、かなりの再現性があるものであ
る（誤差の棒は非常に小さい）。まとめのグラフ（図
９）は、血清にのみ曝された細胞を制御するために血清
に対して添加されたＰＰＳの効果を比較したものであ
る。
与量−応答は、５０μｇ／ｍｌにて平坦化されたが（図
６）、３日目において、最大抑制応答が２５μｇ／ｍｌ
にて示された（図７）。無添加（対照）とヘパリン（１
００μｇ／ｍｌ）とＰＰＳ（１００μｇ／ｍｌ）との間
の比較から、モル基準として、ＰＰＳは、純粋なヘパリ
ンよりもほぼ２倍の効果のあることが明らかである（図
８）。これらの応答は、かなりの再現性があるものであ
る（誤差の棒は非常に小さい）。まとめのグラフ（図
９）は、血清にのみ曝された細胞を制御するために血清
に対して添加されたＰＰＳの効果を比較したものであ
る。
【００３８】実験Ｂ 正常なメサンギウム細胞層を、種々の期間、ＰＰＳ（１
００μｇ／ｍｌ）に曝し、逆転写させ、ｍＲＮＡレベル
を、選択した分子について１日目において測定し、３日
目及び５日目におけるレベルと比較した（図１０参
照）。タイプＩＶコラーゲンｍＲＮＡにおける変化はな
く、タイプＩコラーゲンｍＲＮＡは実質的に減少し、Ｔ
ＧＦ−βｍＲＮＡは５０％減少し、９２ｋＤａ酵素活性
は５０％以上増加した。対照は、変化することがなく、
処理された細胞における増殖のない場合と一致するβ−
アクチンであった。
００μｇ／ｍｌ）に曝し、逆転写させ、ｍＲＮＡレベル
を、選択した分子について１日目において測定し、３日
目及び５日目におけるレベルと比較した（図１０参
照）。タイプＩＶコラーゲンｍＲＮＡにおける変化はな
く、タイプＩコラーゲンｍＲＮＡは実質的に減少し、Ｔ
ＧＦ−βｍＲＮＡは５０％減少し、９２ｋＤａ酵素活性
は５０％以上増加した。対照は、変化することがなく、
処理された細胞における増殖のない場合と一致するβ−
アクチンであった。
【００３９】実施例５ ＧＨ遺伝子導入マウスを用いた実験 実験計画： 生後６週のＧＨ遺伝子導入マウス１２匹を、
このマウスＧＨ配列とは相互反応しない牛成長ホルモン
ｃＤＮＡに対する特殊なプライマーを使用して、尾生検
からの洗浄剤抽出物質のＰＣＲ分析により同定した。６
匹のＧＨマウスは、飲料水中に入れた経口ＰＰＳナトリ
ウム（エルミロン（登録商標）、ベーカーノートンファ
ーマシューティカルズ、インコーポレイテッド）を用い
て１０〜１２週間の間、処置し、これと同様の週齢であ
る６匹のＧＨマウスには、同じ期間の間、水道水を与え
た。飲料水中のＰＰＳナトリウムの量は、動物の体重１
ｋｇ当たり約１００ｍｇであった。
このマウスＧＨ配列とは相互反応しない牛成長ホルモン
ｃＤＮＡに対する特殊なプライマーを使用して、尾生検
からの洗浄剤抽出物質のＰＣＲ分析により同定した。６
匹のＧＨマウスは、飲料水中に入れた経口ＰＰＳナトリ
ウム（エルミロン（登録商標）、ベーカーノートンファ
ーマシューティカルズ、インコーポレイテッド）を用い
て１０〜１２週間の間、処置し、これと同様の週齢であ
る６匹のＧＨマウスには、同じ期間の間、水道水を与え
た。飲料水中のＰＰＳナトリウムの量は、動物の体重１
ｋｇ当たり約１００ｍｇであった。
【００４０】糸球体の分離、及び原位置逆転写(in situ
Reverse Transcription) ：糸球体を、ＲＮａｓｅ抑制
因子の存在下で顕微解剖によって分離した。左腎臓を、
食塩水を用いて、引き続き可溶性のＲＮａｓｅ抑制因子
を含有するコラゲナーゼ溶液を用いて灌流した。この下
極を、コラゲナーゼ灌流の前に取り除き、電気泳動法の
ためにドライアイス上で硬く凍らせた。コラゲナーゼ消
化の後、４０〜６０個の糸球体を逆転写（ＲＴ）のため
に、バナジルリボヌクレオチド錯体の存在下において４
℃で分離した。ＲＴ成分を添加する前に、糸球体を、ア
セトンドライアイス中で１回凍結−解凍し、かつ、２％
のトリトンと、ヒト胎盤ＲＮａｓｅ抑制因子（ベーリン
ガーマンハイム、インディアナポリス、ＩＮ）の４ユニ
ット／μｌとの存在下において２℃で５分間超音波処理
することを除き、原位置ＲＴを上述と同様にして行っ
た。超音波処理の間にサイプルを冷却するために、微超
音波細胞破壊機（コンテス、バインランド、ＮＪ）を使
用した。
Reverse Transcription) ：糸球体を、ＲＮａｓｅ抑制
因子の存在下で顕微解剖によって分離した。左腎臓を、
食塩水を用いて、引き続き可溶性のＲＮａｓｅ抑制因子
を含有するコラゲナーゼ溶液を用いて灌流した。この下
極を、コラゲナーゼ灌流の前に取り除き、電気泳動法の
ためにドライアイス上で硬く凍らせた。コラゲナーゼ消
化の後、４０〜６０個の糸球体を逆転写（ＲＴ）のため
に、バナジルリボヌクレオチド錯体の存在下において４
℃で分離した。ＲＴ成分を添加する前に、糸球体を、ア
セトンドライアイス中で１回凍結−解凍し、かつ、２％
のトリトンと、ヒト胎盤ＲＮａｓｅ抑制因子（ベーリン
ガーマンハイム、インディアナポリス、ＩＮ）の４ユニ
ット／μｌとの存在下において２℃で５分間超音波処理
することを除き、原位置ＲＴを上述と同様にして行っ
た。超音波処理の間にサイプルを冷却するために、微超
音波細胞破壊機（コンテス、バインランド、ＮＪ）を使
用した。
【００４１】標準及び競合ＰＣＲ分析：マウスα1 ＩＶ
及びα1 Ｉコラーゲン、α平滑筋細胞アクチン、β−ア
クチン、ラミニンＢｌ、テナスチン(tenascin)、９２ｋ
Ｄａ金属プロテイナーゼ及び７２ｋＤａ金属プロテイナ
ーゼｍＲＮＡｓ用のプライマー、及び、牛成長ホルモン
ゲノミックＤＮＡ用のプライマーを、ＰＣＲ−メイト
（アプライド バイオシステムズ、フォスターシティ
ー、ＣＡ）上で合成した。それぞれ増幅された生成物の
同一性は、大きさと制限酵素分析によって証明された。
ｍＲＮＡ用のプライマー特異性は、逆転写酵素を取り除
くことによって決定された。ＰＣＲは、ゲンアンプＤＮ
Ａ増幅キット（パーキンエルマーシータス、ノルウォー
ク、ＣＴ）を使用することによって行った。最初に、４
０〜６０個の糸球体／マウスのプールから得られたｃＤ
ＮＡを、標準ＰＣＲにより、ＰＣＲ増幅の対数−直線部
を用いて分析した。これにより、ｍＲＮＡレベルの迅速
な非定量的評価が可能となった。その後、α1 ＩＶコラ
ーゲン（及びＧＡＰＤＨ酵素に対するα1 ＩＶコラーゲ
ンの割合を、動物間のデータを標準化させるために算出
した）、ＰＤＧＦ−Ｂ、α平滑筋細胞アクチン、β−ア
クチン、及びラミニンＢｌｃＤＮＡｓを測定するため
に、小さな内部遺伝子欠失又は新しい制限酵素部位を有
する、各分子についてのｃＤＮＡ突然変異株を作ること
により競合ＰＣＲ分析を用いた。ＰＣＲ生成物の分析
は、クァンティティワン（Quantity One、登録商標）イ
メージ分析ソフトウェアが載ったＰＤＩ自記濃度記録計
(densitometer)を用いて行った。競合ＰＣＲ分析は、２
回又は３回行った。
及びα1 Ｉコラーゲン、α平滑筋細胞アクチン、β−ア
クチン、ラミニンＢｌ、テナスチン(tenascin)、９２ｋ
Ｄａ金属プロテイナーゼ及び７２ｋＤａ金属プロテイナ
ーゼｍＲＮＡｓ用のプライマー、及び、牛成長ホルモン
ゲノミックＤＮＡ用のプライマーを、ＰＣＲ−メイト
（アプライド バイオシステムズ、フォスターシティ
ー、ＣＡ）上で合成した。それぞれ増幅された生成物の
同一性は、大きさと制限酵素分析によって証明された。
ｍＲＮＡ用のプライマー特異性は、逆転写酵素を取り除
くことによって決定された。ＰＣＲは、ゲンアンプＤＮ
Ａ増幅キット（パーキンエルマーシータス、ノルウォー
ク、ＣＴ）を使用することによって行った。最初に、４
０〜６０個の糸球体／マウスのプールから得られたｃＤ
ＮＡを、標準ＰＣＲにより、ＰＣＲ増幅の対数−直線部
を用いて分析した。これにより、ｍＲＮＡレベルの迅速
な非定量的評価が可能となった。その後、α1 ＩＶコラ
ーゲン（及びＧＡＰＤＨ酵素に対するα1 ＩＶコラーゲ
ンの割合を、動物間のデータを標準化させるために算出
した）、ＰＤＧＦ−Ｂ、α平滑筋細胞アクチン、β−ア
クチン、及びラミニンＢｌｃＤＮＡｓを測定するため
に、小さな内部遺伝子欠失又は新しい制限酵素部位を有
する、各分子についてのｃＤＮＡ突然変異株を作ること
により競合ＰＣＲ分析を用いた。ＰＣＲ生成物の分析
は、クァンティティワン（Quantity One、登録商標）イ
メージ分析ソフトウェアが載ったＰＤＩ自記濃度記録計
(densitometer)を用いて行った。競合ＰＣＲ分析は、２
回又は３回行った。
【００４２】結果：図１１に示されるように、タイプＩ
Ｖコラーゲン／ＧＡＰＤＨの平均比率は、未処理（対
照）グループのマウスの場合よりも、経口ＰＰＳナトリ
ウムを用いて処理したマウスのグループでは半分未満で
あった。このような差は、未処理の動物に比べて、処理
された動物の糸球体中には瘢痕タイプのコラーゲンがか
なり少量しか存在していなかったことを示しており、こ
のことは、組織学的試験及び免疫螢光顕微鏡検査法によ
って確認された。
Ｖコラーゲン／ＧＡＰＤＨの平均比率は、未処理（対
照）グループのマウスの場合よりも、経口ＰＰＳナトリ
ウムを用いて処理したマウスのグループでは半分未満で
あった。このような差は、未処理の動物に比べて、処理
された動物の糸球体中には瘢痕タイプのコラーゲンがか
なり少量しか存在していなかったことを示しており、こ
のことは、組織学的試験及び免疫螢光顕微鏡検査法によ
って確認された。
【００４３】実施例６ 渡辺ウサギを用いた実験 渡辺ウサギ〔このウサギの遺伝的傾向は、渡辺遺伝性高
脂血症ウサギ（ＷＨＨＬ, Watanabe heritable hyperli
pidemic rabbit）として技術的に知られている〕は、自
然の内因性過コレステリン血症の動物モデルとして役立
つ。このような特性は、同型接合状態において完全に示
され、異型接合状態においては部分的に示され、単遺伝
子欠陥(single-gene defect)によるものである。同型接
合の渡辺ウサギは、通常の日本白ウサギよりも８〜１４
倍も大きな血清コレステロール濃度を有している。
脂血症ウサギ（ＷＨＨＬ, Watanabe heritable hyperli
pidemic rabbit）として技術的に知られている〕は、自
然の内因性過コレステリン血症の動物モデルとして役立
つ。このような特性は、同型接合状態において完全に示
され、異型接合状態においては部分的に示され、単遺伝
子欠陥(single-gene defect)によるものである。同型接
合の渡辺ウサギは、通常の日本白ウサギよりも８〜１４
倍も大きな血清コレステロール濃度を有している。
【００４４】渡辺ウサギは、特に大動脈において、アテ
ローム性動脈硬化プラークの非常に高い出現率を有して
いる。アテローム性動脈硬化症の発生及び発病度の速度
は、このウサギにコレステロールの多い食餌を与えるこ
とによって増加させることができる。
ローム性動脈硬化プラークの非常に高い出現率を有して
いる。アテローム性動脈硬化症の発生及び発病度の速度
は、このウサギにコレステロールの多い食餌を与えるこ
とによって増加させることができる。
【００４５】以下の２つの実験を、渡辺ウサギにおける
ＰＰＳの抗アテローム性動脈硬化活性を確認するために
行った。
ＰＰＳの抗アテローム性動脈硬化活性を確認するために
行った。
【００４６】実験Ａ：ＰＰＳの皮下評価 １２匹の渡辺ウサギを、それぞれ６匹の２つのグループ
（グループＡとグループＢ）に分け、高コレステロール
の食餌（０．５％コレステロール）を与えた。グループ
Ａの動物を毎日、皮下的に通常の食塩水を用いて処理す
る一方、グループＢの動物を毎日、皮下的にＰＰＳナト
リウム（エルミロン（登録商標））１０ｍｇ／ｋｇを用
いて処理した。
（グループＡとグループＢ）に分け、高コレステロール
の食餌（０．５％コレステロール）を与えた。グループ
Ａの動物を毎日、皮下的に通常の食塩水を用いて処理す
る一方、グループＢの動物を毎日、皮下的にＰＰＳナト
リウム（エルミロン（登録商標））１０ｍｇ／ｋｇを用
いて処理した。
【００４７】ＰＰＳ処理された動物（グループＢ）のう
ちの４匹は、実験が終了する前に死亡し、１匹は２２日
目で、３匹は８０日目と８６日目との間であった。８９
日目に、グループＡの動物とグループＢの残った２匹の
動物を安楽死させ、剖検し、これらの組織、特に大動脈
の異なる主要な枝管からの切片を評価した。
ちの４匹は、実験が終了する前に死亡し、１匹は２２日
目で、３匹は８０日目と８６日目との間であった。８９
日目に、グループＡの動物とグループＢの残った２匹の
動物を安楽死させ、剖検し、これらの組織、特に大動脈
の異なる主要な枝管からの切片を評価した。
【００４８】結果：以下の表Ｉに示されるように、処理
グループＢの動物は、試験した大動脈断面の全てにおい
て、グループＡの対照ウサギに比べ、プラーク析出がは
るかに小さく、しかも、プラークに対する平滑筋層の比
率がはるかに大きい（６．８倍大きい）ことが分かっ
た。これらの発見は、図１２に示されている写真におい
て、目に見えるようにして図示されている。対照グルー
プ動物からの腹部大動脈の断面には、かなりの断面領域
において非常に発達したアテローム性動脈硬化プラーク
が見られる。処理グループの動物には、対照グループと
同じ高コレステロールの食餌を与えたが、ＰＰＳナトリ
ウムを用いて処理された動物の腹部大動脈の断面には、
プラークの徴候はほとんど示されていない。
グループＢの動物は、試験した大動脈断面の全てにおい
て、グループＡの対照ウサギに比べ、プラーク析出がは
るかに小さく、しかも、プラークに対する平滑筋層の比
率がはるかに大きい（６．８倍大きい）ことが分かっ
た。これらの発見は、図１２に示されている写真におい
て、目に見えるようにして図示されている。対照グルー
プ動物からの腹部大動脈の断面には、かなりの断面領域
において非常に発達したアテローム性動脈硬化プラーク
が見られる。処理グループの動物には、対照グループと
同じ高コレステロールの食餌を与えたが、ＰＰＳナトリ
ウムを用いて処理された動物の腹部大動脈の断面には、
プラークの徴候はほとんど示されていない。
【００４９】
【表１】
【００５０】実験Ｂ：ＰＰＳの経口評価 ２０匹の渡辺ウサギを、それぞれ５匹の４つのグルー
プ、グループＡ〜グループＤに分けた。このウサギの全
てに、同じ高コレステロールの食餌（０．５％コレステ
ロール）を与えた。グループＡとＢの動物には飲料用の
水道水を与える一方、グループＣとＤの動物には、０．
５ｍｇ／ｍＬのＰＰＳナトリウム（エルミロン（登録商
標））を含有する水道水を与えた。事前に実験した動物
による水消費の観察に基づいて、処理グループ中の各動
物により消費されたＰＰＳナトリウムの１日の総投与量
は約３０ｍｇ／ｋｇであった。
プ、グループＡ〜グループＤに分けた。このウサギの全
てに、同じ高コレステロールの食餌（０．５％コレステ
ロール）を与えた。グループＡとＢの動物には飲料用の
水道水を与える一方、グループＣとＤの動物には、０．
５ｍｇ／ｍＬのＰＰＳナトリウム（エルミロン（登録商
標））を含有する水道水を与えた。事前に実験した動物
による水消費の観察に基づいて、処理グループ中の各動
物により消費されたＰＰＳナトリウムの１日の総投与量
は約３０ｍｇ／ｋｇであった。
【００５１】処理したウサギのうちの２匹は、ＰＰＳと
は明らかに無関係の腫瘍のために、４日目と１１日目に
それぞれ実験から取り除いた。
は明らかに無関係の腫瘍のために、４日目と１１日目に
それぞれ実験から取り除いた。
【００５２】グループＡとＣの動物を、実験を始めて５
０日目に安楽死させ、剖検し、これらの大動脈を調べ
た。グループＡ（対照）動物の動脈内膜と、グループＣ
（処理された）動物のものとの間には、視覚的に顕著な
違いが観察され、後者においては、アテローム性動脈硬
化プラーク発生が少ないことが示された。
０日目に安楽死させ、剖検し、これらの大動脈を調べ
た。グループＡ（対照）動物の動脈内膜と、グループＣ
（処理された）動物のものとの間には、視覚的に顕著な
違いが観察され、後者においては、アテローム性動脈硬
化プラーク発生が少ないことが示された。
【００５３】グループＢとＤのウサギは、実験を始めて
６４日目に安楽死させ、剖検した。これらのグループの
大動脈を組織学的に調査し、種々の大動脈枝における動
脈内膜及び内側板(medial layers) のそれぞれの断面を
測定した。
６４日目に安楽死させ、剖検した。これらのグループの
大動脈を組織学的に調査し、種々の大動脈枝における動
脈内膜及び内側板(medial layers) のそれぞれの断面を
測定した。
【００５４】図１３はそれぞれ、対照グループ（グルー
プＢ）と処理グループ（グループＤ）のウサギの大動脈
の種々の枝管から採得した動脈内膜の、断面において測
定された平均動脈内膜領域を示す棒グラフである。図１
２には、試験された各大動脈枝においては、動脈内膜領
域が、未処理のものと比べて処理された動物では実質的
に小さかったことが示されており、このことは、処理グ
ループの血管系におけるアテローム性動脈硬化病変及び
プラーク析出が実質的に少なかったことを意味してい
る。
プＢ）と処理グループ（グループＤ）のウサギの大動脈
の種々の枝管から採得した動脈内膜の、断面において測
定された平均動脈内膜領域を示す棒グラフである。図１
２には、試験された各大動脈枝においては、動脈内膜領
域が、未処理のものと比べて処理された動物では実質的
に小さかったことが示されており、このことは、処理グ
ループの血管系におけるアテローム性動脈硬化病変及び
プラーク析出が実質的に少なかったことを意味してい
る。
【００５５】図１４は、図１３に記載されているものと
同様のグループＢとＤのウサギから採得した同じ大動脈
断面における内側領域に対する動脈内膜の比率について
の平均値を示すものである。この比率は、血管壁上に析
出した瘢痕組織及びプラークの相対量を反映するもので
あり（この析出物が動脈内膜の断面積を増加させる）、
この比率は、未処理の動物（グループＢ）に比べて処理
したウサギ（グループＤ）のいずれの大動脈枝において
も低かった。
同様のグループＢとＤのウサギから採得した同じ大動脈
断面における内側領域に対する動脈内膜の比率について
の平均値を示すものである。この比率は、血管壁上に析
出した瘢痕組織及びプラークの相対量を反映するもので
あり（この析出物が動脈内膜の断面積を増加させる）、
この比率は、未処理の動物（グループＢ）に比べて処理
したウサギ（グループＤ）のいずれの大動脈枝において
も低かった。
【００５６】科学的に妥当な実験方法により得られた前
述のデータは、コラーゲン分解酵素の活性を増加させる
一方、過剰の細胞外基質コラーゲン及びある種の細胞成
長因子の合成を減少させるのに、ＰＰＳが有効であるこ
とを示している。これらの効果は、ＰＰＳが、臨床的管
理及び、ＣＰＶＳＤ、特に動脈硬化症、アテローム性動
脈硬化症及び糖尿病性腎臓病症状の逆転において非常に
有効であることを意味している。
述のデータは、コラーゲン分解酵素の活性を増加させる
一方、過剰の細胞外基質コラーゲン及びある種の細胞成
長因子の合成を減少させるのに、ＰＰＳが有効であるこ
とを示している。これらの効果は、ＰＰＳが、臨床的管
理及び、ＣＰＶＳＤ、特に動脈硬化症、アテローム性動
脈硬化症及び糖尿病性腎臓病症状の逆転において非常に
有効であることを意味している。
【００５７】このように、本発明の種々の目的を達成
し、かつ、実際の使用条件に非常に良く適合している方
法及び組成物が提供されることが示されてきた。
し、かつ、実際の使用条件に非常に良く適合している方
法及び組成物が提供されることが示されてきた。
【００５８】種々の可能な実施態様が上記本発明では可
能であり、しかも、種々の変更が前述の実施態様におい
ては可能であるので、ここに記載している全てのことは
具体例を示すものとして理解されるべきであって、限定
の意味ではないと理解すべきである。
能であり、しかも、種々の変更が前述の実施態様におい
ては可能であるので、ここに記載している全てのことは
具体例を示すものとして理解されるべきであって、限定
の意味ではないと理解すべきである。
【００５９】新規なものとして、特許証により保護され
ることが望まれているものが、特許請求の範囲に記載さ
れている。
ることが望まれているものが、特許請求の範囲に記載さ
れている。
【００６０】
【発明の効果】本発明の医薬組成物は、疾病の過程を停
止するだけでなく、実際にその過程を逆行させ、存在す
る傷痕または病巣の退行を起こす慢性進行性血管傷痕疾
病（ＣＰＶＳＤ）を治療するのに有用であり、しかも、
この組成物は、非毒性であり重大な副作用を起こさず、
ＣＰＶＳＤの治療に高い効果を示す。
止するだけでなく、実際にその過程を逆行させ、存在す
る傷痕または病巣の退行を起こす慢性進行性血管傷痕疾
病（ＣＰＶＳＤ）を治療するのに有用であり、しかも、
この組成物は、非毒性であり重大な副作用を起こさず、
ＣＰＶＳＤの治療に高い効果を示す。
【図１】正常な５週令のマウスからの腎糸球体の１／１
０に対する競合的ＰＣＲによるα1 ＩＶコラーゲンｍＲ
ＮＡの定量を表す図であり（実施例１記載の通り）、 ａ）最上部のパネルには、反応の構成およびＰＣＲ増幅
後の相当する臭化エチジュウム染色ゲル、および ｂ）下部のパネルには、腎糸球体当たり変異体コラーゲ
ンＣＤＮＡの比率に対し、すべてのＰＣＲ試薬を含む９
つの管のそれぞれに挿入された変異体ＤＮＡの量をプロ
ットしたグラフが示されている。
０に対する競合的ＰＣＲによるα1 ＩＶコラーゲンｍＲ
ＮＡの定量を表す図であり（実施例１記載の通り）、 ａ）最上部のパネルには、反応の構成およびＰＣＲ増幅
後の相当する臭化エチジュウム染色ゲル、および ｂ）下部のパネルには、腎糸球体当たり変異体コラーゲ
ンＣＤＮＡの比率に対し、すべてのＰＣＲ試薬を含む９
つの管のそれぞれに挿入された変異体ＤＮＡの量をプロ
ットしたグラフが示されている。
【図２】ａ）図２Ａ及び図２Ｂには、腎臓癌をもつ二つ
の腎臓摘出試料（Ａ−正常腎糸球体組織学、Ｂ−顕著な
硬変）が、 ｂ）図２Ｃ及び図２Ｄには、免疫蛍光顕微鏡図、同じ腎
臓内のＩＶ型コラーゲンへの抗体が示されている。
の腎臓摘出試料（Ａ−正常腎糸球体組織学、Ｂ−顕著な
硬変）が、 ｂ）図２Ｃ及び図２Ｄには、免疫蛍光顕微鏡図、同じ腎
臓内のＩＶ型コラーゲンへの抗体が示されている。
【図３】ｃ）図３には、同じ腎臓内の硬変指数を示す棒
グラフが表されており、α1 ＩＶコラーゲンＣＤＮＡは
５０に細断された腎糸球体のプール内での競合的ＰＣＲ
定量によって測定された（値は、１４５±２２対１０４
６±７４×１０-4ａｔｔｏｍｏｌｅｓ／腎糸球体）。
グラフが表されており、α1 ＩＶコラーゲンＣＤＮＡは
５０に細断された腎糸球体のプール内での競合的ＰＣＲ
定量によって測定された（値は、１４５±２２対１０４
６±７４×１０-4ａｔｔｏｍｏｌｅｓ／腎糸球体）。
【図４】腎糸球体の比較的細胞数およびα2 ＩＶコラー
ゲンｃＤＮＡ水準で表した、硬変をもつ五人の患者と比
較した腎糸球体硬変のない五人のヒトの患者の腎臓内で
の硬変指数を表す棒グラフである。
ゲンｃＤＮＡ水準で表した、硬変をもつ五人の患者と比
較した腎糸球体硬変のない五人のヒトの患者の腎臓内で
の硬変指数を表す棒グラフである。
【図５】膜質の腎糸球体腎炎（ＭＮ）および糖尿性腎臓
病（ＤＭ）をもつヒトの患者からの、および腎糸球体硬
変をもち（ＮＸＧＳ）、および腎糸球体硬変を持たない
（ＮＸＮ１）腎臓切除術からのα2 ／α3 ＩＶコラーゲ
ンｍＲＮＡ比を表す棒グラフである。
病（ＤＭ）をもつヒトの患者からの、および腎糸球体硬
変をもち（ＮＸＧＳ）、および腎糸球体硬変を持たない
（ＮＸＮ１）腎臓切除術からのα2 ／α3 ＩＶコラーゲ
ンｍＲＮＡ比を表す棒グラフである。
【図６】三重水素化チミジン配合（２４時間の培養）に
よって決定され、１０3 の細胞当たり毎分の三重水素化
係数対μｇ／ｍｌで表したＰＰＳナトリウム濃度として
プロットされた正常脈管膜細胞内でのＤＮＡ合成に対す
るＰＰＳの効果を表す棒グラフである。
よって決定され、１０3 の細胞当たり毎分の三重水素化
係数対μｇ／ｍｌで表したＰＰＳナトリウム濃度として
プロットされた正常脈管膜細胞内でのＤＮＡ合成に対す
るＰＰＳの効果を表す棒グラフである。
【図７】三日間の培養後の細胞数対μｇ／ｍｌで表した
ＰＰＳナトリウムの添加濃度をプロットした、正常脈管
膜細胞内での細胞の成長に対するＰＰＳの効果を表す棒
グラフである。
ＰＰＳナトリウムの添加濃度をプロットした、正常脈管
膜細胞内での細胞の成長に対するＰＰＳの効果を表す棒
グラフである。
【図８】三日間および五日間の培養後の正常脈管膜細胞
内での細胞の成長に対するＰＰＳナトリウムおよびヘパ
リンの（未処理の対照群を用いた）効果の比較を表す棒
グラフである。
内での細胞の成長に対するＰＰＳナトリウムおよびヘパ
リンの（未処理の対照群を用いた）効果の比較を表す棒
グラフである。
【図９】血清だけで培養された対照細胞と比較した、血
清とＰＰＳナトリウムを用いて培養した細胞内での正常
脈管膜細胞増殖の時間経過を表すグラフである。
清とＰＰＳナトリウムを用いて培養した細胞内での正常
脈管膜細胞増殖の時間経過を表すグラフである。
【図１０】種々の期間の間、ＰＰＳナトリウム（１００
μｇ／ｍｌ）に暴露し、逆転写された正常脈管膜細胞か
らのＭＲＮＡ値の表であり、α1 ＩＶおよびα1 Ｉコラ
ーゲンｍＲＮＡ、コラーゲナーゼ（メタロプロテイナー
ゼ）７２ｋＤａおよび９２ｋＤａ ｍＲＮＡ、成長因子
ＴＧＦ−β ｍＲＮＡおよび細胞蛋白β−アクチンｍＲ
ＮＡの水準の増加、減少または変化の欠如を表してい
る。
μｇ／ｍｌ）に暴露し、逆転写された正常脈管膜細胞か
らのＭＲＮＡ値の表であり、α1 ＩＶおよびα1 Ｉコラ
ーゲンｍＲＮＡ、コラーゲナーゼ（メタロプロテイナー
ゼ）７２ｋＤａおよび９２ｋＤａ ｍＲＮＡ、成長因子
ＴＧＦ−β ｍＲＮＡおよび細胞蛋白β−アクチンｍＲ
ＮＡの水準の増加、減少または変化の欠如を表してい
る。
【図１１】１０〜１２週間の間、飲料水中のＰＰＳナト
リウムを投与されたＧＨトランスジェニックマウスから
の腎糸球体および未処理水を受ける対照のＧＨマウスか
らの腎糸球体によってそれぞれ同化された、競合ＰＣＲ
によって測定された、α1ＩＶコラーゲン／ＧＡＰＤＨ
の比を表す棒グラフである。
リウムを投与されたＧＨトランスジェニックマウスから
の腎糸球体および未処理水を受ける対照のＧＨマウスか
らの腎糸球体によってそれぞれ同化された、競合ＰＣＲ
によって測定された、α1ＩＶコラーゲン／ＧＡＰＤＨ
の比を表す棒グラフである。
【図１２】未処理の対照群からの安楽死させた渡辺ウサ
ギおよび皮下ＰＰＳナトリウム（エルミロン（登録商
標））で処理した群からの他の渡辺ウサギの腹腔大動脈
の断面の写真を示す。
ギおよび皮下ＰＰＳナトリウム（エルミロン（登録商
標））で処理した群からの他の渡辺ウサギの腹腔大動脈
の断面の写真を示す。
【図１３】高コレステロール食餌だけを受けている渡辺
ウサギの大動脈の種々の枝管の内膜の断面積および、高
コレステロール食餌と飲料水中のＰＰＳナトリウムとを
受けている渡辺ウサギの他の群から採得した比較可能な
断面の内膜面積を表す棒グラフである。
ウサギの大動脈の種々の枝管の内膜の断面積および、高
コレステロール食餌と飲料水中のＰＰＳナトリウムとを
受けている渡辺ウサギの他の群から採得した比較可能な
断面の内膜面積を表す棒グラフである。
【図１４】高コレステロール食餌だけを受けている渡辺
ウサギの大動脈の種々の枝管の内膜の中央断面積に対す
る内膜断面積の比および、高コレステロール食餌と飲料
水中のＰＰＳナトリウムとを受けている渡辺ウサギの他
の群から採得した断面で測定した比較可能な比を表す棒
グラフである。
ウサギの大動脈の種々の枝管の内膜の中央断面積に対す
る内膜断面積の比および、高コレステロール食餌と飲料
水中のＰＰＳナトリウムとを受けている渡辺ウサギの他
の群から採得した断面で測定した比較可能な比を表す棒
グラフである。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.6 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 31/725 ＡＣＶ Ａ６１Ｋ 31/725 ＡＣＶ 47/12 47/12 Ｂ 47/38 47/38 Ｂ
Claims (16)
- 【請求項１】 瘢痕又は糖尿病性腎臓病症により特徴付
けられる動脈硬化の形態である慢性進行性血管瘢痕疾患
にかかった哺乳動物患者を治療するための医薬組成物で
あって、前記疾患の進行を停止させ、既に形成された瘢
痕病変の軽減又は減少をもたらすものであって、前記組
成物が、血管瘢痕疾患を治療するのに有効な量のペント
ザンポリスルフェート又は製薬学的に受容可能なその塩
を含有することを特徴とする、慢性進行性血管瘢痕疾患
を治療するための医薬組成物。 - 【請求項２】 前記疾患が、大動脈又はその主要な枝管
の動脈硬化症であることを特徴とする請求項１記載の組
成物。 - 【請求項３】 前記疾患が、瘢痕により特徴付けられる
動脈硬化症の形態であり、しかも、該動脈硬化症瘢痕経
過が前記組成物によって逆転されることを特徴とする請
求項１記載の組成物。 - 【請求項４】 前記動脈硬化症の形態が、アテローム性
動脈硬化症であり、しかも、前記瘢痕が、アテローム性
動脈硬化斑に冒された動脈壁を含むことを特徴とする請
求項３記載の組成物。 - 【請求項５】 前記疾患が糖尿病性腎臓病症であること
を特徴とする請求項１記載の組成物。 - 【請求項６】 ペントザンポリスルフェート又は製薬学
的に受容可能なその塩の１日の総投与量が、約３５０〜
約２０００ｍｇ、又は、患者の体重１ｋｇ当たり約５〜
約３０ｍｇとなるように患者に投薬されることを特徴と
する請求項１記載の組成物。 - 【請求項７】 前記の１日の投与量が約５００〜約１５
００ｍｇであることを特徴とする請求項６記載の組成
物。 - 【請求項８】 前記の１日の投与量が、１個〜４個に等
しく分割された投薬量で、それぞれ製薬学的投薬形態に
て投薬されることを特徴とする請求項６記載の組成物。 - 【請求項９】 前記投薬形態が、経口的に投与される投
薬形態であることを特徴とする請求項８記載の組成物。 - 【請求項１０】 前記投薬形態が、慣習的又は持続作用
性錠剤、コートされた錠剤、カプセル、カプレット、ロ
ゼンジ、液体及びエリキシルから成るグループより選ば
れたものであることを特徴とする請求項９記載の組成
物。 - 【請求項１１】 前記投薬形態が、少なくとも１種の製
薬学的に受容可能な不活性成分を含むことを特徴とする
請求項９記載の組成物。 - 【請求項１２】 前記不活性成分が、充填剤、結合剤、
溶剤、賦形剤又は担体であることを特徴とする請求項１
１記載の組成物。 - 【請求項１３】 前記投薬形態が、約５０〜約３００ｍ
ｇのペントザンポリスルフェート又は製薬学的に受容可
能なその塩を含有することを特徴とする請求項９記載の
組成物。 - 【請求項１４】 前記の製薬学的に受容可能な塩が、ナ
トリウム塩であることを特徴とする請求項１記載の組成
物。 - 【請求項１５】 前記組成物が、ペントザンポリスルフ
ェートのナトリウム塩、微結晶性セルロース及びステア
リン酸マグネシウムを含有するゼラチンカプセルの形態
であることを特徴とする請求項１４記載の組成物。 - 【請求項１６】 前記患者が人間の患者であることを特
徴とする請求項１記載の組成物。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US08/840,777 US20010005720A1 (en) | 1995-06-07 | 1997-04-16 | Method of treating chronic progressive vascular scarring diseases |
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