JPH11502193A

JPH11502193A - セラミド仲介シグナル導入の抑制のための化合物

Info

Publication number: JPH11502193A
Application number: JP8521051A
Authority: JP
Inventors: エー．カーソン、デニス; ビー．コッタム、ハワード; ワッソン、ディー．ブルース
Original assignee: University of California
Current assignee: University of California
Priority date: 1994-12-29
Filing date: 1995-12-18
Publication date: 1999-02-23
Also published as: EP0801568B1; WO1996020710A1; DE69534438T2; ATE220549T1; AU717243B2; DE69527438D1; DE69534438D1; ATE303994T1; CA2208580A1; EP0801568A4; AU4601996A; DE69527438T2; EP0801568A1

Abstract

(57)【要約】少なくとも１つの環状窒素、開示した側鎖およびいくつかの実施態様では当該環状窒素に対してオルト位に酸素を有する新規な複素環化合物は、ＴＮＦ−α関連炎症反応および線維芽細胞増殖をインビボおよびインビトロで抑制する。本発明の化合物は、ｃＡＭＰホスホジエステラーゼ活性も、またホスファチジン酸加水分解も認識できるほどには抑制せず、さらに細胞毒性も細胞増殖抑制も示さない。本発明の好ましい化合物はエステルである。刺激に対するセラミド仲介細胞内反応をインビボで抑制する新規な化合物の使用方法も開示する。本方法は、炎症反応を抑制するために（例えば血管形成術後の）、線維症を制限するために（例えば肝硬変での）、細胞老化、細胞アポプトシスおよびＵＶ誘発皮膚免疫抑制を抑制するために使用できると期待されている。

Description

【発明の詳細な説明】セラミド仲介シグナル導入の抑制のための化合物関連特許出願本出願は、米国特許出願第08/367,102号（1994年12月29日出願）の部分継続出願である。政府の支援に関する記述本発明は、米国国立衛生研究所の許可番号ＧＭ−２３２００の下、政府の支援を受け行われた。合衆国政府は本発明について一定の権利を有する。発明の背景１．発明の分野本発明は、セラミド仲介シグナル導入によって刺激される細胞反応、特にサイトカイン腫瘍壊死因子α（ＴＮＦ−α）による刺激に対する反応を調節するのに有効な化合物に関し、より具体的には、セラミド仲介シグナル導入経路を介する細胞刺激に付随する病状の進行を抑制する化合物に関する。２．従来技術スフィンゴミエリン経路は、いくつかのサイトカイン（ＴＮＦ−αおよびＩＬ −１βを含む）および増殖因子（例えば血小板由来増殖因子および線維芽細胞増殖因子）に対する細胞反応を仲介するのに必要であると考えられている細胞シグナル導入経路である（例えば、Dresslerら、Science 259:1715-1718(1992);及び Jacobs & Kester，Amer．J．Physiol．265:740-747(1993)を参照のこと）。そのような分子と細胞表面レセプターとの相互反応が、形質膜のスフィンゴミエリナーゼの活性化の引き金となると考えられている。スフィンゴミエリナーゼは、スフィンゴミエリンからセラミドおよびホスホコリンへの加水分解を触媒する。セラミドは、プロリン誘導セリン／トレオニンキナーゼ（セラミド活性化タンパクキナーゼ即ち“ＣａＰＫ”）の活性化を介して第二のメッセンジャーとして作用すると考えられている。セラミドはまた、ＭＡＰキナーゼおよびタンパクキナーゼＣゼータ（例えば、Rivasら、Blood 83:2191-2197(1993)を参照のこと）、並びにセリン／トレオニンタンパクホスファターゼとも相互作用する（Hannunら、 TIBS 20:73-77(1995)を参照のこと）。最近の研究によって、スフィンゴミエリン経路は、ＴＮＦ−αとの反応において（例えば、Jayadev ら、J．Biol．Chem．270:2047-2052(1994); Dbaiboら、J ．Biol．Chem．268:17762-17766(1993)を参照のこと）、さらに照射に反応して（Haimovitz-Friedmanら、J．Exp．Med．180:525-535(1994)）細胞の老化およびアポプトシス（計画的細胞死）を仲介するのではないかという証拠が提供された。この点についてセラミドは細胞内のプロセスにおいてＴＮＦ−αの作用を模倣すると推測された。発明の要旨本発明は、スフィンゴミエリンシグナル導入経路、例えば炎症、線維症、紫外線誘発皮膚免疫抑制、細胞老化およびアポプトシスのセラミド代謝物に対する細胞反応を抑制する化合物の開発と使用を目的とする。ある面において本発明は、生物学的に活性な側鎖をもつ複素環分子を含む新規な化合物（“本発明の化合物”）からなる。プリン、プテリジン、チアジアゾロピリミジン、キナロジンおよびイソキノロンをベースとした化合物が本発明に含まれる。本発明の化合物はｃＡＭＰホスホジエステラーゼの活性を抑制しないので、他のＴＮＦ−α抑制物質（例えばペントキシフィリン）に付随する副作用、例えば不眠や不安の危険性が生じない。実際驚くべきことには、本発明の化合物の中でより強いＴＮＦ−α活性をもつ抑制物質の１つ（化合物３７）は、ホスホジエステラーゼＩＶ型、即ち単球および好中球で主要なホスホジエステラーゼアイソザイムに対する抑制効果が最も少なかった。これは、例えば３７のような化合物はメチルキサンチン構造をもたないという事実に依る。一般的なホスホジエステラーゼ抑制物質の多く（例えばテオフィリン、テオブロミンおよびカフェイン）はメチルキサンチン化合物である。のみならず、本発明の化合物は全て、アポプトシスを抑制し、ペントキシフィリンよりもはるかに強くインビトロおよびインビボでＴＮＦ−αに対する細胞反応を阻止する。予期せぬことには、少なくとも非イソキノリン化合物の能力は環状窒素（ピリミジン系窒素以外）の存在に部分的に依存するようである。このことは、これまで認められたＴＮＦ−αの活性の抑制に必要な標的レセプターへの結合も、そのような環状窒素の存在によってある程度調節されることを示唆している。さらに、該化合物の全ての作用はホスホジエステラーゼ抑制とは全体的に無関係のようである。もし細胞内のｃＡＭＰレベルが増加することによりＢ細胞のアポプトシスが誘発されるならば、このことは特に興味深い(Lφmoら、J．Imm unol．154:1634-1643(1995))。本発明の別の特徴は、刺激、特に細胞老化およびアポプトシスに対する刺激に対するセラミド活性化細胞反応を抑制させるのに新規化合物を使用する方法からなる。本発明のこの特徴は、細胞死を伴う病状、例えば卒中、心虚血、神経損傷およびアルツハイマー病の治療に潜在的な治療的意義を有する。本発明のまた別の特徴は、本発明の化合物のＵＶ吸収能を活用する方法からなる。本発明のこの特徴は、癌治療のための治療プログラムに付随するものを含む照射性皮膚炎の治療および予防に潜在的な治療的意義を有する。本発明の化合物は、皮膚の加齢の影響を抑制するとともに照射性皮膚炎の開始と進行の抑制するのに特に有用であると期待される。さらに、本明細書に含まれる本発明の利点および実施態様は以下の記載から明白となろう。図面の簡単な説明図１は、細胞から血清を枯渇させることによって増殖停止を誘発した後、本発明の３Ｔ３繊維芽細胞で細胞増殖停止を抑制したことを示す棒グラフである。細胞を血清中で培養し集密度９０％まで増殖させた。その後培養液を除去し、血清非含有培養液と交換した。セラミドの存在下での細胞老化に対する本発明の化合物（No.３７、プテリジン系）の効果を評価するために、少量の細胞をそれぞれ異なる濃度で培養した。化合物No.３７の濃度は挿入説明文で表示され、一方セラミドの濃度はｘ軸に表示されている。抑制効果をＤＮＡ合成量として評価した。〔³Ｈ〕チミジンの取り込み検出をｙ軸に示す。図２は、ヒト（ジャーカット）Ｔリンパ球における本発明による細胞アポプトシスの抑制を示す棒グラフである。本発明の２つの化合物(No.３７および６(プリン系))の抑制作用を、ペントキシフィリンおよびコントロール化合物、Ｒｏ２０−１７２４の同じような作用と比較してテストした。スフィンゴミエリンシグナル導入経路の活性化を、抗ＦＡＳモノクローナル抗体（これは、細胞のアポプトシスの引き金となる細胞表面レセプターであるＣＤ９５と結合する）ととともに当該細胞を培養することにより刺激した。生体染色色素エリトロシンＢを排除した細胞の数の関数として抑制％を測定した。抑制％をｙ軸に示し、被験化合物の濃度をｘ軸に示す。図３は、ジャーカット細胞のＣａＰＫ部分に対する本発明による活性の抑制を示す棒グラフである。本発明の化合物（No.３７）の抑制作用をセラミドまたは抗ＦＡＳのいずれかの存在下でテストした。ＣａＰＫ活性の抑制をリン酸化の関数として測定し、オートラジオグラフィーで検出した。細胞と培養した化合物をｙ軸に示し、制御（コントロール）％（すなわちＣａＰＫの抑制）をｘ軸に示す。棒線が短ければ相対的抑制が大である強いことを示している。図４（ａ）〜（ｃ）は、本発明の化合物No.３７、No.６、No.３７とNo.６の組み合わせ、No.３７のオキソ変形型およびNo.６のオキソ変形型、並びに比較のためのＰＡＢＡ（ｐ−アミノ安息香酸、一般的な遮光添加剤）およびイソキノリンの吸収スペクトルの複製図である。本発明の化合物はＵＶＢ波長をほとんど吸収する一方、No.３７と６の化合物の混合物はＵＶＢ全体を吸収した。図５（ａ）および（ｂ）は、それぞれ、本発明の化合物及びコントロール化合物で培養した細菌由来脂質多糖類（エンドトキシン）刺激ヒト単球によるＴＮＦ −α産生に関する酵素結合イムノソルベントアッセイ（ＥＬＩＳＡ）の結果を示す。コントロール化合物は、ＲＯ−１７２４であり、ホスホジエステラーゼＩＶ型（単球および好中球で主要なホスホジエステラーゼのアイソフォーム）の既知の特異的抑制物質である。被験化合物は表１で割り当てたそれらの数字によって特定されている。各グラフの水平軸は各被験化合物の量（単位、μｍ）を示し、垂直軸は、化合物のみの存在下での産生に対する％としてＴＮＦ−α産生についてＩＣ₅₀値を示している。図６は、コントロール化合物（Ｒｏ２０−１７２４）および本発明の化合物のいくつかによるホスホジエステラーゼＩＶ型の活性の抑制に関してＥＬＩＳＡアッセイした結果を示す棒グラフである。水平軸は、基質ｐｍｏｌ／接触時間（分）／ホスホジエステラーゼＩＶ型のｍｇが達成した抑制の程度を示している。被験化合物は表１でそれらに割り当てた数字で示されている。図７は、脂質多糖類（ＬＰＳ）に反応するマウス血中のインビボ白血球減少症についてアッセイした結果を示すグラフである。ＬＰＳによって誘発される白血球減少症はＴＮＦによって仲介される。したがって、このモデルはＴＮＦの産生及び作用の双方を評価する。白血球減少症の抑制に関する被験化合物は表１で割り当てた数で示す。グラフのｘ軸の数字は、液体の細胞数／ｍｌとして検出した白血球細胞の数に対応する。結果（棒線で示した）を、他の化合物の非存在下で、純粋なＬＰＳに対する白血球減少症反応（好中球含有量をベースとして）の％として表している。図８は、ヒト単球によるＴＮＦ−α産生に対する細胞透過性セラミド類似体（Ｃ₂セラミド）、ジヒドロセラミドおよびジアシルグリセロールの作用の本発明の化合物（No.３７）による抑制に関してアッセイした結果を示す。ＴＮＦ−α 産生の抑制はＥＬＩＳＡによって測定した。結果を、ｘ軸のＴＮＦ−αのｐｇ／ｍｌで示す。図９は、ヒトリンパ球抽出物におけるＣ₂セラミドまたはタンパクキナーゼＣ活性の刺激作用を防止するために本発明の化合物（No.３７）による抑制に関してアッセイした結果を示す。抑制効果はＤＮＡ合成を目安として表した。〔³Ｈ〕チミジンの取り込み検出はｙ軸に示す。図１０は、脂質多糖類（ＬＰＳ）に応じるヒトマクロファージによるＴＮＦ− αのインビトロ産生、および本発明のプテリジンおよびイソキノリン化合物（No .３７および１１−４９）による当該産生の抑制についてアッセイした結果を示す。グラフのｘ軸の数字は検出されたＴＮＦ−αの濃度（ｐｇ／ｍｌ）と対応する。図１１は、本発明の化合物に応じる３Ｔ３線維芽細胞でのＰＤＧＦ誘発線維芽細胞増殖の抑制を示す。被験化合物は、表１で割り当てたそれらの数字によりｘ軸に示す。抑制効果はＤＮＡ合成を目安として表した。〔³Ｈ〕チミジン取り込みの検出をｙ軸に示す。図１２は、本発明の化合物に応じる３Ｔ３線維芽細胞でのＥＧＦ誘発線維芽細胞増殖の抑制を示す。被験化合物は、表１で割り当てたそれらの数字によりｘ軸に示す。抑制効果はＤＮＡ合成を目安として表した。〔³Ｈ〕チミジン取り込みの検出をｙ軸に示す。図１３は、化合物１Ｃ−２６１および１Ｉ−４９によって代表される本発明の化合物のアポプトシス防御特性を示すデータである。ヒトリンパ球を図のｘ軸に表示する本発明の化合物の濃度を含む適切な量の血清中で培養した。防御効果は、本発明の化合物の非存在下における培養細胞の生存と比較した、本発明の化合物の存在下での培養細胞の生存の長さの関数として４日間にわたって測定した。１００％生存（ｙ軸）は処理した細胞の総数が試験期間生存したのに対し、同じ数の未処理細胞が死滅したことを意味する。図１４は市販のイソキノリン構造物の構造を示すが、その抑制効果を、本発明にしたがって側鎖置換基を付加する改質前の、ヒト単球によるＴＮＦ−αの産生についてテストした。化合物Ｓ５２６２６−６（６，７−ジメトキシ−１（２Ｈ）−イソキノリン、これは図１０に示すように弱い抑制活性を有する）を除いて、テストした化合物のいずれも本発明の改質前には、たとえ５００μＭまでの濃度でもそのような抑制活性を示さなかった。好ましい実施態様の記載Ｉ．本発明の化合物本発明の化合物は、一般に下記の模式図にしたがって調製したプリン、プテリジン、チアジアゾロピリミジンおよびキナゾリンを含む。参考文献として、該化合物の合成に用いた技術は周知のトラウベの合成プロトコル(Lister，"Purines" ,p220(Wily-Interscience刊、1971))の応用で、４，５−ジアミノピリミジンで開始した。すなわち、（１）一般にプリンについては、Brown,“The Chemistry of Heterocyclic Compounds:Fused Pyrimidines”第II部、プリン(1971)、pp31- 90を参照；（２）特に９−ジアザプリンについては、Foxら、J．Org．Chem.，43 :2536(1978)を参照；（３）プテリジンのためには、標準的なティミス（Timmis ）反応の記載についてはNishigaki ら、Heterocycles，15:757-759(1981); 及び Timmis，Nature 164:139(1949)を参照（または二炭素試薬を用いたジアミノ−ピリミジンの閉環によるプテリジン調製用の他の標準的なトラウベ様プロトコル）；および（４）ピリミジンについて、Schrage & Hitchings，J．Org．Chem．16:20 7(1951)を参照のこと。本発明の化合物、中間体および本発明の化合物との活性の比較のためのテスト化合物は、表１で各化合物に対して割り当てた数字を用いて下記の考察で特定する。Ｂ．プリン合成本発明のプリンは以下の一般式（Ｉ）を有する。式中、ＺはＮ又はＣＨであり；Ｒ₁は（ＣＨ₂）_nＡであって、ＡがＮＨ₂、アシルオキシ、ＳＯ₃Ｈ、ＰＯ₄Ｈ₂、ＮＮＯ（ＯＨ）、ＳＯ₂ ＮＨ₂、ＰＯ（ＯＨ）ＮＨ₂、ＳＯ₂Ｒ又はＣＯＯＲ（ＲはＨ、炭素原子を１〜４個有するアルキル、炭素原子を１〜４個有するアルケニル、テトラゾリル又はベンジルである）であり、ｎが飽和及び／又は不飽和炭素と炭素との結合を有する１〜７のうちのいずれかの原子数であって、原子として炭素に代わって酸素原子又は窒素原子を含めることができ、その場合それぞれエーテル又はアミノ結合を形成するものであって、好ましくはＲ₁が炭素原子を１〜８個有するω−カルボキシアルキル、ω−カルボキシアルケニル、又はω−カルボキシアリールであり、置換基Ａ（上記で定義した）として芳香族基をさらに有するものであり：Ｒ₂はＨ、アルキル（脂肪族及び脂環式、並びにヘテロ脂環式形態を含む）、アルケニル、炭素原子を１〜７個有するアラルキル、又は炭素原子を１〜７個有するω−ヒドロキシアルキルであり；Ｒ₃はＲ₂と同じであり；及びＸはＨ、ハロゲン、ＯＨ、ＳＨ、ＯＲ’、又はＳＲ’であり、Ｒ’が炭素原子を１〜４個有するアルキル、アルケニル、フェニル又はベンジルである。これらの化合物を下記の合成模式図にしたがって合成する（これについては実施例でさらに詳細に述べる）。模式図１（プリン）３つの基本的な合成プロトコルを模式図１に用いた。即ち、方法Ａ一般に、Ｏ−６アルキル化に代わってＮ−１アルキル化が確実に生じるような条件下で、テオブロミンを出発材料として用いた。化合物４〜８、１０および１１（表Ｉ）を本方法によって調製した。特に化合物１０および１１はアルキル化法の変形によって調製した。即ち、テオブロミンをまず臭素付加して、８−ブロモテオブロミン（化合物９）を生成し、その後アルキル化した。８−ブロモ置換基をＮａＳＨで置換し、対応する８−チオキソ誘導体（化合物１２および１３）を得た。方法Ｂこの方法は、上記で引用したトラウベのプリン合成プロトコルを本質的にベースにしている。本方法を用いて、Ｎ−７位にアルキル基を持たない１，３，８− 三置換キサンチンを調製した。この方法では、Ｎ−１置換ピリミジンをＮ−３位でアルキル化した。プリン環の形成は、ニトロソを触媒水素化によりアミンに還元するニトロセーション(nitrosation)、次いで尿素またはエチルキサントゲン酸カリウムを用いて閉環することによって完了し、化合物２４および２５（それぞれ８−オキソおよび８−チオキソ誘導体）を提供する。本プロトコルの詳細な説明を実施例で提供する。方法Ｃこの方法を用いて、Ｎ−３プロピルプリンを調製した。用いた出発材料は、ナトリウムエトキシドの存在下でシアン酢酸エチルで縮合したｎ−プロピル尿素で、中等度の収量で６−アミノ−１−プロピルピリミジンジオンを得た。市販の３ − ｎ−プロピルキサンチンもまた出発材料として用いることができた。閉環は、閉環工程で炭素源として酢酸ジエトキシメチルを用いた点を除いて方法Ａで述べたように実施した。続いて連続アルキル化をハロゲン化アルキルを用いて実施し、最終化合物３１（エチル４−（２，３，６，７−テトラヒドロ−２，６−ジオキソ−７−メチル−３−ｎ−プロピル−１Ｈ−プリン−１−イル）ブタン酸）を得た。本プロトコルの詳細な説明を実施例で提供する。Ｃ．プテリジン合成本発明のプテリジンは以下の一般式（ＩＩ）を有する。式中、Ｒ₁は（ＣＨ₂）_nＡであって、ＡがＮＨ₂、アシルオキシ、ＳＯ₃Ｈ、ＰＯ₄Ｈ₂、ＮＮＯ（ＯＨ）、ＳＯ₂ ＮＨ₂、ＰＯ（ＯＨ）ＮＨ₂、ＳＯ₂Ｒ又はＣＯＯＲ（ＲはＨ、炭素原子を１〜４個有するアルキル、炭素原子を１〜４個有するアルケニル、テトラゾリル又はベンジルである）であり、ｎが飽和及び／又は不飽和炭素と炭素との結合を有する１〜７のうちのいずれかの原子数であって、原子として炭素に代わって酸素原子又は窒素原子を含めることができ、その場合それぞれエーテル又はアミノ結合を形成するものであって、好ましくはＲ₁が炭素原子を１〜８個有するω−カルボキシアルキル、ω−カルボキシアルケニル、又はω−カルボキシアリールであり、置換基Ａ（上記で定義した）として芳香族基をさらに有するものであり：Ｒ₂はＨ、アルキル（脂肪族及び脂環式、並びにヘテロ脂環式形態を含む）、アルケニル、炭素原子を１〜７個有するアラルキル又は炭素原子を１〜７個有するω−ヒドロキシアルキルであり；Ｒ₄はＲ₂と同じか、ＯＨ又は炭素原子を１〜５個有するＯ−アルキルであり；Ｒ₅はＲ₂と同じか、ＯＨ又は炭素原子を１〜５個有するＯ−アルキルであり；及びＺはＮ又はＣＨである。これらの化合物を下記の合成模式図（これについては実施例でさらに詳細に述べる）にしたがって合成する。模式図ＩＩ（プテリジン）方法Ｃ（上記）を簡易な方法として選択して、この群におけるＯ−アルキルよりむしろＮ−アルキルを製造した。方法Ｃはその終わりで以下のように改変した。プテリジンの合成は前駆体としてオルトジアミノピリミジンをベースとした。オルトジアミン（化合物３３および２８）の閉環を、二炭素源（例えばグリオキサール）を用いて達成し、化合物３４および３５（Ｎ−１置換プテリジン）を得た。方法Ａで述べたようにＮ−３でのアルキル化によって所望のプテリジン（化合物３６〜３８）を製造した。さらに、閉環工程で３，４−ヘキサンジオンを用いることにより、より親油性の誘導体（化合物４１；６，７−ジエチルプテリジン）を生成した。ジメチルアセチレンジカルボキシレートで化合物２２を縮合することにより、化合物３９（１，３−ジアルキルプテリジン）を生じる一方、化合物２７をフェネチルアミンで処理し、続いてアルキル化を実施することによって化合物４３（６−フェニルジアキルプテリジン）を生じた。後者のプロトコルはともにティミス反応を利用して所望の生成物を得た。これらのプロトコルの詳細な説明を実施例で提供する。Ｄ．チアジアゾロ−ピリミジン合成本発明のチアジアゾロピリミジンは下記の一般式（ＩＩＩ）を有する。式中、Ｒ₁は（ＣＨ₂）_nＡであって、ＡがＮＨ₂、アシルオキシ、ＳＯ₃Ｈ、ＰＯ₄Ｈ₂、ＮＮＯ（ＯＨ）、ＳＯ₂ ＮＨ₂、ＰＯ（ＯＨ）ＮＨ₂、ＳＯ₂Ｒ又はＣＯＯＲ（ＲはＨ、炭素原子を１〜４個有するアルキル、炭素原子を１〜４個有するアルケニル、テトラゾリル又はベンジルである）であり、ｎが飽和及び／又は不飽和炭素と炭素との結合を有する１〜７のうちのいずれかの原子数であって、原子として炭素に代わって酸素原子又は窒素原子を含めることができ、その場合それぞれエーテル又はアミノ結合を形成するものであって、好ましくはＲ₁が炭素原子を１〜８個有するω−カルボキシアルキル、ω−カルボキシアルケニル、又はω−カルボキシアリールであり、置換基Ａ（上記で定義した）として芳香族基をさらに有するものであり：及びＲ₂はＨ、アルキル（脂肪族及び脂環式、並びにヘテロ脂環式形態を含む）、アルケニル、炭素原子を１〜７個有するアラルキル又は炭素原子を１〜７個有するω−ヒドロキシアルキルである。これらの化合物を下記の合成模式図（実施例でさらに詳述される）にしたがって合成する。模式図ＩＩＩ（チアジアゾロピリミジン）方法Ｃ（上記）を簡易な方法として選択して、この群におけるＯ−アルキルよりむしろＮ−アルキルを製造した。方法Ｃはその終わりで以下のように改変した。ピリミジンの合成は前駆体としてオルトジアミノピリミジンをベースとした。オルトジアミンの閉環を、ピリジンの存在下で塩化チオニルで処理することによって達成した。これら中間体のアルキル化によって化合物４７および４８（二置換ピリミジン）を製造した。このプロトコルの詳細な説明を実施例で提供する。Ｅ．イソキノリン合成本発明のイソキノリンは以下の一般式（ＩＶ）を有する。式中、Ｒ₂は（ＣＨ₂）_nＡであって、ＡがＨ、ＮＨ₂、アシルオキシ、ＳＯ₃Ｈ、ＰＯ₄Ｈ₂、ＮＮＯ（ＯＨ）、ＳＯ₂ＮＨ₂、ＰＯ（ＯＨ）ＮＨ₂、ＳＯ₂Ｒ又はＣＯＯＲ（ＲはＨ、炭素原子を１〜４個有するアルキル、炭素原子を１〜４個有するアルケニル、テトラゾリル又はベンジルである）であり、ｎが飽和及び／又は不飽和炭素と炭素との結合を有する１〜７のうちのいずれかの原子数であって、原子として炭素に代わって酸素原子又は窒素原子を含めることができ、その場合それぞれエーテル又はアミノ結合を形成するものであって、好ましくはＲ₁が炭素原子を１〜８個有するω−カルボキシアルキル、ω−カルボキシアルケニル、又はω−カルボキシアリールであり、置換基Ａ（上記で定義した）として芳香族基をさらに有するものであり：Ｒ₃はＨ、アルキル（脂肪族及び脂環式、並びにヘテロ脂環式形態を含む）、又は炭素原子を１〜７個有するω−ヒドロキシアルキルであり；Ｒ₄はＨ、ＯＨ、ＮＨ₂又は炭素原子を１〜７個有するＯ−アルキルであり；Ｒ₆はＨ、ＯＨ、ＮＯ、ＮＯ₂、ＮＨ₂、炭素原子を１〜７個有するＯ−アルキル、又はＸであり（ここでＸはＨ、ハロゲン、ＯＨ、ＳＨ、ＯＲ’、又はＳＲ’ であり、Ｒ’は炭素原子を１〜７個有するアルキル、アルケニル、フェニル又はベンジルである）；及びＲ₇はＨ、ＯＨ、ＮＯ、ＮＯ₂、ＮＨ₂、炭素原子を１〜７個有するＯ−アルキル、又はＸである（ここでＸはＨ、ハロゲン、ＯＨ、ＳＨ、ＯＲ’、又はＳＲ ’であり、Ｒ’は炭素原子を１〜７個有するアルキル、アルケニル、フェニル又はベンジルである）である。これらの化合物はアルドリッチケミカル社（Akdrich Chemical）からイソキノリンを購入し、本発明のプリン、プテリジンおよびチアジアゾロピリミジン化合物に関して上記並びに実施例で述べる環状構造に側鎖を付加して合成した（図１４参照）。６，７−ジメトキシ−１（２Ｈ）−イソキノリン化合物（Aldrich No .S52626-6）のみが、上記の側鎖付加前にＴＮＦ−α産生に対してある抑制効果を有していた（実施例７参照）。Ｆ．キナゾリン合成本発明のキナゾリンを以下の模式図により合成し、その構造を化合物５２に表す。模式図ＩＶ（ジデアザプテリジンまたはキナゾリン）化合物５２（キナゾリン誘導体；エチル４−（１−メチル−２，４−ジオキソキナゾル−３−イル）ブタン酸）を以下のように製造した。本発明の出発材料は、Ｎ−メチルイサト酸無水物であった。本プロトコルの詳細な説明を実施例で提供する。ＩＩ．本発明の化合物の使用方法式ＩからＩＶの化合物を哺乳類ホストに投与して、ＴＮＦ−αおよびＩＬ−１産生並びにセラミド仲介シグナル導入経路の活性化に伴う細胞反応を阻止することができる。特に、本発明の化合物を哺乳類に投与して、標的細胞内のホスホジエステラーゼの活性を抑制することなく、または該細胞内のジアシルグリセロールレベルに影響を与えることなく該標的細胞内においてセラミド依存細胞内生化学経路の活性化を阻止することができる。本明細書で例証するように、本発明の方法は、刺激単球によるＴＮＦ−αの産生を低下させることによって、炎症および線維組織の過剰形成に対する防御を提供するという用途が特に期待されている。本明細書でさらに例証するように、本発明の化合物（特にイソキノリンおよびプテリジン）は、例えば外傷（例えば照射性皮膚炎）および加齢（例えば皮膚および他の器官の加齢）の結果として生じる細胞老化または細胞のアポプトシスに対する防御を提供するうえでもまた有効であろうと期待されている。本明細書において、“〜に対する防御を提供する”という語句は、セラミド仲介、スフィンゴミエリンシグナル導入経路によってその細胞への伝達が全体として、または部分的に促進される刺激（シグナル）に対する細胞反応を臨床上著しく抑制することを意味する。したがって本発明の目的のためには、スフィンゴミエリン経路を介するセラミド仲介シグナル導入に応じる炎症、線維芽細胞増殖、細胞老化および細胞アポプトシスは、“セラミド関連”病状であると考えられる。当業者は、特異的なセラミド関連病状の特性および兆候を熟知し、また容易にこれを確認することができ、さらに本明細書で例証するものの他に当該病状の兆候の改善（例えば血清中のＴＮＦ−αレベルの低下および症状の改善）を特定することができるであろう。投与のために、本発明の化合物を、好ましくは医薬的に許容可能なキャリア中で製剤化される。そのようなキャリアとして、非水溶液の滅菌水溶液、懸濁液および乳濁液が含まれる。非水溶媒の例として、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、オリーブオイルのような植物油およびオレイン酸エチルのような注射可能な有機エステルが挙げられる。水性キャリアとして、水、アルコール性／水溶液、食塩水および緩衝媒体を含む乳濁液または懸濁液が挙げられる。非経口ビヒクルとして、塩化ナトリウム溶液、リンゲルのデキストロース、デキストロース及び塩化ナトリウム、乳酸リンゲル溶液または固定油が挙げられる。静脈内用ビヒクルとして栄養物補液、電解質補液（例えばリンゲル氏デキストロースをベースとしたもの）などが挙げられる。保存料および他の添加物、例えば抗菌剤、抗酸化剤、キレート剤および不活性ガスなども加えることができる。典型的な固形キャリアとして乳糖、白陶土、蔗糖、タルク、ゼラチン、寒天、ペクチン、アラビアゴム、ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、微晶質セルロース、ポリマーヒドロゲルなどが挙げられる。同様に、キャリアまたは希釈剤として当業界で周知のいずれの有効時間延長剤、例えばモノステアリン酸グリセリルまたはジステアリン酸グリセリルを単独で又はワックスと合わせたもの、マイクロカプセル、微小球、リポゾームおよびヒドロゲルを挙げることができる。更に参考として、当業者は「レミントンの薬科学」(Remington's Pharmaceuti cal Sciences)を参照することができる（この文献は、好適な医薬キャリアに関して当業界の知識を例示するために、参考として本明細書に含まれる）。広範囲の製剤形態を用いることができる。したがって、固形キャリアを用いる場合、該調製物をタブレット化するか、硬質ゼラチンカプセルに粉末もしくはペレット状に封入するか、またはトローチ、ロゼンジもしくは坐剤の形状とすることができる。液体キャリアを用いる場合、該調製物を液状、例えばアンプルとするか、または水性もしくは非水性懸濁液とすることができる。徐放性皮膚貼付薬による局所投与もまた適切な薬剤形態である。本発明の化合物の投与量は、年令、体重および処置を受けるホストの症状、並びに投与する個々の化合物の効能によって変動するであろう。そのような変数は臨床分野の当業者には容易に理解されよう。特に、投与量は、処置される症状の重篤度および本発明の医薬製剤の標的細胞への接近の容易さにしたがって増減されるであろう。可能な場合には、標的細胞部位に局所的に、例えば炎症を起こしている皮膚に、またはホストの別の器官に輸液によって本発明の医薬製剤を投与するのが好ましい。したがって、投与量はまた投与経路によっても左右され、さらに本発明の製剤の希釈またはクリアランス前に該製剤が標的細胞に到達すると予想される程度によって変動する。好ましい投与経路は、局所投与、局所注射、または非経口輸液によるが、経口および静脈内経路もまた利用できる。一般に、外部刺激（例えばペントキシフィリン）に対する細胞内反応の他の抑制物質に関する経験および本明細書で提供するデータを基に、体重が約６０ｋｇの成人ホストで、約５００〜約４０００ｍｇ／日、好ましくは約１０００〜約３５００ｍｇ／日の投与量の範囲で良好な結果が期待される（すなわち“治療上有効量”）。これらの投薬は、炎症および線維症のための他の病状の医薬的治療、例えば非ステロイド性抗炎症性医薬の投与と併用することができる。本発明の化合物は効能に差がある。各化合物の効能の要約を上記の表１で提供する（これらは、ＬＰＳに対する細胞内反応、すなわちＴＮＦ−α産生の抑制％として表され、この場合純粋なＬＰＳに対する反応を１００％とし、かつＴＮＦ −α産生を５０％まで抑制するのに必要な本発明の化合物の濃度として測定している）。当業者には、投与される個々の化合物の効能にしたがって、本発明の化合物の増減が必要となることは理解されよう。ＩＩＩ．本発明の化合物の治療上有効な類似体の同定方法当業者は、構造的には同一ではないが同じ生物学的活性を有する、本明細書で特に記載した化合物の類似体を開発する手段を熟知しているであろう。そのような化合物は本発明の範囲内にあり、下記および実施例で述べるプロトコルにしたがって同定することができる。制御条件下で本発明の化合物に細胞を曝すことによって、炎症性薬剤に対する細胞の反応性およびその細胞内メカニズムを調べることができる。このような情報によって特定の刺激に対する細胞反応に必要な細胞内経路の解明が容易になるだけでなく、抗炎症性および抗線維症性治療化合物の特定にもまた役立つであろう。例えば炎症および線維症のようなセラミド関連病状を治療するために用いる治療化合物を同定し選別するために、炎症性または線維芽細胞増殖誘発性薬剤（例えばＬＰＳ、ＴＮＦ−α、ＩＬ−１、ＰＤＧＦ）に曝されたことがない細胞（またはミクロソームのような細胞内成分）をそのような薬剤および治療用候補化合物に曝す。特にコントロール細胞群は、既知量の炎症性又は線維芽細胞増殖誘発性薬剤と培養した。治療細胞群を同量の炎症性又は線維芽細胞増殖誘発性薬剤とともに少量の治療用候補化合物に曝す。各群における炎症性反応または線維芽細胞増殖を、当業者に既知の通常の手段（例えば実施例で述べるアッセイ工程）によって検出し、比較する。細胞老化およびアポプトシスのセラミド関連病状を治療するために用いる治療用化合物を同定し選別するために、老化またはアポプトシス誘発性薬剤（例えばＴＮＦ−αのようなサイトカインおよび例えば熱、照射および化学薬剤のような外来刺激）に曝されたことがない細胞（またはミクロソームのような細胞内成分）をそのような薬剤および治療用候補化合物に曝す。老化またはアポプトシスの抑制は細胞増殖の関数として測定される。当業者は、そのような測定値を得るための技術を熟知しているであろう。その例を下記に提供する。 “治療上有効な化合物”とは、本発明および適切な医学的慣行にしたがって投与される場合に、セラミド関連病状を誘発する薬剤に対する細胞の反応についてコントロールの値と比較したとき、セラミド関連病状に対する防御を細胞に提供する化合物である。本発明をこれまで充分に説明してきたが、その実施について具体例を下記に詳述する。しかしながら、これらの具体例は本発明の範囲を限定するためのものと解釈すべきではなく、当該範囲は添付の請求の範囲によって限定される。実施例では、“ｍｉｎ”は分を指し、“ｈｒｓ”および“ｈ”は時間を指す。測定単位（例えば“ｍｌ”）は標準的な略語により表され、“ｍｐ”は融点を指す。実施例１血清依存細胞の血清欠乏後の細胞老化の抑制多くの種類の細胞が増殖について血清因子に依存している。したがって、そのような細胞から血清を除去することによって、細胞内セラミド仲介シグナル導入に対する細胞反応を調節する化合物の評価用モデルが提供される。特に、血清依存細胞培養から血清を排除することによって、内在性セラミドの細胞内レベルの増加がもたらされ、内在性ジアシルグリセロールの細胞内レベルもまた増加する（例えばJayadev ら、J．Biol．Chem.，270:2047-2052(1995)を参照のこと）。セラミド関連病状に対する本発明の化合物のインビトロでの抑制効果を調べるために、この血清除去モデルを用いた。具体的には、１０％ウシ胎児血清の存在下、９６ウェルマイクロタイタープレートのＤＭＥＭ中に３Ｔ３線維芽細胞を播種した。細胞を集密度９０％まで培養した。培養基を除去し、細胞を洗浄して血清非含有ＤＭＥＭで再培養した。化合物No . ３７および細胞透過性セラミドをウェルに化合物No.３７濃度をそれぞれ０、４、40または 400μＭおよびセラミド濃度を０、５または10μＭで添加した。24時間培養した後、〔³Ｈ〕チミジンを 0.5μＣｉ各ウェルに２時間添加した。〔³Ｈ〕チミジン取り込みの検出について通常の技術を用いて被験細胞集団のＤＮＡ合成を調べた。このアッセイの結果を図１に示し、本発明の化合物（化合物３７によって代表される）の細胞老化の抑制効果を確認する。実施例２ＣＤ９５刺激後の細胞アポプトシスの抑制細胞表面レセプターＣＤ９５（Ｆａｓ／Ａｐｏ−１抗原としても知られている）の嵌合は細胞のアポプトシスを引き起こす。ＤＸ２は機能的な抗ＦＡＳ（ＣＤ９５）抗体であり、ＣＤ９５と結合して、スフィンゴミエリン加水分解のＳｍアーゼ触媒作用及びセラミド産生を活性化する（ＤＸ２について、Cifoneら、J．E xp．Med．177:1547-1552(1993)を参照のこと。この文献の開示内容はＤＸ２抗体について知りたいときに参考として本明細書に含まれる）。したがって、ＣＤ９５の結合はスフィンゴミエリンシグナル導入経路を介するアポプトシス誘発のためのモデルである。セラミド仲介細胞アポプトシスに対する本発明の化合物の抑制効果を評価するために、ヒトＴリンパ芽球（ジャーカット）を２×１０⁶細胞／ｍｌでインスリン、トランスフェリン、セレニウムおよびグルタミンを補充したＲＰＭＩ−１６４０に懸濁した。化合物No.３７、化合物No.６、ペントキシフィリンまたはコントロール化合物（Ｒｏ−１７２４）のいずれかと室温で２時間培養した後、抗ＦＡＳ抗体を25ｎｇ／ｍｌ各懸濁液に加えた。さらに２時間後、細胞アポプトシスを生体染色色素エリトロシンＢを排除する細胞数（血球計数器で数えた）の関数として測定した。実験の結果を図２に示し、これによって本発明の化合物（化合物No.６およびNo.３７、特に後者によって代表される）のアポプトシス抑制効果を確認する。ヒトリンパ球の細胞死に対する本発明の化合物の抑制効果を調べるために、ヒト末梢血リンパ球を健常人の血液から単離し、プラスチック基材に付着させることによって単球を除去した。その後、１０％自己血漿を含むＲＰＭＩ−１６４０培養液で開始濃度２×１０⁶細胞／ｍｌでリンパ球を培養した。細胞サンプルを少量分割し、サンプルの１／２を化合物３７または化合物ＩＬ−４９（イソキノロン、その構造を実施例７に示す）と４日間培養した。サンプルの残りの半分を４日間そのままにした。４日後の細胞の生存度をエリトロシンＢ色素排除によって血球計数器で求めた。図１３に示すように、濃度を増加させると本発明の化合物（化合物３７およびＩＬ−４９によって代表される）は、未処理リンパ球の生存率と比較したとき細胞のサンプル集団を細胞死から１００％まで防御した。実施例３セラミド活性化タンパクキナーゼの活性の抑制セラミド活性化タンパクキナーゼ（ＣａＰＫ）は97ｋＤａタンパク質であり、もっぱら膜に結合し、スフィンゴミエリンシグナル導入経路で役割を果たすと考えられている。特に、ＣａＰＫは、上皮性増殖因子レセプターのＴｈｒ⁶⁶⁹を取り囲むアミノ酸配列（すなわちアミノ酸６６３−６８１）由来のペプチドのリン酸化を仲介すると考えられている。この部位はまた、ミトゲン活性化キナーゼＭＡＰ（また細胞外シグナル調節キナーゼ類としても知られている）によって認識される。したがって、細胞内でのＣａＰＫ活性に対する本発明の化合物の効果は、スフィンゴミエリン経路におけるシグナル導入で該化合物が具現する効果を示している。最終的に、ジャーカット細胞を、実施例２に記載したようにＲＰＭＩ培養液に２×１０⁶細胞／ｍｌで懸濁した。２時間培養後、化合物３７、セラミド20μｍまたは抗ＦＡＳ抗体ＤＸ２２５ｎｇ／ｍｌのいずれかを各懸濁液に加え、１５分間培養した。遠心分離及び洗浄後、ダウンスホモジナイザーで細胞を別々に均質化した。各テストサンプルのセラミドキナーゼレベルを、Liu ら、J．Biol．Chem．269 :3047-3052(1994)（この文献の開示内容は、セラミドキナーゼのアッセイでの使用及び参考として本明細書に含まれる）に記載されるようにアッセイした。簡単に記せば、各テストサンプルの均質化した処理細胞から超遠心および１０％ＰＡＧＥゲルでの分離によって膜分画を分離した。このゲルを塩酸グアニジンで洗浄し、ＨＥＰＥＳ緩衝液中で変性から復元させた。続いて、〔³²Ｐ〕−ＡＴＰをゲルに添加し１０分保持した。その後、５％ＴＣＡでゲルを充分に洗浄した。自家リン酸化キナーゼをオートラジオグラフィーによって検出した。このアッセイの結果を図３に示し、本発明の化合物（化合物３７によって代表される）のＣａＰＫ抑制効果を確認する。実施例４本発明の化合物によるＵＶＢの吸収照射（特にＵＶＢ波長における）はヒトの皮膚損傷（アポプトシスを含む）の主要な原因である。上記のどこかで述べたように、スフィンゴミエリンシグナル導入経路は、照射によって誘発される皮膚症（照射性皮膚炎、日焼けおよび皮膚のランゲルハンス細胞の照射性損傷によるＵＶＢ誘発免疫抑制（例えば、：Haim ovitz-Friedmanら、J．Exp．Med．180:525-535(1994)「イオン化誘発照射に対する細胞反応」；Kurimoto & Streileinら、J．Immunol．145:3072-3078(1992)「ＵＶＢ曝露による皮膚の免疫抑制」を参照のこと）進行の少なくとも初期段階において重要であると考えられている。したがって、照射によるスフィンゴミエリンシグナル導入経路の刺激に対する細胞反応を抑制し、かつ露出部位に局所的に投与できる化合物は、照射曝露（例えば太陽光線または照射に対する曝露による）に伴う損傷を阻止するうえで極めて有益であろう。本発明の照射吸収能を評価するために、本発明の化合物（No.６および３７、それぞれ単独、組合せ、さらに８−オキソ誘導体として）の紫外線スペクトルを調べ、市販の遮光性添加剤（ＰＡＢＡ）およびイソキノリンと比較した。スペクトルを、ＫＯＮＴＲＯＮ分析装置を用いて同定した。図４に示したように、本発明の化合物（化合物No.６およびNo.３７によって代表される）は殆どのＵＶＢ領域を吸収し、照射を吸収する効能を示した。驚いたことに、化合物No.６およびN o.３７の混合物はＵＶＢ領域全体を吸収することが分かった。したがって、化合物６に較べて化合物３７がいくらか強い吸収特性を有するとしたら、１：１の比率の混合物または化合物３７が多い混合物は、照射を吸収し細胞でのその影響を阻止することについて実質的に相乗効果を有することが論理的に期待できる。実施例５本発明の化合物によるＴＮＦ−α産生の抑制図５（ａ）で示すように、炭素数２〜５個の長さのＮ−１鎖を有する本発明の化合物は、インビトロでのＴＮＦ−α産生の抑制で特に有用である一方、長さが炭素数約４個のＮ−１鎖（末端エステルをもつ）はこの点において（コントロール化合物と比較した場合；図５（ｂ））最適であるようである。さらに、エステル化化合物は、カルボキシル基をもつ対応物よりも一層顕著な効果を有するＴＮＦ−α産生抑制物であった。これらのデータを以下のようにして得た。健常人血液から末梢血の単核細胞をハイパークフィコール（Hypaque-Ficoll）密度勾配で単離した。単離細胞の一部をゼラチン被覆フラスコに付着することによってさらに精製した。単球 100μｌ容量を９６ウェルマイクロタイタープレートの10％ウシ胎児血清を含むＲＰＭＩ−１６４０培養液中に５×10⁵細胞／ｍｌの密度で播種した。２４時間培養後、種々の濃度の被験化合物（図５）を播種細胞に100μｌ容量で添加し、１時間培養した。培養後、ＬＰＳ１μｇ／ｍｌを各ウェルに添加した。播種細胞をＬＰＳに曝露してから18時間後に 100μｌの培養液を各ウェルから採集し、標準物質として組換えヒトＴＮＦを用いてＴＮＦ−αの遊離についてＥＬＩＳＡによってアッセイした。アッセイの感度は10〜100ｐｇ／ｍｌの範囲であった。実施例６本発明の化合物によるホスホジエステラーゼＩＶ活性の比較的低い抑制図６に示したように、本発明の化合物のホスホジエステラーゼ活性の抑制効果とＴＮＦ−α活性の抑制効果との間には殆ど相関性は認められないようである。例えば、ＴＮＦ−α産生のインビトロ抑制で最も活性の高い化合物（No.３７）は、たとえマイクロモルの濃度でもホスホジエステラーゼに対して極めて弱い抑制物質しかない。これらのデータによって、本発明の化合物は、ホスホジエステラーゼを標的とせずにＴＮＦ−α産生を制御することことがわかる。結果を以下のようにして得た。反応をＰＤＥの添加で開始し、37℃で10分間培養し、その後２分間沸騰させて停止した。0.1ＭＨＥＰＥＳ／0.1ＭＮａＣｌ（ｐＨ 8.5）の 500μｌを各試験管に加え、その後反応混合物をボロネートカラムにかけた。未反応ｃＡＭＰをＨＥＰＥＳ／ＮａＣｌで洗い流し、さらに反応混合物を酢酸で溶出した。回収を〔¹⁴Ｃ〕−ＡＭＰで測定した。実施例７ＬＰＳに応じるインビトロおよびインビボの白血球減少症および本発明の化合物によるその抑制図７〜９および表Ｉに示すように、本発明の化合物は、ＬＰＳ、ＴＮＦ−αの既知誘発物質に対する細胞反応を効果的に低下する。セラミドの存在下で、本発明の化合物のＬＰＳ誘発白血球減少症（接着分子のうちＰ−選択類のＴＮＦ−α 誘発表面発現に依存する現象）の抑制作用が増大した（図７）。しかしながら、本発明の化合物の抑制作用は本質的にジアシルグリセロールによって影響を受けず（図８）、本発明の化合物の作用態様はホスファチジン酸の加水分解に依存しないことを示している。これらのデータを下記のようにして得た。被験化合物の白血球減少症抑制能は、雌のＩＣＲマウス（６〜８週、体重19〜 23ｇ）にＬＰＳ 0.5μｇの食塩水溶液を腹腔内投与することによって測定した。ＬＰＳを投与する１時間前に、被験化合物を50ｍｇ／ｋｇの投与量で（等張食塩水溶液中）腹腔内注射することによってマウスに投与した。ＬＰＳ注射後２時間してから、各マウスから血液 200μｌをヘパリン化試験管に採集し、有核細胞の総数を血球計数器で求めた（図７および９）。ジャーカット細胞（５×10⁸／ｍｌ）の１％トリトン−Ｘ１００抽出物を用いて、カルシウム非依存タンパクキナーゼ活性を測定した。反応混合物は、20ｍＭトリス（ｐＨ 7.5）、ＭｇＣｌ₂ 20ｍＭ、 200,000ｃｐｍの〔γ³²Ｐ〕ＡＴＰを含むＡＴＰ20μＭおよびミエリン塩基性タンパク質（Myelin Basic Protein）50 μＭからなる。抽出物を、Ａ）化合物３７、Ｂ）セラミド10μＭ存在下、非存在下での化合物３７、Ｃ）セラミド、またはＤ）ジヒドロセラミドとともに15分間予備培養し、その後基質およびＡＴＰを添加し、30℃で５分間培養した。有核細胞の総数を血球計数器で測定した（図９）。同じプロトコルを実施して、図８に示した結果を得た（テスト混合物のいくつかにジアシルグリセロールを添加した）。ヒト細胞でのＬＰＳ誘発ＴＮＦ−α産生に関してその抑制効果について、本発明のイソキノリン化合物をまたインビトロで調べた。この化合物、１Ｉ−４９の構造を下記に記載する。ヒトマクロファージを９６ウェルマイクロタイタープレートで培養し、ＬＰＳとともに培養した。その後、刺激細胞を少量、１Ｉ−４９をそれぞれ 0.1、１、 10、100 または1000μｍ、化合物３７および市販のイソキノリン（アルドリッチケミカル社の6,7-ジメトキシ−1(2H)-イソキノリンであって、図１０ではS52-62 6-6と表示）と培養した。当該市販のイソキノリンは、本発明の化合物のように、環状窒素に対してオルト位に酸素を有するが、本発明の化合物と異なり上記のように側鎖置換基がない（１Ｌ−４９は、上記のどこかで述べたように側鎖置換基を有する本発明のイソキノロン化合物の代表である）。各化合物の抑制効果をＴＮＦ−α減少の関数としてｐｇ／ｍｌで測定した。実験結果を図１０に示し、本発明の化合物（１Ｉ−４９および化合物３７に代表される）は、ヒトの細胞でＬＰＳ誘発ＴＮＦ−α産生の減少に関して抑制効果を有することを確認する。調べた他のイソキノリン（図１４）は、本発明にしたがって付加される側鎖基の不存在下では抑制活性を示さなかった。実施例８ＬＰＳに応じる線維芽細胞の増殖と本発明の化合物によるその抑制図１１に示すように、ＰＤＧＦ誘発線維芽細胞増殖は、本発明の化合物によって選択的に抑制された。さらに、当該化合物は、調べた細胞のＥＧＦ誘発有糸分裂に変化をもたらさないという点において、細胞増殖抑制性を示さず、細胞毒性も示さなかった。これらのデータを以下のように得た。マウス線維芽細胞株、３Ｔ３細胞（American Type Culture Collection #CCL 92）を完全な培養液中で９６ウェルマイクロタイタープレートに播種し融合するまで増殖させた。その後培養液を溶液を含まない血清に置き換え、細胞を24時間培養した。その後、ヒトＰＤＧＦまたはＥＧＦを５ｎｇ／ｍｌ各ウェルに添加する前に、被験化合物を細胞とともに１時間培養した。さらに24時間後、〔³Ｈ〕チミジンを１μＣｉ各ウェルに添加した。４時間後、細胞をガラス線維フィルターに集め、〔³Ｈ〕チミジンの細胞取り込みを液体シンチレーション計測によって測定した（図１１および１２）。実施例９化合物２、４〜８および１０〜１３の合成化合物４〜８、１０、１１（方法Ａ）のための一般的アルキル化工程：テオブロミンまたは8-ブロモテオブロミン(2mmol)を無水Ｋ₂ＣＯ₃（2.5mmol）および乾燥ＤＭＦ（15ｍｌ）と合わせ、この混合物を75℃に加温した。適切なハロゲン化アルキル(2.5mmol)を加え、混合物を75℃で２〜18時間攪拌した。反応混合物を冷却し、水（125ｍｌ）に注ぎ、さらに酢酸エチルで抽出した（２×75 ｍｌ）。有機層を硫酸マグネシウム上で乾燥し、蒸発させて無色の油状または白色の固形物を得た。この固形物をエチルエーテルで粉砕した。得られた固形物、しばしば分析上純粋なものを所望により少量のエタノールで結晶化させることによってさらに精製することができる。収量58〜89％。化合物１５〜１７、３１、３６〜３８、４１、４３、４７および４８（下記に記載）を、テオブロミンの代わりに適切な前駆体を用いてこれと同じ工程で調製した。化合物１２および１３のための一般的チエーション（thiation）工程： 8-ブロモキサンチン１０または１１(0.25mmol)を無水エタノール（10ｍｌ）に懸濁し、加熱還流した。ＮａＳＨ．Ｈ₂Ｏ_x（2.5mmol）を加えると、混合物はほぼ瞬間的に緑色透明になった。混合物を還流下で30分間攪拌し、冷却してシリカゲル上で蒸発させた。５〜７％ＭｅＯＨのＣＨ₂Ｃｌ₂溶液を用いたフラッシュカラムクロマトグラフィーによって、１２及び１３を白色固形物としてそれぞれ63 ％および75％の収量で得た。註記：化合物１３は、反応条件下でのトランスエステル化のためにエチルエステルであることが ¹ＨＮＭＲで分かった。 ¹ＨＮＭＲスペクトルおよび元素分析または正確な質量分析データは指定の構造と一致した（表２および下記実施例１３を参照）。実施例１０化合物２４、２５、３１および中間体の合成ピリミジンの一般的Ｃ−ニトロソ化工程（化合物１８〜２０、２７および３２）：ピリミジン(15mmol)を１ＮＨＣｌ（30ｍｌ）に懸濁し、亜硝酸ナトリウム水溶液（10ｍｌ中に20mmol）を10分かけて攪拌しながら滴下した。懸濁液はほぼ瞬時にオフホワイトから紫色に変化した。１時間攪拌を続け、アンモニア水でｐＨ５に調整し、乾燥後75〜90％の収量で紫色の固形生成物を得た。 ¹ＨＮＭＲで特徴的なＣ−５プロトンの欠落が各化合物について明らかになった（表２）。5- ニトロソから5-アミノピリミジンへの還元のための一般的工程（化合物２１〜２３、２８および３３）： 5-ニトロソピリミジン(15mmol)を水（50ｍｌ）に懸濁し、80〜90℃に加熱した。攪拌しながら、ヒドロ亜硫酸ナトリウム(45mmol)を５分かけて一部分ずつ添加した。急速に紫色から淡い緑に変化した。さらに10分間攪拌を続けた。混合物を氷で冷却し濾過した。濾過固形物を冷水、ＥＴＯＨおよびＥｔ₂Ｏで洗浄し、70 〜88％の収量で褐色から青緑色の固形物としてオルトジアミンを得た。１−ｎ−ヘキシル−３−メチル尿酸中間体（２４）の合成：ニトロソピリミジン１９（270ｍｇ、1.06mmol）を加温しながらエタノール（2 0ｍｌ）に溶解し、炭素上のパラジウム（75ｍｇ、10％）をアルゴン下で添加した。水素化を室温で15ｐｓｉで２時間実施し、触媒を除去するために濾過し、蒸発乾固した。残留物を尿素（600ｍｇ、10mmol）と合わせ、攪拌しながらホットプレートで手際よく加熱した。透明な融解物を生じる 140℃に温度を上げ、さらに尿素を１ｇ添加して約10分間維持した。冷却して融解物を固形化し、１ＮＮａＯＨ（25ｍｌ）に溶解し、脱色炭素とともに10分間煮沸し、濾過して熱いうちにｐＨ３〜４に酸性化した。得られた沈澱物を冷却後集め、水で洗浄して乾燥し、２４を以下の特性を有するオフホワイト固形物として 160ｍｇ（57％）得た： mp>290℃分解。 ¹ＨＮＭＲ(500MHz，DMSO-d₆)d 11.80 及び10.73(2s，2H，N-7 H，N-9H)，3.78(t，2H，N-CH₂)，3.30(s，3H，N-CH₃， H₂O シグナル下)，1.48(m，2 H， 2'CH₂)，1.24(m，6H，3',4',5' CH₂)，0.85(t，3H，CH₃)。分析結果：C₁₂Ｈ₁₈ Ｎ₄Ｏ₃(C，H，N; 表2)。３−メチル−８−チオ尿酸（２５）中間体の合成：ピリミジンジアミン３３（100ｍｇ、0.63mmol）をエチルキサントゲン酸カリウム(810ｍｇ、５mmol)およびＤＭＦ（10ｍｌ）と合わせ、100℃に加熱した。懸濁液はほぼ瞬時に緑色になり、反応は３０分後にＴＬＣによって終了させた。１時間の全反応時間後、混合物を冷却し、濾過してＥｔ２Ｏで洗浄し乾燥してオフホワイトの固形物(310ｍｇ)を得た。これは、おそらく未反応のエチルキサントゲン酸カリウムと所望の生成物のカリウム塩を含んでいた。この固形物を水（５ｍｌ）に懸濁し、加熱して溶解した。氷酢酸をｐＨ５になるまで添加して、激しい発泡が認められた。白色の固形物が生成され、これを温めながら濾過し、水、その後エタノールで洗浄して乾燥し、99ｍｇ（79％）の表題の化合物を得た。¹ ＨＮＭＲ(DMSO-d₆)d 13.40，12.92 および11.80(3br s，3H，NHs)，3.28(s， 3H，CH₃)。分析結果：Ｃ₆Ｈ₆Ｎ₄Ｏ₂Ｓ（Ｃ、Ｈ、Ｎ；表２）。３−ｎ−プロピルキサンチン（２９）中間体の合成：ピリミジンジアミン２８（750ｍｇ）を酢酸ジエトキシメチル（７ｍｌ）と合わせ、80℃で２時間加熱した。混合物を蒸発乾固し、水（５ｍｌ）を加えて混合物を20分間ほぼ沸騰するまで加熱した。その後、得られた溶液をゆっくりと蒸発させオフホワイトの結晶を得た。収量680ｍｇ（86％）；mp 282-284℃、Lit ¹⁵ 291-292℃。実施例１１化合物３６−３９、４１および４３並びに中間体の合成ピリミジンジアミンからプテリジンへの閉環のための一般的工程：オルトジアミン２８および３３（２mmol）を水（20ｍｌ）に懸濁し、さらに、グリオキサール−重亜硫酸ナトリウム付加生成物溶液（水25ｍｌに10mmol）を攪拌しながら添加する前に70℃以上に加熱した。青緑色の懸濁液は徐々に淡黄土色となり透明になった。５分間加熱後、ＴＬＣで反応が終了したことが示された。混合物を冷却し、酢酸エチルで抽出し（５×40ｍｌ）、ＭｇＳＯ₄上で乾燥し、蒸発させて１−メチル（３４）または１−ｎ−プロピルプテリジン（３５）をそれぞれ71％および78％で得た。 ¹ＨＮＭＲによって、双方の化合物について、２つの芳香環シグナルの出現を約8.74および8.55のダブレット(J=2.5Hz)として示された。 6,7-ジエチル−1-メチルプテリジン−2,4-ジオン（４０）中間体の合成：化合物３３（200ｍｇ、1.27mmol）をアセトニトリル（５ｍｌ）に懸濁し、3,4 -ヘキサンジオン(185μｌ、1.52mmol）を添加した。混合物を70℃で15分間加熱して、３３の不溶性により最小限の生成物が形成された。したがって、ＤＭＦ（３ｍｌ）および水（３ｍｌ）を加え、温度を 100℃に上げた。全反応時間90分後、混合物を冷却し、水（100ｍｌ）に注ぎ、酢酸エチル（３×75ｍｌ）で抽出した。有機層をＭｇＳＯ₄上で乾燥し、さらに蒸発させて無色の結晶性生成物を得た。収量 240ｍｇ（81％）；mp 218-222℃； ¹ＨＮＭＲ（DMSO-d₆）d 11.78(br s，1H，NH)，3.46(s，3H，NCH₃)，2.95 および2.93(2q，4H,エチルの２ＣＨ₂)， 1.28および1.23(2t，6H,エチルの２ＣＨ₃)。分析結果：Ｃ₁₁Ｈ₁₄Ｎ₄Ｏ₂（Ｃ、Ｈ、Ｎ；表２）。１−メチル−６−フェニルプテリジン−２，４−ジオン（４２）中間体の合成：ニトロソピリミジン３２(220ｍｇ、1.28mmol)をフェネチルアミン塩酸塩(1.5 ｇ、9.5mmol）と完全に混合し、ホットプレート上で開放ビーカーで加熱した。約 160℃で数分後、紫色の反応混合物は溶解して褐色のペーストとなった。ＴＬＣによって多くの生成物が認められたので、スルフォレイン（１ｍｌ）を加え、加熱を15分間継続した。反応混合物を水（10ｍｌ）中で加熱し、その後水50ｍｌに希釈し、さらに酢酸エチルで抽出（２×５０ｍｌ）し、有機層をＭｇＳＯ₄上で乾燥させその後濃縮した。残留物を４％メタノールのＣＨ₂Ｃｌ₂溶液を用いてシリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィーにかけた。淡黄橙色の固形物として４２を75ｍｇ（23％）得た。mp＞307℃分解； ¹ＨＮＭＲ（500MHz、DMSO-d₆ ）d 11.95(brs，1H，NH)，9.37(s，1H，C-7H)，8.17(m，2H，2',6'フェニル)， 7.55(m，3H，3',4'，5'フェニル）、3.51（s，3H，NCH₃）。分析結果：Ｃ₁₃Ｈ₁₀ Ｎ₄Ｏ₂（Ｃ、Ｈ、Ｎ；表２）。実施例１２化合物４４、４７および４８の合成ピリミジンからチアジアゾロ−ピリミジンへの閉環のための一般的方法（化合物４４〜４６）：オルトジアミン２３、２７または３２(2.3 mmol)を乾燥アセトニトリル（５ｍｌ）に懸濁し、乾燥ピリジン（1.5ｍｌ）を加えた。塩化チオニル（１ｍｌ、3.7 mml）を迅速に加え、透明で暗色になった混合物を60℃で10分間加熱した。その後混合物を冷却し、１ＮＨＣｌ（40ｍｌ）に攪拌しながら注ぎ入れた。生じた黄色溶液を酢酸エチルで抽出（３×40ｍｌ）し、ＭｇＳＯ₄上で乾燥し、さらに蒸発させて淡黄色固形物を得た。これをエーテルで粉砕した。収量65〜74％。これら中間体のアルキル化によって二置換生成物４７および４８を得た。実施例１３化合物５０および５２の合成エチル４−〔（２−メチルアミノ）ベンゾイル〕アミノブタノエート（５１）：無水Ｎ−メチルイサト酸(3.5ｇ、19.8mmol)の混合物を乾燥ＤＭＦ（50ｍｌ）中で４−アミノ酪酸(2.5ｇ、24.3mmol)と合わせ、100℃で２時間加熱した。ＴＬＣによって反応の終了を確認し、真空中でＤＭＦを除去した。残留物をエステル化に直接用いた。残留物を100％エタノール（50ｍｌ）に溶解し、クロロトリメチルシラン(2.5ｍｌ、20mmol)を加えて、エステル化を行った。混合物を65℃で６時間加熱し、その後蒸発させて褐色のシロップを得た。粗生成物は無水イサト酸から87％で得られた。７％メタノールのＣＨ₂Ｃｌ₂溶液を用いて調製用ＴＬＣで少量のサンプルを特性決定と生物学的テストのために精製した。材料の残りを化合物５２の調製のために直接用いた。分析結果：Ｃ₁₄Ｈ₂₀Ｎ₂Ｏ₃（Ｃ、Ｈ、Ｎ；表２）。エチル−１−メチル−１，４−ジヒドロ−２，４−ジオキソ−３（２Ｈ）−キナゾリンブタノエイト（５２）：５１の残留物をエチルクロロホルメート（10ｍｌ）と合わせ、90℃で１時間加熱した。混合物を冷却し、飽和重曹水溶液（50ｍｌ）に攪拌しながら注ぎ入れ、10 分後に酢酸エチルで抽出した（２×75ｍｌ）。有機層をＭｇＳＯ₄上で乾燥し、さらに蒸発させて褐色のシロップを得た。粗生成物を３％メタノールのＣＨ₂Ｃｌ₂溶液を用いてシリカゲル上でフラッシュクロマトグラフィーにかけて濃厚な油として５２をｇ（％）得た。 ¹ＨＮＭＲ（500MHz，DMSO-d₆）d 7.27-7.42(2 m，4H，C-5,6,7,8)，4.04(t，2H，エチルのＣＨ₂)，3.88(m，2H，NCH₂)，3.11(s ，3H，NCH₂)，2.33(t，2H，2'CH₂)，1.71(m，2H，3’CH₂)。分析結果：Ｃ₁₅Ｈ₁₈ Ｎ₂Ｏ₄（Ｃ、Ｈ、Ｎ；表２）。本発明を十分に記載してきたが、当業者にとって、それらを変更することは明白であろう。そのような変更は添付の請求の範囲に規定する本発明の範囲内に包含される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁶ 識別記号ＦＩＡ６１Ｋ 31/52 ＡＥＤＡ６１Ｋ 31/52 ＡＥＤＡＧＺＡＧＺＣ０７Ｄ 217/24 Ｃ０７Ｄ 217/24 475/02 475/02 487/04 １４０ 487/04 １４０ 513/04 ３５１ 513/04 ３５１ (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＨＵ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ (72)発明者コッタム、ハワードビー. アメリカ合衆国 92028 カリフォルニア州ホールブルックホワイトホースレーン 208 (72)発明者ワッソン、ディー．ブルースアメリカ合衆国 92109 カリフォルニア州サンディエゴベリルストリートナンバー１ 935

Claims

【特許請求の範囲】１．以下の式を有する化合物。（式中、ＺはＮ又はＣＨであり；Ｒ₁は（ＣＨ₂）_nＡであって、ＡがＮＨ₂、アシルオキシ、ＳＯ₃Ｈ、ＰＯ₄Ｈ₂、ＮＮＯ（ＯＨ）、ＳＯ₂ ＮＨ₂、ＰＯ（ＯＨ）ＮＨ₂、ＳＯ₂Ｒ又はＣＯＯＲ（ＲはＨ、炭素原子を１〜４個有するアルキル、炭素原子を１〜４個有するアルケニル、テトラゾリル又はベンジルである）であり、ｎが飽和及び／又は不飽和炭素と炭素との結合を有する１〜７個の原子数であって、原子として炭素に代わって酸素原子又は窒素原子を含めることができ、それぞれエーテル又はアミノ結合を形成するものであって、かつ好ましくは、Ｒ₁は、炭素原子を１〜８個有するω−カルボキシアルキル、ω −カルボキシアルケニル、又はω−カルボキシアリールであり、置換基Ａ（上記で定義した）として芳香族基をさらに有するものであり：Ｒ₂は、Ｈ、アルキル（脂肪族及び脂環式、並びにヘテロ脂環式形態を含む）、アルケニル、炭素原子を１〜７個有するアラルキル、又は炭素原子を１〜７個有するω−ヒドロキシアルキルであり；Ｒ₃は、Ｒ₂と同じであり；及びＸは、Ｈ、ハロゲン、ＯＨ、ＳＨ、ＯＲ’、又はＳＲ’であり、Ｒ’が炭素原子を１〜４個有するアルキル、アルケニル、フェニル又はベンジルである。）２．ｎ＝３、Ａ＝ＣＯＯＥｔ、Ｒ₂＝Ｍｅ、Ｘ＝Ｈ及びＺ＝Ｎである請求項１記載の化合物。３．ｎ＝４、Ａ＝ＣＯＯＥｔ、Ｒ₂＝Ｍｅ、Ｘ＝Ｈ及びＺ＝Ｎである請求項１記載の化合物。４．Ｒ₁＝炭素原子を１〜８個有するω−カルボキシアルキル、ω−カルボキシアルケニル、又はω−カルボキシアリールであり、置換基Ａとして芳香族基をさらに有する請求項１記載の化合物。５．請求項１記載の化合物を治療上有効量及び生理上許容可能なキャリアを含有する医薬組成物。６．以下の式を有する化合物。（式中、Ｒ₁は（ＣＨ₂）_nＡであって、ＡがＮＨ₂、アシルオキシ、ＳＯ₃Ｈ、ＰＯ₄Ｈ₂、ＮＮＯ（ＯＨ）、ＳＯ₂ ＮＨ₂、ＰＯ（ＯＨ）ＮＨ₂、ＳＯ₂Ｒ又はＣＯＯＲ（ＲはＨ、炭素原子を１〜４個有するアルキル、炭素原子を１〜４個有するアルケニル、テトラゾリル又はベンジルである）であり、ｎが飽和及び／又は不飽和炭素と炭素との結合を有する１〜７のうちのいずれかの原子数であって、原子として炭素に代わって酸素原子又は窒素原子を含めることができ、その場合それぞれエーテル又はアミノ結合を形成するものであって、好ましくはＲ₁が炭素原子を１〜８個有するω−カルボキシアルキル、ω−カルボキシアルケニル、又はω−カルボキシアリールであり、置換基Ａ（上記で定義した）として芳香族基をさらに有するものであり：Ｒ₂はＨ、アルキル（脂肪族及び脂環式、並びにヘテロ脂環式形態を含む）、アルケニル、炭素原子を１〜７個有するアラルキル又は炭素原子を１〜７個有するω−ヒドロキシアルキルであり；Ｒ₄はＲ₂と同じか、ＯＨ又は炭素原子を１〜５個有するＯ−アルキルであり；Ｒ₅はＲ₂と同じか、ＯＨ又は炭素原子を１〜５個有するＯ−アルキルであり；及びＺは、Ｎ又はＣＨである。）７．ｎ＝３、Ａ＝ＣＯＯＥｔ、Ｒ₂＝ＭｅＣＨ₂ＣＨ₂（ノルマル）並びにＲ₄及びＲ₅＝Ｈである請求項６記載の化合物。８．Ｒ₁＝炭素原子を１〜８個有するω−カルボキシアルキル、ω−カルボキシアルケニル、又はω−カルボキシアリールであり、置換基Ａとして芳香族基をさらに有する請求項６記載の化合物。９．請求項６記載の化合物を治療上有効量及び生理上許容可能なキャリアを含有する医薬組成物。 10．以下の式を有する化合物。（式中、Ｒ₁は（ＣＨ₂）_nＡであって、ＡがＮＨ₂、アシルオキシ、ＳＯ₃Ｈ、ＰＯ₄Ｈ₂、ＮＮＯ（ＯＨ）、ＳＯ₂ ＮＨ₂、ＰＯ（ＯＨ）ＮＨ₂、ＳＯ₂Ｒ又はＣＯＯＲ（ＲはＨ、炭素原子を１〜４個有するアルキル、炭素原子を１〜４個有するアルケニル、テトラゾリル又はベンジルである）であり、ｎが飽和及び／又は不飽和炭素と炭素との結合を有する１〜７のうちのいずれかの原子数であって、原子として炭素に代わって酸素原子又は窒素原子を含めることができ、その場合それぞれエーテル又はアミノ結合を形成するものであって、好ましくはＲ₁が炭素原子を１〜８個有するω−カルボキシアルキル、ω−カルボキシアルケニル、又はω−カルボキシアリールであり、置換基Ａ（上記で定義した）として芳香族基をさらに有するものであり：及びＲ₂はＨ、アルキル（脂肪族及び脂環式、並びにヘテロ脂環式形態を含む）、アルケニル、炭素原子を１〜７個有するアラルキル又は炭素原子を１〜７個有するω−ヒドロキシアルキルである。） 11．ｎ＝３、Ａ＝ＣＯＯＥｔ及びＲ₂＝ＭｅＣＨ₂ＣＨ₂である請求項10記載の化合物。 12．Ｒ₁＝炭素原子を１〜８個有するω−カルボキシアルキル、ω−カルボキシアルケニル、又はω−カルボキシアリールであり、置換基Ａとして芳香族基をさらに有する請求項10記載の化合物。 13．請求項10記載の化合物を治療上有効量及び生理上許容可能なキャリアを含有する医薬組成物。 14．以下の式を有する化合物。（式中、Ｒ₂は（ＣＨ₂）_nＡであって、ＡがＨ、ＮＨ₂、アシルオキシ、ＳＯ₃Ｈ、ＰＯ₄Ｈ₂、ＮＮＯ（ＯＨ）、ＳＯ₂ＮＨ₂、ＰＯ（ＯＨ）ＮＨ₂、ＳＯ₂Ｒ又はＣＯＯＲ（ＲはＨ、炭素原子を１〜４個有するアルキル、炭素原子を１〜４個有するアルケニル、テトラゾリル又はベンジルである）であり、ｎが飽和及び／又は不飽和炭素と炭素との結合を有する１〜７のうちのいずれかの原子数であって、原子として炭素に代わって酸素原子又は窒素原子を含めることができ、その場合それぞれエーテル又はアミノ結合を形成するものであって、好ましくはＲ₁が炭素原子を１〜８個有するω−カルボキシアルキル、ω−カルボキシアルケニル、又はω−カルボキシアリールであり、置換基Ａ（上記で定義した）として芳香族基をさらに有するものであり：Ｒ₃はＨ、アルキル、又は炭素原子を１〜７個有するω−ヒドロキシアルキルであり；Ｒ₄はＨ、ＯＨ、ＮＨ₂又は炭素原子を１〜７個有するＯ−アルキルであり；Ｒ₆はＨ、ＯＨ、ＮＯ、ＮＯ₂、ＮＨ₂、炭素原子を１〜７個有するＯ−アルキル、又はＸであり（ここでＸはＨ、ハロゲン、ＯＨ、ＳＨ、ＯＲ’、又はＳＲ ’であり、Ｒ’は炭素原子を１〜７個有するアルキル、アルケニル、フェニル又はベンジルである）；及びＲ₇はＨ、ＯＨ、ＮＯ、ＮＯ₂、ＮＨ₂、炭素原子を１〜７個有するＯ−アルキル、又はＸである（ここでＸはＨ、ハロゲン、ＯＨ、ＳＨ、ＯＲ’、又はＳＲ’ であり、Ｒ’は炭素原子を１〜７個有するアルキル、アルケニル、フェニル又はベンジルである。）） 15．Ｒ₂＝ＣＯＯＲであってＲ＝Ｅｔ；Ｒ₃及びＲ₄＝Ｈ、並びにＲ₆及びＲ₇＝ＯＣＨ₃である請求項14記載の化合物。 16．請求項14記載の化合物を治療上有効量及び生理上許容可能なキャリアを含有する医薬組成物。 17．生理上許容可能なキャリアに請求項１記載の化合物を治療上有効量含有する医薬組成物の使用方法であって、ホストの組織が受けたセラミド関連病状からホストを保護するのに十分な量及び十分な時間、ホストに該化合物を投与する工程を含む、上記使用方法。 18．生理上許容可能なキャリアに請求項６記載の化合物を治療上有効量含有する医薬組成物の使用方法であって、ホストの組織が受けたセラミド関連病状からホストを保護するのに十分な量及び十分な時間、ホストに該化合物を投与する工程を含む、上記使用方法。 19．生理上許容可能なキャリアに請求項10記載の化合物を治療上有効量含有する医薬組成物の使用方法であって、ホストの組織が受けたセラミド関連病状からホストを保護するのに十分な量及び十分な時間、ホストに該化合物を投与する工程を含む、上記使用方法。 20．生理上許容可能なキャリアに請求項13記載の化合物を治療上有効量含有する医薬組成物の使用方法であって、ホストの組織が受けたセラミド関連病状からホストを保護するのに十分な量及び十分な時間、ホストに該化合物を投与する工程を含む、上記使用方法。 21．セラミド関連病状が炎症である請求項17記載の方法。 22．セラミド関連病状が炎症である請求項18記載の方法。 23．セラミド関連病状が炎症である請求項19記載の方法。 24．セラミド関連病状が炎症である請求項20記載の方法。 25．セラミド関連病状が繊維症である請求項17記載の方法。 26．セラミド関連病状が繊維症である請求項18記載の方法。 27．セラミド関連病状が繊維症である請求項19記載の方法。 28．セラミド関連病状が炎症である請求項20記載の方法。 29．セラミド関連病状が細胞老化又は細胞アポプトシスである請求項17記載の方法。 30．セラミド関連病状が細胞老化又は細胞アポプトシスである請求項18記載の方法。 31．セラミド関連病状が細胞老化又は細胞アポプトシスである請求項19記載の方法。 32．セラミド関連病状が細胞老化又は細胞アポプトシスである請求項20記載の方法。 33．セラミド関連病状が照射性皮膚炎、皮膚の日焼け又はＵＶ誘発性免疫抑制である請求項29記載の方法。 34．セラミド関連病状が照射性皮膚炎、皮膚の日焼け又はＵＶ誘発性免疫抑制である請求項30記載の方法。 35．セラミド関連病状が照射性皮膚炎、皮膚の日焼け又はＵＶ誘発性免疫抑制である請求項31記載の方法。 36．セラミド関連病状が照射性皮膚炎、皮膚の日焼け又はＵＶ誘発性免疫抑制である請求項33記載の方法。