JPH11509206A - 虚血性腸組織における好中球浸潤および形態学的喪失の遅延のためのピルベートの使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 虚血性腸を有する哺乳動物を治療量のピルベートで腸内においてまたは非経口的に治療することにより、腸虚血の間および後における好中球浸潤が遅延されかつ形態が保持される。ピルベートは腸虚血または続く腸再灌流の間に、好ましくは腸虚血の前において、患者に腸内または非経口的に導入される。ピルベートの投与量は患者のカロリー摂取量の１〜２０重量％である。

Description

【発明の詳細な説明】 虚血性腸組織における好中球浸潤および形態学的喪失の遅延のための ピルベートの使用 発明の背景 発明の分野 − 本発明は虚血性腸疾患を遅延させる哺乳動物の治療に関する 。腸虚血および再灌流は、通常、フリーラジカルの発生の急激な増加に関係付け られ、好中球湿潤を伴いかつ哺乳動物を死亡させることがある細胞の死または形 態の喪失を伴う。虚血は特定の器官または筋肉への血流の停止を意味する。再灌 流は影響を受けた器官または筋肉への血流の回復を意味する。 本発明によれば、腸虚血の開始の前、および／または間において、哺乳動物に ピルベートを投与することによって、影響を受けた腸への好中球湿潤が有意に抑 制される。虚血性腸の再灌流の間において、腸内のピルベートの存在により、好 中球湿潤および絨毛の変質は有意に遅延される。 先行技術の説明 − ピルベートは医学的に多数の有用な用途を有する。ピル ベートは、肝臓における脂肪の沈着の遅延（４，１５８，０５７）、糖尿病の治 療（４，８７４，７９０）、体重の増加の遅延（４，８１２，８７９、４，５４ ８，９３７、４，３５１，８３５）、哺乳動物における身体のタンパク質濃度の 増加（４，４１５，５７６）、心臓酸素要求を伴わないで、心拍出量を増加する ための心臓患者の治療（５，２９４，６４１）、スポーツの耐久性の延長（４， ３１５，８３５）、コレステロール増加の遅延（５，１３４，１６２）、悪性疾 患の増大および広がりの抑制およびＤＮＡ破壊の遅延（出願第０８／１９４，８ ５７号、１９９４年２月１４日提出）、および遊離基の発生の抑制（出願第０８ ／２８６，９４６号、１９９４年８月８日提出）に関して報告がなされている。 種々の形態のピルベートが腸内投与および非経口投与のために提案されてきてい る。典型的には、ピルベートは塩の形態、例えば、ピルビン酸カルシウムおよび ピルビン酸ナトリウム；アミノ酸のピルベート類似体、例えば、ピルビル−アミ ノ酸、例えば、ピルビル−グリシン、ピルビル−アラニン、ピルビル−ロイシン 、ピルビル−バリン、ピルビル−イソロイシン、ピルビル−フェニル−アラニン 、ピルピル−プロリン、およびそれらのアミドの形態で入手可能である。ピルビ ル−アミノ酸については、米国特許第５，２８３，２６０号および米国特許第５ ，２５６，６９７号明細書を参照のこと。 ピルベートは、哺乳動物において生理的レベルを超えるレベルにおいて哺乳動 物に腸内または非経口的に投与することができる。好ましくは、ピルベートの投 与量は哺乳動物のカロリー摂取量の１〜２０％である。腸内投与のために、ピル ベートは飲料の中に分散または溶解させるか、またはクッキー、キャンデーまた はその他の食品中に含めることができる。ピルベートは水溶液の形態で非経口的 に投与することができる。好ましい投与法は、糖と、選択された１種または２種 以上のピルベートを含む、水性エネルギー維持点滴である。米国特許出願第０８ ／２８６，９４６号、１９９４年８月８日提出）明細書を参照のこと。投与法に 無関係に、本発明によれば、哺乳動物の腸または循環系における生理的レベルを 超えるピルベートの存在が、哺乳動物の腸における虚血の発生の間および再灌流 の間におけるフリーラジカルの出現を遅延する。図面の説明 第１図は、虚血の間およびそれに引き続く再灌流の間における腸内のフリーラ ジカルの発生から生ずる化学発光の測定値のグラフであり、プラシーボ（ＰＬ） 、ピルベート（ＲＹ）の治療および対照条件を比較する。 第２図は、一方がピルベート（ＰＹ）を投与され、そして他方がプラシーボ（ ＰＬ）を投与された、２匹の哺乳動物についての好中球数のグラフである。これ は、虚血の開示前、対照条件と比較される。腸虚血後３０分の再灌流において、 好中球数を測定した。 第３図は、異なる条件下の腸の絨毛を示す３枚の顕微鏡写真である。好ましい態様の説明 虚血は血流が、哺乳動物の解剖学的に特定の領域、例えば、筋肉または器官に 対して中断された症状である。腸虚血は、通常、外科手術、機械的事故、および 腸疾患の過程において生ずる。 虚血性部位への血流の回復は再灌流と呼ばれる。腸虚血の開始において、フリ ーラジカルの急激な増加が見られる。哺乳動物のフリーラジカルの産生は、長期 間、例えば、再灌流の開始後１〜２時間の間、高い状態を維持する。高いレベル のフリーラジカルは、通常、影響を受けた部位における不可逆的損傷を引き起こ す。腸におけるフリーラジカルの増大は、細胞の壊死（細胞の死）、形態変化お よび哺乳物の死を生ずる。“Ｏｘｙｇｅｎ Ｆｒｅｅ Ｒａｄｉｃａｌｓ ｉｎ Ｔｉｓｓｕｅ Ｄａｍａｇｅ“Ｍｅｒｒｉｌｌ Ｔａｒｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｉ ｒｋｈａｕｓｅｒ Ｂｏｓｔｏｎ、１９３３、を参照のこと。形態は哺乳動物の 形態および構造である。 腸虚血前にピルベートで治療された患者はフリーラジカルの増大を示さないが 、その代わりに、虚血およびそれに引き続く再灌流を通じて正常であるか、また は対照レベルより低いレベルにフリーラジカルの発生を維持する。好中球浸潤は 遅延され、そして形態は保持される。 実施例１ ６匹の実験室用ラットの各々の小腸を結んで閉鎖した。この閉鎖から下流の腸 に、治療の１０分前およびその間、下記の成分を直接投与した： プラシーボ（ＰＬ）水性ポリグルコースを含有する液状食事調製物；または ピルベート（ＰＹ）ポリグルーコースのエネルギー（カロリー）含量の１０％ が液状食事の１０％（エネルギー）、すなわち、カロリー摂取量の１０％を構成 するピルビン酸ナトリウムとピルビン酸カルシウムとの混合物で置換された、水 性ポリグルコースを含有する液状食事調製物。 ６匹の実験室用ラットの各々において、腸に血液を供給する上腸間膜動脈を閉 塞して腸虚血を発生させた。この虚血を４５分間続け、その後上腸間膜動脈を解 放し、そして影響を受けた腸の再灌流を開始した。 各実験室用ラットの腸の一部を取り出した： （Ａ） 虚血直後； （Ｂ） ３０分の再灌流後； （Ｃ） ６０分の再灌流後； 各腸部分を化学発光（強度／ｍｇタンパク質を測定した）によりフリーラジカ ルについて分析し、そして光顕微鏡検査により検査した。化学発光の測定は、Ｓ ｉｍｍｏｎｄｓ、Ｎ．Ｊ．ｅｔ ａｌ．、ＧＡＳＴＲＯＥＮＴＥＲＧＯＬＯＧＹ １９９２、Ｖｏｌ．１０３、ｐｐ．１８６−１９６、に記載されている。 ラットについての対照化学発光値は、試験前に６８４，０００±６８，２００ 化学発光単位と得られ、これはフリーラジカル数に直接に相関する。プラシーボ （ＰＬ）及びピルベート（ＰＹ）処理についての値は表１及び第１図に示される 通りであった。 哺乳動物のピルベート処理により生ずるフリーラジカルの有意な減少（化学発光 により測定した）が第１図に示される。ここでピルベート処理（ＰＹ）を表す区 域はプラシーボ（ＰＬ）を表す区域よりも有意に低い。この減少は虚血の終わり および観測した再灌流を通じて明らかである。 プラシーボの腸セグメントは、再灌流後、変色し、壊死したように見えた。プ ラシーボのセグメントのすべては点状出血（小さい出血スポット）を示したが、 ビルベートのセグメントは点状出血を示さなかった。 更なる試験において、３０分の腸虚血および引き続く３０分の再灌流を生じさ せ、実験室用ラットに実施例１に記載する飼料を与えた。プラシーボのラットに 、記載の標準的食事を与えた。ピルベート処理のラットは、ピルベート変性食事 を （Ａ） 虚血の前およびその間；または （Ｂ） 虚血の開始後においてのみ、 与えた。腸の好中球浸潤を測定し、それは第２図に示される通りであった。第２ 図の対照条件は、評価前における好中球の個体数を示す。標識した２つのバーは 、３０分の虚血後３０分の再灌流後における好中球の個体数を示す。 （Ａ） ピルベートを虚血の開始前にラットに導入する場合、好中球浸潤（Ｐ Ｙ）は対照条件により減少したが、プラシーボ（ＰＬ）は好中球浸潤の 増加を示した。 （Ｂ） ピルベートの食事を虚血開始直後に始めた場合、同様な結果が得られ た。 第２図から明らかなように、ピルベートは、双方の状況において、すなわち、 虚血の前およびその間において投与するとき、そして、虚血の開始または再灌流 の開始後においてのみ投与するとき、好中球浸潤の遅延に有益である。 腸に対する虚血の作用の視的証拠のために、２匹の実験室用ラットを評価した 。一方のラット、ＰＬ、に記載した標準的食事を与え、そして他方のラット、Ｐ Ｙ、に記載したピルベート変性の標準的食事を与えた。双方のラットの上腸間膜 動脈をブロックして、腸虚血を６０分間発生させた。 ６０分の再灌流の終わりにおいて、ラットを殺し、小腸を通る断面を顕微鏡写 真撮影した。小腸は小さい絨毛で覆われており、絨毛は筋肉壁から腸の内部の中 に伸びている。これらの顕微鏡写真は第３図に示されており、 第３ａ図 − 虚血をもたない正常のラットの小腸のスライスの２００倍の断 面を示し、正常の、健康な絨毛を示す。 第３ｂ図 − プラシーボのラット（ＰＬ）の腸からの１００倍の断面を示し 、筋肉壁から伸びる、悪く変質した絨毛を示す。形態は非常に失なわれた。 第３ｃ図 − ピルベート治療のラット（ＰＹ）の腸からの１００倍の断面を 示し、健康な絨毛を示す。絨毛は形態を保持している。 以上より明らかなように、ピルベートにより処理した動物は、未処理の動物に おいて腸の絨毛に対して破壊的でありかつ形態を失なわせる縮小させる腸虚血の 間において、健康絨毛を維持しかつ形態を保持する。 治療 − 腸虚血を経験しているか、または腸虚血をまさに経験しようとして いる患者は、患者の鼻から胃へ通ずる点滴管によるか、またはピルベートを含有 する飲料または食物によるか、または非経口的静脈内点滴により、生理的レベル より高いレベルのピルベートを投与されるべきでる。すべてのこれらの送達シス テムは患者においてピルベートの生理的レベルより高いレベルを確立する。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＡＴ，ＡＵ，ＢＧ，Ｂ Ｒ，ＣＡ，ＣＮ，ＣＺ，ＤＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＪＰ ，ＫＰ，ＫＲ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＵ， ＳＥ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． 治療量のピルベートを虚血性腸の間または再灌流の間に哺乳動物に腸内 または非経口的に導入することを含んでなる、虚血性腸を経験する哺乳動物の虚 血性腸における好中球浸潤を遅延しかつ形態の喪失を遅延する方法。 ２． 治療量のピルベートを虚血性腸の前および間または再灌流の間に哺乳動 物に腸内または非経口的に導入することを含んでなる、虚血性腸暴露を経験する 哺乳動物の虚血性腸における好中球浸潤を遅延しかつ形態の喪失を遅延する方法 。 ３． 前記ピルベートが１種または２種以上のピルビン酸塩またはピルビン酸 エステルである、請求項１に記載の方法。 ４． 前記ピルベートがアミノ酸の有機エステルである、請求項１に記載の方 法。 ５． 前記ピルベートがピルビルアラニンである、請求項１に記載の方法。 ６． 前記治療量が哺乳動物のカロリー摂取量の１〜２０重量％である、請求 項１に記載の方法。 ７． 治療量のピルベートを虚血性腸の間または再灌流の間に哺乳動物に腸内 または非経口的に導入することを含んでなる、虚血性腸を経験する哺乳動物の虚 血性腸における好中球浸潤を遅延する方法。 ８． 治療量のピルベートを虚血性腸の前および間または再灌流の間に哺乳動 物に腸内または非経口的に導入することを含んでなる、虚血性腸を経験する哺乳 動物の虚血性腸における形態の喪失を遅延する方法。 ９． 治療量のピルベートを虚血性腸の間および再灌流の間に哺乳動物に腸内 または非経口的に導入することを含んでなる、虚血性腸を経験する哺乳動物の虚 血性腸における形態の喪失を遅延する方法。 １０． 治療量のピルベートを虚血性腸の間または再灌流の間に哺乳動物に腸 内または非経口的に導入することを含んでなる、虚血性腸を経験する哺乳動物の 虚血性腸にいおける好中球浸潤を遅延する方法。