JPH1175889A

JPH1175889A - 光学活性α−トリフルオロメチル乳酸及びその対掌体エステルの製造方法及び精製方法

Info

Publication number: JPH1175889A
Application number: JP15130798A
Authority: JP
Inventors: Eiji Sato; 栄治佐藤; Kanehiko Enomoto; 兼彦榎本; Toshitaka Uragaki; 俊孝浦垣
Original assignee: Mitsubishi Rayon Co Ltd
Current assignee: Mitsubishi Chemical Corp
Priority date: 1997-07-15
Filing date: 1998-06-01
Publication date: 1999-03-23
Also published as: WO1999004028A1

Abstract

(57)【要約】【解決手段】一般式（Ｉ）：【化１】（式中、Ｒは置換又は非置換の炭素原子数１〜12の炭化
水素基である。）で表されるラセミ体α−トリフルオロ
メチル乳酸エステルを、エステル不斉加水分解能力を有
する酵素、酵素固定化物、微生物、菌体培養液、又は菌
体処理物の存在下で不斉加水分解することを特徴とす
る、光学活性α−トリフルオロメチル乳酸及びその対掌
体エステルの製造方法；並びに当該方法で得られる光学
活性α−トリフルオロメチル乳酸、又は当該方法で得ら
れる対掌体エステルを加水分解して得られる対掌体光学
活性α−トリフルオロメチル乳酸を再結晶し、結晶を回
収することを特徴とする光学活性α−トリフルオロメチ
ル乳酸の精製方法。【効果】本発明によれば、医薬、農薬等の原料又は合
成中間体として有用な光学活性α−トリフルオロメチル
乳酸及びそのエステル類を光学分割剤を使用せず製造す
ることができる。また、本発明により得られる光学活性
α−トリフルオロメチル乳酸を再結晶すれば、簡便な手
法での精製（光学純度の向上）が可能である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、医薬、農薬等の原
料又は中間体として有用な光学活性α−トリフルオロメ
チル乳酸及びその対掌体エステルの製造方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】ラセミ体α−トリフルオロメチル乳酸及
びそのエステルは、従来1,1,1-トリフルオロアセトンと
シアン化ナトリウムを原料として合成されることが報告
されている(Journal of Chemical Society, 2329, 195
1) 。また、同報告においてはブルシンを用いた光学分
割法によるラセミ体α−トリフルオロメチル乳酸からの
光学活性α−トリフルオロメチル乳酸の製造方法を報告
している。更にWO93/23358には(S)-(-)-α−メチルベン
ジルアミンを用いた光学分割法によるラセミ体α−トリ
フルオロメチル乳酸からの光学活性α−トリフルオロメ
チル乳酸の製造方法が報告されている。

【０００３】しかしながら、いずれの方法も光学純度を
上げるためには高価な分割剤を必要とし、生産コストが
高額となる。更に、これらの方法では、分割剤との塩の
形で数回以上再結晶を繰り返した後に、脱分割剤処理を
行う必要があり、操作が煩雑である。また、上記の文献
では、再結晶による光学活性α−トリフルオロメチル乳
酸の精製（光学純度の向上）については何ら触れられて
おらず、再結晶により光学純度を向上させることが可能
か否かは全く不明であった。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】本発明の課題は、医
薬、農薬等の原料又は中間体として有用な光学活性α−
トリフルオロメチル乳酸及びその対掌体エステルの光学
分割剤を使用しない製造方法、並びに当該方法で得られ
る光学活性体の簡便な精製方法（光学純度向上方法）を
提供することにある。

【０００５】

【課題を解決するための手段】本発明者らは上記課題を
解決すべく鋭意検討を重ねた結果、ラセミ体α−トリフ
ルオロメチル乳酸エステルを光学選択的に加水分解する
活性を有する酵素を見い出し、更に、光学活性α−トリ
フルオロメチル乳酸を再結晶することによりその光学純
度が向上することを見い出し、本発明を完成した。すな
わち、本発明は以下の発明を包含する。（１）一般式（Ｉ）：

【０００６】

【化２】

【０００７】（式中、Ｒは置換又は非置換の炭素原子数
１〜12の炭化水素基である。）で表されるラセミ体α−
トリフルオロメチル乳酸エステルを、エステル不斉加水
分解能力を有する酵素、酵素固定化物、微生物、菌体培
養液、又は菌体処理物の存在下で不斉加水分解すること
を特徴とする、光学活性α−トリフルオロメチル乳酸及
びその対掌体エステルの製造方法。（２）上記（１）に記載の方法で得られる光学活性α−
トリフルオロメチル乳酸、又は上記（１）に記載の方法
で得られる対掌体エステルを加水分解して得られる対掌
体光学活性α−トリフルオロメチル乳酸を再結晶し、結
晶を回収することを特徴とする光学活性α−トリフルオ
ロメチル乳酸の精製方法。

【０００８】

【発明の実施の形態】以下、本発明を詳細に説明する。
一般式（Ｉ）中において、Ｒは置換又は非置換の炭素原
子数１〜12の炭化水素基である。具体的には、メチル
基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ブチル
基、イソブチル基、n-ヘキシル基等の炭素原子数１〜12
のアルキル基；ビニル基、プロペニル基、イソプロペニ
ル基、ブテニル基、イソブテニル基、ヘキセニル基等の
炭素原子数２〜12のアルケニル基；エチニル基、プロピ
ニル基、ブチニル基等の炭素原子数２〜12のアルキニル
基；シクロヘキシル基等の炭素原子数３〜12、好ましく
は３〜７のシクロアルキル基；フェニル基、トリル基、
ナフチル基等のアリール基；ベンジル基等のアラルキル
基等が例示される。また、この炭化水素基は、その炭素
原子に結合する水素原子がハロゲン等の置換基で置換さ
れていてもよい。

【０００９】原料となるラセミ体α−トリフルオロメチ
ル乳酸エステルは、例えば、Journal of Chemical Soci
ety, 2329(1951) 等に記載されたような公知の方法によ
り合成することができる。すなわち、1,1,1-トリフルオ
ロアセトン水溶液に、冷却下でシアン化ナトリウム水溶
液を滴下した後、硫酸を添加して室温にて一昼夜反応さ
せることによってα−トリフルオロメチルラクトニトリ
ルを合成し、次いで、これを硫酸等の強酸で加水分解す
ることによりα−トリフルオロメチル乳酸を合成し、続
いてこれを常法に従いエステル化することにより製造す
ることができる。

【００１０】本発明において使用するエステル不斉加水
分解酵素は、ラセミ体α−トリフルオロメチル乳酸エス
テルを不斉加水分解して光学活性α−トリフルオロメチ
ル乳酸とその対掌体エステルを製造する能力を有するエ
ステル不斉加水分解酵素であれば酵素の種類及びその製
造源を問わないが、その中でも一般にリパーゼ類、エス
テラーゼ類、プロテアーゼ類と称される酵素が特に有効
である。

【００１１】エステル不斉加水分解酵素としては、例え
ば、ラセミ体α−トリフルオロメチル乳酸エステルを不
斉加水分解して光学活性α−トリフルオロメチル乳酸と
その対掌体エステルを製造する能力を有する微生物から
分離された粗酵素又は精製酵素を使用することができ
る。そのような微生物としては、バシラス属(Bacillu
s)、アスペルギルス属(Aspergillus) 、キャンディダ属
(Candida) 、シュードモナス属(Pseudomonas) 、リゾッ
プス属(Rhizopus)、ムコール属(Mucor) 、フミコラ属(H
umicola)等に属する微生物が挙げられる。

【００１２】バシラス属に属する微生物としては、Baci
llus subtilis, Bacillus licheniformus, Bacillus po
lymixa等が、アスペルギルス属に属する微生物として
は、Aspergillus flavus, Aspergillus fumigatus, Asp
ergillus oryzae, Aspergillusfoetides, Aspergillus
niger, Aspergillus phoenics, Aspergillus saitoi,As
pergillus sojae 等が、キャンディダ属に属する微生物
としては、Candida rugosa, Candida antarcia, Candid
a utilus等が、シュードモナス属に属する微生物として
は、Pseudomonas fluorescence, Pseudomonas antarci
a, Pseudomonassp. MR-2301(FERM BP-4870) 等が、リゾ
ップス属に属する微生物としては、Rhizopus juponicus
等が、ムコール属に属する微生物としては、Mucor jupo
nicus, Mucor miehei 等が、フミコラ属に属する微生物
としては、Humicola lanuginosa等が例示される。

【００１３】また、本発明において使用するエステル加
水分解酵素としては、市販のものを使用することができ
る。微生物により生産される酵素としては、代表的なも
のとして、例えばNOVO社製アルカラーゼ(Bacillus 属由
来) 、NOVO社製デュラザイム(Bacillus 属由来) 、NOVO
社製エスペラーゼ(Bacillus 属由来) 、NOVO社製サビナ
ーゼ(Bacillus 属由来) 、NOVO社製ニュートラーゼ(Bac
illus 属由来) 、NOVO社製リポラーゼ(Humicola 属由
来) 、NOVO社製フラボザイム(Aspergillus属由来) 、ナ
ガセ生化学工業社製ビオプラーゼコンク(Bacillus 属由
来) 、ナガセ生化学工業社製デナチームAP及びAP-15(共
にAspergillus 属由来) 、ナガセ生化学工業社製リパー
ゼ２Ｇ(Pseudomonas属由来) 、天野製薬社製リパーゼＰ
(Pseudomonas属由来) 、天野製薬社製リパーゼＰＳ(Pse
udomonas属由来) 、天野製薬社製ニューラーゼＦ(Rhizo
pus 属由来) 、天野製薬社製リパーゼＭＦＬ、天野製薬
社製リパーゼＭ(Mucor属由来) 、天野製薬社製リパーゼ
ＡＹ(Candida属由来) 、天野製薬社製リパーゼＡ(Asper
gillus属由来) 、天野製薬社製リパーゼＭ−ＡＰ−１
０、旭化成工業社製ＬＰ−０１５−Ｓ等の酵素等が挙げ
られ、動物起源のエステル加水分解酵素としては、ブタ
あるいはウシ由来のパンクレアチン、トリプシン等が挙
げられる。

【００１４】更に、上記のような微生物から分離された
粗酵素又は精製酵素のみならず、該微生物を培地中で培
養して得られる培養物をそのままか、又は該培養物から
遠心分離等の集菌操作によって得られる培養上清、菌
体、若しくは菌体処理物の存在下で一般式（Ｉ）で表さ
れるラセミ体α−トリフルオロメチル乳酸エステルを不
斉加水分解することにより光学活性α−トリフルオロメ
チル乳酸及びその対掌体エステルを製造することもでき
る。菌体処理物としては、アセトン、トルエン等で処理
した菌体、菌体の破砕物、菌体を破砕した無細胞抽出物
等が挙げられる。本発明の製造方法において、上記エス
テル不斉加水分解酵素を反応に供するに際しては、該酵
素が活性を示す限りその使用形態は特に限定されず、酵
素を適当な担体に固定化して使用することもできる。酵
素を固定化して用いることにより、反応終了後の光学活
性α−トリフルオロメチル乳酸及びその対掌体エステル
並びに酵素の分離・回収が容易になるとともに、酵素の
再利用も可能となる。

【００１５】本発明において、ラセミ体α−トリフルオ
ロメチル乳酸エステルの光学選択的加水分解は、以下の
方法で行うことができる。反応溶媒に基質であるラセミ
体α−トリフルオロメチル乳酸エステルを溶解もしくは
懸濁する。また、基質を反応溶媒に添加する前に又は添
加した後に触媒となる上記不斉加水分解する能力を有す
る酵素、酵素固定化物、微生物、菌体培養液、又は菌体
処理物を添加する。そして、反応温度、必要により反応
液のpHを制御しながらα−トリフルオロメチル乳酸エス
テルの半量程度が加水分解されるまで反応を行う。場合
によっては反応の初期段階で反応を中断したり、あるい
は過剰に反応させることもある。

【００１６】反応液の基質濃度は、0.1 〜80重量％の間
で特に制限はないが、生産性等を考慮すると１〜50重量
％の濃度で実施するのが好ましい。反応液の酵素濃度
は、通常、0.01〜10重量％であり、好ましくは 0.05 〜
５重量％である。反応液のpHは用いる酵素の至適pHに依
存するが、一般的にはpH４〜11の範囲である。化学的加
水分解反応による光学純度の低下及び収率の低下を抑え
ることができるという点でpH５〜９で反応を行うのが好
ましい。また、反応が進行するに従いpHが低下してくる
が、この場合は適当な中和剤、例えば、水酸化ナトリウ
ム、水酸化カリウム水溶液等を添加して最適pHに調整す
ることが望ましい。反応温度は５〜70℃が好ましく、10
〜50℃がより好ましい。

【００１７】反応溶媒は、通常イオン交換水、緩衝液等
の水性媒体を使用するが、有機溶媒を含んだ系でも反応
を行うことができる。有機溶媒としては、例えば、メタ
ノール、エタノール、プロパノール、イソプロパノー
ル、ブタノール、イソブタノール、t-ブチルアルコー
ル、t-アミルアルコール等のアルコール系溶媒、ペンタ
ン、ヘキサン、ヘプタン、オクタン等の脂肪族炭化水素
系溶媒、ベンゼン、トルエン、キシレン等の芳香族炭化
水素系溶媒、塩化メチレン、クロロホルム、四塩化炭
素、ジクロロエタン等のハロゲン化炭化水素系溶媒、ジ
エチルエーテル、ジイソプロピルエーテル、テトラヒド
ロフラン、ジオキサン等のエーテル系溶媒、酢酸エチ
ル、酢酸プロピル、酢酸ブチル等のエステル系溶媒、ア
セトン、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン
等のケトン系溶媒、その他アセトニトリル、N,N-ジメチ
ルホルムアミド等を適宜使用できる。また、これらの有
機溶媒を水への溶解度以上に加えて２層系で反応を行う
ことも可能である。有機溶媒を反応系に共存させること
で、選択率、変換率、収率等が向上することも多い。

【００１８】反応時間は、通常、１時間〜１週間、好ま
しくは１〜72時間であり、そのような時間で反応が終了
する反応条件を選択することが好ましい。尚、以上のよ
うな基質濃度、酵素濃度、pH、温度、溶媒、反応時間及
びその他の反応条件はその条件における反応収率、光学
収率等を考慮して目的とする光学活性化合物が最も多く
採取できる条件を適宜選択することが望ましい。

【００１９】上記の反応により、ラセミ体α−トリフル
オロメチル乳酸エステルが不斉加水分解されて、光学活
性α−トリフルオロメチル乳酸が生成する。また、残存
基質は、その生成した光学活性α−トリフルオロメチル
乳酸の対掌体エステルとなる。生成した光学活性α−ト
リフルオロメチル乳酸及び光学活性α−トリフルオロメ
チル乳酸エステル（すなわち、光学活性α−トリフルオ
ロメチル乳酸の対掌体エステル）の反応混合液からの単
離は抽出、蒸留、カラム分離等通常の単離法で行うこと
ができる。

【００２０】例えば、光学活性α−トリフルオロメチル
乳酸エステルは、例えば、反応液のpHを中性付近に調整
後、ジエチルエーテル、ジイソプロピルエーテル等のエ
ーテル類；酢酸エチル等のエステル類；ヘキサン、オク
タン、ベンゼン、トルエン等の炭化水素類；塩化メチレ
ン等のハロゲン化炭化水素等、一般的な有機溶媒により
抽出分離することができる。一方、光学活性α−トリフ
ルオロメチル乳酸は、上記抽出残液に硫酸、塩酸等の強
酸を加えた後に、上記と同様の一般的な有機溶媒で抽出
分離することができる。

【００２１】更に、光学活性α−トリフルオロメチル乳
酸エステルは、通常の方法で加水分解することにより光
学活性を維持したままα−トリフルオロメチル乳酸にす
ることができる。また、光学活性α−トリフルオロメチ
ル乳酸は通常の方法でエステル化することにより光学活
性を維持したままα−トリフルオロメチル乳酸エステル
にすることができる。従って、任意の立体配置のα−ト
リフルオロメチル乳酸及びそのエステルを取得すること
ができる。以上のようにして得られる光学活性α−トリ
フルオロメチル乳酸は、再結晶により更に精製し、その
光学純度を向上させることができる。以下に、再結晶に
よる精製ついて詳細に説明する。

【００２２】本発明において、再結晶に供する光学活性
α−トリフルオロメチル乳酸は、Ｒ体及びＳ体のいずれ
の光学活性体でもよい。その光学純度は０％e.e.でなけ
れば、即ち、Ｒ体及びＳ体のいずれか一方が他方よりも
多く含まれていれば、特に制限はないが、10％e.e.以上
のものが好ましい。なお、本明細書においては、光学純
度はエナンチオマー過剰率（％e.e.）で表す。本発明に
従って不斉加水分解することにより得られる光学活性α
−トリフルオロメチル乳酸は、そのままの形で再結晶に
供することができる。一方、光学活性α−トリフルオロ
メチル乳酸と同時に製造されるその対掌体エステルは、
再結晶に供する前に、エステル結合を通常の方法により
加水分解する必要がある。

【００２３】光学活性α−トリフルオロメチル乳酸の再
結晶に使用する溶媒は、光学活性α−トリフルオロメチ
ル乳酸と反応しないものであれば、特に制限はなく、用
いる原料の光学純度、目的とする光学純度等に応じて、
目的物の回収率を勘案して適宜決定することができる。
上記溶媒としては、例えば、ペンタン、ヘキサン、ヘプ
タン、オクタン等の脂肪族炭化水素系溶媒；ベンゼン、
トルエン、キシレン等の芳香族炭化水素系溶媒；塩化メ
チレン、クロロホルム、四塩化炭素、ジクロロエタン等
のハロゲン化炭化水素系溶媒；ジエチルエーテル、イソ
プロピルエーテル、テトラヒドロフラン、ジオキサン等
のエーテル系溶媒；酢酸エチル、酢酸プロピル、酢酸ブ
チル等のエステル系溶媒；アセトン、メチルエチルケト
ン、メチルイソブチルケトン等のケトン系溶媒；並びに
アセトニトリル、N,N-ジメチルホルムアミド等が挙げら
れ、その中でも、汎用性及び経済性の面で、トルエン、
n-ヘキサン、酢酸エチル、塩化メチレン、クロロホル
ム、イソプロピルエーテル、アセトン及びアセトニトリ
ルが好ましく、これらのうち、トルエンは、凝固点〜沸
点（１気圧下、−95℃〜110.6 ℃）の範囲が取り扱い易
い範囲内にあり、かつその範囲が広いため、特に好まし
い。これらの再結晶溶媒は、単独で又は組み合わせて用
いることができる。

【００２４】また、メタノール、エタノール、プロパノ
ール及びブタノールに代表されるアルコール系溶媒は、
光学活性α−トリフルオロメチル乳酸とエステル化反応
を起こさない程度の量であれば、他の溶媒と組み合わせ
て混合溶媒として使用することも場合によっては有効で
ある。再結晶操作は一般的な方法に従って実施すること
ができ、特に制限はない。即ち、上記再結晶溶媒に原料
となる光学活性α−トリフルオロメチル乳酸を加温下で
溶解させ、その後に冷却させることにより析出させるこ
とができる。また、光学活性α−トリフルオロメチル乳
酸の貧溶媒を加えることにより、結晶を析出させてもよ
い。更に、結晶の析出を円滑かつ効率的に行うために、
結晶種を播種することもできる。結晶種としては、特に
制限はないが、目的に応じて、光学純度の高い結晶、ラ
セミ体結晶等を用いることが好ましい。

【００２５】再結晶操作の温度条件は、使用する溶媒の
沸点及び凝固点により適宜決定することができ、一般に
は、室温（25℃）から溶媒の沸点温度で原料を溶解さ
せ、−80℃〜50℃で結晶を析出させることができる。溶
媒としてトルエン（１気圧下、凝固点：−95℃、沸点：
110.6 ℃）を使用する場合には、90℃〜110 ℃で原料を
溶解させ、−20℃〜50℃で結晶を析出させることが好ま
しい。また、再結晶溶媒及び原料となる光学活性α−ト
リフルオロメチル乳酸の量関係は、完全に溶解する範囲
内であれば、特に制限はないが、用いる原料の光学純
度、目的とする光学純度等に応じて、目的物の回収率を
勘案して適宜決定することができる。

【００２６】次に、精製された光学活性α−トリフルオ
ロメチル乳酸の回収は、濾過、遠心分離等、常法に従い
行うことができる。これら光学活性α−トリフルオロメ
チル乳酸の光学純度は、常法によりエステル化し、光学
分割用ＧＣキャピラリーカラムを用いるガスクロマトグ
ラフィーにより容易に測定することができる。光学純度
（エナンチオマー過剰率；％e.e.）は、一般的に、ＧＣ
による(S)-α−トリフルオロメチル乳酸及び(R)-α−ト
リフルオロメチル乳酸の各ピーク面積から、以下の式に
よって算出することができる。

【００２７】

【数１】Ｒ＞Ｓの場合：Ｒ体の光学純度（％e.e.）＝（Ｒ−Ｓ／Ｒ＋Ｓ）×１０
０Ｓ＞Ｒの場合：Ｓ体の光学純度（％e.e.）＝（Ｓ−Ｒ／Ｒ＋Ｓ）×１０
０Ｓ：(S)-α−トリフルオロメチル乳酸のピーク面積Ｒ：(R)-α−トリフルオロメチル乳酸のピーク面積以上のようにして得られる光学活性α−トリフルオロメ
チル乳酸は、上記の再結晶による精製を更に１回又は複
数回同様に繰り返すことにより、更に光学純度の高い光
学活性体とすることができる。

【００２８】

〔参考例１〕

ラセミ体α−トリフルオロメチル乳酸n-ブチルエステル
の合成 n-ブタノール65mlにラセミ体α−トリフルオロメチル乳
酸60ｇ及び濃硫酸１mlを加え、還流しながら15時間反応
を行った。次いで、蒸留にて過剰のブタノールを除去し
た。残液を氷水に入れた後、それぞれ60mlのジエチルエ
ーテルにて３回抽出を行った。３回の抽出操作で得られ
たジエチルエーテル層を一つにまとめて減圧にて蒸留し
て精製し、ラセミ体α−トリフルオロメチル乳酸n-ブチ
ルエステル64ｇを得た。

【００２９】〔実施例１〕pHコントローラーのついた反
応器に、 0.1Ｍリン酸緩衝液 300ml、ラセミ体α−トリ
フルオロメチル乳酸n-ブチルエステル15ｇ及びデナチー
ムＡＰ（ナガセ生化学工業社製）３ｇを加えて、２Ｎの
水酸化ナトリウム水溶液で反応液のpHを7.0 に調整しな
がら30℃で一昼夜反応させた。

【００３０】反応終了後、それぞれ 100mlのジイソプロ
ピルエーテルを用いて３回抽出を行った。３回の抽出操
作で得られたジイソプロピルエーテル層を一つにまとめ
て無水硫酸マグネシウムを加えて脱水した後、蒸留にて
ジイソプロピルエーテルを除いた。このようにして得ら
れたα−トリフルオロメチル乳酸n-ブチルエステル（4.
8 ｇ）について、光学分割カラム（クロムパック社製Ch
irasil-DEX CB カラム）をつけたキャピラリーガスクロ
マトグラフィーにて分析したところ、光学活性体（Ｓ
体）であり、光学純度は96.5％e.e.であった。

【００３１】上記で得られた光学活性エステルに５％水
酸化ナトリウム水溶液50mlを加えて、室温にて２時間加
水分解反応を行った。次いで、硫酸を加えてpHを1.5 に
調整し、それぞれ50mlの酢酸エチルにて３回抽出を行っ
た。３回の抽出操作で得られた酢酸エチル層を一つにま
とめて硫酸マグネシウムで脱水した後、溶媒を除去し
た。このようにして得られたα−トリフルオロメチル乳
酸(2.3ｇ) についてジアゾメタンでエステル化後、光学
分割カラム（クロムパック社製Chirasil-DEX CBカラ
ム）をつけたキャピラリーガスクロマトグラフィーにて
分析したところ、光学活性体（Ｓ体）であり、光学純度
は96.5％e.e.であった。

【００３２】また、(S)-α−トリフルオロメチル乳酸n-
ブチルエステル抽出残液（水層）を100ml に濃縮した。
これに濃硫酸を加えてpH1.0 に調整した後、それぞれ50
mlの酢酸エチルを加えて３回抽出を行った。３回の抽出
操作で得られた酢酸エチル層を一つにまとめて無水硫酸
マグネシウムを加えて脱水した後、溶媒を除去した。こ
のようにして得られたα−トリフルオロメチル乳酸(3.3
ｇ) についてジアゾメタンでエステル化後、光学分割カ
ラム（クロムパック社製Chirasil-DEX CB カラム）をつ
けたキャピラリーガスクロマトグラフィーにて分析した
ところ、光学活性体（Ｒ体）であり、光学純度は58.9％
e.e.であった。

【００３３】〔実施例２〜４５〕各実施例において、ラ
セミ体α−トリフルオロメチル乳酸n-ブチルエステルを
１重量％懸濁した 0.1Ｍリン酸緩衝液 (pH＝7.0)0.5ml
に、表１に示した酵素をそれぞれ10mg添加して、30℃に
て24時間振盪した後、 0.5mlのジイソプロピルエーテル
を加えて攪拌した。ジイソプロピルエーテル層に含まれ
る光学活性α−トリフルオロメチル乳酸n-ブチルエステ
ルを実施例１と同様にして光学分割カラム（クロムパッ
ク社製Chirasil-DEX CB カラム）を付けたガスクロマト
グラフィーにて分析し立体配置及び光学純度を測定した
結果を表１に示す。

【００３４】

【表１】

【００３５】〔実施例４６〕ペプトン(Difco社製)10g、
酵母エキス(Difco社製) 5g、食塩 5g 、蒸留水１Ｌから
なる組成の液体培地を調製し、この液体培地を300ml エ
ルレンマイヤーフラスコに50mlづつ分注し、120 ℃で15
分間蒸気滅菌した。このフラスコ５本にシュードモナス
sp. MR-2301(FERM BP-4870)を１白金耳植菌し、30℃で
１日間振盪培養した。次に各フラスコ内の培養液から遠
心分離により菌体を集めて水洗した後、50mMリン酸緩衝
液（pH＝7.0) 10ml に懸濁した。この菌体懸濁液 0.5ml
にラセミ体α−トリフルオロメチル乳酸ｎ−ブチルエス
テルを２重量％懸濁した 0.1Ｍリン酸緩衝液（pH＝7.0)
4.5mlを添加して、30℃にて24時間振盪しながら反応し
た。

【００３６】反応液に、５mlのジイソプロピルエーテル
を加えて攪拌した。ジイソプロピルエーテル層に含まれ
る光学活性α−トリフルオロメチル乳酸ｎ−ブチルエス
テルを実施例１と同様にして光学分割カラム（クロムパ
ック社製Chirasil-DEX CB カラム）を付けたガスクロマ
トグラフィーにて分析し、立体配置及び光学純度を測定
した結果、Ｒ体であり光学純度は３０％e.e.であった。

【００３７】〔実施例４７〜６１〕実施例２と同様にし
て、ラセミ体α−トリフルオロメチル乳酸メチルエステ
ルを１重量％懸濁した 0.1Ｍリン酸緩衝液 (pH＝7.0)
0.5mlに、表２に示した酵素をそれぞれ10mg添加して、3
0℃にて24時間振盪した後、 0.5mlのジイソプロピルエ
ーテルを加えて攪拌した。ジイソプロピルエーテル層に
含まれる光学活性α−トリフルオロメチル乳酸メチルエ
ステルを実施例１と同様にして光学分割カラム（クロム
パック社製Chirasil-DEX CB カラム）を付けたガスクロ
マトグラフィーにて分析し立体配置及び光学純度を測定
した結果を表２に示す。

【００３８】

【表２】

【００３９】〔実施例６２〕実施例１で得られた96.5％
e.e.の(S)-α−トリフルオロメチル乳酸1.0gにトルエン
10mlを加え、100 ℃にて溶解させ、室温で一晩静置し
た。析出した結晶を回収したところ、99％e.e.以上の
(S)-α−トリフルオロメチル乳酸0.8gが得られた。な
お、光学純度の測定は、次のようにして行った。得られ
た結晶に、ジアゾメタンのエーテル溶液を加え、メチル
エステル化し、この溶液を以下の条件のガスクロマトグ
ラフィー（ＧＣ）によって分析し、(S)-α−トリフルオ
ロメチル乳酸及び(R)-α−トリフルオロメチル乳酸のピ
ーク面積から上記式により光学純度（エナンチオマー過
剰率）を算出した。カラム：CP-Chirasil DEX CB 0.25mm × 25 ｍ（クロム
パック社製）カラム温度：70℃ 検出器：ＦＩＤ

【００４０】〔実施例６３〕実施例１で得られた58.9％
e.e.の(R)-α−トリフルオロメチル乳酸1.0gにトルエン
50mlを加え、100 ℃にて溶解させ、30℃で３時間静置し
た。析出した結晶を回収したところ、79％e.e.の(R)-α
−トリフルオロメチル乳酸0.28g を得た。なお、光学純
度の測定は、実施例６２に記載の方法によって行った。

【００４１】〔実施例６４〕実施例１で得られた58.9％
e.e.の(R)-α−トリフルオロメチル乳酸1.0gにn-ヘキサ
ン500ml を加え、沸点近傍に加温して溶解させ、室温に
て一晩静置した。析出した結晶を回収したところ、70％
e.e.の(R)-α−トリフルオロメチル乳酸0.4gが得られ
た。なお、光学純度の測定は、実施例６２に記載の方法
によって行った。

【００４２】〔実施例６５〕反応時間を半分にした以外
は実施例１と同様にして得られた64％e.e.の(S)-α−ト
リフルオロメチル乳酸2.0gを表３に示す溶媒に加温して
溶解させ、室温にて３時間静置して結晶を析出させた。
使用した溶媒、溶媒量、結晶回収量及び得られた結晶の
光学純度を表３に示す。なお、光学純度の測定は、実施
例６２に記載の方法によって行った。

【００４３】

【表３】

【００４４】〔実施例６６〕反応時間を半分にした以外
は実施例１と同様にして得られた64％e.e.の(S)-α−ト
リフルオロメチル乳酸2.0gを酢酸エチル又はイソプロピ
ルエーテルに溶解させ、更にn-ヘキサンを加えた後、−
20℃にて５時間静置して結晶を析出させた。使用した溶
媒、溶媒量、結晶回収量及び得られた結晶の光学純度を
表４に示す。なお、光学純度の測定は、実施例６２に記
載の方法によって行った。

【００４５】

【表４】

【００４６】〔実施例６７〕反応時間を半分にした以外
は実施例１と同様にして得られた64％e.e.の(S)-α−ト
リフルオロメチル乳酸2.0gをアセトニトリル又はアセト
ンに溶解させ、更に室温にてトルエンを加えた後、−20
℃にて５時間静置して結晶を析出させた。使用した溶
媒、溶媒量、結晶回収量及び得られた結晶の光学純度を
表５に示す。なお、光学純度の測定は、実施例６２に記
載の方法によって行った。

【００４７】

【表５】

【００４８】

【発明の効果】本発明によれば、医薬、農薬等の原料又
は合成中間体として有用な光学活性α−トリフルオロメ
チル乳酸及びそのエステル類を光学分割剤を使用せず製
造することができる。また、本発明により得られる光学
活性α−トリフルオロメチル乳酸を再結晶すれば、簡便
な手法での精製（光学純度の向上）が可能である。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】一般式（Ｉ）：【化１】（式中、Ｒは置換又は非置換の炭素原子数１〜12の炭化
水素基である。）で表されるラセミ体α−トリフルオロ
メチル乳酸エステルを、エステル不斉加水分解能力を有
する酵素、酵素固定化物、微生物、菌体培養液、又は菌
体処理物の存在下で不斉加水分解することを特徴とす
る、光学活性α−トリフルオロメチル乳酸及びその対掌
体エステルの製造方法。
【請求項２】請求項１記載の方法で得られる光学活性
α−トリフルオロメチル乳酸、又は請求項１記載の方法
で得られる対掌体エステルを加水分解して得られる対掌
体光学活性α−トリフルオロメチル乳酸を再結晶し、結
晶を回収することを特徴とする光学活性α−トリフルオ
ロメチル乳酸の精製方法。