JPS5810520A - 胆石症の治療薬 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、細菌を主剤とする胆石治療薬に関。

する。

胆石はコレステロール系胆石とビリルビン系胆石とに大
別されるが、近年わが国においても欧米諸国と同様のレ
ベルまでコレステロール系胆石が増加しており、全胆石
症中の７０〜ｓｏｎを占めるに到った。

したがって、このコレステロール系胆石全手術によらず
溶解しようとする試みが多く報告されている。巖近、ケ
ノデオキシコール酸等の胆汁酸を経口投与することＫよ
るコレステロール系胆石溶解療法が開発されているが、
下痢と肝機能異常その他に悪心、腹部不快感、掻痒感等
の副作用が報告されている。

本発明者は、上述のような副作用がない胆石症治療薬に
ついて、鋭意研究した結果、特定の細菌が胆石の発生防
止と、治療に著効を奏することを見い出し、それにもと
づいて、本発明をなすに至った。

一般に、マウスの胆石形成にはコレステロールとコール
酸ノーダーの同時投与が必要である。

そこで、腸内常在菌が全く欠除している無菌マウスと自
然マウスとを用いて実験胆石症を作成した。その結果無
菌マウス群で胆石形成食経口摂増４週後にすでに金側に
胆石の形成が見られるのに対し、自然マウス群では４週
、８週後で６０％、冴週後にいたって金側に嗟石の形成
が見られた。

これらの知見から、腸内常在菌が胆石形成に関与してい
るものと推定された。

すなわち、本発明は、動物又は人の糞便より分離した腸
内常在菌及び腸内発育可能菌を主剤とする胆石症治療薬
を提供するもので、本発明によれば、副作用を全く生ず
ることなしに胆石の発生と治療を効果的に行なうことが
できる。

本発明で用いる、上記腸内常在菌と腸内発育可能陶は、
例えば、人の糞便より分離したクロストリデュム・ブチ
リクム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｂｕｔｙ−ｒｉｃｕ
ｍ　）　、　クロストリテュム・スフエノイデス（ＣＪ
ｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　５ｐｈｅｎｏｉｄｅｓ　）、ＩＣ
Ｒ系自然マウス糞便より分離したバクテロイデス・フラ
ギリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｆｒａｇｉｌｉｓ　
）　、バクテロイデス−７ｋチアシダス（Ｂａｃｔｅｒ
ｏｉｄｅｓ　ｍｕｌｔｉａｃｉｄｕｓ　）　、　　ビフ
ィドバクテリウム・アドレセンティス（Ｂｉｆｉｄｏｂ
ａ−ｃｔｅｒｉｕｍ　ａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ　）　
、ビフイドバクテリウム−ロングム（Ｂｉｆｉｄｏｂａ
ｃｔｅｒｉｕｍ　ｌｏｎｇｕｍ　）　　、　　ラクトバ
チルス・プレビス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｂｒ
ｅｖｉｓ　）、　　ラクトバチＡ／スープランタラム（
Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｐｌａｎ−１ａｒｕｍ　
）　、　インリシア・コリイ（ｇｓｈｅｒｉｃｈｉ　ｃ
ｏｌｉ　）。

ストレプトコッカス・フェカリス（Ｊｉｔｒｅｐｔｏｃ
ｏｃｃｕｓｆａｅｃａｌｉｓ　）である。

これらの菌は、いずれも公知のものであって（バアシイ
ズ　マニエル　オブ　デタアミネティブ　バクテリオロ
ジ（Ｂｅｒｇｅｙ＆　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆＤｅｔｅｒｍ
ｉｎａｔｉｖｅ　Ｂａｃｔｅｒｊｌｏｌｏｇｙ　）参照
）、次の方法によって糞便から分離し、培養した。

糞便（試料）ＩＦに９　ｗｒｌの生理食塩液を加えよく
懸濁する。このように懸濁した液を１０−潰釈液として
、順次１０倍段階稀釈を行なう。試料を過当に稀釈し、
その０．０５　ｍを下記の選択平板に塗布し、それぞれ
の培養法により培養し菌を分離した。さらにその菌を分
離培地で増殖させて供試菌を得た。′ ※Ｉ　　ＮＮ培地組成 ペプトン　　　　　４０　ｆ ＮａｚＨＰＯ４ｓ　ｔ ＫＨ，ｆつ４　　　　１Ｆ ＮａＣ６２ｆ Ｍｇ８０４　　　　　０．１９ ブドウ糖　　　　　　２ｆ 精製水　　Ｌ　０００１１１１４ ※２　　ＢＳ培地組成 ラブレンコパウダー　　　　　　　　２．４１トリプチ
ケース　　　　　　　　　　　　５ｔプロテオーズペプ
トン　　　　　　　１０Ｆフイトン　　　　　　　　　
　　　　　　３ｆイーストエキストラクト　　　　　　
　５を肝−抽出液　　　　　　　　　　　　１５０ｍブ
ドウ糖　　　　　　　　　　　　　　　１０ｆ町溶性デ
ンプン　　　　　　　　　　０．５ｆ溶液Ａ　　　　　
　　　　　ＩＱｉｄ 溶液Ｂ　　　　　　　　　　５１１１１ｇアンチフオー
ムＢ　　　　　　　　　　　ＩＱａ７トウイーン８ｏ１
？ Ｌ−シｘｆイｙ−ＨＣＪ−Ｈ，Ｏ（５％溶液）１〇− ウマ血液　　　　　　　　　　　　　　　５９ｍ（ｐＨ
７，２） ＢＳ培地用添加液　　　　　　　　　５０−精製水　　
　　　　　　　７６５ｄ 溶液Ａ　：　ＩＧ（２ＰＯ４２５ｔとに、Ｈ）す４２５
ｆとを精製水（８）ｄに溶解 溶液Ｂ　：　Ｍｇ５Ｏａ−ｒＨｌｏｔｏ　ｔ、　ｐｅｓ
ｏａ−７）１ρｏ、ｓ　ｔ　。

ＮａＣ１Ｏ，５ｆ、　Ｍｎ３Ｏ４０，３３７Ｆ　　を精
製水２５０−に溶解 ＢＳ培地用添加液 約９０−の精製水にプロピオン酸ナトリウム３０ｔを溶
解し、次いで硫酸バロモマイシン４００■、塩化リチウ
ム６ｆを溶解、ｌｏｏｗｌのメスコルベ／に移して精製
水で総量を１００１１７とする。

その他は市販培地 得られた菌を主剤として、慣用の方法によって治療薬を
製造した。

本発明による実験成績の一例を次に示す。

Ａ、胆石溶解実験 自然マウスを胆石形成食（１％コレステロールと０．５
チコール酸ノーグーを市販の粉末普通飼料に添加した）
でる日間飼育し、胆石形成後各実験群にそれぞれの供試
飼料を与えて１８日日月３２日目に胆石の溶解状態を判
定した。

１、　供試動物 ＩＣＲ系自然マウス ２、供試菌株 上記菌株を用いた。

３、供試菌の性状は次のとおりである。

Ｉ属（Ｇｅｎｕｓ　） （１）　　クロストリデュム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ
　）嫌気性菌で胞子形成能を有する。ダラ ム染色陽性又は陰性、細菌の形態は直桿＠　（Ｓｔｒａ
ｉｇｈｔ　ｒｏｄｓ　）。

（２）　　バクティロイディス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅ
ｓ　）嫌気性菌で胞子形成能を有しない。ダ ラム染色陰性、細菌の形態は直桿菌 （Ｓｔｒｉｇｈｔ　ｒｏｄｓ　）　、鞭毛を有しない。

発育過程においてコハク酸、酢酸、乳酸、プロピオン酸
、蟻酸を産生ずる。

（３）　　ビフィドバクテリウム（Ｂｊｆｉｄｏｂａｃ
ｔｅｒｉｕｍ　）嫌気性菌で胞子形成能を有しない。ダ ラム染色陽性、細菌の形態は多形性桿菌（ｄｉｐｈｔｈ
ｅｒｏｉｄｓ　）　、鞭毛を有しない。発育過程におい
て酢酸、乳酸を産生する。

（４）　　　ラクトバチルス（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌ
ｕｓ　）適性嫌気薗で胞子形成能を有しない。

ダラム染色陽性。細菌の形態は直桿菌 （Ｓｔｒａｉｇｈｔ　ｒｏｄｓ　）又は多形性桿菌（Ｄ
ｉｐｈｔｂｅ−ｒｏｉｄｓ　）。鞭毛を有しない。発育
過程において乳酸を産生ずる。

（５）　　イシリシア（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　）好
気性菌で運動性があシ胞子形成能を 有しない。ダラム染色陰性、細菌の形態は直桿菌（Ｓｔ
ｒａｉｇｈｔ　ｒｏｄｓ　）　、鞭毛を有し、発育過程
においてインドールを産生じ、乳糖を分解してガスを発
生する。

（６）ストレプトコッカス（５ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕ
ｓ　）通性嫌気性菌で胞子形成能を有しない。

ダラム染色は陽性。＃ｌ菌の形態球菌 （Ｃｏｃｃｊ　）っ発育過程に乳酸を産生する。

ｌ　橿（５ｐｅｃｉｅｓ　） 菌種としては、例えばバクテロイブイス・フラギリス（
Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｆｒａｇｉｌｉｓ　）　、　
　共クチロイディス・マルテアシダス（Ｂａｃｔｅｒｏ
−ｉｄｅｓ　ｍｕｌｔｉａｃｉｄｕｓ　）　、イシリシ
７−コリイ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　Ｃｏ１１　）　
、　　ビフィドバクテリウム瘤アドレセンティス（Ｂ山
ｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍａｄｏｌｅｓｃｅｎｔｉｓ　）
　、　　ビフイドバクテリウＡ−ロングム（Ｂｉｆｉｄ
ｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｌｏｎｇｕｍ　）　、クロスト
リデュム・ブチルラム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｂｕｔ
ｙｒｉｃｕｍ　）、　　りＯストリテュム・スフェノイ
デス（Ｃｊｏｓｔｒｉｄｊｕｍ　５ｐｂｅｎｏｊｄｅｓ
　）　、　　ラクトバチルス・ブレビイス（Ｌａｃｔｏ
ｂａｃ市ｕｓｔ）ｒｅｖｉｓ　）　ｒラクトバチルス・
プランタラム（Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　ｐｌａｎ
ｔａｒｕｍ　）　、ストレプトコッカス・フェカリス（
５ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ　）を
用いることができ、その他上記属に入る菌種はすべて用
いることができる。

８０種（８ｐｅｉｅｓ　）の同定は次の方法によった。

（１）胆汁培地での発育 ＰＹＦＧ培地にＯｘｇａｌｌ　（Ｄｉｆｃｏ　）を２ｓ
加えた培地に被検面を接種し、同時にＰＹＦＧ培地Ｋｌ
！を接種したものを対照として発育を比較し、発育の促
進、不変、抑 制、阻止を観察する。

（２）　　硫化水素産生 Ｈ２８培地に菌を穿刺培養後、黒変し たものを陽性とする。

（３）運動性 硫化水素産生試験に用いたものと同 じ試験管について運動性の有無を観察 する。

（４）硝酸塩還元 Ｉｎｄｏｌｅ−Ｎｉｔｒａｔｅ培地（ＢＢＬ　）　Ｋ菌
を接種し、２〜３日間培養後、亜硝酸試薬Ａｌｄ と亜硝酸試薬ＢＱ、５ｍを加え、赤色となったものを陽
性とする。２〜５分間 のうちに発色しないものについては亜 鉛末を少量添加し、赤色となったもの は陰性とし、発色しなかったものは陽 性（完全還元）とする。

（５）　　インドール産生 （２）、　（３）項に用いたＨ２Ｓ培地に穿刺培養した
もの２ｄに対しＩＩｌ／のキシレンを加えてよく振盪し
、２分間放置後 Ｅｈｒｌｉｃｈ試薬を０．５　ｍｇ添加し、１５分間以
内にキシレンの層が赤色〜桃色となっ たものを陽性とし、無色〜黄色となっ たものを陰性とする。

（６）　　Ｇｅ１ａｔｉｎ液化 Ｑｅｌａｔｉｎ培地に菌を接種し、１４日間培養後、冷
蔵庫中に静置し、囲まったも のを陽性、再び室温に出した後、（９）分以内に液状と
なったものを弱陽性とす る。

（７）脂肪酸の産生 ＰＹＦＧ　培地に菌を接種し、十分増殖するまで培養（
通常２〜７日）、同じ 培地の非接種培地を対照としてガスク 。マドグラフィーにより、ギ酸、醋酸。

プロピオン酸、酪酸、イソ酪酸、吉草 酸、イソ吉草酸、カプロン酸などの揮 発性脂肪酸と乳酸、コノ・り酸などの不揮発性脂肪酸を
測定する。

（８）炭水化物の発酵 発酵試験培地に菌を接種し、７日間 培養後、培地のｐｔ−ｔを測定し、糖を加えていない培
地に菌を接種したものの Ｐ）ｌを対照として判定する。ｐ）１６．０以上は陰性
（−）、　Ｉ）Ｈ５，５〜５．９を弱陽性、ｐＨ５，４
以下を陽性とする。なお、多検体（１８検体）のｐＨを
自動測定記録する機器を用いると便利である。

ＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓとＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅ
ｒｉｕ＋ｎについては、ＬＢ発酵試験培地を用い、ｐＨ
メーターによらず、培養後培地が黄変した ものを陽性、やや黄変したものを弱陽 性、わずかに黄味を帯びたものと赤紫 色のものは陰性と判定してもよい。

（９）　　デンプンの加水分解 （７）項のデンプン培地に菌を接種・培養後、ｐ）ｌ測
定の終ったものに、ルゴール液の１滴を加え、無色（淡
黄色）の ものを陽性、青紫色となったものを陰 、性とする。はじめ着色し数秒後に無色となるものも陰
性とする。

ＯＩ　　ニスクリ／の加水分解 （８）項の発酵試験培地のエスクリン培地に菌を接種・
培養後、ｐＨを測定したものについて１％クエン酸鉄ア
ンモニ ウム水溶液を２〜３滴加え、黒色にな ったものを陽性とする。

（１１）　　レシチナーゼ反応 卵黄寒天平板に菌を接種し、２〜３ 日間培養後、集落の周囲に淡黄乳白色 の不透明帯を生じたものを陽性とする。

（１２カタラーゼ産生 ０υ項と同一の平板培養菌について、 培養完了後、約（資）分間空気に暴露した後の集落上に
３１Ｈ２０□水溶液を滴下し、発泡するものを陽性とす
る。

峙　ブドウ糖からのガス産生 通性嫌気性ＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓおよびＢｉｆｉ
ｄｏ−ｂａｃｔｅｒｉｕｍの場合は、ダルハム管のはい
った小試験管にＢｒ１ｇｇ５１ｉｖｅｒ　ｂｒｏｔｈを
分注し、１００　Ｃでガス抜きし滅菌した後、菌を接種
し、流動パラフィンを重層し、７日間培養する。ダルハ
ム管の中にガ スがたまったものを陽性と判定する。

嫌気性球菌の場合はＢａｃｔｏ−Ａｇａｒ　（Ｄｉｆｃ
ｏ）を１．５チ加えたＰηＭ培地を溶かし、■Ｃに冷し
、菌を接種・培養し、ガス産 生によって寒天にき裂の入ったものを 陽性とする。

（１４）１５Ｕ発育 Ｂｒ１ｇｇ５１ｉｖｅｒ　ｂｒｏｔｈにＱ、１５％の寒
天を加えた培地に菌を接種し、１．５　Ｃ１７日間培養
後発育の有無を判定する。ｌａｃｔｏｂａ−ｃｉｌｌｕ
ｓ　　の分類に用いる。

０９　　乳酸の旋光性 ＯＲ培地に菌を接種し、十分増殖す るまで培養（通常２〜３日）、その１ −を１００１１Ｉ／のメスフラスコにとり、０．５Ｎ　
ＮａＯＨα５−を加えよく振ってから約６−の精製水を
加え、１０　％　Ｚｎ８０．−７Ｈ２０溶液の０．５−
をゆっくりと加えてよく振って混合する。精製水で総量
を正確 に１０−とし、遠心管に移しかえて約１５分間放置した
後遠沈（３０００ｒｐｍ　１０分）し、この上清を１液
とする。

Ｉ液１−を共栓試験管にとり、精製 水１０−を加えて混合、同時に調製したばかりの１　％
　ＦｅＣｌ３・６Ｈρ（ＦｅＣ１３−６Ｈ２０１ｆ。

精製水９５ｍ、ｌＮＨＣｌ５−を混合溶解したもの）を
加えて混合、同様に処理し た水を対照としてＯ，Ｄ、　４００　ｍμで測定し、あ
らかじめ作成しておいた標準曲線に より乳酸の総量を求める。

ＮＡＤ　（Ｓｉｇｍａ　Ｇｒａｄｅ　ＩＩ　）　１２５
１ｇにＧｌｙｃｉｎｅｂｕｆｆｅｒ　（Ｓｉｇｍａ−ｆ
ｆｌ、８２６−３　、　ｐＨ９，２）　７５　ｍｌを加
えた後、Ｌ　（＋）　−ＬＤＨ（Ｓｉｇｍａ　Ｔｙｐｅ
　ｌ　）　０．２−および精製水４．８−を加え混合す
る。これを３１Ｌｔずつ２本の共栓試験管に分け、上記
１液４μｅずつをそれぞれの試験管に加えて混合、３７
℃、６０分間保持した後、０．Ｄ、３４０ｍｕで比色定
量し、あらかじめ作成しておいた標準曲線からＬ（＋）
乳酸の値を求める。

Ｄ（−）乳酸の測定は、ＮＡＤ　（ＳｉｇｍａＧｒａｄ
ｅ　ＩＩＩ　）　９０　ｉｆにＧｌｙｃｉｎｅ　ｂｕｆ
ｆｅｒ　５４−を加え、Ｄ　（−）−Ｉａｌ　１　ｍお
よび精製水２，５ｄを加えた後、Ｌ（＋）乳酸の場合と
同様、Ｄ　（−）乳酸の値を求める。

以上の値から、総光酸量に対するし く＋）乳酸のチを求め、θ〜２０％→Ｄ　（−）。

加〜４０％→Ｄ−１−ＤＬ、４０〜６０チ→ＤＬ、（イ
）〜８０％、Ｌ＋ＤＬ、　８０〜１０１−Ｌ（＋）と判
定する。

Ｑｌ　　リパーゼ反応 ００項と同一の平板について、集落の 表面およびその周囲のせまい範囲に真 珠様の層のみられるものを陽性とする。

あるいはＴｒｙｂｕｔｙｒｉｎ寒天平板で白濁を生ずる
ものを陽性としてもよい。

Ｕη　グルコン酸分解 Ｋ）Ｌ、８０４２　ｆ　、　Ｍｇ５Ｏｉ５Ｈｚ００．１
　ｆ　、　ＮａＣｌ３　ｔ　、　（ＮＨ４）２８０４０
．５　ｆ　、グルクロン酸カリウム１０　ｔ　、精製水
１Ｂを加えた培地（ｐＨ７，５）　Ｋ　ＩＩを接種し、
３７℃３日間嫌気性培養する。判定は中試験管に培養 液１−を採り、１慢モリブデン酸アン モニウム３１１７．氷酢酸０．２−を加え湯浴中で５分
間煮沸し、冷却後、液が濃 い青色ならば陽性、薄い青色または無 色ならば陰性と判定する。

α樽　溶血反応 血液寒天平板上に菌を塗抹して培養 した場合、溶血帯を生ずるならば陽性、溶血帯を生じな
いならば陰性と判定す る。

（１１オキシダーゼ産生 １チのトリメチル−Ｐ−フェニレン ディアミｙ　（Ｔｒｉｍｅｔｈｙｊ−Ｐ−Ｐｈｅｎｙｌ
ｅｎｅｄｉａｍｉｎｅ　）溶液を平板培地の集落の上に
かけて、 紫色になるものを陽性と判定する。

働　β−ガラクトシダーゼ産生 ＯＮＰ　Ｇ　（０−Ｎｉ　ｔｒｏｐｈｅｎｙｌ　−１１
−Ｄ−Ｇａｌａｃｔｏｐｙｒａｎｏ−ｓ＋ｄｅ　ｌ　　
を含むペプトン水中で菌を１夜培養する。無色の基質が
黄色のＯ−ニトロフェノールに加水分解され名ものを 陽性とする。

（２υ　印℃（資）分間耐熱性 ブリックス・リバー・ブロス（Ｂｒｉｇｇｓｌｉｖｅｒ
　ｂｒｏｔｈ　）に菌を接種後、試験管にゴム栓をして
、全体を恒温槽にうずめ、 ω℃（資）分間加熱後の菌の発育したものを陽性とする
。

（至）　４チＮａＣ１中の発育 ヴイ：ｌ　：ｙ　（Ｂｏｕｉｌｌｏｎ　）培地に、Ｎａ
Ｃ１を４チ加え、菌を接穐後、発育したもの を陽性とする。

＠　　ｐＨ９，６中の発育 ヴイヨ：／　（Ｂｏｕｉ１皿ｏｎ）培地を、１０＊Ｎａ
ＯＨでｐＨ９，６に調整し、菌を接種孝、発育した本の
を陽性とする。

ｂ、　種（３ｐｅｃｉｅｓ　）の性状は次のとおりであ
る。

（１）　　バクテロイデス（１３ａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ
　）＝３１−ヤｔ （２）　　ビフイドバクテリウＡ　（Ｂｉｆｉｄｏｂａ
ｃｔｅｒｉｕｍ　）Ｇ−陽性また社陰性によって菌ｌｌ
Ｋ分類される。

（３）　　クロストリデュム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ
　）−椰の１！休似褥荀旺　　　　　　　　　　　　　
　−鄭の閂休框幹陽江（４）　　　ラクトバチルス（Ｌ
ａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ　）ＤＬ＝ＤＬ乳酸 （５）　　イシリシア・コリイ（ｇｓｃｈｅｒｉｃｈｉ
　　ｃｏｌｉ　）（６）ストレプトコッカス・フェカリ
ス（５ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ４、　供試飼料 １１１５０−の成人のケノデオキシコール酸の投与量を
４　ｆ　／　ｄａｙとし、マウスの体重を２５Ｆとして
、普通食に０．０４％添加し丸。

５、胆石溶解の判定 下記の４段階により判定した。

ｍ：胆石は全く見られず、その他の変化も見られない。

＋：胆石は見られるが軽度でおる。

２＋：胆のうの１／３〜１／２に胆石がつまっている。

３＋　：　ｌｌ！（のうの１／２以上に胆石がつまって
いる。

この判定には少なくとも３Å以上の個人の判定を平均化
して示した。

上記の判定の平均値をＩｎｄｅｘ　（＋数の総和を７ウ
スの画数で割った）として求めた。

その結果を表−１に示す。

表　　−１ （一般症状の観察） 実験期間中、供試菌投与による軟便、下痢等の副作用は
認められなかった。

Ｂ、胆石形成予防実験 ＩＣＲ系無菌マウスに同系マウス糞便由来のイシリシイ
・コリイ（ｇｓｃｈｅｒｉｃｈｉ　ｃｏｌｉ　）　、ス
トレプトコッカス・フェカリス（Ｓ　ｔｒｅｐｔｏｃｏ
ｃｃｕｓｆａｅｃａｌｉｓ　）　、人の糞便由来のクロ
ストリデュム°ブテリクＡ　（（’ｌｏｓｔｒｉｄｉｕ
ｍ　ｂｕｔｙｒｉｃｕｍ　）をｒｃｊ　〜１０″オール
省の懸濁液０．１−を単独及び同時混合投与し、定着さ
せたのち、１チコレステロールと０．５　％コーＶ酸ノ
ーダーを市販の普通飼料に添加した胆石形成食を高圧蒸
気滅菌後自由に経口摂取させた。

胆石形成予防実験、４週後胆石形成率（胆石形成マウス
数割る全マウス数掛ける１００）をみた。その結果を表
−２に示す。

表−２ ■ 嘔 （一般症状の観察） 実験期間中、供試菌投与による軟便、下痢等は認められ
なかった。

上記の如く本発明により腸内常在菌及び腸内発育可能菌
を投与することにより副作用を防止し、て胆石を溶解す
ることが可能である。

手続補正書（白地 昭和５７年　３月　１５日 特許庁長官　　島　１）春　樹　　殿 １、事件の表示 昭和　５６年　特許願　第　１０８０１５　　号２、発
明の名称 胆石症の治療薬 ３、補正をする者 事件との関係　　特許出願人 住所 ４、代　理　人〒１０７ 氏　名　（６００６）弁理士　奥　　山　　尚　　男は
か　２　名 ５、補正の対象　　　明細書の「発明の詳細な説明」の
欄。

６、補正の内容　　別紙のとおり 補正の内容 （４）　　第３頁第１４行に１アドレセンテイス」とあ
るを「アドレンセンチイス」と訂正する。

＋２１　　第４頁第３行の「マニエルＪｔｒマニュアル
」と訂正する。

（３）第５頁第５行および第６頁第８行に「Ｎａｃ４Ｊ
とあるをＪＮａＣｌｊと訂正する。

（４）第５頁丁から第２行のｒ　Ｈ（Ｊ　ｊとあるを「
ＨＣＩＪと訂正する・ （５）第７頁第１４行の「菌（８ｔｒａｉｇｈｔ　ｒｏ
ｄｓ　）　ｏ　ｊを「（８ｔｒａｉｇｈｔ　ｒｏｄｓ　
）　ｓ又はや＼わん曲した桿菌（８１ｉｇｈｔｌｙ　ｒ
ｏｄｓ　）　、　Ｊと訂正する。

（６）第８頁第１２行に「イシリシア（Ｅｓｃｈｅｒｉ
ｃｈｉａ　）とあるを「イシリシイ（Ｅｓｃｈｅｒｉｃ
ｈｉ　）　Ｊと訂正する。

（７）第９頁第６行〜第７行に１イシリシア・コリイ（
Ｆｉｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　Ｃｏ１１　）　Ｊ　とある
を［インリシイーコリイ（Ｂｓｃｂｅｒｉｃｈｉ　ｃｏ
ｌｉ　）　ｊと訂正する。

（８）第１１頁第１４行Ｋ「囲まつ九」を「固まった」
と訂正する。

（９）　　第２１頁表中の第１行に「アドレンセンチイ
ス」「ロングラン」とあるを「アドレンセンチイスＪ「
ロングラム」と訂正する。

顛　第２２頁第２行〜第１１行を下記のとおりに訂正す
る。

記 ａＯ第５頁第２行〜第５行を下記のとおりに訂正する。

記 ａ３　　第３頁第１４に［β−ガラクシダーゼ産生］と
あるを「β−ガラクトシダーゼ産生」と訂正する。

０３　　第５頁第３行〜第１３行を下記のとおりに訂正
する。

ａ４　　第（９）頁表−２中第３行に「ｃｏｌｌｊとあ
るを１ｃｏｌｉＪと訂正し、第８行に「〃」とあるをｒ
６０−ｊ　と訂正する。

以上

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 動物又は人の糞便より分離した腸内常在菌及び腸内発育
   可能菌を主剤とする胆石症治療薬。