JPS58134Y2 - 等速電気泳動分析装置 - Google Patents
等速電気泳動分析装置Info
- Publication number
- JPS58134Y2 JPS58134Y2 JP12498178U JP12498178U JPS58134Y2 JP S58134 Y2 JPS58134 Y2 JP S58134Y2 JP 12498178 U JP12498178 U JP 12498178U JP 12498178 U JP12498178 U JP 12498178U JP S58134 Y2 JPS58134 Y2 JP S58134Y2
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- JP
- Japan
- Prior art keywords
- electrophoresis
- tube
- preparative
- migration
- needle
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired
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- Sampling And Sample Adjustment (AREA)
Description
【考案の詳細な説明】
この考案は等速電気泳動分析装置に関する。
更に詳しくは、この考案はターミナル電解液槽、試料注
入口及び検出器を設置した泳動管並び゛にリーディング
電解液槽等を順に備え、その泳動管における予め設定さ
れた分取位置から前段又は後段の離れた位置にその泳動
方向を前記分取位置での泳動方向に対して変える屈曲部
を形成すると共に、その屈曲部にセプタムを設け、その
セプタムを通じて吸引式分取細管が前記分取位置の泳動
方向と同軸で且つその先端が分取位置に保持されるよう
構成してなる等速電気泳動分析装置に関する。
入口及び検出器を設置した泳動管並び゛にリーディング
電解液槽等を順に備え、その泳動管における予め設定さ
れた分取位置から前段又は後段の離れた位置にその泳動
方向を前記分取位置での泳動方向に対して変える屈曲部
を形成すると共に、その屈曲部にセプタムを設け、その
セプタムを通じて吸引式分取細管が前記分取位置の泳動
方向と同軸で且つその先端が分取位置に保持されるよう
構成してなる等速電気泳動分析装置に関する。
等速電気泳動分析法は、一定内径の泳動管路、例えばキ
ャピラリチューブ（細管）に内にターミナル電解液とリ
ーチ゛イング電解液とを充填し、その境界面に荷電状態
になる物質（アミノ酸類、ペプチド類、生体物質など）
の試料を入れ、定電流による等速電気泳動を行い被検出
部を分離し、定性及び／又は定量するものである。
ャピラリチューブ（細管）に内にターミナル電解液とリ
ーチ゛イング電解液とを充填し、その境界面に荷電状態
になる物質（アミノ酸類、ペプチド類、生体物質など）
の試料を入れ、定電流による等速電気泳動を行い被検出
部を分離し、定性及び／又は定量するものである。
しかしながら、定性は標準品との比較において決まるも
のであるから、標準品がない場合には定性ができない。
のであるから、標準品がない場合には定性ができない。
このような場合は通常被検出物が分離されたゾーンを分
取し、改めて別途に定性／又は定量を行っていた。
取し、改めて別途に定性／又は定量を行っていた。
このような分取を具体的に行う装置としては、例えば特
開昭５０−８１３９７号に開示されているごとく、試料
を分取するために泳動管から分岐管を設け、リーディン
グ電解液を強制的に泳動方向とは逆方向に分岐管に向っ
て強制的に流入させ、分離された目的物質を分岐管を通
じてセルロールアセテート板上に分取（国定）する装置
が知られている。
開昭５０−８１３９７号に開示されているごとく、試料
を分取するために泳動管から分岐管を設け、リーディン
グ電解液を強制的に泳動方向とは逆方向に分岐管に向っ
て強制的に流入させ、分離された目的物質を分岐管を通
じてセルロールアセテート板上に分取（国定）する装置
が知られている。
しかしながら、このような分取方法では、せっかく分離
された各ゾーンがリーチ゛イング電解液の対向流によっ
て乱れやすく、更に分取される物質が分岐する際に流動
方向を変えるので更にゾーン乱れが生じやすく、分取精
度が悪かった。
された各ゾーンがリーチ゛イング電解液の対向流によっ
て乱れやすく、更に分取される物質が分岐する際に流動
方向を変えるので更にゾーン乱れが生じやすく、分取精
度が悪かった。
この考案は、これらの事情に鑑みなされたもので、その
主要な特長の一つは、吸引式分取細管を泳動管における
分取すべき目的物質の位置より離れた位置から泳動方向
に対して同軸に挿入して吸引分取し、それによって分離
ゾーンの乱れか少ない分取を可能にするところにある。
主要な特長の一つは、吸引式分取細管を泳動管における
分取すべき目的物質の位置より離れた位置から泳動方向
に対して同軸に挿入して吸引分取し、それによって分離
ゾーンの乱れか少ない分取を可能にするところにある。
この考案のその他の具体的な構成上の特徴及び利点は以
下の説明によって明らかになろう。
下の説明によって明らかになろう。
以下図に示す実施例に基いてこの考案を詳述する。
なお、これによってこの考案が限定されるものではない
。
。
まず第１図において、細管式等速電気泳動分析装置１は
、ターミナル電解液槽２と、試料注入口３及び分取用セ
ル４を設置したキャピラリチューブ５と、リーディング
電解液槽６とから主として構成されている。
、ターミナル電解液槽２と、試料注入口３及び分取用セ
ル４を設置したキャピラリチューブ５と、リーディング
電解液槽６とから主として構成されている。
次いで第２図において、前記分取用セル４は、キャピラ
リチューブ５の途中に介設されて泳動流路に屈曲部７を
形威し、その屈曲部の前方には検出器８と、その屈曲部
にはセ、プタム９とニードルガイド１０とをそれぞれ備
えている。
リチューブ５の途中に介設されて泳動流路に屈曲部７を
形威し、その屈曲部の前方には検出器８と、その屈曲部
にはセ、プタム９とニードルガイド１０とをそれぞれ備
えている。
つまり、前記屈曲部７は、泳動流路をほぼ直角に曲げる
よう構成され、前記セプタム９とニードルガイド１０と
は前段流路と同軸に配設されている。
よう構成され、前記セプタム９とニードルガイド１０と
は前段流路と同軸に配設されている。
従って前記ニードルガイド１０の透孔１１より、分収用
マイクロシリンジ１２の針１３を押し込めば、その針は
セプタム９を貫通して泳動細管内を同軸に前進し、この
前進が分取用マイクロシリンジ１２の針１３の付根、す
なわちシリンダ１４の前端がニードルガイド１０の後端
に当接するまで続けられる。
マイクロシリンジ１２の針１３を押し込めば、その針は
セプタム９を貫通して泳動細管内を同軸に前進し、この
前進が分取用マイクロシリンジ１２の針１３の付根、す
なわちシリンダ１４の前端がニードルガイド１０の後端
に当接するまで続けられる。
かくしてマイクロシリンジ１２の針先１３は、予め設定
された位置、すまり分取位置Ｐに位置決めされる。
された位置、すまり分取位置Ｐに位置決めされる。
なお、１５．１６は所定間隔、に配設された電位勾配電
極であり、この雨検出器によって各分離物質の検出と共
にその移動速度を測定することができる。
極であり、この雨検出器によって各分離物質の検出と共
にその移動速度を測定することができる。
次に以上のような構成からなる細管式等速電気泳動分析
装置１の動作を説明する。
装置１の動作を説明する。
まず、キャピラリチューブ５の試料注入口３に、試料よ
り易動度の大きい陰イオンを含む電解液（リーディング
電解液槽 ンを含む電解液（ターミナル電解液）の境界面を作り、
その境界面に試料を注入し定電流高圧電源（図示省略）
より一定電流を供給して等速電気泳動を行う。
り易動度の大きい陰イオンを含む電解液（リーディング
電解液槽 ンを含む電解液（ターミナル電解液）の境界面を作り、
その境界面に試料を注入し定電流高圧電源（図示省略）
より一定電流を供給して等速電気泳動を行う。
かくして試料イオン（陰イオン）は易動度の大きさの順
に泳動細管内部で単一成分イオンのゾーン（バンド）に
分離され、互いに明確な境界面を保持しながら各ゾーン
がイオン量で決まる一定の幅をもって等速度で矢印Ａ方
向に移動を始める。
に泳動細管内部で単一成分イオンのゾーン（バンド）に
分離され、互いに明確な境界面を保持しながら各ゾーン
がイオン量で決まる一定の幅をもって等速度で矢印Ａ方
向に移動を始める。
この場合基ゾーンには易動度に応じてそれぞれ違った固
有の電位勾配が形成されるのでこの電位勾配を検出器８
によって検出し分離された単−成分イオンを知ることが
でしる。
有の電位勾配が形成されるのでこの電位勾配を検出器８
によって検出し分離された単−成分イオンを知ることが
でしる。
すなわち、その電位勾配値から分取すべき目的物質イオ
ンを検知することができる。
ンを検知することができる。
このように分取すべき目的物質ゾーンの前端境界面が検
知されると、その検知信号が適宜手段によって表示され
、それによって所定時間を後泳動電流を切り、次いで、
予め用意された分収用マイクロシリンジ１２の針１３を
ニードルガイド１０及びセプタム９を通じてキャピラリ
チューブ５内に挿通される。
知されると、その検知信号が適宜手段によって表示され
、それによって所定時間を後泳動電流を切り、次いで、
予め用意された分収用マイクロシリンジ１２の針１３を
ニードルガイド１０及びセプタム９を通じてキャピラリ
チューブ５内に挿通される。
すなわち、前記針１３がマイクロシリンジ１２のシリン
ダ１４の前端がニードルガイド１０に当接するまで、矢
印Ｂ方向同軸に挿通され、結局針先１７を予め設定した
分取位置Ｐに保持し、ちょうどその分取位置Ｐに到達し
た目的物質を一定量シリンダ１４内に吸引する。
ダ１４の前端がニードルガイド１０に当接するまで、矢
印Ｂ方向同軸に挿通され、結局針先１７を予め設定した
分取位置Ｐに保持し、ちょうどその分取位置Ｐに到達し
た目的物質を一定量シリンダ１４内に吸引する。
以上のように目的物質の分取が吸引によって行われるの
で、各ゾーンの乱れが少なく、従って精度の高い分取が
可能になる。
で、各ゾーンの乱れが少なく、従って精度の高い分取が
可能になる。
また分取用細管、つまり針が分取位置より離れた位置か
ら泳動管内に挿通されるので、分取位置に、構造上の複
雑さを与えず且つその分取位置が屈曲部より離れた直線
部分であり、ゾーン乱れの防止と共に分取タイミング決
定が容易になる。
ら泳動管内に挿通されるので、分取位置に、構造上の複
雑さを与えず且つその分取位置が屈曲部より離れた直線
部分であり、ゾーン乱れの防止と共に分取タイミング決
定が容易になる。
更に分取用細管が泳動細管内に同軸に挿入され且つ同方
向（泳動方向）に吸引分取されるので各ゾーンの乱れが
少ない。
向（泳動方向）に吸引分取されるので各ゾーンの乱れが
少ない。
なお、検出器８が二つの電位勾配電極１５．１６よりな
るので、目的物質とその泳動速度の検知がその都度可能
になり、吸引分取するタイミングが正確にとれ精度の高
い分取が可能になる。
るので、目的物質とその泳動速度の検知がその都度可能
になり、吸引分取するタイミングが正確にとれ精度の高
い分取が可能になる。
もちろん、以上の実施例と異なり１個の電極を備えた電
位勾配検出器でも高精度の分取は可能である。
位勾配検出器でも高精度の分取は可能である。
例えば分取位置をその検出器直後に設定するか、又は同
じような等速電気泳動分析を予め行って泳動速度を予想
することによって可能になる。
じような等速電気泳動分析を予め行って泳動速度を予想
することによって可能になる。
この場合は、検出器によって直接分取すべき目的ゾーン
を検出しなくても、他の物質の検知によって目的ゾーン
の位置及び泳動速度を予想することもできる。
を検出しなくても、他の物質の検知によって目的ゾーン
の位置及び泳動速度を予想することもできる。
泳動管の屈曲部は、第１〜２図とは異なり検出器に対し
て前段に設けることもできる。
て前段に設けることもできる。
例えば、前述のように先に泳動する他の物質ゾーンを検
出することによって後に続く目的物質ゾーンの位置を予
想し、分取細管を前段の屈曲部より泳動方向と同じ方向
に挿通して、吸引分取する構成が具体例として挙げられ
る。
出することによって後に続く目的物質ゾーンの位置を予
想し、分取細管を前段の屈曲部より泳動方向と同じ方向
に挿通して、吸引分取する構成が具体例として挙げられ
る。
更に第１〜２図において説明した分取用マイクロシリン
ジ１２は、手動によって挿通及び吸引操作がなされてい
るが、吸引操作をいわゆるシリンジ吸引ポンプとして自
動化させそのポンプを挿通固定してもよい。
ジ１２は、手動によって挿通及び吸引操作がなされてい
るが、吸引操作をいわゆるシリンジ吸引ポンプとして自
動化させそのポンプを挿通固定してもよい。
また分取時に泳動電流を停止しているが、供給状態でも
分取は可能である。
分取は可能である。
但し、電気絶縁については危険が伴うので配慮する必要
がある。
がある。
このためにはマイクロシリンジとして非金属製のものが
好ましいものとして挙げられる。
好ましいものとして挙げられる。
次いで第１〜２図に示した等速電気泳動分析装置１を用
いて行った実験例を示す。
いて行った実験例を示す。
なお、主要な寸法その他の仕様はおよそ次の通りである
。
。
キャピラリチューブ内径・・・・・・Ｑ、５７ｍｍΦ目
的戊分Ｂの前端が検出されてからその中央が分取位置Ｐ
に到達する理論時間ｔ・・・・・・約２秒（泳動速度１
９ｍｍ７分） 検出器１６と分取位置Ｐとの距離１１・・・・・・約２
ｍｍマイクロシリンジ１２の針１３外径・・・・・・０
．５１ｍｍΦ マイクロシリンジ１２の針１３の容積・・・・・・０．
９μｌマイクロシリンジ１２の針１３の長さ・・・・・
・５１ｍｍ検出器１６と屈曲部７との距離・・・・・・
５ｍｍリーチ゛イング電解液：ヒスチジン及びヒスチジ
ンの一塩酸塩・・・・・・各０．ＯＩＭ ターミナル電解液：グルタミン酸・・・・・・０．０１
Ｍ泳動電流ニア５μＡ 試料： Ａ成分ニクロム酸 Ｂ成分：マレイン酸 の混合溶液（溶媒・・・・・・水
）Ｃ成分：酢酸 目的成分Ｂゾーンの前端検出から分取までの時間Ｔを変
化させた場合の分取成分をグラフに表示すると第３〜４
図である。
的戊分Ｂの前端が検出されてからその中央が分取位置Ｐ
に到達する理論時間ｔ・・・・・・約２秒（泳動速度１
９ｍｍ７分） 検出器１６と分取位置Ｐとの距離１１・・・・・・約２
ｍｍマイクロシリンジ１２の針１３外径・・・・・・０
．５１ｍｍΦ マイクロシリンジ１２の針１３の容積・・・・・・０．
９μｌマイクロシリンジ１２の針１３の長さ・・・・・
・５１ｍｍ検出器１６と屈曲部７との距離・・・・・・
５ｍｍリーチ゛イング電解液：ヒスチジン及びヒスチジ
ンの一塩酸塩・・・・・・各０．ＯＩＭ ターミナル電解液：グルタミン酸・・・・・・０．０１
Ｍ泳動電流ニア５μＡ 試料： Ａ成分ニクロム酸 Ｂ成分：マレイン酸 の混合溶液（溶媒・・・・・・水
）Ｃ成分：酢酸 目的成分Ｂゾーンの前端検出から分取までの時間Ｔを変
化させた場合の分取成分をグラフに表示すると第３〜４
図である。
つまり第３図において、Ｔ＝１０〜２０秒の間ではＢ成
分ひＡ及びＢ成分はほとんど混合しない。
分ひＡ及びＢ成分はほとんど混合しない。
これを確かめるために再度同じその装置１において分析
した。
した。
その結果は第４図の通りである。但し分取量は、第３図
の場合に４μｌ、第４図の場合に３μｌである。
の場合に４μｌ、第４図の場合に３μｌである。
第１図はこの考案に係る等速電気泳動分析装置の一実施
例を示す機能説明図、第２図はその分取セルの拡大断面
図、第３図は検出からＴ時間後の分取成分を表示するグ
ラフ、第４図はそのＴ−１０〜３０秒での分取成分を要
示するグラフである。 １・・・・・・細管式等速電気泳動分析装置、２・・・
・・・ターミナル電解液槽、３・・・・・・試料注入口
、５・・・・・・キャピラリチューブ、６・・・・・・
リーディング電解液槽、７・・・・・・屈曲部、８・・
・・・・検出器、９・・・・・・セプタム、１２・・・
・・・分取用マイクロシリンジ。
例を示す機能説明図、第２図はその分取セルの拡大断面
図、第３図は検出からＴ時間後の分取成分を表示するグ
ラフ、第４図はそのＴ−１０〜３０秒での分取成分を要
示するグラフである。 １・・・・・・細管式等速電気泳動分析装置、２・・・
・・・ターミナル電解液槽、３・・・・・・試料注入口
、５・・・・・・キャピラリチューブ、６・・・・・・
リーディング電解液槽、７・・・・・・屈曲部、８・・
・・・・検出器、９・・・・・・セプタム、１２・・・
・・・分取用マイクロシリンジ。
Claims (1)
- ターミナル電解液槽、試料注入口及び検出器を設置した
泳動管並びにリーディング電解液槽等を順に備え、その
泳動管における予め設定された分取位置から前段又は後
段の離れた位置にその泳動方向を前記分取位置での泳動
方向に対して変える屈曲部を形成すると共に、その屈曲
部にセプタムを設け、そのセプタムを通じて吸引式分取
細管が前記分取位置の泳動方向と同軸で且つその先端が
分取位置に保持されるよう構成してなる等速電気泳動分
析装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12498178U JPS58134Y2 (ja) | 1978-09-11 | 1978-09-11 | 等速電気泳動分析装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12498178U JPS58134Y2 (ja) | 1978-09-11 | 1978-09-11 | 等速電気泳動分析装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS5542142U JPS5542142U (ja) | 1980-03-18 |
| JPS58134Y2 true JPS58134Y2 (ja) | 1983-01-05 |
Family
ID=29085475
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP12498178U Expired JPS58134Y2 (ja) | 1978-09-11 | 1978-09-11 | 等速電気泳動分析装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS58134Y2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6070454U (ja) * | 1983-10-21 | 1985-05-18 | ダイハツ工業株式会社 | 自動車における側面ガ−ド部品 |
-
1978
- 1978-09-11 JP JP12498178U patent/JPS58134Y2/ja not_active Expired
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS6070454U (ja) * | 1983-10-21 | 1985-05-18 | ダイハツ工業株式会社 | 自動車における側面ガ−ド部品 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS5542142U (ja) | 1980-03-18 |
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