JPS5840462B2 - 微細藻類の培養方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はクロレラ、セネデスムス、コエラストルムなど
の微細緑藻類の光合成色素含有量を高める培養法に関す
る。

クロレラその他の緑藻類は増殖速度が一般の緑色植物に
比較して速いため、生産が容易である上、これらの緑藻
類は、蛋白質、炭水化物、ビタミン、色素、特殊生理活
性物質などを含有することから多数の研究がなされ、又
企業化されている。

その培養形式は独立栄養、混合栄養、従属栄養に分けら
れる。

従来より屋外の開放培養池で、炭酸ガスと日光照射によ
る独立栄養培養、又は酢酸を炭素源として日光照射によ
る混合栄養培養により生産されている。

然るにこの方法は太陽光線を多量に必要とするため、生
産には広大な土地が必要となり、又日照量の天候、季節
による変動、更には開放的設備であるため、微生物その
他の汚染を受は品質の安定した製品が得られないという
欠点をもっていた。

問題点解決のため、近年いわゆるタンク培養が行われて
いる。

しかし、有機物を炭素源およびエネルギー源とする従属
栄養では光合成器官であるクロロプラストが充分発達せ
ず、クロロフィルなどの光合成色素の含有が低くなる事
から、特別な装置を用いて、天然或は人工の光を与える
混合栄養培養が考案されている。

しかしこの場合も、大量の光エネルギーを照射する必要
上、複雑な構造の装置の設置をよぎなくされ、又複雑な
操作を要するため実用的ではない。

本発明者らは生産性が高く、かつ汚染の機会が少ないタ
ンク培養法で、光の照射なしで、有機物を炭素源、エネ
ルギー源とする従属栄養培養において、クロロプラスト
が充分発達してクロロフィル等の光合成色素の含有量の
高い緑藻類を得る方法につき検討の結果、本発明に到達
した。

即ち、本発明は微細緑藻類を、有機物を炭素源およびエ
ネルギー源として従属栄養的に培養するに際し、培養液
中の溶存酸素濃度を０．５ｐｐｍから６ｐｐｍの範囲で
調節し、且つ培養液のＰＨを５．５から７．５の範囲に
調節することによる培養法であるが、更に培地中に蛋白
質の加水分解物或いはアミノ酸を０．１■／培地１以上
の微量を添加することにより、且つ連続培養液のグルコ
ースノ量を１０〜４０■／培地ｌに調整することにより
、クロロプラストが発達し、光合成色素の含有量の高い
微細藻類の培養法に係る。

以下本発明の詳細な説明する。

微細緑藻類は有機物を資化し従属栄養で増殖可能なもの
で、クロレラ、セネデスムス、クラミドモナス、セレナ
ストルム、コエラストルム等カ代表的なものである。

微細緑藻類の炭素源およびエネルギー源である有機物は
、グルコースが用いられる。

培地中には栄養成分として硝酸塩、尿素、アンモニウム
塩等の窒素源、燐酸塩、カリウム塩、マグネシウム塩等
が、微量要素として鉄、カルシウム、硼素、マンガン、
亜鉛、銅、モリブデン、コバルト、チタン、タングステ
ン、クロム、バナジウム、ニッケル等の金属の塩類が添
加される。

又不溶解性の塩類の生成を防止するためにクエン酸、Ｅ
ＤＴＡ等のキレート剤を添加することもある。

本発明に於ては、培養液中の溶存酸素濃度を０．５〜６
ｐｐｍの範囲で調節し、且つ培養液のＰＨを５．５〜７
．５の範囲で調節することが微細緑藻類のクロロプラス
トを発達させ、光合成色素含有量を高める上で必要であ
る。

更に安定して光合成色素含有量の微細緑藻類を得るため
には、培地中にイーストエキス、カザミノ酸、ペプトン
、トリプトン、肉エキス、コーンステイープリカー等の
蛋白質の加水分解で得られるアミノ酸等の混合物および
バリン、ロイシン、インロイシン、フェニルアラニン、
トリプトファン、グリシン、セリン、スレオニン、チロ
シン、アスパラギン、グルタミン、グルタミン酸、アス
パラギン酸、リジン、アルギニン、ヒスチン等の単独ア
ミノ酸の内のいずれか単独若しくは混合したものを０．
１■／培地１以上の微量を添加することが好ましい。

添加量はｏ、１ｍｑ／ｌで充分であるが、更に安定した
結果を得るためには０．５Ｐ／、ｇ程度が添加される。

又培養条件によっては経済的に許される範囲内で更に多
量を添加しても良い。

又添加法は培養液中に一時的に添加しても或は連続的に
添加しても良い。

さらに連続培養液のグルコースの量は１０〜４０■／培
地ｌに調整される。

実施例 １ 容量２．５１のミニ、ジャーファメンターにＰＨ電極、
溶存酸素電極を装置し下記の組成の培地１．８１を加え
、Ｓｃｅｎｅｄｅｓｍｕｓ ａｃｕｔｕｓを植菌し、
ＰＨ６、温度３３℃で通気・攪拌しながら純粋培養を行
った。

尚、ＰＨは自動的にアンモニア水で調節し、溶存酸素濃
度は１〜２．５ｐｐｍ Ｋ調整した。

連続培養の途中で、一時的に、ファーメンタ−中に以下
に記す添加物を加え、藻体中のクロロフィル量、蛋白質
量及び培養液中のグルコース、アンモニア態窒素、燐酸
の含量を測定し、培養経過を観察した。

結果を表−１に示す。培地組成 グルコース 硫酸アンモン 第１リン酸カリ 硫酸マグネシウム・７水塩 硫酸第１鉄・７水塩 微量金属溶液（Ａ、） 蒸留水 ｒ Ｏ，８２５’ １．２５１ １．２５ｙ ｍ９ ｍ１ ９９．８ｍｌ 参考例 実施例１と同様の装置及び培地を用い、添加物を加える
ことなく温度３３℃、培養液のＰＨ５，８、同じく溶存
酸素濃度０．８〜１．５ｐｐｍの範囲で、各々調節しな
がら、培養を行った。

５０時間目に得られた藻体中のクロロフィル含量は２．
０％であった。

又ＰＨを６．５、溶存酸素濃度を４．８〜５．５ｐｐｍ
として５０時間の培養後、藻体中のクロロフィル含量は
２．２％であった。

実施例 ２ 実施例１と同様の操作を行った。

但し、新しく供給する培地中にカゼインの加水分解物１
００ｍｙ／ｌを含むものを使用し、通気・攪拌により、
培養液中の溶存酸素量を調節し、溶存酸素調節後６０時
間目の藻体中クロロフィル濃度を測定した。

結果は表−２に示す。

実施例 ４ 実施例３と同様に操作し、ＰＨを変え、ＰＨ設設定変更
後４蒔 定した。

尚、溶存酸素は１〜２ｐｐｍに設定した。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 有機物を炭素源およびエネルギー源として従属栄養
   的に光照射なしに微細藻類をタンク培養するに際し、培
   養液中の溶存酸素濃度を０．５から６ｐｐｍの範囲で調
   節し、培養液をＰＨ５，５から７．５の範囲に調節し、
   蛋白質の加水分解物或はアミノ酸を０．１η〜０．５？
   ／培地ｌの範囲で添加し、且つ連続培養液のグルコース
   の量を１０〜４０ｍ９／培地ｌに調整して培養すること
   を特徴とする光合成色素含有量を高める微細藻類の培養
   法。