JPS5842423B2 - デンキエイドウスライドトリツケソウチ - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、電気泳動スライド取付は装置に関する０ 電気泳動は、体液中の蛋白質を分析する１つの方法であ
り、研究室や臨床的仕事において非常に価値があること
が分った。

電気泳動媒体として、分析されつ＼ある物質中のは’ｘ
５つの成分の分離を可能にする微孔性プラスチック膜ま
たはポリアクリルアミドデルが使用される。

比較的低分離用に製作された多数の商業的機器がある。

アガローズ、ケ）レスライドの比較的大きな領域を利用
して１５はどの多くの成分を分離するより高い分離性、
したがって分析を達成することができる。

しかして、このスライドは、特定の制御された条件の下
で電気泳動を受ける。

このようなスライドは、バルビタール緩衝液を付加した
アガローズゲルより成る。

これらのスライドで遂行される測定は研究室の環境の下
では優れた結果を示したが、広い臨床上の用途で使用す
るためには、容易であり、経済的であり、そして特に正
確で再現性のある結果を得る装置が必要とされる。

電気泳動においては、最初の段階は、試料物質を電気泳
動媒体に適用し、印加される電界の作用下で泳動により
分離を生ぜしめることである。

しかる後、スライドは化学的に固定され、乾燥され、つ
いで直接または適当な濃度計で読み取られる。

実際的な泳動装置を得るために、装置は、比較的未熟な
技術者により操作されるときでさえ、正確で高度に再現
性のある結果を得ることができねばならぬ。

かへる正確さと再現性を得るため、精確に制御されねば
ならぬ多数の変数がある。

これらの変数として、印加された電圧の値、泳動、印加
される電圧の継続時間、泳動の期間中スライドを取り付
は保持する形態、泳動期間中維持される温度が含まれる
。

大面積のスライド、例えば約２２．８６Ｃ７ＦＬＸ１５
．２４ｃＩｎ（９”Ｘ６” ）の矩形スライドの場合、
約２００ボルトの電圧が印加されると、スライドは、５
５°Ｇ以上の温度に温度上昇を受ける。

この温度の下で、スライドの乾燥が行なわれてイオン濃
度の増大をもたらし、さらに電力消費、温度の増大を生
せしめる。

加えて、このような高温度では蛋白質の変性が起こる。

最後に、電気泳動中スライドを一定の温度環境に維持す
ることが望ましいことに付言する。

分離中のスライド温度の変化は、清報内容には影響を及
ぼさないが、電気泳動中の個々の蛋白質の成分の移動度
に変化を生ぜしめる。

一定温度ｌこて電気泳動の分離を遂行するにより、スラ
イド間のパターンの比較が容易になされる。

過去においては、種々の従来の冷却技術が採用された。

これらの技術として、スライドと熱接触下にある室を水
冷する方法、および種々の空気冷却法がある。

必ず、その各端部が化学的に活性の緩衝物質に挿入され
かつ約２００ボルトの電圧が印加されねばならぬスライ
ドの場合、か＼る冷却の仕方は、泳動装置の設計を複雑
１ζし、きまりきった研究室的手順で操作することを若
干難しくする０ それゆえ、本発明の主たる目的は、電気泳動スライドを
５°Ｃないし４０℃間の実質的に一定の温度ｌζ維持り
ながら、増扱い容易であり、動作が経済的であり、かつ
精確な結果をもたらす電気泳動装置を提供することであ
る。

概説すると、矩形状の電気泳動スライドは、その基板部
分が取付はブロックの凹面の円筒状外表面と親密に接触
するように摩り付けられる。

ブロックの内部は、室温よりも数度高い温度例えば２９
℃で融解する塩を含む。

塩を液化するに必要とされる熱が、スライドと接触下ｌ
こある表面から奪われる。

この凹表面は、電気的に絶縁性で、疎水性でありかつ緩
衝液と化学的に作用し合わない物質より成る。

取付はブロックは、２つの隔離された緩衝液室に分割さ
れた緩衝液容器と密封関係で位置づけされるように賦型
される。

しかして、各室は、適当なバルビッール酸塩緩衝溶液を
含み、また溶液と接触して反対極性の電極を有する。

十分の電力レベルにて適当な電圧を供給する電源が２電
極間に接続される。

スライド取付はブロックは、スラ・イドの基板と取付は
ブロックの凹表面間に連続的な親密な接触を保証するに
寸分圧縮された状態でスライドの確実な保持を可能にす
るように配置される。

スライドがそのようｌζ位置づけされるとき、取付はブ
ロックが容器上に配置されると、スライドの端部は緩衝
溶液内に置かれ、そして電圧が印加されると電気泳動が
起こる。

アガローズゲルの電気泳動スライドの迅速、正確かつ確
実な取付けを容易１こするため、スライドを被覆ブロッ
クの凹表面と接触下に摩り付は保持する特別の手段が設
けられている。

この手段は、凹表面にはゾ直角に延在するように位置づ
けされた独立気泡フオームラバーまたはシリコーンエラ
ストマのごとき高弾性の柔かい物質より成る平担なはゾ
矩形のストリップを含む。

凹表面の支対端は、同じように配向された堅い矩形の保
持部材を具備する。

シリコーンスライドを取付は保持する際に遭遇する問題
は、その一方の表面は、汚染されない状態に維持されね
ばならぬアガローズゲルで被覆されることであり、しか
も基板、代表的にはポリエチレンンフイルムの下面が、
フィルムの一様な冷却を可能ｉこするため凹表面と密接
な実質的に連続的な接触下に維持されることが重要であ
る。

かくして、スライドを取り付は保持するには若干の圧縮
力が必要とされ、そしてこの力は、スライドそれ自体の
全体的な繊細さを考慮に入れて加えられねばならない。

動作において、スライドは無ゲルの縁部により把持し、
そして一端を凹表面と接触するように配置し、その端部
が柔かい弾性部材を圧縮するまですべらせる。

ついで、全スライドを密接に接触するように押し、そし
て自由端を、凹表面の反対端部にある堅い保持部材の下
にスナップ係合させる。

全スライドは、こ＼で、圧縮可能な唇状保持部材の弾性
）コより彎曲表面）コ圧縮状態１こ維持される。

以下図面を参照して、本発明を好ましい具体例について
説明する。

まず第１図を参照すると、１１で総括的に指示される取
付けおよび冷却ブロックはアルミニウム鋳造物より成り
、凹面の円筒状外表面１３を含む。

取付は部材１１の中空部分１５には、リチウム塩のごと
き物質１７が配される。

取付はブロックは内部冷却用フィン１９を具備し、また
カバー２１を有する。

カバー２１は、ねじまたは同等物（図示せず）により取
付はブロック１１自体に封着されうる。

凹表面１３は、好ましくは、緩衝溶液と化学的不反応性
でありかつ冷却ブロックの湿潤を避けるため疎水性でも
ある電気的絶縁材料で被覆される。

冷却ブロックが湿潤されると、電気泳動スライドの表面
に不均一な温度分布をもたらすことになろう。

適当な材料は、米国オクラホマのフィリブス・ペトロリ
ウム・カンノマニに、Ｊ：、 リ「Ｒ，ｙｔｏｎ Ｊの
商標の下で製造されるごときポリフェニレンサルファイ
ドレジンである。

電気泳動スライド１６は、凹表面１３と連続的に親密に
接触するように増り付けられている。

スライドは、ポリエチレン基板上にアガローズゲルの層
が重ねられたものより成る。

スライドの代表的寸法は、１５．２４（ｍ幅Ｘ２３．４
６９６ＣｒｒＬ長（６１１幅Ｘ９．２４”長）であり、
ポリエチレン基板は０．００フインチの厚さを有する。

取扱いを容易にするため、ポリエチレン基板の各長側縁
に沿う１．９０５ｃｒｆＬ（３／４”）のストリップを
除いて、スライドの全面をアガローズゲルで覆っである
。

この場合、取扱いに際して、スライドはアガローズゲル
物質を汚染することなくこれらの１．９０５ｃ１１１（
３／ ４ ” ）ストリップに沿って摩り扱うことがで
きる。

物質１７は、所望の範囲における相変化、およびスライ
ドを一定温度１こ維持するため相変化と関連して十分の
熱を吸収する特性を有する任意の適当な物質である。

ある種の塩は、相が固体相から液体相に変わるから、こ
の目的のために特に有用であることが分った。

使用した１種の塩は、水利硝酸リチウムである。

冷却ブロック１１は、約７０カロリ／グラムの融解熱を
有するこの物質を約８００ミリリツトル包含する。

この物質は、比較的高密度を有していて、相当多量の物
質で比較的小さい容積しか占めないことからいっても望
ましいものである。

取付はブロック１１上にスライドを位置づけるには、ス
ライドを、基板側を上側にして、その一端が圧縮可能な
唇状部材２０に当接するように動かす。

しかして、圧縮可能な唇状部材２０は、代表的には、緩
衝溶液に対して不活性のシリコーン、またはゴムまたは
その他の柔かい弾性物質より構成し得る。

唇状部材２０は、ガラス充填盤または他の等価な物質よ
り成る保持部材２４により適所に保持される。

次いで、スライド１６の反対端を保持部材２４の下にす
べり込ませる。

弾性唇状部材２０は、スライドを凹表面１３に連続的に
親密に接触させるように凹表面に対してはゾ圧縮状態に
保持する。

保持部材２４もガラス充填盤で作つてもよい。

スライドを保持する代りの配置として、ばね保持部材の
利用がある。

緩衝溶液器３０は、例えば流込みエポキシより構成しう
るもので、比較的背の高い分離部材３６を具備する２つ
の隔絶された緩衝液室３２および３４を含む。

一方の電極３１が緩衝液室３２内にあり、他方の同一の
電極３３が緩衝液室３４内にある。

容器３０の上縁は、取付はブロック１１が容器３０内に
適所に置かれるとき緩衝液がこぼれるのを避けるため、
密封用ガスケット３７を含む。

動作に際しては、約３００アンペアのピークアンペア数
にて約２００ボルトの電圧を供給しうる電源が電極３１
および３３間に接続される。

代表的泳動時間は約４５分ないし１時間である。

緩衝溶液は、任意の適当な電気泳動緩衝液、例えば１２
０ミリリツトルの蒸留水に対して０．３３１グラムのジ
エチルバルビッール酸＋１．８４８グラムのジエチルバ
ルビッール酸ナトリウムを加えた混合物（ｐｈ８．６、
イオン強度０．０７５ ）としうる。

上述の物質１７の場合、取付はブロックは、再生利用が
必要となるまで４枚はどのスライドを処理するのＩこ利
用できる。

取付はブロックの再生は、塩を固化するため室温にて一
夜放置することによる。

もしも再生時間の短縮が望まれる場合Ｉコは、ブロック
は、約１時間水槽に入れることにより再生できる。

以上、装置の特定の形態について説明し、例として特定
の物質を挙げたが、他の物質を他の形態とともに使用し
てもよいことが理解されよう。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明の原理にしたがって構成された取付はブ
ロックおよび緩衝液容器組立体の一部を切除した斜視図
、第２図は第１図の２−２線で切断した断面図である。 図中主要な部分を表わす符号の説明は以下の通りである
。 １１：取付けおよび冷却ブロック、１３：１１の凹表面
、１６：電気泳動スライド、１７：リチウム塩のごとき
物質、２０：唇状部材まなは保持部材、２１：カバー、
２４：保持部材、３０：緩衝液容器、３Ｌ３３：電極、
３２，３４：緩衝液室、３６：分離部材。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 電気泳動スライドを取り付は保持する凹面の円筒状
   外表面を備える取付はブロックを有する電気泳動装置に
   おいて、前記凹面の円筒状表面の一縁に隣接して固定さ
   れて前記表面にはゾ直角の方向に延在する・柔かい弾性
   物質より成る第１のスライド保持部材と、前記凹面の円
   筒状表面の反対縁部近傍に摩り付けられて前記第１保持
   部材に向って前記凹面の円筒状表面にはマ直角の方向に
   延在する。 相当堅い物質より成る第２の保持部材とを含み、それに
   より前記電気泳動スライドが、これを長手方向に沿って
   前記第２保持部材に向って圧縮する前記第１部材の弾性
   作用により、前記凹面の円筒状表面に対して圧縮状態に
   維持されて取り付けられるようになされた電気泳動装置
   。