JPS5843981A - ピユリン−ジハイドロチアゾ−ル - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、免疫反応調贅剤とされている幾つ力為の化学
物質と同様、免疫反応を調整する作用を期待される新規
物質に関するものである。 イングリノシン■（Ａ）、（ボード／の米国特許３，６
４６．００７号）は、主としてＴ−細胞に効果を及ばず
とされる免疫調整剤である。・レバき！−ル（Ｂ）も又
主としてＴ−細胞に効果あやとされている。 二つの分子に共通しである種の構造的特徴をもつ新しい
一連の化合物を、発明者らは発明した１発明者の発明に
なる物質、即ちジノ）イドロチアゾロピユリンは免疫調
整作用をもつと共に、思い力ぶけなく、それはＢ−細胞
反応を刺激、：例えば、１ｍ、’　”　ｓ　ｌ　ａ　ｓ
　Ｎ　ａ　ｓ又はＴ−細胞反応を良卦；例えばＩｂ、　
　ならびにＴ−細胞反応を息監する効果の方が多いとい
う点で生理学的に極めて興味ある物質従って、本明細書
記載の成果Ｆｉ（１）　／　／＼イドロチアゾロピユリ
ンの新規誘導品をつくることが可能であり、（２）その
新規誘導品は試験ｉ内で抗ビールス作用かあ６％（３）
Ｔ−及びＢ−細胞′反応の両省を促進し、又はＴ−細胞
反応を抑制する作用をもつことを示している。 本発明に於けるシバイドロチアゾロピユリンは下に示す
様な式！、曹及び夏をもつ化合物を含む。 便宜のため次式中では番号を打った。第■式の新規なシ
バイドロチアゾロ化合物も又同様な免疫調ｊ　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　１璽　　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　■之等の弐に於て　Ｒ１は水素、低級アルキルチオ
、（例えばメチルチオからブチルチオ）、ハロダン、（
例えば塩素、臭素又は弗素）、低級アルキルスルフィニ
ル、（例エバメチルスルフィニルからブチルスルフィニ
ル）、又はアミノであり、Ｒ３はヒドロオキシ、低級ア
ルキルチオ、（例えばメチルチオからブチルチオ）、ア
ミノ、ハロダン、（例えば塩素、−臭素又は弗素）、又
はメルカプトであり、Ｒはヒドロキシ、メルカプト、低
級アルキルチオ、（例えばメ、チルチオからブチルチオ
）、ハロダン、（例えば塩素、臭素又は弗素）であ！Ｄ
％Ｒ”ｆｌヒドロキシ、メルカプト、低級アルキルチオ
、（例えばメチルチオからブチルチオ）、ハロダン、（
例えば塩素、臭素、弗素）、又はアミノである。好まし
くは　Ｒ１，Ｒ１及びＲ′はヒドロオキシとする。現在
量も望ましいと考えられている化合物は、式Ｉで１１が
ハロ、ダン、Ｒ３がヒドロキシなる化合物である。 弐厘で、Ｒがアミノである様な化合物はモンゴメリーの
ジャーナル・オプ・ヘテロサイクリックケミストリー、
Ｖｏｌ　１７、ｐａｇｅ　　５８３−５８４に報告され
ている。モンゴメリーの場合、この化合物はエテルアデ
ニ／ノ・イドロブロマイドを製造するための中間体とし
て使用されている。抗ビールス作用或は免疫調整作用の
記載はない。モンゴメリーは又Ｒ３としてはアミノ基を
もつジノ・イドロチアゾロピユリンを報告している。し
かし、このシバイドロチアゾロピユリンは式１、ｌ、ｌ
のものとは非常に異った構造をもっている。又、モンゴ
メリーの場合、之等の化合物はエチルアデニノを造る九
めにのみ使用されている。 本発明に於ける化合物の例を下の表、ｌないし■に示す
。 表　　ｌ Ｒ富 化合物　　　　　　　　　　　　　　ＲＩ　　Ｒ＊ａ）
　　３−ハイドロオキシ−７，８−シバ輸ドロチアゾロ
−（３，２＠）−ＨＯＨピユリン（ＮＰＴ　１６４１６
） ｂ）　　３−メチルメルカグトー７．苧−ジハイドロチ
アゾロ−〔３，２・〕−ビニ　　　ＨＳｃｕｍリン（Ｎ
ＰＴ　　１６４３９） ｅ）　　３−ハイドロオキシ−５−メチルメル１６４７
２） チアゾロ−〔３，２・〕−ピユリン ｆ）３−ハイドロオキシ−５−メチルスルｇ）　　３−
ハイドロオキシ−５−アミノ−７，８−ジハイドロチア
ゾロ− 〔３，２・〕−ピユリン　　　　　　　　　　ＮＨ，０
Ｈｈ）　　３−ハイドロオキシ−５−フルオロ−７，８
−シバイドロチアゾロ−Ｆ　　　　ＯＲ〔３，２・〕−
ピユリン ロチアゾロ−〔３，２・〕−ピユリン Ｊ）　　３−メルカプト−５−アミノ−７，８−シバイ
ドロチアゾロ−（３，２＠）−ＮＨ露　ＳＨピユリン 表　　置 化合物　　　　　　　　　　　　　　ＲＩ　　Ｒ露ｍ）
　　６−ハイドロオキシ−７，８−ツノ１イド闘テア！
ロー（！、３ｆ）−ピュリ　　　　ＨＣＨン（ＮＰＴ　
１６４８５　） ｂ）　　６−メチルメルカグトー７．８−シバイドロチ
アゾ０−（２，３ｆ）−ピー’−Ｈ５ＣＨＩリン チアゾロ−（２，３ｆ）−ピユリン ゾロ−（２，３ｆ）−ピユリン ロオキシー７．８−シバイドロチアゾ　ＣＨ，−８０Ｈ
ロー（ｍ、ａＢ−ピユリン ｆ）　　５−アミノ−６−−〜イドロオキシー７．８−
ツバイドロチアゾｏ−ＮＨＩ　　　０Ｈ（２，３ｆ）−
ピユリン ｇ）　　５−フルオロ−６−ハイドロオキシ−７，８−
シバイドロチアゾロ−Ｆ　　　　０）Ｉ（２，３ｆ）−
ピユリン ロチアゾロ−（２，３ｆ）−ピユリン ｉ）　　５−アミノ−６−メルカグトー７．８−シバイ
ドロチアゾロ−（２，ａｔ） −ピユリン　　　　　　　　　　　　　　　　　ＮＨ言
　　５ＨＪ）　　５−メチルメルカグト−６−ハイドロ
オキシ−７，８−ジハイドロチア　　　ＳＣＨｍ　　　
ＯＨゾロ−（２，３ｆ）−ピユリン 表　　■ ■ 化合物　　　　　　　　　　　　　　Ｒリ　６−ハイド
ロオキシ−７，８−シバイドロチアゾロー（３，２ｍ）
−ピュリ　　　　ＣＨン（ＮＰＴ１６４５Ｇ） ナア！ロー（３，２ｍ）−ビニリン ｅ）　　６−メルカデトメチルー７．８−シバイドロチ
アゾロ−（３，２ｍ）−ピュ　　ＢＣＨ署リン ｄン　６−クロロ−７，８−ノハイドロα チアゾロ−Ｃ３，２ｍ）−ピユリン 表　■ ｓ ■ 化合物　　　　　　　　　　　　　　Ｒ８ａ）　　６−
ハイドロオキシ−ビス−（３４−ジハイドロチ７ノロー
８．９− ツバイドロチアゾロ）　−Ｃ３，２・−ＯＨ２，３ｆ）
ピユリン（ＮＰＴ １６４４９） ｂ）　　６−メルカゾトービスー（３，４−シバイドロ
チ７！ロー８．９−＆ハ イ、。、ア、。）−［３，２＊−８Ｈ ２，３ｆ）ピュリン ｅ）　　６−メチルメルカグトービスー（３，４−ジハ
イドロテ７ノロー８．９−シバ ＣＨｓ イドロチアゾロ）−（３，２・− ２，３ｆ）ピュリ／ ピユリン ・）　６−アミツービス−（３，４−ジハイドロテア！
ロー８．９−ジハイドロチ ア、。）−（３，２＠−２，３ｆ）　　　ＮＨ”ピユリ
ン 次の表（表Ｖ）は、本発明の主題諸化合物の代表例の物
思化学的性質をまとめたものである。 代表的化合物の化学的性質 １１／Ｌ　Ｐ、　　　　　　αＨ，Ｎ。 （Ｉｓ）　　　　　　　　　　　　　Ｈ３，１１３，０
２Ｎ　２８．６５　２８．６５ （Ｉｃ）　　　　　　　　　　　　　Ｈ３，３５３，３
３（メタノーヤ、　　　　　　　　　　　　　　　Ｎ２
３．３１　２３．２６（Ｉｂ）　　　　　　　　　　　
　　Ｈ３，５９３，５３Ｎ　２４．９７　２４．８６ Ｎ　２８．８５　２８．９０ （ｌ　ａ）　　　　　　　　　　　　　Ｎ　２８．７０
　２８．７８Ｂ　１６．４２　１６．５６ ＮＰＴ　　１６４４９　　　２５２．３３　　　３０３
−５　　　Ｃ４２，６６４２，８３Ｓ　　２５．３１　
　２５．３０ 表　■（つづＩ） 代表化合物の化学的性質 （１＠）　　　　２７４／１５．３４”ＮＦ２　１６４
５０ （’ｆｆ）　　　　　２３５／３２．４　　２３５／３
２　　２２７／２２．６表　■（つづき） 代表化合物の化学的性質　７　　１、 （Ｉｍ）　　　　　　　　　　　　、、　　１　　襲ｐ
ｏｔＰＬＣ （Ｉｅ） （メタノール） （Ｔｏ） （■１） ＮＦ２　１６４５０ （Ｉａ） （ｍＶ） 本発明の免疫調整剤は、例えば表Ａの諸ビールスによる
侵襲に対する抵抗性を付与する。 表Ａ ビールス　　　　　クラス　　　　疾　病アリナビール
ス　　　　　ＲＮＡ　　　リフトバレー熱病インフルエ
ンザビールス　ＲＮＡ　　　インフルエンザツノビール
ス　　　　　　ＲＮＡ　　感官ポリオビールス　　　　
　ＲＮＡ　　　ポリオはしかビールス　　　　　ＲＮＡ
　　　風疹ニューキャッスル病カルスＲＮＡ　　　ニュ
ーキャッスル病ロタビールス　　　　　　ＲＮＡ　　幼
児の１１１８炎Ａ臘肝炎　　　　　　　　ＲＮＡ　　　
感染性肝炎狂犬病ビールス　　　　　ＲＮＡ　　　狂犬
病脳炎ビールス　　　　　　ＲＮＡ　　　脳炎天然痘ビ
ールス　　　　　ＤＮＡ　　　天然痘単純庖疹ビールス
　　　　ＤＮＡ　　　感冒痛、脳炎、性病帯状庖疹ビー
ルス　　　　ＤＮＡ　　帯状庖疹水痘ビールス　　　　
　　ＤＮＡ　　水痘アデノビールス　　　　　ＤＮＡ　
　呼吸器病Ｂ型肝炎　　　　　　　　ＤＮＡ　　慢性肝
炎、重症肝炎口蹄疫ビールス　　ＤＮＡ　　口蹄疫 マテユポビールス　　　　ＤＮＡ　　　出血性熱病本発
明に＄＼る２等化合物及び組成物は人間、豚、′犬、猫
、牛、馬、羊、山羊、マウス兎、ラット、モルモット、
ハムスター、猿等の哺乳動物（及びその細胞）を治療す
る上で有効である。 本記述中、別段のことわりがなければ、すべての部及び
ノ９−セントは重量によるものとする。又、他に別段の
ことわりなき限り、すべての温度は摂氏とする。゛ 組成物はそこに記された物質を包含し、又は主として其
等の物質より、あるいは其等の物質より成っているもの
とじ父方法は、か＼る物質を用いて、そこに示された諸
工１！！金位含し、或は実質的に其等緒工程から、ある
いは其等諸工程から成る４のとする。 組成物は哺乳動物に対して在来の方法、例えば経口、経
鼻、経直腸、経膣又は腸管外投与を行うことができる。 又注射液、例えば水溶液、或は錠剤、丸薬、カプセル、
などの製剤をもって投与される。 本発明にか＼る化合物は以下に記し実力法により調製さ
れる： ａ−［換−７，８−ジノ１イドロチア！ロー“〔３，“
２′ｅ〕−ピ′ニリン（表ｆ　）　：実施例Ｉ Ｖ　　　　　　　　　　　　ＩＡ　　　　　　ＩＡジメ
チルフォルムアマイド（ＤＭＦ）（６９ｍｊ中に８−メ
ル、カプトハイポキサンチン（Ｖ、６．３ｆ）を懸濁せ
しめ、これに炭酸カリ（５，７ｆ）を加え九０次いで、
エチレンジブロマイド（＆７５−）を滴下（約５分）し
、反応混合物を４時間６５〜７０Ｃに加熱した。一時間
毎に紫外線吸収をチェックし、反応が完了するのを待つ
喪。２５Ｃで一夜放置し、得られた懸濁物をフィルター
し、冷水で（２〜３回）洗滌し庭。洗滌１澄の？■を氷
錯駿で６に調節し、減圧下に乾燥するまで蒸発を行わし
めた。かくして粗結晶物が得られたｊ　、　５．２７Ｆ
　　（７８１Ｇ）；ｍ、ｐ、２７０Ｃ’：　　ｕ、ｖ、
　　λｗａｘ２６９ｎｍ（ＨＩＯ）、２７３ｎｍ（ＯＨ
）。 本製品は二つの化合物の混合−である（化合物ｌａとＩ
ｍが３＝１の比率で混９ている）。 この粗製物を３０慢エタノール水溶液で繰返し再結晶し
、純粋のｌ’　ａを得た。 を、炭酸カリ（２＆７ｆ、　　α１７１Ｍ）を含み、Ｄ
ＭＦ　（５５０ｍ）中に懸濁し九８−メケカグトハイ４
キサンチン（Ｖ　）　（２６，２ｆ、　　０．１５５８
Ｍ）懸濁液中に滴下Ｌｆ−６混合物を５ｓ−ｔ；ｓｃで
攪拌した。４０分後、紫外線吸収及び薄層ンロマトー分
析で反応が終結するのを確認した。懸濁物のｐｉｔを氷
錯酸を加えることによって６に調節、−過によって得ら
れた沈澱物を二度水（２０ｄ）とエタノール（ＩＸ２０
ｇ／）で洗い、空気中で２５Ｃでトゲラフ　（ｔａｌｅ
）では、ｌ＆は検出されなかった。 ３０慢エタノールで再結晶し、純ｆａｔ−得た（ＮＰＴ
１６４１６）、大量のＤＭＦ　（二倍量）を使用すると
本物質の溶解と反応がより容易になるようである。 実施例２ （ｂ）　　ａ−メチルメルカグトー７′、８−シノーイ
ドロチアゾロ−〔３，２・〕−ピユリン（ＮＰＴ１６４
３９）（Ｉｂ） ＶＩ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　ＩＢＤＭＦ（８７５ｍ）中に懸濁した６−メチル
メルカプト−８−メルカゾトビユリ／（ＶＩ’ＩＯ・Ｏ
ｆ）及び炭酸カリ（５８Ｆ）の混合物を２５Ｃで攪拌し
、エチレンジブロマイド（５０ｍｇ）を滴下した。 ７０Ｃで５時間加熱して反応を行わせ、次いで２５Ｃで
一夜放置−した。沈澱物を濾過により集めた。水中懸濁
−は氷錯酸を加えてｐｉを６とした。 沈澱物を濾過により集め、水で洗い、黄色の結晶（１ｂ
）を得た。収率−９２２（８鼾−）、ｍ、Ｐ−２７Ｏｒ
、　　ｔＪ＋　　ｖ、Ｉ）Ｈ−５，５（λ　ｍａｘｍ２
３６、λａｈ　２５７、λ３０９、λ３１３）。 得た製品を７０襲エタノールで再結晶した。′　　。 Ｃｍ　ＨＩ　Ｎ４　Ｓｓ　（Ｄ理論分析値：　Ｃ，４Ｌ
８３　：Ｈ，＆５９　；　　Ｎ、２４．９７　：　８．
２＆５７゜　　。 実測値：　Ｃ，４１８０：Ｈ，３，５３；Ｎ；　２４．
８６；８．２＆７５．　　　　　　　− ８−ジハイ“ドロチアゾロ−（’３．２の）　２五”１
７ｙ（ＮＰＴ１６４７２）Ｉｃ Ｖｌｌ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
Ｉｃ１．２−ジグロモエタ゛ン（２，３６ｍ、０．０２
７−Ｍ・）を、炭酸カリ（１８６Ｆ、　　α０２８０Ｍ
）を含むジメチルフォルムアマイド（５６ｄ）゛−中゛
に２−メチルメルカプト−８−メルカグトハイポキサン
テン（収Ｏｆ、　　α０２８Ｍ）を″懸濁七−た液に滴
下した０反応“混合物を６゛５°−７’ＯＣで“３′時
間加熱した。・′冷却後、°混合物のｐｌｉを氷錯酸を
用けて５に調節した。析出し丸洗澱物をＨｓＯ（３Ｘ　
２−０−）、エタノール（１ｘ２ｏ−）で洗って、淡ク
リーム色の結晶性物質を得た。（Ｉ　ｃ　）　ｕ、マ。 λｃｏａｘ　２３５と２８０　ｎｍ　（ＨＩＯ１ＭＰ２
９８°−３ｏ５Ｃ）　、（ｄｅｃ　）収率５．Ｏｆ　（
７５９ｇ）。 理論分析値Ｃ１’Ｈ＠　Ｎ４０１１ｈ　：　Ｃ，８９，
９８；Ｈ，３，３５；　Ｎ、　２３．３”ｌ　：　８．
２６．６９゜実測値：　Ｃ，３９，８２；　Ｈ，３，３
３：　Ｎ、　２３．２６　；８．２ａ７５゜ ６−置換−７，８−シバイド′ロチアゾロ〔２゜３ｆ）
−ピユリンの合成′。 実施例４ ゛（１）６−ハイドロ矛キシ−７，８−シバ゛イドロテ
ア！ロー（２，３ｆ）−’ピユリン（ＮＰＴ１ｊ＋５ｓ
）ｉ龜 実−′例１の方法ｈ’＜記され晃反応か□ら得られたー
液を減圧下に蒸発乾固せし゛めた゛。得′ら゛五九−白
色の結晶性固体を７０−エタノールで数回再結晶し、純
粋の−′ａを得た。　　　　　　 ｕ、　ｖ、λｍａｘ　２８０．５　（ｐＨ９，５）　：
λｗａｘ　２７７　　（ｐＨ７，０）、ｚ　ｐ：ａｏｇ
’ｃ　（ｄｓｅ）Ｒｆ　　（ＥＴＯＨ，ＨＡＣ，１：１
　）　　α５７゜Ｃ，Ｈ，Ｎ・Ｏ８の理論分析値：Ｃ０
４１２８；Ｈ，＆１１：Ｎ、２＆８５　：　　Ｓ、１６
．５１０実側値：　Ｃ，４３，３８；　Ｈ，３，１３：
　Ｎ、　２＆９０　；Ｓ、　　１亀５８　。 ６−置換−７，８−ジノ・イドロテア、ゾロ−〔３゜２
ｍ）−ピユリンの合成。 実施例５ （ａ）　　６−ハイドロオキシ−７，８−ジノ１イドロ
チア！”−（ａｓ　　２ｍ）−ピュリｙ（ＮＰＴ１６４
５０）　　　厘　　ａ ２−メルカプトノ１イ４キナンテン（２ｔ）をＤＭＦ　
（４０ｍｇ）中に懸濁し、炭酸カリを加えた（１．８１
ｆ）、エチレンジブロマイド（１１８ｄ）を２５Ｃで攪
拌下にしづかに加えた０反応混合物を６時間攪拌下７０
Ｇに加熱し、ついで２５ｔｌ’で一夜放置し九。析出物
を一過によシ集め、水を加えて濃いスラリー状とし、氷
錯酸を加えてｐ■を調節した。沈澱物を少量のく４倍量
）水で洗って黄色の結晶性生成物（厘１）が得られた。 収率ｗＯ１５ｒ　（ｚｌ鳴）、ｍ、　ｐ、　３４０　”
、聾、マ１、ｐｆｌ＝５．５（λｍａｘ＝２７９ｎｍｓ
、　　λｍｉｎ２３３ｍｍ）。 分析すングルは９０係エタノールで繰返し再結晶して調
製し友。 Ｃ，Ｈ＠　Ｎ−４８０の理論分析値：　Ｃ，４３，０６
；Ｈ，１１１：Ｎ、２８．８５：　Ｓ、１６．５０゜実
測値：　Ｃ，４３７６；　Ｈ，３，０７；　Ｎ、　２＆
７８；８．１＆５６゜ ビス−（３，４−シバイドロチアゾロ−８，９−シバイ
ドロチアゾロ）−（３，２・、ｚ、ａｆ）−ピユリンの
合成。 実施例６ （ａ）６−ケドー（３，’４−シバイドロチアゾロー８
．９−ツノ・イドロチアゾロ）−（３，２＠。 ２、ａｆ〕−ピユリン（ＮＰＴ１６４４９）ｌＶｕ。 の合成。 ＩＸ　　、　　　　　　　　　　［ＶａＤＭＦ（２２ｄ
）中に２．８−メルカプトノ１イ４中す／チｙ（Ｉｘ）
（２’）を混合し、炭酸カリ（＆６２ｆ）を加えた。混
合物を２５Ｃで攪拌し、エチレンジブロマイド（’１３
６ｍ）を滴下した。この時反応温度が２．３に上昇し一
罠。滴下ｄｉ終ると、反応生成物ｔ−３時間７０Ｃに加
熱した。 懸濁物は溶解しなかつ九が、紫外線分析で蝶軟化が観察
さ九た。３時間後、反応混合物をＰ別して集め、最少量
の水中に懸濁した。氷錯酸を加えてｐＭを６に調節しえ
。 収率１．５？　（５９１Ｇ）ｍ、ｐ、３４７Ｃ，ｕ、ｖ
、Ｐｔ１−５．５（λｍａｘ２７６、λｍｉｎ　２３６
　）。サンプルは７０−エタノールで繰返し再結晶した
。 Ｃ，Ｈ，Ｎ、　Ｏ８，（７）理論分析値：　Ｃ，４ｊＬ
８４　；Ｈ，３，２０；Ｎ、　２１２１　：　８．２５
．４２　＠実測値：　Ｃ，４１８３；Ｈ，３，１９：Ｎ
、２ＬＯ６：ｓ、２５．３Ｇ。 実施例７ ７．８−シバイドロチ７ノロー（３，２＊）ハイポキサ
ンチン（ＮＰＴ１６４１６）のラネイニッケル処理。 ７．８−−）ハイドロｆ−７７０−（３，２・〕ハハイ
ポキサンチンＩｍ、３０ｑ）を水（１５ｊ）と濃厚水酸
化アンモニューム（３ｗＩｌ）中に懸濁し、ラネイニッ
ケル（約ｚｏｓｖ）を加え良悪濁液を２４時間還流し良
。 懸濁物を熱い内ＫＦ別し、ラネ′イニッケルは熱湯で洗
い、Ｆ別生成物は之を併せ一１減圧下に蒸発乾固せしめ
た。残滓はｕ、　ｖ＝λ。＠ｘ、　２５０　ｍ　ｍ（）
１３０％ｐＨ５，５）、２５３ｎｍ（ＯＨ）　　及び２
５０ｔ＋ｍ（Ｈ）を示し、９−エテルノ・イボキサンチ
ンの一つと区別がつかなかったｂ薄層クロマト（シリカ
ゲル、ＥｔＯＡｅ　：　ＥｔＯＨｏｌ　：　１　）　　
Ｒｆ　’０．３７　：３つの異る溶剤システム中でのワ
ットマン紙上のスイットは９−工≠ルハイ４゛キサンチ
ンのそれと同じＲｆ値を示した。 実施例８ ７、′８−シバイドロチアゾールー（２，３−ｆ）−ノ
・イボキサ／テｙ（ＮＰＴ１６４８５量ａ）のラネイニ
ッケル処理。 水（１００ｍｇ）、濃厚アンモニア（３−］及びラネイ
ニッケル（１００ｑ）中に７．８−ゾノ＼１ドロテア！
ロー（２，３−ｆ）ハイＩキサンチン（Ｉａ％　ｘｏｏ
ｑ）を懸濁したものを２４時間還流し九。懸濁液は熱い
内Ｋ濾過し、ラネイニッケルは熱湯で洗い、Ｆ［は之を
合せて、減圧下に蒸発乾固し九。結晶性の生成物（３０
ｑ）を得た。 ｍ−Ｐ−２５５ｔｌｌ’　：　ｕ、　ｖ、λｗａｘ　　
２５６ｍｍ　（ＨＩＯ，ｐ１５．５）２６０ｍｍ（ＯＨ
−）、２５０ｎｍ（Ｈ）、薄層クロマト（シリカゲル、
ＥｔＯＨ：ＥｔＯＡｃ、１：１　　）Ｒｆ：０．４２　
。 生物学的特性 Ａ　抗ビールス作用− 血液吸着分析法を用いてＮ、Ｐ　Ｔ　１６４１６のイン
フルエンデビールス増殖抑制能を測定した。表Ｖｌカら
分る様ＫＮＰＴ１６４１６は０．０５〜７５μｆ／−の
一度範囲に於てインフルエンザビールス（ＲＮＡビール
ス）を４８−乃至７８−抑制することが出来る。ＤＮＡ
ビールス増殖抑制状況は表ｖｔ　　Ｋ示されており、Ｎ
ＰＴ１６４１６が濃度範囲３７．５〜１５０１ｔｆ／−
に於てＨ８Ｖを３３−から６５９！抑制することが分る
。 表　　■ ビールス増殖に及ぼすＮＰＴ１６４１６の効果Ｖｉｒｕ
ｓ−Ｔｙｐｅｌ　　　　　　−−−３３６１６５Ｂ　免
疫調整作用 式１．ｌ、Ｉ及び■のシバイドロチアゾロピユリン誘導
体の免疫システム調整能を次のシステムを用いて試験管
内及び生体内で試験した。 （１）　　鼠の膵臓細胞を用いた。 ミド−ダン（リーポリ゛サッカライ゛ド、ＬＰ８又ｔｉ
ｃｏｎＡ）＠導すン・９球増殖（試験管内）（２）　　
ルン７オカイン（マクロファージのミトーグン要素ＭＭ
Ｆ）＠導のマクロファージ増殖（試験管内） （３）　　抗原（羊の赤血球、８ＲＢＣ）依存抗体の合
成（生体内］ （４）　　ヌードマウスに於けるθ陽性細胞の誘導（試
験管内） の調節。 １、　表１に示されたデータは明らかにＮＰＴ１６４１
６がＬＰＳ誘導り７７９球増殖を増大せしめる（３０−
１８０１１）能力があることを示している。ＬＰ８はＢ
−細胞に選択的に作用するミド−ｙ　ノである＠　Ｎ　
Ｐ　Ｔ　１６４　ｉ　６　Ｉ／１Ｃｏｏ　Ａ誘導の増殖
（Ｔ−細胞）には殆ど又は全く影響をもたなかった。表
ＩＸ　　中のデータの示す処によれば、Ｎ−ＰＴ１６４
２２　（Ｉｄ）ＮＰＴ１６４３９は明らかにＣｏｎ　Ａ
誘導増殖の抑制能がある。Ｃｏｎ　ＡはＴ−細胞ミト−
ｒノの一つと考えられる。 Ｚ　　ＮｐＴ１６４１６は又ｉクロ７アージのリンフ才
力イン（ＭＭＦ）誘導増殖を増大せしめる能力がありマ
クロファージ増殖を７９ｚｆ−セント増大せしめる。 ３、　表■と、Ｘ−のデータは明らかにＮＰＴ１６４１
６がマウスの５ＲＢＣに対して抗体生産を増大せしめる
ことを示しておりその程度は０．０１ｖ／Ｉｔで１８〜
２２６パーセントである。 ＮＰＴ１６４３９（Ｉｂ）Ｆｉ抗体生産の抑制能をもつ
。 表　　■ ３−ハイドロオキシ−７，８−ハイドロチアゾロ−（３
，２・〕−ピユリン（ＮＰＴ１６４１６）の免疫調整特
性 マウスの膵臓細胞を用いた試験管内 圧於けるミドーｙン誘導リンパ球増 殖の刺激効果 ＮＰＴ１６４１６（Ｉｍ）− ・−＼１ ０　Ｃｏｎｔｒｏｌ　　１９．４　　　　５９．０１０
　Ｄｒａｇ　　　　１７．３　　　　６１．８１００　
Ｄｒｕｇ　　　　２０．６　　　　６０．８１、０００
　Ｄｒｕｇ　　　　１　＆８　　　　６０．８２、６０
０　Ｄｒｕｇ　　　　１９．１　　　　５４．０５、０
００　Ｄｒｕｇ　　　　２１．５　　　　５９．７２５
、０００　Ｄｒｕｇ　　　２１１　　　　５９．０５０
、０００　Ｄｒｕｌ　　　　２０．２　　　　５　＆６
表■ ３−ハイドロオキシ−７，８−シバイドロチアゾロ−〔
３，２・〕−ピユリン（ＮＰＴ１６４１６）の免疫調整
特性 マウスの膵臓細胞を用いた試験管内 に於けるミドー゛ｒ７誘導リンノナ球増殖の刺激効果 ＮＰＴ　１６４１６　（・””　　　　　’　　　７．
＜ｉ＜ＯＣｏｎｔ’ｒ’ｏｌ　”　”’ １０　Ｄｒｕｇ　　　１．４５８　　　　　＆　６０３
１００　Ｄｒｕｇ　　　ｌ、　７６０　　　　８−５１
８１、０００　Ｄｒｕｇ　　　１．５１５　　　　　＆
　６８９２、５００　Ｄｒｕｇ　　　１．５２２　　　
　７．９７５５、−０００　Ｄｒａｇ　　　１．８８１
　　　　７．７８８２５、０００　Ｄｒｕｊｒ　　　２
．７８９　　　１１．６８３５０．０００Ｄｒｕｇ　　
　＆’１３’２　　　’１４．０６５表　　■ ３−ハイドロオキシ−７，８−シバイドロチアゾＣＩ−
（３，２・〕−一ュリン（Ｎ門Ｔ１６’４１６）の免疫
調整特性　　　　　“ マウスの膵臓細胞を用いた試験管内 に於けるミドーｒｙ＃導り／ノ量球増 殖の刺激効果 ＮＰＴ　１６４１６（１ｍ）　− ＱＣｏｎｔｒｏｌ　　−− １０Ｄｒｕｇ　　　、８５　１１０　　１．０４　１．
０５１００　Ｄｒｕｇ　　　１．０５　１．５７　　１
．０２　１．１４１、０００　Ｄｒｕｇ　　　、９３　
１Ｊ５　　１．０３　１．１７２、５００　Ｄｒｕｇ　
　、　９８　１Ｊ６　　．９１　１．０７−５．０００
　Ｄｒｕｇ　　　１．１０　１．６８”　　１．０１　
１．０５２５、０００　Ｄｒｕｇ　　　１．ｉ３　１４
９ｂ１．０１．５７’−１ｆ　ｒａｔｌｏ　　ＣＰＭ　
ＤＲＵＧＣＰＭ　Ｃｏｎｔｒｏｌ ａ　ｐ＜α０５ ｂ　ｐ＜α００５ ａ　ｐ＜　０．０２５ 試験管内に於て無胸腺マウスの膵臓細胞を培養し、Ｎ　
Ｐ　７１６４．１６の効果を検べた処胸腺陽性対して１
２５　）’−セントの増加を示しＮ’ＰＴ１６４１６が
′Ｔ−細胞欠乏個体ＫＴ−細胞を生産せしめる効果があ
ることを示゛した（試験管内）。 試験管内ではレノ々ミゾール（Ｂ）ｔ；ｊこの作用をも
たない。 加えてＢａ１ｂ／Ｃマウスを用いた予備的な毒性試験で
Ｆｉ５０ｑ／ＫｇのＮＰＴ１６４１６　（１，１１−３
？投与した場合死亡例は見られなから九。若し５０ｑ／
りが最低致死量であり、＜、０５＋ｖン時の最低治療可
能比率は５０１０．０５即ち１０００／１．０＋−５ れ、経口では、５００ｑ／Ｋｅでも）−ルプイＣマウス
に死亡例は興られなかった。 表鴇 免疫調整特性。 ５ＲＢＣ免疫バルブ／Ｃマウスに　　　　　、於ける１
ｊＭ抗原生産の調節 物質　　　、 ５ａｌｉｎｅ　Ｃｏｎｔｒｏｌ　　　　　２１±１．１
−ＮＰＴ　１６４１６ｆ１ｍ）−０，０５３９±３．３
４ＮＰＴ　１６４１６（ｌａｌ−０，５３５±２０６　
　　　　＋　　６６ＮＰＴ　１６４１６（Ｉａ）−５，
０９±０．３７　　−５λ゛　　　　　　表　！Ｘ シバイドロチアゾロピユリンの免疫調！１％性試験管内
に於けるＬＰＳ、Ｃ０ＮＡ誘導増殖め比較（ｌ／に大値
） 化合物　　　　　　　　　ＣＯＮ　Ａ　Ｃ，３７，５Ｌ
ＰＳ（＃度　ｎｌ　／　＋Ｊ　　　　　　　　μＷ／／
ｎｌｌ　Ｄ／Ｃ（５Ａｔ／ｒＪ　）ＮＰＴ１６４１６（
ｌａｌ　　（１，００（１）　　　　　１．１８　　　
　　　　１０１（２５，００’０）　　　　１．１８　
　　　　　″之３６゛ＮＰＴ１６４８５（Ｉｌａ）（２
５，０００）　　　　　１．１８　　　　　　１．８５
ＮＰＴ１６４５０（Ｉｍ）　（２５，０００）　　　１
．０７１１、１，１８ＮＰＴ１６４４９（ＩＶ）（２１
，０００１１，００１，５７ＮＰＴ１６４７２（ｌｅ）
（１０）　　　　　　　　ｉ、００　　　　　　１．３
１ＮＰＴ１６４２２（Ｉｄ）（２５，０００）　　　　
　０．２０　　　　　　０．３７ＮＰＴ１６４３９（ｌ
ｂ）（４，５００）　　　　　０．５７　　　　　　１
．ＯＣＰＭ　　Ｃ０ＮＴＲ０Ｌ １ 表　　　Ｘ ノ・・イドロテア！ロピュリンの免疫ａｉ４ｉｉ特性、
窄 ５ＲＢＣＫ対する抗原尽応の生体内に於ける！１４整作
用の比較 ＮＰＴ　　１６４８５（ｌ１ｍ）　　　　＋２８＊　　
　　　　　　＋１３４＊　　＋１．７（Ｎ、８．）ＮＰ
Ｔ　’・１６１７２（１＠）　　＋１３’埜・・　　−
ＮＰＴ　１６４３９″（Ｉｂ）−４０チ＊、−６３１Ｇ
ＮＰＴ　１６４４９（ｌＶａ）　　”８３＊＋５’　　
−ＮＰＴ　１６４５Ｇ（ＩＩＩ婦　・−６４＋１５　　
＋３６”−ｔ□ １４０・−０，Ｏ３５７／ｋｌ ＊ｐ＜ｇ、ｏｏｘ　　　　　　　　　　　　　　。 Ｃｏｎｔｒ＠ｌ　（Ｂｍｌｉｎ＠）　　”　　　　　　
　８　　　　　　’丁ｈｙ＋ａ１ｇ　　Ｆａｃｔｏｒ（
０，０１）’　　−２９− ＮＰＴ　１ｔ４ｘａ（Ｉｍ＞　（０，００５−０，０１
）　　　　　　１４ＮＰＴ　１６４１６（Ｉｍ＞　（０
，０５−０，１）　　　　　　　１８ＮＰＴ　１６４１
６　（１ｍ）　（０，５−１，０）　　　　　　　１７
ａ、三つＯ実験の方法 正常な志願者から得九すンツク球と共に試験管内活性Ｅ
−ロゼツトの賦活は生物学的に重要である、には欠乏し
ている６とが分っているからであ仝。 ２０′乏を元通ｐ、Ｋｆｈ−１患者１背１有４ＮＰＴ　
１６４１ｆｔの免疫調整効果 Ｅ−μゼット（活性）の賦活 Ｃｏｎｔｒｏｌ　　　　　　　　　　　　　　　　３７
　　　　　　　　−ＮＰＴ　１６４１６（５Ｘ１０　　
　）　　　　４２　　　　　７．　ｅＮＰＴ　１６４１
６　（５Ｘ１０　　）　　　　　５８．５　　　　３４
Ｓ ＮＰＴ　１６４１６（５Ｘ１０　　　）　　　　　　　
　６２．５　　　　　　　３６゜５ＮＰＴ　１６４１６
　（５Ｘ１Ｇ　　）　　　　　５５．５　　　　２３Ｎ
ＰＴ　１６４１６（５８１Ｇ　　）　　　　　４３　　
　　　１０本発明にか＼る物質は標準値織培養法を用い
た時ＲＮＡ（インフルエンず）　ＤＮＡ（ヘルペス）の
ビールスの何れの代表的サンプルについて４この増殖を
抑制することが判った。　ＲＮＡビールスの場合ハイン
フルエンデビールスの成長ｔ４８〜７８ノ臂−セント抑
制する仁とが試験管内テストで示されえ（衆ｌＯ）、こ
の時のｌ１１度範囲は０．０５〜１５０．２声ｌ／−で
あつ九、又ＤＮムビールスの場合は３７．シー１５０声
１１７ｄで抑制率３３〜も５Ｉ譬−セントであった。 其他のＲＮＡ、ＤＮＡｆｌｍのビールスについては夫々
の疾病と共に表ムに示した。 更にビールスの内の幾つかは腫瘍を発生せしめるので抗
ビールス剤はこの場合抗腫瘍特性をもつことになる。 ビールスの橡に多くの感染源（インフルエンデビールス
、Ｈ８Ｖ、７レンド白血病ビールス）バクテリア及び繭
は宿主に免疫作用を抑制した状態を生ぜしめ感染による
感染に対する防衛力が弱くなる。其他殆どの抗ビールス
抗代鑵生成物物質例えばＡｒａＣの様なものは宿主の免
疫防衛機構を抑制し身体に之が具わった防衛機構を弱体
化し、二次感染を促進する可能性を４つ。 免疫増大剤又は免疫１４Ｍ剤は低下した免疫機能を囲復
し又は正′當な免疫機能を促進し、又はその双方を行う
物質である。免疫機能とは体質的免疫（抗体による）、
ｍ胞の免疫（胸腺細胞の働き又ｉｊ　マ／　ｏファージ
や顆粒細胞の力による抵抗性の発達と＃Ａと定義づけら
れる。 理論的に、それは免疫反応Ｏ表ｊＪｉＫ直接関与す゛る
細胞に直接作用する物質或は免疫反応に関与する細胞の
機能を変・化せしめる細胞又は分子機構に直接−きかけ
る物質を含む奄の工ある。免疫機能の増大は免疫システ
ムに対する体内、外的なマイナスの影響によ）誘導され
る免疫抑制機能を痩絶する剤の作用から４得られる。シ
九がって免疫賦活剤は多様な作用機序をもっている。唯
免役賦活剤の細胞内に於ける作用点並びに矢化ネ的作用
機序の多様性にか＼ｔらずそれが用いられる方法は基本
的ｒｃ　ＰｉＪじである。即ち、宿主玩抵、抗力を増大
する＠に使用するということである。 免疫賦活剤の応用 １、免疫システムの主たる保ｉ１＃！機能は病原体例え
ばビールス、す・ケラテア、ミコプラズマ、バクテリア
、薗並びＫあらゆる一類の寄生生物の侵襲に対する抵抗
力の附与に関わるものである。 し九がって免門反応の改善、特にそれが低下している場
合、之を改善することは計算上は上記病原体の何れによ
る感染に対しても抵抗性を増大することになる。したが
って免疫賦活剤は単独で又は他の抗感染症治療法と併用
してあらゆる　　　゛感染症に適用しうるものである。 ２　免疫システムの第二の保―機能は異物の接合に対す
る抵抗即ち子と母親の関係の様な自然の接合虞Ｆｉ整形
医の行う様な人工的な接合に対する抵抗であると考えら
れる。胎児や胎盤組織の排出を容易ならしめる免疫賦活
剤の使用或は異物接合に対する体の許容度を調節し増大
せしめるために之等を用いることも理にかなっている。 ３、　免疫賦活剤の第三の保−機能は瘉に於ける様な悪
性細胞の増殖に対する抵抗性と考えられる。１［ｌに免
疫賦活剤を使用することは、腫瘍の排出を促すという意
味で理にかなっているし、また他の治療法を適用した後
で腫瘍の再発を抑制するという意味で理にかなっている
。 ４、第四の保−機能としては異物を異物としそ認知し正
の抑制機構による自身に対する不活動を維持する能力が
ある。自己免疫又はそれに関連する′不調では免疫反応
性が自身の抗原に対して向けられ或は自身を破壊する様
な異常に増電した状態になつ−てムる。免疫゛賦活剤は
正常な抑制機構を復活し貯容性を与え其他正常な免−反
応を促進するために使用することも理にかなっている。 ２等免疫システムの保−機能の各々は免疫賦活剤単独で
又は抵抗性を改善し又は侵入する病原体を殺す丸め使用
される他の剤と併用して非特定治療を行うことによシｌ
ｉｌ贅することが可能である。 更には免疫賦活剤を他のタイプの抗原と共に使用するこ
とによ〕特定の抵抗性を増大せしめ２ることが出来る１
例えばビールスや腫瘍細胞勢とワクチンを併用する様な
場合である。この方法＃ｉ特定の免疫性或は許容性を給
与することが出来る。後者は例えばアレルギーや自己免
疫疾病に於て抗原と共に用いる場合等である。免疫賦活
剤は治療剤として又は予防剤として使用される、後者Ｆ
ｉ％に老年で感染や自己免疫や瘉がより多発する場合等
である。投与のタイミングと経路は色々あるがそれによ
って陽性の反応が出るか陽性の反応が出来るかが決定さ
れる上で非常に大切な要素である。免疫反応を刺激増大
せしめうる剤は同時にその投与のタイミングや投与量に
よっては免疫を抑制する方向で働く、シたがっである種
の状況下では免疫賦活剤はアレルギー中自己免疫中整形
上の移噛の場合に免疫抑制剤として使用される。 試験管内の交配技術が現われ又モノクロナール抗体の生
産が開始されてからはある種の免疫賦活剤は商業目的の
丸めに抗体生産を増大せしめる抗体生産Ｂ細胞の機能の
調節に利用さ懸る可能性４出て来九、事実ＮＰＴ　１６
４１６其他ＮＰＴシリーズの化合物（ＮＰＴ　１６４８
５．１６４４９　）は試験管内で非特定細菌ミド−ｒン
（Ｌｌｌｌ）Ｋ反応してＢ−細胞の増殖を促しくＪＲ■
）又生体内例えば羊の亦血球細胞（Ｓ鼠ｉｃ）で免疫を
与えられ九マウ、スの体内で特定の抗体の生産を促進す
ることが判っている（＃ｉ！■、■）。 更に抗体生産の抑制は自分−・身に対抗する抗体を自分
の体が生産する自己免疫症の場合や整形接合物の＃論を
抑え、る場合など有用である。？：、の化合物シリーズ
の内のあるもの（ＮＰＴ　１６４２２．１６４３９　）
は試験管内でＣｏｏム鱒導の゛膵臓細胞の増殖を抑制し
又同時に生体内で抗体の・生′産を抑制する餉自をもっ
ている。 したがってこのシリーズの化合物は免疫反応を調１ｍ（
増大抑制）することが出来る、Ｂ二細胞反応の調節剤が
有利に鋤く様な疾病？タイプを次、に“体質性免疫欠乏
症（Ｂ−細胞欠乏゛）”なる見出しの下に−詳しく紹介
する′、−１・ 本発明の化合物は特にＤＮム、ＲＮＡビールスの増殖を
抑制し、免疫反応を調節する餉きを４つ。 試験管内及び生体内の試験では前者の場合０，０５〜１
５０８９７−の濃度範−で又後者の場−合９．０５〜５
０ダ／＃の範囲で活性があることが示されてお）、之に
基づいて考えると哺乳動＊Ｖｅ’ｉけ、る有効投与量は
０゜ｏｏｏｓ〜５０ダ／＃、と考えられる。 体質的免疫欠乏 （Ｂ−細胞欠乏）、、４ ＃Ｉ２．にリストし、九諸失調に於い不一−劇感染に患
する病原菌は肺炎画・イア　７　ｋ　１７デ桿曹・葡萄
状球菌、髄膜炎１、シュードモナス　エルギノナである
・多くの１−ミラに対腎ては免疫をも９ているのが普通
であるが、血清肝炎を起すビールス、だけは例外４であ
る０診断は体質的免疫輝や臨床２状況を分□゛析するこ
とによシ可能である（表１）。 表　　　１ 体質的免疫欠乏症症候群　　　　　 ＊　・激しい細°曹感染症の再発：肺ム、髄−炎、耳炎
、敗血症、゛−ビドダーマ’（ｐｙｓｌｏｄ＠ｒｍｉ）
胃腸炎細繭名：肺炎゛曹、葡萄状球菌、゛髄膜炎菌、シ
ュードモナス、Ｈ，イジフルエ゛ジデ繭 ＊　湿疹 ＊□重篤な肝炎 ＊　栄養不良　発育不良　　“゛ ＊　゛淋色節や膳桃線が非常、に／Ｊ）さい゛ケ＊　吸
収不良、慢性的下痢、ｇｉａｒｓｌｌａｍｌ−ｓ、合併
被：関節炎、吸収不良、白血症、好中球欠乏症　血小板
欠乏症゛コラ“−゛ｒン血液疾病甲状′腺迄等 表　　　　２ 免疫欠乏症 一次免疫欠乏症候群のリンパ細胞欠陥 網状組織増殖但書　　　　　　　　７＠ＩＩ　　　　　
７＠思５ｃｘｄ”）＠腺ａｌｙｎｙｈｏｐｌａｉａ　）
　　　　ｙｖ　＠　　　　　　ｙｍ　５８ＣＩＤ（スイ
ス蓋）　　　　　　　　　７＠ｌ　　　　　　７＠＠Ａ
ＤＡ欠乏、伴５ＳＣＩＤ　　’　　　　　ｙｅｓ　　　
　　ｙｅｓ皮膚外形成米ｉ二株儒を伴う５ＣＩＤ　ｙｅ
ｓ　　　　　ｙｅｓ−８ＣＩＤ（％発性）　　　　　　
　　　ｙ・易　　　　　ｙ・１Ｂ−細胞に主として影響
する疾病 先天性プンマダロプリン欠乏症　　ｎｏ　　　　　　ｎ
・一般可変免疫欠乏症　　　　　　　ｎｏ　　　　　　
（ｎ・）！ｇム欠乏症　　　　　　　　　　１１０　　
　　　ＣＩＣｌｌ０）Ｉ欠乏症　　　　　　　　　Ｉ、
　　　　　ｎｏ。 ＩｇＧＬｋｊＬ　　　　　　　　、　　　ＩＩ（ｌ　　
　　　　ＩＩ＠ＩｇＭの上昇した免疫欠乏症　　　ｎｏ
　　　　　　ｎ。 胸腺腫を伴うグロブリン欠乏症　　　ｎｏ　　　　　　
　ｎ。 Ｔ−一細胞に主として影＃を及ぼす疾病胸腺形成不良（
ネゼロフ症候＃）　　７＠ｌ　　　　　　Ｆ＠ｌデイジ
ョージ症候＃Ｆ＠Ｉ　　　　　　Ｆ＠ＩＩＩＬ雑性免疫
欠乏症 ウイスコットーアルドリツヒｆｆ１ｌＡ軒ｙｅｓ　　　
　　　　ｙｅｓ運動失調−母斑症　　　　　　　　（ｙ
＠ａＪ　　　　　Ｆ＠１＾ＩｇＥ症候＃　　　　　　　
　ｎｏ　　　　　Ｆｅ２（１）リン／４細胞分化の第一
、第二側を示す。 （２））　　ｇｃＩＤ＝重篤複合免疫欠乏症。 （３）　　（）内の文字はその重篤度又は発現の仕方に
変化のある欠陥を示す。 （４）　　最近の証拠は過剰に抑制的な細胞活動の存在
を示している。　　　　− 表　　　２　（続”） 免疫欠乏症 一次免疫欠乏症候群のリン／譬細胞欠陥網状組織増殖徂
害　　　　　７＠Ｉ　　　　　７０．８．Ｃ，、ＩＩ）
　　（胸腺ａｌｙｑｈａｐｌａｍｉｍ）　（Ｆ＠ｌ）”
　　　Ｆｅ２（２） １４、ｃｔＤ（スイス瀧）　−１，（ｙ＋ｍｓ）　　　
　（ｙす）ムＤム欠乏を伴う８ＣＩＤ　　　　（ｙ・畠
）　　　　（ｙｅｓ）皮膚形成不良・像儒を伴う８ＣＩ
Ｄ　　Ｆ・−１０ＩＣＩＤ　（轡尭性）　　　　　　１
・−ｙ・Ｓ主としてｌ−１１１胞に影響する疾病　　　
　。 １ｇＭ欠乏症　　　　　　　　筋Ｏ！ ＩｇＧ亜欠乏　　　　　　　　　ｎｏ　　　　７１ｇＭ
上昇を伴う免疫欠乏　　　ｎｏ　　　　（ｙ＠５）Ｔ−
細胞に主として影響を及ばず疾病 ｌ″ＩＩＩ″１ｉｄ−ＴｊＬ−（＊＃“７　　い。）０
．。。 症候群） ディｙＮ−ジ症候群　　　　　ｎｏｎ・内分泌異常を伴
う慢性 粘膜皮膚カンデイメ症　　　ｍｅ　　　　　ｍ・複雑性
免疫欠乏症 ウイスプットーアルドリツヒ症候群　ｎ・　　　　　（
ｙ＠ｓ）運動失調−母斑症　　　　　　−・　　　　（
ｍｓ）高ＩｇｌＣ症一群　　　　　　　ｍ１６　　　　
　ｍ・（２）　　５ｃｔｐ＝重篤゛複゛合免疫欠乏症（
３）　　（“）内の文字はその重篤度又は発現の仕方に
変化のある欠陥を示す （４）　　最近の証拠は過剰に抑制的な細胞活動の存在
を示している しかし特定の免疫反応を開始せしめることはＣＭＩにつ
いてはマクロファージとＴ−細胞個体数の間の遺伝的な
制約をうけた一連の複雑な相互作用を含み又抗体反応に
ついては之等の細胞とＢ−細胞との間のそれを含んてい
る。Ｔ助因子Ｔｅ制因子細胞は夫々Ｂ−Ｊｌ胞反応に対
し正及び負の制御効果をもつ、一方ＩｇＭとＩｇＧ抗体
は表３に見られる様に２等クラスの免疫グロブリンのＦ
ｅ９分に対する特定受容体を通してＴ−細胞の機能的に
明確な個体数の活動に影響を及ばず。 表　　　３ 琴崗類の寄生虫誘導性免疫欠乏症についての実験的調査
結果 應参勤−： Ｐｌａｓｍ＠ｄｉｗｍ　ｙｓ＊１１１林　　　↓　　↓
→Ｐ、　ｂ＠ｒｇｋ＠ｌ＊＊　　　　　　　↓　　　　
↓１１ａｋ＋ａｍｌａ　　ｍ１ｅｒｅｔｌ　　　　　　
　　　　　　↓　　　　　　　↓→テｒｙｐａｎｏａｏ
ｍａ　　ｂｒｕｃ＠ｉ　　　　　　　　↓　　　　　　
　↓Ｔ、　　ｃｏｎｇｏｌ＠ｎａ＊　　　　　　　　　
　↓Ｌ＠量−ｋｍａｍｌａ　ｍ＠ｔｈ１ａｐ１ｅａ　　
　　↓憔４： Ｓｃｈｉｓｔｏｓｏｍａ　ｍａｎｓｅｎｉ　　　　　　
↓　　　　　↓Ｆａｓｅｉ＊１ａ　ｈ＠ｐａｔｉ＊ａ　
　　　　↓Ｔｒｌｅｂｌｎ＊１１ａ　１ｐｊｒａｌｉｓ
　　　　　↓　　　　　↓→鯰不変；↓−急速に低下；
↓→−反応が一定でない ＊　抗体欠乏は通常各種の赤血球又は可溶性抗原に対す
る反応を一定して調査しえ。ＣＭＩＲ査は異物接合排除
、皮膚感受性上昇剤及びＴ−細胞ミ）−５’ンに対する
反応に関して行われた。 ＊＊リンパ腫原因性ビールスに対する感受性を増大させ
る。 製剤 本発明による化合物は哺乳動物に対して体重ｌ＃当）１
〜１０００ン９ダ２ムの投与量で投与出来１４当Ｊ）０
．０００６ミリ゛グフムという低いレベルでも効果を構
わず。 人に対しては錠剤又はカブ七゛ル製剤で投与するか、溶
解性に問題ない時は水溶シロップ又は油嬉剤或は不溶性
の時は懸濁液として用いることも出来る。 典撤的な製剤法を下に示す。 カプセル： ＮＰＴ　１６４１６　　　　０．１〜５００〜懸濁液 有効薬剤物質と幾つかの旙濁物質を組合せて水溶性懸濁
液をりくる、か＼る懸濁物質としてはカー＃中シメテル
セルローズソー〆、Ｎａアルギネート、ｔムトラガカン
ス、アヴイセルＲＣ−５９１（１１細結Ｊ［セルローズ
）、メチルセルローズ、グエーゴム、クナンタンがム等
がある。懸濁物質に加え、甘味剤フレーバー、着色剤、
防腐剤、保−コロイド、分散剤等も加えてよい。 ７ｒ１ツク製制 コーンシュガー　　　　　　　　　　　３．２５９蒸溜
水　　　　　　　　　　　ｏ、ｏＢＦＤ及びＣＲ・ｄ　
４０　　　　　　　　０．００１７５ｐサツカリンンー
ダ　　　　　　　　　０．００２５Ｍ＋米国局方アルコ
ール　　　　　　　　　ｏ、ｏＢ米米国局方メチルフシ
ペン　　　　　　０．００５．＠グリセリン　　　　　
　　　　　　０．００１チエリーフレーバー　　　　　
　　　　　０．＄１２２５９果物のフレーバー　　　　
　　　　　　０．００８２５１ｉ蒸溜水　ｇ、ａ、ａｄ
　　　　　　　　　　５ｍ１錠　　剤 ＮＰＴ　１６４１６　　　０．１−５００１１ｇアグイ
セルｐＨ１０１１３０Ｗｖ 変性ｒンデン　　　　　　　　　　“　　２０〜米国局
方ステアリン酸マダネシューム　　　　　５．′５ダ４
リビニルビロリドン　　　　　　　　゛２２１１ｊｆ！
米国局方ステアリン９　　　　　　　　３０Ｉｖ方法 上に述べた＃１％性を測定するため次の方法を用いた。 １、　ノ譬ルプ／ａＪ１＊マウス生後７〜８遍を２０〜
２４週になるまで使用 ｉ　頚部ｔｊＪ所により動物を屠殺その体の左側に７０
パーセントエタノールを塗布肋骨下部と骨盤の間をえて
に＃方から後方にかけて切間、皮膚零細。 この時点からあとは無菌技術を使用。 ３、滅１鉗子で肺臓を靜かに摘除脂肪層を除き牌を３ｗ
ｔ（１）冷却無血清ＲＰＭＩ−１６４０の入った無菌６
０ｗ４）す皿にとる。之に抗生・殺菌製剤溶液（ＧＩＢ
ＣＯｌＣａｔす５２４）、Ｌ−グルタミン、２１レー（
ＧＢＣＯ）を加え砕いた氷の上に置く。 評絨をすべて集め、清掃し九後３−の冷ＲＰＭＩを入れ
た第二のベトリ皿に入れる。 ４、綽＃！績胞虐濁吻は滅菌刃で組織をしづかにミ／テ
シ、φ１００のステンレススチールメツシュを通して一
過してｇａｌｌする。残った組織はＩラスペストルでし
づかに押して残った細胞を出し２〜３−の冷却無血清Ｒ
ＰＭＩ　−１６４０で洗滌する。 ５、次いで細胞ｍｍ＊を二度冷ＲＰＭＩ−１６４０中で
遠心分離して（１０００ｒｐｍ、４℃３０分）洗う、沈
澱した細胞製剤は丹び抗生物質を入れ九ＲＰＭＩ−１６
４０２ｍｇ　（牌ｍａす）で細胞の固シをはごすため充
分な攪拌を行いつ一再懸濁する。 ６、上記懸濁物の分画を用意して細胞数を数える二０、
１−の懸濁液を３−錯酸で１．０−に薄め少くとも５分
間室温に放置する０次いでサンプルを“イソトンｌ″（
カーチスーマチソン４ｋ）で１：１００に博めコールタ
−カフ／ターで細胞数を数える。 コンカナバリンＡ（ＣＯＮＡ）、す１１！／リサツカ２
イド（ＬＰＢ）、アロｒネイツク肺臓細胞（ＬＭＣ）を
用いたネズミの牌細胞刺激下に述べた処Ｆｉ標準方法で
あって、特定供試化合物の溶解性其他の特性に応じ修正
すべきものとする。 Ａ　溶液展剤 １、添加済ＲＰＭＩ−１６４０ ａ　　’ＲＰＭＩ−１６４０（ＧＩＢＣＯ）−５００ｍ
ｇビンを４℃に保管。 ｂ　ヘペス緩輌１１Ｋ　（ＦＬｏｖ　）　　−粉体を４
℃で保′管。 ｅＡＭ（抗生殺菌剤ＧＩＢＣＯ） ベニシリｙｔｏ、ｏｏｏｕ／ｓｇ、ファ”ンジゾン２５
　ｗａｇ　／　ｔｄ、ストレプトマイシン１０ｅ０００
ｍｃｇ／−をｌｄに分割−２０℃に裸管 ｄＬ−グルタミン（ＧＩＢＣＯ２００ｎ＋Ｍ）を５−に
分割−２０℃に保管。 ＲＰＭＩ−１６４０の各瓶に５−のＡＭと−のＬ−グル
タミンを加える。１０ｍ［）ＲＰＭＩを！、７１１Ｄヘ
ペス及びヴオーテツクスに完全に＃１４’るまで加える
。へ（スｍ液を１０−シリ／〆を用い０，２２μｍ２μ
ｍアクロブｍｍｍに加える。使用呻まではＩＩｌ力１い
処に保管する。 ２、牛の胎児の血清（ＦＣ８％細菌アソシエーツ）ｔ２
−に分割し一７０℃で保管する。 ３、　１ＰＭＩ−１６４０にマ后トマイシンＣ（カルビ
オヘム（シ）５０■／６６７−を加え九ものを分割し一
７０℃に保つ。分析に供するまでチューブは箔につ＼ん
でおく。 ４、ＰＢＳ（讐クツイド１ｂ）−５錠を５００５ｍｇの
ａｍ水に溶かしオートクレニプに入れ４℃に保管する。 ５、　　ＣｏｎＡ（カルビオヘム−３＋）−ｉｏｏｗ９
／ｓｇｍ水注射液（マッグ＝／−−１ｐ）、フィルター
し１−分画とし一７０″ＣＫ保管。 ６、ＬＰＢ（シグマ、Ｅ、　Ｃｏ１１−にロタイブ◆０
１１　：　８４　）　−〜１１１９／ｓｇ　　ＲＰＭＩ
−１６４０にム、−及びＬ−グルタミンを添加、ヘペス
（０，３５１１ｊ＋）を溶かす丸め１０−をとプヘペス
ｉ液をフィルター、４つの２５ダ瓶φのＬＰＢを残余の
一一一中に入れ３７℃で１時□間培養、０．２２μ翼フ
ィルターで一過し、Ｐ過し九ヘペスな加え２−分画とし
一７０℃に保管。 ？、　　ＮＰＴ−１５３９２−５００−の塩水注射液（
マッグｆ−ｉ？）に５００〜を加え１時間４５℃の水浴
上で培養、０．２２μ鼠フイルターで一過、更に０．０
２５μｍフィルターでｅ過ａ１５ｐｓｉ（２５０℃）で
１５分間オートクレーブ内に置く、分画を０．ＩＮ塩酸
水に１：２５の割合で溶かし分光分析針で２５０２で吸
光を絖む。次式から濃度な針“算。 各種の量の分画をつ＜Ｊ）　−２０℃にて保管。 ８、トリチェーム標識ナイミジン（”Ｈ−ＴｄＲ。 シュワルツマン、６　Ｃ１／　ｍＭ　）　ｌ　ｅｃシリ
ンジを用いグアイアルから必要量よプ少し条目に”Ｈ−
ＴｄＲを取シ小さな無薗グラスナックテエーツの中ヤツ
！中に入れる。１：１０００稀釈に必要な量を細胞検定
の際一つ九温めた添加済ＲＰＭＩ−１６４０の適当な量
と共にピペットで試験管に入れる。皿に加える［Ｃ充分
渦動すること、放射性物質はすべて放射性物質容器中に
捨てる。 ９、トルシントー７７−シンテグレッｆ／１ガロンのト
ルエン Ｂ　動物への注射 １Ｍ剤を室温まで上げて融解せしめ０．２２　Ａｍフィ
ルターで濾過　食塩水注射液で適度の濃度まで稀釈分割
し４℃で使用時まで保管使用歯口室温まで温める。動物
の注射部位をクロ／？−セクトのエタノールと無菌ガー
ゼで消毒−日毎に左右を変えて０．５−を腹部に注射。 Ｃ動物の屠殺と細胞の調製 １、−鮮から一頭づ＼の動物をと９頚部切断によシ屠殺
次の動物を屠殺するまで夫々個別に細胞を加工する。切
開の前には各動物を７〇−エタノールで消毒、注意して
肺臓を取出し脂肪層をとり除き添加済ＲＰＭＩ−１６４
０二、三ミリリッターを入れた１６Ｘ１２５ｓｍネゾキ
ャップ付試験管中に入れる。先端部がテフロンて出来た
ホモジナイザーで上下８ストローク（或はすべての組織
を破壊するに充分な回数）りきくづす、各テンプルを１
００メッシュスク替−ンで１遍して５０１１ｔの試験管
中に入れる。細胞を１５　ｔｄ　（１１Ｘ　１００　ｗ
ｍ　）　ｔ）試験管に移し添加済ＲＰＭＩ−１６４０を
管が一杯になるまで加える。１７００ＲＰＭで２分間遠
心分離し再び５−の添加済ＲＰＭ（−１６４０で懸濁す
る。すべてのサンプルが遠心゛分離されたら夫々を簡単
に渦動し、１時間放置する。 更に各サンプルを５秒以内渦動する。各サンプル関は１
０秒間間を置く０次いで５分間放置し、細胞懸濁物をピ
ペットで５ｓｇ（１２×７５■）の試験管に注意深くと
プ沈積物を残さぬ様にする。マイクロピペットを用いて
５０μｊの細胞懸濁液をとりビ（ットの先を注意深くキ
ムワイプでぬぐ−コニルター針数グアイアル中に入れ九
２０−のイントン中に入れる。ピペットはイソトン中で
数回洗う。 サイメツトロ滴を加えヴアイアルをまわして混ぜる。コ
ールタ−カウンターのセットは次の通シとする：拡大−
１、閾値−１Ｏ１孔流量−１カクンターを使用の朝イソ
タージで清掃し、ＯＨ，６０血液コントロールで標準化
する前にパックグラウンド数値を計算する。 細胞数が計数出来友ら添加済ＲＰＭＩ″′ｃＩａ胞数が
６×ｌＯ・／−になるまで稀釈し、三回の検定の為三試
験管に分割する。 Ｄ　ミド−ｒ）分析 １、　タイターテツクマルテチャネルピベターを用いマ
イクロタイマーグレート中に１００μｌのコントロール
培養基（添加済ＲＰＭＩ）又はｉトーダンを適度に稀釈
したもの（最低濃度からはじめる、）を加える。 各プレートにピペットで添加し九＊ニア’レートｔ３７
℃のｃｏｓ恒温器に入れＣＯｓを０．５　Ｋセットする
。１００ｓｌの反応細胞を最もミド−ダン濃度の低いも
のからはじめてウェルの中に置く、ｆし、−トは注入が
終ったものから恒温器中に入れすべてのプレートが入っ
てから１０〜２０分間放置する。プレートをグラスチッ
クの包みで包み上部を再び覆い再び恒温器中に入れＣｏ
３を〜Ｏ，ＯＳに＾セットする。ナイミジン稀釈用に〜
５ｏ−の添加済ＲＰＭＩをとっておき４℃で保管する。 〜４４時間俵ＲＰＭＩを恒温器中にて３７℃に加温する
０、トリテユーム４１１鐵ナイミソ／を温ＲＰＭＩ中、
でｌ：１０ＯＫ稀釈する。ティ゛ミジン５０声ノをタイ
ターチックを用いて各り立ルに加える。プレートを上記
の様に処置し一夜ｃ〜１８時間）培養する。 １ｉ８Ｉａ胞収獲　・ １、各グレート今ら細胞を収獲する前に充分、細１収ａ
Ｓを洗う、各列について新しいフィルターストリップを
使用し各列を２０回づ１食塩水で２０回づ＼水で洗う、
各ストリッ！を標識をつけ九スタイロフォでｊ（発泡４
リスタイレ／）板上に置き赤外２７グで〜１時間乾燥す
る。ディスクカッターでサンプルディスクを切込とクシ
ンテレーショング、アイアルシントを加え、金属皿中に
ヴアイアルがある内にヴアイアルレ；キャップを施す。 シンチレーションカウンター中にグアイアルを置き計数
する。 Ｆ　　ＭＬＣ細胞ｌＩ製 １、　　Ｃｏｗム及びＬＰＳ検定の丸め用意された反応
細胞を用いＣ５７ＢＬ／６７・クスを用いて両性処女生
殖交番細胞を調製する。動物を層殺しステップＣに於け
る如（ＨＩＭをホモ２ナイズする。ｍ＆ｉ！を１５−フ
ァルコン試験管（ＩＩＸｌｏｏ）中に移しＲＰＭＩ−１
６４０培養基で管の上端まで満す、１７００ＲＰＭで１
、＋分″遠心分離し更に今−ｌｉｉ：１７００１ＰＭテ
１．＋分洗い２ｍＯＲＰＭＩ−１６４０中に再懸濁する
。すべての両性処女生殖交番マウスから得友細胞を合せ
る。５分程かたまシを試験管の底に溜らせる。注意して
上澄を細胞の塊〕から分離採取する。 ２、ステップＣＫ於ける様に細胞数を数え、ＲＰＭＩ培
地５５ｇ１Ｋｔｓｏｘｔｏ・個の細胞が縁布する様に稀
釈する。 ３、　　Ｍ１６を行いつ＼０．２−のｎｉ’ｔ　ｃを細
胞に加え１．３７℃テ５　＊　Ｃｏ１を用イ３０分培養
する一一′養中１゛０分毎にしづかに細胞を攪拌する。 ゛ ４、３０分の培養が終れば細胞をＲＰ’ＭＩ−１６４０
培地によ６１５−のファルコン試験管の頂部まで液が来
る様に稀釈する。１７００ＲＰＭで１１／２分間遠心分
離する。上澄液を排出し“最後の数滴は試験管の端を一
枚の無菌ガーゼ１触れさせて排除する。゛ ５、＃Ｉ−回目の洗滌：　ＲＰＭＩ培地３〜５−を加え
φ３にセットして１０〜２０秒間渦動せしめる。試験管
にＲＰＭＩ−１６４０培養基を満し、１７００ＲＰＭで
１１７２分間遠心分離する。 ｓ　　ｇ’二面゛目の洗滌：上澄を排出し最“後の数滴
は試験管の口を無菌ガーヤに触れさせて除く。 ３〜５−のＲＰＭＩを加えφ３にセットして１０〜２０
秒間渦動せしめる。試験管上ＲＰＭＩ−１６４０で管の
上端まで満し１５分放置。次イテ２コＬ旦ＯＲＰＭ−で
２分間遠心分離する。 ７、　第三回目の洗滌二第二図目の時の手順を繰返すＲ
ＰＭＩ−１６４０５ｓｇ中に再ａｉｍする。 ８、両性処女生殖交番細胞の数を稀釈によシｌ−轟Ｄ６
Ｘ１０・コすなわち８−癲夛４８×１０・コとする。 ９、　　Ｃａ１ｌ　Ａ　ＡびＬＰ８検定の為１１表し；
−ｉ　ｊ）６Ｘ１０’　コの細胞液を使用する。 １０、細胞ブレーティング：各動物個体毎は９６のウェ
ルコスタ−プレート上に３又１ｄ、４ｆ）エルｆ二列プ
レートする。、コン）０−Ａ−、Ｊｉ胞−１’ある最初
、の列は反応細胞１００λとＲＰＭＩ−１６４Ｇ（添加
済）、１００λ、を使用、第二列目には反応細胞１００
λと両性処女生殖交番細胞１００λを使用する　３　　
． １１、・培養、トリチュームＩＩｍサインジンのＩ［鐵
給与及び細胞の収獲の方□法１ｄＣｏｎム、ＬＰ８検定
に於けると同様とする。但し　ＩＨサイミジンによるラ
ベリング前の培養時間は細胞プレーティング後４４時間
でなく６８時間とする。細胞の収穫は”Ｈｔイミゾンで
の標識後通常の１８時間で行う。 以下に標準方法を示すが之は特定の供試化合物の溶解性
其他の特性によシ適当に修正す坂きものとする。 ム　ＮＰＴ薬剤溶液ＯＨ＃！ １、無１１１ＰＢｓ（燐酸緩衝食塩水）Ｋ予め重量を測
定した粉状の薬剤を加え溶液に音波を３０分間かけてｓ
ｏｏμｇ／−のＮＰＴを含む溶液を１１製する。 、ｌ　　ＧＣＡ／マック７アーソン二重ビーム分光分析
器の波長をｎｍ　ＩＩＣセット、する。 ３、　　Ｏ，１ＮＨＣ／にてＮＰＴを１　：　１０に＄
ｉ釈する。 ４　０１ノーマルＨα１５−をビーカーに入れる。この
溶液をクペットの水洗に使用する。 相方のクペットＫＯ０１ノーマルＨＣｊを満して、波長
を読み取る。この時、吸光度はゼロがリュームから０．
００１〜０．００５以内である事。 ５、　　ｔングル用りペットを空にして、稀釈薬剤溶液
を加える。　　　− ６、吸光度を記録し、下記の要領で濃度計算を行う。 式：Ａ（５吸光度×稀釈係数×原子量 １１．３１　　　、　、　　（２７８）＝縛／−１、Ｐ
Ｒ８１ｍｇ”！１５００μ＆ＯＮＰ〒を瘤か′してＮＰ
ｉ剤溶液を作る。 ２、本ＢＯＰのセ゛′クション人に従ってＩｌ！度をチ
ェックする。 ３、溶液ストックをｌ−ずっのサンプルにわけ、−２０
℃で数ケ月間保存する。− ４、＊ｗｔｉｔ解氷ｔ、、必ｆｌａｉｌ：Ｋ１１ｌ＜ｔ
！。 Ｃアガローズ培地のつくり方 １、　ＰＢＳ中１．４　ｍ　（Ｄ　７　ｉｆ　ｏ　−ｐ
ｅ　懸濁液（’５００−中７Ｎ）を１５゛分間加圧する
。 ２、　コーンウェル・シリンジを用いて、３−の溶解ア
ｆａ−ぜを無菌状態で７アルコ：ン社製扁１００６ペト
リ皿に分配し、等質層がてきる様に攪拌する。 ３、　この培地は使用に先立ち４℃で１週間まで保存す
ることができる。培地は逆さｔ（Ｊ＠地上部に寒天が来
る）に保存する。 Ｄ　モルモット血清め予−処理 １．２〜６匹のモルモットから心臓穿刺により１０ｍの
血液を抜き取シ゛、ファルコン社製１２０７０遠心分離
器の試験管に５０−の血液を凝血剤を加えずに入れる。 ２、　この試験管を３７’Ｃで４５分間培養して、凝血
させる。 ３、次に試験管を培養器から取り出して、３０分間”水
の上にのせて凝固血を収縮させる。 ４、　この試験管に無菌状態で血清を入れて混ぜ合せ、
１−ずつの等量にわけて一７０℃で使用時まで保存して
おく。 Ｅ　免疫″Ｄａｙ　Ｏ’ １、　マウスの免疫法：へイツンド研究所から遍に一度
羊の血液（羊ム２３）を入手する。 これを無菌状態で血液一部に対し、Ａｌｅ・マｉｒ２部
の割で混ぜる。 ２、　　Ａ１５ｅｖｉＩｒ　　中の羊の血液５／１　Ｏ
ｓｇをＳｔ＠ｒＨｅｐｇｓ中で３−洗滌しＩＥ、Ｃ臨床
用遠心分離器に入れ、Ａ４　（２８００ｒ、ｐ、ｍ、）
にセットして１０分間室温で洗浄する。 ３、　ベレットを１：１０の焦面のＰＢＳに入れて再度
Ｍ濁させる。 ４、　　Ｚ型コルター・カウンターを取扱い説明書に従
・つて目・盛ｗ４１Ｉする。 ５、：２ｋｌ−ａカラフタ−でＦｉｌ：１００，０００
の稀釈が必要であるが、先ずＰＢＳ中でｌ二ｌＯＯのに
稀釈し、次にこの溶液を等張液中で更に１：１・００に
稀釈する。コルク、−命カウンターの限界点をＡ５の位
置−ＫｉｉＩ１１整し、ておく。 ６、血球数をＩｔ＃ＩＩｌシ、ストック溶液を４Ｘ１０
’血球／ｓｇｔで稀釈する。この＊＊ｏ層濁層液溶液疫
に使用する。 ７、各々Ｏマウ゛スの尾の貴部靜脈（血管を拡張させる
九めに５０°の温浴で温めて−お・〈）に５ＲＢＣ（羊
の赤血球）０．１ｍの静注を行い免疫化する。５ＲＢＣ
ｆ）最終的なａｔはマウス当シ４Ｘ１０’　とする。 ｒ処置 １、各々のマウスを９日、１日、２日、３日と腹腹内注
射によシ装置を行う、シリンジ（ｌ＊ｃ　）　Ｋ　Ｆｉ
ｌ　１／２イ：／ｆ、２６５’−ノの針を装着する。白
線（１１ｎ＠ａ　ｍｌｋ＋ａ　）の右側に沿って４５°
の角度１；針を挿入する。０．２−の量を薬剤投与及び
コントロール処置をしたグループの相方に投与する。 ２、薬剤投与グループにはそれぞれに必要な一度のＮＰ
Ｔ滴液０．２−を投与するが、２０１の薬剤投与のマウ
スの場合は、５μｉ／ｌ　１２）　一度とする。 Ｇ　膵臓の予備処理 ！、無曹状−にして膵臓を摘出し、各々をＭＥＭ３−の
入ったファルコン４２０２５組織培養試験管に入れる０
次にこの試験管を氷にのせて保存する。 コントローラに接続したＧ、　Ｋ、ヘラー変速逆転モー
ターに１ｌｉＬ＃）つけたｔ・ｆｌｏｗ　　乳棒を用い
て、膵臓を上記試験管に入れ九ｔまで均質に１１ａす。 ３、均質に擦潰す時間及び方法は各サングルにパフツキ
の無い様に行う必要がある。 ４、次にテンプルを１００メツシュ４０ミクロンのステ
ンレス濾過網でｒ過しながら標準培養試験管内へ移す。 濾過網を３−〇ＭＥＭで洗浄し、血球懸濁液を氷にのせ
て保存する。 ５、　コルター・カウンタで細胞数を調べる丸めに１：
１０００の稀釈を行うが、先ず、ＰＢＳで１：１００に
稀釈してから等張液で更Ｋｌ：１ＯＫ稀釈する。 ６、細胞数をカウントし、ストック懸濁液をｌＸ１０’
ｍ胞数／ｓｄまで稀釈する。コルター・カウンターを限
界を１０にセットする。デツプ等張液３滴を落して赤血
球を溶解する。 １、ユルレンマイヤーフラスコに０．３５．９＋７）７
ガロースと０．５３　、ｐのＭＥＭ粉末を入れる。 次に５０−の蒸留水をフラスコ中に加える。 ２．２５０〒１５　ｐｓｉでこの溶液を１５分間加圧す
る６次にこれを４５＠で５分間温浴する。 炭酸水素ナトリウム（ＮａｘＣＯｓ　０．１　ｍ　）を
加えテｐｉｌを約７．２に、１１整する。 ３、先に温浴しておい九５−の組織培養試験管Ｋ１ｍｇ
の分量を入れる。残９の試験管は寒天培地が旨くできな
かった場合のスペア−として使用する。 Ｉ　　１　Ｇ　１１８ＲＢＣ溶液の調製１、　５−の羊
の血液（免疫時に使用したのと同じもの）をＩＥＣ臨床
用標準遠心分離器を速ｆ轟４　（２・８００　ｒ、ｐ、
ｍ）にセットして１０分間ｐｉｓ中で３回洗浄する。 ２．３回目の洗浄後に、血球は固まってい走時の容積の
１０倍のＰＢＳ、即ち０．５ｍｇの固まった８Ｒ１ＩＣ
の９８に対して５−のＰＢＳ、に再度懸濁する。 Ｊ　寒天培地の作成 １、寒天層を冷凍器からとシ出し、室温で温める。それ
らに各々の実験グループ用に３つの２ペリンダを施す。 ２、寒天を満した試験管を温浴槽から取シ出す。 各々の寒天の入つ九試駿管Ｋ　１０　＊　８ＲＢＣ１／
１Ｇと０．１−の膵臓細胞のｙｍｓ液を加える。この試
験管を一ルテツクスミキ賃−にのせて攪拌する。 ３、試験管の中味を直ちに寒天培地に注１込ん−で、滑
らかな層ができるまで攪拌する。 培地を水平な面に置いて固まらせる。 ４、培地はＣｏｇ　Ｂ−１湿った空気９５−中で３７℃
で９０分間培養する。 ５、モルモットの補体（セクションＤの準備を参照）を
フリーデーから取り出し、室温で解・氷してｐｉｔｓ中
で１：１Ｇに稀釈する。 ６、培地を培養器から取）出し、稀釈補体１ｓｄを各々
の培地に加える。 Ｌ　次に培地を３７℃で更に３０〜４５分間培養する。 培地を培養器から取シ出し、傾斜光をｉててカウントを
行う。 ８、培地は逆さまにして４℃で保存し、２４時間以内に
カウントを行ってもよい。 代理人　三宅正夫他１名 第１頁の続き ＠Ｉｎｔ、　Ｃ１，３識別記号　　　庁内整理番号／／
ＣＣ０７Ｄ　５１３／１４ ３５１００ ３９１００ ２７７１００　） （Ｃ０７Ｄ　５１３／２２ ３５１００ ３９１００ ２７７１００　） ０発　明　者　ライオネル・ツートン・サイモン アメリカ合衆国カリフォルニア 州すンタ・アナ・ラス・パーマ ス１１７７２番地 ０発　明　者　アルフレッド・ジナー−ソローラ アメリカ合衆国コネチカット州 リバーサイド・チャペル・レー ン９番地 ０出　願　人　スローンーケタリング・インスチチュー
ト・フォー・キャンサ ー・リサーチ アメリカ合衆国ニューヨーク州 ニューヨーク・ヨーク・アベニ ュー１２７５番地

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）下記一般式のいずれかを有する化合物。 １厘 （九だし　１１は水素、低級アルキルチオ、低級＝アル
   中ルスルフイニル、アミノ、★たは）・口ｒンでｈＤ、
   ｎ”はヒドロキシ、低級チルキルチオ、ハロｆｙ、アミ
   ノ、ｔえはメルカプトであって、Ｒ１が水素の場合には
   Ｒｓはアミンではない、Ｒはヒドロキシ、メルカプト、
   低級アルキルチオ、ｆたはノーロダンであシ、Ｒｓはヒ
   ドロキシ、メルカプト、低級アルキルチオ、ノ・口ｒン
   、またはアミノである。） （り　　Ｒ”、Ｒ”％　Ｒ魯、またはＲが低級アルキル
   チオである場合に、メチルチオであり、Ｒ１が低級アル
   キルスルフィニルである場合にメチルスルフィニルであ
   る特許請求の範囲第（１）項記載の化合物。 （ａ）　　Ｒ”　Ｓ　　８％およびＲａがヒドロキシで
   ある特許請求の範囲第（１）項記載の化合物。 （４）　　Ｒ１が水素である特許請求の範囲第（３）項
   記載の化合物。 （５）一般式！を有する特許請求の範囲ｊ１ｇ　（１）
   項記載の化合物。 （６）Ｒ’が水素４１九はメチルメルカプトであり、Ｒ
   嘗が水素またはメチルメルカプトである特許請求の範囲
   第（ｊｓ）項記載の化合物。 （７）　　Ｒ１がメチルメルカプトであり　Ｒ１がアミ
   ノである特許請求の範囲第（５）項記載の化合物。 （８）　　Ｒ”がヒドロキシである特許請求の範囲第（
   ６）項記載の化合物。 （９）Ｒ１がヒドロキシである特許請求の範囲第（８）
   項記載の化合物。 輪　一般式厘を有する特許請求の範囲第（１）　＊記載
   の化合物。 α葛　Ｒ麿がヒドロキシである特許請求の範囲第Ｑ４項
   記載の化合物。 （２）　Ｒ１がヒドロキシである特許請求の範囲第αη
   項記載の化合物。 （至）一般式璽を有する特許請求の範囲第（１）項記載
   の化合物。 ９４Ｒがヒドロキシである特許請求の範囲第（至）項記
   載の化合物。 （２）一般式■を有する特許請求の範囲第（１）項記載
   の化合物。 （２）　Ｂａがヒドロキシである″特許請求の範囲第（
   至）項記載の化合物。 （２）特許請求の範囲第（１）項記載の化合物を当該目
   免疫調整作用、抗ビールス作用または抗腫瘍作用を付与
   する方法。 ｏｓＩｆＩＩ許請求の範囲第（４）項記載の化合物を当
   紋目的に有効な量で哺乳類に投与することからなる免疫
   調整作用、抗ウィルス作用または抗腫瘍作用を付与する
   方法。 輪　免疫調整作用を付与する量で化合物を使用する特許
   請求の範囲第（至）項記載の方法。 （２）免疫刺激作用を付与する量で化合物を使用する特
   許請求の範囲第（至）項記載の方法。 （２）抗ウィルス作用を付与する量で化合物を作用する
   特許請求の範囲第（至）項記載の方法。 （２）化合物が一般式Ｉを有する特許請求の範囲第０９
   項記載の方法。 ・＠　Ｒｓがヒドロキシである特許請求の範囲第一項記
   載の方法。 −化合物が一般式１を有する特許請求の範囲第（ロ）項
   記載の方法。 ＠　　Ｒ１がヒドロキシである特許請求の範囲第（財）
   項記載の方法。 −化合物が一般式ｌを有する特許請求の範囲第（ロ）項
   記載の方法。 ＠　Ｂがヒドロキシである特許請求の範囲第一項記載の
   方法。 −化合物が一般式■を有する特許請求の範囲第（ロ）項
   記載の方法。 ＠　Ｒｓがヒドロキシである特許請求の範囲第（至）項
   記載の方法。