JPS5867700A - ヒプリスタノ−ル類 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はヒプリスタノール類、さらに詳しくは、腔腸動
物、花虫類、へ放サンゴに属するヤギ（Ｉｓｉｓ　ｈｉ
ｐｐｕｒｉｓ　）から抽出、単離された新規ステロイド
化合物およびその誘導体であるヒプリスタノール類に関
する。これらのヒスリスタノール類は抗腫瘍作用を有し
、制がん剤として有用であり、したがって、本発明はま
たヒブリスタノール類を含有する医薬組成物にも関する
。

本発明のヒプリスタノールは式： 〔式中、Ｒ，、Ｒ２お工びＲ８は、同一または異なって
、各々、水素またはアシルを意味する。ただし、２２位
における立体配置はＲ−配置でもＳ−配置でもよいが、
弐１）において、Ｒ１がアセチル、Ｒ２が水素の場合は
２２８である〕で示される。

Ｒ，、Ｒ２およびＲ８におけるアシル基としては・アセ
チル・プロピオニル、ブチリル、イソバレリル、バレリ
ル、イソバレリル、ピバロイルなどのような炭素数２〜
５の。アシル基が挙げられる。

本発明のヒプリスタノール類の代表的な例としてはつぎ
の化合物が挙げられる。

化合物−ｉ：Ｒ，ｙａ２およＱ：Ｒｓが共に水素で、２
２Ｒの式［１１〕の化合物。

化合物−２：　Ｒｓ　、　ＲｚおよびＲ８が共に水素で
、２２８の式Ｃ１１〕の化合物。

化合物−３：Ｒ１がアセチル、Ｒ２が水素で、２２８の
式〔１〕の化合物。

化合物−４：Ｒ，およびＲ２が共に水素で、２２Ｒの式
（１）の化合物。

一化合物−５：　Ｒ，およびＲ２が共にアセチルで、２
２Ｒの式〔Ｉ〕の化合物。

化合物−６：Ｉ’Ｌｔがアセチル、Ｒ２およびＲ５が共
に水素で、２２Ｒの式〔■〕の化合物。

化合物−７：Ｒ１およびＲ２がアセチル、Ｒ５が水素で
、２２Ｒの式（Ｉｔ）の化合物。

化合物−８：Ｒ＋がアセチル、Ｒ３およびＲ３が共に水
素で、２２８の式（Ｕ）の化合物。

化合物−９：もおよびＲ２が共にア毛チル、Ｒ３が水素
で、２２８の式（１）の化合物。

化合物−１０：　Ｒ１、Ｒ２およびＲ１が共にアセルチ
ルで、２２８の式（Ｉｌ〕の化合物。

このうち、化合物−１、化合物−２、化合物゛−３およ
び化会ｅ）−４がヤギから抽出、゛単離されるヒプリス
タノール類であり、化合物−５、化合物−６、化合物−
７、化合物−８、化合物−９および化合物−ＩＯはそれ
らのアセチル化誘導体である。

かくして、本発明のヒプリスタノール類には、ヤギから
抽出、単離されたものおよびそのアシル化誘導体が包含
される。

ヤギからのヒプリスタノール類の抽出、単離を行なうに
は、例えば、まず、常法に従ってヤギをメタノールで抽
出してエキスを得、さらに、このエキスを酢酸エチルで
抽出して酢酸エチル抽出物を得る。ついで、得られた酢
酸エチル抽出物をシリカゲルカラムクロマトグラフィー
に付し、ｎ　−ヘキサン−アセトン゛・グレデイエント
で溶出し、ヒプリスタノール類を含有する両分を分取す
る。

得られん画分を、さらに、シリカゲルカラムクロマトグ
ラフィーに付し、薄層クロマトグラフィーでモニターし
ながら所望の化合物を分画し、これを精製し、メタノー
ルのごとき適当な溶媒から再結晶させて目的とする化合
物を単離する。

得られた化合物のアシル化誘導体は、常法に従って、適
当なアシル化剤を用い、該ヒプリスタノール類の骨格構
造に影響を及ぼさない温和な条件下でアシル化を行なう
ことにより得られる。例えば、ピリジン中、室温にて無
水酢酸で該アシル化を行なう。

本発明のヒグリスタノール類は抗腫瘍作用を有する。該
化合物の抗腫瘍作用はつぎのような方法でｉｎ　ｖｉｔ
ｒｏ　　において示すことができる。

ＤＢＡマウス（雄）Ｋメチルコランスレンヲ皮下注射し
て生成させた線維芽肉腫のクローン化した細胞をイーグ
ル＋ウシ血清（２０％）、ラクトアルブミンヒドロリゼ
ート（０，４％）およびグルタミン（１％）からなり、
１０％炭酸水素ナトリウム水溶液でｐＨを中性に導いた
組成の培地に懸濁り、７１クロブレート（フアシヨン８
０４２）へ５　Ｘ　１０３ノ０．２ｍ／／ｍ／外の量で
まく。８７１Ｚ’で炭酸ガス培養器にて２４時間培養後
、培地を新たなものに変え、被験薬剤を所定濃度添加し
、混合し、さらに４８時間培養する。培養後、培地°を
捨で、・・ンクス（Ｉ（ａｎｋｓ’　）液で１〜２回洗
浄し、メタノールで３〜５分間固定する。その後ギムザ
液にて３０分間染色し、水洗、乾燥し、鏡検して被験薬
剤による該細胞の増殖抑制状態を観察する。

この方法に従って、Ｒ，、Ｒ，およびＦＬ３が共に水素
で、２２Ｒの式（Ｉｔ）の化合物（前記化合物−１）と
、Ｒ２およびＲ３が共に水素で、２２ＦＬの式〔■）の
化合物（前記化合物−４）の抗腫瘍作用を試験したとこ
ろ、各々、４および０．５μｇ／−の濃度で細胞の増殖
を完全に抑制した。

本発明はまた、式〔ｌ）または式（Ｉｔ）で示されるヒ
プリスタノール類を有効成分とする制がん剤組成物も包
含する。かかる医薬組成物は、例えば、錠剤、カプセル
剤、顆粒剤、細粒剤、粉剤、シロップ剤、生薬、注射剤
などの経口または非経口投与用の通常の医薬製剤の形に
することができ、その製剤化には通常の医薬用賦形薬、
稀釈剤などが用いられる。さらに、注射剤には通常のｐ
Ｈ調節剤、等張化剤などが適宜配合される。ヒブリスタ
ノール類の用量は実際に用いる化合物の種類、患者の年
令、疾病の程度などによって異なるが、通常１０〜１０
００〜／ｋｙ程度である。

つぎに実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明する。

実施例１ 沖縄県小浜島で採集したヤギ５ｋｙ（含水重量）をメタ
ノール１５ｋｐ中で粉砕し、−夜放置後、沖過する。残
渣を再びメタノール１５ｋｐに浸し、−夜放置後、濾過
する。Ｆ液を合して減圧下で濃縮してエキスを得る。こ
のエキスを水２′ｔに懸濁し、酢酸エチル２ｔで２回抽
出する。酢酸エチル抽出液を合し、減圧下で濃縮して酢
酸エチル抽出物３７ｇを得る。

得られた酢酸エチル抽出物８’ｌをシリカゲルカラム（
メルク社製シリカゲル、５ｘ８０ｍ）上でクロマトグラ
フィーに付し、容量比２０：ｌ、１０：１．５：１．８
：１．２：１および１：１のｎ−ヘキサン−アセトン混
液各ｌｔづつで溶出させる。各溶出液を減圧下で蒸発乾
固させて、各々、画分１（８，８Ｊ？）−、画分２（５
，’ｌ）、画分８（２，８，！ｉ＋）、画分４　（９，
１ｇ）　、画分５（１，ＩＩ）および画分６（２，０，
ｌを得る。目的とするヒプリスタノール類は画分４およ
び画分６に含有される。

（ａ）画分４からの目的化合物の単離 まず、脱色のため、画分４（９，１，９）をポリスチレ
ンゲルカラム（８，５，Ｘ　２１　ｃｍ　）にのせ、メ
タノールで溶出し、初期の溶出液　１４を捕集し、減圧
−下で蒸発乾固させて５．６Ｉの両分を得る。この画分
をシリカゲルカラム（メルク社製シリカゲル、２３０〜
４００メツシユ、８．５Ｘ８５ｃｒｎ）上でクロマトグ
ラフィーに付し、ｎ−ヘキサン−アセ）７（５：　１　
）混液、ついで、ｎ−ヘキサン−アセトン（４：１）混
液で溶出させる。溶出液を薄層クロマトグラフィー（シ
リカゲル、ｎ−ヘキサン−アセトン（２：１））でモニ
ターＬ　す７５ｒ　ラ分画する。ローヘキサン−アセト
ン（４：１）混液での溶出により、まず、Ｒ７がアセチ
ル、Ｒ２が水素て、２２８の式〔１〕の化合物（前記化
合物−８）を主成分とする粗両分５ｔｏｎｙ、ついで、
Ｒ１、＆曹およびＲｓが共に水素で、！！２８０式〔夏
〕の化合物（前記化合物−２）を主成分とする粗画分９
００ｗ９、さらに、Ｒ１、Ｊ　ｉＭ　ＡＤ　Ｒｓが共に
水素で、２２Ｒの式〔璽〕の化合物（前記化合物−１）
を主成分とする粗画分２．２Ｉが得られる。各両分を、
各々、リクロプレブＲＰ−，ｇ（メルク社製ＬｊＣｈｒ
ｏｐｒｅｐ　ＲＰ　−８（ＧｒｔｌβｅＢ））のカラム
にのせ、８ＯＮ水性メタノールで溶出して精製し、さら
にメタノールから再結晶させ、各々、化合物−２１４５
ｗ９、化合物−８１５８呼および化合物−１５７Ｑｑを
得る。各化合物の諸物性はつぎのとおりである。

化合物−１ 分子量：Ｍ＋１　４６８．８ 分子式：Ｃ社ボ番・Ｏｌ 融点：１ｇ８〜１９０Ｃ ＩＲ，訂：　８４６０．２９２０．１００９　。

９７９．９８２国−１ Ｎ　Ｍ　Ｒ（ＣＤＣ４）　　：　δ−０，９８（ｄ、Ｊ
＝７Ｈｚ　　）；１．０３（ｓ）：１．２０（ｓ）；１
．２’２（ｌｉ）；１．８２（Ｓ）；１．：１１８；４
．０４；４．１０結晶形二針状 化合物−２ 分子量：Ｍ　　　４６２ 分子式’　Ｃ２ｇ’４６０１１ 融点：２４８〜２４９Ｃ 曽ＩＴ’Ｌ　　：８６４０，８４８０，２９００．１０
２８．９６８，９１６菌 ＮＭＲ（ｉ０％ＣＤ３０Ｄ　／　ＣＤ’Ｃ１３）　：δ
−０゜９４　（ｄ　、８１１）；　０．９８（Ｓ　、８
Ｈ）；　１．０８（Ｓ、８Ｈ）；１．２７（Ｓ、８Ｈ）
；１．８０（Ｉｉ。

８１（）；１．８４（ｓ、８Ｈ）；４．０１（ｂｓ）；
４゜２８（ｍ、Ｉ（）；４，４３（ｄｄｄ、Ｈ）結晶形
：針状 化合物−３ 分子量：Ｍ　　５２０ 分子式”　３０”４４０？ 融点：２４３〜２４５Ｃ ＩＲＫＢｒ：１０２０〜ＩＯ２８，９６８〜９７２，９
１５〜９２８　ｃｍ−１ 結晶形二針状 （ｂ）画分６からの目的化合物の単離 光のシリカゲルカラムクロマトグラフィーで得られたｎ
−ヘキサン−アセトン（に１）溶出画分６（２，０，９
）を再度シリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、
ｎ−ヘキサン−アセトン（３：ｌ）混液で溶出させる。

溶出液を薄層クロマトクラフィーでモニターしながら分
画し、Ｒ，およびＲ２が共に水素で、２２Ｒの式〔１〕
の化合物（前記化合物−４）を主成分とする粗画分９５
０■を得る。この画分をポリスチレンゲルカラム（８，
５Ｘ２０ｃｒｎ）にのせ、メタノールで溶出して脱色し
、溶出液を減圧下に蒸発乾固して白色粉末６３０■を得
る。これを、さらに、シリカゲルカラム（メルク社製シ
リカゲル１０１ｔ、ｌＸ５０ｃＷ１）上でクロマトグラ
フィーに付し、ベンゼン−酢酸エチル・グレデイエント
（２：１〜１：ｌ）で溶出し、化合物−４を含着する両
分を捕集し、減圧下に蒸発乾固して白色粉末状の化合物
−４２４０■を得る。

分子量；　Ｍ　＋　’ｌ　　４７９．８分子式：　０２
８”４６０６ ％式％： （２ ） 前記実施例１で得られた化合物−４をピリジン中、室温
で無水酢酸と１７時間反応させてガラス状の、Ｒ１およ
びＲ２が共にアセチルで、２２Ｒの式〔１〕の化合物（
前記化合物−５）を得る。収率８７％、融点１２０〜１
３０Ｕ。

実施例８ 前記実施例１で得られた化合物−１をピリジン中、室温
で無水酢酸と１３日間反応させて、各々、無定形固体の
、Ｒ１がアセチル、Ｒ７およびＲ８姑共に水素で、２２
１’ｔの式Ｃｍ）Ｑ化合物（前記化合物−６、収率７８
％、融点８０〜１００Ｃ）ならびにＲ，およびＲ２が共
にアセチル、Ｒ８が水素で、２２Ｒの式（ＩＩ）の化合
物（前記化合物−７、収率１４％）を得る。

実施例４ 前記実施例１で得られた化合物−２をピリジン中、室温
で無水酢酸と１３日間反応させて、各々、Ｒ１がアセチ
ル、Ｒ２およびＲ３が水素で、２２Ｓの式（１〕の化合
物（前記化合物−８、収率８１％、融点１９８．５〜１
９５Ｃ）ならびにＲ８およびＲ１が共にアセチル、Ｒ３
が水素で、２２８の　式［１）の化合物（前記化合物−
９、収率１４％、融点２５２〜２５８ｔｌ’）を得る。

実施例５ 前記実施例１で得られた化合物−２を、無水酢酸お！び
ｐ−）ルエンスルホン酸を用い、室温で３日間アセチル
化して化合物−９（収率５８％）ならびに無定形固体の
、Ｒ，、Ｒ，およびＲ３が共にアセチルで、２２８の式
［１］の化合物（前記化合物−１０、収率２４％、融点
９５〜ｉｉ。

Ｃ）を得る。

特許出願人藤沢薬品工業株式会社 代理人弁理士青山　葆し２名

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）式： 〔式中、Ｒ，、Ｒ２およびＲ８は、同一または異なって
   、各々、水素またはアシルを意味する。ただし、２２位
   における立体配置はＲ−配置でもＳ−配置でもよいが、
   式〔Ｉ〕において、Ｒ，がアセチル、Ｒ２が水素の場合
   は２２８である〕で示される化付物。 （２）Ｒ１’、　Ｒ２お工びＲ３が共に水素で、２２１
   ’Ｌの式ＣＩ）で示される前記第（１）項の゛化合物。 （８）Ｒ＋　、　Ｒ２お工びＲ８が共に水素で、２２８
   の式［Ｕ）で示される前記第（１）項の化合物。 （４）Ｒ１がアセチ／ｋｊ・Ｒ２が水素で、２２８０式
   〔１〕で示される前記第（１）項の化合物。 （５）ＴＬ＋およびＲ２が共に水素で、２２Ｒの式〔１
   〕で示される前記第（１）項の化合物。 （６）Ｒ１およびＲ２が共にアセチルで、２２Ｒの式（
   １）で示される前記第（１）項の化合物。 （７１Ｒ１がアセチル、Ｒ２およびＲ５が共に水素で、
   ２２Ｒの式（Ｉｌ〕で示される前記第（１）項の化合物
   。 （ｓ）　ｎ　１　お工びＲ２がアセチル、Ｒ８が水素で
   、２２Ｒの式Ｃ１１）で示される前記第（１）項の化付
   物。 （９）”ｔがアセチル、Ｒ，およびＲ８が共に水素で、
   ２２８の式（Ｈ）で示される前記第（１）項の化合物。 Ｑｏ）　　Ｒｔ　およびＲ２が共にアセチル、Ｒ８が水
   素で、２２８の式（１）で示される前記第（１）項の化
   合物。 （１１）　Ｒｔ　、　ＲｔおよびＲ３が共にアセチルで
   、２２８０式〔■〕Ｘ示される前記第（１）項の化合物
   。 （１２）式： 〔式中、Ｒ，、Ｒ２およびＲ３は、同一または異なって
   、各々、水素またはアシルを意味する。ただし、２２位
   における立体配置はＲ−配置でもＳ−配置でもよいが、
   式（ｒ〕において、Ｒ１がアセチル、Ｒ２が水素の場合
   は２２Ｓである〕で示される化合物を有効成分とする制
   がん剤組成物。