JPS5883629A - アジュバント - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 この発明は、公知の豚由来ボルデテーラ・ブロンヒセプ
テイカ（Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ　ｂｒｏｎｃｈｉｓｅｐ
ｔｉｃａ　。

以ＦこれをＢ、ｂと略記）の菌体および菌体成分を主成
分とした細菌性免疫増強剤１こ関するものである。

従来、生体の持つ免疫能を増強させる免疫増強剤の開発
は、主１こ癌に対する免疫化学療法の研究を中心として
行なわれ、ＢＣＧ、コリネバクテリウム、レバミゾール
等１こついては、多くの報告かなされている。また、ワ
クチン等の免疫効果を抗１申特異的１こ増強する物質は
、一般にアジュバントと呼ばれ、フロイントのコンプリ
ートアジュバント（ＦＣＡ）、リン酸アルミニウムゲル
等の種々の物質について検討され、かなりの効果も認め
られている。、しかし、特殊な感染症、たとえば、１県
虫性疾患（マラリア、ピロプラズマ、トキソプラズマ等
）やヘルペスウィルス感染に対する予防免疫には、従来
から用いられているアジュバントでは、接種反応か強く
、また、効力が弱いこ゛ともあって、安全でしかも確実
な免疫増強剤の開発が強く要望されている。

この発明は、このような現状に着目してなされたもので
あり、公知の豚由来Ｂ、ｌ）の菌体および菌体成分より
なる細菌性免疫増強剤を提供するものであるが、これを
さらに異体的に説明すれば、Ｂ、ｌ）を仔牛血清１０％
添加プレインハートインヒユージョン寒天培地等の培地
で培養した後、集菌、洗浄して得た菌体および菌体成分
を有効成分とする免疫増強剤で、通常の保護剤（たとえ
ばショ糖）を含む凍結乾燥製剤である。

この製剤の効果を、“以下Ｉこ述べる実施例ｆこよって
示す。

〔実施例１ この免疫増強剤を、犬の住血原虫病で貧血を１徴とする
バベシ７−ギブソニイ（Ｂａｂｅｓｉａ　ｇｉｂｓｏｎ
ｉ。

以下これをＢ、ｇと略記）感染症１こ対する免疫増強の
目的で、Ｂ６ｇホルマリン不活化抗原（以下これをＢ、
ｇ−にと略記）と併用注射したところ以下に示すような
良好な免疫増強効果を現わした。すなわち、体重３０ｇ
のＩＣＲ系ＳＰＦ　　マウス番こＢ、ｂのチメロサール
不活化菌体（１２１Ｆこれをｔｍｓと略記）を２５０Ｆ
ｇずつ尾静脈内注射後、７１目における食細胞の貧食活
性をカーボン・クリアランステストで観察したところ、
Ｂ　、’ｌ）注射マウスでは、第１図（５匹の平均値を
示す）から明らかなよう１こ、対照（Ｃｏｎｔ、）に対
しては勿論のこと、ほかの３菌株、すなわち、コリネバ
クテリウム・アネロビウム（Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒ
ｉｕｍ　ａｎａｅｒｏｂｉｕｍ、これをＣ，ａト略記）
、ミコバクテリウムｅツベルクローシス（Ｍｙｃｏｂａ
ｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｂｅｒＣｕｌｏｓｉｓ　ＢＣＧ、
これをＢ。

Ｃ，Ｇと略記）、およびヘモフィルス・プロイロニウモ
ニア（Ｈａｅｍｏｐｈｉ　Ｉｕｓ−’ｐｌｅｕｒｏｐｎ
ｅｕｍｏｎｉａｅ　、これをＨ，ｐｌ　、と略記）を注
射したマウスに比較して、きわめて強いクリアランスが
認められ、Ｂ、ｌ）が食細胞の貧食活性１こ対する最も
強大な増強効果をもつことが判明した。また、Ｂ、ｌ）
注射マウスの胛臓および肝臓の重量測定および足１反応
による遅延型過敏症の検出を試みたところ、第２図のよ
う１こ、Ｂ、ｂが良好な成績を示した。

そこでＢ、ｂをＢ、ｇ　−Ｋと併用して犬に注射し、Ｂ
、ｇ感染１こ対する免疫増強を図る目的で第３図に示す
ような免４疫プログラム導従って試験を実施した。ここ
で、Ｂ、ｇ−にはＢ、ｇ感染天め毒血を摘胛犬に注射し
、赤血球内のＢ、ｇ寄生率が３０％以上番こなった時点
で全採血し、血球を５回洗浄後、虫体数を４　Ｘ　１０
’個／ｍ＋　　に調整し、ホルマリンで不活化して作り
出したものを用いた。また、供試犬は５〜８力月齢の１
２頭で、これを各３頭ずつの４群５こ分け、第１ａ′は
１ｍｓ注射後３週目ｌこＩｍＳとＢｏｇ　’−Ｋとの混
合抗原を皮下注射して、６週目に８Ｘ１０’個のＢ、ｇ
で攻撃し、第２群はｔｍｓとＢ、ｇ　−Ｋの混合抗原を
２週間隔で２回注射して４週目に攻撃した。さらに第４
１！￥は攻撃のみの対照群である。なお、第３図におけ
る符号は、それぞれつぎのことを示す。すなわち、 （Ｉ）・・・１ｍＳ単独皮下注射（チメロサール不活化
Ｂ、ｂ　５　ｍｇ　／　ｋｇ　） （−１Ｂ）−ｔｍｓとＢｏｇ　−Ｋ　　との混合皮Ｆ注
射（チメロサール不活化Ｂ、ｂ　５　ｍｇ　／　ｋｇ、
ホルマリン不活化Ｂ、ｂ　２　Ｘ　１０’個）（Ｂ’）
・・・Ｂ、ｇ　−Ｋ単独皮下注射〜（ホルマリン不活゛
化Ｂ、ｇ　２　ｘ　１ｏ’個） （Ｃ）・・・攻撃活性Ｂ、ｇ　８　ｘ　１ｏ’皮下注射
である。

Ｂ、ｇに対する血清抗体価の推移は、試験開始時より継
目的１こ間接螢光抗体法による血清抗体価（ＩＦＡ価）
として−求゛めた。免疫注射によるＩＦＡ価の上昇は、
第４図から明らかなよう１こ、ｔｍｓ　　とＢｏｇ　−
Ｋとを併用した第１群および第２ｇ４では、注射後急激
な立ち上がりを示し、攻撃時までに第１ｔ４では６４０
倍、第２ｔ４では２５６０倍の高い水準に達したのに対
し、Ｂｏｇ−Ｋ　１１独注躬の第３群では１６０倍の低
い水準であって、ＩｍＳを併用することによって、抗体
産生が著明に増強されることが確認さ°れた。また、各
免疫群における攻撃後の赤血球数（ＲＢＣ）の推移は、
第５図に示したように、攻撃後４〜５週目に軽い赤血球
数の減少°は認められるが、はぼ正常範囲を保って推移
したのに対して、第３ｍでは５週′目に２８０万／ｌｒ
＋ｍ”また第４群では４週目番こ１６０万／ｍｍ”の急
激な減少が認められ、特に第４酢では重篤な貧血症状を
呈し、内１頭は４週目に死亡した。

攻撃後のＢ側原虫の赤血球内寄生率は、第６図に示した
とおり、最高寄生率が第１群では２．５％、第２群では
１．０％と低い率に抑えられたのに対して、第３群では
４．７５％、また第４１Ｒでは１０．２４鴨といった高
い率であった。さらに１．　ＩｍＳ注射部位の反応につ
いては、第２回注射後数日間は注射部位ｆｌｉｔ”にや
や硬結を認めたが、日数の経過とともにその硬結は完全
に消失してしまった。

以上の結果を総合すればこの発明による免疫増強剤はき
わめて優れた免疫増強作用を有し、しかも安全性の高い
ことがわかったので、この発明の意義はきわめて太き（
戸と言うことができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は、カーボン−クリアランス試験成績の結果を、
第２図は胛−計重量、足踏反応試験成績の結果を、第３
図は免疫プログラムを、第４図は間接螢光抗体（ＩＦＡ
）法による血清抗体価の推移を、第５図は各免疫群の攻
撃後の赤血球数（ＲＢＣ）の推移を、また、第６図は各
免疫群の攻撃後のバベシア・ギブソニイ面中寄生率の推
移をそれぞれ示す図である。 特許出願人　　　株式会社　微生物化学研究新註　　代
理人　　　　鎌　　　　１）　　　文　　　二第１図 第２図 ■■ｌ　婢 ロ：コ　Ｒｆ 第３図 第４図 手続補正書岬発） 昭和５６１−１２１１　９　１１ 特許庁長官　島田春樹　殿 １、　事件の表示 昭和５６年１．￥許願第１８０６３６　”ｊ’ｉ２、・
発明の名称 免疫増強剤 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 １１所　　　京都府宇治市槙島町２４．１６番地氏Ｗ、
　（Ｙ、＋！＋ｒ　　株式会社　微生物化学研究所４、
代理人 ５゜ 昭和　　　　；ト　　　　月　　　　１．１’　　（５
ａ送ｌ１１６、補正により増加する発明の数 ７、補正の対象 明細書 ８、補正の内容 別紙の通り 補　　正　　の　　内　　Ｒ １、明細書、第５頁、第７行目、口３．ｂ２・１０’ｌ
ｌ＾１」をｒ’　Ｂ、ｇ　２Ｘ１０速補正します。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 豚由来ボルデテーラ・ブロンヒセプテイカの菌体および
   菌体成分よりなる免疫増強剤。