JPS5914452B2 - インジウム−１１１オキシン錯体組成物 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 インジウム−１１１は６７時間の半減期を有する放射性
同位体である。

それは０．１７３および０、２４７ ＭｅＶのエネルギ
ーでガンマ放射線を放出することによって崩壊するので
ガンマカメラで体中視察したり計数するのに好都合であ
る。

オキシン（８−ヒドロキシキノリン）とインジウム−１
１１の錯体は下記式を有する。

この錯体は知られており、例えばよＬａｂ、 ａｎｄＣ
Ｉｉｎ、 Ｍｅｄ、１９７７年１月号第８９（１）巻第
２１７頁〜第２２８頁にＭ、 Ｌ、 Ｔｈａｋｕｒ等が
発表している。

それは血球のラベル付け（標識付け）用に有用である。

この錯体でラベル付けした白血球は膿瘍を検出するため
に使用できる。

この錯体は親油性であり、この性質がそれを血球中に浸
透することを可能にする。

一度血球内に入ると、錯体が分解し、インジウム−１１
１がその場で固定されるようになる。

錯体はインジウム−１１１の塩、例えば塩化インジウム
の水性溶液と８−ヒドロキシキノリンの水溶液を混合す
ることによって簡単に容易に作られる。

しかしながら多分その親油性のために、錯体は水性溶液
中では充分には安定でない。

この錯体の水性溶液がプラスチック容器またはガラス容
器と接触すると、かなりの割合の錯体が容器のガラスま
たは他の面に結合するようになる。

ガラス面へ結合するようになるこの問題は溶液をオート
クレーブ処理することによって顕著になる。

これらの困難のため、上述したＭ、 Ｌ、 Ｔｈａｋｕ
ｒ等の論文に記載されているようにこの錯体を血球をラ
ベル付けするのに好適な形にするための標準的な方法は
、クロロホルム中に抽出し、クロロホルムを蒸発乾固さ
せ、次いで無水エチルアルコール中の溶液の形にするこ
とを含んでいる。

この方法は幾つかの理由によって満足できない。

それは長時間を要し、この時間はインジウム−１１１の
如き短い寿命の同位体にとっては重要な問題となる。

一般に抽出段階でラベルの２０係を失ってしまう。

この方法は放射性材料の化学的処理を含み、また引火性
の溶媒の使用および残渣の乾燥を含むがこの両者はリモ
ートコントロールによって取扱うのに困難があり、潜在
的な危険性がある。

錯体のエタノール溶液は無菌でなく、高圧滅菌できない
。

そして血球を患者に注射するためラベル付けする場合に
は滅菌は必須の要件である。

水性溶液の形で錯体を作るための簡単な方法が最近フラ
ンスでＣｏｍｐａｇｎｉｅ Ｆｒａｎｃａｉｓｅ Ｐｈ
１ｌ−ｉｐｓから提案された〔フランス特許公告第２３
９０４０８号（出願７７・１４３９６号）〕。

しかしこの方法は容器のガラスまたは他の面へ結合する
ようになる錯体の問題に対処したものではない。

本発明の目的はこれらの問題を克服することにある。

本発明は、少なくとも１０μｇ／ｒｎｌの界面活性剤を
含有する水性媒体中に、８一位にヒドロキシル基を有す
るキノリン化合物とインジウム−１１１の錯体を含有せ
しめたインジウム−１１１製剤を提供するものである。

好ましい錯化剤は８−ヒドロキシキノリン（オキシン）
である。

しかしながら、オキシンの誘導体例えばアルキル（例え
ばメチル）またはハロゲン（例えば塩素）置換基を有す
るオキシン誘導体も、それがインジウムと親油性を有す
る錯体を形成する能力を保有しているならば使用しうる
。

界面活性剤は乳化剤および可溶化剤として医薬製造に広
く使用されている。

この場合、界面活性剤は患者に投与後直ちに体液で急速
に稀釈される。

これに対し本発明の場合は、界面活性剤は非常に限定さ
れた稀釈のみしか起らない。

界面活性剤はそれが使用される濃度で血球に対し非毒性
であるべきことが必須の要件であることは勿論である。

低毒性の見地から、本発明では非イオン界面活性剤、特
にある範囲の脂肪酸のポリオキシエチレンソルビタンエ
ステル〔ツウイーン（Ｔｗｅｅｎ）の商標名で市販され
ている〕を使用するのが好ましい。

高圧滅菌（オートクレーピング）中に容器壁への錯体の
付着を減少させるためには少なくとも１０μｇ／ｍｌの
界面活性剤を含有せしめることが必要である。

界面活性剤濃度について厳密な上限規制はないが、一般
には１０００μｇ／ｍｌより多くは使用しない。

血球の損傷を避けるため、血球と接触する溶液の界面活
性剤濃度は２００μＶＴＬ１を越えないようにすること
が好ましい。

組成物のｐＨは錯体が安定であり、血球に悪影響を及ぼ
さないような価にすべきである。

５〜８のｐＨ，好ましくは約７が好適である。

インジウム−１１１の濃度には厳密な規制はなく、０．
１〜１０ｍＣ１／ｍｌｌの範囲が好適である。

オキシン濃度は５〜１００μｇ／ｍＣｉインジウム−１
１１、好ましくは２５〜５０μｇ／ｍＣｉインジウム−
１１１の範囲が好適である。

オキシン濃度が低過ぎると、多発地の金属との競争によ
ってラベル付は効率が低下する。

過度に高いオキシン濃度は毒性の危険性を含み、ラベル
付は効率を低下させる傾向がある。

これらの錯体を含有する水性組成物で生ずる別の問題は
、高圧滅菌により血球ラベル付は効率が極度に低下する
ことにある。

理論上は滅菌条件下無菌成分を使用して錯体を作ること
は可能であるが、高圧滅菌で最終製品を滅菌することが
工業的実施に当って非常に容易かつ安価である。

本発明者等は、高圧滅菌時のラベル付は効率のこの損失
は水性組成物中に緩衝剤を混入することによって軽減で
きることを見出した（ただしこれは本発明の副次的な目
的を構成する）。

好ましい緩衝剤はＮ−２−ヒドロキシ−エチルピペラジ
ン−Ｎ′−２−エタンスルホン酸（ＨＥＰＥＳ）である
少なくとも０．０１モルまたは０．０２モルの濃度で、
ＨＥＰＥＳは高圧滅菌によって生ぜしめられるラベル付
は効率の損失を軽減するのに有効である。

濃度の臨界的な上限はないが、毒性の見地から０．５
Ｍより多くない濃度で使用するのが好ましい。

血球と接触する水性溶液中での濃度は０．０２Ｍより多
くないのが好ましい、しかし短時間では血球は０．０５
Ｍ濃度も許容できるであろう。

ＨＥＰＥＳは好ましい緩衝剤であるが、他の双性イオン
（ｚｗｉｔｔｅｒｉｏｎ）化合物も有効であると信ぜら
れる。

事実生体に対し非毒性であり、共存性を有し、ｐＨを５
〜８の範囲に保ちうるものであれば他の緩衝剤、例えば
トリス緩衝剤または重炭酸塩も使用しうる。

本発明の組成物は水性媒体を基礎にしているが、水混和
性有機液体の小量、例えば５０係以下の混入も可能であ
る。

組成物は血球をラベル付けした後、注射投与により使用
することを目的としているから、それらは等侵食塩溶液
を基にするのが好ましい。

組成物は各成分を混合することによって簡単に容易に作
られ、加熱またはその他の処理は必要ない。

下掲の実施例において、組成物は塩化ナトリウムで等張
にした約１ｍＣ１／ｍｌのインジウム−１１１と５０μ
ｇ／ｍＣｉインジウムー１１１のオキシンを含有する。

組成物は下記の典型的な方法で作る。

金属イオン不純物を含有しないように洗浄した適当なガ
ラス容器に下記の無菌発熱物質（ｐｙｒｏ−ｇｅｎ）不
含の成分溶液を加えた。

１）０．０４ＮのＨＣＬ中に１０ｍＣ１／ｍｌの放射能
濃度で塩化インジウム−１１１を含有する液の０、５
ｍｌ。

２）０．０４ＮのＨＣＬ中に２５０１ｔｇ／Ｔｉ１ｌの
濃度で８−ヒドロキシキノリンを含有する溶液の］、、
ＯｒｒＬｌ。

３）ｐＨ７，２〜７．４のＩＭのＨＥＰＥＳの溶液の１
ｒＩＬｌ。

４）食塩水中の１係ツウイーン−８０の１００μｌ。

５）発熱物質不含水の１． Ｏｒｕｌ。

６）等侵食塩水溶液の１．４ ｒｎ１０ 溶液を小瓶に入れ、閉じて１２１℃で２５分間高圧滅菌
した。

この組成物で血球ラベル付けを行なう操作は従来のとお
りである。

例えば患者の血液試料を分別して所望の血球を分離し、
適当な媒体中のこれらの懸濁液を１〜１５分間インジウ
ム−オキシン錯体組成物で処理した。

好適な媒体は如何なる種類の血球がラベル付けされるか
によって決まるが、食塩水溶液または血漿を用いること
ができる。

上記処理後上澄液を傾瀉して血球によって吸収されなか
ったインジウム錯体の部分を除去し、血球を再懸濁させ
た後患者に再注入する。

上述した方法によって種々な組成物（本発明に従ったも
のと比較目的のためのもの）を作り、下記試験に供した
。

１、小瓶中での不変性（保持性） （ａ） 小瓶中に１ｍＣＶＩＩｌｌの放射能濃度で、
インジウム−１１１−オキシンの試料１ｒｎｌを入れる
。

幾つかは高圧滅菌した。

３日間放置する。（ｂ） 小瓶の放射能を測定する。

（ｃ） 針によって注射器中ζｃ／ト瓶内容物を取り
出す。

（ｄ） 小瓶に等侵食塩水１ｍｌを加える。

（ｅ） 食塩水を取り出す。

（ｆ） 空になった小瓶の放射能を測定する。

小瓶中での不変性は次の如く表わされる。

２、血球ラベル付は効率 人間のリンノ々芽球様血球（タイプＢｅＣ１１）を培地
（ＲＲＭ１１６４０）巾約１０７血球Δｄの濃度で含む
ものを市場で入手した。

下記の操作を行なった。

（ａ） 円錐形容器（ネジ付キャップを嵌合させた）
中に血球１０ｒｎｌを入れる。

（ｂ） 遠心機で血球を沈降させる。

（ｃ） 培地を傾瀉する。

（ｄ） 血球を５ｒｒＬｌの等張食塩溶液中に再懸濁
する。

（ｅ） ０．１〜０．５ｍｌのインジウム−１１１−
オキシン溶液を加える。

（ｆ）５〜１５分間培養処理する（培養は一般に室温で
行なうが４℃〜３７℃の範囲が好適である）。

（ｇ） 血球を遠心分離して沈降させる。

（ｈ） 上澄溶液を傾瀉させる。

（ｉ） ５ｍｌの等張食塩溶液中に血球を再懸濁する
。

（ｊ） 再び血球を遠心分離で沈降させ１．第二の上
澄溶液を傾瀉する（洗浄画分と命名する）。

（ｋ） 血球を再懸濁する。

「上澄液」、「洗浄」および「血球」画分を合わせれば
血球ラベル付は作業開始時に加えた放射能の全部を含有
する。

血球ラベル付は効率は次の如く測定する（三つの両分中
のインジウム−１１１放射能含有率を計数後）。

結果を各下表に示す。

表１は、界面活性剤を含有しない組成物のものであり、
血球ラベル付は効率について、高圧滅菌前および後の両
方におけるＨＥＰＥＳ濃度の増加に起因する効果を示す
。

表２は、０．２ＭのＨＥＰＥＳ緩衝剤を含有する組成物
のものであり、高圧滅菌前および後の両方における小瓶
の壁への接着を防止するための２種の界面活性剤の効果
を示す。

表３は、０．２ＭのＨＥＰＥＳ緩衝剤を含有する組成物
のものであるが、界面活性剤濃度を変えたときの小瓶中
の不変性に対する効果を示す。

瞳表４は、０．２ＭのＨＥＰＥＳ緩衝剤を含有す
る組成物のものであるが、組成物の各種添加物の小瓶中
の不変性に対する効果を示す。

表５は、０．２ＭのＨＥＰＥＳ緩衝剤を含有する組成物
のものであるが、血球ラベル付は効率に対する、高圧滅
菌後の２種の界面活性剤の効果を示す。

表６は、０．２ＭのＨＥＰＥＳ緩衝剤を含有する組成物
のものであるが、血球ラベル付は効率に対する界面活性
剤の種々の濃度の効果を示す。

表７は、本発明の水性組成物の血球ラベル付は効率を、
従来のインジウム−１１１−オキシン錯体のエタノール
溶液と比較して示す。

表８は、界面活性剤を用いまたは用いないときの、各種
緩衝剤を用いたインジウム−１１１−オキシンの製剤の
小瓶中での不変性を比較して示す。

ｎ−オクタツールで抽出することによって測定した試料
の放射線化学純度（ＲＣＰ）も示す。

６７− 臨床試験 下記配合物を作った オキシン ５０ ｐｐｍ ツウイーンー８０ ５０ ｐｐｍＨＥＰＥＳ
Ｏ，０２５ＭＩｎ−１１１１ｍＣｉ、
４’ 溶液を等張にした。

小瓶に分は入れ、高圧滅菌した後の１０個のバッチは６
％〜９係の範囲の放射能の小瓶中での不変性を有し、６
．６〜６．９のｐＨを有していた。

この配合物は、白血球および血小板を含む各種の白血球
のラベル付けに有効であることが判った。

ラベル付は血球は多数の患者の診断用に用いて成功した
。

二つの場合を以下に示す。第１の場合 ５５才の女性患者が５日前に腎臓移植を受けた。

上述した配合物を用いてラベル付けした血小板を器官の
拒否性を検査するため使用した。

そして拒否の早期証拠の提供および迅速な処理を行なう
に当たり効果を示した。

第２の場合 胆のう切除を受けた５２才の男性患者が手術後発熱した
。

横隔膜下膿瘍が考えられた。上述した配合物でラベル付
けした白血球は、右上方区分に膿瘍があることを診断す
るのに有効であり、これは後に外科的に確認された。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 少なくとも１０μ９／ｒｆＬｌの非毒性界面活性剤
   を含有する水性媒体中に８位にヒドロキシル基を有する
   キノリン化合物とインジウム−１１１の錯体を含有せし
   めたインジウム−１１１製剤。 ２ キノリン化合物が８−ヒドロキシキノリンである特
   許請求の範囲第１項記載の製剤。 ３ 界面活性剤が非イオン界面活性剤である特許請求の
   範囲第１項または第２項記載の製剤。 ４ 界面活性剤を脂肪酸のポリオキシエチレンソルビク
   ンエステルから選択する特許請求の範囲第１項〜第３項
   の倒れか一つに記載の製剤。 ５ 界面活性剤の濃度が１０μｇ／ｒｉｌｌ〜１０００
   μｇ／ｍｌである特許請求の範囲第１項〜第４項の何れ
   か一つに記載の製剤。 ６ インジウム−１１１の濃度が０．１〜１０ ｍＣｉ
   ／ｆｎｌｌであり、キノリン化合物の濃度が５〜１００
   μｇ／ｍＣｉインジウム−１１１である特許請求の範囲
   第１項〜第５項の何れか一つに記載の製剤。 ７ ｐＨを５〜８に保つため非毒性相溶性緩衝剤も存
   在する特許請求の範囲第１項〜第６項の何れか一つに記
   載の製剤。 ８ 緩衝剤がＮ−２−ヒドロキシエチルピペラジン−Ｎ
   ′−２−エタンスルホン酸である特許請求の範囲第７項
   記載の製剤。 ９ 緩衝剤の濃度が０．０２〜０．５Ｍである特許請求
   の範囲第７項または第８項記載の製剤。