JPS59155348A - オクタペプチドバソプレシン「きつ」抗剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はパップレシン拮抗剤である環状オクタペプチド
に関する。本発明の化合物は９−デスＧｌｙ−バンプレ
シン（ｖｓｐ）拮抗剤もしくは９−　ｆ　ｙ、　Ｇｌ　
ｙ　−’ｌ−Ｐｍｐ−バンプレシンでアル。さらに詳し
くは、これらのオクタペプチドの構造はβ−メルカプト
−β、β−シクロアルキレンプロピオン酸と、システィ
ン単位から由来する硫黄および該プロピオン酸単位から
の硫黄によって６単位環に環化された５個のアミノ酸中
位を有する。

鎖環はまた、グリシン単位を欠き、アミド結合により該
６一シヌテイン単位に結合した特徴あるジペプチド尾部
を有する。

エム９マニング（Ｍ、Ｍａｎｎｉｎｇ）　、ダブリュウ
９エイチ・ソウイヤー（Ｗ、Ｌｌ、Ｓａｗｙｅｒ）およ
びその協力者は、抗バンプレシン作用を有する種々の〔
］−（］β−メルカプト−β、β−シクロペンタメチレ
ンプロピオン酸−４−バリン〕−アルギニンーパップレ
シン同族体を記載した一連の文献を発表している。それ
らの代表的なものは、ヨーロッパ特Ｔ（出願（Ｅ　ｌ）
　Ａ、　）第６］３５５＠、米国パ持許第４３６７２２
’５号および米国特許第４３９９１２５号である。

これらマニング化合物の全ては単位６に結合したトリペ
プチドを有し、当然、ノナペプチドである。本発明の化
合物は、オクタペプチドであること、単位６に結合しだ
デスＧｌｙジペプチド尾部を有することおよび強力なパ
ップレシン拮抗作用を有することにより、これらの化合
物と区別できる。

本発明の化合物の強力な生物学的活性は、デス−グリシ
ンアミド９−パップレシンおよびデフ−リジン８−デヌ
ーグリシンアミド９−バンプレシン〔Ｔ。

ＢａｒＬｈ　　ｅ、Ｌ　　ａｌ、、Ｃｏ１１ｅｃｔｉｏ
ｎ　Ｃｚｅｃｈｏｓｌｏｖ　。

Ｃｈｅｍ、Ｃｏｍｍｕｎ、　、　３９　＋　５０６　（
１９７４）　）ならびにデス−グリシン９−オキシトシ
ン（Ｂ、Ｂｅｒｄｅｅｔ　　ａｌ、、Ｈａｎｄｂ、Ｅｘ
ｐ、Ｐｈａｒｍ、、　２３　、８５　Ｑ　（’　１９６
８））がそれらの各鋭化合物の活性をほとんど維持して
いないという事実に鑑み、予期せぬことである。事実、
パース（Ｂａ　ｒ　ｔ　ｈ　）は、デス−グリシンアミ
ド９−　Ａ　Ｖ　ＰがＣＮＳ活性を有するが、実際ト、
抗利尿もしくは子宮緊縮活性を持たないと報告している
（ベルギー特許第８９６５０９号）。

本明細咀で用いる当該ペプチド分野の呼称のいくつかは
つぎのとおりである。

Ｃａｐ：β−メルカプト−β、β−シクロアルキレンプ
ロピオン酸、 Ｐｍｐ：β−メルカプト−β、β−シクロペンタメチレ
ンプロピオン酸、 Ｃｈｇニジクロへキシルグリシン、 Ａｂｕ：α−アミノ−ｎ−酪酸、 Ｃｈａニジクロへキシルアラニン、 Ｐｂａニアミノフェニル醋酸、 Ｇｌｎ：グルタミン、 Ｇｌｙ’ニゲリシン、 Ｔｙｒ：チロシン、 Ｐｈｅ：フェニルアラニン、 Ｐｌｔｅ（４’−Ａｌｋ）；低級アルキルフェニルアラ
ニン、 ＶａｌＨバリン、 Ｎｖａ：ノルバリン、 ＩＬｅ：イソロイシ′・ Ｎｌｅ：ノルロイシン、 Ｄ−ａＩｌｅ：Ｄ−アローイソロイシン、１、ｅｕ：ロ
イシン、 Ａｌａ：アラニン、 Ｌｙｓ：リジン、 Ａｒｇ：アルギニン、 Ａｓｎ：アスパラギン、 Ｍｅｔ：メチオニン、 Ｔ、ｏｓ：）シレート、 ｔ−ｔＦ：フッ化水素、 Ｂ）ＩＡ：ベンズヒドリルアミン、 ＤＩＥＡ：　ジイソプロピルエチルアミン、４−ＭｅＢ
ｚ　Ｉ　：　４−　ｊ　ｆＪＬ／へ：／リジルＴＦＡ：
）リフルオロ酢酸、 ＤＣＣニジシクロヘキシＩレカｌＶボジイミ４゛１、Ｈ
ＢＴ：］−ヒドロキシベンゾトリアゾール、ＡＤＩ−１
：抗利尿ホルモン、 ＡＣＭ：アセトアミドメチル、 ＤＭＡＰニジメチルアミノピリジン。

本明細占において、「バンプレシン」なる語ヲそれだけ
で、他に修飾語なしに用いる場合、それはＬ−アルギニ
ン−パップレシン（ＡＶＰ）をｉ味する。本発明のＡＶ
Ｐ誘導体が好ましい。ｌ’−ＡｌｋＪは、所望により、
Ｙにおける窒素、２位にチロシン単位が存在する場合は
その酸素置換基または環の３位のフェニルアラニン単位
のフェニル環に結合した、炭素数１〜４の低級アルキル
を表わす。

かかるアルキル置換基にはメチル、エチル、ｎ−プロピ
ル、インプロピルまだはブチルが包含される。

したがって、本明細書においてはペプチドおよびバンプ
レシン化学の分野で通常用いられる命名法を用いる。何
ら立体配置を付さない場合、アミノ酸単位はＬ’ｌたは
天然型にあることを意味する。

本発明のデヌＧｌｙ９化合物は式： 〔式中、 ＰはｐｈｅまたはＰｌｉｅ　（４’−Ａｌｋ　）、Ｘは
Ｉ）−Ｐｈｅ、　Ｉ）−Ｖａ−１、Ｉ）−Ｎｖ　ａ、　
Ｉ）−Ｌｅ　ｕ。

１）−１１ｅ、　Ｉ）−ａ　Ｉ　Ｉ　ｅ、　Ｉ）−Ｐｂ
ａ、　Ｉ）−Ｎｌ　ｅ、　Ｉ）−Ｃｈａｌｌ）−Ａｂｕ
、　Ｄ−Ｍｅ　ｔ、　Ｉ）−Ｃｈｇｌｌ）まだはＩ−Ｔ
ｙｒまだはＤまたはＩ、−Ｔｙ　ｒ　（Ａｌ　ｋ　）、
ＹはＮｌ１２、ＮＩＩＡ　ｌ　ｋ、　ＮＨＢ　ｚ　ｌま
だは０■１゜ＷはＤ−Ｐｒｏ、Ｌ−ＰｒｏまだはΔＰｒ
ｏ（デヒドロ−Ｉ’ｒｏ）、 ＡはＶａｌＳｌｉｅ、　Ａｂｕ、　Ａｌａ、　Ｇｌｙ、
　Ｌｙｓ、Ｃｈａ。

Ｎ　Ｉ　ｅ、４’　＋１　ｅ、　Ｉ−ｅ　ｕｌＣｈ　ｇ
またはＮｖａ。

ＺはＤ−Ａｒｇ、Ｌ−Ａｒｇ、Ｄ−ＬｙｓまだはＬ−Ｌ
ｙｓｌ。

ｎは０．１まだは２、 を意味する〕 示される化合物またはその医薬上許容される塩、エステ
ルプロドラッグまたは複合体である。

本発明の化合物の下位群は、ＸがＩ）−Ｔｙｒ、１）−
Ｃｂ　ａ、　Ｊ）−Ｐｈ　ｅ、　Ｉ）−１１ｅ％Ｉ）−
１−ｅ　ｕ、　］）−Ｖａ　ｌまだはＩ）−Ｔｙ　ｒ　
（Ｅ　ｔ　）、ＰがｐｈｅまだはＰｈｅ（４’−Ｅｔ入
Ａが前記と同じ、ＹがＮｌＩ２、ＷがＰｒｏ、ＺがＡｒ
ｇおよびｎが１の式〔１〕の化合物からなる。

Ｘが１）−Ｔｙ　ｒ　（Ｅ　Ｌ　）の式〔１〕の化合物
は、そのアミド８同族体と共に特に活性なＡＩ）１１拮
抗剤である。

特に注目すべき化合物は〔１−（β−メルカプト−β、
β−シクロペンタメチレンプロピオン酸）　−２−１）
−チロシン−４−バリン−８−アルギニン−９−デヌグ
リソン〕バンプレシン、〔］−（］β−メルカプトーβ
、β−シクロペンタメチレンブロヒオン酸−２−Ｄ−チ
ロシン−４−バリン−８−アルギニン−９−デヌグリシ
ンアミド〕パップレシンおよび、特に、（１，−（β−
メルカプト−β、！−シクロペンタメチレンプロピオン
酸）−２−（０−エチル−１）−チロシン）−４−バリ
ン−８−アルギニン−９−デヌグリシン〕バンプレシン
である。

まだ、本発明には、付加塩、エステルまだはアミド型の
プロドラッグおよび複合体のような式〔■〕の化合物の
種々の誘導体も包含される。付加＋甘 塩は末端酸基（Ｙ＝ＯＨ）におけるＮＨ４、Ｃａ、ＩＣ
：＋まだはＮ計のような医薬上許容されるカチオンとの
塩あるいは該ペプチドの塩基中心（該Ａｒｇ単位におけ
るような）における医薬上許容される塩のいずれかであ
ってよい。塩酸塩、臭化水素酸塩および他の強酸との塩
も有用であるが、酢酸塩形が特に有用である。また、該
化合物はＹがＯＨの場合のよ、うに内環または双性イオ
ンを形成する。

該エステルプロドラッグ形は、例えば、式〔■〕ノ酸の
、炭、１１〜８のアルキルエステル、種々のベンジルエ
ステルのようなアラルキルエステルである。式〔■〕の
化合物の他の有用な化合物は当業者にとって明らかであ
り、「複合体」には水和物またはアルコール化合物のよ
うな溶媒化合物またはメリーフィールド樹脂のような担
体樹脂を含む化合物である。

式〔Ｉ）の化合物は、６位のシヌティン単位（Ｃｙｓ）
および１位のβ−メルカプト−β、β−シクロアルキレ
ンプロピオン酸中位（Ｃａｐ）Ｋおける２つのメルカプ
１−Ｊｕによって鎖状オクタペプチドを環化することに
よって製造される。この環化反応はメルカプタンをジス
ルフィドに酸化できる温和な酸化剤の庁在下で容易に起
る。この反応はつきのとおりである。

〔式中、Ｘ、Ｐ、ＡおよびＹは前記式ＣＩ〕と同じ、Ｚ
は前記式〔１〕と同じが、ＹがＯＨの場合、単結合でも
よい、Ｗは式〔■〕と同じか、ＺおよびＹがない場合、
ＯＨでもよい、ＱｌおよびＱは、各々、水素まだは置換
しうる基を意味する〕式〔１丁〕の中間体は新規化合物
であり、本発明の一部をなすものでおる。ＷまだはＺの
一方または両方のない式Ｃ１１ｒ）の化合物も以下に記
載するように中間体として有用な新規化合物である。後
者は該オクタペプチドよりも低レベルのｖＳＰ拮抗作用
を有する。

この一連の反応の環化反応は酸化によシもっとも都合よ
く行なわれる。ジメルカプタンをジスルフィドに変換で
きる公知のいずれの酸化剤も使用できる。、かかる酸化
剤の例としては、フェリシアン化アルカリ金属、ことに
、フェリシアン化カリウムまたはナトリウム、酸素ガス
、ショートメタンまたはヨウ素が挙げられる。

例えば、フェリシアン化カリウムを、適当な不活性溶媒
、例えば、水まだは水性メタノールに溶解した式〔「〕
のジメルカプタンに０〜４０°Ｃで加える。しはしは、
ｐＨ７〜７．５で、稀溶液中、室温での酸化が環状化合
物の良好な収率（４０〜５０％）を与える。

Ｃｙ　ｓ　（０１−（）６またはＰｒｏ（ＯＨ）７の式
ＣＩＩＩ　〕の化合物を、以下に記載するように、各々
、ジペプチド（保護（Ｎｉ１２　）　−Ｗ　Ｚ　Ｙ　）
まだはアミノ酸（（Ｎｉ−１２）−Ｚ　−Ｙ　）　　と
反応させる。

該鎖状メルカプクン出発物質は各種のアミノ酸単位の表
ころに存在する当該分野における通常の置換しうるもし
くは保護基（ＱｌおよびＱ”）を有していても、いなく
てもよい。かかる保護基にはべ・　　　　ｌ　− ンジル、Ｐ−ノドキシペンシル、　　　アダマンチル、
Ｌ−メチル、Ｐ−ニトロフェニル、トリチル、ベンジル
チオメチル、エチルカルバモイルまだはアセトアミドメ
チルが包含される。ベンジル、アダマンチルまだは【−
ブチルは水性メタノール中、（ハロ）酢酸第二水銀塩に
より、０〜８０°Ｃで除去される。通常、保護基は該ペ
プチドをその担体樹脂からフン化水素で開裂する間のよ
うな環化の前に除去される。しかし、環化の間まだは環
化前の系内で除去することもてきる。

該Ｓ−アセトアミドメチ／１．／基が特に有用である。

例えば、Ｓ−八ＣＭ−Ｐｍｐ　−１）−’ｌ’ｙ　ｒ　
（Ｌ、Ｌ　）　−Ｐｈ　Ｃ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−５−ＡＣ
Ｍ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−ＯＨ７，ｌを水性メタノール中、
炭酸カリウムで処理してＰ　ｒ　ｏ酸鎖］火ぺブヂドを
７８〜８４％の１１又率でイル）る。ついて、これを、
水性メタノール中、ヨウ素を用いて酸化環化して所望の
Ｐ　ｒ　ｏ　（（ＢＴ　）７生成物を６５〜７０％の収
率て得る。別法として、該保護生成物を同様な条件下、
まず、ヨウ素処理で環化し、ついで保護エステル基の炭
酸カリウムによる除去を行なう。ついで、該Ｐｒｏ７酸
を、Ｉ）ＭＦ中、ｌ）　ＣＣおＰｈｅ−Ｖａｌ−Ａｓｎ
−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（ＮＩＩ２）を得る。

かくして、ヨウ素はＳ−保護基、ことに、ＡＣＭ基を除
去し、該中間体を環化する。酢酸第二水銀もＡＣＭ基を
除去して金属メルカプチドを生じる。これを硫化水素で
処理して系内でチオールに変え、ついで、別工程で酸化
する。

所望の式〔［〕の環状オクタペプチドは、例えは、氷酢
酸を用いて、水性酸化混合液を酸性にし、反応混合液を
イオン交換クロマトグラフィーカラム、例えは、弱酸性
アクリル樹脂カラムに通し、酸で溶出するか、エピクロ
ロヒドリン架橋テキストランて調すクしプこヒース状ケ
ルに通してゲル’／Ｊ：　ａを行なうことにより都合よ
（−？−１を離できる。

１ＪｉＪ記しだ式〔１１〕の鎖仄中間１本の環化の別法
と同様に、鎖環（ＩＬシた６−Ｃｙｓ酸または７−Ｐｒ
ｏ酸（尾部単位〜■およびＺの両方または１つの尾部単
位Ｚのみかない式〔［〕の酸化合物）を、各々、保護ジ
ペプチドＷ−Ｚ−Ｙまだはアミノ酸Ｚ−Ｙと反応させる
。このＣｙｓ酸またはＰｒｏ酸と適当に保護したジペプ
チドまたはアミノ酸との反応はペプチドの分野で一般的
ないずれかのアミド形成反応を用いて行なう。Ｊｍ常、
実蔽的に当モ）ｖｆｉ４の出ｔｊ物質ヲ、ジシクロへキ
シルカルポジイミドのようなカルボジイミドと、１−ヒ
ドロキシベンゾトリアゾールまだはジメチルアミンピリ
ジンの存在下、有機溶媒中、０〜３５°Ｃ１好ましくは
、０°Ｃ〜室温で反応させる。保護基を、該へキザペプ
チド環のジヌルフイド結合を開裂しない反応、例えは、
温和なアルカリにより除去する。

式〔１■〕の重要な中間体はエム・マニングら〔Ｍ、Ｍ
ａｎｎｉｎｇ　ｅｔ　’ａｌ、　、ＪｏＭｅｄ、Ｃｈｅ
ｍ、、　２５　、４６（１９８２）、１１によシ検討さ
れているような、ペプチド合成の固相法を用いて都合よ
く製造される。

ＹがＮｉ１２の式〔■〕の最終生成物（デヌーグリシン
）製造のだめには市販のベンズヒト＋）　／レアミン担
体樹脂（、ＢＩ（Ｒ）が、Ｙが０８０式〔■〕の化合物
（テスーグリシンアミド）製造にはクロロメチル担体樹
脂（ＣＭＲ）が用いられる。

式［Ｊｒ　）の鎖状ペプチドのペプチド鎖は単位８から
単位１に向って順次形成させる。各単位はペプチド分野
で知られているように、まだ、以下にｎＦＬ戦するよう
に適宜保護する。別法として、液相まだは担体反応を用
いて種々のオリコペプチドを形成させ、該ジメルカプト
中間体製Ｉ告の一連の反応の最後の工程で縮合させても
よい。

一連の好ましい樹脂担体反応は、各中間体ペブチドを単
離することなくベックマン９９０Ｂペプチド合成器中で
行なわれる。その詳細は後記実施例に示す。当該分野で
知られているような、溶液または酵素反応条件が適用で
きる。

連続的に樹脂担持鎖に付加される種々のアミノ酸は当該
分野に公知のことくしで保護される。例えば、Ｂｏｃ保
護基はアミノ基、ことに、α位のアミ７基に列して、所
望により置換されたベンジルはＰｍｐおよびＣｙｓ単位
のメルカプト基に対して、トシルはＡｒｇ単位に対して
、所望によジ置換されたカルボベンゾキシ（Ｚ）はＴｙ
ｒまたはＬｙＳ単位に７１して用いられる。もつとも都
合よくは、保護基は容易に除去できるものであるべきて
、すなわち、Ｅ−メチルオキシカルボニル基については
酸処理、ベンジルまたはカルボベンゾキシ箔については
ナトリウム−液体アンモニアまだは接触水素添加を用い
、該除去反応条件は該ペプチドの曲の部分、例えは、ジ
ヌルフイド結合における反応を生しさせるものであって
はならない。

保護基の他の例として、アミノ酸またはオリゴペプチド
のアミ７基は、通常、ポルミルルオロ酢酸、フタロイル
、Ｉ）　−　１−ルエンスルホニルま＊はｏ−二１ーロ
フェニルスルポニル基のヨウなアシ）Ｖ基、ベンジルオ
キシカルボニル、０−ブロモベンジルオキシカルボニル
、Ｐ−ブロモベンジルオキシカルボニル、０−まだは１
）−クロロベンジルオキシカルボニル、Ｐ−ニトロベン
ジルオキシカルボニルまだはＰ−メトキシベンジルオキ
シカルボニルのようなベンジルオキシカルボニル、トリ
クロロエチルオギシカルボニル、ｔ−アミルオギシカル
ポニル、（−ブトキシカルボニルまだはジイソプロピル
メトキシカルボニルのような脂肪族オキシカルボニル基
または２−フエニ）Ｌ／イソプロポギシカルポニル、２
−トリルインプロポキシカルボニル ポキシカルボニルのようなアラルキルオキシカルボニル
基によって保護される。まだ、アミン基はベンゾイルア
セトンまたはアセチルアセトンのような１，３−ジケト
ンとの反応によりエナミンを形成させることによっても
保護される。

カルボキシル基はアミド形成、ヒドラジド形成またはエ
ステル化によって保護することができる。

該アミド基は、要すれは、３．４−ジメトギシベンジル
マタはヒス−（１）−メトキシフェニル）メチルノ、（
で置換される。該ヒドラジド割・はベンジルオキシノ７
／ｌ／ボニル、トリクロロエチルオキシノ）ｌレボニル
、トリフルオロアセチル、［−ブトキシカルボニル、ト
リチルまたは２−ｐ−ジフェニル−インプロポキシカル
ボニル基で置換される。該エステル基はメタノール、エ
タノール、【−ブタノールまたはシアンメチルアルコー
ルのようなアルカ／−ル、ベンミルアルコール、Ｉ〕−
ブロモベンジルアルコール、１）−クロロベンジルアル
コール、■）−メトギシベンンルアルコール　ｌ）−ニ
トロベンジルアルコール、２．６−シクロロベンジルア
ルコール、ベンズヒドリルアルコール、ベンゾイルメチ
ルアルコール、Ｐ−フロモベンゾイルメチルアルコール
マタはＰ−クロロベンゾイルメチルアルコールのような
アラルカノール、２，４．６−）リクロロフェノール、
２，４．５　−　）　！Ｉクロロフェノール、ヘンタク
ロロフェノール、Ｐ−ニトロフェノールまたは２，４−
ジニトロフェノールのよウナフェノールまたはチオフェ
ノールまだはＰ−二トロチオフエノールのようなチオフ
ェノールで置換される。チロシン中のヒドロキシ基は、
所望により、エステル化まだはエーテル化によって保護
される。エステル化で保護された基は、例えば、〇ーア
セチル基、０−ベンゾイル基、０−ベンジルオキシカル
ボニルまだは０−エチルオキシカルボニルである。エー
テル化で保護された基は、例えば、Ｏ−ベンジル、０−
テトラヒドロピラニルまだは０−ｔ−フチル基である。

アルキトル中のグアニジノ基におけるアミノ基は塩形成
、ニトロ、トシル、ベンジルオキシカルボニルまだはメ
シチレン−２−ヌルホニル基によって保護することがで
きる。しかし、必ずしも該グアニジノ基を保護する必要
はない。

該保護鎖状ペプチド中間体は、例えばーアルコール性溶
媒中アンモニアを用いて担体樹脂マトリックスから開裂
され、ついで、例えば、ナトリウバー液体アンモニアを
用いて処理して保護基を除去する。この操作により、鎖
状オクタペプチドのアミド誘導体が得られる。

さらに都合よくは、樹脂担持ペプチドを適当な公知のカ
チオン・ヌカベンジャ−１例えは、アニソールの存在下
、無水フッ化水素で処理することにより該２工程を合し
て、ジメ・ルカプクン型の式〔■〕のオクタペプチド中
間体を良好な収率で得ることができる。

本発明の化合物は強力なバンプレシン拮抗活性ヲ有スる
。パップレシンは腎臓における抗利尿機構の作用に関与
していることが知られている。これらの化合物の作用が
該天然の抗利尿ホルモン（ＡＤＨ）の作用を拮抗すると
、体は、腎小管末端部の透過性増加によシ、水分を排泄
する。本発明者らは、この作用機構がある種の腎上皮細
胞の原形質膜上に位置するバンプレシン受容体（Ｖ２−
受容体）におけるものと考える。本発明のＡ　Ｄ　Ｈ拮
抗剤のもつとも顕著な薬力学的効果はチアジドのような
ナトリウム利尿効果よシも、水利尿効果である。

抗利尿ホルモン分泌不適の症候群（ｓ　１Ａｏｔ１）ま
たは望ましくない浮腫症状をわずらういずれもの患者が
本発明の化合物の対象となる。本発明の化合物を必要と
する臨床症状には高血圧、肝硬変、うつ血性心不全まだ
は、ｖｓｐ−介在受容体部位における天然に生じるパッ
プレシンの作用が関与ファクターとなる重い負傷まだは
病気に起因するいずれの損傷症状の構成症状が包含され
る。

パップレシン受容体部位の第２群は心臓血管系自体に位
置する血管昇圧部位（’　Ｖｌ−受容体）である。例え
は、以下の第１表における化合物５のラットにお、ける
バンプレシン誘発血管収縮をグイクスの方法（ｐｙｃｋ
ｅｓ、米国特許第４３６７２５５号）で試験したところ
、ｉｎ　ｖｉｔｒｏてｐ　Ａ、　２　’８．４０、ｉｎ
　ｖｉｖｏでｐＡ２７．７１であった。陸受容体におけ
る拮抗作用は血管拡張をもたらし、最終的な結果として
抗高血圧作用を有する。月経困難症の治療は静脈内まだ
は鼻内投与した場合の本発明化合物のもう１つの利点で
ある。

したがって、本発明の化合物は、選択した化合物の非毒
性かつ有効量を、好ましくは、医薬担体と合して、非経
口投与まだは吸入により与え、治療の必要な患者におけ
る浮腫の治療または水分の排泄に使用される。活性成分
の投与単位は、体重７０Ｋｇの患者につき、０．０１〜
ＪＯノＷｌ　／　ｈ、好ましくは、０．０１〜５”ＩＩ
／ｈの範囲からｊ巽はれる。

この投与栄位を１日当り１〜５回投与する。

パップレシン拮抗作用を訓導する該医薬組成物は標ｌｖ
′、的な液体」−１１体中に溶解または懸濁しだｎｌ」
記のような投Ｊテ単位の形の式〔１〕の活性成分を含有
する。標準的な１１．１体は、静脈内、皮下まだは筋肉
内投与のごとき非経口注入に適したアンプルまだは複用
喰バイアルに入れた等張食塩水である。

吸入用の組成物は同様であるが、通常、計量投与アプリ
ケータまたは吸入器に入れて投与される。

粉末組成物も、油状製剤、ゲル、等張製剤用緩衝剤、エ
マルジョンまたはエアゾルと共に、標準的組成物形とし
て用いることができる。

本発明の化合物はブク（ｈｏｇ）の髄質組織またはヒト
腎において、ｉｎ　ｖｉｔｒｏで、まだ、水欠乏ラット
または水欠乏サルにおいて、ｉｎ　ｖｉｖｏて、天然の
抗利尿ホルモンに対する独特な拮抗作用（抗ＡＪ）１１
作用）を有することが示された。１ｎｖｉＬｒｏのテク
ト法の詳細はエフ・エル・ヌタツセンらＣＩ’、Ｌ、５
ｔａｓｓｅｎ　ｅｔ　ａｌ、、Ｊ、ｏｆ　Ｐｈａｒｍ、
Ｅｘｐ。

Ｔｉ１ｅｒ、、　２３３　、５０〜５４（１９８２）：
）によって記載されているが、サイクラーゼ活性の計算
および受容体部位における結合能力の分析はつぎのとお
り行なった。

７デニレート・サイクラーゼ活性分析テスト掬乍各実験
において、髄質膜の非存在下において生成した３”−Ｐ
／ｃＡＭＰの量を測定する（ブランク）。

このブランク値を全ての実験データから差引く。

化合物の基礎アデニレート・サイクラーゼ活性および／
またはパップレシン刺激活性に対する影響をテストする
。各測定は３連で行なう。Ｋａ値はラインｆ）　エーハ
−−ブルケ（Ｌｉｎｅｗｅａｖｅｒ−Ｂｕｒｋｅ）プロ
ットから導かれる。Ｒｅ１．ｖｌｌｌａｘ−（ｖｍａｘ
薬剤／　■ｍ　ａ　ｘパップレシン）Ｘ１００ｏＫｉ＝
ｌ／Ｃ（Ｋ’ａ／Ｋａ　）−１）　Ｃ式中、■は拮抗剤
の濃度、Ｋ’ａおよびＫａは、各々、拮抗剤の存在下お
よび非存在下におけるアデニレート・ザイクラーゼの半
最大活性を与えるに必要なパップレシン濃度を意味する
〕。

結合分析テスト操作 各実験において、バンプレシンの非存在下および過剰の
パップレンジ（７，５Ｘ１０　　Ｍ）の存在下における
結合した３１１−バンプレシンの量を３連で測定する。

これらの値は各々、全および非特異性結合を示す。化合
物のＫＢは競合的抑制についての等式：　ＫＢ＝ＩＣ５
０／（１＋Ｌ／ＫＤ）Ｃ式中、■Ｃ５ｏは特異的３ＩＩ
−パップレシン結合の５０％抑制に必要な濃度、Ｌはリ
ガンドの濃度、ＫＩ）は３■１−バンプレシンの解離定
数〕から選ばれる。ブタ腎臓膜の３調製物で測定した平
均ＫＤ＝　３．６　Ｘ　１Ｏ−９Ｎｉ、ｌ　５Ｉ）＝０
．４Ｘ］、　ＯＭ。

水欠乏ラット法 テスト前約１８時開維ラットに飼料および水を与えずに
おく。１代謝ケージ当り４尾づつ動物を入れる。０時間
口に、テスト群の動物にテスト化合物を腹腔内投与し、
等容量の担体を２対照群（絶食群および非絶食群）に投
与する。１時間ことに４時間、尿容量および浸透圧を測
定する。テストの値は尿排泄＋ｎ！（累積）、ｍＥｑ／
ラット電解質排泄、り／ラット尿素排泄および浸透圧ミ
リＯ５ｍ／Ｋｇ　ｌ−１２０として記載する。有意差検
定に許容テストを用いた。尿浸透圧を３００　ミ’）　
Ｏｓｍ／Ｉ＜９に低下させるに必要な化合物用量（μｆ
Ａｇ）をＥＤ３００とする。尿浸透圧を５００　ミＩＪ
　Ｏ５ｍＡｇに低下させるに必要な化合物用量（μ！　
／Ｉ＜ｑ　）をＥｌ）５００とする。水欠乏ザル法も同
様である。

第１表には、本発明の化合物の特徴であるデスＧｌｙジ
ペプチド尾部を有するオクタペプチド構造の、選択した
代表的な化合物の前記テスト法における抗パップレシン
活性を示しである。実質的な拮抗活性の存在は予期しえ
な゛かったことである。

なぜなら、一連の作用剤においては、デスーＧｌγ−オ
キシトンがオキシトシン自体と比較すると血圧△ に苅する反対の作用を有しておシ（前記１ｓ、Ｂｅｒｄ
ｅｅｔ　ａｌ、　ｇ照）、また、オキシトシンおよびバ
ンプレシンの鎖状尾部の短縮が「これらの物質の典型的
中物学的活性の著しい減少」を起すことが知られ−ｒい
る（前記’Ｉ’、ＢａｒＬ１１ｅｔ　ａｌ　、参照）か
らである。

さらに、第１表におけるＮ　ｏ　、５の化合物はブタま
だはヒト組織におけるｉｎ　ｖｉｔｒｏテストならひに
水欠乏ラットおよびサルテストにおける種々のテストに
おいて非常に拮抗作用を示す化合物であることが判明し
た。その抗Ａ　Ｄ　Ｈ活性は、意識のある水欠乏リスザ
ルテストにおいて尿浸透圧を３００ミリＯｓ　ｍＡｇ　
Ｈ２０に減少させるに必要な用州″として、ＩらＩ）３
００　＝　　８．６　ｎ　モ／ｌ／／Ｋｌｌ　（腹腔内
）である。第１表における化合物４のそれは３３，１ｎ
モ／ｌ／　／　Ｋｙである。後者の化合物の２−　Ｄ　
−ＰｈｅＮ族体は３］９．Ｑｎモ）ｖ　／　Ｋｙである
。

つきに実施例を挙げて本発明をさらに詳しく説明する。

実施例Ｉ Ｐｍｐ（Ｊ３ｚｌ　）−１）−’Ｉ″ｙｒ（Ｒｒ−Ｚ）
−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−ＣｙＳ（ＯＭｅ−Ｂｚｌ　
）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（−１’ｏｓ　）樹脂の同相合成 標記の樹脂相持ペプチドの同相合成用に、Ｂｏｃ−Ａｒ
ｇ（Ｔｏｓ）樹脂（３ミリモル１５．４ｇ樹脂）を出発
物□質として用いる。Ｒｏｃ−Ａｒｇ（ＴｏＳ）のセシ
ウム塩を公知の市販のメリーフィールド樹脂（ＣＩ−Ｃ
ＩＩ２　樹脂）と反応させて調製したＩｌｏｃ−Ａｒｇ
−（１”ｓ　）ｔｉｉＪ脂に、つきの操作を用いて適宜
保護したアミノ酸を順次カップリンクさせる。

（１）塩化メチレンで洗浄（３回、１分間）。

（２）１％インドール含有塩化メチレン中、３３％トリ
フルオロ酢酸で予備洗浄（１回、１分間）。

（３）１％インドール含有塩化メチレン中、３３％トリ
フルオロ酢酸で脱保護（２０分間）。

（４）塩化メチレンて洗浄（３回、１分間）。

（５）塩化メチレン中、１０％トリエチルアミンで予備
洗浄（１回、１分間）。

（６）塩化メチレン中、１０％トリエチルアミンで中和
（１０分間）。

（７）塩化メチレンで洗浄（３回、１分間）。

（８）　Ｊ”　化メチレン−トリエチルアミン中、保護
アミノ酸１０ミリモルおよび塩化メチレン２０ｒｎｌ中
、０．５Ｍ　　Ｎ、Ｎ’−ジシクロへキシルカルボジイ
ミ　ド添加。

反応時間は２時間まで。

Ａｓｎ基のカップリングの場合、乾燥ジメチルホルムア
ミド中、Ｂｏｃ−Ａｓｎと共に、■−ヒドロキシベンゾ
トリアシー／ｌ／’（ＨＩ３Ｔ　）　１０ミリモルを加
える。４−ジメチルアミノピリジン１０ｍＭを用いて、
Ｐｍｐ　（Ｂｚ　ｌ　）をペプチド樹脂にカップリング
させる場合も、乾燥ジメチルホルムアミド（１）ＭＦ）
を溶媒として用いる。Ｃｙｓのチオール基ヲ（’ＪＣ護
する７社めに４−メトキシベンジル基を、ま／こ　Ｉ）
−１’ｙｒのフェノール１牛ヒドロギシ基を保護するた
めに２−ブロモカルボベンゾキシ基を用いる。

得られだ保護Ｐｍｐ（’１３ｚｌ）−１）−’ｒｙｒ（
Ｂｒ−Ｚ）−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ（ＯＭｅ
−Ｂ１．Ｉ　）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（’Ｉ”ｏｓ）樹脂を
、各々、塩化メチレンおよびメタノールでよ＜ａ；浄す
る。真空下で一夜乾燥後、標記の保護樹脂中間体８．４
ｙを得る。

□１ Ｐ　＋ｎｐ　−１，）−Ｔｙ　ｒ　−Ｐｈ　ｅ　−Ｖａ
　ｌ　−Ａｓ　ｎ−Ｃｙｓ　−Ｐｒ　ｏ　−Ａｒ　ｇ　
−Ｎ１１２の調製 Ｐｍｐ　（Ｂｚ　ｌ　）−１）−Ｔｙ　ｒ　−（ｐ−ブ
０モカルポヘンゾキシ）　−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−
Ｃｙｓ（ＯＭｅ−Ｂ７．Ｉ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ
）樹脂４ｇ（約１．５ミリモル）を乾燥ジメチルホルム
アミド５０．７中、飽和アンモニア／メタノール溶液２
００．Ｊを用いて室温で４８時間アンモノリシスに付す
。蒸発乾固後、残渣を酢酸エチル／ｎ−ヘキザンで沈滞
させ、濾過して保護オクタペプチドアミド１５４ｇを得
る。

この粗ペプチドを液体アンモニア２５０　ｍｌに溶解し
、ナ１−リウム／液体アンモニア溶液で処理してＪ’ｍ
ｐ−１）−’Ｆｙｒ−Ｉ’ｈｅ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｃｙ
ｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ＮＩＩ２を得、これをｐＨ７〜７
．５ノ０．Ｏ１Ｍフェリシアン化カリウム水溶１ＴＺ４
Ａを用いて酸化する。酸化反応完了後、氷酢酸の添加に
より水溶液のｌ）Ｈを４．５に調整する。この溶液をゆ
っくりと、弱酸性アクリル樹脂（バイオ−レックス（旧
ｏ−Ｒｅｘ　）　７０　）カラム（］　］、　Ｘ　２．
５ｏｎ、ｒｉ’Ｈν）に通す。カラムを、各々、５％お
よび５０％酢Ａ　ｒ　ｇ　−ＮＯ３ノ精製 （１）向流分配 試１１　：　８６０７〃９粗、ｎ　−Ｂ　ｕ　Ｏｒｌ　
／Ｉ　ＩＯＡ　ｃ　／１１２０（４：１：５）、２５０
トランスファー（ａ）フラクション１８６〜２０４．４
３６　〃ｌＩ　。

（１））フラクション１８２〜］８５および２０５〜２
１８．２　Ｊ、　９　ＩＩＩ （２）分配クロマトクラフィー 試Ｉｔ　：　２５０ｍｆｌ　（（１）−（ａ）より）、
Ｇ−２５（微細、２．５　Ｘ　５５　ｏｎ　）、ｎ　−
Ｂ　ｕ　０Ｉ−１／１ｉｏＡｃ　／８２０（４：１：５
） （ａ）フラクション３２〜４６．２２２　ｎｌ（３）調
製的１１　Ｐ　Ｌ　Ｃ 試料：　４０７７７１／　（（２）−（ａ）より）、オ
ールチック（Ａ、１ＩＬｅｃｈ）Ｃ１３，３０００ｐｓ
ｉｇ１流速３．０８１７７分 緩衝液Ａ：Ｏ，Ｉ％Ｔ　Ｉ”Δ 緩衝液Ｂ　：　０．２５％’Ｉ”　Ｆ　Ａ　／　Ｃｌｌ
３　ＣＮ　（４＝６）、６０％Ｂ、イソクラチック（ｉ
　５ｏｃｒａｔｉｃ）、２３５ｎｍ　（２，ＱＡＵＪ’
Ｓ　） Ｌ「人：　Ｉ　Ｏ’ｆｌ／　０．５　ｍｌ緩衝ｒｔＡ純
漂記化合物Ｊ　７　Ｍ’Ｊ （４）イオン交換クロマトグラフィー 試利：３６５　Ｔｌ！　（（Ｊ）　−（ａ）および＜２
）　−（ａ）より）、Ｃ，ＭＣ，Ｑ、Ｑ　ＪＭ−０，Ｉ
Ｍ　　ＮＴ−１４０Ａｃ直線グラジエント （ａ）７ラクシヨン、５１〜７０　　　　　９３．５ｍ
９（１））フラクション７１〜８９　　　　　８６．５
ｆｆＰ（Ｃ）フラクション９１〜１１０　　　　６５１
〃！？（（１）フラクション］、　Ｉ　］〜１２　］　
　　　２４．’５７７１ｇ実施例２ （’−−−−〜−−７ Ｐｍｐ−１）−−１”ｙｒ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−
Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇの調製 蒸留７−＝−ソー　ｔＶ　４．５　ｎｎｌ中、実施例１
からのＰｍｐ−（Ｂｚｌ　）ｆｌ）−ｒｙｒ（Ｂｒ−Ｚ
）−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ（ＯＭｅ−Ｂ’ｚ
ｌ　）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−樹脂４，２１ｉ’
（１，５ミｌＪモル）を無水フッ化水素４０ｍ１と０°
Ｃで１時間反応させる。前記と同様に処理し、真空下で
蒸発乾固させた後、残渣を無水エーテルで処理し、濾過
して粗ペプチド１．３：ｌを得る。実施例Ｊと同様に、
液体アンモニア中、ナトリウムの反応を用いてＰｍｐ基
からのｌ３ｚｌ基の除去を行なう。得られた非保護オク
タペプチドを、前記アミドの調製と同様にして０．０１
Ｍフェリシアン化カリウム溶液を用い、ｐｌ−１７〜７
．５で、着色が３０分間持続するまで環化する。

酸化溶液を酢酸でｐＨ４，５の酸性にし、反応混合液を
バイオ−レックス（ｌ１ｉｏ−Ｒｃｘ）−７０カラムに
ｊＪｉ　Ｌ、５％ｍ酸１βて溶出してテスグリシンアミ
ドオクタベブチド６００７Ｉ１ｇを得る。

ロー　　−−−−’　　　−＋ Ｐｍｐ−１）−１”ｙｒ−Ｐｈｃ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｃ
ｙｓ−Ｐｒｏ−Ａｒｇのオ′占製 （１）向流分配 試＊１：バイオーレソクス７０からの６００　”ＴＩ、
＋＋　−１−５ｕ（川／ｌｌ０Ａ（１／＋１２０　　（
４：　Ｉ　：　５　）、２００１−ワンスファー （ａ）フラクション１５０’−Ｊ６］、Ｉ　６９　ｕｔ
ｙ（Ｉ））フラクション１３°３〜１４９および１６２
〜１６３ （２）調製的ＩＩＰＬに 試Ｉｔ　：　５２４１ｇ（（］）−（ａ）より）、オー
／Ｖ　チックＣ１，８（２５ｃｍ、］Ｑｍ７Ｉ、ＪＯミ
／ｙｎ＋ン）緩衝面Ａ：０．１％Ｔ　Ｆ　Ａ 緩衝液Ｂ　：　０．２５％Ｕ−Ｆ　Ａ　／　Ｃｌｌ３　
ＣＮ　（４二６）、６０％１３、インクラチック、３０
００ｐｓｉｇ　、　３．ｏｍｚｙ分 注入：　１０ｎｒ１１０．６ｍｌ緩衝液Ａ、２３５ｒ１
ｍ（２，□ＡＵＦＳ） （ａ）　２４．　ｍｙ （１））　７．３　”！！ （２）　−（ａ）および（２）　−（１））を合し、Ｉ
ＩＰＬＣ」−で再精製して純ペプチド１５１１９を得る
。

（３）分配クロマトグラフィー 試Ｅｌ　：　Ｊ　１７７１９　（（１）　−（ａ）より
）、Ｇ−２５（微細、２．５　Ｘ　５５　ａｎ　）、ｎ
　−Ｂ　ｕ　ＯＨ／１ｌＯＡ　Ｃ／ｌ−１２０（４：１
：５） （ａ）フラクション３２〜３６、＋Ｎ生成物８３πＩＰ
ｒｏ−Ａｒ、ｇ−ＮＨ２の調製 ベンズヒドリルアミン樹脂（１３Ｉ−ＩＡ）上、同相法
により標記化合物を調製する。すなわち、ＢＩＩＡ樹脂
１：、Ｏｇ（１，、］　３ミリモルＮｒ１２７１樹脂）
を、ジメチルポルムアミド中、Ｂｏｃ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ
）Ｑ、ＪＭとなるように調製した１、５轟昂のＢｏｃ−
Ａｒｇ−（Ｔｏｓ）、１．５当量（７）　Ｉ）　ＣＣオ
ヨび３．０当量ノＨ１１Ｔと反応させる。５０％’ｉ”
　１；　Ａ　／塩化ノチレンで脱保護し、５％ＤＩＥＡ
／塩化メチレンで中和する。予め形Ｉ戊させたＤＭＦ中
、Ｂｏｃアミノアシル列称無水物を用いてカップリング
を行ない、ペプチドを段階的に延長する。Ｉ）　Ｍ　Ｆ
中、ＤＣＣおよびＩＩ　’Ｂ　Ｔを用い、Ｂｏｃ−Ａｓ
ｎ、Ｂｏｃ−Ｄ−Ｔｙｒ−（Ｅ【）およびＰｍｐ　（Ｍ
Ｂ　ｚ　）を順次カンブリングする。カップリングの完
了を定性ニンヒドリンテストでモニターし、要すれば再
カンプリングを行なう。得られだＰｍｐ　（ＭＢｚ　）
−Ｄ−ｒｙ　ｒ　（Ｅ　ｔ　）−Ｐｈ　ｅ　−Ｖａｌ−
Ａｓｎ−Ｃｙｓ（ＭＢ７．）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ
）−Ｂ　Ｉ−Ｔ　Ａ樹脂を塩化メチレンで洗浄し、一定
の重量（２，３４１になるまで乾燥する。

アニソール４　ｍｌの存在下、無水液体フッ化水素３０
ｍ１で、０°Ｃにて１時間処理してペプチドを脱保護し
、樹脂から開裂させる。真空下で蒸発乾固し、樹脂をエ
チルエーテルで洗浄し、風乾し、脱ガスしだジメチルホ
ルムアミド（３Ｘ　２０　ｍｉ　）および２０％酢酸（
４Ｘ　２０　ｍｌ　）で抽出する。該１）ＭＦおよび酸
抽出液を水４Ａ（酢酸でｐＨ４，５とする）に加える。

水酸化アンモニウムてＰＩＩ７，２とｌ７、この溶液に
攪拌しながら、アルコン算囲気Ｆ、黄色が持続するまて
０．０１．　Ｍフェリシアン化カリウムを滴丁する。氷
酢酸でｐＨ４，，３とする。

混合液を濾過し、′ｌｉ５液をパイオーレツクヌ７０カ
ラム（■ｖ−型）に通す。カラムを水２００　ｍｌで洗
浄後、粗ペプチドをピリジン／ｆｆＩ’酸／水（，３０
：　４：６６、Ｖ／■）３００ｍｌで溶出する。溶出液
を真空下、３０’Ｃで蒸発させる。残渣を０．２Ｎ酢酸
１００ｒｎｌで溶解し、凍結乾燥し、粗製の標記オフＰ
　ｒ　ｏ　−Ａｒ　ｇ−ＮＩＩ２の精製（１）向流分配 試料：　６０７　ｍＷ粗、ｎ　−ＢｕＯＩ−（／ＨＯＡ
ｃ／ｌ−１２０（４：１：５）、２４０トランスフアー
（ａ）フラクション１５４〜１７０および１９０〜１９
２．７１ツ （ｂ）フラクション１７１〜１８つ、２３０　’１／（
２）ゲル濾過 試料：　１２３１１ｇ１）−（ｂ）より）、Ｇ−１５（
２、５Ｘ　５５　ｃｍ　）、Ｑ、　２Ｎ　　ｌｌ０Ａ　
ｃ使用（ａ）フラクション４６〜５０、〜２０　ｍｙ（
＋））フラクション５１〜７７、純ペプチド６０ｌｑ Ａ　ｒ　ｇ　−ＮｌＩＣ３ＦＩ７　　ノ調製前記と同様
に、ただし、２位にｎｏ　ｃ　−Ｊ）−Ｉ−ｅ　ｕを用
いて調製した（Ｐｍｐ’−１）−ｊｅｕ２−Ｖａｌ４−
デスＧＩｙ−Ｎｌ−１２）　Ａ　Ｖ　Ｐ　Ｑ、１ミリモ
／Ｌ’およびｎ−プロピ／Ｌ／７ミン０．１ミリモルの
Ｉ）ＭＦ２０ｍｌ中混合物をＤＣＣ２３ツ（０，，１１
ミリモル）およびＦＩ　Ｊ３　Ｔ　ｌ　４　ｎｔｇ（０
１１ミｌＪモル）と室温て２時間反応させる。

揮発性物質を蒸発させて油状の生成物残渣を得る。

生成物を前記と同様に、（］）Ｇ　−１０−セファデッ
クス」−、ゲル濾過、０．２Ｎ酢酸溶出、（２）３９％
アセトニトリル−水中、０．０５％’Ｉ”　Ｆ　Ａを用
いＩＩＰＬ　Ｃに付し、ついで、再び（３）ゲ）ｖ′／
ｒ３過により精製し、標記の純オクタペプチド２０Ｍｆ
を得る。

アミノ酸分析：ＡＳＰｏ、８８、Ｐｒｏ　Ｏ，’９３、
Ｖａｌｌ、、０Ｏ１Ｌｅｕｌ、Ｑ９、Ｉ’１１ｅＱ、８
３、Ａ　ｒ　ｇｌ、０７゜Ｈｌ’　Ｌ　Ｃ＝　４’０％
水性アセトニトリル、緩衝液Ｑ、　Ｑ　５　Ｍ　　Ｋｔ
１２ＰＯ４により、Ｊ、１．３３に９５％主ピーク。Ｋ
ｂｉｎｄ＝ＩＯ−”Ｍで１２．１％抑制。

前記実施例２で調製した（Ｐｒｙ＋ｐ　−Ｄ−Ｔｙ　ｒ
　（Ｅｌ　）２−Ｖａ　１４−テヌＧＩ　ｙＮＨ２）Ａ
　Ｖ　Ｐ　オニ０：ヘンシｗ７　ミーアルキル化誘導体
も同様に製造される。

実施例５ Ｐｍｐ　（４−ＭｅＢｚ　Ｉ　）　−Ｄ−Ｔｙ　ｒ　（
Ｅｔ　）−Ｐｈ　ｅ　−Ａｂｕ−Ｃｙｓ（４−ＭｅＢｚ
ｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＢＨＡ樹脂の同相ペ
プチド合成 標記の樹脂担持ペプチドの固相合成用に、出発物質とし
てＢｏｃ−Ａｒｇ　（Ｔｏ　ｓ　）　Ｂ　ＨＡ樹脂（１
，１９ミリモ）Ｖ／ｆ樹脂）を用いる。これは、Ｂｏｃ
−Ａｒｇ（Ｔ６ｓ）３ミリモルを、ベンズヒドリルアミ
ンｍ脂１．　Ｏミリモルとジメチルホルムアミド中で２
時間反応させて製造する。塩酸塩形の該ペンズヒトＩＪ
　）し樹脂を一夜塩化メチレンで覆う。ついて、塩化メ
チレンて洗浄しく４×１分）、塩化メチレン中７％ジイ
ソプロピルエチルアミン（２Ｘ２分）、塩化メチレン栄
独（６×１分）、ついて、予め乾燥したジメチルホルム
アミド（２×１分）で中和する。Ｂｏ　ｃ　−Ａｒ　ｇ
　（１’ｏ　ｓ　）の樹脂上への装填ハ、１−ヒドロキ
シベンゾトリアゾール（ＩＩＢ’Ｉ”　）　５　ミリモ
ルおよびジシクロへキシルカルボジイミド（１）ＣＧ）
３ミリモルを用い、シェーカー上で２回行なう。常法に
より定量ニンヒドリンテストおよびアミノ酸分析を行な
い、樹脂への装填パーセントを測定する。この実施例に
おける装填は６２．’６６％、すなわち、０．７４ミリ
モル／ｆ樹脂であった。つぎのアミノ酸Ｂｏｃ−Ｐｒｏ
をシェーカー」二でつぎの方法によりカップリングさせ
る。

（１）塩化メチレンで洗浄（６回、１分）。

（２）塩化メチレン中５０％′■”ＦＡで予備洗浄（１
回、１分）。

（３）塩化メチレン中５０％ＴＦＡて脱保護（２０分）
。

（４）塩化メチレンで洗浄（６回、１分）。

（５）塩化メチレン中７％ＤＩＥＡで予備洗浄（１回、
１分）。

（６）塩化メチレン中７％Ｉ）　Ｉ　ｌ！、　Ａで中和
（８分）。

（７）塩化メチレンで洗浄（６回、１分）。

（８）ジメチルホルムアミドで洗浄（２回、１分）。

（９）　Ｄ　Ｍ　Ｆ　中、保護アミノ酸３ミリモルおよ
び１−ＩＢ　’Ｉ’　５−：リモル、ついて、塩化メチ
レン中１）　ＣＣ３ミリモルを加え、２時間カップリン
グ。

００）ジメチルポルムアミドで洗浄（２回、１分）、。

■）塩化メチレンで洗浄（４回、１分）。

Ｃｌ２）エタノ−／Ｌ’　／塩化メチレン（］：］）で
洗浄（２回、４分）。

（１３）塩化メチレンで洗浄（４回、１分）。

残りのアミノ酸を、ベックマン・ペプチド合成器９９０
−　Ｂを用いて用貝次力゛ンブリングする。

Ｂｏｃ−ＡｓｎおよびＰｍＰ（４−Ｍｅ　Ｂ　ｚ　Ｉ　
）以外の各カップリングに用いる操作はつぎのとおりで
ある。

（１）塩化メチレンで洗浄（３回、１分）。

（２）塩化メチシン中５０％ＴＦＡで予備洗浄（１回、
］分）。

（３）塩化メチレン中５０％１”ＦＡで脱保護（３０分
）。

（４）塩化メチレンで洗浄（３回、１分、）。

（５）塩化メチレン７％Ｉ）ＩＥＡ予備洗浄（１回、１
分）。

（６）塩化メチレン中７％Ｉ）　ｌ　Ｅ　Ａで中和（１
回、］００分。

（７）塩化メチレンで洗浄（３回、１分）。

（８）　塩化メチレン中保護アミノ酸３ミリモル、つい
で、Ｉ）　ＣＧ　３ミリモル、塩化メチレン中Ｑ、　３
　Ｍ、１（Ｌ＋ｚを加え、２時間カップリングする。

（９）塩化メチレンで洗浄（３回、１分）。

（１０）エタノール／塩化メチレン（１：１）で１５１
Ｅ　Ｋ’（３回、１分）。

（１１）塩化メチレンで洗浄（３回、１分）。

Ａｓｎ基をカップリングさせる場合は、Ｊ−ヒドロキシ
ベンゾトリアゾール（ＩＩ　Ｂ　Ｔ）　ｆ３ミリモル、
ジメチルホルムアミド中０．６Ｍ１ｏ＊、を用いる。

４−ジメチルアミノピリジン３ミリモルを用い、Ｐｍｐ
　（４−Ｍｅ　Ｂ　ｚ　ｌ’　）をペプチド樹脂にカッ
プリングさせる場合には、乾燥ジメチルホルムアミドも
溶媒として用いる。各カップリング反応の完了をニンヒ
ドリンテストでモニターする。Ｃｙｓおよびペンタメチ
レンメルカプトプロピオン酸（Ｐｍｐ）基のチオール基
を保護するだめに４−メチルベンジル基（４−ＭｅＢｚ
ｌ）を用いる。

Ｐｍｐ−１）−Ｔｙｒ（Ｅｔ）−Ｐｈｅ−Ａｂｕ−Ａｓ
ｎ−Ｃｙｓ−Ｐｒｏ−ＡｒｇＮＨ２の調製 ７−’−ソ’−／Ｖ２ｍｌ中、Ｐｍｐ（４−ＭｅＢｚｌ
）−Ｄ−Ｔｙｒ（Ｅｔ　）−Ｐｈｅ−Ａｂｕ−Ａｓｎ−
Ｃｙｓ（４−ＭｅＢｚｌ　）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ
）ＢＨＡ樹脂１．２５　（／　（０，３７ミリモル）を
無水フッ化水素２０ｍ１と０°Ｃで５０分間反応させる
。真空下でＨＦ・を蒸発させた後、残渣を無水エーテル
で洗浄しく４Ｘ２０ｍ／）、粗ペプチドを、ジメチルホ
ルムアミド５０−および３３％酢酸５０−で、予めｐＨ
４，，５に調整し、脱ガスした水２１中へ抽出する。こ
の水性稀ジスルフヒドリルオクタペプチドを、黄色か３
０分間持続するまでｐＨ７，２の０．０．１　Ｍフェリ
シアン化カリウムを用いて（５０＋＋１１　）バ１化す
る。氷酢酸でｌ）Ｉ＋　４．５に調整し、溶７ｆりをゆ
っくりと弱酸性アクＩ））し樹脂（バイオーレツクヌ−
７０）ノＪラム（２，５Ｘ　１．２−ト ＩＴ型）に通す。カラムをピリジン−酢酸塩緩衝液（ピ
リジン／氷酢酸／水（３０：４：６６））て溶出する。

ピリジン−酢酸塩溶ａ夕を真空下で留去し、残渣を１０
％酢酸から凍結乾燥して粗製の標Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ＮＨ
２の精製 （］）自流分配 試料：　３００　ｍｙ、ｎ　−Ｂｕｏｌｌ、４１０Ａｃ
１０２０（４：］：５）、２４０トランヌフアー（ａ）
フラクション１７６〜１８６、純ペプチド９９．６〃！
ダ （１〕）フラクション１７０〜１７５および１８７〜２
１０．１１７．２４−１１９ 精製物の収量２１６．８４ｍｙ（５５％）（２）分子式
：Ｃ３０ＩＩ７２Ｎ１２０１０Ｓ２分子＠：ＪＯ６４，
５３ アミノ酸分析：ＡＳＰ（１，００）、Ａｂｕ＋Ｃｙｓ　
　（］、、７０）、Ｔｙｒ（ｏ、６４　）、ｐＨｅ（０
，９８）、Ａｒｇ（０，９１） ペプチド含量ニアミノ酸分析から６８．０６〜９１．５
２％、窒素分析から８７３３％（３）クロマトクラフィ
ー・データ 溶　　　　媒　　　　　　　　　ｋ「 ’Ｉ’ＬＣｎ−ＢｕＯＨ，４１０Ａｃ／１巳ｔＯＡｃ（
］：］：１：Ｉ）　　０．５６＋１−ＢｕＯＨ／ｌｌ０
ＡＣ／ １（２０（ＣＩ：５）１層　　　　　　　０，４２１１
ＰＬ（：　　　　に１８　カラム　　　　　　ｋ′イン
クラチソ、り　Ｉ　ｌ　’２０　／　Ｃ目３ＣＮ１１’
ＦＡ（６０：／ｌｏ：０．２５）　　　　　　　　３Ｑ
、Ｑ　５Ｍ　　１（１１２ＰＯ４ニ アセトニトリル（６０： ４０）　　　　　　　　　　　　７．３３クラシエント
　　１１２０／Ｃ１１３ＣＮ　ｌｌ’ｌ・Ａ８０：２０
：０．２５〜 ５０：５０：０．２５　　　　８．８２高速原子ポ　ｍ
　／　ｚ　Ｊ　Ｑ　５５　（Ｍ−１−ＩＴ　）’ンバー
ド　　１０１０６３（夏Ｉ） （Ｆ　Ａ　Ｂ　） 実ＭＩＬ例６ １’ｍｐ−（４−八・ｆｅ１３ｚｌ　　）−１）−’Ｉ
’ｙｒ（Ｊ籠　Ｌ　　）　　−門１ｅ−△Ｉａ−Ａｓｎ
−Ｃｙｓ−（４−ＭｅｌＳｚｌ　）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（
’Ｊ’ｏｓ）−１３１１Ａ樹ｊ指の固相ペプチド合成 実施例５と同（子な方法により、Ｂｏｃ−Δｒ　ｇ　（
’Ｉ’ｏゆ一ベンズヒドリルアミン樹脂（’０．７２ミ
リモ）ｖ　／！　）から出発し、ヘツクマン９９０−　
Ｂペプチド合成器でテトラペブチＦ世持樹脂、１ｌｏｃ
−Ａｓｎ−Ｃ：ｙｓ−（４−ＭｅｌＳｚｌ　）−ｌ’ｒ
ｏ−Ａｒｇ（’１７ｏｓ　）−Ｉ（１１Ａ　Ｏ，７２ｇ
（０，３６ミ’Ｊモル）を音数する。同様に、ｌ１１３
′１′およびＩ）　ＣＧ　ヲ用い、シェーカー１−て残
りのアミノ酸を順次、２時間カップリンクさせる。最後
の基、すなわち、Ｉ’１Ｔｌｌ）　（４，−Ｍｅ　Ｂｚ
　Ｉ　）をカッブリンクさせた後、樹ｊ指含有ペプチド
を１）［Ｊ記と同（イ（に１５Ｌ＆トＬ、乾燥して標記
中間体０．８８ｇを得る。

１’　ｒ　ｏ　−Ａ　ｒ　ｇ−ＮＩＩ２の１ｉ１１１１
製アニソール２　＋＋＋ｌ中、Ｉ’ｍｐ　（４−Ｍｅ　
、ｌＳ　７．１　）帽）−１’ｙ　ｒ　（ｌｉｆｔ　）
−１’ｈｃ−Ａｌ　ａ　−ＡＳＴＩ　−Ｃｙ　ｓ　（４
−ＭｃｌＳｚ、ｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（’Ｉ’ｏＳ）−
ｌ目’　Ａ　ｔＭＪ脂を無水ＩＩ　Ｆ　２　Ｏｒｒ＋１
！と、Ｏ″Ｃで５０分間１ｙ応させる。ｎ丁ｊ記と同様
に処理し、”３　”ｅ（Ｃ”）６　４５　ｍｌを浦費さ
ぜ、１１１製Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ＮＩ１２の精製 （１）自流分配 試＊、ｔ　：　２３０　ｍｌ／、ｎ　−ＢｕＯ１１／ｌ
ｌ０Ａｃ／［２０（４：１：５）、２４０トランスフア
ー（ａ）フラクション１６０〜１７８、純生成物１０５
、２　ｍ／／　　。

（１））フラクション１７９〜１９０および１５０〜］
５９．４９．５　〃１ｇ 純生成物の収量１５４．７ノノｉｙ（４］％）（２）分
子式：　Ｃ４９”７ＯＮ７００１０Ｓ２分子Ｍｔ：ｌ０
５０．４４９ アミノ酸分析：ＡＳＰ（１，００）、Ｐ　ｒ　ｏ　（］
、、０３　）、Ａ、Ｉ　ａ　（０，９４）、Ｃｙｓ（０
，４６）、’ｉ”ｙ　ｒ　Ｃ０，６５）、門１ｅ（０，
９１）、Ａ　ｒ　ｇ　（０，９２）ペプチド含量＝２つ
の分析から５９．１．８〜８１．７７％ （３）クロマトグラフィー・データ 溶　　媒　　　　　　　　Ｒ１ ’１’　Ｌ　Ｃｎ　−Ｉ３ｕＯＨ／ｌｌ０Ａｃ　／＋１
２０．．’Ｉζ【〇へＣ （１：１：１：］）　　　　　０．６４ｒｌＰｆ、ｃ：
　　　　　　Ｃ１０ツノ　ラ　ム　　　　　　　　　　
　　　　　　ｋｌイソクラチック　ｌＩ２０／Ｃ■ｌ３
ＣＮＩＩ丁Ａ（６０：４０：ｏ、１）　　　　　　２．
１８クラジエント　　ｌＩ２０７Ｃ１夏３ＣＮＩＹＦＡ
６０：４０：０．１〜 ５０　：　　５０　　：　０．１　　　　　　　　６．
４７＋ 高速原子ポ　ｔｎ／ｚ　Ｊ　Ｏ５１，（Ｍ−［（）ンバ
ー（Ｆ　　Ｊ　０４９　（Ｍ、−１−１）Ａｌ１） 実施例７ １’ｍｐ　（４，−Ｍｅ１３ｙ、　Ｉ　）−Ｊ）−Ｔｙ
　ｒ　（Ｅｔ　）−Ｐｈｅ　（４’−Ｅｔ）−Ｖａｔ−
Ａｓｎ−Ｃｙｓ−（４−ＭｅＢｚｌ　）−Ｐｒｏ−Ａｒ
ｇ（Ｔｏｓ）−ＢＩＩＡ樹脂の固相ペプチド合成標記の
樹脂担持ペプチドは、シェカー上、１３　ｏ　ｃ　−Ａ
ｒｇ　（１−ｏｓ　）　ＢＩ−Ｉ　Ａ樹脂０４ミリモ／
１／　／　１７から、前記の方法、すなわち、ＩＩ　Ｂ
　ＴおよびＩ）　ＣＧを用いる２時間の脱保護−カップ
リングによりＢｏｃ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−（４−
ＭｅＢｚｌ）−Ｐｒｇ（Ｔｏｓ）−Ｂ　ＨＡ樹脂まで調
製することによシ得られる。つぎ０２つのアミノ酸基は
ベックマン・ペプチド合成器９９０−　Ｂを用いてカッ
プリングさせる。

Ｐｍｐ　（４−Ｍｅ　１３　ｚ　Ｉ　）はＤＭＡＩ）、
Ｉ）ＣＧを用い、−夜、手動でカップリンクさせる。樹
脂含有ペプチドを前記と同様に洗浄し、乾燥して標記の
中間Ｐｒｏ−ＡｒｇＮｉ１２　ｔ７）調製 ７　＝　ソー／ｌ／　３　ｍｌ中、Ｐｍｐ　−（４−Ｍ
ｅ　Ｂ　ｚ　１）−１）−’Ｉ−ｙ　ｒ　（，１らｔ）
−Ｐｈｅ（４−Ｆ、ｔ）−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−（
４−ＭｅＪ３ｚ　Ｉ　）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（’Ｉ’ｏｓ
　）−Ｂ　ＩＴＡ樹脂を煎水フッ化水素３０　ｍｉと０
°Ｃで１時間反応させる。前記と同様に処理し、Ｋ３Ｆ
ｅ（ＣＮ）６３８ｎ？ｌＶを消費させる。租ペプチド約
５０ｍ９をパイオーレツクヌカシムから得、１３９ダを
溶液から析出させ、全敗量１８９　ｔＱ　（４２，７％
）の標記ペプチドを得る。

精製 （１）分配カラムクロマトグラフィー、セフアデツクス
Ｇ−２５ 試料：　５０ｍｙ１ｎ−ＢｕＯＨ／ｌｌ０Ａｃ／Ｈ２０
（４：１：５） （ａ）７ラクシヨンＡ、２３．８６　’ｆ／（ｂ）フラ
クションＩＳ、１８．５　ｍｙ調製ＩＩ　Ｉ）　Ｌ　Ｃ 試Ｆｌ：４３ｍｇ（（１）ノフラ’）　ジョンＡ−１−
Ｒ）、：ｔ　−）Ｌ／　テックス０１）　５．１０　ｍ
ｒＶＸ　２５　ｏｎ、５μ、流速４ｎＩｌ／分、水／ア
セトニトリ）ｖ　／　’Ｉ″ＦＡ（５０：　５０　：　
０．２５　）、インクラチック、２２９旧η　（２，０
ＡＵＰＳ）　、　１１：］人２０２ツノｙ／　３　０　
０　　ｐ、ｌおよび４．０　”ｆｌ／　４２０　ｍｌ、
純ペプチド収量３０．Ｏｙ０ （２）物理恒数 分子式：　Ｃ５３Ｈ７８ＮＪ　２０ＪＯ５２分子用（：
３１０６．４７ アミノ酸分析：　ＡＳ＋）（１，００）、Ｐｒｏ（Ｑ、
７ｓ〜０．８４．）、Ｃｙｓ　（０，４５）、Ｖａｌ（
１，，０２）、Ｔｙｒ（０，６３）　、　Ｐｂｅ（ｐ　
−Ｆ−Ｌ）（１，５０）、　Ａｒｇ（１，００〜０．９
６） ペプチド含量ニア３３〜８９．６％ （３）クロマトクラフィー・データ 溶　　媒　　　　　　　ｌζｆ ’Ｉ”　Ｌ　Ｃｎ　−１１ｕ　ＯＨ／ｌｌ０Ａ　ｃ　／
１１２０／Ｅ　ｔＯＡ　ｃ　（Ｊ　： ］　：　ＩＩ：　］　）　　　　　　　　　０．７　Ｏ
ｎ　−Ｂ　ｕ　ＯＨ／１．−１０　Ａ　ｃ　／１（２０
（４：ｌ：５）Ｊ二層　　　　　　　　　０．２９９Ｌ
ＪＪ’１．、ＣＣ１３カラム　　　　　ｋｌインクフチ
ツク　Ｈ２０／Ｃ１−１３ＣＮハ゛ＦＡ（５５：４５：
０．１）　　　　４．４３’ｌラジエント　　０２０７
Ｃ１１３ＣＮ／ｒＦＡ６０：４０：０．１〜 ５０：５０：０．１　　　　　　　８．７１、Ａ１、　
　ｒｉ＋／ｙ、　］　ｌ　０７　（Ｍ−１−ｒｒデー− １，１０ぺＭ−、Ｉｆ） 実施例８ Ｂｏｃ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ　（４７ＭｅＢｚ　Ｉ　）−Ｔ
’ｒ、−ｏ−Ａｒｇ−（Ｉ”ｏｓ’）−Ｍｌへ■Δ樹脂
の合成Ｒｏｃ−Ａｒｇ（Ｕ’ａｓ　）−４−メチルベン
ズヒドリルアミン して用い、ベックマン９　９　０　−　１３ペプチド今
成器中で該当するｔＬＢｏｃ保護アミノ酸を順次カップ
リングさせて１ミリモ／Ｌ’の１３ｏｃ−Ａｓｎ−Ｃｙ
ｓ（４−ＭｅｌＳｚｌ）−１’ｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）
−旧［Ａ樹脂を得る。

該保護ペプチド樹脂１８３ｇを得、各々、０．９Ｊ’　
ｒ　ｏ　−Ａ　ｒ　ｇ−Ｎｌ１２の合成前記で？′＋ら
れた保護ペプチド樹脂の１部分をさらに該当する１１０
ｃアミノ酸およびβ−（　Ｓ　−Ｍｅ　１．Ｓ　ｖ　Ｉ
　）−１’ｍｐ−Ｏｆｌ　　ｉ，５　ミリモルつつと順
次カップリングさせて最終の保護ペプチド樹脂１．１６
ｇを得る。

得られたＰｍｐ（Ｓ−ＭｅＢｙ．ｌ　）−１）−Ｔｙｒ
（ＥＣ）−１’ｈｅ−Ｇｌ　ｙ　−Ａｓ　ｎ　−Ｃｙ　
ｓ　（４−ＭｅＢｚ　ｌ　）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（’ｌ’
ｏｓ）Ｍ　Ｉｓ　Ｈ　Ａ樹脂を真空下で乾燥する。この
保護樹脂をアニソ−／ｖ　１．−　５　ｍｌおよび無水
フッ化水素２　５　ｍｌて０°Ｃにて１時間処理する。

この脱保護ペプチドを、水２β中、０．０１モルのフェ
リシアン化カリウム溶Ｈ（ＰＨ７．２）で処理する。該
酸化剤５３ｍｌを用いる。

得られた溶液をＣ１８フラッシュカラムに通ず。

カラムを、１フラクション当り２０〃Ｊの０．２５％ト
リフルオロ酢酸含有５０％アセトニトリルで溶出する。

フラクションから粗生成物３２５りを単離する。生成物
をＣＣＤ　（Ｂ／Ａ／Ｗ（４．：　ｌ　：５））によシ
さらに精製して純度９９％の標記生成物１８８〜を得る
。

アミノ酸分析：ペプチド含量８２％、ＡｓＦ３．０４、
′Ｉ″ｙｒ０．９２、Ｐｒｏｌ．］、５、Ｐｈｅ　１．
０　１ＳＧＩＹ１、００、Ａｒｇｏ．９１、ＣｙＳｏ．
５４」− Ｆ　ＡＢ　／ＭＳ　＝ｍ　／Ｚ　（Ｍ＋ＩＩ　）　　１
　０　３　７Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ＮＬ１２ノ合成 実施例８の保１穫ペプチド樹脂の１部分をさらに該当す
るＩｓ（Ｉｃアミノ酸およびβ−（Ｓ−４−Ｍｅ−Ｂｚ
ｌ）−Ｐｍｐ−０１１　　１．５ミリモ／ｌ／づつと順
次カップリングさせ、真空下で乾燥して最終保護ペプチ
ド樹脂、Ｐｍｐ（Ｓ−４−ＭｅＢｚｌ　）−１ルＴｙｒ
（Ｅｔ）−Ｐｈｅ−Ｃｈｇ−Ａｓｎ，Ｃｙｓ（Ｓ−４−
ＭｅＢｚｌ）−Ｐｒｏ−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）ＭＢＨＡ樹脂
１．０６Ｆを得る。

この保護ペプチド樹脂をアニソール１．５−および無水
フッ化水素２５ｍ／で処理する。

前記と同様にフェリシアン化カリウムで酸化し、ＣＩ８
カラムで単離し、粗製の標記生成物１６５ツを得る。前
記と同様にＣＣＤ，Ｇ−１．５およびＰ−２ゲルｐ過て
さらに精製してＨ　Ｐ　Ｌ　Ｃ純粋の標記生成物５５■
を得る。

ペプチド含量＝８８％ ＦＡＢ／ＭＳ：ｍｌｚ１］］９（Ｍ＋ｏ）’一実施例１
０ （０■）の調製およびその実施例３の化合物調製におけ
る使用 ＢｏｃＣｙｓ（４−ＭｅＢｚｌ）４．８　７　１　（　
１　５　ミ！Ｊモル）をエタノ−）Ｖ　３　０　ｎ−ノ
に溶解し、水１０ｔｎｌを加える。ついで、重伏酸セシ
ウム水溶液でｐＨを７。

１に調整する。

混合液を濃縮し、残渣をトルエン５’　Ｏ　ｍｌから３
回熱発させる。この残渣を室温で高真空下に一装置く。

この塩をジノチルホルムアミド３５−に溶解し、市販の
クロロメチルフェニル樹脂５ｙを加える。

混合液をアルコン雰囲気１０、５３°Ｃて一夜掲１拌す
る。

混合ｇｆ．を濾過し、樹脂をジメチルポルムアミド（　
５　Ｘ　６　０　ｍＡ！　）、Ｉ）　Ｍ　Ｆ　／水（９
：■、５×６０ｒｒｌｌ）、Ｉ）　Ｍ　Ｆ　（　５　Ｘ
　６　０　ｍｌ　）ついでエタノ−）ｖ　（６×６０ｒ
ｎｌ）でｂし浄する。これを高真空ト・、室温で週末を
辿して乾燥する。

前記と同様に、ＡＳｌｌ、Ｖａ　１１Ｐｈ　ｅ，　Ｉ）
−’ｉ’ｙｒ　（ｌｉｔ　）の１３０Ｃ誘導体およびＳ
−（４−ＭｃＢｚｌ）Ｐｍｐ誘導体を用い、ベックマン
合成器中でペプチド鎖を形成させる。樹脂を取出し、手
動シェーカーに入れる。

このペプチド樹１１旨０．８６１ｉ’をアニソール１．
５　ｍｌで処理し、フッ化水素１５．、Ｊ中、０°Ｃで
６０分間攪拌する。フン化水素を吸収減圧下、０°Ｃて
除去する０ 残渣をエーテル（３Ｘ２５ｍｌ）で洗浄しくすてる）、
ジメチルホルムアミドおよび３０％酢酸でペプチドを溶
出させる（　４　Ｘ　］　Ｏｍｌ　）。この溶液を脱ガ
スしだ水２βに加え、水酸化アンモニウムでｐｆｌを７
．０に調整する。０．　Ｏ］、　Ｍフェリシアン化カジ
カリウム溶液３５　ｍｌをゆっくり加える。

酢酸でｐＩＩを４．５に調整し、混合液を弱塩基性イオ
ン交換樹脂（ＡＧ−３Ｘ４　１Ｒ−４５）２５ｇ（湿潤
）と共に３０分間攪拌する。この懸濁液をｒ１過し、樹
脂を３０％酢酸（２Ｘ　４００　ｍｌ　）で洗浄する。

ｒ液をＣ］８フラッシュ・カラム（７Ｘ　＋−６＃１１
〃）にｉＭす。カラムを水で洗浄しく　３　Ｘ　４００
　ｎ４　）、ペプチドをアセトニトリル／水７−ｒ　Ｆ
　Ａ　（５０’：５０：ｏ、２５）で溶出させる。フラ
クション３０〜３６を合し、濃縮腰凍結乾燥して標記の
遊間１Ｃｙ　ｓ　（Ｏｌｌ　）環状中間体２５■を得る
。

グリセロール中、ＦΔＢ　、マス・ヌペクトル：Ｂ　２
７　（Ｍ−＋−ｏ　）　　、８２５　（Ｍ−Ｈ）このＣ
ｙＳｍ２ｏｙｔｙを、ジメチルポルムアミド中、１）　
ＣＣおよびＩ−Ｉ　Ｂ　Ｔ　（７）存在下、１当量ｏｐ
ｒｏ−Ａｒｇ　（ＮＩ１２　）Ｉ’ｌＣ１（市販のジ塩
酸塩をトリエチルアミン１当量で処理して調製）１当量
と反応させて実施例３の化合物を得る。同様に、該Ｃｙ
ｓ酸にＰ　ｒ　ｏ　（ＯＭｅ　）に結合させ、温和な水
酸化すｌ−ＩＪウムて加水分解して対応するＰｒｏ酸を
得、これをＡ　ｒ　ｇ　（ＨＣｌ　）　（ＯＭｅ　）と
反応させ、得られたエフ。

チルを温和な条件下で加水分解して実施例３の化合物の
酸親化合物を得る。所望により、この化合物をカリウム
塩として単離する（後記実施例１２参照）。別法として
、該縮合にＰｒｏ−Ａｒｇ（ＮＬＩ２）を直接用いるこ
とができる。

前記で得られだＰｍｐ−Ｄ−Ｔｙｒ　（Ｅｔ　）−Ｐｈ
ｅ−Ｖａｌ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ−ＯＨ４，５■およびメタ
／　−）Ｖｌ、ｍｌノ混合液をエーテル性ジアゾメタン
で処理し、調製１’＋　１’　ｆ、　Ｃ（５０％Ｃｒ１
３　ＣＮ／　５　Ｑ％ｒ１２０／　０．１％”’　”　
Ａ）　テＦ’ｔ　製１．テｉＪ応すルメ（−／Ｌ’　エ
ヌテ／Ｌ’　４．３ｒｑ１　（９４％）を得る。Ｆ　Ａ
　Ｂ　Ｍ　Ｓ　：　ｒｎ　／　ｚ　８４１（Ｍ−１−Ｉ
Ｉ　）　　、ＩＩ　Ｉ）　Ｌ　Ｃおよび１゛【、Ｃによ
り均質。

実施例１１ Ｐｒｏ−Ａｒｇ（ＮＩＩ２　）　ｔｙ）末端縮合による
調製セシウム塩法を用いてＢｏｃＰｒｏをメリーフィー
ルド樹脂にカップリングさせてＢＯｃ−Ｐｒｏ−ＯＣＪ
１２−　Ｃ６１１４−樹脂を得ることにより、ＢｏｃＰ
ｒｏ−メリーフィールド樹脂を製造し、合成用の出発物
質を用いる。つきの操作を用い、ベックマン９９０−Ｂ
ペプチド合成器北で合成を行なう。各々、３当量のアミ
ノ酸を適当な溶媒に溶解しく　４−ＭｅＢｚ　Ｉ　−Ｃ
ｙｓｌＶａｌ、ｐＨｅのｌ５ｏｃ誘導体：ジメチルホ／
Ｌ／ムアミド、Ｉ）　−Ｔｙ　ｒ　（ＥＣ）まだはＢｒ
Ｂｚ−４）−ＴｙｒのようなＸ：塩化メチレン／ジメチ
ルホルムアミド（１：Ｉ）、４−Ｍｅ１３ｚ　Ｉ　−Ｐ
ｍｐ　：塩化メチレン〕、４−Ｍｅ　Ｉｓ　ｙ、　ｌ　
−Ｐｍｐ以外は当モル量のジシクロへキシル力ルポジイ
ミド（１）ＣＧ）および１−ヒドロキシベンゾ１〜リア
ゾール（ＩＩ　ＯＢ　Ｔ　）を用い、また、４−ＭｅＩ
３ｚ　ｌ−Ｐｍｐの場合は１当量のジメチルアミノピリ
ジンを触媒として用いてカップリングを行なう。カップ
リングの程度を定性的ニンヒドリン分析によって判定し
、要すればカップリングをくり返す。トリフルオロ酢酸
／塩化メチレン（１：１）を用いてＢｏｃ基を除去し、
洗浄後、５％ジイソプロピルエチルアミン／塩化メチレ
ンを用いて遊離アミンを生じさせる。４−ＭｅＢｙ、ｌ
−Ｐｍｐのカップリング前に固相配列順序付を用いてペ
プチドの配列をチェックし、その均質性を確認する。

最後のカップリング後、樹脂を乾燥し、ペプチド樹脂２
．２４１を得る（　Ｄ−Ｔｙｒ　（Ｅｔ　）２−Ｐｒｏ
７化合物の場合）。

Ｄ−Ｔｙｒ（Ｅｔ）２ペプチド樹脂１．１Ｆ（０，５ミ
リモル）およびアニソ−／Ｉ／３ｍｌをフン化水素（ｎ
　Ｆ）２５ｍｌ中、Ｏ’Ｃ（水浴）で６．０分間攪拌す
る。残渣ヲエチルエーテル（４Ｘ　２０　ｍｌ）で洗／
’Ｐ　Ｌ　（ｔてる）、ジメチルホルムアミド（３Ｘ１
０ｍｌ）、２０％酢酸（３Ｘ］、０ｒｎｌ）および０．
３Ｎ水酸化アンモニウム（３ｘ　１ｏ　ｍｉ　）でペプ
チドを溶出させる。

ρ液を脱ガスしだ水２１に加え、濃水酸化アンモニウム
でｐＨを７．１に調整する。薄い黄色が持続するまで、
攪拌しながら０．０１Ｍフェリシアン化カリウムを滴下
する（　４１．．７　）。この溶液を酢酸でｐｌ−Ｉ４
．７に調整し、冷所に一夜保持する。

溶液をアンモニアでＰＨ７に調整し、ＡＣ−３×４バイ
オ−ラド・イオン交換樹脂（湿潤、ＣＩ型）３０ｇと共
に１５分間攪拌する。ついて、この溶液を、さらに３０
９の樹脂を通してゆっくシとｐ過する。樹脂を２０％酢
酸（４Ｘ　２００　ｍｌ　）で洗浄し、ρ液を一夜冷所
で保持する。

ついて、／ｒ３液を、Ｃ−１８シランで被覆したシリカ
ケルを充ｊ真しだフラッシュ・カラム（５Ｃｍ　Ｘ］　
Ｏｃｎｒ　）　Ｋ　通ス。カラムを水３５０　ｍｌ　テ
ａ；ｆｆ＋　Ｌ、ペプチドをアセＩ・ニトリル／水（０
，２５％トリフルオロ酢酸含有）（１：１）５００＋＋
＋Ｊで２０＋＋＋／っつのフラクションに溶出する。

フラクション１１〜１７を合して濃縮する。残渣を濃酢
酸に溶解し、水で稀釈し、凍結乾燥し−ＣＤ−Ｔｙ　ｒ
　（Ｅ　ｔ　）２−プロリンペプチド１８９πダを得る
。これはさらに精製することなく、尾部修飾ペプチドの
合成に用いる。

Ｐ　ｒ　ｏ　（０１１）ノ同定 アミノ酸分析：ペプチド含＠５５％、Ａ　ｓ　ｐ　１．
００、Ｐｒｏｌ、２３、ＣＹＳｏ、３５、Ｖａｌｌ−，
０４、Ｔｙｒ（ＥＬ）１．４３、Ｉ’ｈｅ１．５１（（
ＩＩ）の同定 アミノ酸分析：ペプチド含量８２％、ＡＳＩ）０．９７
、Ｐｒｏｉ、ＪＱ、ＣｙｓＱ、３９、Ｖａｌｌ、０５、
Ｉ’ｙ　ｒＯ１９９、Ｐｈ　ｅ　０．９９ ＨＰ　Ｌ　Ｃ：満足する。３０％Ｃ：ｌｌ３（１；Ｎ　
７７０％０、　Ｑ　５　Ｍ　　ＫＨ２ＰＯ４，２ｒｎｌ
／分、５　ｕｃ−１８、ｋ’＝６．１４ ｉｉＪ記で得られたＤ−’ｒｙｒ（Ｅｌ）−Ｐｒｏ（Ｏ
ｌｌ）ＩＱｍｙおよびメタノール１ｒｎｌの混合液をエ
ーテル性ジアゾメタンで処理し、調製■ＩＰＬＣ（５０
％ＣＴｌ３ＣＮ／　５　Ｑ　％ｌ−１２０／　０．１　
％ｌ’　Ｆ　Ａ　）　で精製して対応するメチルエステ
ル７、５　ＩＩＱ　（７４％）ヲ得る。ＦＡＢＭＳ　：
　ｍ／ｚ　９３３　（Ｍ４−ＴＩ　）　、ＩＩＩ’Ｌ　
Ｃおよびｒ　Ｉ−Ｃにより均質。

ジメチルボルムアミド られた１）−’ｌ’ｙｒ　（Ｅｔ　）２−　７’０　リ
：ｙ　−−、−ｙｐ　ヘ−ｊ’−ｆ−ト２　９．７Ｑ／
Ｃ　０．０　３　３　１　ミリモル）およびＡｒｇ−（
Ｎｌ（２）　ｏ．ｏ　９　９　６ミリモルの溶液に、ジ
シクロヘギシルカルポジイミド１　０．３ｎｌ’／（　
０．０　５ミリモル）およＯニジメチルアミノピリジン
０．０５ミリモルを加え、反応混合液を０〜２０’Ｃて
４時間攪拌する。真空下でジメチルポルムアミドを除去
シ、残渣を実Ｍ］．１例３と同様に処理して４５％の収
率で所望のＩ）−Ｔｙｒ（ＪＥＬ）−Ｖａ１４７ミドを
得る。

実姉例Ｊ２ １’ｒｏ−１）−Ａｒｇ（ＮＩ＋２　）の合成および特
徴鎖状ペプチド樹脂、Ｐｍｐ（Ｓ−ＭｅＢｚＩ）−１月
’Ｉ’ｙ　ｒ　（ｌｉｔ　）−Ｐｈｅ　−Ｖａ　ｌ　−
Ａｓｎ　−Ｃｙ　ｓ　（Ｓ−ＭｅＢｚｌ　）−１’ｒｏ
−１）−Ａｒｇ（Ｔｏｓ）−ＢＩＩＡ樹脂を前記と同様
に、同相法により製造する。ずなわち、１．ＯミｌＪモ
ルのアミンに相当するベンズヒドリルアミン樹ｊ指１．
５ｙに、塩化メチレン／Ｉ）八ｉｐ（１：］）中、１）
　Ｃ　Ｃ　／　ＨＯＢ　ｔを用い、３倍過剰のＪ３ｏｃ
アミノ酸誘導体を順次カップリングさせる。Ｐｍｐ　（
Ｓ　−Ｍｅ　−１３ｚｌ’）はＤＣＣ／ＤＭＡＰでカッ
プリングさせる。

カップリングの完了はカイザー・テストまたは定量的ニ
ンヒドリン・テストでチェックする。該テストが陰性に
なるまで再カップリングを行なう。

該保護ペプチド樹脂を塩化メチレン、メタノール、酢酸
エチルおよび塩化メチレンで順次洗浄し、ついで、工乾
する。アニソール１．０ｍ７’の存在下、液体フッ化水
素１．５ｍ／でＯ′ｃにて１時間処理してペプチドを樹
脂から開裂させる。フン化水素を蒸発させ、高真空下で
乾燥した後、樹脂をエーテルで洗浄しく３Ｘ２０ｍｌ）
、５０％酢酸（２Ｘ５０ｒｎｌ）、１０％酢酸５０ｍｌ
および水５０ｍｌで抽出する。抽出液を合し、水で４１
に稀釈し、５０％水酸化ナトリウム溶液でｐＨ７．２に
調整する。この溶液に、黄ｆバカ利寺続するまで０．Ｏ
ＪＭ　　Ｋ３Ｆｅ（ＣＮ）６溶液を滴１でする（　３ｏ
　ｍｉ　）。ｐＨを氷酢酸で４．５に調整し、ｒ過する
。ｐ液をカチオン交換１− （バイオレックス−７０）カラム（ＩＩ型）にのせ、水
洗し、ピリジン酢酸緩衝ｇ！（ピリジン３０ｍ１゜酢酸
４ｍｌ、水６６ｍｔ　）　１００　ｍｉで溶出させる。

溶出液を蒸発乾固する。残渣を少量の１０％酢酸に溶解
し、水で１％酢酸となるように稀釈し、凍結乾燥し、粗
製の標記ペプチド６５０１ｎｆＩを得る。

該粗ペプチドを、ｎ−ブタノール／酢酸／水（Ｂ／Ａ／
Ｗ、／Ｆ：１：５）を用いる向流分配により精製して部
分的に精製したペプチド３３Ｆ’１ｇを得る。これを、
１％酢酸中、セファデックスＧ−１５カラム」二でのゲ
）ｖ７ＩＴｉ過によりさらに精製して純ペプチド２４．
５　ｍｌを得る。アミノ酸分析（Ｉ（Ｃ１／ＴＦＡ（２
：Ｉ）、０．００５％フェノール中、１時間加水分解）
　：　Ａｓｐｌ、Ｑ　ｏ、　ＰｒｏＱ、７２、ＣｙｓＯ
１６２、ＶａｌＱ、９９、−ｒｙｒｌ、０４、Ｐｈｅｌ
、０４、Ａ　ｒ　ｇ　Ｑ、９５、ペプチド７１％。Ｆ（
−Ｐ　Ｉ−Ｃ：　（４，０％アセトニトリル、／６０％
水１０．Ｊ％ＴＦＡ）、１ピーク、ｋ’＝　５．２　ｉ
　（４，５％アセトニトリル１５５％水１０．１％ＴＦ
Ａ　）、ｋ’−３，６ｉ　（グラジェント２０形アセト
ニトリル５’ｉ２０〜５０％アセトニトリル２０’ｉ５
０％アセトニトリル５′）、ｋ’−８，７、純度９７％
。ＴＬＣ：　Ｒ（０，３２（１３／Ａ／Ｗ、ｌ］：１）
蟇０．１２　（Ｂ　／Ａ／Ｗ、４：１１）ｉｏ、５０（
ｎ−ブタ／　−）Ｖ／ピリジン／酢酸／水、１５１０：
３：１２）。

抽出したペプチド樹脂はアミノ酸分析により、未だペプ
チドを含有しているのて、Ｉ）ＭＦ（３Ｘ５０ｒｎｌ）
で抽出する。Ｉ）　Ｍ　Ｆ抽出液を蒸発乾固させ、残渣
を１０％ＨＯＡｃに溶解し、１％酢酸となるまで稀釈し
、凍結乾燥し、さらに２６０　Ｍｌのペプチドを得る。

この物質のＦＡＲマス・スペクトルはｍ／Ｚ］０７９で
あり、所望の環状ペプチドのＭ＋１１に対応する。

実施例１３ 実施例ｊのペプチド合成の２位においてＢｏｃ−Ｐｈｅ
を用い−（１’ｍｐ−１）−Ｐｈｅ−Ｐｈｅ−Ｖａｌ−
Ａｓｎ−Ｃｙｓ−Ｐ　ｒ　ｏ　−Ａ　ｒ　ｇＮＩＩ２を
得る。

実施例２の開裂酸化反応を用い、同じ位置でＢｏｃ−Ｄ
−ＶａＩ　を代りに用いて、Ａｒｇを得る。

実施例１において＋３ｏ　ｃ−１）−１−ｅ　１１を代
シに用いて、 ７　　　　　　　　ｍ １’ｍｐ−Ｉ）−１−、ｃｏ−円１ｃｍＶａ　１−ＡＳ
ＩＴ−ＣＩＩＩＳ　−１’ｒｏ−Ａｒｇ−ＮＩ＋２を得
る。

実施例、５において、Ｐ　ｍ　１１の代りにβ−メルカ
プト−β、β−シクロテトラメチレンプ「１ピオン酸（
Ｉ’ｍ　＋１　）を用いて、 １−一一一一″″−１ １”ｍｐ−１）−１’ｙｒ　（１”：ｌ　　）−ＰＩ＋
ｅ−Ａｂｕ−Ｃｙｓ−１”ｒｏ　−Ａｒｇ（Ｎ１１２）
ヲ得ル。β−メルカプト−β、β−シクロヘキーリーメ
チレンプロピオン酸を用いてｒａｍｐ　誘」７７体を得
る。

一ノＪＭｌｉ例１において、２位にＢＯｃ　−Ｄ−Ｎ　
ｌ　ｃ、８位に１）　−Ａｒｇ（’Ｙｏｓ　）を用いて
、を得る。

実施例２に＄−いて、２位にＩｓ　ｏ　ｃ帽）−Ｃｈａ
を用いて、 Ｐ１ζｌ１１）−１）−ＣＩｌ　ａ　−１’ｈ　ｅ　−
Ｖａ　Ｉ　−肩７畳ｓ−１’ｒｏ−Ａｒｇ実施例１にお
いて、２位にＩＳ　ｏ　ｃ−α−アミノフェニル醋酸（
Ｐ　Ｉ）　ａ　）を用いて、「　　　　　　　　　　　
１ １’ｍｐ−１）−Ｉ’ｌ〕ａ　−Ｐｈ　ｅ　−Ｖａ　Ｉ
　−Ａｓ　ｎ　−Ｃｙ　ｓ　−Ｐ　ｒ　ｏ−ＡｒｇＮｔ
１２を得る。

実施例３において、保ｉ１　Ａ　ｒ　ｇの代りにＪ３ｏ
ｃ−Ｊ’ｒｏ−ＬｙｓＮｌ１２ を得る。

同様にして製造される他の代表的な化合物はつきのとお
りである。

「−一−−−−−−□−］ １’ｍｐ−１）−Ａｂｕ−Ｐｌ＋ｅ　−Ｖａ　Ｉ　−Ａ
ｓｎ　−Ｃｙ　ｓ　−Ｐｒ　ｏ−Ａｒｇ　−ＮＴ（２実
施例１４ 弁杆し」投与単位組成物 実施例］または３の滅菌乾燥粉末状の環状オクタペプチ
ドＱ、５　ｍｆｌを含有する弁杆１」注射用組成物をつ
きのとおり製造する。

ペプチドアミド０．５ノ〃ｙを、マンニト−ル２０　ｍ
ｇの水溶１（１，Ｉ　ｎ１１！に溶解する。無菌条件丁
でこの溶液を２　ｍｌアンプル中にｒ過し、凍結乾燥す
る。この粉末を、抗ＡＩ）ＩＩ機構の作用に感受性の浮
腫をわずらう患者に筋肉内まだは静脈内投与する前に復
元する。この注射は必要に応じて１日１〜５回くシ返し
、まだは連続静脈内薬剤注入を行なう。本発明の他のオ
クタペプチドも同様に調製され、使用できる。

赤用投与単位組成物 実施例２の生成物のことき本発明の微粉砕したオクタペ
プチド３０〜を、ベンジルアルコール７５　ｍｆおよび
市販の半合成の高級脂肪酸グリセリド混合物のような沈
澱防止剤１．３９５ｆの混合液中に懸濁させる。この懸
濁液を、計量バルブで閉じられ、エアゾル噴射剤を充填
しだエアゾ／Ｉ／１０ｒｎｌ容器中に入れる。この内容
物は１００単位用量からなり、浮腫患者に１日１〜６回
鼻内投与する。

特許出願人　スミスクライン・ベックマン・コーポレイ
ション 代理人弁理士青山　葆ほか２名

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 〔式中、 ＰはＰｈｅまだは旧＋ｅ（４’−Ａｌｋ）、Ｘ　は　夏
   ）ｉ’ｈｅ、　　１ＬＶａ　　ｌ、　　Ｉ）−１，ｅ、
   ｕ、　　Ｉ）−１１ｅ。 Ｊ）−Ｎｖａ、　Ｉ）−Ｐｌ）ａ、　Ｊ、）−Ｎｌ　ｅ
   ＳＩ）−Ｃｈ　ａ、　Ｄ−Ａｂｕ。 １）−Ｍｅｔ、１）−Ｃｈｇ、　Ｉ）−’ｌ’ｙ　ｒ、
   　Ｌ−Ｔｙｒｌｌ）−ａ　１１　ｅ。 １）−１’ｙｒ−（Ａｌｋ）まだはＬ−Ｔｙ　ｒ　（Ａ
   ｌ　ｋ　）、ＹはＮｔ１２、ＮＩＩＡ　１　ｋ、　Ｎ１
   −ＩＢ　ｙ、　ｌまたは０Ｉ−Ｉ、Ｗは１〕まだはｆ−
   Ｐ　ｒ　ｏまだは／１Ｐｒｏ　（テヒドローＰｒｏ）、 ＡはＶａｌ、　１ｌｅ１Ａｌ〕ｕ、　Ａｌａ、　Ｇｌｙ
   、　Ｌｙｓ。 Ｃｈａ、　Ｎｌ　ｅ、　Ｐｌｔｃ、　Ｌｅｕ、　Ｃｈｇ
   またはＮｖａｌＺはＤ−ＡｒｇＳＬ−Ａｒｇ、１）−Ｌ
   ｙｓまた（よＬ−Ｌｙｓ。 ｎは０，１または２、 を意味する〕 て示されるポリペプチドまたはその医薬」二許容される
   塩もしくはプロトラグ誘導体。 （２）ＰがＰ’ｈ、ｅ、　ＸがＤ−Ｔｙ　ｒ　（Ａｌ　
   ｋ　）、ＹがＮ　Ｈ２、ＷがＰｒｏ、ＡがＶａｌまだは
   Ａｂｕ、ＺがＬ−Ａｒｇ。 ｎが１である前記第（１）項の化合物。 （３）式： て示される前記第（１）項の化合物。 （４）式： で示されるＡｉＪ記第（１）項の化合物。 （５）式： で示される前記第（１）項の化合物。 （６）式： で示される前記第（１）項の化合物。 （７）　９−デヌグリシンバソプレシン拮抗剤。　　′
   （８）医薬上許容される担体と、その中に分散されたｖ
   ｓｐ拮抗有効、かつ、非毒性量の１ｍ記第（１）項〜第
   （′？）項いずれかの化合物からなることを特徴とする
   バンプレシン拮抗剤医薬組成物。 （９）該化合物が式： で示される前記第（８）項の組成物。 （１０）核量が０．０１〜１０ツ／Ｋｇの範囲から選ば
   れ、非経口注入まだは吸入用の組成物である前記第（８
   ）項または第（９）項の組成物。 ０１）式： 〔式中、Ｘ、Ｐ、ＡおよびＹは前記と同じ、Ｗは前記式
   〔−■〕におけると同じか、ＹおよびＺが共にないとき
   は０１（であってもよい。Ｚは前記式〔１〕におけると
   同しか、ＹがＯＩ−１のときは単結合であってもよい。 ＱｌおよびＱは、各々、水素または置換しうる基、Ｃａ
   ｐは５−Ｑｌがβ−位に結合し、５〜７員のシクロアル
   キレン鎖を有するβ。 β−シクロアルキレンプロピオン酸を意味する〕で示さ
   れるポリペプチド。 Ｑ２）　Ｑ’およびＱが水素である前記第（ＩＪ）項の
   化合物。 （１３）　（２１および（かアセトアミドメチルである
   前３己第（１１）項の化合物。 Ｑ４）Ｘか１）−Ｔｙ　ｒ　（ＩうＥ）、ＰがＰｈｃｌ
   ＡがＶａｌ、ＹがＰｒｏ、ＺがＡｒｇ、ＹかＮｌｌ　２
   、ＱｌおよびＱも、共に水素まだはアセトアミドメチル
   であるｎｉＪ　ＫＵ　第Ｏｆ）項の化合物。 Ｃｌ５）Ｊ’ｒｎｐ　−Ｊ）−Ｔｙ　ｒ　（Ｉｉ　ｔ　
   ）　−Ｐｌ＋　ｅ　−Ｖａ　Ｉ　−Ａ　ｓ　ｎ−Ｃ）１
   ．５−１’ｒｏ−Ａｒｇ（Ｎｌｌ２　）である前記第（
   月）項の化合物。 ０６）Ｉ’ｍｐ−Ｄ−１’ｙｒ（Ｅｔ）−Ｐｈｅ−Ｖａ
   ｌ−Ａｓｎ−Ｃｙｓ（Ｏｆ［）てあル１）ｉＪ　記第（
   １０項）ｒＬＭｆｉ。 ０７）Ｐ＋ｎｐ　−１）−Ｔｙ　ｒ　（１’：ｔ　）　
   −Ｐｈ　ｅ−’ａ　Ｉ　−Ａ　ｓ　ｎ　−Ｃｙｓ−Ｐｒ
   ｏ（（川）である前記第（１１）項の化合物。 （８）式： 〔式中、１１、Ｘ、ＰおよびＡは式〔１〕におけると同
   し、Ｗはｉ）　−Ｐ　ｒ　ｏ、（、−Ｐ　ｒ　ｏまだは
   単結合を意味する〕 で示されるポリペプチドまたはそのエステル。 （１９）ＷかＬ　−Ｐ　ｒ　ｏである前記第（１８）項
   の化合物。 ■）式： で示される前記第（１８）項の化合物。 （２Ｉ）式： で示される前記第（１８）項の化合物。 ｃ！２）式： 〔式中、Ｘ、Ｐ、Ａ、Ｗ、ＺおよびＹは後記と同し、Ｑ
   ｌおよびＱりよ、各々、水素まだは置換しうるＪｉｌ、
   ｌ、ＣａｐはＳ−Ｑｌがβ−位に結合し、５〜７員のシ
   クロアルギレン鎖を有スるβ、β−シクロアルキレンプ
   ロピオン酸を意味する〕 で示される所望により保護された化合物を環化し、要す
   れば、 （ａ）いずれの保護基も除去し、 （＋））　Ｃｙ　ｓ”　（０１（）またはＰ　ｒ、ｏ　
   （０１４）７化合物か存在すれは、これを、各々、酸保
   護またはアミド形のジペプチドｗ−ｚ−ｙまたはアミノ
   酸Ｚ−Ｙと反応させ、あるいは、 （Ｃ）医薬」二許容される塩またはプロトラグを形成さ
   せる（いずれの順序でもよい）ことを特徴とする式： 〔式中、 ＰはＰｈｅまたはｐＨｅ　（４’−Ａｌ　ｋ　）、Ｘは
   Ｉ）−Ｐｈｅ、　Ｉ）−Ｖａ　１、Ｄ−Ｌｅｕ、　Ｄ−
   Ｉ　１　ｅ。 １）−Ｎｖａ、　Ｄ−Ｐｂａ、　Ｄ−Ｎｌ　ｅ、　Ｄ−
   Ｃｂａ、　Ｄ−Ａｂｕ。 Ｄ−Ｍｅ　ｔ、　Ｉ）−（：ｂａ、　Ｄ−Ｔｙ　ｒｌＬ
   −、ｒｙ　ｒ、　Ｄ−ａ　Ｉ　ｌ　ｅ。 １）−Ｔｙ　ｒ　（Ａ　ｌ　ｋ　）またはＬ−Ｔｙ　ｒ
   　（Ａｌ　ｋ　）、ＹはＮｌ−Ｉ２、ＮＨＡ　ｌ　ｋ、
   　ＮＩ−ＩＢ　ｚ　ｌまだはＯＨ。 ＷはＤ−Ｐｒｏ、Ｌ−Ｐｒｏ、　　デヒドｏ　−Ｐｒｏ
   まだ番よＹおよびＺがない場合はＯＨでもよい、ＡはＶ
   ａｌ、　ｌ１ｅＳＡｂｕＳＡｌａ、　ＧｌｙｌＬｙｓ、
   Ｃｈａ、Ｎｌｅ、　ＰｈｅｌＬｅｕｌＣｈｇまだはＮｖ
   ａ。 Ｚは１）−Ａ　ｒ　ｇｌＬ−Ａｒ　ｇ、　Ｄ−Ｌｙ　ｓ
   、　Ｌ−Ｌｙ　ｓまだはＹが０１（の場合は単結合でも
   よい、ｎは０．］または２、 を意味する〕 で示される化合物またはその医薬上許容される塩もしく
   はプロトラグの製法。 ｃ１３）式［Ｉ）のＰ　ｒ　ｏ　（０１１）７化合物ヲ
   カルホシイミドの存在下、（ＮＨ２）　−Ｚ　−Ｙと反
   応させ、ついて、所望により、いずれの保護基をも除去
   する前記第（２２）項の製法。