JPS5936623A - インタ−フエロン誘起剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 有する新規なインターフェロン誘起剤に関する。

−（ンターフエロン（以下ＩＦＮと略す）はウィルスの
侵入またはその他の刺激によって動物の細胞が産生ずる
ウィルス増殖抑制因子であり、１９５７年の発見以来行
なわれた数々の研究により抗ウィルス作用および抗ｌΦ
瘍作用を有する物質としてたいへん注目されている。

ＩＦＮは白血球、培養線維芽細胞、腎臓細胞またはヒー
ラ細胞等の細胞により生産されることが知られているが
、工業的生産の観点からは量産化にまだ問題を残してい
る。

また、宿主を刺激してＩＦＮの産生を促進させるＩＦＮ
−誘起物質の研究が行なわれ、これまでにいくつかの物
質で臨床試験においてインフルエンザ、ヘルペス、肝炎
等のウィルス性疾患または癌に効果を示すことが報告さ
れているが副作用の点で問題を残しているのが現状であ
る。

かかる状況を鑑み、本発明者らは漢方生薬のメタノール
エキスおよびその成分について研究を重ねた結果、一般
式（１）で示される化合物にＩＦＮ−誘起活性を見出し
本発明を完成した。

・１′１該化合物は検力で袖精、強壮、止杆、利尿の要
檗として多数の処方に繁用されている黄苔（オウギ）の
成分として本発明者らが単離・確認〔１１本生薬学会第
２７年会（１９８０年）、日本薬学会１１１０１年会（
１９８１年）にて発表〕した化合物であり、その生物／
＋Ｔｉｒ１については今まで確認されていなかった。

以１・、本発明のインターフェロン誘起剤の製造法およ
びインターフェロン誘起効果について１．１細に説明す
る。

ただし、１・記試験においては一般式（１）の化合物の
中で代表的な２袖の化合物（化合物Ａおよび化合物Ｂ）
を用いた。

２０（Ｒ）、２４（Ｓ）−エポキシ−１６β、２５−ジ
ヒドロキシ−３／ｊ−０−［ＪＩ−ｎ−（２−０−アセ
チル）−キシロピラノシル］−６α−〇−β−Ｄ−グル
コピラノシル−９，１９−シクロラ２０（Ｒ）、２４（
Ｓ）−エポキシ−６α、１６β、２５−トリヒドロキシ
−３β−０−（β−Ｄ−グルコピラノシル（ｌ→２）−
β−Ｄ−キシロピラノシル）−９，１９−シクロラノス
タン 化合物Ａおよび化合物Ｂは黄養をメタノール、エタノー
ル（いずれも含水であってもよい）、含水アセトン、水
等で加温抽出し、ｎ−ヘキサン、ベンセン、四ル化炭素
、ジクロロメタン、クロロホルム、酢酸エチル、エーテ
ル等で分配転溶して夾雑物を除去したのち、ｎ−ブタノ
ールにて分配転溶して得たエキスをクロロホルム・メタ
ノール・水混液、ｎ−ブタノール・酢酸エチル・水混液
等を展開溶媒としてシリカゲルカラムクロマトグラフィ
ーに（Ｊすことにより容易に得られる。

１Ｆ）ｌ−Ｍ超活性はウィルスのＲＮＡ合成阻害の程度
をａ標として、銘木法［Ｊａｐａｎ、Ｊ、Ｍｊｃｒｏｂ
ｉｏｌ。

１８（６）　、　４４９−４５６（１９７４））にて１
■−ウリジンの取り込み間をシンナレーション・カウン
ターで測定することにより定撤した。

７ｒ）ス（ｄｄＹ系、雄性、１０Ｍ令、体ｆｆ１３３±
２ｇ、各群５匹）を実験動物として、後記製造例におい
て製造した化合物Ａおよび化合物Ｂを各々生理食塩水に
て１ｉｌｌｌ　Ｉ！ｌ　Ｌ、、３０ｍｇ　／　ｋｇ腹腔
内に投与して８時間、２４時間および９６時間後にマウ
ス尾切断により採血し、この血液を３００Ｏｒｐｍで１
０分間通６分離し、採取した血液中のＩＦＮ力価を測定
した。

ＩＦＮ力価は稀釈した上記血清を用いて、マウスＬＹ細
胞〔マウス皮下脂肪組織由来の線維芽細胞株〕に対する
水損性口内炎ウィルス（ＶＳＶ：ニュージャージー株）
の増殖に伴うＲＮ＾合成を″Ｈ−ウリジンの取り込み量
で測定し、取り込みを５０％抑制するＩＦＮの稀釈倍数
を計算し、１Ｆｈｌ力価とした６なお標準品としては旧
Ｈ標準ＩＦＮを用いた。その結果を国１１９ｊ＃位にて
下記の表１に示す。

表１　インターフェロン（ＩＦＮ）力価化合物Ａまたは
化合物Ｂにより誘起されたＩＦＮ力価は、いずれも投与
後２４時間後に高値を示した。

次に、化合物Ａおよび化合物Ｂの投与量とＩＦＮ誘起活
性との関係について説明する。

マウスＣｄｄＹ系、雌性、ｌＯ０週令体重３３±２ｇ。

各群５匹）を実験動物として、後記製造例において製造
した化合物Ａおよび化合物Ｂを各々生理食鴇水にて調整
し、３　ｍｇ　／　ｋｎ、３０咄／ｋｇ、３００　ｍｇ
　／　ｋｇ　ＩＩＬＩ腔内に投かして２４時間後にマウ
ス尾切断により採血し、以下１１ｉ前記と同様にしてＩ
ＦＮ−誘起活性を調べた。その結果は国際単位にてＩＣ
記の表２に示す。

表２　インターフェロン（ＩＦＮ）誘起活性化合物Ａま
たは化合物ＢによるＩＦＮ誘起活性は、いずれも３０暉
／ｋｇ以上の投与、量により発現された。

さらに、上記試験例において、化合物Ａまたは化合物Ｂ
によりマウス血清中に誘起されたＶＳＶウィルス感染１
！１１　止物質ハ、３７°０．３時間のトリプシン処理
により失活することが確認された。

（６） 従って、化合物Ａまたは化合物ＢによりＩＦＮが誘起さ
れていることは明らかである。

また化合物Ａおよび化合物Ｂの急性毒性（ＬＤ％。）は
マウス（ｄｄＹ系、雌性、５週令、体重２０±１ｇ、各
群５匹）において囮腔内および経口投与のいずれの場合
も３０００ｍｇ　／　ｋｇ以上であり、毒性は極めて低
かった。

一般式（１）の化合物は経口的あるいは非経口的に投与
することができ、経口投与の剤型としては錠剤、コーテ
ィング剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、シロップ剤など
が、また非経口投与の剤型としては注射剤、坐剤などが
使用できる。

これらの剤型の調整は薬学的に許容される賦形剤、結合
剤、滑沢剤、崩壊剤、懸濁剤、乳化剤、防腐剤、安定化
剤および分融剤などを適宜用いて行なわれる。投与量は
ｍ省の症状、体重などに応じて異なるが成人に対する１
日量として２０〜２０００ｍｇ、好ましくは１００〜５
００　ｍｇを１〜４回に分けて投与することができる。

□　以上述べたごとく、化合物Ａまたは化合物Ｂ（９） に代表される一般式〔１〕の化合物はＩＦ）ｌ誘起剤と
して有用であり、ウィルス性疾患並びに癌の治療剤どし
てｉｔ独または併用して用いることのできるものである
。

以下に製造例を掲げて具体的に説明すると共に製剤例に
ついてその代表的組成を例示する。

製造例 細切した市販のＭｌ（オウギ、韓国産）１　ｋｇを３Ｑ
のメタノール中に浸し７０’Ｏで３時間抽出した。抽出
残渣は同様の方法で４回抽出を繰返し、抽出？Ｖｖ液を
まとめて減圧下溶媒を留去し、抽出物１５０ｇを得た。

この抽出物全７１を３鉦の５０％含水メタノールに溶解
し、まずｎ−ヘキサン３Ｑ、次いでクロロホルム３１１
１を用いてそれぞれ４回分配転溶させ、転溶物を除去し
た。残った含水メタノール液層より減圧下でメタノール
を留去し、残渣にｎ、ブタノール１．５Ｑを加えて分配
転溶させ、同様の操作を４回繰り返した。転溶に用いた
トブタノールをまとめ、減圧下で溶媒を留去して抽（１
０） 出エキス５０ｇを得た。

このエキス２０ｇをクロロホルム・メタノール・水の混
合溶媒〔クロロホルム：メタノール：水＝７：１：０−
５の割合（容量比）で混合し一昼夜静置後の下層〕を用
いてシリカゲルカラムクロマトグラフィーに付し、溶出
開始後１２〜１４Ｑの両分を分取し、乾燥後域１］三下
で溶媒を留去して化合物Ａ　ＯＪｇを得た。また、溶出
開始後１８〜２０Ｍの画分を分取し、乾燥後減圧下で溶
媒を留去して化合物Ｂ　Ｏ，４ｇを得た。得られた化合
物の融点、赤外吸収スペクトルは下記のとおりであった
。

化合物Ａ　　融点：　２６８〜２７１°０赤外吸収スペ
クトル（ａｌｌ−″） シＹ：ａ’、　：　３４００（ｂｙ、）　、　１７３９
化合物Ｂ　　融点、２１６〜２２０”０赤外吸収スペク
トル（φ−″） ＫＢｒ：　３３５０（ｂｒ−） ′ｍａよ 製剤例 （１）錠剤 （１１） 化合物Ａ　　　　　　　　　　　　１００ｍｇマンニト
ール　　　　　　　　　　３５ｍｇ微結晶セルロース　
　　　　　　　２６ｍｇ１０イタルシリカ　　　　　　
　　１３＋ｎｇタ　　ル　　り　　　　　　　　　　　
　　　　　　　　　　　１２ｍｇポリビニルピロリドン
　　　　　　１０ｍｇステアリンＭマグネシウム　　　
　　４暉０）顆粒剤 化合物Ｂ　　　　　　　　　　　　１００ｍｇデンプン
　　　　　　　　　　　　　３０暉乳　　糖　　　　　
　　　　　　　　　　　　　　　　３２ｍｇ結晶セルロ
ース　　　　　　　　　４２ｍｇポリビニルアルコール
　　　　　　　６ｍｇ〔３〕注射剤

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）　一般式（１）： で示される化合物を有効成分として含有するインターフ
   ェロン誘起剤。