JPS5946493B2 - 異種死菌体混合物を有効成分とする抗腫瘍剤 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は異種死菌体混合物を主成分とする抗腫瘍剤に係
り、殊にヒトの上気道常在細菌である肺炎球菌と、溶血
連鎖球菌と、ブドウ球菌と、カタルナイセリアと、回連
球菌と、緑膿菌と、肺炎桿菌と、インフルエンザ菌の死
菌体混合物を主成分とする抗腫瘍剤に係る。

新生物疾患に対しては、各種治療法が提案されテ来たが
、化学療法はマイトマイシン、プレオマイシン、ウラシ
ル系薬剤等の開発と相俟って急速な進歩を遂げ、外科的
療法及び放射線療法と比肩される程の位置を確立するに
至っている。

然るに、化学療法剤はそのほとんどが高い副作用を有し
ており、従って長期間に亘る連用が困難であり、宿主免
疫力の低下と相俟って再発の危険性も高いので、必ずし
も優れているものとは言い難いものであった。

尚、旧来より数種類の病原菌が抗腫瘍活性を有すること
は知られていたが、これ等は生菌であるためにその危険
性の点から殆んど使用されるに至らなかったが、近年若
干の菌種に関し弱毒化が成功し、新たな抗腫瘍剤として
注目されつつある。

本発明者等は、病原菌による抗腫瘍活性が宿主の非特異
的免疫作用即ち細胞免疫能の賦活によるもので生体自身
の抗腫瘍能増強作用と考えて、安全性のより高い死菌体
についてその抗腫瘍性を鋭意研究した処、生菌と同様な
作用が認められ、更には異種死菌体の混合物に強力な抗
腫瘍能増強作用が認められ、宿主の延命及び再発防止に
関し、少なくとも従来の化学療法剤の限界を補なう意味
で有効であることを見出し本発明を完成するに至ったの
である。

本発明による抗腫瘍剤は、既に本出願人会社より呼吸器
系疾患治療剤殊に気管支喘息治療剤として市販されるに
至っているもの（商品名ブロンカスマベルナ）であるが
、その製造方法について述べれば下記の通りである。

製造例 ＣＩ） 継代培養 各種菌種を次の方法により継代培養する。

ａ）肺炎球菌については肝臓ブイヨンで静置培養する。

ｂ）ブドウ球菌、カフルナイセリア、回連球菌、緑膿菌
、インフルエンザ菌及び肺炎桿菌の各画についてはそれ
ぞれ振盪培養し、純粋性を顕微鏡にて検査する。

Ｃ）溶血連鎖球菌についてはチオグリコール酸塩ブイヨ
ンで静置培養する。

〔釦・培養 継代培養で得た菌の純粋性及び抗原性を調べた後に次の
培地に移植して後培養を行う。

ａ）肺炎球菌についてはブドウ糖を加えた肝臓ブイヨン
で静置培養する。

ｂ）ブドウ球菌、回連球菌、緑膿菌及び肝炎桿菌の各画
についてはそれぞれカゼイン氷解物をベースとする液体
培地で通気性タンク培養する。

Ｃ） カフルナイセリアについてはローヘン・ホウイ
ーラーの液体培地で通気性タンク培養する。

ｄ） インフルエンザ菌についてはホルトの液体培地
で通気性タンク培養する。

ｅ）溶血連鎖球菌についてはカゼイン氷解物をベースと
する液体培地で通気を行うことなしにタンク培養する。

側 採取菌の調製 菌の原形質が凝固したり、又菌の抗原物質が溶出しない
ように特に留意しつつ次の操作を行う。

ａ）肺炎球菌以外の各画については静止期に菌を採取し
、その純粋性を顕微鏡にて検査してから、比濁法により
菌数を計算し、次いで６０℃に於て６．０分間加熱して
殺菌する。

３８Ｗ／Ｗ％のホルマリンを０．４Ｖ／Ｖ係割合で添加
して滅菌する。

然る後、遠心分離して上清を捨て、沈渣のみを集めて洗
浄し、生理食塩水を加えて懸濁せしめて死菌体懸濁原液
とする。

ｂ）肺炎球菌については移植後約２４時間経過後に菌を
採取しａ）項と同様に処理して死菌体懸濁原液とする。

瑣 無菌試験 各菌種の懸濁原液につきそれぞれ次の要領で無菌試験を
行う。

ａ）チオクリコール酸塩培地で１０日間培養（培養温度
３２℃） ｂ）ペプトン／ブドウ糖培地で１０日間培養（培養温度
３２℃） Ｃ）サブロー培地で１０日間培養（培養温度２０〜２５
°Ｃ） ■ 原液の混合 無菌試験を経た各単一菌種懸濁原液を、製剤１ｒｕｌ中
に各菌種が所定の菌数を含むように攪拌器付タンク中で
無菌的操作で混合する。

尚、注射液となされる場合には防腐剤としてフェノール
０．４Ｗ／Ｗ％が添加混合され、次いでアンプルに１ｒ
ｒＬｌ宛充填される。

製剤１ｍ１３中の各画の死菌体菌数は、例えば次の通り
である。

肺炎球菌 ５０Ｘ１０６個、溶血連鎖球
菌 ４０Ｘ１０６個、ブドウ球菌
５００Ｘ１０６個、カフルナイセリア ６０Ｘ
１０６個、回連球菌 ２０ Ｘ １０６
個、緑膿菌 ２５０Ｘ１０６個、 肝炎桿菌 ４０Ｘ１０６個及びインフル
エンザ菌 ４０Ｘ１０６個抗腫瘍活性試験ｌ Ｓ−１８０（ザルコーマ１８０）マウス肉腫をメツシュ
を用いて個々の細胞とし、その２Ｘ１０５個をｃｔｃｔ
ｙマウス（１群７匹）の腋下皮下に移植し、移植後２４
時間を経過した後に１日１回１０日間に亘り下記薬剤を
腹腔内注射にて投与し宿主の延命を測定した処、次の結
果を得た。

使用薬剤 本発明製剤（注射製剤） ０、６３ ｍｌ／に９．２．５ｒｕｌ／ｋｙ及び１０ｒ
ｆＬｌ／ｋｙフエノール液 ０、２５ ｒＩＬｌ／ｋｐ ピシバニール（公知制癌剤） ０．５ＫＥ／マウス、２．０ＫＥ／マウス抗腫瘍活性試
験２ ドンリュウラットの腹水肝癌ＡＨの系３種（■ＡＨ−４
４、■ＡＨ−６６、■ＡＨ−１３０）について各々１０
７細胞７１ｍ１．液を調整し、その１ｒＩ′Ｌｌをトン
リューラット（メス体重１００〜２ｏｏｇ１群６匹）の
尾静脈内に注射することによって癌細胞を移植する。

移植後（移植細胞数１０７（１ｉ！ｆｆｉ／１ｍｌ／１
匹）９６時間を経過した後に１日１回１０日間に亘り本
発明製剤（注射製剤）５ｍｌ／ｋｇを１回投与量として
腹腔内注射にて投与し宿主の延命を移植後６０日間に亘
り測定した処、次の結果を得た。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 肺炎球菌と、溶血連鎖球菌と、ブドウ球菌と、カタ
   ルナイセリアと、回連球菌と、緑膿菌と、肺炎桿菌と、
   インフルエンザ菌の死菌体混合物を有効成分として含有
   していることを特徴とする抗腫瘍剤。 ２、特許請求の範囲１記載の抗腫瘍剤に於て、溶液１ｒ
   ／Ｌｌ中に 肺炎球菌 ５０Ｘ１０’個と、溶血連鎖球菌
   ４０Ｘ１０’個と、ブドウ球菌 ５００
   Ｘ１０６個と、カタルナイセリア ６０Ｘ１０６個と
   、回連球菌 ２０Ｘ１０６個と、緑膿菌
   ２５０Ｘ１０’個と、 肺炎桿菌 ４０Ｘ１０’個と、インフルエン
   ザ菌 ４０Ｘ１０６個 の死菌体と、防腐剤としてのフェノール４１ｎ９を含有
   していることを特徴とする注射目的用抗腫瘍剤。