JPS599155B2 - 抗生物質 - Google Patents
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- JPS599155B2 JPS599155B2 JP51028543A JP2854376A JPS599155B2 JP S599155 B2 JPS599155 B2 JP S599155B2 JP 51028543 A JP51028543 A JP 51028543A JP 2854376 A JP2854376 A JP 2854376A JP S599155 B2 JPS599155 B2 JP S599155B2
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- C07D477/00—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring
- C07D477/10—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 4, and with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2
- C07D477/12—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 4, and with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2 with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached in position 6
- C07D477/16—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 4, and with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2 with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached in position 6 with hetero atoms or carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 3
- C07D477/20—Sulfur atoms
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- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
- C12P17/182—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system
- C12P17/184—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system containing a beta-lactam ring, e.g. thienamycin
-
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- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
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Description
【発明の詳細な説明】
ＭＭｌ７８８Ｏと命名した新規な抗生物質はストレプト
マィセス オリバセウスおよび関連微生物の菌株の培養
によつて得ることができる。
マィセス オリバセウスおよび関連微生物の菌株の培養
によつて得ることができる。
ＭＭｌ７８８Ｏおよびその塩は強力な抗菌剤であること
に加えて多くの微生物から得られたβ−ラクタマーゼを
阻害するのでβ−ラクタム系抗生物質と一緒にして相乗
的な抗菌効果を示す。英国特許第１３６３０７５号では
ストレブトマィセス オリバセウスの菌株が有用なβ−
ラクタマーゼ阻害物質を生産する能力があると述べてい
る０ペルキー特許第８２７３３１号および第８２７３３
２号では英国特許第１３６３０７５号の物質が非常に不
純であり抗菌活性のある物質をほんのわずかしか含んで
いないことを示した。
に加えて多くの微生物から得られたβ−ラクタマーゼを
阻害するのでβ−ラクタム系抗生物質と一緒にして相乗
的な抗菌効果を示す。英国特許第１３６３０７５号では
ストレブトマィセス オリバセウスの菌株が有用なβ−
ラクタマーゼ阻害物質を生産する能力があると述べてい
る０ペルキー特許第８２７３３１号および第８２７３３
２号では英国特許第１３６３０７５号の物質が非常に不
純であり抗菌活性のある物質をほんのわずかしか含んで
いないことを示した。
これらの抗菌活性物質は前のペルキー特許で特徴づけら
れており、ＭＭ４５５ＯおよびＭＭｌ３９Ｏ２と命名さ
れた。我々は、ＭＭ４５５ＯおよびＭＭｌ３９Ｏ２に加
えてストレプトマイセス オリバセウスと関連微生物の
ある菌株がさらに抗菌活性なβ−ラクタマーゼ阻害物質
を生産することを見いだした。この新規な物質をここで
ＭＭｌ７８８Ｏと命名した。ここでは以前に述べた英国
あるいはペルキー特許に述べられたどの物質も、またそ
のような物質のどの生成方法も特許請求をしていないと
解釈されるべきである。
れており、ＭＭ４５５ＯおよびＭＭｌ３９Ｏ２と命名さ
れた。我々は、ＭＭ４５５ＯおよびＭＭｌ３９Ｏ２に加
えてストレプトマイセス オリバセウスと関連微生物の
ある菌株がさらに抗菌活性なβ−ラクタマーゼ阻害物質
を生産することを見いだした。この新規な物質をここで
ＭＭｌ７８８Ｏと命名した。ここでは以前に述べた英国
あるいはペルキー特許に述べられたどの物質も、またそ
のような物質のどの生成方法も特許請求をしていないと
解釈されるべきである。
本発明は、ＭＭｌ７８８Ｏおよびその塩を提供し、ＭＭ
ｌ７８８Ｏは二価酸の固体であり、その実質的に純粋な
ジナトリウム塩は次の性質をもつている。
ｌ７８８Ｏは二価酸の固体であり、その実質的に純粋な
ジナトリウム塩は次の性質をもつている。
（ａ） ＫＢｒデイスク中で測定すると実質的に図１で
示される如き特有の赤外線吸収スペクトルをもつている
。
示される如き特有の赤外線吸収スペクトルをもつている
。
（ｂ）重水中で測定すると実質的に図２で示される如き
特有の核磁気共鳴スペクトルをもつている。
特有の核磁気共鳴スペクトルをもつている。
（ｃ）水中で測定すると実質的に図３で示される如く約
２９７ｎ．ｍ．に吸収極大をもつ特有の紫外線吸収スペ
クトルをもつている。ＭＭｌ７８８Ｏの１つの酸性基が
カルボン酸基であることが信じられる。
２９７ｎ．ｍ．に吸収極大をもつ特有の紫外線吸収スペ
クトルをもつている。ＭＭｌ７８８Ｏの１つの酸性基が
カルボン酸基であることが信じられる。
ＭＭｌ７８８Ｏがジナトリウム塩として実質的に純粋で
ある場合、それは薄層クロマトグラフィ一系において表
１に示すようなＲｆ値をもつている。ＭＭｌ７８８Ｏは
炭素、酸素、水素に加えて硫黄と窒素を含んでいるよう
である。
ある場合、それは薄層クロマトグラフィ一系において表
１に示すようなＲｆ値をもつている。ＭＭｌ７８８Ｏは
炭素、酸素、水素に加えて硫黄と窒素を含んでいるよう
である。
ＭＭｌ７８８Ｏは３００〜５００の分子量をもつている
ようである。実質的に純粋な場合、ＭＭｌ７８８Ｏはジ
ナトリウム塩として微量滴定法で決定した時にある種の
グラム陽性およびグラム陰性菌、たとえばバチルス ズ
ブチリス、エンテロバクタ一 クロアカ一、エシエリシ
ア コリ、クレブシラ エロゲネス、プロテウス ミラ
ビリス、サルモネラ テイフイムリウス、セラチア マ
ルセツセンスおよびスタフィロコツカス アウレウスの
菌株に対して高い水準の抗菌活性をもつている。実質的
に純粋な場合、ＭＭｌ７８８Ｏのジナトリウム塩はスタ
フイロコツカス アウレウスやクレブシラ エロゲネス
のようなあるβ−ラクタマーゼ産生菌株を含む微生物種
に対して、アンピンリンやアモキシシリンのようなβ−
ラクタム系抗生物質の活性を相乗することができる。
ようである。実質的に純粋な場合、ＭＭｌ７８８Ｏはジ
ナトリウム塩として微量滴定法で決定した時にある種の
グラム陽性およびグラム陰性菌、たとえばバチルス ズ
ブチリス、エンテロバクタ一 クロアカ一、エシエリシ
ア コリ、クレブシラ エロゲネス、プロテウス ミラ
ビリス、サルモネラ テイフイムリウス、セラチア マ
ルセツセンスおよびスタフィロコツカス アウレウスの
菌株に対して高い水準の抗菌活性をもつている。実質的
に純粋な場合、ＭＭｌ７８８Ｏのジナトリウム塩はスタ
フイロコツカス アウレウスやクレブシラ エロゲネス
のようなあるβ−ラクタマーゼ産生菌株を含む微生物種
に対して、アンピンリンやアモキシシリンのようなβ−
ラクタム系抗生物質の活性を相乗することができる。
ここでゝ実質的に純粋２という語は、少なくとも７５％
が純粋、好ましくは少なくとも８５％が純粋、たとえば
９０〜１００％が純粋であることを意味する。
が純粋、好ましくは少なくとも８５％が純粋、たとえば
９０〜１００％が純粋であることを意味する。
一般にＭＭｌ７８８Ｏの塩は溶液中で分解しやすい遊離
酸よりもはるかに安定である。
酸よりもはるかに安定である。
かくして、ＭＭｌ７８８Ｏは式（１）：
で表わすことができる。
この発明で提供されるＭＭｌ７８８Ｏの塩は好ましくは
ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、ア
ルミニウムまたは通常のアンモニウム塩あるいは置換ア
ンモニウム塩のような医薬的に受容な塩である。
ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、ア
ルミニウムまたは通常のアンモニウム塩あるいは置換ア
ンモニウム塩のような医薬的に受容な塩である。
この発明ではたとえばＭＭｌ７８８Ｏのジナトリウム塩
あるいはジカリウム塩のようなＭＭｌ７８８Ｏの医薬的
に受容なアルカリ金属塩が最も好ましい。
あるいはジカリウム塩のようなＭＭｌ７８８Ｏの医薬的
に受容なアルカリ金属塩が最も好ましい。
この発明のさらにもう一つの面ではＭＭ
ｌ７８８Ｏまたはその医薬的に受容な塩を含む医薬組成
物を提供する。
物を提供する。
そのような組成物はヒトを含む咄乳動物における細菌感
染症の治療や予防に適する。
染症の治療や予防に適する。
たとえばこの発明の組成物は呼吸器管、泌尿器管、軟組
織、皮膚などの疾患の治療に用いることができる。その
ような治療の使用にあたつて組成物は経口、局所、乳腺
内、注射用あるいは注入用のための通常の形態で提供さ
れる。好ましい観点によれば、この発明はヒトに対して
経口あるいは非経口投与用に製剤化されたＭＭｌ７８８
Ｏまたはその医薬的に受容な塩を含む医薬組成物を提ば
する。
織、皮膚などの疾患の治療に用いることができる。その
ような治療の使用にあたつて組成物は経口、局所、乳腺
内、注射用あるいは注入用のための通常の形態で提供さ
れる。好ましい観点によれば、この発明はヒトに対して
経口あるいは非経口投与用に製剤化されたＭＭｌ７８８
Ｏまたはその医薬的に受容な塩を含む医薬組成物を提ば
する。
そのような好ましい組成物は、一般的には１０〜から５
ｒｆ）ＭＭｌ７８８Ｏまたはその塩を含み、より一般的
には５０Ｔｆ９から１．２５ｆ１たとえば、１５０ワか
ら１．０Ｖｆ）ＭＭｌ７８８Ｏの塩を含むであろう。
ｒｆ）ＭＭｌ７８８Ｏまたはその塩を含み、より一般的
には５０Ｔｆ９から１．２５ｆ１たとえば、１５０ワか
ら１．０Ｖｆ）ＭＭｌ７８８Ｏの塩を含むであろう。
この発明の組成物はＭＭｌ７８８Ｏまたはその塩を唯一
の治療剤として含んでもよいし、またＭＭｌ７８８Ｏま
たはその塩を他の治療剤、たとえばアンピンリン、アモ
キシシリン、カルペニシリン、ベンジルペニシリン、こ
れらのペニシリンの生体内で加水分解されうるエステル
、フエノキシメチルペニシリン、セフアロリジン、セフ
アロチン、セフアログリシン、セフアマンドール、セフ
アゾリン、そのアシルアミノ側鎖にα−アミノ基を含む
前述したペニシリンまたはセフアロスポリン類のアセト
ンまたはホルムアルデヒド付加物、クロキサシリン．シ
クロキサンリン、フルクロキサシリンまたは他の通常の
β−ラクタム系抗生物質のようなペニシリンあるいはセ
フアロスポリンと共に含んでいてもよい。
の治療剤として含んでもよいし、またＭＭｌ７８８Ｏま
たはその塩を他の治療剤、たとえばアンピンリン、アモ
キシシリン、カルペニシリン、ベンジルペニシリン、こ
れらのペニシリンの生体内で加水分解されうるエステル
、フエノキシメチルペニシリン、セフアロリジン、セフ
アロチン、セフアログリシン、セフアマンドール、セフ
アゾリン、そのアシルアミノ側鎖にα−アミノ基を含む
前述したペニシリンまたはセフアロスポリン類のアセト
ンまたはホルムアルデヒド付加物、クロキサシリン．シ
クロキサンリン、フルクロキサシリンまたは他の通常の
β−ラクタム系抗生物質のようなペニシリンあるいはセ
フアロスポリンと共に含んでいてもよい。
この発明の組成物は、抗菌組成物の製造に熟練した者に
理解されているような通常の方法で担体を含めることが
できる。
理解されているような通常の方法で担体を含めることが
できる。
この発明のさらに１つの観点はＭＭｌ７８８Ｏの生産菌
株であるストレプトマイセス オリバセウスの培養と、
混合物からのＭＭｌ７８８Ｏまたぱその塩の単離よりな
るＭＭｌ７８８Ｏまたはその塩の製造方法を提供する。
株であるストレプトマイセス オリバセウスの培養と、
混合物からのＭＭｌ７８８Ｏまたぱその塩の単離よりな
るＭＭｌ７８８Ｏまたはその塩の製造方法を提供する。
ストレプトマイセス オリバセウスの培養は英国特許第
１３６３０７５号またはペルキー特許第８２７３３１号
および第８２７３３２号で述べたように行うことができ
、一般には炭素、窒素、硫黄および鉱酸塩の同化性源の
存在下での好気的発酵が含まれる。
１３６３０７５号またはペルキー特許第８２７３３１号
および第８２７３３２号で述べたように行うことができ
、一般には炭素、窒素、硫黄および鉱酸塩の同化性源の
存在下での好気的発酵が含まれる。
所要の栄養分は複合の有機源または通常の方法にて化学
的にきめられた媒体によつて提供されてもよぃ。ここで
用いられるゞストレプトマイセス オリバセウス２とい
う語はフュタ一Ｒの分類（Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｄｅｒ
ＳｔｒｅｐｔＯｍｙｃｅｔｅｎ．Ｓ．ＫＯｒｇｅｒ．Ｂ
ａｓｌｅ．８〜３２頁）に従つて定義される。
的にきめられた媒体によつて提供されてもよぃ。ここで
用いられるゞストレプトマイセス オリバセウス２とい
う語はフュタ一Ｒの分類（Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｄｅｒ
ＳｔｒｅｐｔＯｍｙｃｅｔｅｎ．Ｓ．ＫＯｒｇｅｒ．Ｂ
ａｓｌｅ．８〜３２頁）に従つて定義される。
この定義ではストレプトマイセス フルボポリディス、
ストレプトマィセス フラバスおよびストレプトマイセ
ス フラボピレンスがストレプトマイセス オリバセウ
スと同義であると考えることができる。゛ゝストレプト
マイセス オリバセウス２の胞子形態学と炭素利用性は
ペルキー特許第８２７３３１号および第８２７３３２号
で述べられている。
ストレプトマィセス フラバスおよびストレプトマイセ
ス フラボピレンスがストレプトマイセス オリバセウ
スと同義であると考えることができる。゛ゝストレプト
マイセス オリバセウス２の胞子形態学と炭素利用性は
ペルキー特許第８２７３３１号および第８２７３３２号
で述べられている。
この製造で用いられる好ましい微生物はストレプトマイ
セス オリバセウス微工研菌寄第２９５５号（ＡＴＣＣ
３ｌｌ２６）またはその突然変異体である。この発明の
もう一つの面は実質的に純粋なＭＭｌ７８８Ｏまたはそ
の塩を（ａ）ＭＭｌ７８８Ｏ生産菌株であるストレプト
マイセス オリバセウスまたは関連種の培養、次いで（
ｂ）培養基からの粗製抗菌性複合体の抽出によつて得ら
れる粗製抗菌性複合体から前述したＭＭｌ７８８Ｏまた
はその塩を単離することによつて製造することよりなる
。
セス オリバセウス微工研菌寄第２９５５号（ＡＴＣＣ
３ｌｌ２６）またはその突然変異体である。この発明の
もう一つの面は実質的に純粋なＭＭｌ７８８Ｏまたはそ
の塩を（ａ）ＭＭｌ７８８Ｏ生産菌株であるストレプト
マイセス オリバセウスまたは関連種の培養、次いで（
ｂ）培養基からの粗製抗菌性複合体の抽出によつて得ら
れる粗製抗菌性複合体から前述したＭＭｌ７８８Ｏまた
はその塩を単離することによつて製造することよりなる
。
ＭＭｌ７８８Ｏは普通には主に培養ｆ液から得られるの
で単離工程におけるより好ましい最初の段階は発酵から
の固体物質の除去、たとえばＰ過である。一般にはすべ
ての単離および精製工程は極端でない温度、たとえば２
０℃以下、より好ましくは１２℃以上でない温度で行な
うべきである。
で単離工程におけるより好ましい最初の段階は発酵から
の固体物質の除去、たとえばＰ過である。一般にはすべ
ての単離および精製工程は極端でない温度、たとえば２
０℃以下、より好ましくは１２℃以上でない温度で行な
うべきである。
粗製のＭＭｌ７８８Ｏまたはその塩は清澄培養Ｐ液から
ＭＭｌ７８８Ｏまたはその塩を活性炭のような物質に吸
着させ、次いで水性アセトンで溶離し、溶媒を減圧で留
去することによつて得ることができる。こＱ程による粗
生成物は水に溶解させ親油性の４級アンモニウム塩を用
いて有機層に抽出して有機溶媒可溶な塩とし、次いで水
あるいはヨウ化ナトリウム水溶液などへ逆抽出すること
によつてさらに精製することができる。また、培養Ｐ液
を親油性の４級アンモニウム塩と有機溶媒を用いて抽出
し、次いでヨウ化ナトリウム水溶液などへ逆抽出しても
よい。
ＭＭｌ７８８Ｏまたはその塩を活性炭のような物質に吸
着させ、次いで水性アセトンで溶離し、溶媒を減圧で留
去することによつて得ることができる。こＱ程による粗
生成物は水に溶解させ親油性の４級アンモニウム塩を用
いて有機層に抽出して有機溶媒可溶な塩とし、次いで水
あるいはヨウ化ナトリウム水溶液などへ逆抽出すること
によつてさらに精製することができる。また、培養Ｐ液
を親油性の４級アンモニウム塩と有機溶媒を用いて抽出
し、次いでヨウ化ナトリウム水溶液などへ逆抽出しても
よい。
この方法は中間でＰ液を濃縮する方法よりもしばしばよ
り効果的である。我々はＭＭｌ７８８Ｏのクロマトグラ
フイ一精製はナトリウム塩のようなＭＭｌ７８８Ｏの塩
を用いて行なうのが最もよいと思う。
り効果的である。我々はＭＭｌ７８８Ｏのクロマトグラ
フイ一精製はナトリウム塩のようなＭＭｌ７８８Ｏの塩
を用いて行なうのが最もよいと思う。
ＭＭｌ７８８Ｏの塩類は通常親油性の高い溶媒よりも水
性溶媒や水性アルコール溶媒に、より溶けやすいので、
この発明に用いられるクロマトグラフイ一精製では水性
溶液や水性とアルコール溶媒系を用いるのが好ましい。
我々はＭＭｌ７８８Ｏの精製のためにはほぼ中性に緩衝
された電解質の水性溶液を塩基性イオン交換樹脂のよう
な極性担体物質と一緒に用いるのが適切であるというこ
とを証明した。
性溶媒や水性アルコール溶媒に、より溶けやすいので、
この発明に用いられるクロマトグラフイ一精製では水性
溶液や水性とアルコール溶媒系を用いるのが好ましい。
我々はＭＭｌ７８８Ｏの精製のためにはほぼ中性に緩衝
された電解質の水性溶液を塩基性イオン交換樹脂のよう
な極性担体物質と一緒に用いるのが適切であるというこ
とを証明した。
かくしてりん酸緩衝液のような通常の緩衝液で約ＰＨ７
に緩衝された塩化ナトリウム水性溶液を４級のアンモニ
ウム基を含む担体物質と共に用いることができる。我々
は塩基性のイオン交換セルロースや塩基性のイオン交換
交差結合デキストランが適切な担体物質であり、特にＱ
ＡＥセフアデツクスＡ２５（セフアデツクスは登録商標
名である）が非常に適切な担体物質であることを見い出
した。ＭＭｌ７８８Ｏを特に無機塩、またその他の汚染
物質から分離することは、ＭＭｌ７８８Ｏを無機塩が吸
着されないような親油性樹脂に吸着させることによつて
達成しうる。
に緩衝された塩化ナトリウム水性溶液を４級のアンモニ
ウム基を含む担体物質と共に用いることができる。我々
は塩基性のイオン交換セルロースや塩基性のイオン交換
交差結合デキストランが適切な担体物質であり、特にＱ
ＡＥセフアデツクスＡ２５（セフアデツクスは登録商標
名である）が非常に適切な担体物質であることを見い出
した。ＭＭｌ７８８Ｏを特に無機塩、またその他の汚染
物質から分離することは、ＭＭｌ７８８Ｏを無機塩が吸
着されないような親油性樹脂に吸着させることによつて
達成しうる。
我々はアンバーライトＸＡＤ−４のようなポリスチレン
ージビニルベンゼン共重合体が特に適切であり、所望の
抗生物質をカラムから溶離（水または水性アルカノール
で溶離）し、得られた溶液を蒸溜により濃縮し、ついで
凍結乾燥してより精製された物質を得ることができる。
無機塩からのＭＭｌ７８８Ｏの分離は、ゲルＰ過剤たと
えばセフアデツクスＧｌ５のような交差結合したデキス
トランゲルやバイオゲルＰ２のようなポリ−アクリルア
ミドゲルで構成されたカラムクロマトグラフイ一によつ
て行なうのも適切であろう。前述した方法の１種または
それ以上を用いて作つた物質からＭＭｌ７８８Ｏをさら
に精製するには、シリカゲルまたはセルロースのような
不活性な固形層上で、水性アルコール溶媒系を用いたカ
ラムクロマトグラフィ一によつて行なうことができる。
ージビニルベンゼン共重合体が特に適切であり、所望の
抗生物質をカラムから溶離（水または水性アルカノール
で溶離）し、得られた溶液を蒸溜により濃縮し、ついで
凍結乾燥してより精製された物質を得ることができる。
無機塩からのＭＭｌ７８８Ｏの分離は、ゲルＰ過剤たと
えばセフアデツクスＧｌ５のような交差結合したデキス
トランゲルやバイオゲルＰ２のようなポリ−アクリルア
ミドゲルで構成されたカラムクロマトグラフイ一によつ
て行なうのも適切であろう。前述した方法の１種または
それ以上を用いて作つた物質からＭＭｌ７８８Ｏをさら
に精製するには、シリカゲルまたはセルロースのような
不活性な固形層上で、水性アルコール溶媒系を用いたカ
ラムクロマトグラフィ一によつて行なうことができる。
適切な溶媒系には水と少なくとも一種類の低級アルカノ
ールを含み、たとえば水／イソプロパノール、水／ｎ−
プロパノール、水／メタノール／イソプロバノール、水
／ブタノール、水／エタノール／ブタノールあるいは同
じような系が挙げられる。我々はｎ−プロパノールと水
の４／１の混合物がセルロース担体と共に用いるのに特
に適切な溶媒系であることを証明した。集めて貯めたフ
ラクシヨンは、紫外線吸収極大を約２９７ｎ．ｍ．にも
つＭＭｌ７８８Ｏに特有の紫外線吸収スペクトルを示す
ものである（たとえば図３参照）。
ールを含み、たとえば水／イソプロパノール、水／ｎ−
プロパノール、水／メタノール／イソプロバノール、水
／ブタノール、水／エタノール／ブタノールあるいは同
じような系が挙げられる。我々はｎ−プロパノールと水
の４／１の混合物がセルロース担体と共に用いるのに特
に適切な溶媒系であることを証明した。集めて貯めたフ
ラクシヨンは、紫外線吸収極大を約２９７ｎ．ｍ．にも
つＭＭｌ７８８Ｏに特有の紫外線吸収スペクトルを示す
ものである（たとえば図３参照）。
得られた溶液を凍結乾燥して実質 １的に純粋なＭＭｌ
７８８Ｏの塩を得る。前述した情報からすると、一つの
観点から見て本発明は種々の抗菌物質と共にＭＭｌ７８
８Ｏまたはその塩を含む溶液から本質的にＭＭｌ７８８
Ｏまたはその塩の溶液よりなるフラクシヨンをクロ １
マトグラフイ一的に分離することよりなる実質的に純粋
なＭＭｌ７８８Ｏまたはその塩の製造方法を提供するも
のであるということが認識されるであろう。
７８８Ｏの塩を得る。前述した情報からすると、一つの
観点から見て本発明は種々の抗菌物質と共にＭＭｌ７８
８Ｏまたはその塩を含む溶液から本質的にＭＭｌ７８８
Ｏまたはその塩の溶液よりなるフラクシヨンをクロ １
マトグラフイ一的に分離することよりなる実質的に純粋
なＭＭｌ７８８Ｏまたはその塩の製造方法を提供するも
のであるということが認識されるであろう。
そのような工程は一般的には、セルロースのよ ｚうな
不活性担体と前述したようなアルカノール溶媒系を用い
たカラムクロマトグラフイ一を含む。
不活性担体と前述したようなアルカノール溶媒系を用い
たカラムクロマトグラフイ一を含む。
次に実施例によつて本発明を説明する。実施例 １
実質的に純粋なＭＭｌ７８８Ｏナトリウム塩の 二製造
Ａ．発酵 ストレプトマイセス オリバセウス微工研菌寄第２９５
５号（ＡＴＣＣ３ｌｌ２６）をゝロークズ２ピン中、傾
面固体寒天上で７日間、２８℃で培養した。
Ａ．発酵 ストレプトマイセス オリバセウス微工研菌寄第２９５
５号（ＡＴＣＣ３ｌｌ２６）をゝロークズ２ピン中、傾
面固体寒天上で７日間、２８℃で培養した。
寒天培地の組成は次の通り。Ｃ酵母抽出物２は英国、バ
ートンーオンートレント、ウエリントン ロード、ピ一
．オ一．４ボツクス１８のボビリル フード イングレ
デイエンツ製のゝイーテツクス２を用い、ゝ寒天″″は
英国、ロンドン、エス・イ一．１、サウスワーク ブリ
ツジ ロードのオキソイド リミテツド製のものを用い
た。
ートンーオンートレント、ウエリントン ロード、ピ一
．オ一．４ボツクス１８のボビリル フード イングレ
デイエンツ製のゝイーテツクス２を用い、ゝ寒天″″は
英国、ロンドン、エス・イ一．１、サウスワーク ブリ
ツジ ロードのオキソイド リミテツド製のものを用い
た。
］ ，培地は滅菌前にＰＨ６．８に調整した。
５０ｄの０．０２％ツウイーン８０（登録商標名）含有
滅菌脱イオン水を１つのゞロークズ２ピン培養物に加え
、胞子を振盪して懸濁させた。
滅菌脱イオン水を１つのゞロークズ２ピン培養物に加え
、胞子を振盪して懸濁させた。
この胞子懸濁液は次いで１００１のステンレス鋼製発酵
釜に入れた７５１の滅菌種段階培地に接種物として加え
た。種段階培地の組成は次の通り。〔ゝ大豆粉末２は英
国、マンチエスタ一・オールドトラフオードのブリテイ
シユ・アルカデ一社のアルカソイ５０を用いた。〕発泡
抑制のため１０％容量／容量のプルロニツクＬ８ｌ（登
録商標名）大豆油溶液５０ｄを滅菌前の発酵培地に添加
した。
釜に入れた７５１の滅菌種段階培地に接種物として加え
た。種段階培地の組成は次の通り。〔ゝ大豆粉末２は英
国、マンチエスタ一・オールドトラフオードのブリテイ
シユ・アルカデ一社のアルカソイ５０を用いた。〕発泡
抑制のため１０％容量／容量のプルロニツクＬ８ｌ（登
録商標名）大豆油溶液５０ｄを滅菌前の発酵培地に添加
した。
〔ブルロニツクＬ８ｌは英国、ロンドン、ダブリユ一．
３．ザ バーレ２３１のヤコブソン・ヴアン・デン・ベ
ルグユ一・ケ一・社より供給のものである〕培地は発酵
釜中で２０分間、１２０℃で蒸気滅菌した。
３．ザ バーレ２３１のヤコブソン・ヴアン・デン・ベ
ルグユ一・ケ一・社より供給のものである〕培地は発酵
釜中で２０分間、１２０℃で蒸気滅菌した。
種段階培養物を７．５インチ直径の羽根皿攪拌機を用い
１４０ｒ．ｐ．ｍ．で攪拌し、開放末端スパージヤ一を
通して滅菌空気を毎分７５１供給した。培養容器はじや
ま板で固定した。温度は２８℃に調節し、この条件下で
４５時間培養させた後、３００１のステンレス鋼製発酵
釜に入れた１５０１の滅菌発酵培地に７．５１のこの種
培養物を接種した。発酵培地の組成は次の通り。発泡抑
制のため１０％のプルロニツクＬ８ｌ大豆油溶液３００
ｍ１を加えた。
１４０ｒ．ｐ．ｍ．で攪拌し、開放末端スパージヤ一を
通して滅菌空気を毎分７５１供給した。培養容器はじや
ま板で固定した。温度は２８℃に調節し、この条件下で
４５時間培養させた後、３００１のステンレス鋼製発酵
釜に入れた１５０１の滅菌発酵培地に７．５１のこの種
培養物を接種した。発酵培地の組成は次の通り。発泡抑
制のため１０％のプルロニツクＬ８ｌ大豆油溶液３００
ｍ１を加えた。
発酵物は４８時間後に取り出し、遠心分離で澄明化した
。澄明化した発酵物はクレブシラ ェロゲネスを種っけ
した寒天上での通常のホール イン プレ一 之ト法に
よつて検定し、任意に３４０単位／ＴｆＬｌの活性に定
められた。Ｂ．実質的に純粋なＭＭｌ７８８Ｏナトリウ
ム塩の単離１０℃．ＰＨ６．８の実質的に（ａ）におい
て製造 １された澄明な発酵物（１０５０１；３４０単
位／ｄ）はセチルジメチルベンジルアンモニウム クロ
ライド（１２００ｆ）を含むジクロロメタン（３１０１
）を用い、１０℃で、あらかじめ決めた流速でインライ
ンミキサーを通し １て二つの液体を吸い上げつつ抽出
した。
。澄明化した発酵物はクレブシラ ェロゲネスを種っけ
した寒天上での通常のホール イン プレ一 之ト法に
よつて検定し、任意に３４０単位／ＴｆＬｌの活性に定
められた。Ｂ．実質的に純粋なＭＭｌ７８８Ｏナトリウ
ム塩の単離１０℃．ＰＨ６．８の実質的に（ａ）におい
て製造 １された澄明な発酵物（１０５０１；３４０単
位／ｄ）はセチルジメチルベンジルアンモニウム クロ
ライド（１２００ｆ）を含むジクロロメタン（３１０１
）を用い、１０℃で、あらかじめ決めた流速でインライ
ンミキサーを通し １て二つの液体を吸い上げつつ抽出
した。
層をシヤープレス連続遠心分離で約２分間混合して分離
した。ジクロロメタン層（３００１）を水性ヨウ化ナト
リウムで逆抽出した。この逆抽出は全量で２１０？のヨ
ウ化ナトリウム含有の水溶２液７１を用い４つのバツチ
で行なつた。層は比重で分けた。水層を希塩酸でＰＨ７
．７〜７．０に調整しＰ過した。ヨウ化ナトリウム抽出
液（７１）には２１９００単位／ｍｌを含有した。１０
Ｃ１ｎ直径のガラス製カラムに食塩（０．３モ エル）
含有のＰＨ７りん酸緩衝液（０．０５モル）中のＱＡＥ
セフアデツクスＡ２５（フアーマシア社製）を４０ＣＩ
！Ｌの高さに詰めイオン交換樹脂塔を作った。
した。ジクロロメタン層（３００１）を水性ヨウ化ナト
リウムで逆抽出した。この逆抽出は全量で２１０？のヨ
ウ化ナトリウム含有の水溶２液７１を用い４つのバツチ
で行なつた。層は比重で分けた。水層を希塩酸でＰＨ７
．７〜７．０に調整しＰ過した。ヨウ化ナトリウム抽出
液（７１）には２１９００単位／ｍｌを含有した。１０
Ｃ１ｎ直径のガラス製カラムに食塩（０．３モ エル）
含有のＰＨ７りん酸緩衝液（０．０５モル）中のＱＡＥ
セフアデツクスＡ２５（フアーマシア社製）を４０ＣＩ
！Ｌの高さに詰めイオン交換樹脂塔を作った。
５℃のヨウ化ナトリウム抽出液（７１！）を毎分５０ｄ
の速さでＱＡＥセフアデ （ツクスに通した。
の速さでＱＡＥセフアデ （ツクスに通した。
ＰＨ７の０．０５モルリん酸緩衝液中、０．７モル塩化
ナトリウム溶液で毎分２５ｍＩ３の流速で５℃で溶離さ
せた。
ナトリウム溶液で毎分２５ｍＩ３の流速で５℃で溶離さ
せた。
２１の流出液を捨て、９０のフラクシヨン（１００ｍ０
を集めた。
を集めた。
このフラクシヨンを紫外線分光光度計で検出し、約２８
５ｎ．ｍ．に吸収極大を示すフラクシヨンはＭＭｌ７８
８Ｏと２６５ｎ．ｍ．に吸収のある不純物との混合物を
含んでいることがわかつたのでそれらを集め、ＰＨ７に
調整した。（フラクシヨン番号２５〜３５、採取容量１
２３０ｄ、８４５０単位／ｍｌ） この集めたフラクシヨンに塩化ナトリウム（５７／１０
０−）を加え、５℃において６．３礪直径のカラムにア
ンバーラィトＸＡＤ４樹脂（ローム・アンド・ハース社
製）を３０ｃｒ１Ｌの高さに詰めたものに毎分２０ｄの
流速で通した。
５ｎ．ｍ．に吸収極大を示すフラクシヨンはＭＭｌ７８
８Ｏと２６５ｎ．ｍ．に吸収のある不純物との混合物を
含んでいることがわかつたのでそれらを集め、ＰＨ７に
調整した。（フラクシヨン番号２５〜３５、採取容量１
２３０ｄ、８４５０単位／ｍｌ） この集めたフラクシヨンに塩化ナトリウム（５７／１０
０−）を加え、５℃において６．３礪直径のカラムにア
ンバーラィトＸＡＤ４樹脂（ローム・アンド・ハース社
製）を３０ｃｒ１Ｌの高さに詰めたものに毎分２０ｄの
流速で通した。
これらの条件で抗生物質は無機の不純物がない状態で樹
脂に吸着される。抗生物質を室温で蒸溜水（２００Ｔｎ
１）、次いで５０％水性メタノールを用いて溶離させた
。溶離液（１１）を３０℃以下で減圧濃縮して７０ｄに
し、ＰＨ７に調整後、凍結乾燥してかつ色の固体（２．
１８７）を５０００単位／ηの活性で得た。上記の方法
で製造された物質の他のバツチは５７００単位／ηの活
性をもつたわずかに純度のより高いものでぁった。
脂に吸着される。抗生物質を室温で蒸溜水（２００Ｔｎ
１）、次いで５０％水性メタノールを用いて溶離させた
。溶離液（１１）を３０℃以下で減圧濃縮して７０ｄに
し、ＰＨ７に調整後、凍結乾燥してかつ色の固体（２．
１８７）を５０００単位／ηの活性で得た。上記の方法
で製造された物質の他のバツチは５７００単位／ηの活
性をもつたわずかに純度のより高いものでぁった。
この固体（０．５５ｆ）をｎ−プロパノール／水（４／
１）で平衝にしたセルロースカラム（４Ｘ２９ｃｍ）（
ワツトマンＣＣ３ｌ）を用いてクロマトグラフイ一を行
なつた。カラムはｎ−プロパノール／水（４／１）を用
いて溶離し、最初の１３５ｍ１の溶離物を捨てた後、１
５ｄのフラクシヨンを集めた。ＭＭｌ７８８Ｏに特有な
紫外線吸収スペクトルをもつたフラクシヨンを集め（４
５ｍ０、減圧濃縮してｎ−プロパノールを除いた後、凍
結乾燥して黄色の固体（３３７１９）を得た。
１）で平衝にしたセルロースカラム（４Ｘ２９ｃｍ）（
ワツトマンＣＣ３ｌ）を用いてクロマトグラフイ一を行
なつた。カラムはｎ−プロパノール／水（４／１）を用
いて溶離し、最初の１３５ｍ１の溶離物を捨てた後、１
５ｄのフラクシヨンを集めた。ＭＭｌ７８８Ｏに特有な
紫外線吸収スペクトルをもつたフラクシヨンを集め（４
５ｍ０、減圧濃縮してｎ−プロパノールを除いた後、凍
結乾燥して黄色の固体（３３７１９）を得た。
この固形物は１６０００単位／ηの活性であると検定さ
れた。実施例 ２発酵および単離工程はアンバーライト
ＸＡＤ−４からの溶離までは実施例１に述べたのと本質
的に同様に行なつた。
れた。実施例 ２発酵および単離工程はアンバーライト
ＸＡＤ−４からの溶離までは実施例１に述べたのと本質
的に同様に行なつた。
アンバーライトん山−４カラムからの溶離物を減圧濃縮
し、約２０ｄ容量とした。この溶液を０．１８モル塩化
ナトリウム溶液で調整したＱＡＥセフアデツクスＡ２５
カラム（３，８Ｘ３０ｃ１ｎ）に通した。カラムは最初
は、０．１８モルから０．２８モルの塩化ナトリウム溶
液を指数的勾配で全量が２１で溶離し、次いで０．２８
モル組成の一定な塩化ナトリウム溶液で溶離しムカラム
は流速毎分３ｍ１．４℃で溶離し、２５ｍ１のフラクシ
ヨンを集めた。ＭＭｌ７８８Ｏに特有な紫外線吸収スペ
クトルをもつたフラクシヨン（９０〜１０５）を集めた
（４００ｄ）。集めたフラクシヨンは減圧で約１０ｍ１
に濃縮し、１％ブタノールで平衡にした３．８Ｘ２８ｃ
ＩｎのバイオゲルＰ２（２００〜４００メツシユ）（バ
イオ・ラット・ラボラトリーズ）のカラムに付した。カ
ラムは毎分２ｍ１の流速で１％ブタノールを用いて溶離
し、５ｄのフラクシヨンを集めた。ＭＭｌ７８８Ｏに特
有な紫外線吸収スペクトルをもちかワ塩素に対する硝酸
銀反応が陰性であるフラクシヨンを集めた。集めたフラ
クシヨンを減圧で濃縮してブタノールを除き、凍結乾燥
して不定形固体（７３ワ）を得た。固形物（７０η）を
最低量のｎ−プロパノール／水（４／１）に溶解し、同
じ溶媒混合物で平衡にしたセルロースカラム（１．５×
１５Ｃ１！Ｌ）（ワツトマンＣＣ３ｌ）に付した。
し、約２０ｄ容量とした。この溶液を０．１８モル塩化
ナトリウム溶液で調整したＱＡＥセフアデツクスＡ２５
カラム（３，８Ｘ３０ｃ１ｎ）に通した。カラムは最初
は、０．１８モルから０．２８モルの塩化ナトリウム溶
液を指数的勾配で全量が２１で溶離し、次いで０．２８
モル組成の一定な塩化ナトリウム溶液で溶離しムカラム
は流速毎分３ｍ１．４℃で溶離し、２５ｍ１のフラクシ
ヨンを集めた。ＭＭｌ７８８Ｏに特有な紫外線吸収スペ
クトルをもつたフラクシヨン（９０〜１０５）を集めた
（４００ｄ）。集めたフラクシヨンは減圧で約１０ｍ１
に濃縮し、１％ブタノールで平衡にした３．８Ｘ２８ｃ
ＩｎのバイオゲルＰ２（２００〜４００メツシユ）（バ
イオ・ラット・ラボラトリーズ）のカラムに付した。カ
ラムは毎分２ｍ１の流速で１％ブタノールを用いて溶離
し、５ｄのフラクシヨンを集めた。ＭＭｌ７８８Ｏに特
有な紫外線吸収スペクトルをもちかワ塩素に対する硝酸
銀反応が陰性であるフラクシヨンを集めた。集めたフラ
クシヨンを減圧で濃縮してブタノールを除き、凍結乾燥
して不定形固体（７３ワ）を得た。固形物（７０η）を
最低量のｎ−プロパノール／水（４／１）に溶解し、同
じ溶媒混合物で平衡にしたセルロースカラム（１．５×
１５Ｃ１！Ｌ）（ワツトマンＣＣ３ｌ）に付した。
カラムは毎分１１１Ｌ１の流 １速でｎ−プロパノール
／水（４／１）を用いて溶離し、６ｄのフラクシヨンを
集めた。フラクシヨンは紫外線吸収スペクトルで追跡し
、ＭＭｌ７８８Ｏに特有なスペクトルをもつフラクシヨ
ン（１３〜１６）を集めた（２４ｄ）。これを減圧で濃
縮し ｌてプロパノールを除き、凍結乾燥して淡かつ色
の不定形固体（１７ワ）を得た。前記で生成したＭＭｌ
７７８Ｏナトリウム塩の性質本質的に実施例２で述べた
方法で生成された物 ２質はそれぞれ図１、図２および
図３で示されるような赤外線吸収スペクトル、核磁気共
鳴スペクトル、紫外線吸収スペクトルを有していた。
／水（４／１）を用いて溶離し、６ｄのフラクシヨンを
集めた。フラクシヨンは紫外線吸収スペクトルで追跡し
、ＭＭｌ７８８Ｏに特有なスペクトルをもつフラクシヨ
ン（１３〜１６）を集めた（２４ｄ）。これを減圧で濃
縮し ｌてプロパノールを除き、凍結乾燥して淡かつ色
の不定形固体（１７ワ）を得た。前記で生成したＭＭｌ
７７８Ｏナトリウム塩の性質本質的に実施例２で述べた
方法で生成された物 ２質はそれぞれ図１、図２および
図３で示されるような赤外線吸収スペクトル、核磁気共
鳴スペクトル、紫外線吸収スペクトルを有していた。
前記で生成した物質の抗菌活性は０．２％濃度のテスト
細菌の一夜接種物を用いた微量滴定法によ＊２（つて決
定した。
細菌の一夜接種物を用いた微量滴定法によ＊２（つて決
定した。
結果を表２に示す。クレブシラエロゲネスやスタフイロ
コツカス アウレウスラツセルに対し、アンピンリンや
セフアロリジンと共にＭＭｌ７８８Ｏを用いた場合の相
乗活性を表３に示す。このようにして生成されたＭＭｌ
７８８Ｏのジナトリウム塩はペルキー特許第８２７３３
１号における方法で決定するとエシエリシア コリＪＴ
４からのβ−ラ，クタマーゼに対して２５０Ｘ１０−１
２ｔ／７ｎｔｆ）１５０値を持つていた。
コツカス アウレウスラツセルに対し、アンピンリンや
セフアロリジンと共にＭＭｌ７８８Ｏを用いた場合の相
乗活性を表３に示す。このようにして生成されたＭＭｌ
７８８Ｏのジナトリウム塩はペルキー特許第８２７３３
１号における方法で決定するとエシエリシア コリＪＴ
４からのβ−ラ，クタマーゼに対して２５０Ｘ１０−１
２ｔ／７ｎｔｆ）１５０値を持つていた。
電気泳動によると生成された物質はジナトリウム塩であ
り、従つてＭＭｌ７８８Ｏは二価酸であるということが
示唆された。上記で生成されたＭＭｌ７８８Ｏのジナト
リウム塩のサンプルについて行なわれた元素分析による
と次の結果が得られた。
り、従つてＭＭｌ７８８Ｏは二価酸であるということが
示唆された。上記で生成されたＭＭｌ７８８Ｏのジナト
リウム塩のサンプルについて行なわれた元素分析による
と次の結果が得られた。
Ｃ：３１．９％、Ｈ：４．２％、Ｎ：５．４％、Ｓ：１
３．２％、Ｎａ：１１．６％分析に供された物質は凍結
乾燥によつて生成されたものであるので水または他の不
純物を含んでいるかも知れないということは覚えておく
べきである。
３．２％、Ｎａ：１１．６％分析に供された物質は凍結
乾燥によつて生成されたものであるので水または他の不
純物を含んでいるかも知れないということは覚えておく
べきである。
ＭＭｌ７８８Ｏのジナトリウム塩は（炭素、水素および
酸素に加えて）硫黄原子、窒素原子、ナトリウム原子を
２：２：２の割合で含んでいる。
酸素に加えて）硫黄原子、窒素原子、ナトリウム原子を
２：２：２の割合で含んでいる。
マウスに対するＭＭｌ７８８Ｏの急性毒性化合物：ＭＭ
ｌ７８８Ｏのジナトリウム塩（純度８０％） 投与経路：２５００Ｗ！Ｆ７／Ｋｇ皮下 ５０００？Ｎｆ７／Ｋｇ皮下 種：オラツクＭＦＩ種の雌雄マウス。
ｌ７８８Ｏのジナトリウム塩（純度８０％） 投与経路：２５００Ｗ！Ｆ７／Ｋｇ皮下 ５０００？Ｎｆ７／Ｋｇ皮下 種：オラツクＭＦＩ種の雌雄マウス。
１９〜２１ｙ０各性ごとに１投与量当り１０マウス用い
る。
る。
観察期間：１４日間
結果：投与後、接種部位に少しの初期炎症が見られた。
この毒性試験において死亡したマウスはなかつた。試験
結果を表４に示す。
結果を表４に示す。
図１はＭＭｌ７８８Ｏのジナトリウム塩の赤外線吸収ス
ペクトル（新しく調整した０．４％重量／重量ＫＢｒデ
イスク中）、図２はＭＭｌ７８８Ｏのジナトリウム塩の
核磁気共鳴スペクトル（新しく調整した重水中、ここで
ゞＸ″印のピークは溶媒中の不純物（ＨＯＤ）によるも
のである）、図３はＭＭｌ７８８Ｏのジナトリウム塩の
紫外線吸収スペクトル（ＰＨ７．リン酸緩衝液中１００
μｆ／ＭＯを示す。
ペクトル（新しく調整した０．４％重量／重量ＫＢｒデ
イスク中）、図２はＭＭｌ７８８Ｏのジナトリウム塩の
核磁気共鳴スペクトル（新しく調整した重水中、ここで
ゞＸ″印のピークは溶媒中の不純物（ＨＯＤ）によるも
のである）、図３はＭＭｌ７８８Ｏのジナトリウム塩の
紫外線吸収スペクトル（ＰＨ７．リン酸緩衝液中１００
μｆ／ＭＯを示す。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 二価酸性固体でその実質的に純ジナトリウム塩が次
の特性：（ａ）ＫＢｒディスク中で測定した際、実質的
に図１で示されるような特有の赤外線吸収スペクトルを
示す、（ｂ）重水中で測定した際、実質的に図２で示さ
れるような特有の核磁気共鳴スペクトルを示す、（ｃ）
水溶液中で約２９７ｎ．ｍ．に吸収極大を持つ実質的に
図３で示されるような特有の紫外線吸収スペクトルを示
す、（ｄ）バチルスズブチリス、エンテロバクタークロ
アカー、エシエリシアコリ、クレブシラエロゲネス、プ
ロテウスミラビリス、サルモネラテイフイムリウム、セ
ラチアマルセツセンスおよびスタフイロコツカスアウレ
ウスの菌株のごときグラム陽性菌およびグラム陰性菌に
対して抗菌活性を有する、（ｅ）アンピシリンまたはア
モキシシリンと混合して用いると、スタフイロコツカス
アウレウスおよびクレブシラエロゲネスの菌株のごとき
細菌に対する抗菌活性を相乗する、を有するＭＭ１７８
８０及びその塩類。 ２ ＭＭ１７８８０の医薬的に受容なジ塩基性塩である
特許請求の範囲第１項による化合物。 ３ ＭＭ１７８８０のジナトリウム塩またはジカリウム
塩である特許請求の範囲第２項による化合物。 ４ 少なくとも８５％純度のＭＭ１７８８０ジ塩基性塩
である特許請求の範囲第２項又は第３項による化合物。 ５ 少なくとも９０％純度のＭＭ１７８８０のジ塩基性
塩である特許請求の範囲第２項又は第３項による化合物
。 ６ 二価酸性固体でその実質的に純ジナトリウム塩が次
の特性：（ａ）ＫＢｒディスク中で測定した際、実質的
に図１で示されるような特有の赤外線吸収スペクトルを
示す、（ｂ）重水中で測定した際、実質的に図２で示さ
れるような特有の核磁気共鳴スペクトルを示す、（ｃ）
水溶液中で約２９７ｎ．ｍ．に吸収極大を持つ実質的に
図３で示されるような特有の紫外線吸収スペクトルを示
す、（ｄ）バチルスズブチリス、エンテロバクタークロ
アカー、エシエリシアコリ、クレブシラエロゲネス、プ
ロテウスミラビリス、サルモネラテイフイムリウム、セ
ラチアマルセツセンスおよびスタフイロコツカスアウレ
ウスの菌株のごときグラム陽性菌およびグラム陰性菌に
対して抗菌活性を有する、（ｅ）アンピシリンまたはア
モキシシリンと混合して用いると、スタフイロコツカス
アウレウスおよびクレブシラエロゲネスの菌株のごとき
細菌に対する抗菌活性を相乗する、を有するＭＭ１７８
８０又はその塩類からなる抗菌剤。 ７ 特許請求の範囲第６項記載の抗菌剤と医薬的に受容
な担体とからなる哺乳動物への投与に適用される特許請
求の範囲第６項による抗菌組成物。 ８ 二価酸性固体でその実質的に純ジナトリウム塩が次
の特性：（ａ）ＫＢｒディスク中で測定した際、実質的
に図１で示されるような特有の赤外線吸収スペクトルを
示す、（ｂ）重水中で測定した際、実質的に図２で示さ
れるような特有の核磁気共鳴スペクトルを示す、（ｃ）
水溶液中で約２９７ｎ．ｍ．に吸収極大を持つ実質的に
図３で示されるような特有の紫外線吸収スペクトルを示
す、（ｄ）バチルスズブチリス、エンテロバクタークロ
アカー、エシエリシアコリ、クレブシラエロゲネス、プ
ロテウスミラビリス、サルモネラテイフイムリウム、セ
ラチアマルセツセンスおよびスタフイロコツカスアウレ
ウスの菌株のごときグラム陽性菌およびグラム陰性菌に
対して抗菌活性を有する、（ｅ）アンピシリンまたはア
モキシシリンと混合して用いると、スタフイロコツカス
アウレウスおよびクレブシラエロゲネスの菌株のごとき
細菌に対する抗菌活性を相乗する、を有するＭＭ１７８
８０又はその塩類と、ペニシリンまたはセフアロスポリ
ンを含む抗菌組成物。 ９ ストレプトマイセス属に属するＭＭ１７８８０生産
菌株を培養し、混合物から二価酸性固体でその実質的に
純ジナトリウム塩が次の特性：（ａ）ＫＢｒディスク中
で測定した際、実質的に図１で示されるような特有の赤
外線吸収スペクトルを示す、（ｂ）重水中で測定した際
、実質的に図２で示されるような特有の核磁気共鳴スペ
クトルを示す、（ｃ）水溶液中で約２９７ｎ．ｍ．に吸
収極大を持つ実質的に図３で示されるような特有の紫外
線吸収スペクトルを示す、（ｄ）バチルスズブチリス、
エンテロバクタークロアカー、エシエリシアコリ、クレ
ブシラエロゲネス、プロテウスミラビリス、サルモネラ
テイフイムリウム、セラチアマルセツセンスおよびスタ
フイロコツカスアウレウスの菌株のごときグラム陽性菌
およびゲラム陰性菌に対して抗菌活性を有する、（ｅ）
アンピシリンまたはアモキシシリンと混合して用いると
、スタフィロコツカスアウレウスおよびクレブシラエロ
ゲネスの菌株のごとき細菌に対する抗菌活性を相乗する
、を有するＭＭ１７８８０またはその塩類を単離するこ
とよりなるＭＭ１７８８０または塩類の製造方法。 １０ ストレプトプロセス属に属するＭＭ１７８８０生
産菌がストレプトマイセスオリバセウムである特許請求
の範囲第９項記載の方法。 １１ ストレプトマイセス属に属するＭＭ１７８８０生
産菌がストレプトマイセスオリバセウス微工研菌寄第２
９５５号である特許請求の範囲第９項又は第１０項記載
の方法。 １２ ＭＭ１７８８０のジ塩基性塩の単離が、ＭＭ１７
８８０のジ塩基性塩を水性溶媒中に抽出し、次いでクロ
マトグラフィー的に精製を行なう段階を経ることよりな
る特許請求の範囲第９項〜第１１項の何れかに記載の方
法。 １３ 他の抗菌物質と共にＭＭ１７８８０またはその塩
類を含む溶液を本質的にＭＭ１７８８０またはその塩類
の溶液からなるフラクシヨンにクロマトグラフィー的に
分離し、その溶液から実質的に純粋なＭＭ１７８８０ま
たはその塩類を回収することよりなる実質的に純粋なＭ
Ｍ１７８８０またはその塩類を製造することよりなる特
許請求の範囲第９項〜第１２項の何れかに記載の方法。
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