JPS599860B2 - 液体クロマトグラフィ−における溶離液流を形成する方法および装置 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は液体クロマトグラフイ一に関し、さらに詳細に
は液体クロマトグラフイ一における溶離液流を生成させ
る方法、液体クロマトグラフイ一における溶離液流を生
成させる装置に関する。

液体クロマトグラフイ一における溶離液流を形成する幾
つかの方法が現在当業界で知られている。液体クロマト
グラフイ一における均一な溶離液流は、クロマトグラフ
イ一分析の実施にとつて必須の条件である。液体クロマ
トグラフイ一における溶離液流を形成する方法の１つは
、溶離液を加圧下でクロマトグラフイ一系を通つて変位
させることを包含する。

圧力源として、種々のデザインのポンプが使用される（
Ｊ．Ｊ．カークラッド（Ｋｉｒｋｌａｎｄ）編集、「現
代液クロマトグラフイ一の実際」（ＭＯｄｅｒｎＰｒａ
ｃｔｉｖｅＯｆＬｉｑｕｉｄＣｈｒＯｍａｔＯｇｒａｐ
ｈｙ）、デラウエア州ウイルミントン、Ｅ．Ｉ．デユポ
ン・ド・ヌマ一・アンド・カンパニーの工業及び生化学
部門（ＩｎｄｕｓｔｒｉａｌａｎｄＢｉＯｈｅｍｉｃａ
ｌＤｅｐａｒｔｍｅｎｔＥ．Ｉ．ｄｕＰＯｎｔｄｅＮｅ
ｍＯｕｒｓａｎｄＣＯｍｐａＮｙ，ＷｉｌｍｉｎｇｔＯ
ｎ，Ｄｅｌａｗａｒｅ）、ウイレ一・インターサイエン
ス（ＷｉＩｅｙＩｎｔ一Ｅｒｓｃｉｅｎｃｅ）、ジヨン
・ウイレ一・アンド・サンズ社の一部門（ＡＤｉｖｉｓ
ｉＯｎＯｆＪＯｈｎＷｌｌ−ＥｙａｎｄＳＯｎｓ．Ｉｎ
ｃ．），（ニユーヨーク、ロンドン、シドニ一 トロン
ト）１９７１、第２章参照）。この従来技術法は、ある
欠点を有し、その中で最も重要なのは脈動の発生および
上記方法を実施するために必要な装置の高価格である。

さらに、現代の液体クロマトグラフイ一では、溶離液流
を、クロマトグラフイーカラムを所要の速度で流動させ
るために広範囲の圧力が使用される。溶離液の流速の変
化は、種々の圧力に対するデリケートでかつ労力を消費
するポンプ調節操作を伴い、その結果分析期間が長くな
り溶離液の１つの流速から他の流速への転移が妨害され
る。可撓性隔室に適用される圧縮ガスまたは溶離液を有
するコンテナ一に装着されたピストンの圧力下でコンテ
ナ一から溶離液を排出させることにより液体クロマトグ
ラフイ一において溶離液の均一な流れを形成する方法が
当業界で知られている。

この従来技術法は、液体クロマトグラフイ一における溶
離液流を形成する装置、たとえば溶離液を含有する圧縮
性容器を中に配置した硬質コンテナ一を包含する空気ポ
ンプにより実現される。このポンプでは、圧縮ガスが硬
質コンテナ一に供給され、その結果上記容器が圧縮され
てそこから溶離液が排出される。種々のポンプ装置にお
いて、圧縮性容器としてプラスチツクフラスコ、ステン
レス鋼またはテフロン製送風器が使用される。（Ｊ．Ｊ
．カークラッド編集、「現代液体クロマトグラフイ一の
実際」（デラウエア州ウイルミントン、Ｅ．Ｉ．デユポ
ン・ド・ヌマ一・アンド・カンパニー、工業及び生化学
部門）、ウイレ一・インターサイエンス（ジヨン・ウイ
レ一・アンド・サンズ社）（ニユーヨーク、ロンドン、
シドニートロント）１９７１、第２章参照）。しかしな
がら、液体クロマトグラフイ一における溶離液流を形成
するための前記従来技術法およびそれと対応する装置は
、一連の本質的欠点を特徴とする。

溶離液から溶解ガスが発生するために、クロマトグラフ
イーパラメータたとえば分解能が損われ、零線変動のセ
ンサーの操作安定性が妨げられる。

上記装置を用いる上記従来技術法を実施するためには、
高圧源、すなわち圧縮ガスを含有するコンテナ一が必要
である。その結果、全体のクロマトグラフイ一系は厄介
なものとなり、運搬が不便でありかつ自己信頼性が欠け
る。圧縮ガスを含有する上記シリンダーは１５０気圧以
下の圧力で作動し、その結果このポンプ系の上限圧力は
制限される。

本発明の目的は、液体クロマトグラフイ一で使用される
任意の圧力下で脈動なしに均一な溶離液流を形成するこ
とが出来るような液体クロマトグラフイ一における溶離
液流を形成する方法、その装置を提供することである。

Ｊ η この目的は、溶離液を加圧下でクロマトグラフイーカラ
ムへ移動させることにより液体クロマトグラフイ一にお
ける溶離液流を形成する方法によつて達成され、この場
合本発明に従い、溶離液の移動が濃度を一定に保持した
物質の溶液の浸透圧作用により確実に行われる。

溶離液として、浸透圧を生じさせるためのものと同じ物
質溶液が使用される場合、液体クロマトグラフイ一にお
ける溶離液流を形成する方法は実質的に簡単化される。

物質溶液の一定濃度は、物質溶液を固相のこの物質と接
触させることにより維持するのが好ましく、物質溶液は
溶剤の氷点より高い温度で恒温にされる。

本発明による方法を実施するための装置は、圧力源およ
びこの圧力源と連通している溶離液の入つたコンテナ一
を有し、本発明によれば、圧力源は２つの容器形として
具体化された浸透セルおよび上記２つの容器を分離する
半透膜を有し、上記容器の１つは溶剤で満たされ、他方
の容器は上記コンテナ一と連通していてかつ同じ入れ物
に入つた固相物質と接触する上記物質の飽和溶液が満た
されている。

半透膜の機械強度を確保するために、浸透セルに基体が
設けられ、上記基体の表面には、溶剤流に相対する側に
、上記半透膜が配置される。

作動圧を増大させることが必要な場合、液体クロマトグ
ラフイ一の溶離液流を形成するための装置を少なくとも
２つ同じものを直列に連結したものからなる、液体クロ
マトグラフイ一の溶離液流を形成するための機構を使用
するのが得策である。本発明は次のようにして具体化さ
れる。上記容器の１つに溶剤が注がれ、それは半透膜を
通つて他の容器に入つている物質の溶液と接触する。

該物質の溶液の入つた容器が今度はコンテナ一と連通さ
れ、そのコンテナ一には溶離液が入れられている。溶離
液として同じ物質溶液を使用する場合、その物質溶液の
入つた容器にクロマトグラフイーカラムを直接結合させ
ることが出来る。溶離液をクロマトグラフイーカラムに
移動させるには、濃度を一定に保持した物質溶液の浸透
圧下で行われる。浸透圧に物質溶液の入つた容器が溶剤
と接触させられた瞬間から生じ始める。溶剤は半透膜を
透過し始め、その結果物質溶液の全容積が増大し、した
がつて特定の圧力下で一定の流速で以つて溶離液の移動
が行われる。現時点では濃縮溶液に対して浸透圧の値を
定めるパラメータおよびパラメータ間の関数的関係は十
分研究されていない。希薄溶液の浸透圧の数値決定はフ
アントーホツフの式により行うことが出来る。物質の濃
度はたとえば溶液を固相の同じ物質と接触させることに
より一定に維持される。一定温度の溶液を与えるために
は、物質溶液の入つた容器は恒温に温度調節される。溶
離液の増大された流速および増大された圧力値は、物質
および溶剤の対応する対、膜の種類および表面、恒温に
調節される温度を選定することにより得ることができる
。

本発明による方法では、種々の化合物の溶液を使用する
ことが出来る。

物質として、有機および無機の両方の化合物たとえばＬ
ｉＣｌ，ＮａＣｌ，ＮＨ４Ｃｌ，ＣａＣｌ，，ＢａＣｌ
２，ＭｇＣｌ２，ＫＣＩ，ＭｇＣ２Ｏ４，ＬｉＮＯ３，
Ｃａ（ＮＯ３）２，Ｍｇ（Ｎへ）２，ＮａＮ０，，Ｎａ
２Ｓ０４，ＭｇＳ０４，ＣＵＳ０４，ＭｎＳ０４，Ａ１
Ｃ１３，Ｎａ０Ｈ，ＫＨ２Ｐ０４，（ＣＨ，ＣＯＯ）２
Ｍｇ１硝酸セルロース、糖、ヘモグロビン、ゼラチン、
および化合物の混合物たとえばＣｓＣｌ−ＫＣＩｌ海塩
、塩湖塩等を使用することが出来る。それら物質の水溶
液を使用することが最も便利であるが、他の溶剤を使用
することも出来る。本発明は添付図面を参照して述べる
下記の特定の実施態様についての詳細な記載から一層完
全に明らかになるであろう。

液体クロマトグラフイ一の溶離液流を形成する装置１（
第１図）は、浸透セルの形になつている圧力源で、溶離
液４の入つたコンテナ−３と連通している浸透セル（圧
力源）２を有する。

溶離液は硬質コンテナ−３の可変性容積５に入つており
、その容積は可動性不透過性隔壁６により制限される。

上記可変性容積５の容積はまた溶離液と溶離液と不混和
性で、硬質容器３と連通する浸透セル２の容器８に入れ
られた物質の飽和溶液７との間の界面により制限される
。容器８には、上記飽和溶液７とは別に、固相物質９が
存在し、上記飽和溶液および固相物質は半透膜１０によ
り溶剤１１と分離されている。溶剤１１は溶剤１１の供
給用入口管１３を設けた浸透セル２の容器１２に入つて
いる。本発明のこの実施態様による装置を使用する場合
、大きな圧力および半透膜１０（第１図）の高い機械強
度を与えるために、半透膜は基体１４（第２図）の上に
配置される。半透膜として、多孔質なもので、動的（Ｄ
ｙｎａ−ＭｌＣ）な膜、予備成形膜、密封性膜、剛性構
造の膜、複合膜、等方性膜、異方性膜、付着膜、含浸膜
、スプレー膜および沈積膜を使用することが出来る。ま
た、無孔性（拡散性）の膜で、密封性をもつもの、剛性
構造のもの、等方性或は異方性のものを使用することが
出来る。作動圧を増大させる必要がある場合、本発明は
第２図に示すような装置１と同じものを少なくとも２つ
直列に連結したものからなる濱体クロマトグラフイ一の
溶離液流の形成系を提供する。

この系は第３図に示され、上記系の操作の説明に都合が
よいように、装置の１つの構造部材は他の装置の同じ部
材の参照文字と異なる参照文字を有する。液体クロマト
グラフイ一の溶離液流の形成系は、溶剤供給用の入口管
１３（第２図）を通して第二の同様な装置１（第３図）
の硬質コンテナ−１５（第３図）の出口に連通する装置
１（第２図）からなる。第二の同様な装置は、可撓性容
器１６中に溶剤１１（第１図の容器１２に存在するもの
と同じ溶剤）が入つている硬質コンテナ−１５である。

溶剤１１は、浸透セル２の容器１９ど連通するコンテナ
−１５に貯蔵される物質の飽和溶液１８から可動性隔壁
１７により分離され、物質の飽和溶液１８および固相の
同じ物質２０は、溶剤供給用の入口管２５を設けた浸透
セル２の他の容器２４に入つている溶剤２３から基体２
２上の半透膜２１により分離されている。液体クロマト
グラフイ一の溶離液流を形成する方法を実施するための
装置の操作は、第１図に例示されている。

初期段階で、コンテナ−３の可変性容器５に溶離液４が
注ぎ込まれ、コンテナ−３の出口はクロマトグラフイー
カラムに連結される。容器１２に同じ溶剤１１（物質の
飽和溶液７の溶解に使用される）が管１３から供給され
る。次に、容器８に物質の飽和溶液７が注ぎ込まれ、固
相の同じ物質９が、溶離液の選定された流速（ωで所定
時間（γ）容器８の物質の飽和溶液を確実に一定濃度（
Ｃｓ）に維持できるような量りで添加される。固体物質
の量は、下記の関係により決定される：Ｑ＝Ｋ−Ｃｓ・
αγ〔式中Ｋは比例係数である〕。

溶剤１１が半透膜１０と接触すると、溶剤１１が物質の
飽和溶液７中に浸透するために容器８で浸透圧が増大し
始め、この浸透圧の下で物質の飽 ．和溶液７は容器８
から溶離液４を含有するコンテナ一に移動する。

物質の飽和溶液７の浸透圧の作用下で、可撓性不透過性
隔壁６または、溶離液と溶離液不混和性物質の飽和溶液
７間との界面は移動を開始し、その結果コンテナ−３か
ら溶離液４がクロマトグラフイーカラムに向つて移動す
る（移動した溶離液のクロマトグラフイーカラムに向う
移動方向は矢印Ａで示されている）。作動圧を増大させ
るために、適当な対の溶剤一溶剤を選択することは別に
して、第３図に示すような液体クロマトグラフイ一の溶
離液流を形成する機構を使用することが出来る。

この機構の操作は次のようにして行われる。

初期段階で、コンテナ−３の可撓性容器５（第３図）に
溶離液４が注ぎ込まれ、コJャeナ一３の出口はクロマト
グラフイーカラムに連結される。容器１２に入口管１３
を通して同じ溶剤（コンテナ−１５の可撓性容器を満た
すために注がれる溶剤１１と同じ）が入れられ、コンテ
ナ−１５の出口は管１３に連結される。容器２４に、入
口管２５を介して溶剤１１と同じでも良くまたは異なつ
ていても良い溶剤２３が注ぎ込まれる。容器８および１
９に、固相物質９および２０が導入される（この物質は
同じでもまたは異なつてもよい）。上記容器は対応する
物質の飽和溶液７および１８で充填される。溶剤２３が
基体２２上の半透膜２１を通して物質の飽和溶液１８と
接触すると、溶剤２３は容器１９に浸透し始め、そこで
浸透圧が増大し始める。この圧力作用下で、物質の飽和
溶液１８はコンテナ−１５の可変性容積１６から溶剤２
３を、管１３を介してコンテナ−１５と連通する容器１
２に移動させ、その結果後続の浸透セルの溶剤１１の初
期圧を増大させる。今度は、溶剤１１が半透膜１０を透
過して物質の飽和溶液７の入つた容器８に入り、２つの
浸透セルで生じた浸透圧の値の合計に等しい浸透圧がそ
こに生じる。この圧力下で、溶離液４はコンテナ−３の
可変性容積５からクロマトグラフイーカラムへ移動させ
られる。

本発明により、液体クロマトグラフイ一で使用される広
範囲の圧力内で脈動なしで液体クロマトグラフイ一で溶
離液の均一流を生じさせることが出来る。

さらに、本発明による方法は使用装置に関して非常に簡
単である。

本発明による方法を実施するための装置では、運動する
部材が存在しない。従来技術の機構ではポンプ系の操作
により溶離液の不純物汚染が起るが、本発明による方法
ではこのような汚染は起きない。本発明をより良く理解
するために、いくつかの特定例を次に例示する。

例１ 内容積２００ｍ１の鋼容器１２に、溶剤すなわち水を入
口管１３から入れる。

容量５００ｍ１の可変性容積５にヘプタンを充填する。
溶離液の全容積と取つて代るのに十分な２００９のＭｇ
ＳＯ４固体塩を内容積５００ｍ１の容器８に入れる。次
に、ＭｇＳＯ４の飽和水溶液を容器８に注ぎ入れる。容
器１２は、サーメツト基体１４により支持された酢酸セ
ルロースフイルム製半透膜１０により容器８から分離さ
れる。膜の表面積は２５ｃ１１１に等しい。水はサーメ
ツト基体の側から容器８に浸透し、その内部に浸透圧を
生じる。クロマトグラフイーカラムの入口における圧力
およびカラムを通過する溶離液流速は、固体塩ＭｇＳＯ
４が容器８に供給される水に完全に溶解するまで一定に
維持される。ヘプタンの一定流速は４ｍ１／時で、カラ
ム入口における圧力は１２０絶対気圧である。例２ 例１の方法を繰り返すが、ただし半透隔膜として、ミリ
ボア社（″ＭｉｌｌｌｐＯｒｅ″Ｉｎｃ．）製の「ミリ
ボア」基体上に支持されたプラズマ付着４−ビニルピリ
ジン膜を使用する。

溶離液の流速は７８絶対気圧で６０ｍ１／時である。例
３ 例１の方法を繰り返すが、ただしクロマトグラフイーカ
ラムの抵抗をカラムの長さを減少させることにより変え
る。

ヘプタンの一定流速１２ｍ１／時でカラム入口の圧力は
４０絶対気圧に等しい。例４例１の方法を繰り返すが、
ただしサツカロースの飽和水溶液を容器８に注ぎ入れる
。

溶離液の一定流速１０ＴｆＬ１／時で、クロマトグラフ
イーカラムの入口の圧力は１１０絶対気圧に等しい。

例５ 例１の方法を繰り返すが、ただしシクロヘキサノンを容
器１２に注ぎ入れながら、硝酸セルロースの飽和シクロ
ヘキサノン溶液を容器８に注ぎ入れ、膜としてポリイミ
ドフイルムを使用する。

溶離液の一定流速６ｍ１／時で、クロマトグラフイーカ
ラムの入口圧力は９０絶対気圧である。例６例１の方法
を繰り返すが、ただしエタノールを容器１２に注ぎ入れ
ながら、サツカロースの飽和エタノール溶液を容器８に
注ぎ入れる。

溶離液の一定流速９ｍｊ／時で、クロマトグラフイーカ
ラムの入口圧力は７０絶対気圧である。

例７例１と同様なやり方で方法を実施するが、ただし酢
酸エチルを容器１２に注ぎ入れながら硝酸セルロースの
飽和酢酸エチル溶液を容器８に注ぎ入れ、膜物質として
アクリロニトリルフイルムを使用する。

溶離液の一定流速６ｄ／時で、クロマトグラフイーカラ
ムの入口圧力は６４絶対気圧に等しい。

例８第３図に示すような液体クロマトグラフイ一の溶離
液流を形成する系は、例１に記載の寸法および構造材料
に関して同じ２つの装置からなる。

初期段階で、コンテナ−３の可変性容積５（第３図）に
ヘプタン４を注ぎ入れ、コンテナ−３の出口をクロマト
グラフイーカラムに連結する。水を入口管１３から容器
１２に入れる。コンテナ一１５の可変性容積１６にも水
を満たし、一方コンテナ−１５の出口を管１３に連結す
る。溶剤すなわち水を入口管２５から容器２３に入れる
。固体塩ＭｇＳＯ４９，２Ｏを容器８および１９に各容
器当り２００９の量で導入する。その後、同じ容器８お
よび１９にＭｇＳＯ４の飽和水溶液７および１８を注ぎ
入れる。水と飽和ＭｇＳＯ４溶液１８とが半透膜２１を
通して接触すると、水が容器１９に浸透し始め、そこで
浸透圧が発生し始める。

この圧力の作用下で、ＭｇＳＯ４の飽和水溶液１８はコ
ンテナ−１５の可変性容積１６から、管１３によりコン
テナ−１５に連結される容器１２へ水を移動させ、その
結果容器１２に含まれる水の初期圧が増大する。この水
は今度はサーメツト基体１４上に配置された酢酸セルロ
ースフイルム製半透膜１０を通しての浸透によりＭｇＳ
Ｏ４の飽和水溶液の入つた容器８に入り込み、２つの浸
透系で生じる浸透圧の値の合計に等しい浸透圧を生じさ
せる。浸透圧は２３５絶対気圧に等しい。この圧力下で
、ヘプタン４はコンテナ−３の可変性容積５からクロマ
トグラフイーカラムに移動させられる。例１のカラム長
さの２倍のカラム長さで、２３５絶対気圧の圧力下で４
ｍ１／時に等しいヘプタン流速が得られる。

例９ 強化サーメツト製基体２８上に表面積が１８０ｄの芳香
族ポリアミドフイルム製半透膜を有する円筒形表面部分
を有する１，０００ｍ２鋼容器２６（第４図）に、Ｃａ
（ＮＯ３）２の固体塩２９を４５０９予め装入する。

同じ容器２６に、Ｃａ（ＮＯ，）２の飽和水溶液を注ぎ
入れる。

硬質コンテナ−３２の５００ｍｔ可変性容積３１にヘプ
タン３３を充填し、クロマトグラフイーカラムに連結す
る。充填容器２６を溶剤３５すなわち水の入つたタンク
３４に入れる。容器２６をタンク３４に入れると直ちに
、水は半透膜２７を透過して容器２６へ浸透し始め、そ
こで浸透圧を生じる。この圧力作用下で、ヘプタンはク
ロマトグラフイーカラム中に移動する。

この浸透系で生じる作動圧力値の範囲は、５〜１５０絶
対気圧である。

溶離液として使用されるヘプタン流速は１８ｍ１／時で
ある。例１０ 強化サーメツト基体２８上に支持されたポリ塩化ビニル
製半透膜隔壁２７により構成された円筒形表面部分を有
する１，０００ｍ１チタン容器２６（第４図）に、固体
塩Ｎａｃｌ２９を予め装入する。

同容器２６に、Ｎａｃｌの飽和水溶液３０を装入する。
例４と対照的に、この例では溶離液の役割はＮａｃｌの
飽和水溶液３０によつて行われる。容器２６の出口はク
ロマトグラフイーカラム（図示せず）に連結される。容
器２６を水である溶剤３５が充填されたタンク３４に入
れる。容器２６をタンク３４に入れると直ちに、水は半
透隔壁２７を透過して容器２６に至り、そこで浸透圧を
生じる。この圧力下でＮａｃｌの飽和水溶液３０はクロ
マトグラフイーカラム中に排出される。４８絶対気圧の
圧力下で６０ｍ１／時に等しいＮａｃｌ飽和水溶液の所
定流速が得られる。

例１１ 例９の方法を繰り返すが、ただしＣＨ３ＣＯＯＮａの飽
和水溶液を使用する。

５７絶対気圧の圧力下で６０ｍ１／時に等しい溶離液の
一定流速が確保される。

例１２ 強化サーメツト基体３８上に支持されたポリ塩化ビニル
製半透膜３７を有する壁部を有する１２０ｍ１容器３６
（第５図）に、ヒータ３９を設ける。

６００Ｔｎ１鋼容器４０に、２５０ｇのＭｇ（ＮＯ３）
２４１を装入し、その飽和水溶液４２もそこへ２５℃で
装入する。

硬質コンテナ−４４の５００ｄ可変性容積４３に、ヘキ
サン４５を注ぎ入れ、容器４４の出口をクロマトグラフ
イーカラムに連結する。容器４０はコンテナ−４４と連
通している。

その後、容器３６に、水である溶剤４６を装入し、溶剤
４６をヒータ３９により５０℃に温度調節する。水が容
器３６に注ぎ入れられると直ちに、水は半透膜３７を透
過して容器４０に至り、そこで浸透圧を生じる。上記圧
力下で、ヘキサンはクロマトグラフイーカラム中に移動
される。恒温に調節される温度に依存して浸透圧値は異
なり、したがつてクロマトグラフイーカラムを通過する
溶離液の流速は変化する。１９０絶対気圧の浸透圧で５
０℃の温度で３０ｍ１／時に等しいＭｇ（ＮＯ３）２飽
和水溶液の予かじめ定められた流速が確保される。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明による方法を実施するための装置の一
実施態様の長手方向の立断面図、第２図は液体クロマト
グラフイ一の溶離液流を形成する方法を実施するための
本発明による装置の他の実施態様の長手方向の立断面図
、第３図は本発明の方法を実施するための２つの同様な
装置（第２図による）を直列に連結したものからなる系
の長手方向断面の立断面図、第４図は、本発明による方
法を実施するための装置の長手方向断面の正面図、第５
図は本発明による方法を実施するための装置の他の実施
態様の長手方向の立断面図である。 １・・・・・・液体クロマトグラフイ一における溶離液
流を形成する装置、２・・・・・・圧力源（浸透系）、
３・・・・・・コンテナ一、４・・・・・・溶離液、７
・・・・・・物質の飽和溶液、８・・・・・・物質の飽
和溶液を含有する容器、９・・・・・・固相物質、１０
・・・・・・半透膜、１１・・・・・・溶剤、１２・・
・・・・溶剤を含有する容器、１４・・・・・・基体。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 溶剤とそれに溶解する物質とからなる飽和溶液と、
   該物質の溶剤とを半透膜を通して接触させ、それによつ
   て生じた該飽和溶液の圧力増大によつて、液体クロマト
   グラフィー用溶離液で変動可能な体積の溶離液を押すこ
   とにより、該溶離液を液体クロマトグラフイーカラムへ
   移動させることからなる溶離液流の形成方法。 ２ 物質として、Ｍｇ（ＮＯ＿３）＿２、ＭｇＳＯ＿４
   、ＮａＣｌ、Ｃａ（ＮＯ＿３）＿２、ＣＨ＿３ＣＯＯＮ
   ａ、硝酸セルロース、セルロース、サッカロースが使用
   される、上記第１項に記載の方法。 ３ 溶剤として、水、エタノール、酢酸エチル、シクロ
   ヘキサノンが使用される、上記第１項に記載の方法。 ４ 溶離液として、浸透圧の形成用と同じ物質溶液が使
   用される、上記第１項に記載の方法。 ５ 物質溶液の一定濃度が、上記溶液を固相の同じ物質
   と接触させることにより維持され、物質溶液が溶剤の氷
   点以上の温度でサーモスタットにより調節される、上記
   第１項に記載の方法。 ６ 液体クロマトグラフの溶離液の流れを生じさせるた
   めの装置において、クロマトグラフカラムに通じる出口
   をもち、溶離液４の入つた可変性容積５を含む堅固なコ
   ンテナー３と；二つの容器８及び１２と、それら二つの
   容器を分離する半透膜１０と、該半透膜を支持する、基
   体１４とからなる浸透セル（圧力源）２；とからなり、
   然も前記容器１２は溶剤１１で満され、前記容器８は前
   記コンテナー３と連通し、前記溶剤に溶解する物質の溶
   剤に溶けた飽和溶液で満たされており、該飽和溶液は同
   じ容器８中に入れられた固体状の該物９と接触しており
   、更に該飽和溶液は可動性不透過性隔壁６を介して前記
   可変性容５と接触している溶離液の流れを生じさせる装
   置。 ７ 上記浸透系において、基体が設けられ、そして上記
   半透膜が溶剤流に対向する上記基体の側から上記基体表
   面に配置される、上記第６項に記載の装置。 ８ 半透膜として、酢酸セルロース、ポリスルホン酸、
   ポリイミドおよびアクリロニトリル膜を有する、上記第
   ６項に記載の装置。 ９ 少なくとも二つの装置１（第２図）からなる液体ク
   ロマトグラフの溶離液の流れを生じさせるための装置に
   おいて、装置１の一つは；クロマトグラフカラムに通じ
   る出口をもち、溶離液の入つた可変性容積５を含む堅固
   なコンテナー３と；二つの容器８及び１２と、それら二
   つの容器を分離する半透膜と、該半透膜を支持する基体
   １４とからなる浸透セル（圧力源）２；とからなり、然
   も前記容器１２は溶剤１１で満たされ、前記容器８は前
   記コンテナー３と連通し、前記溶剤に溶解する物質９の
   前記溶剤に溶けた飽和溶液で満たされており、前記飽和
   溶液は同じ容器８中に入れられた固体状の前記物質９と
   接触しており、更に前記飽和溶液は可動性不透過性隔壁
   ６を介して前記可変性容積５と接触しており、装置１の
   他の一つは；前の装置１の容器１２に通じる出口をもち
   、その容器１２中の溶剤と同じ溶剤の入つた可変性容積
   １６を含む堅固なコンテナー１５と；二つの容器１９及
   び２４と、それら二つの容器を分離する半透膜２１と、
   該半透膜を支持する基体２２とからなる浸透セル（圧力
   源）２；とからなり、然も該容器２４は溶剤２３で満た
   され、該容器１９は該コンテナー１５と連通し、該溶剤
   ２３に可溶性の物質２０のその溶剤に溶けた飽和溶液で
   満たされており、その飽和溶液は該容器１９中に入れら
   れた固体状の該物質２０と接触しており、更に該飽和溶
   液は可動性不透性隔壁１７を介して該可変性容積１６と
   接触しており、そしてもし必要なら、任意の数の装置１
   を同じやり方で前のものに連続的に接続されている、溶
   離液の流れを生じさせるための装置。