JPS60162954A - アスコルビン酸検出用試験片 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ■９発明の背景 皮亙±１ 本発明は、改良されたアスコルビン酸検出用試験片に関
するものである。

医薬や食品等によりアスコルビン酸を大量に摂取した場
合には尿中に７スコルビン酸が排出され、尿中のブドウ
糖や潜血等の検査に影響を与える。そこで予め尿中のア
スコルビン酸の検出試験を行ない、アスコルビン酸が存
在する場合には、その濃度に応じてブドウ糖や潜血のＩ
Ｙｌｌｌ定結宋を補正する必要がある。

本発明の試験片はこのような被検試料中のアスコルビン
酸検出に好適に使用される。

″１−社術および（７ｊ　点 従来、尿中のアスコルビン酸検出試験紙として、メチレ
ングリーンおよびニュートラルレッドを含有するもの、
２．６−シクロロフエノールインドフエノールナトリウ
ムおよびオレンジＩＩを含有するもの等が知られている
。前者の試験紙は試才４山の７スコルビン酸が２５〜１
５０ｍｇ／１００　ｍ立の濃度範囲にある場合に使用可
能であるが、２５〜７５ｍｇ／１００　ｍｌの濃度範囲
で呈色かみすらいという難点があり、また判定は正確に
６０秒後に行う必要があり、時間がかかる。また後者の
試験紙は試料中のアスコルビン酸が１０〜２０ｍｇ／１
００　ｍｌｊという低濃度の場合にしか測定できない。

ところが尿中に排出されるアスコルビン酸の濃度は、お
よそ１０〜１００ｍｇ／１００　ｍｌであり、またブド
ウ糖や潜血の検出試験に影響祭り・えるのもこの範囲で
ある。従って上述した従来の試験紙は尿中のアスコルビ
ン酸を検出するには必ずしも満足すべきものではなく、
より広範囲な濃度にわたって明瞭に９色するアスコル・
ビン酸検出用試験片の出現が望まれている。

ＴＩ　、発明の目的 本発明は被検試料中のアスコルビン酸を広い濃度範囲に
わたって検出可能なアスコルビン酸検出用試験片を提供
することを目的とする。

さらに本発明は、試料中のアスコルビン酸の濃度に対応
してあざやかに色が変化するアスコルビン酸検出用試験
片を提供することを目的とする。

かかる目的を達成するため、本発明は、２．６−シクロ
ロフエノールインドフエノールアルカリ金属（２５〜１
００ｍｇ／ｌｏ＋）ｍ、Ｑ）、メチルオレンジ（１０〜
５Ｑ＋ｎｇ／１００　ｍｌｊ　）および陽イオン界面活
性剤（０゜０１８〜０．２Ｍ／１００　ｍｉｌ　）を含
有するＡｎ液（１）Ｈ６，０〜８．０）に白色の吸湿相
持体用を浸漬し、乾燥したアスコルビン酸検出用試験片
からなる。

未発明において陽イオン界面活性剤としては、第４級ア
ンモニウム塩が適しており、就中、アルキルビジニウム
塩、特にセチルピリジニウム塩、アルキル第４級アンモ
ニウム塩、特にセチルトリメチルアンモニウム塩が好ま
しい。

また緩衝液としてはリン酸緩衝液が好ましい。

■３発明の詳細な説明 本発明のアスコルビン酸検出用試験片は、２．６−シク
ロロフエノールインドフエノールアルカリ金属、メチル
オレンジおよび陽イオン界面活性剤を含有する緩衝液に
白色の吸湿相持体用を浸漬し、乾燥したものである。

２．６−ジ・クロロフェノール・インドフェノールアル
カリ金属は指示薬とし使用され、アルカリ金属としては
すトリウム、カリウム等が適当である。緩衝液中の濃度
は２５〜ｉｏｏｍｇ／　ｌｏｏｍ　ＫＬが好ましい。メ
チルオレンジはバックグランドとして用いられ、アスコ
ルビン酸には不活性である。この化合物は本来オレンジ
色であるが、陽イオン界面活性剤と組合せて用いると波
長がシフトして黄色となる。しかし、オレンジＩＩを用
いた場合、波長はシフｌ−Ｌない。緩衝液中の濃度は１
０〜５０　ｍｇ／１００　ｍ文が好ましい。

陽イオン界面活性剤は被検試料が試験片に吸着ｙれるの
を助け、また呈色を円滑にかつ均一に行わしめる。陽イ
オン界面活性剤としては第４級アンモニウム塩が望まし
くその例として、セチルトリメチルアンモニウムブロマ
イド若しくはブロマイド、ステアリルトリメチルアンモ
ニウムクロライドのようなアルキル第４級アンモニウム
塩、ラウリルジメチルベンジルアンモニウムクロライド
、セチルジメチルベンジルアンモニウムクロライド、オ
クタデシルジメチルベンジルアンモニウムクロライドの
ようなアルキルベンジル第４級アンモニウム塩、ラウリ
ルピリジニウムクロライド若しくはブロマイド、セチル
ピリジニウムクロライド、ラウロイルコラミノフォルミ
ルメチルピリジニウムクロライド、ラウリルインキノリ
ニウムクロライドのような窒素環を含有する第４級アン
モニウム塩が挙げられる。特にセチルトリメチルアンモ
ニウムブロマイドのようなテトラアルキル第４級アンモ
ニウム塩、セチルピリジニウムクロライドのようなアル
キルピリジニウム塩が好適である。セチルトリメチルア
ンモニウムブロマイドは最も適当であり、これを用いた
試験片は、経時変化が少なく好ましい。

緩衝液中の陽イオン界面活性剤濃度は　（０，０ＩＭ〜
０．２Ｍ）　ｇ／１００ｍＭが好ましい。Ｏ，０１Ｍ以
下では、被検試料が試験片に吸着しない場合があり、ま
た０、２Ｍを越えると、指示薬の呈色性を悪くするから
である。

緩衝液としてはｐＨｆｉ、０〜９．０を有するリン酸、
クエン酸、炭酸等の緩衝液が使用され、特にＰＨ７。

５〜８．５のリン酸緩衝液が好ましい。それは、指示薬
である２、６−ジクロロフエノールインドフエノールア
ルカリ金属がアルカリ性側においてより安定だからであ
る。

本発明において使用される担持体片は上記緩衝液を含浸
させることができるように、吸湿性の材料からなること
が必要であり、また呈色を明瞭に観察できるように白色
であることが必要である。

担持体片の材料としては、ろ紙、フェルト、不織布、織
布、ガラス繊維の織布、多孔性セラミック岸等があげら
れる。

本発明の試験片は、それ自体公知の方法によって調製さ
れる。即ち、２．６−ジクロロフエノールインドフエノ
ールアルカリ金属、メチルオレンジおよび陽イオン界面
活性剤の所定量を緩衝液に溶解し得られた溶液に担持体
片を浸漬した後、該担持体片を約５０°Ｃで乾燥して調
製する。かくして得られる試験片は一般的貯蔵法で変色
することなく貯蔵することができる。

本発明の試験片は常法に従って使用される。即ち、本発
明の試験片を被験試料中に浸漬し、約３０秒後に呈色を
観察して試料中のアスコルビン酸の濃度を判定する。本
発明の試験片はアスコルビン酸濃度　θ〜　１５０ｍｇ
／１００　ｍ９．に対応して青緑色〜黄色に順次呈色す
る。感度は５ｍｇ／ＩＱθｍｆＬである。

次に実施例および試験例を示して本発明をさらに具体的
に説明する。

実施例１ 下記の組成を有する溶液を調製し、これにろ紙（ｌＯＸ
４００ｍｍ）を浸漬した後、５００Ｃで乾燥し、アスコ
ルビン酸検出用試験片を作成した。

２．６−ジクロロフェノール　５０　ｍｇインドフェノ
ールナトリウム 、メチルオレンジ　２０　ｍｇ セチルトリメチルアンモニウム　３．６ｇブロマイド リン酸緩衝液（ｐＨ８，０）　１００　ｍｌ実施例２ 下記の組成を右する溶液を調製し、実施例１と同様にし
てアスコルビン酸検出用試験片を作成した。

２．６−ジクロロフェノール　５０　ｍｇインドフェノ
ールナトリウム メチルオレンジ　２０　ｍｇ セチルピリジウムクロライド　３．５ｇリン酸緩衝液（
ｐ）１８．０）　１００　ｍｌ試験例 種々のアスコルビン酸濃度を含有する尿試料に上で得ら
れた試験片を浸漬し、３０秒後に呈色を観察した。

対照として下記の組成を有する溶液を含浸させた試験片
を作成し、同様にして呈色を観察した。

結果を表１に示す。

対照１ メチレングリーン　１５　ｍｇ ニュートラルレッド　５　ｍｇ リン酸緩衝液（ｐＨＥｉ、ｏ）　’　１００　ｍｌ対照
２ ２．６−ジクロロフェノール　３０　ｍｇインドフェノ
ールナトリウム オレンジＨ３０ｍｇ リン酸緩衝液（ｐＨ８，０）　１００　ｍｌ（以下余白
） ０ 表１から明らかなように、本発明の試験片は１０〜１５
０ｍｇ／１００　ｍ見の濃度範囲にわたって明瞭な呈色
反応を示すのに対して、対照１の試験片は色の変化が判
定しにくい。また、対照２の試験片は１０〜２０ｍｇ／
１００　ｍ交の濃度範囲しか測定できない。

次に、実施例１および２の試験片の経時変化を調べたと
ころ実施例１の試験片は、３７°Ｃのオーブン中におい
て５週間安定であった。実施例２の試験片は、３７℃の
オーブン中において１週間安定であった。

■１発明の作用効果 本発明のアスコルビン酸検出用試験片は２．６−シクロ
ロフエノールインドフエノールアルカリ金属（２５−１
００ｍｇ／１００　ｍｌ　）　、メチルオレンジ（１０
〜５０ｍｇ／１００　ｍ！ｌ　）および陽イオン界面活
性剤（０，０１に〜０．２Ｍ　／１００　ｍｌ）を含有
中る緩衝液（ｐＨ６，０〜９．０）に白色の吸湿担持体
片を浸漬し、乾燥してなり試料中のアスコルビン酸を　
５〜１５０ｍｇ／　１００　ｍ　ｆｌの濃度範囲にわた
って測定することができる。このように本発明の試験片
は従来の２ 試験片に比較して、検出可能なアスコルビン酸の濃度範
囲が広く、アスコルビン酸が尿中に排出される濃度およ
び尿中のブドウ糖、潜血検査に影響を与える濃度を全て
包含している。

さらに本発明において、陽イオン界面活性剤としてアル
キルピリジニウム塩またはアルキル第４級アンモニウム
塩を用いるとメチルオレンジの波長がシフトして黄色に
変わり、試料中のアスコルビン酸濃度５〜１５０ｍｇ／
１００ｍ文に対応して青緑色〜黄色に段階的に変化して
呈色し、濃度測定が容易である。

さらに本発明において陽・イオン界面活性剤としてセチ
ルトリメチルアンモニウム塩を用いると経時変化の少な
い安定なアスコルビン酸検出用試験片が得られる。

特許出願人　チル七株式会社

Claims (7)

【特許請求の範囲】
1. （１）２．６−シクロロフエノールインドフエノールア
   ルカリ金属（２５〜１００　ｍｇ／１００　ｍｌ　）　
   、メ壬ルオレンジ（１０〜５０　ｍｇ／１００　ｍ文）
   および゛陽イオン界面活性剤（０，ＯＩＭ　〜０．２Ｍ
   　／１００　ｍす）を含有する緩衝培（ｐＨ１３，０〜
   ９．０）に白色の吸湿担持他片を浸漬し、乾燥してなる
   アスコルビン酸検出用試験片。
2. （２）陽イオン界面活性剤が第４級アンモニウム塩であ
   る特許請求の範囲第１項に記載のアスコルビン酸検出用
   試験片。
3. （３）８４級アンモニウム塩がアルキルピリジニウム塩
   である特許請求の範囲第２項に記載のアスコルビン酸検
   出用試験片。
4. （４）アルキルピリジニウム塩がセチルピリジニウム塩
   である特許請求の範囲第３項に記載のアスコルビン酸検
   出用試験片。
5. （５）第４級アンモニウム塩がアルキル第４級アンモニ
   ウム塩である特許請求の範囲第２項に記載のアスコルビ
   ン酸検出用試験片。
6. （６）アルキル第４級アンモニウム塩がセチルトリノチ
   ルアンモニウム塩である特許請求の範囲第５項に記載の
   アスコルビン酸検出用試験片。
7. （７）＃衝液がリン酸緩衝液である特許請求の範囲第１
   項乃至第６項のいずれかの項に記載のアスコルビン酸検
   出用試験片。