JPS60224062A - アミノ酸の分析方法 - Google Patents
アミノ酸の分析方法Info
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- JPS60224062A JPS60224062A JP8006984A JP8006984A JPS60224062A JP S60224062 A JPS60224062 A JP S60224062A JP 8006984 A JP8006984 A JP 8006984A JP 8006984 A JP8006984 A JP 8006984A JP S60224062 A JPS60224062 A JP S60224062A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
〔発明の利用分野〕
本発明はアミノ酸の分析方法に係シ、特に液体り日マド
グラフィーを通用して蛍光強度を測定するようなアミノ
酸分析方法に関する。
グラフィーを通用して蛍光強度を測定するようなアミノ
酸分析方法に関する。
古くから行われている液体クロマトグラフィーによるア
ミノ酸の分析方法は、緩衝液を溶離液としてイオン交換
カラムを用いて成分分離し、溶出液に連続的にニンヒド
リン発色試薬を加えて発色させ、しかるのち、吸光度を
測定するものである。
ミノ酸の分析方法は、緩衝液を溶離液としてイオン交換
カラムを用いて成分分離し、溶出液に連続的にニンヒド
リン発色試薬を加えて発色させ、しかるのち、吸光度を
測定するものである。
しかし、試料の微賛化、それに伴う高感度検出の必要性
から、近年蛍光性試薬の開発や応用法の検討がなされて
きた。その中でも、オルトフタルアルデヒド（ＯＰＡ）
は、安価な点から広く利用されてきている。ＯＰＡによ
る反応は、アルカリ性液中で効率よく反応し、そのｐＨ
は約１０付近が良好である。
から、近年蛍光性試薬の開発や応用法の検討がなされて
きた。その中でも、オルトフタルアルデヒド（ＯＰＡ）
は、安価な点から広く利用されてきている。ＯＰＡによ
る反応は、アルカリ性液中で効率よく反応し、そのｐＨ
は約１０付近が良好である。
このような蛍光法による従来の方法でアミノ酸混合試料
を分析した結果を第１図に示す。この試料にはハイドロ
オキシプロリン（ＨＹＰ）およびプロリン（ｐ′ｆＬｏ
）が含まれるが、第１図のクロマトグラムではｅ′ヨと
んど検出されていない。この従来の分析方法では、酸化
剤として次亜塩素酸ナトリウムを用い、蛍光性生成物の
生成反応時の水素イオン濃ｅ （ｐ Ｈ）調整のために
ホウ酸ナトリウム緩衝液を用いている。従来法では、酸
化剤の調製後の保存寿命が短いこと、反応時のｐＨ値の
安定性が悪いこと等の問題もあった。
を分析した結果を第１図に示す。この試料にはハイドロ
オキシプロリン（ＨＹＰ）およびプロリン（ｐ′ｆＬｏ
）が含まれるが、第１図のクロマトグラムではｅ′ヨと
んど検出されていない。この従来の分析方法では、酸化
剤として次亜塩素酸ナトリウムを用い、蛍光性生成物の
生成反応時の水素イオン濃ｅ （ｐ Ｈ）調整のために
ホウ酸ナトリウム緩衝液を用いている。従来法では、酸
化剤の調製後の保存寿命が短いこと、反応時のｐＨ値の
安定性が悪いこと等の問題もあった。
本発明の目的は、プロリンおよびハイドロオキシプロリ
ンを蛍光測定法によって高感度に検出できるアミノ酸分
析方法を提供することにある。
ンを蛍光測定法によって高感度に検出できるアミノ酸分
析方法を提供することにある。
本発明は、酸化剤としてパラトルエンスルホンクロロア
ミド塩を分離カラムからの溶出液に加えて、プロリンお
よびハイドロオキシプロリンに酸化作用をもたらしてイ
ミノ酸を開環せしめて蛍光試薬との間で蛍光性生成物を
生成しゃすくするとともに、パラトルエンスルホンクロ
ロアミド塩ニよる他のアミノ酸成分への酸化作用を抑制
するために溶離液にβ−チオジグリコールを含有させ、
もって、各アミノ酸成分を高感度検出するもので〔発明
の実施例〕 第２図を参照して、本発明の−Ｓ＝例の概略構成を説明
する。
ミド塩を分離カラムからの溶出液に加えて、プロリンお
よびハイドロオキシプロリンに酸化作用をもたらしてイ
ミノ酸を開環せしめて蛍光試薬との間で蛍光性生成物を
生成しゃすくするとともに、パラトルエンスルホンクロ
ロアミド塩ニよる他のアミノ酸成分への酸化作用を抑制
するために溶離液にβ−チオジグリコールを含有させ、
もって、各アミノ酸成分を高感度検出するもので〔発明
の実施例〕 第２図を参照して、本発明の−Ｓ＝例の概略構成を説明
する。
第１の溶離液槽１および第２の溶離液槽２には異なる組
成の溶離液が収容されているが、いずれの溶離液にもβ
−チオグリコールが０．１％の濃度となるように含有さ
れている。グラジェントコントローラ６は両ｍ離液の混
合比を自動的に調節するもので、従来から用いられてい
る構成でりる。
成の溶離液が収容されているが、いずれの溶離液にもβ
−チオグリコールが０．１％の濃度となるように含有さ
れている。グラジェントコントローラ６は両ｍ離液の混
合比を自動的に調節するもので、従来から用いられてい
る構成でりる。
グラジェントコントローラ６は再生液槽３からの再生液
を、試料成分分離後に分離カラム１ｏへ供給することが
できる。単−溶離液又は混合溶離液はサンプラ９を介し
て分離カラム１ｏの方へ、送液ポンプ７によってＱ、
４ ｍｌ ／ｍｉｎの流量で送られる。
を、試料成分分離後に分離カラム１ｏへ供給することが
できる。単−溶離液又は混合溶離液はサンプラ９を介し
て分離カラム１ｏの方へ、送液ポンプ７によってＱ、
４ ｍｌ ／ｍｉｎの流量で送られる。
分離カラム１０は、内径４喘、長さ１５０ｍｍの円筒状
で、外套（ジャケット）を有しておシ、このジャケット
には流路１シを介して循環恒温槽１６からの温水が循環
され、６０ｃに保温される。
で、外套（ジャケット）を有しておシ、このジャケット
には流路１シを介して循環恒温槽１６からの温水が循環
され、６０ｃに保温される。
この分離カラム１０内には、強酸性陽イオン交換樹脂（
スチレンジビニルベンゼン共重合体）が充填さ扛ており
、サンプラ９から導入されたアミノ酸混合物試料は分離
カラム１０によって成分分離され、１唄次浴出される。
スチレンジビニルベンゼン共重合体）が充填さ扛ており
、サンプラ９から導入されたアミノ酸混合物試料は分離
カラム１０によって成分分離され、１唄次浴出される。
分離カラム１０からの溶出液は、ミキサ１１、反応部２
１、反応部２２全経て蛍光検出器１７へ至９、その後ド
レイン１８へ排出される。酸化用反応液槽４内に収容さ
れて６るｐ−トルエンスルフォンクロロアミドナトリウ
ム（クロラミン’ｆ ）を含有する炭酸塩緩衝液は、送
液ポンプ８Ａによってミキサ１１へ、０．４ ｍｌ ／
ｍｒｎの流量で送液され、カラム浴出液と混合される。
１、反応部２２全経て蛍光検出器１７へ至９、その後ド
レイン１８へ排出される。酸化用反応液槽４内に収容さ
れて６るｐ−トルエンスルフォンクロロアミドナトリウ
ム（クロラミン’ｆ ）を含有する炭酸塩緩衝液は、送
液ポンプ８Ａによってミキサ１１へ、０．４ ｍｌ ／
ｍｒｎの流量で送液され、カラム浴出液と混合される。
これによりアミノ酸成分の酸化が開始される。反応部２
１は反応チューブ１２とジャケットを有しておシ、ジャ
ケットには循環恒温槽からの温水（６ＯＣ）が流通され
る。反応チューブ１２は弗素樹脂（四弗化エチレン）製
であり、内径が０．２５ｍｍ、長さが１０メートルであ
る。
１は反応チューブ１２とジャケットを有しておシ、ジャ
ケットには循環恒温槽からの温水（６ＯＣ）が流通され
る。反応チューブ１２は弗素樹脂（四弗化エチレン）製
であり、内径が０．２５ｍｍ、長さが１０メートルであ
る。
反応部２１を出た液は、ミキサ１３を介して反応部２２
へ流れる。ミキサ１３では送液ポンプ８Ｂによって反応
液槽５内の蛍光性反応液が、ｏ、４ｍｇ／ｍｉｎの流量
で混入される。反応部２２の反応チューブ１４内では、
オルトフタルアルデヒド（ＯＰＡ）と２−メルカプトエ
タノールとα−アミノ酸との反応によって、蛍光性生成
物が生成される。反応チューブ１４の内径は０．２５ｍ
＋ｎ、長さ５メートルであり、その外周囲はジャケット
で被覆され、６０Ｃに保温されている。
へ流れる。ミキサ１３では送液ポンプ８Ｂによって反応
液槽５内の蛍光性反応液が、ｏ、４ｍｇ／ｍｉｎの流量
で混入される。反応部２２の反応チューブ１４内では、
オルトフタルアルデヒド（ＯＰＡ）と２−メルカプトエ
タノールとα−アミノ酸との反応によって、蛍光性生成
物が生成される。反応チューブ１４の内径は０．２５ｍ
＋ｎ、長さ５メートルであり、その外周囲はジャケット
で被覆され、６０Ｃに保温されている。
蛍光性反応生成物は、フローセルを有する蛍光光度計１
７で測定され１，６アミノ構成分のクロマトグラムが、
レコーダ又はデータプロセッサなどの記録器１９に表示
される。蛍光光度計１７は光学フィルタによって励起光
および蛍光を単色光する構成であるが、回折格子などの
分散子を備えた光度計を用いることもできる。フローセ
ルへ照射する励起光の波長は３（３９Ｈｍが好ましく、
フローセルからの蛍光の検出波長は４４０ｎｍが好まし
い。
７で測定され１，６アミノ構成分のクロマトグラムが、
レコーダ又はデータプロセッサなどの記録器１９に表示
される。蛍光光度計１７は光学フィルタによって励起光
および蛍光を単色光する構成であるが、回折格子などの
分散子を備えた光度計を用いることもできる。フローセ
ルへ照射する励起光の波長は３（３９Ｈｍが好ましく、
フローセルからの蛍光の検出波長は４４０ｎｍが好まし
い。
第１図の実施クリに用いた第１溶離液および第２溶陥液
の組成例を表１に示す。
の組成例を表１に示す。
表 １
なお、再生液は、水酸化す） ＩＪウムをｓ、ｏｙとカ
プリル酸０．１−とを、水に溶解混合して全量を１ｔに
調製したものを用いる。すべての溶離液にβ−チオジグ
リコールを含有することによって、クロ〉ミンＴが共存
するときのプロリンおよヒハイドロオキシブロリン以外
のアミノ酸成分が酸化分解されるのを抑制することがで
きる。クロラミンＴはβ−チオジグリコール（０，１％
）の存在下でもプロリンおよびオキシプロリンを有効に
酸化してイミノ基を開環せしめ一級アミンへ転化させる
ことができる。
プリル酸０．１−とを、水に溶解混合して全量を１ｔに
調製したものを用いる。すべての溶離液にβ−チオジグ
リコールを含有することによって、クロ〉ミンＴが共存
するときのプロリンおよヒハイドロオキシブロリン以外
のアミノ酸成分が酸化分解されるのを抑制することがで
きる。クロラミンＴはβ−チオジグリコール（０，１％
）の存在下でもプロリンおよびオキシプロリンを有効に
酸化してイミノ基を開環せしめ一級アミンへ転化させる
ことができる。
反応液槽４に収容される酸化用反応液は、クロラミンＴ
を５．６３ ｆ／と、２０％のポリオキシエチレンラウ
リルアルコール液を１０ｍ７！と、炭酸ナトリウムをｐ
Ｈ１０，５となるように混合し、全量が２ｔの水浴液と
なるように調製される。この酸化用反応液は、１０ｍＭ
クロラミンＴと０．１％ポリオキシエチレンラウリルア
ルコールを含む炭酸塩緩衝液（０，５Ｍ ）を形成して
いる。炭酸塩としてはナトリウム塩以外にカリウム塩も
用い得る。
を５．６３ ｆ／と、２０％のポリオキシエチレンラウ
リルアルコール液を１０ｍ７！と、炭酸ナトリウムをｐ
Ｈ１０，５となるように混合し、全量が２ｔの水浴液と
なるように調製される。この酸化用反応液は、１０ｍＭ
クロラミンＴと０．１％ポリオキシエチレンラウリルア
ルコールを含む炭酸塩緩衝液（０，５Ｍ ）を形成して
いる。炭酸塩としてはナトリウム塩以外にカリウム塩も
用い得る。
なお、溶離液中のβ−チオジグリコール濃度と反応液中
のクロラミンＴ濃度の関係について発明者らが実験した
ところによれば、β−チオジグリコールを含まない溶離
液と０．５ｍＭクロラミンＴ液との組合せでは、プロリ
ンの開環反応が不充分であシ、検量線の直線性が悪かっ
た。また、β−チオジグリコール０．０１％と５ｍＭク
ロラミンＴとの組合せでは、クロラミンＴに対する抑制
効果が不充分であった。さらに、β−チオジグリコール
０．１％とｉｏｍＭクロラミンＴとの組合せでは、安定
した測定が可能になった。
のクロラミンＴ濃度の関係について発明者らが実験した
ところによれば、β−チオジグリコールを含まない溶離
液と０．５ｍＭクロラミンＴ液との組合せでは、プロリ
ンの開環反応が不充分であシ、検量線の直線性が悪かっ
た。また、β−チオジグリコール０．０１％と５ｍＭク
ロラミンＴとの組合せでは、クロラミンＴに対する抑制
効果が不充分であった。さらに、β−チオジグリコール
０．１％とｉｏｍＭクロラミンＴとの組合せでは、安定
した測定が可能になった。
第３図は、本発明に基づ＜１０ｍＭクロラミンＴを含む
炭酸塩緩衝液３１と、従来の次亜塩素酸ナトリウムを含
むホウ酸緩衝液３３との酸化剤としての安定性を比較し
たデータである。各溶液はチオ硫酸ナトリウム水溶液に
よシ有効塩素を滴定し、縦軸に表示した。調製直後の有
効塩素濃度を相対濃度の１０としである。本発明に基づ
く酸化剤は長期間にわたって安定であることが理解され
−る。
炭酸塩緩衝液３１と、従来の次亜塩素酸ナトリウムを含
むホウ酸緩衝液３３との酸化剤としての安定性を比較し
たデータである。各溶液はチオ硫酸ナトリウム水溶液に
よシ有効塩素を滴定し、縦軸に表示した。調製直後の有
効塩素濃度を相対濃度の１０としである。本発明に基づ
く酸化剤は長期間にわたって安定であることが理解され
−る。
反応槽５に収容され、ミキサ１３に連続的に供給される
蛍光反応用反応液は、０ＰＡ１．６ｇと、２−メルカプ
トエタノール４ｍｌと、２０％のポリオキシエチレンラ
ウリルアルコール液を１０ｍ１と、炭酸ナトリウムをｐ
Ｈ，１０，５となるように含有せし″めて全量が２ｔ
の水溶液となる。ように調製される。この反応液は、０
．０８％ＯＰＡと０．２％２−メルカプトエタノールを
含む、炭酸塩緩衝液（０，５Ｍ）を形成している。
蛍光反応用反応液は、０ＰＡ１．６ｇと、２−メルカプ
トエタノール４ｍｌと、２０％のポリオキシエチレンラ
ウリルアルコール液を１０ｍ１と、炭酸ナトリウムをｐ
Ｈ，１０，５となるように含有せし″めて全量が２ｔ
の水溶液となる。ように調製される。この反応液は、０
．０８％ＯＰＡと０．２％２−メルカプトエタノールを
含む、炭酸塩緩衝液（０，５Ｍ）を形成している。
第４図は、本発明に基づ＜０．５Ｍ炭酸塩緩衝液に第１
溶離＄４１又は第２溶離液４２を混合した場合と、従来
の０．３Ｍホウ酸緩衝液に第１溶離液４３又は第２溶離
液４４を混合した場合との、緩爾液としてのｐＨの安定
性を比較したデータである。反応の最適ｐＨは１０付近
にある。第２図の実施例のように、反応部２１では溶離
液の混合割合が５０％で、反応部２２では溶離液の混合
割合が３３％となることを想定した場合、本発明によれ
ばｐＨが１０±０．５以内に保ち侍るのに対し、従来法
によれば、ｐＨが９゜５以下になってしまい安定性に欠
ける。この結果から理解されるように、炭酸塩緩衝液を
用いれば、安定に反応を促進できるから測定結果の再現
性が向上される。
溶離＄４１又は第２溶離液４２を混合した場合と、従来
の０．３Ｍホウ酸緩衝液に第１溶離液４３又は第２溶離
液４４を混合した場合との、緩爾液としてのｐＨの安定
性を比較したデータである。反応の最適ｐＨは１０付近
にある。第２図の実施例のように、反応部２１では溶離
液の混合割合が５０％で、反応部２２では溶離液の混合
割合が３３％となることを想定した場合、本発明によれ
ばｐＨが１０±０．５以内に保ち侍るのに対し、従来法
によれば、ｐＨが９゜５以下になってしまい安定性に欠
ける。この結果から理解されるように、炭酸塩緩衝液を
用いれば、安定に反応を促進できるから測定結果の再現
性が向上される。
第５図には、本発明に基づくすべての試薬を再調製せず
に、連続して長期間使用したときのアミノ酸成分の測定
蛍光強度の経口変化をプロットした図葡示す。アミノ酸
成分としては、プロリン５１およびメチオニン５２を表
示しである。全試薬は同時に調製したものを用い、各日
とも３回の測定データの平均を示した。調製２日後の測
定値紫、相対蛍光強度の１０．０として各データを示し
た。
に、連続して長期間使用したときのアミノ酸成分の測定
蛍光強度の経口変化をプロットした図葡示す。アミノ酸
成分としては、プロリン５１およびメチオニン５２を表
示しである。全試薬は同時に調製したものを用い、各日
とも３回の測定データの平均を示した。調製２日後の測
定値紫、相対蛍光強度の１０．０として各データを示し
た。
第６図は、第２図の実施例によって第１図に示したもの
と同一の試料について得たクロマトグラムである。第１
図の従来法によってはほとんど検出で＠なかったプロリ
ン（ＰルＯ）およびハイドロオキシプロリン（ＨＹＰ）
を慣用することができる。ちなみに、このアミノ酸混付
物試料には、プロリンが４００ ｐｍｏｔおよびハイド
ロオキシブＯＩＪンが２００ｐｍｏｔ＠まれてお９、各
溶離液中にはβ−チオジグリコールが０．１％（’Ｖ／
’Ｖ）含まれ、酸化用反応液中には１０ｍＭクロラミン
Ｔが含まれている。
と同一の試料について得たクロマトグラムである。第１
図の従来法によってはほとんど検出で＠なかったプロリ
ン（ＰルＯ）およびハイドロオキシプロリン（ＨＹＰ）
を慣用することができる。ちなみに、このアミノ酸混付
物試料には、プロリンが４００ ｐｍｏｔおよびハイド
ロオキシブＯＩＪンが２００ｐｍｏｔ＠まれてお９、各
溶離液中にはβ−チオジグリコールが０．１％（’Ｖ／
’Ｖ）含まれ、酸化用反応液中には１０ｍＭクロラミン
Ｔが含まれている。
本発明によれば、アミノ酸混合物試料を液体クロマトグ
ラフィーと蛍光測定法との組合せによって測定する場合
に、プロリンおよびハイドロオキシプロリンを高感度に
検出できるので、その効果は甚大である。
ラフィーと蛍光測定法との組合せによって測定する場合
に、プロリンおよびハイドロオキシプロリンを高感度に
検出できるので、その効果は甚大である。
第１図は従来法によるアミノ酸混合物試料のクロマトグ
ラム例を示す図、第２図は本発明の一実施例の概略構成
を示す図、第３図は本発明に適用したものと従来法のも
のとの酸化剤の安定性を比較した図、第４図は緩衝液に
よるｐＨの安定性を比較した図、第５図は全試薬を継続
して用いたときの蛍光強度の経日変化を示す図、第６図
は第１図のものと同一試料についての本発明を適用して
得られたクロマトグラム例を示す図である。 １．２・・・溶離液槽、４・・・酸化用反応液槽、５・
・・蛍光反応試薬液槽、１０・・・分離カラム、１１．
１３・・・ミキサ、１７・・・蛍光光度計、２１．２２
・・・反応部。 代理人 弁理士 高橋明夫 ｔｒａ Ｉチ〃 １２ 図 χ３ 図 調製ｆ斐／ｌ羊杢狙ｇ奇閤 （Ｂ） ＃ｐ、／）漣小、／ｊｔｊ合イ％す ｆ５ 図
ラム例を示す図、第２図は本発明の一実施例の概略構成
を示す図、第３図は本発明に適用したものと従来法のも
のとの酸化剤の安定性を比較した図、第４図は緩衝液に
よるｐＨの安定性を比較した図、第５図は全試薬を継続
して用いたときの蛍光強度の経日変化を示す図、第６図
は第１図のものと同一試料についての本発明を適用して
得られたクロマトグラム例を示す図である。 １．２・・・溶離液槽、４・・・酸化用反応液槽、５・
・・蛍光反応試薬液槽、１０・・・分離カラム、１１．
１３・・・ミキサ、１７・・・蛍光光度計、２１．２２
・・・反応部。 代理人 弁理士 高橋明夫 ｔｒａ Ｉチ〃 １２ 図 χ３ 図 調製ｆ斐／ｌ羊杢狙ｇ奇閤 （Ｂ） ＃ｐ、／）漣小、／ｊｔｊ合イ％す ｆ５ 図
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 、 （ａ）分離カラムに導入したアミノ酸成分を含
む試料を、最終溶出成分に至るまでβ−チオジグリコー
ルを含む溶離液を用いて成分分離すること、（ｂ）上記
分離カラムから溶出した液にパラトルエンスルホンクロ
ロアミド塩を含む液を加えること、（Ｃ）上記溶出液に
、アミノ酸成分との間で蛍光性生成物をもたらす試薬を
加えること、（ｄ）上記蛍光性生成物に基づく蛍光強度
を測定すること、を含むことを特徴とするアミノ酸の分
析方法。 ２、特許請求の範囲第１項記載の方法において、上記パ
ラトルエンスルホンクロロアミド塩および上記蛍光性生
ｍ物をもたらす試薬は、炭酸塩緩衝液に含まれるもので
あることを特徴とするアミノ酸の分析方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8006984A JPS60224062A (ja) | 1984-04-23 | 1984-04-23 | アミノ酸の分析方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP8006984A JPS60224062A (ja) | 1984-04-23 | 1984-04-23 | アミノ酸の分析方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60224062A true JPS60224062A (ja) | 1985-11-08 |
| JPH0310076B2 JPH0310076B2 (ja) | 1991-02-12 |
Family
ID=13707934
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP8006984A Granted JPS60224062A (ja) | 1984-04-23 | 1984-04-23 | アミノ酸の分析方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60224062A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101975832A (zh) * | 2010-11-25 | 2011-02-16 | 中国检验检疫科学研究院 | 高效液相色谱法检测化妆品中氯胺t的方法 |
| CN105929044A (zh) * | 2016-04-14 | 2016-09-07 | 宁波出入境检验检疫局检验检疫技术中心 | 一种快速检测乳及乳制品中羟脯氨酸含量的方法 |
| US20200217826A1 (en) * | 2018-12-26 | 2020-07-09 | National University Corporation Saitama University | Method for amino acid analysis and system for amino acid analysis |
-
1984
- 1984-04-23 JP JP8006984A patent/JPS60224062A/ja active Granted
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101975832A (zh) * | 2010-11-25 | 2011-02-16 | 中国检验检疫科学研究院 | 高效液相色谱法检测化妆品中氯胺t的方法 |
| CN101975832B (zh) | 2010-11-25 | 2012-09-05 | 中国检验检疫科学研究院 | 高效液相色谱法检测化妆品中氯胺t的方法 |
| CN105929044A (zh) * | 2016-04-14 | 2016-09-07 | 宁波出入境检验检疫局检验检疫技术中心 | 一种快速检测乳及乳制品中羟脯氨酸含量的方法 |
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| JPH0310076B2 (ja) | 1991-02-12 |
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