JPS6025995A - オリゴ糖を含む新規生成物、その製法並びに生物学的及び生化学的使用 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はオリゴ糖を含む新規生成物に係る。これらオリ
ゴ砧は抗トロンビンＩＩＩ（ＡＴｌｎ）に対して大きな
親和性を示し且つ抗Ｘａ特異活性が高い。

本発明は更に前記生成物の製法と生物学的及び生化学的
使用とにも係る。

これらＵ３４体のオリゴ糖はヘパリン又はヘパラン−硫
酸塩タイプの生物学的活性を示ず誘尋体の系列に９洩れ
る酸性ムコ多糖類の構造を有する１；り惟ムコ多糖の断
片に該当するか又はとｔＬら断片を含む。

この種のムコ多糖はこれら天然物中において、アミノ糖
−ウロン酸又はウロン面−アミノ糖の如く父互に配置さ
れたモチーフで構成されている。

以後符号ａで示されるアミノ糖はよシ竹定的にはＤ−グ
ルコザミンｈ′ｒ造を有し、以後符号Ｕで示されるウロ
ンＱはＤ−グルクロン駿タイゾの４ｉｊ；Ｘ’ｉｂ又は
Ｌ−イズロン酸タイプの（Ｉ・１造Ｃを有する。

これらａ、ｂ及びＣの基本構造は次の通りでろる。

（ａ）　Ｄ　−クルコザミン　（ｂ）Ｄ−クルクロン酸
これら種々のモチーフは天然物中で互に立体性異的に結
合し合っておυ、例えばへ・３リンには■　ａ　４（モ
チーフＣ及び８間、・及びｂ　ｌ＋１　’ｒ−ｆ。

β びに舊及び６間）タイプの結合と、１４（モチーフｂ及
び８間）タイプの結合とが見らＪｚる。

問題のオリゴ糖は、本出順人により開発さノア、且つ１
９８２年１０月２７日付仏国特許出願第８２１８００３
号に開示された有機的合成法によシ、現在では所望の連
（ｒＨ′１、イで４造及び盾換に応じ且つへめで純粋な
形状で［１・ｉ単に製造することができる。

その結果生物学的活性をもつ分子断片の活性と構造との
関係もより明らかになった。

へ／ξミリンびその椋）・の断片は数種の凝血（１１進
往ゾロデアーゼをこれらプロテアーゼが固定されるＡ′
ｒｌｌｌの活性を増強させることにより本質的に抑制す
ることが知られている。

種々の研究を行った結果本発明者６．Ｊ：、’ＡＴｌｌ
ｌへの固定に必要な最小のオリゴ糖配列は基本（；ｖ造
に関してはａ−ｂ−ａ−ｃ−Ａタイプの連句に該当する
５個の砧モチーフからなる配列で（ｌＫ成されていると
考えるに致っだ。

この種の五砧類をより深く研究した結果、該五ｇ’、’
５　ＯＡは血液凝固因子Ｘａに対するＡＴＩｌｌの抑：
ｌ＋：Ｉ　ｌ’ｉてｉ性を！ｎｖｊｔｒｏ及びｉｎ　ｖ
ｌｖｏで向上させることが判明した。全体的抗凝血活性
はゼロでちった。（抗Ｘａ活性の測定はＪ　Ｌｎｈ、　
Ｃｌ１ｎ、　Ａｔ＋ｄ、　（１９７６年）　、　８１．
２９８−３００に記載のＹｊｎ及びＷａＳ！１ｌｅｒの
方法と、ＴｈｒｃｎｎｂｏｓＩＱＲａ＋＋ｅａｒｃｌ＋
　Ｎｏ、　１０　（１，９７７年）　、　３８８−４１
０に記載の１’ｃ：ａｎによる前記方法の変形とに従っ
て実施した）。全体的抗凝血活性はＵＳ　Ｐｈａｒｍａ
ｃｏｐ、ｅａ　ＸＸ　ｐ、９１５に記載のＵＳＰテスト
を用いて仰１定した。

その結果本発明者は大きな抗Ｘａ特異活性をもつオリゴ
糖のＡ　Ｔ　Ｉｌｌに対する親和ｆｉｔを利用すればと
の活性を更に増大させ得ることを確信するに致った。

以上の理由から本発明はＡ　Ｔ　Ｉｌｌに対して強い親
和性を示し且つ抗Ｘａ特異活性が大きいオリゴ結を含む
新規生成物を提供する。

本発す］はまた前記生成物を容易に製造せしめる製法も
提供する。

本発明は更にこれら生成物の生物学的及び生化学的使用
、特に坑血枠症活性ケもつ桑剤の製造におけるこれら生
成物の大きな抗Ｘａ特異活性の利用にも係る。

本発明の生成物の特ｔ′ｊ、（ｌ−ｉモチーフａ及びＵ
を５乃至１２個含むオリゴわとＡＴＩとのコンプレック
スであることにある。

ａはＤ−グルコザミンタイプのアミノｒｉ２　ｔｊ’）
　Ａ’−ｒを表わし、ＵはＤ−グルクロン猷タイプｂも
しく（弓、Ｌ−イズロンはタイプＣのウロンに：’、’
Ｊ＋１な造を表わ（２、これらモチーフａ及びＵは次の
群より選択された規則的な鎖を４’＋”；成する： Ｕ（ａＵ）ｎｚ　（ａＵ）ｎａｌ（Ｕａ）ｍＭｒ′（ａ
Ｕ）、ｎ尚４　（ｎ　（１１，３（ｍ（６である。

これらのコンプレックスはＡＴｍに対する所Ｊｉのオリ
ゴ結の親和性をオ０用するだけで得られる。

こり、らのコンプレックスは可逆的であってこれらを支
配する条件に応じて解バ１を及び杓会合しイ：Ｊ、その
点で不可逆的な化学的共有結合を伴う共役体の如き誘導
体と異なる。

本発明のコンプレックスは抗Ｘａ特異活性がかな夛大き
く、そのため抗血栓症活性の高い生成物が得られる。

一変形例では交互に規則的に配置したモチーフａ及びＵ
の配列を１つ以上のモチーフａもしくはＵ及び／又は１
つ以上の中性糖モチーフ及び／又はデオキシ−糖及び／
又は異なる構造の糖を続けて配置することによシ変化さ
せる。

本発明の好ましいコンプレックスは全体的又は部分的に
ｂ−ａ−ｃ−ａ−ｂ−ａ−ｃ−ａタイプの八潮類配列を
含むか又はこれに該当するオリゴ糖を含む。

この配列では第１アルコール基及び第２アルコール基が
遊離状態におル得る。その変形として、これらアルコー
ル基の一部又は全てを無機又は有機アニオンで置換して
もよい。

リン酸塩アニオン、より好ましくは硫１費塩アニオンは
特に好ましく、管に無機又は有械カチオンとの塩の形状
であるとよい。前記力テメーンとしては特にアルカリ性
カチオンの如き無機カチオンか又はトリエチルアンモニ
ウムのような窒素化有機塩基の誘心カチオンが挙げられ
る。好ましいノ１ブーオンはナトリウムカチオンである
。他の：ａ切なソノチオンにはカリウム、マグネシウム
又はカルバムが１考まれる。

モチーフａのアミノラツは逆Ｆしていてよく、又にしそ
の」ノツ合に同一の又は異なるｌｆｆｉ換基で１〆ｆ換
しても」：い。

好ましいＧ換基としてはアセチルもしくは・−ンジルの
如きアシル基又は前述の如きアニメ゛ン、’ｉ′？にＳ
Ｏ３−アニオンがξけられる。こｉｌらのアニメンは前
述の如きカチオンとの塩の形状で存在すると有利である
。

モチーフｂ又はＣのカルボキシルノ）匂は：ｉｔｉＬＮ
Ｇシているか、又は好ましくは前述の如き有機もしくは
ｊＭ　ｊ１４１カデオンとの塩の形状で存在する。

好ましい生成物は部位２に（ｆｆｊ　酸塩基を有するモ
チーフＣを含む。

別の好ましい生成物−：、３及び／又は６　−　０　７
硫敞塩基を有するモチーフａを場合によっては先行配列
に加えて含む。

Ｎ−酋換型、特に３及び／又は６−〇−硫酸塩、基を有
するＮ−硫酸塩型モチーフａを含む生成物も好ましい。

前述の生成物中特に好ましいものは抗１０ンビン活性又
は抗Ｈａ活性を全く示さない。

好ましいオリゴ糖類は特にヘパリン中に存在しているた
めＡＢＣＤＥＦＧＨ措造の八潮類配列を部分的又は全体
的に含む。この構造は本発明者により１９８０年１０月
６日付欧州特許出願第８０　４０　１４２５６号に開示
されてお）次の式で示される。

（ Ａ　Ｂ’Ｃ’Ｄ　Ｅ　Ｆ　Ｇ　Ｈ 式中Ｒは一〇Ｈ基又はＳＯ；基を示す。

これは勿論基本構造であって等価の生成物は前出の式に
示されている置換基とは異なる置換基を含み得る。特に
モチーフＤのｊ）４合、部位２の直，１４’！基は一Ｎ
　Ｈ　Ｒ’基〔式中Ｒ′はＨ、アシル基特にアセチル基
、又は−ＳＯｓ基を表わす〕であってよい。

これらモチーフにＤｉ−１する以後の５及は従って伺よ
シも先ずこれらモチーフの構造に係る。

本発明のコンプレックスでは特にＣＤＥＦＧＩｌ惜造の
六ネ顛が有利に使用される。

ＡＴＩへの固定に必要な最小配列に十中へ九該当し且つ
大きな抗Ｘａ特異活性を有するというＪ１１！由から特
に好ましいと思われる生成物は、ＡＴＮとのコンプレッ
クスの形状で存在するａ−ｂ−ａ−ｃ−ａタイプ４′；
１造の五糖類からなる。

！［°εに好ましいコンプレックスはＤ　Ｅ　Ｆ　Ｇ　
Ｉ’タイプ配列を含む。

これらのコンプレックスでは五糖類配列は前記の式に関
して説明したように置換され得るか又は独々の誼換体を
特に−０８０１基レベルもしくはアミ７基レベルに有し
得る。尚、前記−〇５Ｏｓｕは−ＯＨ基の如き基と交換
し得る。

特定的には、モチーフＤ、Ｆ及びＨのアミノ井は全て同
一であると有利でおる。これらアミノ凸は例えば−ＮＩ
Ｌ　−Ｓ　ｏ；’基を表わし得る。

前述のコンプレックスでは人間に対する生物学的使用を
考慮してヒ）ＡＴＩＩＩを用いると有利である。

本発明では前述のコンプレックスが有利には等モル号の
ＡＴＩＩとオリゴ糖とをバッファ媒５Ｉｉ中で混合させ
るだけで得られる。

この混合物を室温で放置すると前記コンプレックスが得
らｔｌ、　Ｚ、が、その時間は通常は約１５０で十分と
思われる。得られたコンプレックスはゲノＬＦ：Ｊによ
って回収し得る。塩の度の高い溶Ｐ、ｆバッファを用い
ると該コンプレックスがＷｆ、離する。

本川＃ｕ［ｊ人によシ既に開示されたｉ（１述の方法に
従って合成によ勺イＩＩらり、るオリイ劇を／＄：う６
明の製法に使用することの利点は明らかであり、このよ
うにすれば所超の生成物が篩純度で得られる。

本発明のＡＴＩＩＩ−オリゴ和コンプレックス’ｒ（σ
［究した結果、こｉｔらコンプレックスのイ１１１々の
１１等性が知見された。例えば、偕にデルでの沖；（ｒ
４　（以後ゲル濾過と呼ぶ）Ｐごよる丈験的イブ２畳及
びＳ　ｃａｔｃｌｌａｒｄ法による使用された螢光のイ
プミ査の結果、これらコンプレックスは等モルで心って
約１０５乃至１０７モル−１の大きな会合定ｐ　（ｃｏ
ｎｓｔａｎｔｅｄ’ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ　）を有す
ることが判明した。

これらのＡＴＩＩＩ−オリゴ糖コンプレックス一二また
、単独のオリゴ糖よシ大きい抗Ｘａ活性を有することも
判明した。このようなコンプレックスの形状で存在する
とオリゴ糖は他の蛋白質の作用から保護されるという利
点を有するためよシ連く作用するのである。

該コンプレックス中に存在するＡＴＩがＸａ因子の抑制
に係る時はオリゴ糖は遊ｎ（＃状態におかれる。該オリ
ゴ糖は従って通常血漿中に存在するＡＴＭと新たに結合
しイ０、このようにして何らかのｉ１゛のＸａ因子を次
々とか■返しプロモートしイする。

このよりなＡＴＩＩ［の補給はＡＴＪＩ［欠乏症患者、
又は凝血能九進状７７虱特に播種性の血管内凝血状態に
あるかもしくは急性血栓症にかかった患者にとって有利
な現象である。これらの状態にある忠渚には極めて速い
治療が必要とされる。本発ＩＪ１４のコンプレックスを
用いり、ば患者のＡＴＭの割合に係シなく治療を行い得
る。

ＡＴＩＩＩがこのように補給され且つこの補給が最も有
効に使用されｉＬは、ヘパリンを用いる長期治療に起因
するＡＴＩ！ｉ欠乏も回避される。

首だ、オリゴ糖のｉｔ’ｄ、’　Ｘａ活件は該オリゴオ
・吉が最初からコンプレックスの形状で存在する場合に
ｌ−Ｆ。

よシ長い半減ＪＬＩＪを有することになる。何故ならコ
ンプレックスの形状で存在すればオリゴＪシｊは、・存
９べと中和作用をもつ蛋白ｔｔとの作用から免りるから
でるる。

好ましいコンプレックスは少なくとも（１１￥奇に関し
てはヘパリン中に存在ｊ−る天然の配夕１］のコピーを
侮成する配列をオリゴ糖として含む。

このようなコンプレックスとしては特に前述のＣｌ）　
Ｅ　Ｆ　Ｇ　ＩＩ缶及びＤ　Ｅ　Ｆ　Ｇ　Ｉ−１釘Ｊタ
イプの（、゛ゴ造奮もつＡＴＩ！［−六糖頗コンプレッ
クス又はＡ’ｌ’１ｌｌ−五箱類コンプレックスが誉げ
られる。

前述のＡＴＩ五−五穂ζＩμ゛Ｉコンプレックスは五糖
シ８コ毒が、イシｆられた４１−果に基づき、ＡＴＪＭ
への１−１１定に必要な最小配列と見なされる配列を含
むため弛めて特殊な利点を有する。

これらコンプレックスの抗Ｘａ活性は単独で使用した場
合の五糖類の少なくとも約３倍であり、ＤＥＦＧＨタイ
プのＡＴＮ−五糖類コンプレックスの場合で約９０００
　ｕ／ｍｖ（ＹＷ年単位に達する。

Ｔｅ１ｅｎのアミトリシステスト（ｔｅｓｔ　ａｍｉｄ
ｏｌｙｔｔｑｕａ　）を変形してトリス−Ｉ（Ｃノバッ
ファの代シにｐＨ７，５トリス−マレイン酸ｍ（０，０
２Ｍ）バッファを用いて血漿を希釈することによシテス
トを行っても同様の結果が得られる。

本発明の重要な利点の１つとして、この抗Ｘａ活性はＸ
ａ因子に対し完全な特異性を示す。害１・祭、１１１ａ
因子に対する抗トロンビン活性はＴｈｒｏｍｂ　。

Ｒｅｓ。（１９７８年）、１３，２８５−２８８にδ己
ｉ（戊のＬａｒｓｅｎＭ　−Ｌ、　Ａｂｉｌｄｇａａｒ
ｄ　Ｕ、　Ｔｅ１ｅｎ　Ａｎ　Ｍ及びＧｊｅｓｄａｌｌ
ｃＫ。のアミトリシステストを行って得られる結果が示
すようにゼロである。

これらコンプレックスは更に粉性がないため、血栓症の
予防及び治療に使用し得る薬剤のＺ造に有利に使用でき
る。

従って本発明は大きな抗Ｘａ特異活性をもつ前述のＡＴ
Ｉ−オリゴ糖コンプレックス、より’Ｉ”ｌ’　５’ｆ
ｌ的には前述のＡ’Ｉ’！−五糖類コンプレックスを含
む製剤にも係る。

本発明はよ勺’！：ｊ足的にｔ、１、発〃シ性物質を含
まず、有効景の有効成分を製箔用賦形剤と共に含み、特
にｅＩＩ結乾燥させた状態で存在する製剤に係る。

本発明はまだ、経口投与に適した製剤用ビヒクルを含む
組成物（′こも係る。経口投与する〃）合の本発明の適
切な投与形態としては耐１り液性（ｇａｓｔｒｏｒ５ｓ
ｉｓｔａｎｔ）カプセル、錠剤、九朶、又はリポソーム
形状が有利でおる。

本発明は前述のオリゴ糖を［は１．％投与に±２１Ｌ、
たｊｊｊ：形削と共に含むぞ１Ｓ剤組成物にも係る。こ
の場合は坐払°１≦の形態で膜力される。

本発明編成物の指刀形態としで曳にエアロゾル又は軟膏
が掌げられる。

本発明はまた、筋内投与又は皮下膜力の他静脈内膜力に
も適した注射しイ４）る無菌状の又は妓的可能な薬剤組
成物にも係る。

これらの溶液は静脈内注射又は皮下注射に使用する場合
はｉ、ｏｏｏ乃至５０，０００　ｕ　（Ｙｉｎ−Ｗｅｓ
ｓｌｅｒ　）／ｍｌ好丑しくは１．．５００乃至３０，
０００、例えば２５，０００　ｕ／ｍｅ含んでいると有
利である。

このような聾剤組成物の一例として、例えば該コンプレ
ックスを塩化物等張液に２５．０００　ｕ　ｆｊｃＸｎ
、／ｍｌの濃度で溶解した溶液を使用し得る。単位用足
はｍｌ当Ｊ　５，０００乃至５０，０００　ｕの抗Ｘ　
ａ　、例えば２５，０００　ｑ抗Ｘ　ａ　／　ｍｌであ
ってよい。

このような製剤は即使用できる使い捨て式注射器に詰め
ておくと有利である。

本発明の薬剤組成物はヒト又は動物の成る杜の血液凝固
状態、特に患者が例えば外科手術、アテローム、腫瘍の
発生及び紺、菌もしくは酵恵の賦活体（（よる凝血障害
などに起因し７て凝血能′７′Ｃ進にかかる危険性がら
る」弱含、そして１１キにＡＴＩＩが欠乏している場合
の血液凝固状態をコントロール（予防又は治療）するの
に特に適している。

次に本発明組成物をヒトに対して使用する場合の票用量
ｖ口を示す。例えば５，０００乃至５０，０ＯＯｕ（Ｙ
ｉｎ　−Ｗｅｓｓｌｅｒ　）のオリゴ糖をコンプレック
スの形状で静脈内投与する場合は、例えば８，０００乃
至３０，０００ｕを１回で又は数回に分けて注射するが
、その場合の膜力ｌ−１：患者の己血能冗進の危険の程
度又は血栓症の状態に応じて規則的間隔をありながら断
続的に行うか、もしくｄ、持続注入によシ粧続的に行い
、又は２日乃至３日おきに行う。これらの投与ｆｔは勿
Ｌ：ち前もって行っておいた血散力”＃の結果１，０者
の症状及び一般的にはその健康状態を考広して個々の患
者に応じて調整し祷る。

（以下余白） 本発明の他の特徴及び利点は以下の実が４例から明らか
にされよう。

実施例１　ヒ）ＡＴＩＩＩと次式で示される五糖励との
コンプレックスの製造 （５０） ヒトＡＴＩｉｌ　６５　ｎ’ｆ　（］　］／１−Ｅ−／
Ｌ　）と五糖１１ｊｌ、　７　ｒｑｇ（１７７モル）と
企０．１５ＭＮａＣＡ！、　０．０１Ｍ　ｐ１１７．５
トリス−Ｉ−ｉｃｌバッファ１０ｍ１中で混合し、室已
で約１５分間放置する。

使用する五糖類は本用願人名義仏［−ＢＪ特許出Ｊ〕口
第８２１８００３号実施例９に記載の合成法により製造
する。

得られた混合物のアリコートをゲル濾過処理にかけ且つ
溶出した留分の２８０ｎｍの光学的ｉ、１．６度を測定
してＡ　Ｔ　ｌ１ｌ−五糖類コンプレックスの形成を偽
認する。

前記バッファで一７白化した細かいＳ　ｅ　ｐ　ｈ　ａ
　ｄ　ｅ　ＸＧ　５０　（Ｐｈ、ａｒｍａｃｉｅ　５ｕ
ａｄｅによる市１仮のデキストラン誘尋体）の１．Ｘ９
５ｍのカラム全使用する。

該カラムの頭部にＡＴｌｆと五口類との混合物を配置す
る。次いで該カラムをμｊ」−のバッファで溶出にかけ
１ｍｌの留分を回収する。

溶出最に応じた２８０ｎｍでの光学的ａ、ミ度ＤＯと５
３０ｎｍでのＤｏによるウロン酸のおの変化をＡＴＩＩ
単独の場合と、五糖類単独の：ｌム合と、イムノられた
Ａ　Ｔ　ｌｌｌ−五糖類コンプレックスの場合とに分り
で第１図に示した。

第１図のグラフによればＡＴ川の溶出及び五石３９Ａの
溶出は夫々２７ｍ６及Ｑ’４８ｒｎｌの部位である。

ｍ１Ｅｖｔ２Ａ　Ｔ　ｆｆｌ　−Ｈ４’ａ’ＪＪ４　：
Ｉ　７プＬ／　ツク７、　（Ｄ　ｔＪ３　合ＦＣＢピー
クが２７ｍ１の点にあるたけで４８ｍ１にはない。

過剰量の五’ｊＨｊ類を用いて、１タリえｄ、６５巧の
Ａ　ｉ”　ＩＩと０．３１３　ｍ！７の五糖類とを用い
て前記の実ｊ穴をＲ：’ｉ刀尻すと過剰量のオリゴ糖が
４８ｄでｉ３出する。これは等分子コンプレックスの形
成全意味し、ｔ・ｔって該五糖類に固定部位が１つしか
ないこと全意味する。

該コンプレックスの会合足載を螢ブ０計で測定する。

ＦＩＣＡ　５５　ＭＫ　ｎタイプの螢光計を用いてＡＴ
■中のトリプトファン残留物の螢光増加に対する五糖類
の効果を測定する。

とｈ　ラノ測定ｆ’ｌｆ：　ｏ、ｏ　Ｉ　Ｍ　ｐｌｉ７
．５　ト’）　ス−１１ＣｌＯ，１５Ｍ　ＮａＣｌバッ
ファ中２５０で行う。

励振波長及び発光波長は夫々２７８及び３３５ｎｍであ
る。

ＡＴＩＩＩに五糖ｇ４を加えると蛋白質の螢光が恐らく
トリプトファン残留物のレベルまで増加することが確認
されている。

第２図にはＡＴＩ［Ｉのモルによって結合された五糖類
のモル数７と五糖類のモル姶度Ｃとの比のマに応じ／Ｃ
変化ヲ邑該コンプレックスに１．！：ｌ　Ｌで示した（
　５ｃａｔｃｌｌａｒｄ　［１ｆ１）便）。

この面線の仙ｅ１から会合定数７　Ｘ　１０’　Ｍ’が
算出される。この曲糺１ｉｄ：ｘｍ個ｆ＝　ｎｔｂとほ
ぼ丁＝１で交差しているが、これｉＬ　ＩＪＩｉＩ　５
１部位が単一であること全意味する。

Ｙｉｎ他の方法に従いＴｅ１ｅｎのアミトリシステスト
をトリス−］１Ｃｄバッファの代りに０．０２　ＭＴ）
Ｈ７，５）リス−マレ・ｆン１″ｉト？塩バッファを用
いて血ｔＪ３を希釈することにより実ＩＡＤ　してわし
Ｘａ活性をと（１１足する。

Ａ３１’＋１ｊ　Ａ・１とＡ　’ｌ’　ｌｉｌとの肯モ
ルコンプレックスシェフィブリノペプチＦＡの発生ｔ　
Ｌｉｊ’Ｊ定することによってｊｆｊべろと単独五石−
ダ（より遥かに大きい抗血栓症ン、５性を有している（
ｉｉ’ｌえＩ！；１）、　Ｉ）ｌｔＯｃ、　４３（−１
１７５１に記載のｇｍａｎｕｅｌｅ　Ｉｌ、へ１．他の
方法）。

該五みツａ４　／　Ａ　Ｔ　ＩＩＩやずモルコンプレッ
クスはザルの体内に２５＆び５０μｙ／　ｋ（７で皮下
もしくは浦’　ｂ’７４内投与すると単独五糖類よりも
且つ単独Ａ　’１’　ＩＩＩよシも長い半減期を示す。

同様にして、該コンプレックスは静脈内投与すると単独
五糖類よフ大きい抗血栓症活性を示す。

これはトロンボゲン剤としてＰＣＣ／ｎＶＶ及びＦＥＩ
ＢＡを使用してＴＨＲＯＭＤＯ８，ＡＮＤ　ＨＥＭＯ８
Ｔ。

４６ｔｌ＋、　１１７’（１９８１年）に記載のＡＮＤ
ＥＲ８ＯＮＡ、他の方法に従い血行静止（５ｔａｓｉｓ
　）による血栓症モデルでの測定を行った結果’ｉｌ明
したものである。

実施例２　ＡＴＩＩＩと尖託１例１の配列にｈジ当する
ＤＥＦＧＨをもつＣＤＥＦＧｌ（タイプの六糖類とのコ
ンプレックスの合成 六糖類ヲ前述の仏画特許出願に記載の合成法で製造して
実施例１と同様の操作を行う。その結果会合定数が大き
く且つ抗Ｘａ特異活性も単独穴４：’ａ類より遥かに大
きいコンプレックスが得られる。

【図面の簡単な説明】

第１図は溶出Ｂに応じた２８０ｎｎ１での光学的濃度Ｄ
Ｏと５３０ｎｍでのＤＯによるつｏ　ｙ　ｌｌｉ：＜’
のｔｌの変化を、単独Ａ　Ｔ　ｍ　、単独五組、′拭ｔ
１及びこれらＡ　１’　ｌｌｌ−五糖類のコンプレック
スに１４・ワして示したグラフを示し、第２図（徒Ａ　
Ｔ　ＩＩＩの１モルに結合した五８！！朔のモル数７と
五糖み１のモル両度Ｃとの比の７に応じた変化’ｃ　１
ｉｉＪ記コンプレツクスにしして示したグラフでおる。 三■二辛シにン市　ｊ」二　都！ニ； 昭和５９年８月ど［」 へごゾ ・イ＼）′Ｘ′を 狛８′ｒ庁長官　志賀　学　殿　１１．・−・１、事イ
′１の表示　昭和５９年特ｈ′Ｆ願第１３４９７／１号
２、発明の名称　Δリボ糖を含む新規生成物、その製法
並びに生物学的及び生化学的使用 ３、補正をづる者 事イ′１どの関係　特π１出願人 名　称　ショアイ・ニス・アー ４、代　理　人　東京都新宿メ新宿１７’ｌｌ　１番１
４号　＋１−＋　ＩＩＩヒル５）、補正命令の口角　白
　光

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１１大きな抗Ｘａ活性をもつオリゴ糖を含む新規生成
   物であって、５乃至１２のモチーフａ及びＵを含むオリ
   ゴ粘とＡ　Ｔ　ＩＩＩとのコンプレックスであシ、ａは
   Ｄ−ゲルコサミンクイブのアミノ酸措造を表わし、Ｕは
   Ｄ−グルクロン酸タイプｂもしくはＬ−イズロン酸りイ
   ゾＣのウロン酸４．７４造を表わし、これらモチーフａ
   及びＵが次の群 Ｕ（ａＵ几、　（＋ａＵ）ｎａ　、　（Ｕａ）ｎｌ及び
   （ａＵ）、ｎ〔大中　４　＜ｎ　（ｉｉ　１　３　％　
   ｍ≦６〕より選択されブヒ規則的な鎖を４１７成するこ
   とを特徴とする新規生成物。 （２）交互に規則的に配置されたモチーフａ及びＵの配
   列が１つ以上のモチーフａもしくはＵ及び／又は１つ以
   上の中性糖モチーフ及び／又はデオキシ−糖及び／又は
   異なる４、１７造の糖を続けて自己賃することにより変
   えられていることをｔｌに徴とする特許請求の範囲第１
   項に記載の新規生成物。 （３）全体的又は部分的にｂ−ａ−ｃ−ａ−ｂ−ａ−ｃ
   −ａタイプのへ糖類配列を有するか又はこれに該当する
   オリゴ糖を含んでいることを特徴とする特許請求の範囲
   第１項又は第２項のいずｊｔかに記載の新規生成物。 （４）前記オリゴ糖では第１アルコール基と第２アルコ
   ール茫とが遊離状態にあるか又は部分的もしくは全面的
   にリン酸塩アニオンもしくは特に硫酸塩アニオンの如き
   アニ刃ンで置換されておシ、これらアニオンは特にナト
   リウムの如きアルカリ性カチオンなどの無（長もしくは
   有様カナオンとの塩の形状で存在し；及び／又はモテー
   フれのアミノ基が遊離しているか又はアセチルの如きア
   シル基を含む同一のもしくは異なる茫で置換されている
   か又は前述の如きアニ」ンで買換されており、これら種
   々のアニオンは前述の如きカチオンとの堪の形状で存在
   すると有利　（。 であり；及び／又はモチーフｂもしくはＣのカルボキシ
   ル基が遊１’；伍しているか又は好址しくは前述の如き
   有機もしくは無機カチオンとの＋ｌＫの　（形状で存在
   することをＩｔ′！ｆ徴とする特許請求の範囲第３項に
   記載の新規生成物。 （５）次のＡ　ＨＣＤ　Ｅ　Ｆ　Ｇ　Ｈイｉグ造（ Ａ　Ｂ　ＣＩ）　Ｅ　Ｆ　Ｇ　Ｉ＋ のへ糖類配列か、又は水素原子、アシル基竹にアセチル
   、もしくは−５ｏ３−基を表わすＲ’をも（ つ穏々の１ｒ７換基を有する等価（；￥造のへ糖３：Ｉ
   ″Ｉ配列を全面的又はｉｍｐ分的に含むオリゴ糖を含ん
   でいることを特徴とする！１゛１許請求の範ＶｆｆＪ第
   ３項に記載の新規生成物。 ６）特にＣＤ　ＥＦ　Ｇ　ＩＩタイプ借造の六糖類とｃ
   ｉ’ｌｉｌトノコンプレックスであることを特徴とする
   ′１″ｊ許請求の範囲第５項に記載の新規生成物。 ７）　ａ−１）−ａ−ｃ−ａタイプ（、７造の五糖類を
   Ａ　Ｔ　ＩＩ＋とのコンプレックスの形状で含むことを
   特徴とする特許請求の範囲第４項又は第５項に記載の新
   規生成物。 Ｂ）　Ｄ　Ｅ　Ｆ　Ｇ　Ｈ構造の五Ｘ３　ＪとＡ　Ｔ　
   ｆｉｌとのコンプレックスであって、置換基が前述の置
   換基と同一である力１又は異なシ、１（５゛換基０８Ｏ
   ３−が−０１１と交ｊりされ得、Ｎ１（−アシル基が−
   ＮＨ３Ｏ３−基と二（換され得ることを特徴とする特許
   、請求の範囲１°Ｊ７項に記載の新規゛生成物。 ト→）前述のオリゴ糖のうちより選択８れたオリゴ糖と
   ＡＴＩｌｌとのコンプレックスであって抗ＩＩａ活性を
   全く示さないことを特徴とする特許請求の範囲第１項乃
   至第８項のいずれかに記載の新規生成物。 （１０）　次式 で示さｉＬる五糖類とヒトＡＴＩＩ＋とのコンプレック
   スであることを肋徴とする新規生成物。 Ｑｌ）　等モルａのＡＴＩＩＩ　、！：討リす糖とを緩
   ＠媒質中で混合することを特徴とする特許請求の範囲第
   １項乃至第１Ｏ項のいずれかに記載の生成物の製法。 ←の　有効量の特許請求の範囲第１項乃至第ｉｏ項のい
   ずれかに記載のコンプレックスを製％”−用１１・を形
   削と共に含むことを特徴とする製剤組成物。