JPS6033410B2

JPS6033410B2 - 海蛇脂質類の抽出分離法

Info

Publication number: JPS6033410B2
Application number: JP56127915A
Authority: JP
Inventors: 武夫羽根田
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 1981-08-13
Filing date: 1981-08-13
Publication date: 1985-08-02
Also published as: JPS5829712A

Description

【発明の詳細な説明】この発明は、海蛇の全体、ことにその腹蛭内における脂
質塊より、魚臭を有しない脂質魂を簡便に抽出分離する
方法に関する。

この発明の発明者は、先に海蛇ら全体又はその内臓部か
ら、五十肩、ギックリ腰、鞭打ち症後遺症、変形性腰椎
症、坐骨神経痛などの治療に卓効を有するリン脂質を全
く含まない薬効有力物質である単純脂質物質の抽出製造
法を見出した（袴関昭５５−１６６７松５号）。

しかし、このようにして得られた脂質類はいずれも魚臭
を有するだけでなく抽出分離するのに長い工程を要し、
とくに単純脂質を精製するには力ラムクロマトグラフィ
を用いる必要があった。

この発明の発明者は、この後、更に研究をす）め、海蛇
原料を有機溶媒を用い且つ簡単な工程で抽出し、魚臭を
有しない脂質類を抽出分離する方法を見出したのである
。すなわちこの発明は、海蛇の全体、ことにその腹腔内
における脂質塊のそのま）又はその細片を、アセトン、
クロロホルム−メタノール混液もしくはｎーヘキサンー
ェタノールー水混液のいずれかの溶媒中で抽出処理し、
抽出液から脂質類を単離することを特徴とする海蛇脂質
類の抽出分離法を提出するものである。更にこの発明は
、上記の方法によって得られた海蛇の脂質類を石油エー
テルと水性エタノール又は水性メタノールとの混液で分
画抽出して石油エーテル画分から単純脂質を、またアル
コール画分より類脂質を単離することを特徴とする海蛇
脂質類の抽出分離法を提供するものである。すなわち、
この発明によれば以下のようにして海蛇の脂質類を抽出
することができる。

捕獲された海蛇〔海蛇とはヱラブウナギ蝋ｔｉｃａｎ船ｓｅｎｉｆａｓｃｉａｔｅＲｅ皿ｗ．及
びその同属の海蛇属（ＨｙｄｒｏｐｈｉｓＳＰ．）の総
称〕は、捕獲後すぐには抽出処理を行わず輸送、一時保
管などの時間を経過してから抽出する場合が多いが、ま
ず捕獲後すぐに海蛇全体ことにその腹腔内の脂質塊るそ
のま）か適当な大きさに切断したものをアセトン、クロ
ロホルムーメタノール混液もしくはｎ−へキサンーェタ
ノールー水混液などの抽出溶媒中に浸潰して空気から遮
断するのが望ましい。

これによって脂質類が酸化されて変質するのが防止され
ると共に袷浸が行われる。そして適当なときに抽出を完
了させる。すなわち、例えばこの溶媒に浸潰した海蛇を
そのま）ホモジナィザーなどにかけて細片に粉砕される
。この粉砕の程度は細かい程よいが、かゆ状に粉砕する
のが好ましい。抽出溶媒としてはアセトンが好ましく、
また溶媒１夕に対する海蛇原料の量は５０〜５００夕が
適切であり、好ましいのは１００〜３００夕である。な
お海蛇の捕獲直後に抽出処理するときは捕獲後の溶媒浸
債時間が短いことを除いて上記と同様に処理される。上
記のようにして得られた海蛇乱京料と溶媒の混合物を遠
心分離又は炉過して上層の透明な抽出液を採取する。

なお下層の沈降部に最初に用いた溶媒の約言〜家。の容
量の溶媒を添加し燈拝して抽出処理を３〜８回繰返し、
得られた上層の透明な抽出液を上記の抽出液とひとつに
合わせる。この抽出液をなるべく減圧下（１０〜２仇桝
水銀柱）ロータリーェバポレーターなどを用い３５ｑＣ
以下で濃縮し、水分を凍結乾燥法で除くと淡黄褐色無臭
の半固体状の海蛇の脂質類が得られる。この脂質類は袷
濠訴蓋中−４ぴ０以下で保存される。上記の抽出は、通
常、常温下でよいが、場合により使用する溶媒の沸点以
下の加湿下であってもよい。

また上記抽出法において、特に腹腔内の脂質塊を原料と
する場合、溶媒で抽出する前に次のような方法で脂質を
分離してもよい。

すなわち、該脂質塊を取り出し、できるだけ早くガーゼ
袋に入れ、これを金属容器内に入れこの金属容器を雛水
中につける。ガーゼ袋中の脂質塊が軟化し液状となれば
手早くガーゼ袋をいまることによって無臭の粗脂質類が
得られる。この粕脂質類は、前記の溶媒を用いるこの発
明の方法によって極めて容易に精製することができる。
次いで、上記脂質類を、更に次のようにして抽出分離し
て単離脂質と頚脂質とに分離される。

まず石油エーテルとエタノール又はメタノール水溶液（
好ましくは９０％エタノール）の等量を混合してよく振
渇した後放置して上下２層の溶媒（上層をＡ、下層をＢ
と称する）を作る。得られた上層と下層とに上記脂質類
を分配し、上層の石油エーテル層に単純脂質が、下層の
アルコール層に類朋旨質が分画される。具体的には次の
ように行われる。このＡとＢとをほゞ３：１の容量比で
混合し、この混合溶媒の１のこ対し１００〜２００夕の
比率で上記脂質類を入れ充分振溢して溶解する。得られ
た溶媒の上層ａｌと下層ｂｌを分離し、この下層ｂｌに
最初に使用したＡとほゞ同量の新たなＡを添加してよく
振糧する。得られた上層ａ２と下層ｂ２を分離する。一
方上層ａ１には最初に用いたＢとほゞ同量の新たなＢを
添加してよく猿溢した後、これを前記上層ａ２と混合し
てよく振濁し、得られた上層ａ３と下層ｂ３とを分離し
、ｂ３は前記ｂ２とひとつに合わせる。次いでこの上層
ａ３に最初に用いたのとほ）、同量の新たな下層Ｂを加
えよく振溢して上層ａ４と下層ｂ４に分離し、この下層
ｂ４を上記ｂ２とｂ３とに合する。こ）で得られた上層
ａ４に対して前記上層ａ３に行ったのと同じ処理を数回
繰り返して行いその都度得られた下層をひとつに合わせ
る。かようにして得られた上層と下層とをそれぞれロー
タリーェバポレーターなどを用い減圧下（１０〜２仇舷
水銀柱）３５℃以下で濃縮する。そして下層の濃縮物の
水分は凍結乾燥で除去される。上記のようなこの発明の
方法によって上層からは単純脂質、下層からは類脂質が
えられる。

これらは従来法のごとく水中で加熱したりすることなど
がないため、実質的に魚臭がなく優れた製品といえる。
それぞれ以下のような性質を有している。ィ上層から
得られた単純脂質 ‘ィ｝淡黄色の蝋状物質で軟化点が４０〜５５ｑｏで
ある。

｛ｏ｝水に不落、エタノールに難溶、アセトンに可溶
、クロロホルム、エーテル、石油ヱーナル、ヘキサン、
ベンゼン、トルェンに易溶である。

し一本品１夕をアセトン１００地に溶解した溶液の液
’性は中性である。

０赤外線吸収スペクトル：ＩＲ（ＨＣ１３）２９６０
・２８７０・１７３Ｑ１４６０肌‐１（村薄層クロ
マトグラフイ（ＴＬＣ）｛ｉ）本品１夕をクロロホルム
１００泌に溶解した溶液について、添付量：１０机、担
体：シリカゲルＧ（メルク社）、展開溶剤：石油エーテ
ル／エーテル／酢酸（８５：１５：１．５）、展開距離
：１５肌、検出：０．２％、２・ブージクロロフルオレ
セインのエタノール溶液を噴露し乾燥後３６印肌の紫外
線を照射の条件でＴＬＣに付すとＲｆ値約０．６の位置
に黄色呈色した大きいスポットを示す（第１図の１に示
した）。

‘ｉｉ’‘ｉーで用いた試料液について、添付量：１０
Ｋ〆、担体：シリカゲルＧ（メルク社）、展開溶媒：ｎ
−へキサン／ィソプロピルェーテル／酢酸（６０：５０
：０．４）、展開距離：１５弧、検出：モリブデン試薬
の条件でＴＬＣに付すとＲｆ値約０．８に単一の大きな
スポットを出現する（第２図の１に示した）。

Ｈこの物質中にリン脂質が全く含有されていないこと
はディトマー氏ーレスター氏改良法の検出法によって確
認した。

ロ下層から得られた類脂質 ‘ィー常温で粘稲な油状で、各種の有機溶媒、植物油
に可溶である。

｛ｏ）イｂ学的組成は、リン脂質３７．４％、ホケン化
物３．払％を含み、更に脂肪酸組成は、Ｃ，６２３．９
％、Ｃ，６：，０．５％、Ｃ，６，６：２０．４％、Ｃ
，７０．２％、Ｃ，８４．３％、Ｃ，８：，９．４％、
Ｃ，６：２５４．３％、Ｃ，８：３７．０％である。

し一ＴＬＣ前記単純脂質について行ったＴＬＣ‘ｉ｝及び（ｉｉー
と同様なＴＬＣに付してそれぞれ第１図の２及び第２図
の２のクロマトグラムが得られた。

次にこの発明の方法を実施例によって説明するがこの発
明を限定するものではない。

実施例１ェラブ海蛇の腹腔内の脂質塊からの脂質の抽出分離ェラ
ブ海蛇を沖縄で捕獲後すぐにその腹腔内の脂質魂（約２
００十）アセトンの入った缶に入れ次いでその缶の口ま
でアセトンを満たし（アセトン量約１そ）空気から遮断
し、密栓して室温で保管し、大阪に輸送した。

この原料をアセトンに浸潰したま）ホモジナィザーで室
温で２分間燈拝してかゆ状にした。これを遠心分離して
上層のアセトン溶液を取り分け、沈降部の下層にアセト
ン（１００の【）を加え２分間蝿拝した。そして得られ
た上層のアセトン溶液を取り分け最初に得たアセトン溶
液とひとつに合わせた。この新たなアセトンを加えて行
う操作を５回線返した。このようにして集めて得たアセ
トン溶液をロータリーェバポレーターと水流ポンプを用
い減圧下（１０〜２仇岬水銀社）３び０で濃縮した。濃
縮エキス中の水分は凍結乾燥法で除き、淡黄褐色無臭の
半固体状の脂質を得た。これを冷凍庫中−４び○で保存
した。また溶媒としてアセトンの代りにクロロホルム一
メタ／ール混液（容量比１：２）又はｎ−ヘキサンーェ
タノール−水温液（１０：９：１）を用いても同様の生
成物が縛られた。実施例２実施例１で得た脂質から単純脂質と頚朗旨質との抽出分
離石油エーテルと９０％エタノールの等量をよく振覆し
放置して上下２層（上層をＡ、下層をＢと称す）をなす
溶媒を作製してこのＡ及びＢを用いて実施例１で得た脂
質を分画抽出した。

実施例１で得た脂質（１０のを、Ａ（４５Ｍ）とＢ（１
５の【）と共に分液炉斗１に入れ、よく振濠し溶解した
。

得られた下層ｂｌ（約１５肌）を新たなＡ（４５の‘）
を予め入れておいた分液淀斗Ｄ‘こ入れ充分振渇し溶解
した後得た上層ａ２（約４５の【）と下層ｂ２（約１５
の【）の中下層ｂ２をフラスコ１に取り出した。一方分
液炉斗１に残っている上層ａｌ（約１５の‘）に新たな
Ｂ（１５叫）を加えてよく振覆した後、これを上記上層
ａ２（約４５の‘）の入っている分液炉斗ローこ入れ充
分振浸し上層ａ３（約９０泌）と下層ｂ３（約１５の上
）とを得、この下層ｂ３（約１５の‘）をフラスコ１に
取り出し下層ｂ２と合した。次いで上層ａ３（約９０叫
）の残っている分液炉斗ｎ‘こ新たなＢ（１５机）を入
れ充分振浸した後得られた上層ａ４（約９０の‘）と下
層ｂ４（約１５の‘）の中、下層ｂ４をフラスコ１に取
り出し下層ｂ２及びｂ３と合した。残った上層ａ４（約
９０の‘）を新たなＢ（１５私）で処理する操作を更に
３回繰り返した。以上の操作によって得られた上層（９
０の‘）と下層（９０の【）とをそれぞれェバポレータ
ーと水流ポンプを用い減圧下・（１０〜２仇奴水銀柱）
３０ｑｏで濃縮した。

下層中の水分は凍結乾燥法によって除いた。このように
して上層（約９０の‘）から前記のごとき性質を有する
単純脂質（９夕、９０％）を、下層（約９０の【）から
前記性質を有する類脂質を（０．７夕、７％）得た。

【図面の簡単な説明】

第１図の１及び２並びに第２図の１及び２はこの発明の
方法によって得られた脂質類の薄層クロマトグラムであ
る。第１図第２図

Claims

【特許請求の範囲】１海蛇の全体、ことにその腹腔内における脂質塊のそ
のまゝ又はその細片を、アセトン、クロロホルム−メタ
ノール混液もしくはｎ−ヘキサン−エタノール−水混液
のいずれかの溶媒中で抽出処理し、抽出液から脂質類を
単離することを特徴とする海蛇脂質類の抽出分離法。２抽出溶媒がクロロホルム−メタノール混液（容量比
１：２）である特許請求の範囲第１項記載の抽出分離法
。３抽出溶媒がｎ−ヘキサン−エタノール−水混液（容
量比１０：９：１）である特許請求の範囲第１項記載の
抽出分離法。４抽出溶媒がアセトンであり、これに脂質塊を浸漬し
た後に細切して抽出を完了させる特許請求の範囲第１項
記載の抽出分離法。５海蛇の全体、ことにその腹腔内における脂質塊のそ
のまゝ又はその細片を、アセトン、クロロホルム−メタ
ノール混液もしくはｎ−ヘキサン−エタノール−水混液
のいずれかの溶媒中で抽出処理し、抽出液から脂質類を
単離し、これを石油エーテルと水性エタノール又は水性
メタノールとの混液で分画溶出して石油エーテル画分か
ら単純脂質をまたアルコール画分より類脂質を単離する
ことを特徴とする海蛇脂質類の抽出分離法。６抽出溶媒がクロロホルム−メタノール混液（容量比
１：２）である特許請求の範囲第５項記載の抽出分離法
。７抽出溶媒がｎ−ヘキサン−エタノール−水混液（容
量比１０：９：１）である特許請求の範囲第５項記載の
抽出分離法。８抽出溶媒がアセトンであり、これに脂質塊を浸漬し
た後に細切して抽出を完了させる特許請求の範囲第５項
記載の抽出分離法。９分画溶媒が、等量の石油エーテルと水性エタノール
を混合振盪して得た上下層液の上層−下層（容量比３：
１）である特許請求の範囲第５項記載の抽出分離法。