JPS6034199A - 新規抗生物質フオスアラシンおよびその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、新規抗生物質７オスアラシンおよびその製造
方法に関するものである。

本発明の目的は、本発明者によって抗生物質フォスアラ
ジン（ｐｈｏｓａｌａｃｌｎｅ　）と命名された新規抗
生物質およびその製造方法を提供することである。

従来、除草剤として使用されている物質は合成化合物が
主体であるが、環境汚染が問題となりつつある今日、自
然界で安全に代謝分解され、消滅する性質の物質がめら
れている。従って、自然の産物である天然物、例えば、
微生物により生産された抗生物質は、理論的にも上述の
問題にかなったものと考えられる。

さて、グルタミン合成酵素は、微生物や植物で、グルタ
ミン酸合成酵素とともに９素同化に関与していることが
知られており、特に植物においては、種々のアミノ酸や
核酸などの生合成のために、無機暢窒素を同化する酵素
としてきわめて重要である。近年、微生物代謝産物とし
て知られるタブトキシン［Ｎａｔｕｒｅ、　２２９．１
７４゜１９７１〕の構成成分であるタブトキシンが、植
物のグルタミン合成酵素を阻害する結果としてアンモニ
アが蓄積し、植物に害作用をもたらすことが報告された
（　Ｐｈ１ｓｉｏｌ、　Ｐｌａｎｔ　ｐａｔｈｏｌ、。

２０、２０３．１９８２　〕。

そこで、本発明者らは、グルタミン合成酵素の選択的阻
害物質が除草剤となりうるとの考えに基づき、多数の微
生物の培養ｒ液の中からグルタミンと拮抗する物質の検
索を行なった結果、放線菌ＫＡ−３３８株の培養Ｐ液中
よりグルタミンに選択的に拮抗する新規抗生物質フォス
アラジンを単離し、その構造を決定したのち、このもの
が植物に対して殺曜効果を発揮することを見い出して、
本発明を完成するに至った。

本発明者によって提供される抗生物質フォスアラジンは
、次のような理化学的性質を有する。

（１）元素分析値：炭素、水素、窒素、酸素、リンから
なり、イオウ、ハロゲンは含まない。

本物質の元素分析値の例をあげると次に示す通シである
。

Ｃ４６，０１ｑ６．　Ｈ７，７３チ、　Ｎ　１１．５０
係、　ｏ２６．２８％、ｐ８．４８％（２）融点：＞２
２５℃　（分解する）（３）分子−ＩＩ−：３６５であ
る。すなわち、ＦＤマススにクトル分析において、３６
６　（ｍ／ｚ、　Ｍ”＋１　）のイオンビークが観測さ
れる。

（４）比旋光度：　Ｃａ３”５＝−３ｓ、Ｋ　（（！＝
０．６５．　Ｈ２Ｏ）（５）紫外線吸収スイクトル：末
端吸収を示すのみである。

（６）赤外線吸収スイクトル：第１図のとおりである。

（７）　プロトン核磁気共鳴スペクトル：第２図のとお
りである。（重水中で測定。） （８）溶剤に対する溶解性：水圧よく溶け、メタノール
にはかなり溶けるがエタノール、ブタノール、アセトン
、酢酸エチル、クロロホルム、ベンゼン、ヘキサン、エ
チルエーテル等の有機溶媒には溶は難い。

（９）塩基性、中性、酸性の区分：両性物質である。

０Ｉ　物質の色：白色 （ＩＩｌ　Ｒｆ値ニジリカｒル及びセルロース薄層クロ
マトグラフィー（メルク社製、　ＴＬＣアルミシート厚
さ０．２調、キーゼルグル６０Ｆ□１及びセルロースＦ
ゎ４）を、常法により行なったときの’Ｒｆ値は次のと
おりである。検出には、ニンヒドリン発色を行なう。

１１ｒ）デロノリール／＊（７：３）　０．３８　０．
７５（＋２１　呈色反応：ニンヒドリン試薬に陽性であ
る。

以上の理化学的性質より、抗生物質フォスアラジンの分
子式は、Ｃ１，Ｈ，８Ｎ３０．Ｐが最も適当である。

抗生物質フォスアラジンを６Ｎ−塩酸で１１０℃、１８
時間加水分解し、分解液をシリカゲルおよびセルロース
薄層クロマトグラフィーで調べたところ、３つのニンヒ
ドリン陽性スポットが認められたが、そのうちの１つは
、ロイシンのＲｆ値に、もう１つは、アラニンのＲｆ値
に一致した。

また、本物質は第１図に示した赤外吸収スペクトルにお
いて、１６５８ｃｒｎ−”にアミドＩ吸収帯、１５４５
ｃＩｎ−”にアミド■吸収帯の存在が認められることか
ら、抗生物質フォスアラジンは、ペプチド抗生物質と考
えられる。

さらに、酸加水分解物のアミノ酸分析、プロトンおよび
カーダン−１３核磁気共鳴スイクトル、本物質の誘導体
のＥニーマススペクトル等による構造解析の結果、本物
質は下記の構造を有することが明らかとなった。

１ ゜〈３＼。Ｈ，。

抗生物質フォスアラジンの生物学的性質について述べる
と、次のとおりである。

（１）抗菌活性 寒天希釈法による最小発育阻止濃度（Ｍ工Ｃ）は、第１
表に示すとおりである。抗生物質フォスアラジンは、天
然培地では抗菌性を示さないが、合成培地では抗菌性を
示す。また、例えば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ　ｓｕｂｔｉｌ
ｉｇに対する活性は、合成培地にグルタミンを添加する
ことにより、拮抗する。

＠１表 （Ｍｉｃｒｏｃｏｃｃｕｓ　１ｕｔｅｕａ）（２）殺草
活性 抗生物質フォスアラジンの植物に対する殺草活性は、次
のような方法により行なった。

すなわち、縦１ＯｃＷ１、横１６ｃｒｎ、深さ５ｔｖ１
のプラスチック製容器に殺菌した洪積土壌を入れ、供試
植物としてシコクビエ、メヒシバ、イネ、コムギ、ネギ
、キャベツ、ニンジン、ゴ？つ、ナス、ダイコン、キュ
ウリ、ダイズを４１ｉ種し、葉令１〜４になった時に供
試薬剤である抗生物質フォスアラジンの所定濃度ｎ　２
．Ｏｍ／（２５０ｔ／１０ａ相当）を茎奪に均一に散布
した。調査は処理８日、１４日後に薬害程噛＜−：ｓし
、＋：すこし有り、廿：かなり有り、＋１＋：ひどく有
り）について行った。その結果を第２表に示す。

芭２表　植物に対する薬害の程度 以上のように、抗生物質フォスアラジンは、第１表に示
したとおり、グラム陽性細菌、グラム陰性細菌および真
菌に対して活性を示すことから、抗菌剤としてこれらの
細菌および真菌に起因する植物の疾病の予防あるいは治
療に用いられることが考えられるが、さらに本物質の作
用特性と、その利用に関して研究した結果、第２表に示
されるように、広範囲の植物に対して殺草活性を現わす
ことから、非選択的な除草剤として用いられることが期
待される。

上記した抗生物質フォスアラジンの理化学的性質、構造
式および生物学的性質を、既知抗生物質のそれらと比較
した結果、既知抗生物質に該当するものがなく、抗生物
質フォスアラジンけ、新規な抗生物質であることがわか
った。

本発明による抗生物質７オスアラシ／の製造方法は、抗
生物質フォスアラジン生産能力を有する放線菌を培地に
好気的に培１トシて、培養液中に抗生物質フォスアラジ
ンを蓄積させ、培養液からこれを採取Ｊることを特徴と
している。

抗生物質フォスアラジンを生産する能力を有する限り、
どのような菌株も本発明の目的に用いることができる。

実施例に記載された菌株は、本発明者によって新たに土
壌よシ分離された放線菌ＫＡ−３３８株であるが、抗生
物質フォスアラジンの生産能力を有する限り、この菌株
から自然的または人工的に誘導された変異株も、抗生物
質フォスアラジンの生産に用いることができる。

上記の菌株、放線菌ＫＡ−３３８株は、工業技術院微生
物工業技術研究所に１９８３年７月１８日に微工研菌寄
第７１５６号として寄託されている。

その菌学的性状は次のとおりである。

（Ｉ）　形態的性状 栄養菌糸は、各種寒天培地上でよく発達し、通常は隔壁
を有しない。気菌糸は、イースト・麦芽寒天、オートミ
ール寒天で豊富に着生し、ビロード状を呈する。顕微鏡
下の観察では、胞子網は主として直線状（Ｒｅａｔｕａ
−Ｆユｅｘｉ　’ｂｉＬｉ　ｅ型）であり、１０個以上
の胞子の連鎖が認められる。胞子の大きさは、０．９　
Ｘ　Ｏ，９〜１．８μｍで、円筒状であり、胞子表面は
平滑である。

菌核、胞子のうおよび遊走子は観察されない。

（Ｕ）　各種寒天培地での性状 イー−ビー・シャーリング（Ｅ、Ｂ、　Ｓｈｆｒｌｉｎ
ｇ）とディー・ゴツトリーブ（Ｄ、ＧＯｔｔｌｉｅ’ｂ
　）の方法（インターナショナル・ジャーナル・オブ・
ンステイマテツク・バクテリオワジー１６巻、３１３頁
、１９６６年）によって調べた本生産菌の培養性状を次
表に示す。色調は、標準色として、カラー−ハーモニー
・マニュアル第４版（コンテナー・コーポレーション・
オブ・アメリカ、シカゴ、１９５８年）を用いて決定し
、色名とともに括弧内にそのコードを併せて記した。

以下は、特記しない限り、２７℃、２週間目の各培地に
おける観察の結果である。

（２）生理的諸性状 （１）　メラニン色素の生成 （イ）チロシン寒天　陰性 （ロ）　ペプトン・イースト・鉄寒天　陰性（ハ）　ト
リプトン・イースト液　陰性（２）チロシナーゼ反応　
陰性 （３）硫化水素の生産　陰性 （４）硝酸塩の還元　陽性 （５）　スターチの加水分解　陽性 （６）脱脂乳の凝固（３７°Ｃ）　陰性（７）　脱脂乳
の４プトン化（３７℃）　陽性１８）生育温度範囲　１
５〜４２°Ｃ ００）　セルロースの分解　陽性 （（１）細胞の化学分析 細胞壁のジアミノピメリン酸は、ＬＬ−型およびｍθｓ
〇−型の２種類をともに有し、グリコレート試験は、ア
セルチル型であり、リン脂質は、ＰＴｒ型であった。

以上、本菌の蘭学的性状を要約すると、次のとおりにな
る。形態的には、直線状の胞子鎖を形成し、円筒状の胞
子の表面は、平滑である。

また、菌核、胞子のうおよび遊走子は認められない。培
養上の諸性質としては、栄養菌糸はイエロー系の色調を
呈し、気菌糸は、ホワイトからグレーの色調を持つ。メ
ラニン色素、可溶性色素の生産は認められない。このよ
うな性状に加え、細胞の化学分析、特に、ＬＬ−型、ｍ
ｅθ０−型の２種類のジアミノピメリン酸をともに有す
る点から、本菌はＫｉｔａｓａｔｏｓｐｏｒｉａ　５ｅ
ｔａｌｂａ（ジャーナル・オブ・アンティ／Ｊイオテイ
クスお巻、１０１３頁、１９８２年）に類似する放線菌
と考えられるが、本菌は、セルロース、Ｌ−ラムノース
、ラフィノースを資化する点、Ｋｉｔａθａｔｏ−ｓｐ
ｏｒｉａθθｔａｌｂａ　とは、明らかに異なる。

本発明の方法において、抗生物質フォスアラジンを生産
する培地としては、微生物の培養に常用される炭素源、
窒素源、無機物等を含む各種の培地を使用することがで
きる。例えば、培地の炭素源としては、ブドウ糖、麦芽
糖、乳糖、ショ糖、デンプン、デキストリン、オートミ
ール、グリセリン、水あめ、糖蜜などである。また、窒
素源としては、大豆粉、コーンスチープリカー、綿実粉
、ペプトン、肉エキス、乾燥酵母、カゼイン加水分解物
、トマト被−スト、アンモニウム塩、硝酸塩などである
。その他、必要に応じて炭酸カルシウム、塩化ナトリウ
ム、塩化カリウム、リン酸塩等の無機塩類を添加するほ
か、菌の発育を助け、抗生物質フォスアラジンの生産を
促進するごとき有機および無機物を適当に添加すること
ができる。

培養法としては、一般抗生物質生産の方法と同じく、液
体培養法、特に、深部培養法が最も適している。培養は
通常、好気的条件下で行なわれ、通気攪拌培養が好適で
ある。培養温度は、微生物が発育し、抗生物質フォスア
ラジンを生産する範囲で適宜変更できるが、好ましいの
は頷〜４０℃である。ｐＨは６〜７が好ましい。培養時
間は、種々の条件によって異なるが、通常、２日〜５日
程度で培養液中に蓄積される抗生物質フォスアラジンが
最高力価に達する。

培養終了後、培養液からの抗生物質フォスアラジンの採
取は、微生物の培養液より、前述の理化学的性質を有す
る抗生物質を分離精製する公知の手段を単独または組み
合せて行なうことができる。

抗生物質フォスアラジンは、主として培養物の液体部分
に存在し、前記の理化学的性質で示すように水溶性の両
性物質であるので、その抽出、ｉｗ製にあたっては、ア
ンバーライトエＲ１２０、ダウエックス５０Ｗ等の陽イ
オン交換樹脂もしくは、アンバーライトｒＲＡ　４００
、工Ｒ４５等の陰イオン交換樹脂に吸着させ、これを適
当な酸、アルカリもし・くけ、塩溶液を用いて溶出する
ことができる。あるいは、培養液を活性炭に吸着させ、
含水アセトン、含水メタノール等などの適当な含水有機
溶剤を用いて溶出することができる。

実用的な分離精製法の一例を示すと次のとおりである。

例えば、培養ｆ液を活性炭を充填したカラムを通過させ
、有効成分を活性炭に吸着させ、これを含水アセトンで
溶出する方法は、抗生物質フォスアラジンの精製法とし
て有効な手段である。このような方法で得られた抗生物
質フォスアラジンの組物質は、セルロース、シリカダル
、アルミナ、セファデックスおよびトヨ／？−ル等を使
用する公知の方法によりクロマトグラフィーなどを行な
うことにより、さらに純度を高めることができる。かく
して得られた抗生物質フォスアラジンは、白色の無定形
粉末であり、その理化学的性質および構造式ならびに生
物学的性質は、前に述べたとおシである。

なお、生産される抗生物質フォスアラジンの検定にあた
っては、次の方法が用いられる。検定用培養基としては
、合成培地であるデービス最少培地を、検定菌としては
、バチルス・ズブチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　５ｕｂｔ
ｉｌｉθ）を用いる。抗生物質フォスアラジンは、これ
を用いたペーノソーディスク法により検定を行なう。

次に本発明の抗生物質７オスアラシンの実施例を示すが
、この実施例は単なる一例を示すものであって、本発明
を限定するものではない。

すなわち、ここに例示しない多くの変形あるいは、修飾
子一段を用いうろことはもちろんである。

実施例 に接種し、γ℃で２日間振とり培養後、３０を容ジャー
ファーメンター中２０ｔの培地に、１チの割合で接種し
、２７’Ｃ１鑓時間、通気−１ｉ　１０　ｔ　／分、攪
拌２５０　ｒ、　ｐ、　ｍ、の条件で通気攪拌培養を行
なった。

種培地の組成は、グルコースｏ、ｉｓ、デ／デン２．４
チ、ベゾトン０．３係、肉エキス０．３係、酵母エキス
０．５％、炭酸カルシウム０．４　％であり、本培地の
組成は、グルコース０．２％、）マドピユーレ４．０係
、オートミール１．５％で、それぞれｐＨ７，０、ｐＨ
６，０に調整した後、１２１６Ｃで１５分間滅菌した。

培養物２０ｔをシャープレス型遠心機で遠心分離して（
１００００ｒ、ｐ、ｍ、　）、培養ｒ液と菌体に分別す
る。ここで得た培養ｆ液を６Ｎ−塩酸でｐＨ２，０に調
整した後、活性炭を充填したカラム（ｓｏｏ　ｒ　）を
通過させ、有効成分を吸着させ、引き続き水２０ｔで洗
浄する。活性炭カラムは、３０％アセトン水溶液で溶出
し、ｌｔづつ分画した。活性区分（三角・フラスコＮｎ
ｌ〜８）を減圧製網し、凍結乾燥を行ない淡黄褐色の粗
粉末１２２を得だ。このようにして得た粗粉末１２りを
、セルロース３８０タヲ、エタノール／水（Ｓａ＞：Ｘ
）の混合溶媒で充填したカラムＫがけ、エタノール／水
（ｔＯ：ｔ）の混合溶媒処て展開し、１８＃！／づつ分
画した。活性画分（フラクションＮｎ６０〜１１０）を
減圧濃縮後、凍結乾燥し３６５ｆを得た。

さらに、これをセルロース２１Ｏｆを、ブタノール／酢
酸／水（１６０：　１　：　２　）で充填したカラムＫ
かけ、ブタノール／酢酸／水（８０：　１　：２）で展
開し、１８Ｍ１づつ分画した。ここで得た活性分画（フ
ラクション陽２７〜５５）を減圧濃縮後、凍結乾燥し２
．Ｏｆを得た。次に、あらかじめ水で充填したトヨパー
ルＨＷ　−４０カラム（５００ｍｌ）にかけ蒸留水にて
展開し、１８−づつ分画した。

抗菌活性を示すフラクションＮｎ１９〜３９を減圧濃縮
後、凍結乾燥し１．１２を得た。さらＫ、このものを、
あらかじめ水で充填したセファデックスＬＨ−２０カラ
ム（７００ｍｌ　）にかけ、蒸留水にて展開し、１０　
ｍｌづつ分画した。活性画分（フラクションｈｈ　５５
〜６６）を減圧濃縮後、凍結乾燥することにより淡黄白
色粉末６００　Ｗｔｇを得た。この粉末３７０１１１２
を用いてセルロース分取薄層クロマトグラフィー〔フナ
コシ、アビセル８Ｆ、展開溶媒：デロパノール／酢酸／
水（４：１：１）、Ｒｒ値０．７２　］でｆｆＩ製を行
ない、白色粉末２１０１ｎｇを得た。

さらにこのものを、あらかじめ水で充填したトヨパール
ＨＷ　−４０カラム（５００ｒｔｔｌ　）にかけ、蒸留
水で展開し５　ｍｅづつ分画した。活性分画（フラクシ
ョンＮ１１４８〜６８）を減圧濃縮後、凍結乾燥するこ
とにより１６０■の白色粉末を得た。次Ｋ、ここで得た
白色粉末を、あらかじめ水で充填したセファデックスＬ
Ｈ−２０カラム（７００ａｇ　）にかけ、蒸留水で展開
し５ｄづつ分画し、セルロース薄層クロマトグラフィー
〔メルク、セルロースＦ２５４、展開溶媒：ブタノール
／酢酸／水（４：１：１）、Ｒｆ値０．７２　）で単一
ス２ットを与える活性画分（フラクション陽７９〜８９
）を減圧濃縮し、凍結乾燥することにより、抗生物質フ
ォスアラジンの白色粉末１３０　ｍｇを得た。

【図面の簡単な説明】

第１図は、抗生物質フォスアラシンの臭化カリウム錠中
で測定した赤外吸収スペクトルである。 第２図は、抗生物質フォスアラジンの重水中で測定した
プロトン核磁気共鳴スペクトルである。 （自発的）手続補正書 昭和５８年　特許　願第１４１４０１号およびその製造
方法 ３、　補正をする者 事件との関係　特許出願人 住　所　東京都世田谷区瀬田５−１２−７氏　名（名称
）大　村　智 ４・　代　理　人　電話　３５３−５５２１住　所　東
京都新宿区乍濃町１１番地 ５　補正命令の日付 １）　明細書の特許請求の範囲の記載を別紙の通り３補
正スル°　・　を　キタサトスポリア属３）　同第１２
頁１４行、「菌寄第７１５６号」を１条寄第３５８号」
に補正する。 ４）　同第１６頁１３〜１８行、「（９）炭素源の・・
・・・・・・・・・・陽性」を次の通り補正する。 「（９）炭素源の利用性（ブリドノ−ム・ゴツトリープ
寒天培地） 利用する：Ｄ−グルコース、Ｌ−ア ラビノース、Ｄ−キシロ ース、Ｌ−ラムノース、 ラフィノース、シュータ ロース、Ｄ−フルクト− ス 利用しない：ｌ−イノシトール、Ｄ− マンニトール （１０）セルロースの分解　陰性」 ［５）　同第１７頁１５行、「セルロース、」を削除す
る。 （６）　同第１９頁１２行、［７：／Ａ−：ｌｉ’（ト
ＩｒＬ１２０」の後に「（米国、ローム・アンド・］・
−ス社製）」を加入する。 （７）　同１３行、「ダウエックス５０ＷＪの後に「（
米国、ダウ・ケミカル社製）」を加入する０（８）　同
第２０頁８行、「セファデックス」の後に「（スエーデ
ン国、ファルマシア・ファイン・ケミカルス社製）」を
加入する。 （９）　同行、「トヨ／ｑ−ル」の後に［（東洋曹達工
業膜）」を加入する。 （１０）同第２１頁１行、「検定を行なう。」の後に次
の通り加入する。 ［本発明によるフォスアラジンを常法Ｖこよシ処理する
ことによって、たとえばモノおよび二ナトリウム塩、モ
ノおよびニカリウム塩のようｆＫ　フルカリ金属塩やモ
ノエチレンジアミン塩、モノメチレンジアミン塩、モノ
イソプロピルアミン塩およびモノｎ−ブチルアミン塩の
ようなアミン塩とすることもできる。従って、本発明に
よるフォスアラジンおよびその塩を次の一般式で示すこ
とができる。 （式中、ＭｌおよびＭ２は同じでも異なってもよく、そ
れぞれ水素原子、もしくはナトリウム原子、カリウム原
子、リチウム原子、銅原子、マグネシウム原子、カルシ
ウム原子、亜鉛原子、ニッケル原子、マンガン原子、ア
ンモニウムおよび１〜４の低級アルキル、低級ハイドロ
キシルもしくは低級アルケニルアンモニウムのカチオン
を意味する。Ａは、塩酸、硫酸、臭化水素酸、リン酸、
過塩素酸、硝酸、酢酸、プロピオン酸、クエン酸、酒石
酸、モノクロル酢酸、トリクロル酢酸、トリフルオロ酢
酸から選ばれた無機酸または有機酸を意味する。ｎは、
０．０．５もしくは１であり、ｐはＭｌの価数の逆数で
あシ、（はＭ２の価数の逆数である。）」 （川　同８行、「菌寄第７１５６号」を「条寄第３５８
号」に補正する。 （１２）同第２４頁９行、「得た。」の後に次の通りカ
ロ入する。 ［実施例２ 放線菌ＫＡ−３３８株（微工研条寄第３５８号）をグル
コース０．１％、澱粉２．４受、ペプトン０．３係、肉
エキス０．３チ、酵母エキス０．５チ、Ｃ＆ＧＯ３０，
４％、ｐＨ７の液体培地１１Ｖｃ接種し、２７℃、４８
時間通′気攪拌培養し、これを種母とした。 トマトペースト４．０チ、グルコース０．２チ、オート
　ミ　−　ル　１．ｓ％　、ＧａＣｌ２　５０　μｍ／
／　１３　、　ｐＨ６，０の液体培地ｒｏｌに前記種母
を接種し、２７℃、７２時間通気攪拌培養した。培養液
をｐｉ４６．０に調整後、シャープレス型遠心機で遠心
分離し、培養上澄を得た。この上澄液を弱塩基性陰イオ
ン交換樹脂ダイヤイオンＷＡ−３０（ＯＨ−：］　（三
菱化成工業ｌりを充填したカラム（１，４１）に通過さ
せ有効成分を吸着させた。引き続き水洗後０．５Ｎ塩酸
で溶出し、各５００ｄに分画し、分画Ｎｏ。 ３〜１０を集めた。次いで活性炭を充填したカラム（直
径５　ｍ　Ｘ　３１．５薗）を通過させ有効成分を吸着
させた。引き続きカラムを水洗後、３０チアセトン水溶
液で溶出させた。各２０コの分画に分はフラクションＮ
ｏ、１５〜５５を集め、次いで強酸性陽イオン交換樹脂
アンノーライ）ＩＲ１２０Ｂ（米国、ローム・アンド・
）・−ス社製）を充填したカラム（５ｃｍＸ２７ｃｍ　
）に通過させ、有効成分を吸着させた。引き続きカラム
を水洗後、０．５Ｎアンモニア水で溶出させた。各２０
フの分画に分け、フラクションＮＯ，９８〜１５２ヲ集
メ、減圧下濃縮後、エタノール（２００７ｄ）を加え沈
澱を生じさせた。上澄を集め、減圧濃縮後、アセトン２
０倍量を加え、フォスアラジン１．４４Ｊｉ’を得た。 このものを水に溶解せしめ、Ｉ　Ｎ　ＮａＯＨテ中和せ
しめた。減圧乾固し、フォスアラジン（ナトリウム塩）
　１．５９を得た。 実施例３ フォスアラジン３６５１１１ｐ（１ミリモル）を少量の
水に溶解せしめ、Ｉ　Ｎ、Ｎａ０ｉ（水溶液１コ（１ミ
リモル）を添加した後、減圧乾固し、フォスアラジンナ
トリウム塩３７９１１９を得た。同様にフォスアラジン
３６５〜の水溶液に対し、ｌＮＮａＯＨ水溶液２ｄを添
加し、減圧乾固し、７オスアラシン二ナトリウム塩４１
１　ｒｖを得た。また同様の方法によりＩ　Ｎ　ＮｔＯ
Ｈ水溶液にかえ、Ｉ　Ｎ　ＫＯＨ水溶液を用いて、フオ
スアラシンカリクム塩およびフオスアラシンニカリウム
塩をそれぞれ４０４■、および４４３ダを得た。また同
様にＮａ０Ｆにかえ、イソプロピルアミン１ミリモル、
およびｎ−ブチルアミン１ミリモルを用いて、それぞれ
フォスアラジンモノインプロピルアミン塩およびフォス
アラシンモノ−ｎ−ブチルアミン塩１ミリモルを得た。 」 特許請求の範囲 （１）　下記の一般式で示される抗生物質フォスアラジ
ンおよびその塩。 〈は１であり、ｐはＭｌの価数の逆数であシ、ｑ培地に
好気的に培養し、培養液中に抗生物質フォスアラジンを
蓄積させ、培養液からこれを採取することを特徴とする
抗生物質フォスアラジンの製造方法。 橿 （３）微生物が放線菌ＫＡ−３３８（微工研を寄第罎１
号）である特許請求の範囲第２項記載の抗生物質フォス
アラジンの製造方法。 （自発的）手　続　補　正　書　（方式）％式％ ］　事件の表示 昭和５８年　特許　願第１４１４０１号３、　補正をす
る者 事件との関係　特許出顕人 住　１・Ｊ、　東京都世田谷区瀬田５−１２−７氏　名
（名称）大　村　智 ４゛　代　理　人　電話　３５３−５１５２１（自発的
）手続補正書 昭和５９年ｌθ月１７日 昭和５８年　特許　願第１４１４０１号事件と。関係　
特許出願人 住＋叶　東京都世田谷区瀬田５−１２−７氏　名（名称
）大　村　智 ４・　代　理　人　電話　３５３−５５２１８、補正の
内容 ｔｌｌ　明細書第１６頁下から４行、ｒ［ＩＶｌ　細胞
の化学分析」の前にｒ　（１１）　ゼラチンの液化　陰
性」を加入する。 （２）同第１７角１５行、「本菌は、」の後に「Ｄ−フ
ルクトース、しよ糖、」を加入する。

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）下記の構造式を有する抗生物質フォスアラジンお
   よびその塩。 １
2. （２）抗生物質フォスアラジンを生産する能力を有する
   放線菌を培地に好気的に培養し、培養液中に抗生物質フ
   ォスアラジンを蓄積させ、培養液からこれを採取するこ
   とを特徴とする特許請求の範囲第一１項記載の抗生物質
   フォスアラジンの製造方法。
3. （３）微生物が放線菌ＫＡ−３３８（微工研菌寄第７１
   ５６号）である特許請求の範囲第２項記載の抗生物質フ
   ォスアラジンの製造方法。