JPS6043346A - 食品からの遊離アミンの酵素的除去法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は食品からの遊離アミンの酵素的除去に関しそし
て特にこの除去を行うためのアミンオキシダーゼ酵素の
使用に関するものである。本明細書において食品とは飲
料及び固体状の食料品を包含する。

〔従来の技術〕

多くの食品は食品の製造に用いら力、る方法の生成物を
含む微生物的又は合成的方法の生成物であろうか又は天
然に存在しているであろう遊離のアミンを含有している
。こ力、らアミンの成るもの特にチラミン及びフェニル
エチルアミンは偏頭痛を生じばせると関停づけられて来
ておりその理由のため偏頭痛の患者はしばしばチョコレ
ート、チーズ、特に熟成したチーズ、サラミ、ワイン及
び酵母抽出物を含む遊離アミン含量の高い食品を避ける
ように忠告さねでいる。その上飲食物中の遊離アミンの
存在はモノアミンオキシダーゼ抑制剤（ＭＡＯＩ）を用
いるうつ病の治療を重大に妨害するこ七もありうる。Ｍ
Ａ、ＯＩ治療を受けている患者は摂取したアミンを代謝
する能力を著しるしく減退せしめら力そして遊離アミン
の畜積は珍らしい例であるが死に至らしめら力る。又こ
の問題は遊離アミンを多量に有する食品を避けることに
よってのみ克服されつる。

英国特許第２０３１９４８号はヒスタミンの直接の前駆
物質であるヒスチジンを破壊する酵素的処理により食品
からヒスタミンを除去することを記載している。しかし
これは遊離アミンを除去する一般的な方法ではなくそし
て食品におけるヒスタミン含量の減少のみに関している
。

〔発明が解決しようとする問題点１ 食品中の遊離アミンの荀−は製造方法中の適尚な段階で
アミンオキシダーゼ酵素により処理することにより減少
せしめられるであろうことが見出された。

〔問題点を解決するに、めの手段〕

本発明によればそれ故分子状酸素の存在下食品とアミン
オキシダーゼ酵素とを接触させることよりなる食品の遊
離のアミン含量゛を減少ζせる方法が提供さ１＋、る。

好適な酵素はモノアミンオキシダーゼ及びジアミンオキ
シダーゼであるが後者はその広い基質特異性のため好ま
しい。この酵素は遊離アミンの酸化的脱アミン化を触媒
化してアルデヒドにする。

この反応は極端なｐＨ１温度及びイオン濃度が避けられ
るならば種々の条件下で実施されてよい。

特に条件は酵素が所望の反応を触媒化するのに充分な時
間変性又は劣化されなり条件でなければならない。

任童の特別な酵素にとり最適の性能を与える条件ｔｉ自
業者により容易に正確に決定されるであろう。

１０〜７０℃好１しくに２０〜５０℃例えば３５℃の範
囲の温度及び２〜ｌＯ好ましくは７〜９例えばｐｉ（ｇ
の範囲のｐＨを用いるのが有利であることが分った。

アミンオキシダーゼ酵素は遊離アミンに加えて遊離の分
子状酸素を必要とする。通常処理される食品中には充分
な酸素が存在しようがしかし成る場合には案分の酸素を
加えるのが望ましいことが分るだろう。

モノ及びジアミンオキシダーゼは種々の源例えば哺乳動
物の組織から及び微生物から得られるであろう。アスペ
ルギルス（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　）属の菌特にアス
ペルギルス・ニゲル（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅ
ｒ　）例えばＩＭ１１７４５４の寄託番号でコモンウエ
ルス　マイコロジカル　インスティチュート（Ｃｏｍｍ
ｏｎｗｅａｌｔｈ　Ｍｙｃｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｉｎ５ｔ
ｉｔｕｔｅ　）Ｋ寄託されたアスペルギルス・ニゲル（
Ａ、ｎｉｇｅｒ）の菌株からジアミンオキシダーゼを得
るのが特に有利であることが分った。この後者の菌から
の酵素はその広い基質特異性のために好まガる。酸化さ
れる基質はチラミン、フェニルエチルアミン、トリプト
アミン、ｎ−ブチルアミン、プトレシン、ベンジルアミ
ン及びヒスタミンを含む。酵素は銅及びビリドキサルホ
スフエートの両方を含むことが明らかにされておりそれ
故国際的に認められた命名法により１．４．３．６型と
して広く分類される。しかし酵素は他の菌株及び種から
そして他の微生物から得られよう。ジアミンオキシダー
ゼの他の源は酵母サツカロミコプシス　リボリティ力（
５ａｃｃｈａｒｏ　ｍｙｃｏｐｓｉｓ　１ｉｐｏｌｙｔ
ｉｃａ）であることが分っている。

これらの酵素は人間のアミンオキシダーゼのそれとほぼ
相当する範囲の基質を有することが分っており従ってさ
もなければＭＡＯＩ治療を妨害するであろう遊離のアミ
ンを破壊するのに特に有用である。

酵素「ヒスタミン含量」はヒスタミン含量゛を減少させ
るはかりでなく他の遊離のアミンの含量を減少させる点
て本発明において又有用である。それはこの名前が明ら
かに誤りでありそしてこの酵素が実際にジアミンオキシ
ダーゼであるからである。

酵素は酵素の生産を誘起する遊離のアミンを含む培養培
地中で選択された菌を培養することにより得られよう。

適当な度合の成長が生じたときもし微生物により分泌さ
れるならば培養培地から又は細胞を粉砕しそして通常の
方法により得られた溶液から酵素を抽出することにより
得られよう。

この方法は例えば山田らＡｇｒ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、
２９（７）。

６４９〜６５４（１９６５）により記載されている。

るのに用いら力よう。有利には酵素は食品が液状好せし
ぐに中程変に濃縮された形ではあるがそれ程濃縮されて
おらず酵素が遊離アミンの酸化が生ずる前に変性又は沈
澱する形の段階で添加されよう。前述したように温度及
びｐＨの榮件は又生ずる酵素的反応に適していなけ力、
ばならない。ｐＨ及び温度はもし必要ならば好適な条件
を生ずるように調節されそして次にもし必要ならば製造
工程が続けられる前に再調節さねでもよい。

溶液中の酵素は塩基性安定剤例えば硫酸アンモニウム又
はソルビトール好ましくはソルビトールを用いて安定化
されてもよい。保存剤は又添加されてもよく例えば安息
香酸、ヒドロキシ安息香酸及びソルビン酸カリウムがあ
る。

溶液中の酵素の使用の代りに又はそれに加えて食品は不
溶性の支持体上の不動化された酵素により処理きれても
よい。不動化された酵素用のこの支杵体は公知でありそ
して通常の如く用いられる。

酵素は通常の物理的又は化学的方法例えば軽部ら、Ｅｎ
ｚｙｍｅ　ａｎｄ　Ｍｉｃｒｏｂ、Ｔｅｃｈｎｏｌ、２
　＋　１１７　（１９８０）によりａｅ軟された方法に
より支持体に付着されてもよい。

食品が酵素により処理される正確な方法は関係する製造
方法の性質に依存しようしそして最適のものはそれぞれ
の特定の例において容易にめられよう。

前述した様にアミンオキシダーゼ酵素は用いられて食品
の遊離アミン含量を減少せしめるだろう。

遊離アミンが完全に除去されるかどうかは食品が酵素に
曝される時間の長さに依存しよう。従って遊離アミン含
量は反応時間を選択することにより適当な水準に調節さ
れうる。

成る場合には食品の遊離アミン含量が減少されるか又は
遊離のアミンが完全に除去されるが遊離アミンが製造工
程の後の段階でさらに発生されるであろうことを注意す
べきである。これは熟成が遊離アミンを生成する熟成し
たチーズで特に真実でありそして事実これらは熟成した
チーズの味及び匂いについて部分的に関係があ３、ｊ。

酵素的触媒化が完成するか又は満足な段階に達すると反
応は酵素を変性することにより停止されよう。多くの食
品の製造工程は工程の後で加熱滅菌段階を含んでいるの
でこれは酵素を変性するのに充分であろう。酵素を変性
することは望ましいがそ力は必須ではない。予備的な毒
性学的テストは酵素が有害ではなくそして食品に含まれ
ても安全であることを示している。

本発明の特別な態様において製造の適当な段階において
酵母抽出物とアミンオキシダーゼ酵素とを接触させそし
て次に酵素を変性することによりなる酵母抽出物の遊離
アミン含量を減少させる方法が提供される。

チーズ製造においてフレーバーを改良するための他の酵
素処理がしばしば適用されるときアミンオキシダーゼは
有利には工程の早い段階中に加えられよう。後の段階に
おける処理は充分な酸素がないため制限されよう。これ
は特に長い熟成期間を経ている成熟したチーズに適用さ
れる。

ビール及びワインの製造において処理は充分な溶解した
酸素が存在するとき醗酵前に適用されよう。

成る場合には食品の製造の種々の段階における条件は本
発明の方法によりアミンオキシダーゼ酵素の使用にとり
好１しくないことがありそして要求されるぞｎらに条件
を調節することは食品にとって実施不能であるか又は有
害であることがある。

この場合不動化が酵素を極端な温度、ｐＨ又はイオン濃
度について一層安定にするのであろうから前述した如く
不動化アミンオキシダーゼを用いることが出来よう。

酵母抽出物の製造は細胞の破壊、細胞の残がいの除去及
び液体の濃縮、処理の段階を含む。遊離アミンの酵素的
破壊は適当には抽出物の濃縮工程の中間的な段階で行わ
れる。

好適な精製された酵素例えばアスペルギルス・ニゲル（
Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ　）　（Ｉ　Ｍ　
Ｉ　１７４５４）から抽出さねたものは−及び温度が前
述の範囲に調節された後に添加されそしてもし必要なら
ば抽出物の溶解された酸素含有量は適当な量に調節され
る。有利には抽出物は酵素的反応を進ませるために数時
間〜数日の間装置される。酵素は後で酵母抽出製造工程
の後の部分における加熱段階により変性される。

一方抽出物は不動化酵素の床の上又は中を流れるように
せしめられよう。この場合工程は酵素が抽出物を直接添
加さ力るときバラチェ相よりむしろ連続的に行わｎよう
。もし連続的工程の如く行われるならば抽出物の流速は
酵素的反応が生ずるに充分な時間かけるように調節され
ねばならない。

同様な方法は他の食品例えばワイン、ビール、魚、チー
ズ、乳製品、チョコレート及び肉ペーストの加工中に採
用されよう。そ若ぞれの場合酵素は方法の液状段階に加
えられそして魚、チーズ、肉ペーストに適用されるとき
固体が粉砕した形であって固体の大きな表面積が酵素に
曝さハるとき好１しぐは添加される。

この固体を処理するに当って粒子の内部が必ずしも酵素
と接触しないので遊離アミンの完全な除去を達成するこ
とは不可能であろう、しかし遊離アミン含量の任章の減
少は有利であると考えられ−ることは理解すべきである
。

ビール製造の場合処理は好ましくは麦芽汁に適用されそ
れは酵母により醗酵されてビールを製造する培地である
。麦芽汁の製造に当って大麦は発芽が始する１で１ず水
を数回変えつフ浸漬される。

数日後発芽が収穫しそして材料をコントロールされた条
件下で乾燥して麦芽を得る。麦芽を次に細い粉末に砕き
水を加えそして限定された温度処理を用いて熱を加える
。これは「磨砕（ｍａｓｈｉｎｇ）Ｊ段階として知られ
ておりその間麦芽酵素は炭水化物及び蛋白質の重合体を
劣化させる。濾過後ホップを加えそして麦芽汁を煮沸し
そしてそれにより滅菌する。煮沸の完了後加熱した麦芽
汁をストレーナ−を通してポンプして残渣を除き次にピ
ッチング（ｐｉ　ｔｃｈｉｎｇ　）酵母の添加前に放冷
される。

ビールよりむしろ麦芽汁の処理は温度、…及び溶存酸素
の最高量により生ずる望ましくないフレーバーの変化を
生じさせないようである。しかし煮沸段階後の麦芽汁の
処理は最終のビールを通して活性なアミンオキシダーゼ
の生存に助けとなろう。もしこれが問題であることが分
るならば酵素は磨砕段階で適用されようがこの点におけ
る条件は勿論最大のアミンオキシダーゼ活性にとり好適
ではないであろう。

〔実施例〕

本発明は下記の実施例を参照して説明されようがそノ］
、らは本発明を制限しようとするものではない０ 実施例Ｊ 酵素の製造 ７　スヘＪｌ、ギルス警ニゲル（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
ｓ　ｎｉｇｅｒ）（ＩＭＩ　］７４５４）を４℃に貯え
たじゃがいもデキストロース寒天（ＰＤＡ）斜面に維持
し毎月植えつい穴。

菌を次の如く培養した。

ＰＤＡ斜面からの胞子を硝酸塩培地（１ｎｆｒａ　）（
１０＊）に懸濁させそして懸濁液を用いて硝酸塩培地（
そ力ぞれ１５０ｍ１）を含む培養フラスコに接種した。

フラスコを往復振盪させつつ２０°Ｃで２４時間培養し
た。接種物を硝酸塩培地（８ｅ）を含むジャー醗酵槽に
接種しそして油気しつつ２０℃で２４時間培養した。菌
糸成長物を滅菌ブツフナーフラスコ及び漏斗を用いて収
得しそしてｎ−ブチＪＬ　７ミン培地（１ｎｆｒａ　）
　（８ｅ　）を含むブラウン醗酵槽に移した。醗酵槽を
１ｇ７分／ｅ培地の空気流で３０℃に保ちそして攪拌（
４００ｒｐｍ　）　Ｉ、た。醗酵槽中の泡の高さをシリ
コーン油止め剤（滅菌）の自動化さｔ″Ｉ−た添加によ
りコントロールさねそしてｐＨはｎ−ブチルアミン（１
，０Ｍ）の自動化された添加によりｐＨ５，０〜５．８
の範囲に保たれた。１７時間後ｎ−ブチルアミン培地中
で成長した細胞を濾過により得た。

酵素の単離 下ｇＰの段階を約５℃で行ったＯ ｎ−ブチルアミン培地から得た菌株を５℃で洗った（蓋
留水）。濾過ケーキを約５分間冷した乳鉢中で海砂とと
もに砕いた。生成物を燐酸塩緩衝液（０，０１Ｍ　、　
ｐＨ７，０）中に懸濁しそして遠心分離（６０００Ｘ＆
、１（１分間）して細胞の残がい及び海砂を除いた。上
澄み液を２４時間燐酸塩緩衝液（０，００５Ｍ　、　ｐ
Ｈ７，０，１０７１りを用いて透析した。透析物を粗酵
素製品として用いた。

酵素を必要ならば通常の方法によりさらに精製しそして
結晶形で得られようが実際には比較的粗製の酵素でも工
業上の規模では用いられよう。

培養培地 「硝酸塩培地」 ％　檀■ グルコース　３．０ 燐酸水素二カリウム　０．１ 硫酸マグネシウム　０．０５ 塩化カリウム　０．０５ 硝酸ナトリウム　ｏ、　ｉ 蒸留水　１００とする 「ｎ−ブチルアミン培地」 「硝酸塩培地」と同じであるが硝酸ナトリウムの代りに
ｎ−ブチルアミン１　％　Ｗ／Ｖ　を用いる。

すべての培地はｐＨ６，０に調節されそして使用前に滅
菌された。

実施例２ 酵母抽出物の遊離アミン含量の減少−バッチ工程 酵母抽出物を高温で自己融解し次に篩分は及び遠心分離
の使用により細胞残がいを分けることにより製造した。

分離した液Ｆｉ６〜８チの処理困難物（溶解した固体）
を含む液であった。液を３５℃に冷し−をアルカリの添
加によりｐＨ７，ｓ〜８．０に調節しそしてアスペルギ
ルス・ニゲル（Ａ。

ｎｉｇｅｒ）（ＩＭＩ　１７４５４）からの精製したジ
アミンオキシダーゼを抽出物１ｅ当り４　Ｘ　１０’酵
素単位で添加した。反応を２時間続けた。抽出物を次に
さらに冷却し蒸発させ静置しそして炉遇しそしてさらに
蒸発して濃縮酵母抽出物を得た。

アミンの量を下記のｈｐｌｃにより分析した。結晶は次
の通りである。

チラミン 酵素処理酵母抽出物　なし。検出されず。

未処理酵母抽出物　４４１μ９７９ ヒスタミン量の定量的減少が又観察された。

実施例３ ビールの遊離アミン含量の減少 酵素適用工程 比重及び全窒素量の異なる３種の麦芽汁サンプルを評価
した。各麦芽汁サンプルについて培養ｐＨの効果を下記
の範囲についてテストした。

（ｉ）麦芽汁の天然のｐＨ（ｐＨ５，０〜５．６〕（ｉ
ｔ）　ＰＨ６，０に調節（０，４Ｎ　ＮａＯＨの使用）
（ｆｉｔ）　ｐＨ７，５に調節〔酵母抽出物工程の分離
液におけるアミンオキシダーゼ適用の最適…〕さらにビ
ールのチラミン含量が分離液のそれと比べて極めて低い
ことが知られているので５０μ９２個とした追加のチラ
ミンを含むサンプルも又上述のｐｌ（値で作った。従っ
て異常に高いチラミン量における麦芽汁のアミンオキシ
ダーゼ活性の有効性が評価出来そして又補正のファクタ
ーを適用されうるために回収も計算された。

各側において１００ｍの麦芽汁を培養フラスコ（２５０
ｍ）に入れそして酵素を４ｅ単位／−の割合で加えた。

麦芽汁〔１〕の処理はそれがこのような低いｐＨは酵素
活性をはなはだしく抑制すると思わ名たので天然の−で
８０単位／ｄの投与割合を含んだ。すべての他の適用は
４０単位／ｄで行われた。

酵素添加の次にフラスコを最大の溶存酸素の利用性を得
るために軌道振盪をしつつ３５℃で培養した。サンプル
を０及び４時間の培養後に除去した０ アミン分析 サンプルを抽出しそしてアミンを酵母抽出物工程の分離
液に適用された標準法（付録参照）に従って定量した。

アミンオキシダーゼ活性の能率 研究された３釉の麦芽汁の詳細は第１表に示される。下
記の観察がなされる。

（１）未処理麦芽汁中のチラミン量は０．８０１〜２、
２２９μ９／ｍｅに及んだ。

（１１）テストされた範囲内でｐＨ７，５が麦芽汁中の
アミンオキシダーゼ活性について最適でありそして高い
チラミン量において有効な酸化を行わせることが明白で
ある。

（ｉｉｉ　）補給されないチラミン量は天然の麦芽汁の
ｐＨで４時間培養後最大に酸化された。

３種の麦芽汁に関する平均の数値は第■表に示さｊ、そ
して上述の指摘を保証する。さらに約５０μ’）／ｍｌ
のチラミン量は４時間培養後の完全な酸化について７．
５のｐＨに依存したことも明らかである。

ヒスタミンは分析された麦芽汁のすべてに検出さ名、な
かった。

２μ’ｊ１ｍｌ迄のチラミン量において４０単位／ｄの
投与割合におけるアミンオキシダーゼ活性は規定さ力た
条件下の４時間培養後の天然の麦芽汁のｐｌ（における
完全な酸化について充分である。それ故これは醸造者が
ｐＨ調節段階の必要なしにアミンオキシダーゼ゛を用い
ることが出来るだろうという可能性を生ずる。

この研究において酵素活性はｐｉ（７，５で最も有効で
あることが分った。従ってスケールの大きな適用におい
てこのｐＨへの調節は最小の酵素の要求及び／又は処理
時間を確かにしよう。

規定さねた条件下通気さｎた麦芽汁へ適用されるときア
スペルギルス・ニゲル（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇ
ｅｒ）（ＩＭＩ　１７４５４）からのアミンオキシダー
ゼハ酸化中チラミン含量を減少させるのに有効である。

２μ９△ｄ迄の天然のチラミン量について４０単位／ｄ
麦芽汁の酵素投与割合は３５°０４時間の攪拌された培
養とともに充分である。これらの条件下の最小の酵素投
与割合は４０単位／ｄよりはるかに低いであろう。

能率の良いチラミン酸化は酵素投与割合及び培養時間の
両者を最小にするであろうｐＨ７，ｓへの調節により保
証さねよう。

第（１）　表　３種の麦芽汁のチラミン含量に対するア
ミンオキシダーゼ適用の効果 −＊−５０μ９／ｍｅヘチラミン添加　ＮＯ：検出され
ず麦芽汁（１） ｐＨ：　５．　ｏ　全窒素＝６７５．（１ｍ９／ｌｌ比
重：１．０４４８　固体含量：１１．４８％Ｗ／Ｖ酵素
投与害り合二　８０単位／　ｍｅ　（ｐＨ５，０）４０
単位／　ｍｌｌ　（ｐＨ６，０） ４０学位／ｙ（ｐＨ７，５） 培養ｐｌ（チラミン濃度　〔μ９／ｄ〕０時間　４時間 ５、（１１，４００ＮＤ ５．０米　５１．３６０　２４．３２ ６．０　１．７４６　ＮＤ ６．０来　５１．６９０　ＮＤ ７．５　１．２］５　ＮＤ ７．５米　５１．３１０　ＮＤ 麦芽汁〔２〕 ｐＨ：５．５５　全室−ｉｉ：６１６．３ｍ９／６比重
：１．０３６５　固体含量：９．１６係Ｗ／Ｖ酵素投与
割合＝　４０単位／ｄ 培養ｐＨチラミン濃度（μ９　／ｍｔ　）０時間　４時
間 ５．５５　２．２２９　ＮＤ ５．５５米　５２．２４０　ＮＤ ６．０　１．４４９　ＮＤ 培養ｐＨチラミン濃度（μ９７ｍｅ　）０時間　４時間 ６．０来　５］、、４２０　ＮＤ ７．５　１．．００５　ＮＤ ７．５’　５０．８６０　ＮＤ 麦芽汁〔３〕 ｐＨ：　５．６０　全窒素：　８ｎ　４゜２　ｍ９　／
　６比重：　ｉ、　０３　］、　９　固体含預：８．２
０係Ｗ／Ｖ酵素投与割合：４０単右’Ｉ　／　ｍｅ培養
ｐＨチラミン濃度（μｇ／ｍｅ） ０時間　４時間 ５．６　０．８０１　ＮＤ ５．６米　５０．８６０　２３．９４ ６、ｎ　Ｏ，ｆｉ１６　ＮＤ ６０米　４７．５６　２５．４５ ７．５　０．８８６　Ｎ１） ７．５米　５０．８１　ＮＤ 第〔２〕表　平均の数値 米チラミンを５０μ＆　Ａｒ、ｌへ添加培養ｐＨチラミ
ン濃度（μ９／ｄ） ０時間　４時間 ５．３８　１．４８　０ ５．３８　５１．４９　１６．０９ ６．０　１．．２７０　０ ６．０米　５０．２２　８．４８ ７．５　１．０３５　０ ７．５米　５０．９９　０ 付録 遊離アミンに対するｈｐｌｃ分析 方法はＭｅ　ｌ　ｌらＪ、Ｌｉｚｕｉｄ　Ｃｈｒｏｍ、
１（３）　２６１〜２７７（１９７８）のそれに基づく
。

食品は遊離アミンについて下肥の如く分析される。

０−フタルアルデヒド誘導化試薬を０−フタルアルデヒ
ド（１６（ｌ１９）をエタノール（３（ニア７１３）及
び２−メルカプトエタノール（０，２ｃｍ３）に溶解す
ることにより製造した。この溶液を水酸化カリウムによ
りｐＨ９，５に調節されたほう酸（０，４Ｍ。

工００ｃｒｎ３）に加えた。（この試薬Ｆｉ４℃で貯え
られそして１週間貯蔵出来る）。

食品又は飲料の抽出され〆精製されたサンプル（０，４
ｍ３）を誘導化試薬（０５ｃｒｎ３）及びセリン（０，
１ｃｒｎ３）　（Ｉ　Ｍ塩酸及び４Ｍ水酸化ナトリウム
中２０μし’ｃｍ３．　ｐＨ６，５）により処理した。

混合物を２分間反応させ次にｌＯμｅをＨＰＬＣ器機に
注入した。

カラム型−逆相Ｃ８結合シリカ５μｍ平均粒径犬きｃ　
−４ｍ　ｉ、ｄ、　Ｘ２５ｃｒｎ温　度−室温 流速−１，３ｍｅ　７分 溶媒−メタノール７１％へブタンスルホン酸（６０／４
０容量） セリンは内部標準として働く。

標準アミン溶液を各アミン５μ９／ｃｒｎ３　を含む上
述のサンプルの様にして作って均一化された食品又は飲
料の代りに分析した。

アミン含量を下肥の如く計算した。

代理人　弁理士　秋　沢　政　光 他１名

Claims (10)

【特許請求の範囲】
1. （１）分子状酸素の存在下食品とアミンオキシダーゼ酵
   素とを接触させることよりなるアミンオキシダーゼによ
   り食品の遊離のアミン含量を減少させる方法。
2. （２）アミンオキシダーゼが１．４．３．６．型のジア
   ミンオキシダーゼである特許請求の範囲第（１）項記載
   の方法。
3. （３）ジアミンオキシダーゼがアスペルギルス・ニゲル
   （Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ　ｎｉｇｅｒ　）菌から得ら
   力る特許請求の範囲第（２）項記載の方法。
4. （４）アスペルギルス・ニゲル（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕ
   ｓ　ｎｉ−ｇｅｒ　）菌が寄託番号ＩＭＩ−１７４５４
   でコモンウエルス　マイコロジカル　インステイチュー
   ト（Ｃｏｍｍｏｎｗｅａｌｔｈ　Ｍｙｃｏｌｏｇｉｃａ
   ｌ　Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ）に寄託された菌株である特許
   請求の範囲第（３１項記載の方法。
5. （５）方法がｐ１１７〜９の培地で２０〜５０℃の温度
   で行われる特許請求の範囲第（１）〜（４）項の何れか
   一つの項記載の方法。
6. （６）アミンオキシダーゼが次に変性させられる特許請
   求の範囲第（１）〜（５）項の何れか一つの項記載の方
   法。
7. （７）アミンオキシダーゼが又塩基性安定剤よりなる溶
   液中にある特許請求の範囲第（１）〜（６）項の何れか
   一つの項記載の方法。
8. （８）アミンオキシダーゼ溶液が又保存剤よりなる特許
   請求の範囲第（７）項記載の方法。
9. （９）食品が酵母抽出物である特許請求の範囲第（１）
   〜（８）項の何ねか一つの項記載の方法。
10. （１０）特許請求の範囲第（１）〜（９）項の何れか一
    つの項記載の方法により処理されたときの食品。