JPS611621A - インシュリン製剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発Ｉ！Ｉ−１は遅延作用を有する新規なインシュリン
製剤の製造、自動的な配を装置に使用するための安定化
されたインシュリン製剤の製造、ならびに特に糖尿病の
治療へのそれらの使用に関する。

インシュリンを用いる非経口的置換療法が特別に要求さ
れていることは一般に知られている。

これには特に、楯旅宿，患者を１日当９１回または２〜
３回の少数回注射で安定化させうる遅延された楽物動力
学の問題が巳宮きれる。かかるデボ効果を得るにはデボ
助Ａｌｌとしての亜鉛または硫酸プロタミンの使用を詮
む２、３の臨床的に確証式れた原理が存在′１″る。

これら刈られたデボ原理は生理学的ｐＨ値におけるイン
シュリンの瑞溶性形態物例えば２一亜鉛結晶形態物がゆ
つくシ再溶解するという物理的効果に基づくものである
。その際製剤が長期保存における化学的安定性罠関し℃
好ましい中性β１を既に有する場合は、それら製剤は配
Ｍ過誤を回避するために配量前に非常にａ急閉く均質に
振盪されねばならない懸濁液である。

その上これまで知られているインシュリンデボ製剤は非
常に％異的なそしてある限界内でのみの、溶屏インンユ
リンの添加によシ変動しうる作用プロフィルを有する。

例えばおよそ同じ作用長さにおいて幾分作用開始が遅い
代替の作用プロフィルを所望する患者が常に存在する。

医師がかかる製剤を入手できる場合は、糖尿病患者の特
定の習慣および％性に適合させうる。

これに対して患者にその習慣の変更ヲ要求するならば、
最終的には実質上治Ｒ効果に影響する患者の「応諾」の
問題を必然的に伴うでろろう。

クレーゲン（Ｋｒａｅｇｅｎ）氏他は「ブリト・メドジ
エー（Ｂｒｉｔ、Ｍｅｄ、Ｊ、　）Ｊａｆｒ　３巻第４
６４〜４６６負（１９７５年）において非常に希薄なイ
ンシュリン浴液（０，０４Ｉ．Ｕ、／ｍｌ）への６．５
％までのへマクセル（Ｈａａｍａｃｃθｌ）の添加によ
る安定化効果について報告しておシ、それによシなかん
ずく注入システムにおける貯蔵容器および管系へのイン
シュリンの吸着が阻止されうる。

今、４℃で少くとも１．７５　ｍＰａ・８の粘度および
インシュリン改変１Ｉ．Ｕ、／Ｉｎ１以上を有する水性
インシュリン製剤が罵くべきことに改良された物理的安
定性および他の例えば作用プロフィルに関し改良された
性質を示すことが見出されｆｃ、本発明の笑施形態によ
れば、インシュリン製剤はさらに付加的に生理学的に受
容しうる界面活性物質を含有でき、それによシ籍にａ！
！勤ボンイにおける安定性がさらに高められうる。こ・
　　れら製剤は特に高められた温度における機械的負荷
例えば振盪およびポンプ運動に対して特に良的に安定で
ある。

インシュリン製剤の安定性の問題はすで纜従来重大な問
題でおった。すなわちインシュリンのような溶解された
蛋白質が界面（これには水溶液／空気界面も包含される
）に吸着されることは知られている〔シー・ダブリニー
・エヌ・クンパー（０，Ｗ、Ｎ、Ｏｕｍｂｅｒ）および
ニー・イー−アレキサングー（Ａ、Ｅ、Ａｌｅｘａｎｄ
ｅｒ）氏の「トランス。

ファラデー・ツク（Ｔｒａｎｓ　Ｆａｒａｄａｙ　Ｓｏ
ｃ、）Ｊ第４６巻第２３５頁（１９５０年ン参照〕。界
面へのこの吸着の結果として一般に「変性」なる概念の
下に総括される糧々の二次的反応が観察される。

吸着された蛋白質分子の形状変化（三次的および／また
は二次的構造の変化）が生ずる。それと韮んで吸着され
た分子の＃注または不音性重合体状形態への集合をも来
しうる。インシュリン溶液が狭い水路を通過する際に出
現する乱流もインシュリン変性を助成すると思われる。

連続的な注入装置をさらに発展させそして臨床的に使用
する揚台における主な障害として悼インシュリンが開業
上入手しうる溶液から沈殿しそしてそれにより機械的部
分ならびに供給路を塞ぐ傾向があるご・とでめることが
明らかにされている。さらにかくの如く埋め込まれうる
システムを得るためにこれら装置の寸法を小さくする方
向にあシそれによシ尚績此の安定なインシュリン溶液Ｖ
Ｃ対する要求が庄じ、このことによシ再び前記した問題
がさらに重岑なものとなる。

インシュリン浴液の物理的安定性の問題は特に自動配量
装置の開発以来論議されている。一般に、かかる装置に
おいては特別に安定化されたインシュリンが使用されね
ばならないことは知られている。インシュリンの不充分
な物理的安定性に関連して低下された生物学的効力のみ
ならず、種々の器官におけるアミロイド症を生じうる１
大食細胞の刺激を介して進行する血清中におけるアミロ
イド−Ａ−蛋白質のノ杉成の経過も論議される〔ブラウ
ン’）　−（Ｂｒｏｗｎｌｅｄ）氏他、Ｆ５ンセット（
Ｌａｎｃｅｔ）Ｊ第４１１〜４１３Ｊｊ（１９８４年）
参照〕。

これらの問題の屏決にはすでに一連の提案がなされてい
る。

西ドイツ特許Ａ７２９１７５３５夛からは１変性に対し
保護するため忙一般式Ｉ 与８ Ｒ０−−（−０Ｈ２−ＯＨ−０−）　−−Ｒ’　　　　
（１）ａ （式中　は水素、メチルまたはエチルであ少、ｐ　ｔ；
Ｊ：　２〜８０ＨＩしく（ｄＢ〜４５を意味しそしてＲ
およびＲｏは同一または相異なシて水素、１〜２０個の
炭素原子を有するアルキルアルコール残基、２〜２０個
の炭素原子を有するカルボン酸残基、炭素原子１〜１０
個のアルキル鎖ヲｍ−するアルキルフェノール残基また
は１〜２０個の炭素原子を有するアルキルアミノ残基で
ある）を有する界面活性物質をホモ重合体ブロック重合
体または混合重合体として２〜２００Ｑ／ｌの濃度で含
有する水性インシュリン溶液が知られている。

ヨーロッパ特許Ａ−１８６０９号には、その構成部分が
弱い疎水性領域および物い底水性領域を交互の配置にお
いて官有する鎖状形態の基本構造を有する界面活性物質
を含有する変曲に対して安定なインシュリンおよび多数
の他の蛋白質の水浴液が記載されている。

ＷＯ−Ａ−８３１００２８８号には、ｐＨ６，５〜９を
嘴しそして式 ％式％［１ （式中Ｒ７け飽和または不飽和の（ａ６〜Ｃ１５）−ア
ルキル基を意味しそしてｍは２〜２５の整数を意味する
）を有するポリオキンエチレンアルキルエーテルの１０
００　ｐｐｍまでをヨ有するイン７ユリン配量装置に使
用するための安定な水性インシュリン製剤が記載きれて
いる。

西ドイツ％許Ａ　−３２４０１７７号の記載からは、弐
■ Ｈ−ＣＩ（−ＯＲ４ （式中Ｒ４およびＲ５は同一または相異なることができ
そして爪木、アルキルカルボニル、アルケニルカルボニ
ル、アルカンジェニルカルボニル、アルカンジェニルカ
ルボニルまたはアルカンテトラエニルカルボニルである
が、但しＲ４とＲ５とが同時には水素を表わさないもの
とし、そしてＲ６は親水基を表わす）を有する燐脂質の
安定化量を含有する物理的に安定化されたインシュリン
浴液が知られている。

これら界面活性安定剤はそれらがインシュリン溶液の振
盪に対する安定性を明らかに高めることで非常に効果が
ある。振盪は疑いなく配量装置中のインシュリンに相当
に否定的な影響を及ぼす。

しかしながら今や、特に嬬動ポンプにおいて多くのポン
プ原理において挽われるようにエラストマーポンプ管の
絞）出しおよび／または剪断効果は、インシュリン安定
性をさらに害することが見出された。種々の従来知られ
た安定剤の添加にも拘らずポンプ管またはカテーテル中
におけるインシュリン沈殿がこの様式で生じうる。

「インシュリン」なる用語はとこおよび以下において単
一生成物または数種のイン・／ニリンしかもヒトイノシ
ュリンのみでなく呻乳動物イン７ユリン（例えば牛また
は１抹からのイン７ュリン）のような動物起原のインシ
ュリンの混合物をも意味することが理解芒れる。またよ
り広い意味におけるインシュリン、すなわち脱−Ｐｈｅ
Ｂｌ−インシュリン（例えば西ドイツ特許第２００５６
５８号およびヨーロッパ特許Ａ　４６９７９号参照）ま
たはＢ鎖のＣ−末端で塩基性修飾されたイン７ュリン（
例えば西ドイツ特許出願Ｐ３３２６４７２．４、同Ｐ　
３３２７７０９．５、同ｐ３３３３６４０．７および同
Ｐ３３３４４０７．８において提案されたインシュリン
−Ｒ３１−Ａｒｇ　−ＯＨマｋ　ｌｉ　インシュリン−
Ｒ３１−Ａｒｇ−Ａｒｇ、　−ＯＨ）のような修飾され
たインシュリンおよびヒトまたは他のプロインシュリン
またはプロインシュリン＠似体（例えば西ドイツ特許Ａ
３２３２０３６懐照）ならびにアルカリ塩およびアンモ
ニウム塩も包含される。

数種ノこれらインシュリンが混合物中にて存在すること
もできる。インシュリン濃度は溶ｓｒの如何に応じ約１
５００Ｉ．Ｕ、／ｄまでにすることができ好ましくは５
〜約１０００Ｉ．Ｕ、／−でありうる。デボ形態におい
ては１糧類またはそれ以上のインシュリンの任意の所望
の割合か相互に独立してそれぞれ溶解されたか、無定形
かそして／または栢畠形態で存在しうる。

粘稠剤（ゲル化剤とも呼ばれる）としては生理学的に受
容しうる重合体、例えばコンーゲンおよびその二次的生
成物例えばゼラチン、ヒドロキシポリゼラチン（ゲリフ
ンドーＡ（Ｇｅｌｉ−ｆｕｎｄｏｌ）■）、変性された
液体ゼラチン（フイジオゲル（Ｐｈｙｓｉｏｇθ１）■
ハ例えばジイソシアネートとも交叉結合しうるゼラチン
部分水解物（承りゼリン（Ｐｏｌ’ｙｇｅｌｉｎｅ　）
■およびヘマクセＭ、Ｈａｅｍｃ　−０８１）■〕また
は多糖類およびその誘導体例えばデキストラン、レバン
（Ｌｅｖａｎ）およびヒドロキシエチル殿粉、あるいは
ポリビニルピロリドンがあげられうる。ここにあげられ
たｖｌＪ質の一部分はコロイド状血漿代用剤中にも使用
されうる。

粘稠剤はインシュリン製剤を低温例えば４℃でわずかに
粘稠であるかまたは粘稠であるものとするかまたはヒド
ロゲルとして存在せしめる。

本発明による製剤は４℃で測定して少くとも２そして特
に少くとも２．５　ｍＰａ−θの粘眞を有するのが好ま
しい。ゲルは室温でまたは体温付近の温度ですでに一部
液化する。

高い物理的安定性を有する本発明による製剤は好ましく
は１以上特に２〜２０重量％の粘稠剤を含有する。しか
しまた比較的少量の粘稠剤の添加ですでにとドロゲルが
生成しうる。例えばこれには約０．２係の寒天または０
．６係のゼ？チンの添加で充分である。ゲル化剤の含量
上限はそのＳ類の如何によシ３０％およびそれ以上でる
シうる。

粘稠剤の割合が充分に高い場合は、製剤が保存条件下に
ヒドロゲルとしての固体形で存在することはすべての製
剤で共通している。これは物理的安定性に関する１つの
利点である、というのは卸られているようにオリゴマー
形成および変性は運動によシ強く促進され、それゆえ原
則的には液体状インシュリン製剤を取扱う場合に安全に
排除され得ない。それゆえゲル形態における保存も好ま
しくあシうる、何故ならこの形態は保存に際して溶液ま
たは懸濁液よシもかなシ均質のままでちるからである。

例えば沈降した結晶懸濁液においては長期保存に際して
、比較的安定な結晶会合物が生成することかめらゆる点
で考えられ、このものはあまり容易には振盪して均質な
懸濁液を生じ得す従って配量過誤が起シうる。これに反
し結晶懸濁液がゲル中にて均質に「凍結コされて存在す
る場合は、インシュリン分子は徐々にのみしか容器の壁
Ｉｉ！ｋＴまたは液体／空気界面に拡散できず、そして
かかる効果は排除される。その他取扱い中ゲル内におけ
る運動および乱流は相浩に減少される。それゆえ製剤な
かんずく界面活性物質を含有するものは特別に良好な保
存安定性を示す。

使用前にｔ慣用のインシュリンに、おいて普通であるよ
うなゲルは室温ないし体温となされ、その際これらは液
化するが、しかしながらそれにも拘らず慣用のインシュ
リン製剤と比較してまだ高い粘度を示す。通常懸濁液は
直ちには沈降せず、従って不均質性および配量過誤はめ
まル答易には起シ得ない。不均質性の問題は透明なゲル
製剤では勿論存在しない。あらゆる場合に慣用の注射装
置が使用されうる。

本発明によるゲルの高められた物理的安定性は体温すな
わち液体状況においてもなおおる程度存在する。かかる
浴液が３７０での回転実験におい熱的機械的負荷をかけ
られた場合、何ら粘稠剤を含有しない慣用のインシュリ
ン溶液と比較して約３〜５の相対安定度が観察されうる
。

界面活性物質を含有するインシュリン製剤のうちでは、
その構成部分か弱（・疎水性領域および弱い親水性領域
を交互の配置で有する鎖形状の基本構造を含有するヨー
ロツ・り特許Ａ　ｌ８６０９号から知られた界面活性物
質、特に重合物、しかも式 ％式％（） 〔式中Ｘｎは任意の順序における式 −ｃＨ（、Ｒｉ）−ｃＩｉ（Ｒｉ）−ｏ−（Ｖ）　　１
ｃｉｄ−Ｃ’Ｈ（Ｒ１）　−０−（Ｖｌｆ） のｎ個の鎖であシそしてｎは２〜８０好ましくは８〜４
５であ）、Ｙは一〇−または−ＮＨ−で必シそしてＲ１
はＨ、ＣＲ２または０２Ｈ５で必シ、ここで残基Ｒ１は
同一であるかまたは相異なることができるがしかし鎖構
成員Ｘの少くとも半分において一０Ｈ３または一〇２Ｈ
５が存在し、そしてＲ２およびＲ３は相互に独立してＨ
または有機残基である〕を有するホモ重合体、混合重合
体またはブロック重合体な言方する製剤が好ましい。Ｒ
２およびＲ５はそれぞれ好ましくは１〜２０個の炭素原
子を有するアルキル、２〜２０個の炭素原子を有するカ
ルボキシアルキルまたは１〜１０個のアルキル炭素原子
を有するアルキルフェニルであるがしかしながらＲ２は
Ｙが−ＮＨ−である場合は１〜２０個の炭素原子を有す
るアルキルのみでおる。Ｒ２および／またはＲ６は多重
画であることもできそして６個またはそれ以上のポリア
ルコキシ鎖−Ｘ−と結合して分校生成物を生成すること
ができる。これら化合物は２〜２０ＣＪｍ９／ｌの奈吸
で上動でりる。

界面活性物質としては避らに、前記式１［１（式中Ｒ４
およびＲ５はそこに記載された意味を有しそしてそれぞ
れ８〜２２好ましくは約１２〜２２個の炭素原子を含有
する）を有する西ドイツ特許ａ３２４０１７７号から知
られた燐脂賞も使用式れうる。これら化合物の碌度は一
般に１〜２０好ましくは１〜１０そして特に２．５〜Ｚ
５友瀘％でめる。かかる親水基は例えＶｉ２−（ト！／
メチルアンモニウム〕エチル、２−７ミノエチル、２−
カルボキシ−２−アミノエテル、２，６−シヒドロキシ
ブロピルまたは２＝５−４．５．６−　ヘ＞タヒドロキ
シシクロヘキシルでおる。Ｒ４およびＲ５がそれぞれア
ルキルカルボニルを表わす化合物が好ましい。さら釦好
ましいのはＲ６が２−（トリメチルアンモニウム）エチ
ルである化合物（かかる化合物はレシチンとして知られ
ている）およびＲ４およびＲ５がそれぞれ約８〜１６個
または約１２〜１６個の炭素原子を有するアルキルカル
ボニルでちゃそしてＲ６が２−　（トリメチルアンモニ
ウム）−エチルである化合物、特にＲ４およびＲ５がそ
れぞれオクタノイルである化合物である。

さらに５１ｉ−面活注物質としては西ドイツ特許Ａ−２
９１７５３５号およびＷＯ−Ａ−８３１００２８８号か
ら知られたポリオキシアルキレン化合物、例えばＲ７が
８〜１５個の炭素原子を有するアルキルまたは相当する
オレフィン性の基を表わしそしてｍが２〜２５の整数を
意味する前記式■を有する化合物があげられる。これら
化合物は一般に２〜２ＤＱｍＥ／／ｌの量で添加される
。Ｒ７は好ましくは（Ｃ１２またばＣ１３）−アルキル
であシ、ｍは好ましくは４〜２３特に６〜１５である。

すべての本発明による製剤は原則的には溶解されたかま
たは無定形のまたは結晶形のインシュリンから調製され
うる（透明または混濁したゲル）。これらは一般にｐＨ
２，５〜ａ５、しかし特にｐＩ（’６〜８を有し、好ま
しくは適当な等張剤、適当な保存剤および場合によシ適
当な緩衝物質例えば以下にあげられる物質を含有する。

作用１ｆ１２Ｉ質は溶解された形態で存在するのが好ま
しい。

界面活性物質を含有しない本発明による製剤は１ＮＪＶ
ａ実験において粘稠剤を添加しない対応する比較製剤と
比較して明らかな遅延作用を示し、その番１果は粘稠剤
の割合が増大すると共に増大する（第３図参照）。この
ことは他のデボ形態において存在する難溶性効果（Ｍ晶
または無定形懸濁液）がすなわち存在しない体温におい
て透明な液体である調査された製剤にとって特に極度に
驚くべきことである。

例えば適当量の亜鉛、ズルフエン、グロビンまたは硫酸
プロタミンの添加のような遅延作用を有する周知の助剤
と組み合せることによ多デボ効果を強化することも可能
である。その際添加される亜鉛量はインシュリン１００
阜位轟シ← ｚｎ　１００μｇまででありうる。これは好ましくバイ
ンシュリン１［）０阜位当りｚ♂→６５以上そして大抵
５０μｇ以下である。プロタミン前は例えば１００ｊ１
ｉ位当夛０．２８肩ｇ〜０．６９（寵戚プロタミンに基
づ＠）で６４）うる。この方法でこれまで入手できなか
つ７’Ｃ％別に長期持続性作用を有する製剤が調製でき
、インシュリン配量装置を用いる治療から得られる新し
い知見によれば正に基本量のインシュリンが治療上好ま
しく思われるのでこれら製剤の使用は重賛である。

生理学的に危険がなくそしてインシュリンと適合しうる
担体媒体としては１、慣用の方法例えばグリセリン、食
塩、グルコースによシ鹿液と等張となされそれと蓮んで
さらに１ａｒ類またはそれ以上の慣用の保存剤例えばフ
ェノール、ｍ−クレゾール、ベンジルアルコールまたは
ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステルを含有する滅菌水浴液
が適当である。担体媒体は緩＠物質例えば酢酸ナトリウ
ム、クエン酸ナトリウム、燐酸ナトリウム、トリス（ヒ
ドロキシメチル）−アミノメタンを付加的に含有しうる
。ｐｔｌ調整には、希酸（代表的にはＨＯＡ　）または
アルカリ（代表的にはＮａ０Ｈ）が使用される。

本発明はまた水性インシュリン製剤に生理学的に受容し
うるゲル化剤および場合によル生理学的に受容しうる界
面活性物質を添加することを％徴とする機械的負荷に対
して安定仕込れた水準インシュリン製剤の製法にも関す
る。これら製剤は特別な安定性および一皮下または筋肉
内投与における一遅延された作用において卓越している
。

本発明はさらに特に連続的なインシュリン放出用装置を
用いる糖尿病治療におけるこれらインシュリン製剤の使
用、ならびに特にりｇマドグラフィーまたは結晶化によ
る精製、保存および治療上の使用における表面および他
の相界面でのインシュリンの吸着または変性を回避する
ためのこれら製剤の使用にも関ｊ４゜ 本発明によるインシュリン製剤は糖尿病治療のために非
経口、すなわち静脈、皮下または筋肉内に投与されうる
。界面活性物質を含有するかまたは含有しない製剤のデ
ボ幼果は皮下投与方法において最も著明であるが、しか
しまた筋肉内注射において本明らかである。本発明によ
　　　　゛る透明に溶解された製剤は血管内に投与され
た場合、知られた溶解されたインシュリンと同様に速か
に作用する。それゆえこれらは注入でれたインシュリン
が直ちに有効でるらねばならないポンプのような目勤配
麓装置における使用例と如わけ適当である、というのは
喧゛れによってのみ例えば血糖レベルによる速かな調節
が可能だからである。

いくつかの配量原則においては脱気したインシュリン浴
液を貯留器中に満たしておくことが必賛でめるかまたは
少くとも好都合でめる。空気は作用物質との接触と組み
合せて、何度も示したように、インシュリンにとって最
も欠陥のある環境である。このことは慣用の溶液におい
て実際問題である、というのは製造者によシ礒合によシ
脱気された溶液は運動（例えば輸送）および拡散により
最後には再び空気を溶解させるからである。これに対し
液体として脱気された凝固したゲルはこの影響をはるか
に少なくしか受けない。ポンプ中に使用する直前の煩雑
な脱気（およびそれと結びついた非滅菌の危険）は従っ
て恐らくは回避されうる。

本発明釦よる製剤のもう一つの実際上のオυ点は、それ
が保存温度で凝固しているゲルである場合、栓との直接
の接触が回避されることにあ多うる。慣用の栓はすなわ
ち例えば安定剤を吸収する傾向があシ、このことは部分
的には添加が少量である点で問題でありうる。

以下の実施例によシ本発明をざらに説明するが本発明は
それらに限定されるものではない。

そこで調製された製剤はすべて４℃で１．７５ｍＰａ−
８以上の粘度を有する。デキストランにおける数字、例
えば６０は１０５倍されると分子量を示す。蒸留水はそ
れぞれｐ、ｉ、ｐ！４７．３でめった。

ボリゲリン（Ｐｏｌｙｇｅｌｉｎｅ）はマールブルグ（
Ｍａｒｈｕｒｇ）のベーリングベルケ（Ｂｅｈｒｉｎｇ
ｗｅｒｋｅ）　ＡＧ社の製品である。

実施例 リン製剤 実施例１によれば、 ｄ）　　１ｌｌＥ紹乾燥されたボリゲリン２５０１を蒸
留水中に溶解させて１ｔとなした滅菌浴液、および ｂ）ヒトインシュリン（２８Ｉ．Ｕ、／　Ｒ９）　４．
４６４１、グリセリン２１．２！Ｍ’、　　ｌ−リス−
（ヒドロキシメチルクーアミノメタン７．５０ｙ、’ｙ
エノール５．５７５？、総亜鉛言量り、Ｄ３５？となる
量の無水塩化亜鉛、および両側にそれぞれ約５％のポリ
エチレングリコールが重合したポリプロピレングリコー
ル（平均分子Ｊｔ１８００）０．０１２５？を蒸留水中
建溶解させて２５０！ｎｔとなした滅菌溶液、 を滅菌条件下に合した。

実施例２によれば溶液ｂ）にイりらポリプロピレングリ
コールが添加されないこと以外は実施例１が反復された
。

実施例３によれば、 ｄ）ボリダリン２００ｔを蒸留水中に溶解させて８００
７となした滅菌溶液、および ｂ）ヒトインシュリン（２８１，Ｕ、／廊１ｉ’）１．
４２９１１ｍ−クレゾール１．５０ｆ、フェノール１．
００Ｐ、グリセリン１７．００　ｙ、総亜鉛含量が０．
０２８　？となる量の無水塩化亜鉛およびレシチン０．
０３（ｌを蒸留水中に溶解させて２００ゴとなした滅菌
浴液、 を滅菌条件下に合した。

実施例１〜６によシ牌製された溶液を慣用の方法によシ
小さなガラスピン中に充填した。これらは約１５℃で１
００Ｉ．Ｕ、／−を有する透明なゲルとして凝固する。

実施例４および５によればそれぞれ ｄ）デキストラン６０　１８（ｌまたはデキスト２ン６
０１６０ｔを蒸留水中に溶解させて８００ｄとなした滅
菌溶液、および ｂ）ヒトインシュリン（２８Ｉ．Ｕ、／３１ｇ）ｉ５７
１ｔｓ　　ｌ’リス−（ヒドロキシメチルクーアミノメ
タン６．００　ｆｈ　ｍ−クレゾール２．００？、フェ
ノール１．０（１，グリセリン１Ｚ００ｔおよび総亜鉛
含量が０．０２８Ｆとなる量の無水塩化亜鉛、およびポ
リプロピレングリコール（実施例１参照）０．ＣＮ（ｌ
を蒸留水中に溶解させて２００−となした滅菌溶液ｔ を滅菌条件下に合した。

これら製剤を慣用の方法によシ小さなガラスビン中に充
填した。

実施例６〜８によれば異なる分子量のデキスト２ン１０
または２０％を用いて実施例４と同様にしてインシュリ
ン製剤を調製した（第１表参照）。

リン製剤 滅菌条件下に、 ｄ）ボリゲリン２０１を蒸留水中に溶解させて８０−と
なした滅菌溶液、およ、び ｂ）豚のプロインシュリン１１００ＪＩ、ＮＩＬＨ２Ｐ
Ｏ４・２Ｈ２゜Ｏ，２１？％ｍ−クレゾール０．５０？
、総亜鉛含量が０．００１２Ｆとなる量の無水塩化亜鉛
、および分子Ｊｉ１２００を有するポリオキシエチレン
−２３−２クリルエーテル［ＬＯｌ（ｌを蒸留水中に溶
解させて２０ＦＩＬｔとなした滅菌溶液、を合した。

リン製剤 滅菌条件下に ｄ）ボリゲリンの滅菌された１０％浴液１ｔ。

および ｂ）実施例１０によれば豚インシュリン１．７８６ｆま
たは実施例１１によればヒトインシュリン１．７８６Ｆ
（それぞれ２８Ｉ．Ｕ、／ｍｇ）およびグリセリン４．
２５ｔ、トリス−（ヒドロキシメチルクーアミノメタン
１．５０ｒ、フェノール２．５０ｆおよび総亜鉛含量が
０．０１４ｔとなる量の無水塩化亜鉛を蒸留水中に溶解
させて２５０−となした滅菌溶液− を合した。

かくしてａｌｌ製された製剤は生物学的試験によれば４
０　Ｉ．Ｕ、／ａｔを含有していた。

！ 蝙動ポンプ（３７℃、運動、ポンプ速度１２Ｉ．Ｕ、／
ｄ）を用いる標準化されたポンプ実験において下記の安
定性データが得られた。

トインシュリンヘキスト（ａｏｅｃｈａｔ＃　　　　　
３日　　　　　　　１実施例１記載の製剤　　　　　　
　　　　　８０日以上　〉２７８％のデキストランを含
有する製剤（実施９１１４）６０日以上　　＞２０６７
℃％　　１’Ｈｇでの標準化された回転実験において実
施例２および１０による製剤５ビンずつを検査した。比
較のために標準インシュリンを調べた。

Ｈ−インシュリンヘキスト■　　　　　　　　２日　　
　１蒸留水を用いて１．２５１となした実施例　　　　
４日　　　　２１０記載の製剤ｂ） 実施例２記載の製埼り　　　　　　　　　　　　１５日
　　　　Ｚ５実施例１０紀戦の製剤　　　　　　　　　
　　２２日　　　１１調製された溶液を標準化された循
環ポンプ実験に計いてＮ４ａポンプ（６７℃、運動、速
度５ｄ／時−５００Ｉ．Ｕ、／時−１２０００Ｉ．Ｕ、
／ａで再循猿キれているポンプ）によυそれらの物理的
安定性？検査した。

第３表 Ｈ−インシュリンへキスト■　　　　　　　２０時間１
２０係のボリゲリンを含有する製剤　　　　７日以上　
　〉８（実施例６） 実施例６による製剤、溶液ｂ）＊２日　　　　２．４２
０係のボリゲリン百有製剤（実施例９）　　７８以上　
　〉８実施例９記載の製剤、溶液ｂ）”　　　　　　３
　Ｑ時間　　１．５本　それぞれボリゲリンをま有しな
いがしかしながら蒸留水を用いて１ｔ（実施例６）また
は１０１Ｍ（実施例９）となした。

滅菌条件下にそれぞれ ｄ）凍結乾燥されたボリゲリン１２５２または２５０ｖ
を蒸留水中に俗解させて１ｔとなした滅菌浴液、 ｂ）　　ＮａＨ２ＰＯ４”２Ｈ２０２，１０？、グリセ
リン１６．００？、フェノール０．６０　ｒおよびクレ
ゾール１、５　Ｏｒを蒸留水中に溶解させて１００ｄと
なした滅函浴液、および Ｃ）ヒトインシュリン（２８Ｉ．Ｕ、／Ｑ　）　１．７
８６１、硫酸プロタミン０．１５９　ｆ　、ＮａＨ２Ｐ
Ｏ４’　２Ｈ２００，５２５ｒ、グリセリン４．００　
ｙ１フェノール０、１５　Ｐ、ｍ−フレジー＃　０．３
７５９および総亜鉛含量が０．０１０８ｒとなる量の無
水塩化亜鉛を蒸留水中に懸濁させて１５０ｄとなした滅
菌結晶懸濁液、 を合した。

これら懸濁液？釣業上入手しつるガラスピン中に充填し
た。次に充填直後４℃で凝固せしめると・１０または２
ａ係のボυゲリンを含有する４　０１’、Ｕ、／−の均
質な混濁したゲルが形成された。

沈降実験 懸濁液の小ビンをゆシ動かすことなく６７℃で保温培養
しそして隔膜を通って容器の紙まで力＝ニーＬ４−挿入
し、第２のカニユーレ［／ニスカス直下に挿入した。ビ
ンを揺シ動かすことなく定められた時間間隔ケおいてそ
れぞれ一部分をとｐ出しそしてインシュリン含蓄を高圧
液体クロマトクラフィーによシ測足した。Ｉ．Ｕ、／ゴ
において計視、して下記の値が測定された。

第　４　表 Ｏ分Ｗ　　４１１Ｉ．ＩＪｖ／ｒｎｔ４Ｃ１Ｉ．Ｕ、／
ｍｉ　　４０Ｉ．Ｕ、／ｍ／！　　４０Ｉ．Ｕ、７６１
５分後　４１　　　　　３９　　　　　４１　　　　４
０１５分後　４１４０　　　　　４ｏ４１３ａ分後４０
　　　　　４０　　　　　４０　　　　４１６０分後　
４６　　　　　３５　　　　４０　　　　４０１２０分
後　６６　　　　　１４　　　　　４６　　　　３５滅
菌条件下に、 ｄ）　　デキストラン６０（ＤＢ０ｆｌｆｃｕ１６０Ｆ
を蒸留水に溶解させて８００−となした滅菌溶液、およ
び ｂ〕　脱−Ｐｈｅ−（Ｂｉ）−豚インシュリン（２７，
５Ｉ．Ｕ。

／Ｉ！ｇ）１．４５５ｆ、グリセリンＩＺＯＯｒｔ　　
トリス−（ヒドロキシメチル）−アミノメタン６、００
　ｒ、ｍ−クレゾールｔ　ｓ　ｏ　ｙおよびフェノール
ｉ、　ｏ　ｏ　ｔを蒸留水中にｍｓさせて２００−とな
した滅菌溶液、 を合した。

４℃で粘稠であるこれら浴液を商業上入手しうる小ビン
中に充填した。生物学的試験によれば効力はそれぞれ４
０　Ｉ．Ｕ、／−であった。家兎・　　への０．２ニー
　Ｕ　、／　ｋｇの薬剤量でこれらインシュリン製剤は
皮下投与において商業上入手しうる中性プロタミンーハ
ーゲドルン（Ｈａｇｅｄｏｒ’ｎ）遅延作用製剤と同じ
作用を及ぼすかまたはそれよル強い遅延作用を有する（
第４図参照）。

リン製剤 ｄ）ボリゲリン２００ｔを蒸留水中に溶解させて８００
−となした滅菌溶液−および ｂ〕　ヒトインシュリン（２８Ｉ．Ｕ、／即）３．５７
１ｔ　、ＮａＨ２ＰＯ４・２Ｈ２０２，１Ｏｆ　％ｍ−
クレゾール２、００　ｆおよびフェノール１．０　Ｏｆ
を蒸留水中に溶解させて２００ＩＩＬｔとなし、た滅菌
ａ液、を滅菌条件下に合した。

製剤を商業上入手しうる小ビン中に充填した。

生物学的試験では１００　Ｉ．Ｕ、／−の効力が示され
た。遅延作用は家兎で確認された。

延作用 ｄ）デキストラン３２（実施例１７）またはデキストラ
ン６０（実施例１８）またはデキストラン１００（実施
例１９）２０ｔを蒸留水中に溶解させて８ｏゴとなした
滅菌溶液、および ｂ）ヒトインシュリン（２８Ｉ．ｔｒ、／ｌａｇ）　０
．００７１ｔｓ　　Ｉ’リス−（ヒドロキシメチルクー
アミノメタン０．６０１％ｍ−クレゾール０．２０　ｆ
　ｓ；ｙ−ｒ−／−ル０．　Ｉ　Ｑ　ｆｓ　ｆ　！ｊ　
セＩ）　ン１７．００ｊ’オよび総亜鉛含量α００２８
　ｔとなす量の無水塩化亜鉛を蒸留水中に溶解させて２
０ｍとなした滅ｇ溶液、 を滅菌条件下に合した。

午れら浴液は家兎での皮下投与において□、２Ｉ．Ｕ、
／に１）の渠用麓で強い遅延作用を示した（第５図参照
）。作用期間は家兎で基本的なＨ−インシュリンヘキス
ト■のそれとおよそ同じであった。

Ａ）犬および家兎への生体内投与 実施例１記載の製剤をそれぞれ０．２　Ｉ．Ｕ、／体重
Ｑずつ耳静脈に投与した。比較インシュリンとしてはヒ
トインシュリンヘキスト■（ＩＩ）が用いられた。第１
図およびＭ２図は血糖レベルの時間的経過を示す（ｘ　
：ｊ＝　ＳＡＭ　）。この、値は′？！ｒ５匹の動物の
計測から測足された。夷、流側１記戦の製剤Ｔ１．）は
犬（第１図）においてもまた家兎（第２図）においても
比較物質未修飾インシュリン（ｆｌ）と同じ速さかまた
はむしろそれよシ速やかに効きめがめった。

Ｂ）家兎での皮下投与 相当するプラシーボ浴液を用いて製剤をそれぞれ１０Ｉ
．Ｕ、／ｄまで希釈しそして次に０．２１、Ｕ、／ｋｙ
の薬用量でそれぞれ家兎５匹に皮下投与した。ｎｎ糖値
（ＸｆＳＥＭ）は０．０．５．１．２．６．５および７
時間後に測定された。第６図においては実施例１１と同
様のヒトインシュリン浴液（曲線Ｉ）、実施例２と同様
の溶液（曲線■）、実施例２と同様の溶液であるがボリ
ゲリン添加のない溶液（曲線ＪＩＩ〕の投与について侍
られた値を表わす。第４区においては実施例１４記戦の
説−Ｐｈｅ−（Ｂ１）−脈インシュリンの浴液を投与す
ることによシ得られたイ直（曲？ｆＭ１）、同じ〈実施
例１５（曲線■）ならびに商業上入手しうるヒトインシ
ュリン遅延作用製剤（基本的インシュリンへキスト■〕
の懸濁１ｇＬの１直（曲線１１１）が示される。第５図
には実施例１７紀戦の製剤についての同じ値（曲線Ｉ）
、同じく実施例１８（曲線■）、同じ〈実施例１９（曲
線ｍ）および前記ヒト−インシュリン−遅延作用製剤に
ついての同じ値（曲線■）が示される。第６図には実施
例１記戦の製剤についての同じ値（曲線Ｉ）および前言
己ヒトインシュリンｉｐ延作用製剤についての値（曲線
■）が示される。

第１〜６図において、通常の個々の測定値についてのス
トロークの長さは平均値（Ｓ、ＫＭ）からの標準偏差を
示す。

【図面の簡単な説明】

第１図は実施例１紀載の製剤（１）およびヒトインシコ
ーリンヘキスト■（［１０，２Ｉ．Ｕ、／　ｋｔ　ヲ犬
Ｋ　投与した場合の捕糖レベルの時間的経過を示す。 第２図は実施例１紀載の製剤（１）２よびヒトインシュ
リンヘキスト■（ＩＩ）　０．２Ｉ．Ｕ、／ｋＰヲ！ｉ
Ｋ投与した場合の面糖レベルの時間的経過を示す。 第６図は実施例１１と同様のヒトインシュリン溶液（１
）、実施例２と同様の溶液（曲線■）、実施例２と同様
の溶液であるがポリケ゛リン添加のない溶液（曲線ＩＩ
Ｉ　）　Ｄ、　２Ｉ．Ｕ、／にノを家兎に投与して得ら
れた値を表わす。 第４図は第６図の場合と同じ〈実施例１４記戦の脱−Ｐ
ｈｅ−（Ｂ１）−豚インシュリンの溶液を投与すること
により得られた値（曲ｍ、ｘ）、同じ〈実施例１５（曲
線■）ならびに商業上入手しうるヒトインシュリン遅延
作用製剤（基本的インシュリンヘキスト■）の懸濁液の
値（曲＋Ｖｊ　Ｉｌｌ　）を示す。 第５図は実施例１７記載の製剤を投与することにより・
潜られた１直（曲線Ｉ）、同じ〈実施例１８（曲線■〕
、同じ〈実施例１９（曲線■）および前記ヒト−インシ
ュリン−遅延作用製剤についての同じ値（曲線ＩＶ）を
示す。 第６図は実施例１記戦の製剤を投与することによシ得ら
れたイ直（曲線１）および前記ヒトインシュリン遅延作
用製剤についての１ｆｉ（曲線■）を示す。 第１〜６図において、通常の個々Ｏ測犀値についてのス
トロークの長さは平均値（ＳＥＪＪからの標準偏差を示
す。 特許出願人　　ヘキスト・アクチェンゲゼルシャフト外
２名 り〃コース［ｍｇ／ｃｕｌＦ ３．２

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）４℃で少くとも１．７５ｍＰａ・ｓの粘度を有しそ
   して生理学的に受容しうる粘稠剤またはそのものと生理
   学的に受容しうる界面活性物質との組み合せを含有する
   ことを特徴とする１Ｉ．Ｕ．／ｍｌ以上のインシュリン
   濃度を有する水性インシュリン製剤。 ２）下記の特徴、すなわち ａ）インシュリン濃度が約１５００まで好ましくは５〜
   １０００Ｉ．Ｕ．／ｍｌである、 ｂ）インシュリンがヒトインシュリン、哺乳動物インシ
   ュリン、修飾されたインシュリ ンまたはヒトのプロインシュリンである、 ｃ）１以上、好ましくは２〜２０重量％の粘稠剤を含有
   する、 ｄ）粘稠剤としてコラーゲンまたはそれを変換して得ら
   れる生成物、多糖類またはその 誘導体またはポリビニルピロリドンを含有 する、 ｅ）ｐＨ２．５〜８．５好ましくは６〜８を有する、お
   よび ｆ）４℃でヒドロゲルとして存在する、 の少くとも１項を特徴とする前記特許請求の範囲第１項
   記載の製剤。 ６）ａ）適当な等張剤、 ｂ）適当な保存剤、 ｃ）適当な緩衝物質、および ｄ）１００Ｉ．Ｕ．当り亜鉛イオン１００μｇまでの量
   の亜鉛、 を含有することを特徴とする前記特許請求の範囲第１ま
   たは２項記載の製剤。 ４）遅延作用を有する助剤を付加的に含有することを特
   徴とする前記特許請求の範囲第１〜３項の１つまたはそ
   れ以上の項に記載の製剤。 ５）インシュリン濃度１Ｉ．Ｕ．／ｍｌおよび４℃で少
   くとも１．７５ｍＰａ・ｓの粘度を有する前記特許請求
   の範囲第１〜４項の１つまたはそれ以上の項に記載の機
   械的応力に対して安定化された水性インシュリン製剤を
   調製するに当り、水性インシュリン溶液に生理学的に受
   容しうる粘稠剤を単独でまたはさらに加えて生理学的に
   受容しうる界面活性物質を添加することを特徴とする方
   法。 ６）糖尿病の治療における薬剤としての前記特許請求の
   範囲第１〜４項の１つまたはそれ以上の項に記載の製剤
   の使用。 ７）連続的なインシュリン放出のための装置においてま
   たは遅延作用を有する薬剤としての前記特許請求の範囲
   第１〜４項の１つまたはそれ以上の項に記載の製剤の使
   用。 ８）特に ａ）相界面での変性に対するか、または ｂ）クロマトグラフィーまたは結晶化によるインシュリ
   ンの精製に対してか、または ｃ）前記ａ）およびｂ）の組み合せによる、前記特許請
   求の範囲第１〜４項の１つまたはそれ以上の項に記載の
   水性インシュリン製剤を安定化するための生理学的に受
   容しうる粘稠剤のそれ自体でのまたは生理学的に受容し
   うる界面活性物質と一緒にした使用。 ９）水性インシュリン製剤中における遅延放出のための
   粘稠剤の使用。 １０）その製剤の粘度が少くとも２そして特に少くとも
   ２．５ｍＰａ・ｓであることを特徴とする前記特許請求
   の範囲第１〜９項の１つまたはそれ以上の項に記載の実
   施形態。