JPS6122959B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は新しい類の抗生物質の製法に関する。
特定すれば、これらの新しい抗生物質は、「セフ
エム」核の７位にメトキシ置換分を含有するセフ
アロスポリン型の生成物である。それらは構造的
にはセフアロスポリン系列の化合物に関係してい
るが、７位にＤ−５−アミノ−５−カルボキシブ
アレルアミド部分構造のみを含有するセフアロス
ポリンＣと異なり、本生成物は７−メトキシ置換
分をも含有し、セフアロスポリンＣは環に対し３
位においてアセトキシメチル置換分により置換さ
れているが、本発明の化合物は、３位の置換分と
して（α−メトキシ−ｐ−スルフオキシ又はヒド
ロキシ シンナモイロキシメチル）基を有する。 本発明は、水性栄養培地中好気的条件下ストレ
プトマイセス属に属する７−メトキシ−３−セフ
エム−４−カルボン酸生産菌、ストレプトマイセ
ス・グリセウスMA−2837を培養し、培養物から
７β−（Ｄ−５−アミノ−５−カルボキシブアレ
ルアミド）−３−（α−メトキシ−ｐ−スルフオキ
シ又はヒドロキシ シンナモイロキシメチル）−
７−メトキシ−３−セフエム−４−カルボン酸を
採取することからなる該化合物の製法を提供する
ものである。 なお、参考のため述べると、３位の置換分の例
としては、本発明方法の目的生成物の３位の置換
分も含め、次のようなものを挙げることができ
る。例えば、メチル、ハロメチル、ヒドロキシメ
チル、脂肪族、脂環族または芳香族種のアシロキ
シメチル部分構造、カルバモイロキシメチル、Ｎ
−置換およびＮ・Ｎ−ジ置換カルバモイロキシメ
チル、アルキルチオメチル、異項環置換チオメチ
ル、トリアルキルアンモニウムメチル、ピリジニ
ウムメチル、核置換ピリジニウムメチル、チオウ
ロニウムメチル、アミジノチオメチル（２個の窒
素原子は１〜３個のアルキル残基により置換され
てよい）、アミノチオカルボニルチオメチル、Ｎ
−置換アミノチオカルボニルチオメチル、アロイ
ルチオメチル、オキシチオカルボニルチオメチ
ル、アルクアリルスルフオニルメチル、アジドメ
チル、アミノメチル、アミドメチル、ポリヒドロ
キシベンジル、Ｎ−低級アルキル−インドール−
３−イルメチルおよびチオシアネートメチルであ
る。これらの化合物は次の通り示すことができ
る。 〔たゞし、式中Ｒは水素、ハロ、例えば、クロ
ロ、ブロモ、クロロまたはヨード等、ヒドロキ
シ、アシロキシ、例えば、アセトキシ、ｎ−プロ
ピオニロキシ等のような低級アルカノイロキシ、
単核および二核芳香族カルボニロキシ、例えば、
ベンゾイロキシ、ナフトイロキシ等、異項環カル
ボニロキシ（たゞし、異項環は４−ピリジル等の
ような６員含窒素異項環である。）、フエナセチロ
キシ、３−フエニルプロピオニロキシ、２−ナフ
チルアセトキシまたはヒドロシンナモイロキシ等
のようなアルカノイロキシ、５〜６個の核炭素を
含有するシクロアルカンカルボニロキシ、例え
ば、シクロヘンタンカルボニロキシまたはシクロ
ヘキサンカルボニロキシ等、α−メトキシ−ｐ−
スルフオキシシンナモイロキシまたはα−メトキ
シ−ｐ−ヒドロキシシンナモイロキシ等；式：−
OOCNR¹R²（たゞし、式中R¹およびR²は水素、
低級アルキル、例えば、メチル、エチル、ｎ−プ
ロピル、三級−ブチル等、クロロメチル、２−ク
ロロエチルまたはクロロ−三級−ブチル等のよう
なハロ低級アルキル、エトキシカルボニル等のよ
うな低級アルコキシカルボニル、アリル、例え
ば、フエニル、ナフチル等のような単核および二
核アリル、アルクアリルスルフオニル、例えば、
ｐ−トリルスルフオニル等のような単核アルクア
リルスルフオニルおよびベンズヒドリルまたは、
それらが結合している窒素原子と共に、R¹およ
びR²は合してピロリジニル、ピペリジノまたは
モルフオリノのような単核異項環を形成してよ
い。）のカルバモイロキシ残基；式：−SR³
（たゞし、式中R³はメチル、エチル、ｎ−プロピ
ル等の低級アルキル、含窒素異項環、例えば、２
−、３−または４−ピリジルのようなピ ジル、
４−メチルチアゾール−２−イルまたは４−エチ
ルチアゾール−２−イル等のような低級アルキル
置換チアゾリル、１・３・４−チアジアゾール−
２−イル、５−メチル−１・３・４−チアジアゾ
ール−２−イル等のような低級アルキル置換１・
３・４−チアジアゾール−２−イル、２−ベンゾ
チアゾリル、４−メチルピリミジン−２−イルの
ような４−低級アルキル−ピリミジニルであ
る。）のチオ残基；アンモニウム残基、例えば、
トリメチルアンモニウムまたはトリエチルアンモ
ニウム等のようなトリ−低級アルキルアンモニウ
ムまたは式： （たゞし、式中X¹は水素、ハロゲン、トリフロロ
メチル、シアノ、カルボキシ、カルバモイル、Ｎ
−低級アルキルおよびＮ・Ｎ−ジ−低級アルキル
置換カルバモイル、例えば、Ｎ−メチルカルバモ
イル、Ｎ−エチルカルバモイル、Ｎ・Ｎ−ジメチ
ルカルバモイル、Ｎ・Ｎ−ジエチルカルバモイル
またはＮ・Ｎ−ジ−イソプロピルカルバモイル、
カルボキシメチル、アセチルまたはプロピオニル
のような低級アルカノイル、メチル、エチルまた
はｎ−プロピル等のような低級アルキル、ヒドロ
キシメチルまたはスルフオ、即ち、−SO₂（OH）
である。）のピリジウム；式：

【式】の チオウロニウム残基；式：

【式】（たゞし、式中R⁴、R⁵およ びR⁶は水素またはメチル、エチル、ｎ−プロピ
ル等のような低級アルキルから選択された同一ま
たは異なつたメムバーである。）のアミジノチオ
残基；式：

【式】（たゞし、式中R⁷お よびR⁸は水素、メチル、エチル、ｎ−プロピル
等のような低級アルキル、２−ヒドロキシエチル
等のようなヒドロキシ−低級アルキル、２−（ジ
メチルアミノ）エチル、２−（ジエチルアミノエ
チル）、２−（ジ−ｎ−プロピルアミノ）エチル、
あるいは３−（ジエチルアミノ）プロピル等のよ
うなジ−低級アルキルアミノ−低級アルキル、２
−モルフオリノエチル等のようなモルフオリノ置
換低級アルキル、２−（Ｎ−フエニル−Ｎ−メチ
ルアミノ）エチル等のようなＮ−アリル−Ｎ−低
級アルキルアミノアルキルまたは共に、R⁷およ
びR⁸残基は結合している窒素原子と合してピペ
リジノ、ピロリジニルまたは式：

【式】（たゞし、式中R⁹はメチ ル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−
ブチル、アミル、ｎ−オクチル、デジル等のよう
な低級アルキルまたはフエニルである。）のピペ
ラジノ残基である。）のアミノチオカルボニルチ
オ残基；アリルチオ、例えば、ベンジルチオのよ
うな単核アリルチオ；式：

【式】（たゞ し、式中R¹⁰はエチル、ｎ−プロピル、イソプロ
ピル、ｎ−ブチル、ｎ−ヘキシル等のような低級
アルキルまたは低級シクロアルキル、即ち、シク
ロペンチルおよびシクロヘキシルのような５〜６
個の核炭素原子を含有するシクロアルキルであ
る。）；アルクアリルスルフオニル、例えば、ｐ
−トリルスルフオニルのような単核アルクアリル
スルフオニル；アジド；アミノ、式： −NHR¹¹ （たゞし、式中R¹¹はアシル残基、例えば、アセチ
ルまたはプロピオニルのような低級アルカノイル
またはアルクアルカノイル、例えば、２−フエニ
ルアセチル等のような単核アルアルカノイルであ
る。）のアミド残基；ポリヒドロキシフエニル、
例えば、２・４−ジヒドロキシフエニルのような
ジヒドロキシフエニルまたはＮ−メチルインドー
ル−３−イル等のようなＮ−低級アルキルインド
ール−３−イルまたはチオシアネートである。〕
これらの化合物の薬理学的に使用可能な塩、エス
テルおよびアミドとしては、例えば、次のような
ものがある。これらは有機および無機の塩、例え
ば、酸付加塩、金属塩、四級および三級有機含窒
素塩基から誘導されるアミン塩を包含する。適当
なアミドおよびエステル誘導体はアルカノール、
シクロアルカノール、芳香族アルコールおよびア
ルアルカノールから誘導されるようなエステルな
らびにアンモニア、低級アルキルアミン、ジ−低
級アルキルアミン、アルアルキルアミンおよび異
項環アミンから誘導されるようなモノ−およびジ
−アミドを包含する。これらの誘導体およびそれ
らの製法は、合成法なる標題の亜節中に見出すこ
とができる。 抗生物質810A：本質的には、式の生成物
（上記）は２群の発酵生産物より成る。これらの
うち１群は化合物の混合物であり、それから２種
の別異の化合物が単離され同定されている。これ
らの２種の化合物は、本発明方法の目的化合物で
あり、セフエム核の３位におけるα−メトキシ−
ｐ−スルフオキシシンナモイロキシまたはα−メ
トキシ−ｐ−ヒドロキシシンナモイロキシ部分構
造の存在を特徴とし、次の平面式に対応する： （たゞし、式中R¹²はヒドロキシまたはスルフオキ
シ、即ち、−OSO₃Hである。）これらの生成物
は、管理された条件下ニユージヤーシイ州ローウ
エイ在メルク・アンド・カムパニイ、インコーポ
レーテツドの保存菌株中MA−2837と称される放
線菌の１新株を培養することにより共生産され
る。この菌株を試料は、また、イリノイ州ペオリ
タ在米国農務省のノーザーン・２−テイライセー
シヨン・リサーチ・アンド・デベロツプメント・
ブランチの保存菌株に永久委託され、菌株番号
NRRL 3851と命名されている。25の他の菌株
も、この抗生物質混合物の生産菌として同定さ
れ、MA−2837と共に、微生物なる標題の節中イ
ンフラと記載されている。以下これらの２種の生
成物より成る抗生物質混合物（ａ）は抗生物質
810A、または単に810Aと称される。 なお、参考のため述べると、 抗生物質842A：第２の群の発酵生産物は７β
−（Ｄ−５−アミノ−５−カルボキシブアレルア
ミド）−３−（カルバモイロキシメチル）−７−メ
トキシ−３−セフエム−４−カルボン酸（ｂ、
下記）およびその塩から成る。この化合物は次の
平面式を有する： この生成物（ｂ）も、また、放射菌の１新株
により生産され、この微生物の試料（MA−2908
と称される）はニユージヤーシイ州ローウエイ在
メルク・アンド・カムパニイ、インコーポレーテ
ツドの保存菌株中に置かれている。この菌株の試
料はイリノイ州ペオリア在米国農務省の１−ザー
ン・２−テイライゼーシヨン・リサーチ・アン
ド・デベロツプメント・ブランチの保存菌株に永
久委託されている。この菌株は、菌株番号NRRL
3802と命名されている。その抗生活性の外に、こ
の生成物（ｂ）は、また、対応する３−ヒドロ
キシ、３−アシロキシおよびカルバモイロキシ誘
導体の製造の際の中間体である。これらの誘導体
の製法は、合成法なる標題の亜節中記載されてい
る。以下本明細書中生成物ｂ、即ち、７β−
（Ｄ−５−アミノ−５−カルボキシブアレルアミ
ド）−３−（カルバモイロキシメチル）−７−メト
キシ−３−セフエム−４−カルボン酸は、抗生物
質842Aと称される。 活 性 抗菌治療における主な困難は、大ていの抗生物
質が酵素分解を受けることである。例えば、ペニ
シリンＧは広範囲のグラム陽性およびグラム陰性
微生物に対して有効であるが、ペンシリナーゼの
存在下には分解されて大部分の病原菌に対して無
効な形となる。 この問題への一つのアプローチは、セフアロス
ポリンＣに特徴的な「セフエム」核を有する新抗
生物質の開発であつた。セフアロスポリンＣは、
ペニシリナーゼに対し固有の抵抗性を有し、グラ
ム陰性菌およびグラム陽性菌に対し共に活性があ
る；しかし、中程度に活性があるのみであり、そ
の活性を破壊するペンシリナーゼ以外の酵素が存
在する。これらの酵素はセフアロスポリナーゼと
称される。本発明の生成物も含まれる化合物
（）は、ペンシリナーゼに対してのみならず、
セフアロスポリナーゼに対しても抵抗性を示す。
それらはグラム陰性菌およびグラム陽性菌に対し
て共に活性があるが、活性の程度および有効な生
体の範囲は同一ではない。 抗生物質842Aは、グラム陰性微生物に対する
活性の向上を特徴とする。比較的低い抗生活性を
有するセフアロスポリンと異なり、この生成物は
有意な生体内グラム陰性効果を示し、一般に、セ
フアロチンより大きい効力をもつ。この活性は、
プロテウス・モルガンに対する生体内有効性およ
び次のグラム陰性菌に対する有効性を包含する：
エシエリチア・コリ、プロテウス・ブアルガリ
ス、プロテウス・ミラビリス、プロテウス・モル
ガニ、サルモネラ・シヨツトミユレリ、クレブシ
エラ・ニユーモニエAD、クレブシエラ・ニユー
モニエＢ、ならびにパラコロバクトラム・アリゾ
ニエ。 グラム陰性効果の一般的増大およびセフアロチ
ンと比較した場合の効力の増大ならびにセフアロ
スポリナーゼに対するセフアロチンより大きい抵
抗性の外に、842Aは低い程度の毒性を特徴と
し、迅速な血中濃度を生じる。投与後６時間以内
に約100％が尿中に排泄される。更に、それはセ
フアロスポリンＣより酵素分解に対して抵抗性が
あり、その抵抗性は徐々に発現し、殺菌的であ
る。経口投与すると、パラコバクトラム・アリゾ
ニエ3270、プロテウス・ブアルガリス1810および
サルモネラ・シヨツトミユレリ3010による感染に
対して保護する；皮下投与した場合には、同じ感
染に対してセフアロチンより２〜10倍有効であ
る。 抗生物質810Aは広範囲スペクトルの薬剤であ
り、ほゞ均衡のとれたグラム陰性およびグラム陽
性効果を示す。このものは次のグラム陰性生体に
対する生体内の活性：プロテウス・ブアルガリ
ス、プロテウス・ミラビリス、サルモネラ・プロ
ルム、エシエリチア・コリ、ならびにクレブシエ
ラ・ニユーモニエ、ならびに次のグラム陽性生体
に対する生体内の活性：スタフイロコツカス・オ
ーレウス、ストレプトコツカス・ピオゲネスおよ
びデイプロコツカス・ニユーモニエを包含する。 抗生物質810Aを構成する数種の生成物のう
ち、７β−（Ｄ−５−アミノ−５−カルボキシブ
アレルアミド）−３−（α−メトキシ−ｐ−スルフ
オオキシシンナモイロキシ）−７−メトキシ−３
−セフエム−４−カルボン酸（Ｒがスルフオキシ
の場合の上記の式ａに対応する。）、ならびにナ
トリウム塩のようなその塩は本発明の好適な実施
態様を構成する。この生成物は次の平面式を有す
る： この化合物はセフアロスポリナーゼに対し、セ
フアレチンより大きい抵抗性を有し、マウスにお
いて低い程度の毒性を特徴とする。更に、それは
酵素分解に対しセフアロスポリンＣより抵抗性を
有し、殺菌的である。経口投与すると、プロテウ
ス・ブアルガリスによる感染に対して保護し、皮
下投与した場合には、種々のグラム陰性およびグ
ラム陽性感染に対して有効である。 微生物 810A菌株：抗生物質810Aを生じる微生物は、
はじめ土壌から単一コロニーとして単離された。
このコロニーを次の組成の画線板上に移した： 培地Ａ： イースト抽出液 10.0ｇ デキストロース 10.0ｇ 寒 天 20.0ｇ 蒸溜水 10000.0ml 数日の生育後この微生物は、抗生物質810Aを
生産した。次に、この抗生物質を振盪フラスコ中
において再生産し、種々の生物学的および化学的
研究に基づいて既知の抗生物質から区別した。他
の既知の抗生物質のデータと、このデータを比較
することにより810Aは新しい実在物であること
が確立された。 810Aの分類学と形態学：抗生物質810Aを生産
する微生物（菌株MA−2837）はストレプトマイ
セス・グリセウスと同定されている。この決定に
おいて用いられた分類学は、「ベルゲイス・マニ
ユアル・オブ・デターミナテイブ・バタテリオロ
ジイ」（Bergey′s Manual of Determinative
Bacteriology）７版；ならびにS.A.ワツクスマン
著「アクチノミセーテス」（Actinomycetes）第
２巻（1961年）に記載されている。その操作を使
用してこの菌株は、ストレプトミセス・グリセウ
スの１菌株であることが見出され、ストレプトミ
セス・グリセウス菌株の群は「インターナシヨナ
ル・ジヤーナル・オブ・システミツク・バクテリ
オロジイ」（International Journal of Systemic
Bacteriolgy）７版（1957年）の発行２年後の
1959年に分割されたので、この版中に記載されて
いる説明、メラニン生産および炭素利用において
ストレプトミセス・グリセイヌスに非常に類似し
ている。しかし、ワツクスマンおよび「インター
ナシヨナル・ジヤーナル・オブ・システミツク・
バクテリオロジイ」においては共に、ストレプト
マイセス・グリセイヌスは「ストレプトマイセ
ス・グリセウスのグリセイン生産菌株」または
「グリセインまたはグリセイン様物質を生産す
る」と定義されている。ストレプトマイセス・グ
リセウス（MA−2837）は主としてタンニン黄色
であり、培地によつては緑黄色であるところの気
菌糸体を有し、炭素利用の型がわずかに異なるの
で、ベルゲイ中およびワツクスマン中の古典的説
明と異なる菌株である。ワツクスマンは「ザ・ア
クチノミセーテス」の111および113頁に、ストレ
プトマイセス・グリセウスの系列は多くの異なる
種および株を含み、無色ないしオリーブ黄色の基
質の生育、緑の色合いをもつ黄色、あるいは緑灰
または枯黄色または草緑ないし灰色の気菌糸体、
メラニン陰性、真直または曲り、そして房状に生
じたスフオロフオール（sphorophores）、卵型の
胞子を特徴とする。次の表は抗生物質810Aを生
産する菌株、ストレプトマイセス・グリセウスお
よびストレプトマイセス・グリセイヌスの特性を
比較する。 ベルゲイ^１およびワツクスマン^２中記載されて
いるストレプトマイセス・グリセウスと比較した
親の単離されたMA−2837の特性、ならびにまた
ワツクスマン^２中記載されているストレプトマイ
セス・グリセイヌスと比較たMA−2837の特性
は、表およびａ（下記）中に述べられてい
る。

【表】

【表】

【表】

【表】 これらの観察は、特記する場合を除き28℃にお
いて３週間の温置後になされた。これらの研究中
使用した培地のPHはほぼ中性、すなわち6.8〜7.2
であつた。生理学的試験は７および22日の終りに
実施した。説明中使用された色は「カラー・ハー
モニイ・マニユアル」（Color Harmony
Manual）４版、1958年；コンテナー・コーポレ
ーシヨン・オブ・アメリカの定義の通りである。 810A炭水化物利用： ストレプトマイセス・グリセウス菌株（MA−
2837）はまた、微生物を１％の炭水化物を含有す
る基本合成培地（T.G.プリドハムおよびD.ゴツ
トリープ、1948年）中28℃において３週間生育さ
せることにより種々の炭水化物を利用または同化
する能力について試験した。表（下記）は、ス
トレプトマイセス・グリセウス菌株（MA−
2837）によるこれらの炭水化物源の利用または同
化を示す。表中の記号の説明は次の通りであ
る：＋は良好な生育を示し、±は貧弱な生育を示
し、−は生育のないことを示す（個々の炭水化物
上）。

【表】 表、ａおよび中記載された説明を使用し
て「ベルゲイズ・マニユアル・オブ・デターミナ
テイブ・バクテリオロジイ」７版、694−829頁
（1957年）中および「ザ・アクチノミセーテス」
第２巻、61−292頁（1961年）中に記載されてい
るキイによつて１つの菌種に帰納した。この菌株
（MA−2837）を既知の菌種と比較すると、それ
がストレプトマイセス・グリセウスに類似するこ
とが示される。例えば、気菌糸体の色の形態学的
相違があり、それは、ストレプトマイセス・グリ
セウスにおいては、主としてタンニン黄色および
緑黄色であるが、類似性の有意な数および副次的
な相違のみに鑑みて新しい菌種名をつける正当性
はない。その結果、抗生物質810Aを生産する微
生物（MA−2837）はストレプトマイセス・グリ
セウスの１菌株と同定されている。 本発明は、天然から単離されるかあるいは突然
変異により得られる放線菌類の菌株を含む他の微
生物、例えば、天然の選択により得られる菌株ま
たは突然変異剤、例えば、Ｘ線照射、紫外線照
射、窒素マスタード等によりつくられる菌株（こ
れらは適当な条件下では同一の抗生物質を生じ
る。）の使用を包含する。 842A菌株：抗生物質842Aを生産する微生物は
放線菌類の従来未知の菌株である。はじめの単離
物は寒天スラント上土壌から単一コニイとして得
られ、次の組成を有する培地中生長させた： 培地Ｂ： イースト抽出液 10.0 ｇ グルコース 10.0 ｇ ※燐酸緩衝液 2.0 ml MgSO₄・7H₂O 0.05ｇ 蒸溜水 1000.0 ml PH6.5 ※燐酸緩衝液： KH₂PO₄ 91.0 ｇ Na₂HPO₄ 95.0 ｇ 蒸溜水 1000.0 ml 数日の生育の後胞子分裂を検出できないことが
見出された。この微生物は、種々の生物学的およ
び化学的研究の輪廓を基にして既知の抗生物質か
ら区別される抗生物質を生産した。他の既知の抗
生物質により得られているデータとこのデータを
比較することにより、842Aは新しい実在物とし
て確立された。 842A分類学：842Aを生産する微生物（菌株
MA−2908）は新放線菌と同定されている。この
決定において用いられた分類学は、「ベルゲイ
ス・マニユアル・オブ・デターミナテイブ・パク
テリオロジイ」、７版；ならびに「ザ・アクチノ
ミセーテス」、第２巻、「属および種の分類、同定
および説明」、クツクスマン著（1961年）に記載
されている。この操作を使用して、この菌株はス
トレプトマイセス属に属すことが見出され、既知
の種ストレプトマイセス・フラデイエの属性の多
くを有している。生化学的には、それは本質的に
後者との完全な対である。しかし、形態学的には
重要な差異がある。例えば、S.フラデイエの気菌
糸体の色は貝殻ピンク色であり、一方菌株MA−
2908は通常クリーム色に着色する。また、MA−
2908菌株における栄養生育は、用いられる種々の
培地上色素の差異を示し、後述するように、標準
分類培地上胞子分裂が検出されなかつた。これら
の差異に基づいて、この菌株は新しい種名：スト
レプトマイセス・ラクタムデユランス
（streptomyces lactamdurans）を与えられた。
下記表はストレプトマイセス・ラクタムデユラ
ンスの生化学的属性および既知のストレプトマイ
セス・フラデイエの生化学的属性を記載する。表
中すべての読みは、別記する場合を除き、28℃
において３週間の温置の後取られた。これらの研
究中使用された培地のPHはほゞ中性、即ち、6.8
〜7.2であつた。生理学的試験は、７および21日
の終りに実施された。

【表】 プトン化 プトン化
842A形態学： ８個まで観察をくり返したが、菌株特性の記載
中表示された培地上菌株を生長させた時芽胞柄は
検出されなかつた。しかし、染色した型スライド
は長い糸状体を示し、種々の寸法の小単位に多く
分節されており、一般に、幅広い形をし、寸法は
約0.9×1.7μであつた。気菌糸体は短かく、真直
ぐであり、枝分れはあまりなかつた。栄養菌糸−
幅0.9μと大体同じ寸法のように見える。軽く、
粉末状であり、容易にこすり取られる。 栄養菌糸体はグラム陽性であり、耐酸性ではな
い。粘着し、培地によつては、寒天中埋没され
る。振盪フラスコの生育の際若干の無糸分裂があ
り棒状物となるが、これは広範囲ではない。振盪
器および静置フラスコ（種培地、４〜６日、28
℃）からの栄養菌糸体は、若干の「芽」（buds）
を示し、短かく、厚く、菌糸体上ほとんど太棒形
の分節であるが、数は多くなく、その意義は未知
である。 トマト−ポテト−オートミル寒天 栄養生育−裏側、橙色平板、乾燥した外観、ひだ
がある 気菌糸体−稀薄、クリーム色 可溶性色素−なし ツアペツク−ドツクス寒天 栄養生育−平板、深いクリーム色 気菌糸体−粉末状、クリーム白色 可溶性色素−なし グリセロールアスパラギン寒天 栄養生育−平板、裏側−黄金色ないし橙色 気菌糸体−粉末状、クリーム色、淡なし色の調子 可溶性色素−淡こはく色 卵アルブミン寒天 栄養生育−平板、クリーム色ないし黄色 気菌糸体−粉末状、クリーム色 可溶性色素−なし マレイン酸カルシウム寒天 栄養生育−平板、裏側−黄色、緑−橙色 気菌糸体−粉末状、白色ないしクリーム色、緑−
なし色 可溶性色素−なし 栄養タイロシン寒天 栄養生育−平板、タンニン色ないし橙色 気菌糸体−稀薄、クリーム色、白色混在 可溶性色素−なし タイロシン結晶分解 糖蜜−イースト水解物寒天 栄養生育−平板、裏側−橙色 気菌糸体−粉末状、クリーム白色 可溶性色素−なし 栄養寒天 栄養生育−平板、黄金色に 気菌糸体−粉末状、クリーム色 可溶性色素−なし リトマスミルク 稀薄な生育環−タンニン色、栄養生育−気菌糸体
なし ペプトン化：アルカリ性反応； PH7.3〜7.4（調節PH−6.7） スキムミルク 稀薄な生育環−タンニン色ないし橙色 栄養生育−気菌糸体なし 淡タンニン色可溶性色素 ペプトン化−アルカリ性反応 PH7.2（調節PH−6.6） スキムミルク寒天 栄養生育−平板、橙色 気菌糸体−中程度、クリーム色ないし淡さんご色 淡タンニン色可溶性色素 カゼイン水解 ゼラチンスタブ 稀薄クリーム色ないし橙色フラスコ栄養生育、試
験管全体に懸濁 可溶性色素−なし 完全液化 栄養ゼラチン寒天 栄養生育−平板、橙色 気菌糸体−稀薄、粉末状クリーム色 可溶性色素−なし ゼラチン液化 栄養澱粉寒天 栄養生育−平板、橙色 気菌糸体−稀薄、粉末状、ピンククリーム色 可溶性色素−なし 澱粉中程度水解 合成澱粉寒天 栄養生育−平板、裏側−クリーム色、緑橙色 気菌糸体−粉末状、白色、緑−なし色 可溶性色素−なし 澱粉中程度水解 レフラー血清寒天 栄養生育−クリーム色、橙色に着色 気菌糸体−なし 可溶性色素−なし 液化なし ペプトン−鉄−イースト抽出液寒天 栄養生育−クリーム色 気菌糸体−稀薄−帯白色 可溶性色素−なし ミクロ好気性生育 （イースト抽出液−デキストローススタブ−スタ
ブの深さ40mm） 良好な表面生育、スタブ線の上部1/4に沿つて。 温度−イースト抽出液−デキストローススラント 28℃において良好な生育 37℃において稀薄な生育 50℃において生育なし イースト抽出液−デキストロース寒天 栄養生育−平板、黄金色 気菌糸体−粉末状、クリーム色ないし淡鮮紅色 可溶性色素−なし ポテトプラグ 栄養生育−乾燥、平板、クリーム色ないし橙色 気菌糸体−稀薄、クリーム色味 可溶性色素−なし 硝酸塩の亜硝酸塩への還元−陰性すべての読み
は28℃において３週間の温置後取られた（別記し
ない限り）。生理学的試験は７および21日おいて
実施した。 ストレプトマイセス・ラクタムデユランスとス
トレプトマイセス・フラデイエとの間の形態学的
差異は、下記表に述べられている。観察は、表
中示される培地上１週、３週および８週の間隔
で実施した。S.ラクタムデユランスの気菌糸体は
短かく、真直ぐで枝分れはあまりなかつた。それ
は栄養菌糸体とほゞ同じ寸法、即ち、幅0.9μで
あるように見える。それは軽く、粉末状で、容易
にこすり取られる。栄養菌糸体はグラム陰性であ
る；それは耐酸性ではない。それは粘着し、培地
によつては寒天中埋没される。振盪フラスコ生育
の際分節して棒状となるが、広範囲ではない。振
盪器および静置フラスコからの栄養菌糸体（種培
地、４〜６日、28℃）は若干の「芽」を示し、短
かく、厚くなり、菌糸体上ほとんど太棒形の分節
であつたが、その数は多くなかつた。表中の読
みはすべて、別記しない限り28℃における３週間
の温置後取られた。これらの研究中使用された培
地のPHはほゞ中性、即ち、6.8〜7.2であつた。生
理学的試験は、７および21日後実施した。説明中
使用される色は、「カラー・ハーモニイ・マニユ
アル」、４版、1958年；コンテナー・コーポレー
シヨン・オブ・アメリカの定義によつている。

【表】

【表】 842A炭水化物利用：ストレプトマイセス・ラ
クタムデユランス菌体（MA−2908）をまた、１
％の炭水化物を含有する基本合成培地（T.G.プ
リドハムおよびD.ゴツトリーブ）上28℃におい
て、３週間この微生物を生長させることにより、
種々の炭水化物を利用または同化する能力につい
て試験した。表は、ストレプトマイセス・ラク
タムデユランス菌株（MA−2908）によるこれら
の炭水化物源の利用または同化を示す。表中の
記号の説明は次の通りである：＋は良好な生育を
示し、±は貧弱な生育を示し、−は生育なしを示す
（特定の炭水化物上）。

【表】 表、および中記載した特性を使用して、
「ベンゲイス・マニユアル・オブ・デターミナテ
イブ・パクテリオロジイ」、７版、694〜829頁
（1957年）および「アクチノミセーテス」、第２
巻：61〜292頁（1961年）中記載されているキイ
によりストレプトマイセス・ラクタムデユランス
菌株（MA−2908）を１つの種に分類した。スト
レプトマイセス・ラクタムデユランス菌株の詳細
な特性を既知の菌種と比較することにより、この
菌株は生化学的にストレプトマイセス・フラデイ
エに類似していることが示された。しかし、上に
示したように、重要な形態学的差異があり、例え
ば、この菌株の気菌糸体の色がクリーム色である
のに比べて、S.フラデイエの気菌糸体の色は貝殻
ピンク色である。また、S.フラデイエの場合、栄
養生育は種々の培地上色素の差異を示すが、この
菌株の場合には胞子分裂が検出されなかつた。こ
れらの差異および前述した表中記載した特性に基
づいて、抗生物質842Aを生産する微生物（MA−
2908）は新種名ストレプトマイセス・ラクタムデ
ユランスを与えられた。 抗生物質842Aを生産する微生物の前記の記載
は、使用することができる微生物の菌株の型の単
に例示である。 試験管内および生体内の研究 抗生物質810A；試験管内：抗生物質810Aの生
物学的特性は、デイスク−平板寒天拡散法により
確認された。これらの試験は、培地150ml当りイ
ノキユラム５または10mlを接種し、25℃または37
℃において16時間温置したデイフコ栄養寒天およ
び0.2％イースト抽出液５mlを注いだペトリプレ
ートの表面に、抗生物質の溶液でしめらせた７mm
のデイスクを置くことにより実施された。これら
の試験の方法および原理は刊行物：「交叉耐性の
研究および抗生物質の同定」、アプライド・ミク
ロバイオロジイ、第６巻：392〜398頁（1958年）
中記載されている。次の表、ならびには、
これらの抗菌および交叉耐性試験の結果を示し、
使用された試験菌および用いられた条件を示す。

【表】

【表】 カトリア

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １ 水性栄養培地中好気的条件下ストレプトマイ
   セス属に属する７−メトキシ−３−セフエム−４
   −カルボン酸生産菌、ストレプトマイセス・グリ
   セウスMA−2837を培養し、培養物から７β−
   （Ｄ−５−アミノ−５−カルボキシブアレルアミ
   ド）−３−（α−メトキシ−ｐ−スルフオキシ又は
   ヒドロキシ シンナモイロキシメチル）−７−メ
   トキシ−３−セフエム−４−カルボン酸を採取す
   ることを特徴とする７β−（Ｄ−５−アミノ−５
   −カルボキシブアレルアミド）−３−（α−メトキ
   シ−ｐ−スルフオキシ又はヒドロキシ シンナモ
   イロキシメチル）−７−メトキシ−３−セフエム
   −４−カルボン酸の製法。