JPS61277688A - 抗生物質ａ８０４３８およびその製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、新規なポリエーテル抗生物質Ａ８０４３８お
よびストレプトマイセス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　
）種のある種の新規微生物の培養によるその製造に関す
るものである。

改良された抗生物質は、獣医学分野で絶えず必要とされ
ている。動物における成長促進を強化することは、この
ような抗生物質の１つの望ましい形である。成長促進は
、病気を減少し、飼料利用効率を高めることによって達
成することができる。

胞子虫症（コクシジウム症）は、蚕食産業にとって重大
な問題である。胞子虫症は、エイメリア（Ｅｉｍｅｒｉ
ａ）またはイソポラ（ｌ５ｏｐｏｒａ　）の１またはそ
れ以上の種による感染が原因である。胞子虫症による経
済的損失が続いているので、改良された抗胞子虫症剤が
必要とされでいる。

飼料利用効率を高めることによって成長を促進すること
は、獣医科学のもう１つの経済的に望ましい目標である
。ウシのような反別動物における成長促進は、とりわけ
重要である。

反別動物の飼料の主な栄養部分（炭水化物類）を利用す
るためのメカニズムは、よく知られている。動物の第１
胃における微生物は、炭水化物を分解しで単糖類を生成
し、次にこれらの単糖類をピルベルト化合物に変換する
。ピルベート類は微生物によって代謝され、集合的に揮
発性の脂肪酸（ＶＦＡ）として知られでいるアセテート
、ブチレートまたはプロピオネートを生成する。

ＶＦＡ利用の相対効率は、全体の効率に関係がある。即
ち、アセテートおよびブチレートも使用されるが、プロ
ピオネートはより高い効率で使用される。また、プロピ
オネート生産の発酵効率は、ブチレートまたはアセテー
トの発酵効率より大きい。このことは、利用効率に付加
される。従って、有用な化合物は、動物を刺激して炭水
化物からより高い割合のプロピオネートを生成し、その
結果、炭水化物利用効率を高める。

Ａ８０４３８は、ポリエーテル抗生物質群の新しい一員
である。ウェスドリー（Ｊｏｈｎ　Ｗ、　Ｗｅｓｔｌｅ
ｙ、「ポリエーテル抗生物質：天然の酸のイオン透過担
体（Ｐｏ１ｙｅｔｈｅｒ　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ：　
ＮａｔｕｒａｌｌｙＯｃｃｕｒｒｉｎｇ　Ａｃ１ｄ　Ｉ
ｏｎｏｐｈｏｒｅｓ　）、第２巻、ケミストリー　（Ｃ
ｈｅｍｉ　ｓ　ｔｒｙ　）　Ｊ　、デツカ−（Ｍａｒｃ
ｅｌ　Ｄｅｋｋｅｒ）、ニューヨーク、１９８３）は、
現存しているポリエーテル類をクラスおよびタイプで分
類した。ウェスドリーの系を使用すると、Ａ８０４３８
はポリエーテル群のクラスｌａ、タイプ（２）の新しい
一員である。

この群のその他のメンバーの例は、ロノマイシン（ｌｏ
ｎｏｍｙｃｉｎ）（エメリシト（ｅｍｅｒｉｃｉｄ）、
Ａ２１８、ＲＰ３１５５９およびＤＥ３９３６　　とも
称される：米国特許第３，９５０，５１４号参照）、モ
ネンシン（ｍｏｎｅｎ　ｓ　ｉｎ　）　（米国特許第３
，５０１，５６８号）、ニゲリシン（ｎｉｇｅｒｉｃｉ
ｎ　）およびレイドロマイシン（ｌａｉｄｌｏｍｙｃｉ
ｎ　）である。

本発明は、式（Ｉ）： で示される新規なポリエーテル抗生物質Ａ　８０４３８
およびそのアシル、アルキルエステル、アルキルエーテ
ル、並びにウレタン誘導体およびそれらの塩を提供する
ものである 従って、−態様として、本発明は式（■）：０　　　＋
＋ 〔式中、艮は−ＣＯＮＨＲＩであり、Ｒ１はアルキル、
アリール、アルキルアリール、アリールアルキル、ハロ
アリール、ニドロアリール、ハロアリールアルキル、ア
ルコキシアリール、アリールオキシアリール、アリール
シクロアルキル、アシルアリールおよびシクロアルキル
である〕で示される構造を有すると思われるＡ８０４３
８ウレタン誘導体およびこれらの誘導体の塩を提供する
ものである。

Ａ８０４３８は、有用な抗菌および抗胞子虫症剤である
。Ａ８０４３８は反別動物における飼料利用効率を高め
、皮調動物および単胃動物において成長促進剤として作
用する。また、Ａ８０４３８は、殺虫、変力および抗ウ
ィルス活性を有しでいる。更に、Ａ８０４３８は、イオ
ン透過担体として有用である。

Ａ８０４３８（ナトリウム塩の形態で）は、以下の特性
を有しでいる： 性状：白色結晶（アセトン−水から） ｍｐ　：　１６０−１６２℃ ｐＫａ　　：＝５．２（６６％水性ジメチルホルムアミ
　ド） 〔α〕Ｄ＝＋１０２°（Ｃ１、ＣＨＣｊ３）分子［１：
８２０（フィールド・デソープション・マススペクトル
法（ＦＤＭＳ）による）実験式：Ｃ４３Ｈ７４０１３” Ｕｖ　：吸収なし ＩＲ（酸の形態、ＣＨＣ／３）：３０１８．２９７６．
２９４０．１７３１．１４５７．１３７９．１２０６．
９６８ｃｍ　　　（第１図参照） ＩＲ（Ｎａ塩、ＣＨＣｌ！３）：３０１８．２９７９．
２９３８．２８８１．２８３２．１７１０．１５９１．
１４５４．１３８７．１３０６．１２４３．１２１５．
１１７０．１１１７，１０８９．１０７６．９７４．９
６７および８７４ｃｍ−１（第２図参照）溶解性：水に
難溶；ジメチルスルホキシド、ジメチルホルムアミド、
メタノール等の低級アルコール類、アセトン等のケトン
類、酢酸エチル等のエステル類、クロロホルム等のハロ
ゲン化炭化水素類、およびジエチルエーテル、ベンゼン
、トルエン、温ヘキサン等の炭化水素類に可溶。

その物理特性に基いて、Ａ８０４３８は式（Ｉ）に示さ
れる構造を有していると思われる。その構造から明らか
なように、Ａ８０４３８は塩およびエステル誘導体を生
成することができる酸基を有している。Ａ８０４３８は
また、エステル化され得るか、エーテル誘導体を生成し
得る少なくとも１個の水酸基を有している。Ａ８０４３
８のアシルオヨヒアルキルエステル、アルキルエーテル
、およびウレタン誘導体、およびＡ８０４３８とこれら
の誘導体の薬学的に許容し得る塩は、抗生物質として、
そして飼料利用効率を高める成長促進剤としても有用で
ある。

「アシル」という語句は、Ｃ１〜Ｃ７、好ましくは０１
〜Ｃ４のアルカン酸の部分、即ち、式；％式％ 〔式中、Ｒ１ａは例えばアセチル、プロピオニル、ブチ
リル等の６１〜Ｃ６−アルキルまたは水素である〕 で示される基を意味する。

「シクロアルキル」という語句は、シクロプロピル、シ
クロブチル、シクロヘキシル等のような３〜７個の炭素
原子を含んでいる環式炭化水素基を意味し、シクロヘキ
シルが好ましい。このようなシクロアルキル基は、本明
細書で定義するようなアリール残基で置換されて、例え
ば２−（フェニル）シクロプロピルのようなアリールシ
クロアルキル残基を構成していでもよい。

「アルコキシ」という語句は、メトキシ、エトキシ、プ
ロポキシ等のような、置換された酸素基を有しでいるＣ
１〜Ｃ７低級アルキル基を意味する。

「アリール」という語句は、例えばフェニル、ピリジニ
ルまたはフリル、特にフェニルのような、芳香族炭化水
素から水素原子を除くことによって誘導される芳香族残
基を意味する。この「アリール」残基は、種々の基で置
換されでいでもよい。

フェニル環上の置換分は、４−位にあることが好ましい
。典型的な例は、４−メチルフェニル（４−トリル）等
の４−アルキルアリール：４−クロロフェニル等の４−
ハロフェニル；４−ニトロフェニル：４−フェノキシフ
ェニル等の４−アリールオキシ−アリール：４−メトキ
シフェニル等の４−アルコキシフェニル；および４−（
メチルカルボニル）フェニル等の４−（アルキルカルボ
ニル）フエニｌＬ４タハ４−　（フェニルカルボニル）
フェニルである。

「アルキル」という語句は、Ｃ１〜Ｃ７直鎖状または分
枝踏代炭化水素、好ましくは、例えばメチル、エチル、
プロピル、インプロピル、ｎ−ブチル等のようｒｌ’ｃ
、〜Ｃ４炭化水素を意味する。

このようなアルキル基は、上で定義される様なアリール
残基で置換されて、例えばフェニルエチルまたは２−フ
ェニルエチルのようなアリールアルキル残基を構成する
か、またはハロアリール残基で置換されで、例えば４−
ブロモフェネチルのようなハロアリールアルキル残基を
構成しでいでもよい。

ｒＡ８０４３８Ａ８０４３８う語句は、抗生物質Ａ８０
４３８（式（１））、抗生物質Ａ８０４３８ノアシルあ
るいはアルキルエステル、アルキルエーテル誘導体、抗
生物質Ａ８０４３８のウレタン誘導体（式（■））また
は抗生物質Ａ８０４３８、あるいはそのアシルあるいは
アルキルエステル、アルキルエーテルあるいはウレタン
誘導体の薬学的に許容し得る塩を意味するために使用さ
れる。

抗生物質Ａ８０４３８は、ストレプトマイセスボビリ（
Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｂｏｂｉｌｉ　）　ＮＲＲ
Ｌ１５９７１　　またはストレプトマイセス・パクトウ
ム（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　　ｐａｃｔｕｍ）培養
、ＮＲＲＬ１５９７０のＡ８０４３８−産生株の液中好
気培養によって製造することができる。この抗生物質は
、当該技術分野で知られでいる種々の単離および精製方
法を使用すること・（よって、培養培地から回□収する
ことができる。

これら２種のＡ８０４３８−産生微生物の培養は、ミツ
ドウェスト・エリア・ノーザン・リージヨナル・リサー
チ・センター（Ｍｉｄｗｅｓｔ　ＡｒｅａＮｏｒｔｈｅ
ｒｎ　Ｒｅｇｉｏｎａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　Ｃｅｎｔ
ｅｒ　）、アグリカルチュラル・リサーチ・サービス（
Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　５ｅｒ
ｖｉｃｅ　）　、米国農務省（Ｕ、Ｓ、Ｄｅｐａｒｔｍ
ｅｎｔ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ）、１８１５ノ
ース・ユニヴアーシティ・ストリート（Ｎｏｒｔｈ　Ｕ
ｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　５ｔｒｅｅｔ　）　、ヘオリア（
Ｐｅｏｒｉａ　）、イリノイス（’　ｌ１ｌｉｎｏｉｓ
　）に寄託されてストック・カルチャー・コレクション
ノ一部となっており、ここから取得番号ＮＲＲＬ１５９
７１（Ｓ、ボビリ株）およびＮＲＲＬ１５９７０（Ｓ。

パフトラム株）で誰でも入手することができる。

抗生物質Ａ８０４３８の製造に有用である新規なストレ
プトマイセス・ボビリ株は、スコツトランドからの土壌
標本から単離された。Ｓ、ボビリ株の記述を簡単にする
ために、この株をＡ８０４３８培養と呼ぶ。

この微生物の分類学的研究は、リリー・リサーチ・ラボ
ラトリーズ（Ｌｉ１ｌｙ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈＬａｂｏｒ
ａｔｏｒｉｅｓ　）　　の）ｌ　ルッ（Ｆｒｅｄｅｒｉ
ｃｋ　Ｐ。

Ｍｅｒｔｚ）によって行なわれた。これらの研究に基い
て、この微生物は、ストレプトマイセス・ボビリ〔ワク
スマン・アンド・クルテイス１９１６（Ｗａｋｓｍａｎ
　ａｎｄ　Ｃｕｒｔ　ｉｓ　　ｌ　９１６　）　）の新
株として分類された（ワクスマン・アンド・ヘンリシ１
９４８　（Ｗａｋｓｍａｎ　ａｎｄＨｅｎｒｉｃｉ　　
１９４８））。

この分類は、この種に関する出版された記述〔ブキャｆ
　：／　（Ｒ，Ｅ、　Ｂｕｃｈａｎａｎ　）およびギボ
ンズ（Ｎ、Ｅ、Ｇｉｂｂｏｎｓ　）　（ｅｄｓ　）　、
　　「半、　抽−制’ツバージーの同定細菌学マニ、：
Ｌ　７　ル（Ｂｒｅｇｅｙ’ｓＭａｎｕａｌ　ｏＥ　Ｄ
ｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ
）」、第８版、ザ・ウィリアムズ・アンド・ウイルキ７
　ス−１ｙ　７ハ＝　−（Ｔｈｅ　Ｗｉｌｌｉａｍｓ　
ａｎｄＷｉｌｋｉｎｓ　Ｃｏ＋）　、ハルチモ７　（Ｂ
ａｌ　ｔ　ｉｍｏｒｅ　）、１９７４：シャーリング（
Ｅ、Ｇ、Ｓｈｉｒｌｉｎｇ　）　　およびゴツトリーブ
（Ｄ、　Ｇｏｔｔｌｉｅｂ　）、　「ストレプトマイセ
スのタイプカルチャーに関する共著（Ｃｏ　ｏｐｅｒａ
ｔｉｖｅ　Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｏｆ　ＴｙｐｅＣ
ｕｌｔｕｒｅｓ　ｏｆ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　）
　Ｊ　、インターナショナル・ジャーナル・オブ・シス
テマテイツク・バクテリオロジ−（Ｉｎｔ、　Ｊ、　５
ｙｓｔ、　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、）１８（４１：２７９
−３９９（１９６８）：および’７　クス７７　（Ｓ、
　Ａ、　Ｗａｋｓｍａｎ　）、　［アクチノマイセテス
第■巻（Ｔｈｅ　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ　Ｖｏｌ
、ＩＦ）Ｊ、ザ・ウィリアムズ・アンド・ウイルキンス
、カンパ＝　−（Ｔｈｅ　Ｗｉ　Ｉｋｉｎｓ　ａｎｄ　
Ｗｉ　１ｋｉｎｓＣｏ、　）　、ハルチーＥ−７（Ｂａ
ｌ　ｔ　ｉｍｏｒｅ　）、１９６１〕の試験に基いてい
る。

使用した方法 ストレプトマイセス種の特徴づけのために、インターナ
ショナル・ストレプトマイセス・プロジェク　ト　（Ｉ
ｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　　　Ｓｔｅｐｔｏｍｙｃｅ
ｓＰｒｏｊｅｃｔ　）　（Ｉ　Ｓ　Ｐ　）によって推奨
されでいる方法〔シャーリング（Ｅ、Ｂ、　Ｓｈｉｒｌ
ｉｎｇ　）およびゴツトリーブ（Ｄ、　Ｇｏｔｔｌｉｅ
ｂ　）　、「７．　トＬ’ブトマイセス種の特徴づけの
ための方法（Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｆｏｒＣｈａｒａｃｔｅ
ｒｉｚａｔｉｏｎ　ｏｆ　ＳｔｅｐｔｏｍｙｃｅｓＳｐ
ｅｃｉｅｓ）」、インターナショナル・ジャーナル・オ
ブ・システマテインク・バクテリオロジ−（Ｉｎｔ、Ｊ
。

５ｙｓｔ、　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ　、）　１６（３）、
３１３−３４０（１９６６）Ｊに次いで、幾つかの追加
試験〔ハード（Ｄ、　Ｂｅｒｄ　）、「臨床上重要な好
気性アクチノマイセテスの実験的同定（Ｌａｂｏｒａｔ
ｏｒｙ　Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｃ１１
ｎｉｃａｌｌｙ　ＩｍｐｏｒｔａｎｔＡｅｒｏｂｉｃ　
Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｃｅｓ　）　Ｊ、アプライド・マ
イクロバイオロジ＝（Ａｐｐｌ　、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏ
ｌ　、）　２５（４）、６６５−６８１（１９７３）：
ブラツエビック（Ｄ、Ｊ、　Ｂｌａｚｅｖｉｃ　）およ
びエデラー（Ｇ、　Ｍ。

Ｅｄｅｒｅｒ　）、「診断的微生物学における生化学試
験の指針（Ｐｒ１ｎｃｉｐｌｅｓ　ｏｆ　Ｂｉｏｃｈｅ
ｍｉｃａｌＴｅｓｔｓ　　　ｉｎ　　　Ｄｉａｇｎｏ、
５ｔｉｃ　　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ　　）　Ｊ　　
、ジョン・ウィリー・アンド・サンズ・インコーホレイ
テッド（Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ、　
Ｉｎｃ、　）、ニューヨーク、１９７５、Ｐ、１３６］
も一緒に行なった。

炭素利用は、沖過−滅菌した炭素源を加えて１゜０％の
終濃度にしたＩ　Ｓ　Ｐ　Ａ　９基礎培地上で調べた。

プレートを３０℃でインキュベートし、１４日後に読み
取った。

メラノイド色素生産（色素生成性）は、ＩＳＰＳｉＣ２
リプトン−酵母エキスブロス）、ＩＳＰ黒６（ペプトン
−酵母エキス鉄寒天）、ｌ５ＰＡ７（チロシン寒天）お
よびチロシンを除いた改良ｌ５ＰＡ７を使用して調べた
。

デンプン加水分解は、Ｉ　Ｓ　Ｐ　Ａ　４　（無機塩−
デンプン寒天）プレート（上記ブラツエビツクおよびエ
デラー参照）上でヨウ素を用いてデンプンの存在を試験
することによって調べた。

形態は、光学顕微鏡を使用して調べた。胞子表面の修飾
を調べるために走査式電子顕微鏡（Ｓ　ＥＭ）を使用し
た。

ＮａＣｌ　　耐性は、Ｉ　Ｓ　Ｐ　Ａ　２寒天にＮａＣ
ｌ！　　を添加して所望の濃度にすることによって求め
た。

色名を示すために、Ｉｃ５ｓ−ＮＢＳ・セントロイド・
カラー・チャート（ＩＣ５Ｓ−ＮＢＳＣｅｎｔｒｏｉｄ
　Ｃｏ１ｏｒ　Ｃｈａｒｔｓ　）、標準サンプル１Ｋ２
１０６　〔（ナショナル・ビューロー・オプ・スタンダ
ーズ（Ｎａｔｉｏｎａｌ　　Ｂｕｒｅａｕ　ｏｆ　５ｔ
ａｎｄａｒｄｓ）、１９５８．米国商務省、ワシントン
、Ｄ、Ｃ，〕オヨヒカラー・ハーモニー・マニュアル（
ＣｏｌｏｒＨａｒｍｏｎｙ　Ｍａｎｕａｌ　）　　Ｃ（
第４版、カラースタンダーズ・デパートメント（Ｃｏ１
ｏｒ　ＳｔａｎｄａｒｄｓＤｅｐａｒｔｍｅｎｔ　）、
コンテナー−コーポレイション・オブ・アメリカ（Ｃｏ
ｎｔａｉｎｅｒ　Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎｏｆ　　Ａｍ
ｅｒｉｃａ　）、シカゴ、イリノイス、１９５８〕を使
用した。

細胞全体の氷解物中のジアミノピメリン酸（ＤＡＰ）の
異性体および炭水化物は、ベラカー等〔ベラカー（Ｂ、
Ｂｅｃｋｅｒ　）　、Ｌ／チェバリア　（Ｍ、ｐ。

Ｌｅｃｈｅｖａｌ　ｉｅｒ　）、　ゴードア　（ＲｏＥ
、　Ｇｏｒｄｏｎ　）およびレチェバリ７　（Ｈ，Ａ、
Ｌｅｃｈｅｖａｌ　ｉｅｒ　）　。

［全−細胞氷解物のペーパークロマトグラフィーによる
ノカルディアとストレプトマイセスの迅速な識別（Ｒａ
ｐｉｄ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　　ｂｅｔｗ
ｅｅｎＮｏｃａｒｄｉａ　ａｎｄ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙ
ｃｅｓ　ｂｙ　ＰａｐｅｒＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ
ｙ　ｏｆ　Ｗｈｏｌｅ−ｃｅｌｌＨｙｄｒｏｌｙｓａＬ
ｅｓ　）　Ｊ、アプライド・マイクロバイオロジー（Ａ
ｐｐｌ　、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏ＋　、　）　１２．４２
１−４２３（１９６４））およびレチェバリ、ア〔レチ
ェバリ７　（Ｍ、Ｐ、Ｌｅｃｈｅｖａｌ　ｉｅｒ　）、
「臨床上重要す好気性アクチノマイセテスの同定（Ｉｄ
ｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｅｒｏｂｉｃ　Ａ
ｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓｏｆｃｌｉｎｉｃａｌ　　Ｉ
ｍｐｏｒｔａｎｃｅ）Ｊ、ジャーナｊＬｒ　−オブ・ラ
ボラトリ−・アンド・クリニカル・メゾイス７　（Ｊ、
　Ｌａｂ、Ｃｌ１ｎ、Ｍｅｄ、　）　７１．９３４−９
４４（１９６８））のクロマトグラフィーによる方法で
調べた。

リゾチームに対する耐性は、ゴートンおよびバーネット
〔ゴートン（Ｒ２Ｈ，Ｇｏｒｄｎ　）　　およびバーネ
ット（Ｄ、Ａ、　Ｂａｒｎｅｔｊ　）、［分類学的手段
としての、ある種のミコバクテリウムとノカルディアの
株の、リフアンピンおよびリゾチームに対する耐性（Ｒ
ｅ５ｉｓｔａｎｃｅ　ｔｏ　Ｒｉｆａｍｐｉｎ　ａｎｄ
Ｌｙｓｏｚｙｍｅ　ｏｆ　５ｔｒａｉｎｓ　ｏｆ　Ｓｏ
ｍｅ　５ｐｅｃｉｅｓ　ｏｆＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕ
ｍ　ａｎｄ　Ｎｏｃａｒｄｉａ　ａｓ　　ａＴａｘｏｎ
ｏｍｉｃ　Ｔｏｏｌ　）　Ｊ、インターナショナル・ジ
ャーナル・オブ・システマテイツク・バクテリウムジ−
（Ｉｎｔ、　Ｊ、　５ｙｓｔ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、）
　２７．１７６−１７８（１９７７）Ｊ　　によって提
示された方法で調へた。

抗生物質に対する耐性は、微生物が蒔かれているＩ　Ｓ
　Ｐ　ＪＶ、２　　寒天プレートの表面に抗生物質感受
性ディスクを当てることによって調べた。

ホスファターゼおよびウレアーゼは、上記ブラツエビツ
クおよびエデラーによって記載された方法で求めた。

培養特性 微生物は、複合培地および化学的に限定された培地で非
常に限られた生育を示した。合計１５個の寒天培地から
、５個だけがよく生育し、４個がわずかに生育し、残り
の６個は全く生育しなかった。ＩＳＰ培地Ｎｏｓ、２．
５．７、エマーソンズ寒天、および酵母−デキストロー
ス寒天には、よく生育した。気中菌糸は生成されない。

分生子束は豊富に生成される。生育能が限られており、
分生子束が豊富に生成されることがこの培養の著しい特
徴である。巨視的に、生育した２次生長にわずかに類似
しでいるこの分生子束は、赤みがかった色である。トレ
ズナー・アンド・バッカス・シフ、　テム（トレ７：　
ｆ　−（ＨｏＤ、Ｔｒｅｓｎｅｒ　）およびバッカス（
Ｅ、　Ｊ、　Ｂａｃｋｕｓ　）、「ストレプトマイセス
の分類のためのカラー・フィールのシステム（Ｓｙｓｔ
ｅｍ　ｏｆ　Ｃｏ１ｏｒ　Ｗｈｅｅｌｓ　　ｆｏｒ　Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｔｅｓ　Ｔａｘｏｎｏｍｙ　）　
Ｊ、アプライド−マイクロバイオロジー（Ａｐｐｌ　０
Ｍ１ｃｒｏｂｉｏ’ｌ　、　）　１１　：　３３５−３
３８　　（１９５６））において最もよく合っている色
の札は、５ｃｂの灰色黄色を帯びたピンクである。

コロニーの裏側は、赤橙色から淡黄茶色である。

可溶性色素は生成されない。これらの培養特性は、ＩＳ
Ｐ培地＆７（チロシン寒天）に最もよく示される。表１
はこれらの培養特性を表わしたものである。

表Ｉ　　Ａ８０４３８の培養特性３ 表１（続き〕 ａ：ツアペック（Ｃｚａｐｅｋ’ｓ）　、グリセロール
−グリシンおよびポテト−ニンジンの寒天上。

では生育がわずかであり：　ｌ５Ｐ３　、ｌ５Ｐ４、水
道水、アニオーヘンセンス（Ａｎｉ。

−Ｈｅｎｓｅｎｓ　）　ｓ　グルコース−’７’スパラ
ギンおよびトマトペースト−オートミールの寒天上では
全く生育しなかった。

ｂ：ｃ＝生育；艮＝裏：Ｃ＝分生子束：Ｓｐ＝可溶性色
素 形態特性 Ａ８０４３８は、胞子を生成しない。分生子束の存在は
、独特の形態特性を表わしでいる。この分生子束は繊維
性であり、豊富であり、光学および電子の両顕微鏡で容
易に観察される。

生理学的特性 加水分解された細胞全体の分析により、ＬＩ。

ＤＡＰは存在しているが、そのメン異性体は存在してい
ないことがわかった。アラビノース、グルコース、ラム
ノースおよびリボースが、糖成分である。細胞壁はタイ
プエである。アラビノースは通常、ストレプトマイセス
の細胞壁に存在しない。

しかしながら、プリダム〔プリダム（Ｔ、Ｇ。

Ｐｒｉｄｈａｍ）　およびリョンズ（Ａ、Ｊ、Ｌｙｏｎ
ｓ、’Ｊｒ。

）、［工業的微生物学における発展（Ｄｅｖｅｌｏｐｍ
ｅｎｔｓＩｎ　Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ　Ｍｉｃｒｏｂｉ
ｏｌｏｇｙ　）、第１０巻」中の「ある種の問題アクチ
ノマイセテスの分類上および命名上の地位の説明におけ
る進歩（Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｉｎ　Ｃ１ａｒｉｆｉｃａ
ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｔｈｅＴａｘｏｎｏｍｉｃ　ａｎｄ　
Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒａｌ　５ｔａｔｕｓ　ｏｆＳｏ
ｍｅ　Ｐｒｏｂｌｅｍ　Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ　
）　Ｊ　、アメリカン・インステイチュート・オブ・バ
イオロジカル・サイエンシズ、ワシントン、Ｄ、Ｃ，，
１９６９（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｉｎ５ｔｉｔｕｔｅ　ｏ
ｆ　ＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ、　Ｗａｓ
ｈｉｎｇｔｏｎ、　Ｄ、Ｃ８ｌ　９５９　）　］は、ア
ラビノースが見い出された幾つかの種を挙げている。細
胞壁の糖のパターンは、ｒＮＣＪ（非特徴的糖）に分類
される。培養Ａ８０４３８は、ストレプトマイセス属に
属する。しかしながら、これはこの属の典型的な分類群
ではない。

Ａ８０４３８の炭素利用パターンは、以下の通りである
：アドニトール、セロビオース、Ｄ−フルクトース、Ｄ
−ガラクト−ス、Ｄ−グルコース、ｉ−イノシトール、
Ｄ−ラクトース、Ｄ−フルクトース、Ｄ−メリビオース
、ラフィノース、Ｌ−ラムノース、リボース、スクロー
ス、トレハロースおよびＤ−キシロースは、生育のため
に利用される。Ｌ−アラビノース、セルロース、テキス
トラン、イヌリン、マンニトール、Ｄ−マンノース、サ
リシンおよびキシリトールは、生育に役立たない。

培養Ａ８０４３８は、セファロチン（３０μｇ）、リン
コマイシン（２μｇ）およびペニシリンＣ（１０単位）
に耐性である。この培養は、バシトラシン（１０単位）
、ゲンタマイシン（１０μｇ）、ネオマイシン（３０μ
ｇ）、オレアンドマイシン（１５単位）、リフアンピン
（５μｇ）、ストレプトマイシン（１０μｇ）、テトラ
サイタリン（３０μｇ）、）ブラマイシン（１０μｇ）
、ヴアンコマイシン（３０μｇ）およびリゾチームに感
受性である。

培養Ａ８０４３８は、グラム陽性であり、ノンアシッド
・ファースト（ｎｏｎａｃｉｄ　　ｆａｓｔ　）　　で
ある。この培養は、脱脂乳を加水分解またはペプトン化
せず、ゼラチンを液化しない。この培養は・有機硝酸塩
ブロス（ＩＳＰＢ）　　中で硝酸塩を亜硝酸塩に還元し
、４％ＮａＣｌ！　まで耐性であり、１０〜４２℃の温
度で生育する。８時間５０℃にさらされた場合、生き残
らない。

Ａ８０４３８がＩＳｐ　１　（トリプトン−酵母エキス
ブロス）中、またはＩＳＰ　５　（ペプトン−酵母エキ
ス−鉄寒天）あるいはｌ５Ｐ７（チロシン寒天）の斜面
培地上で生育する場合、メラノイド色素は生産されない
。

Ａ８０４３８は、カタラーゼ、ホスファターゼおよびウ
レアーゼを生産しない。

培養へ８０４３８は、カゼイン、ＤＮＡ、エスクリン、
ヒポキサンチン、チロシンおよびキサンチンを分解する
。マレイン酸カルシウム、キチン、エラスチン、グアニ
ン、ヒップレート（馬尿酸塩）、ケラチンまたはデンプ
ンを分解しない。

種の決定 Ａ８０４３８株の培養、形態および生理学的特性を、類
似しでいる種の公表されている記述と比較した。以下の
５種がＡ８０４３８に類似しでいる。

ストレプトマイセス・アエロコロニケネス（”Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ　ａｅｒｏｃｏｌｏｎｉｇｅｎｅｓ）
ａストレプトマイセス・ボビリ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍγｃ
ｅｓｂｏｂｉｌｉ　）ａ ストレプトマイセス・グロメロアウランテイアクス（Ｓ
ｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　Ｇｌｏｍｅｒｏａｕｒａｎｔ
ｉａｃｕｓ）ｂストレプトマイセス・ヴエンダルゲネシ
ス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　　ｖｅｎｄａｒｇｅｎ
ｅｓｉｓ　）ｃストレプトマイセスーヴエルネ（Ｓｔｒ
ｅｐｔｏｍｙｃｅｓｖｅｒｎｅ）　ｃ ａ：シャーリングおよびゴツトリーブ、１９６８％前記 ｂ：シャーリング（Ｅ、Ｂ、Ｓｈｉｒｌｉｎｇ　）およ
びゴツトリーブ（Ｄ、Ｇｏｔｔｌｉｅｂ　）、「ストレ
プトマイセスのタイプカルチャーに関する共著（Ｃｏｏ
ｐｅｒａｔｉｖｅ　Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｏｆＴｙ
ｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅｓ　ｏｆ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
ｅｓ　）　Ｊ、インターナショナル・ジャーナル・オブ
・システマテイツク・バクテリオロジー（Ｉｎｃ、Ｊ、
５ｙｓｔ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、）２２（４１，Ｃ：シ
ャーリング（Ｅ、Ｂ、　Ｓｈｉｒｌｉｎｇ　）およびゴ
ツトリーブ（Ｄ、Ｇｏｔｔｌｉｅｂ　）、　［ストレプ
トマイセスのタイプカルチャーに関する共著（Ｃｏｏｐ
ｅｒａｔｉｖｅ　Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎｏｆ　Ｔｙｐ
ｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅｓ　　ｏｆ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃ
ｅｓ）」、インターナショナル・ジャーナル・オブ・シ
ステマテイック・バクテリオロジ−（Ｉｎｔ、Ｊ、５ｙ
ｓｔ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ　、　）　１９（４）、３７
５−３９０（１９６９） これらの５培養は、気中菌糸を有しでおらず。

メラノイド色素を生産せず、類似した炭素利用パターン
を有しでおり、Ａ８０４３８と同様のその他の培養およ
び生理学的特性を有しでいると文献に報告されでいる。

上の５種の培養の内、Ｓ、ボビリはＡ８０４３８に類似
したより多くの特性を有しでいる。また、Ｓ、ボビリト
Ｓ、グロメロアウランティアクスだけが、バクテリア名
の公認リスト〔スカーマン（Ｖ、　Ｂ、Ｄ、Ｓｋｅｒｍ
ａｎ　）等、「バクテリア名ノ公認リスト（Ａｐｐｒｏ
ｖｅｄ　Ｌｉ５ｔｓ　ｏｆ　ＢａｃｉｅｒｉａｌＮａｍ
ｅｓ’　）　Ｊ　、インターナショナル・ジャーナル・
オブ・システマテイツク・バクテリオロジ−（Ｉｎｔ、
Ｊ、　５ｙｓｔ、　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、　）　３Ｑ　
　（１）、２２５−４２０　　（１９８０））に、正当
に発表されたものとして挙げられている。

Ｓ、ボビリは、培養的および生理学的にＡ８０４３８に
類似しでいる。培養的には、両培養は気中菌糸または可
溶性色素を生成しない。両培養はコロニーの裏側に非常
に特色ある赤橙色の色素を有している。両培養は気中菌
糸を生成しないので、形態上の比較を行なうことはでき
ない。Ａ８０４３８は分生子束を生成する。Ｓ、ボビリ
の発表された記述は、これらの構造に言及していない。

前記のワクスマン（Ｗａｋｓｍａｎ　）は「分生子束の
生成は分類上全く重要ではない」と述べているので、八
８０４３８のこの特色ある形態はあまり強調されなかっ
た。

Ａ８０４３８とＳ、ボビリに共通している生理学的特性
は、硝酸塩の還元、メラノイド色素が存在しないこと、
４％ＮａＣｌに対する耐性、ストレプトマイシンによる
阻害および類似した炭素利用パターンである。Ａ８０４
３８とＳ、ボビリの類似点および相違点を以下に挙げる
： 類似点 気中菌糸が存在しない メラノイド色素が存在しない 可溶性色素が存在しない 炭素利用パターン 裏側の色 る ストレプトマイシンに外盟害 ＮａＣ／酎性 硝耐塩の還元 相違点 ゼラチンの液化 ツアペック寒天上の生育 グルコース−アスパラギン寒天上の生育デンプンの加水
分解 ミルクのペプトン化 ｐＨ指示薬の逆変色 表■は、Ａ８０４３８とＳ・ボビリの特性の詳細な比較
を提供するものである。

表ｎ　　Ａ８０４３８とストレプトマイセス・ボビリの
特性の比較３ ａ：＋＝陽性の反応 一＝陰性の反応 これらの比較は、Ａ８０４３８はＳ・ボビリに類／ｌ’
Ｊ　ｌ　　１１．％　′Ｌ７　Ｌ　光子ｌ　　−１，％
　Ｚ　　ｉｆｆ　３ｒ　−＃　Ｊ−＋　　Ａ　Ｑｌ’１
ＪＱＱを新しい分類群として創設するのに十分とは思え
ない。従って、Ａ８０４３８　　培養は、ストレプトマ
イセス・ボビリ（ワクスマン・アンド・クルテイス１９
１６）ワクスマン・アンド・ヘンリシ１９４８の株とし
て分類される。

他の微生物と同様に、Ａ８０４３８−産生培養ストレプ
トマイセス・ボビリＮＲＲＬ１５９７１の性質は変異し
易い。この株の組換え株、突然変異株または変異≠株は
、当技術分野で既知の方法で得ることができる。例えば
突然変買株は、紫外光、Ｘ線、ガンマ線、およびＮ−メ
チル−Ｎ′−二トローＮ＝ニトロソグアニジン等の化学
物質のような、種々の既知の物理的および化学的突然変
異誘発物質で処理することによって得ることができる。

へ８０４３８産生の性質を有しているこのストレプトマ
イセス・ボビリ株の天然株および誘発された変異株、突
然変異株、および組換え株の全てが本発明に包含される
ものである。

ストレプトマイセス・パクトウム（Ｓｔｒｅｐｔ。

ｍｙｃｅｓ　　ｐａｃｔｕｍ　）と名付けられた本発明
の微生物は、抗生物質Ａ８０４３８の製造に有用である
。

こノ微生物は、ニューシャーシーからの土壌標本から単
離された。本発明のストレプトマイセス・パクトウム株
の培養は、ミツドウェスト・エリア・ノーザン・リージ
ョナル・リサーチ・センター、アグリカルチュラル・リ
サーチ・サービス、米国農務省、ノース・ユニヴアーシ
ティ・ストリート１８１５、ペオリア、イリノイス６１
６０４（Ｍｉｄｗｅｓｔ　Ａｒｅａ　Ｎｏｒｔｈｅｒｎ
　Ｒｅｇｉｏｎａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒ、
　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　５ｅ
ｒｖｉｃｅ。

Ｕ、Ｓ、Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ　ｏｆ　Ａｇｒｉｃｕｌ
ｔｕｒｅ、　　１　Ｂ　１５Ｎｏｒｔｈ　Ｕｎｉｖｅｒ
ｓｉｔｙ　５ｔｒｅｅｔ、　Ｐｅｏｒｉａ、　ｌ１ｌｉ
ｎｏｉｓ６１６０４）　　に寄託され、ストック・カル
チャー・コレクションの１部となっており、ここからＮ
ＲＲＬ　１５９７０　　の取得番号で誰でも入手するこ
とができる。

この微生物の分類上の研究は、ＩＪ　ＩＪ−・リサーチ
・ラボラトリーズ（Ｌｉ１ｌｙ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈＬａ
ｂｏｒａｔｏｒｉ−ｅｓ　）　　の）ｔ　ルツ（Ｆｒｅ
ｄｅｒｉｃｋ　Ｐ。

Ｍｅｒｔｚ）　　によって行なわれた。これらの研究に
基いて、この微生物は、ストレプトマイセス・バクトウ
ムビュヤン・ディエラ・アンド・スミス１９６２（Ｂｈ
ｕｙａｎ、　Ｄｉｅｔｚ　ａｎｄ　Ｓｍ１ｔｈ　１９５
２）の新株として分類される。この分類は、この種に関
する出版された記述〔ブキャナン（Ｒ，Ｅ。

Ｂｕｃｈａｎａｎ　）およびギボンズ（Ｎ、　Ｅ、　Ｇ
ｉｂｂｏｎｓ　）（ｅｄｓ　）、［バージ−の同定細菌
学マニュアル（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌ　　ｏ
ｆ　ＤｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅＢａｃｔｅｒｉｏｌｏ
ｇｙ　）　Ｊ　、第８版、す・ウィリアムス・アンド・
ウイルキンス・カンパニー（ＴｈｅＷｉｌｌｉａｍｓ　
　ａｎｄ　Ｗｉｌｋｉｎｓ　Ｇｏ、）、ハ／Ｉ／チモア
、１９７４　：およびシャーリング（Ｅ、Ｂ、Ｓｈｉｒ
ｌｉｎｇ）およびゴツトリーブ（Ｄ、Ｇｏｔｔｌ　ｉｅ
ｂ　）、　［ストレプトマイセスのタイプカルチャーに
関する共著（Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ　Ｄｅｓｃｒｉｐ
ｔｉｏｎ　ｏｆ　ＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅｓ　　ｏｆ　
　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　）　　Ｊ、インターナシ
ョナル・ジャーナル・オブ・システマテイツク・バクテ
リオロジ−（Ｉｎｔ、　Ｊ、５ｙｓｔ。

Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、　）　２２　（４）：　２６５−
３９４（１９７２）〕の試験に基いている。

記述を簡単【するために、この株の性質の以下の解説で
は、この新しいストレプトマイセス・パクトウム株をへ
８０３７３培養と呼ぶ。

（以下余白） 使用した方法 ストレプトマイセス種の特徴づけのために、インターナ
ショナル・ストレプトマイセス・プロジェクト（、Ｉｎ
ｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｓｔｒｅｐｔｍｙｃｅｓ　Ｐ
ｒｏｊｅ　−ｃｔ（−１ＳＰ））によって推奨されてい
る方法〔シャーリング（Ｅ、Ｂ、　Ｓｈｉｒｌｉｎｇ）
およびゴツトリーブ（Ｄ、Ｇｏｔ、ｔｌｉｅＪ、「スト
レプトマイセス種の特徴づけのための方法（Ｍｏｔｈｏ
ｄｓ　ｆｏｒ　Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉ　−ｚａｔｉｏｎ
　ｏｆ　Ｓｔｒｅｐｔｍｙｃｅｓ　５ｐｅｃｉｅｓ）」
、インターナショナル・ジャーナル・オブ・システマテ
イツク・バクテリオロジ−（ＩｎｔＪ、５ｙｓｔ、Ｂａ
ｃｔｅ　−ｒｉｏｌＪ　１６　（３）、３１３−３４０
Ｃ１９６Ｌ））　ヲ行なった。

１．０％の終濃度まで、濾過滅菌した炭素源を加えたＩ
ＳＰ／３．９基礎培地上で炭素利用を調べた。プレート
を３０℃でインキュベートし、１４日後に読み取った。

メラノイド色素の生産（色素生成〕は、ＩＳＰ湾１（ト
リプトン−酵母エキスブロス〕、ＩＳＰ＆、６（ヘプト
ン−酵母エキス鉄寒天〕およびＩＳＰ＆、７（チロシン
寒天〕を使用して調べた。

デンプン加水分解は、ｌ５Ｐ４４（無機塩類−デンプン
寒天〕プレート上でヨウ素を使用してデンプンの存在を
試験することによって調べた〔ブラツエビック（Ｄ、　
Ｊ　、Ｂｌ　ａｚｅｖｉりおよびエデラーＣＧ、Ｍ、　
Ｅｄｅｒｅｒ）、［診断的微生物学における生化学試験
の指針（Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ　ｏｆ　Ｂｉｏｃｈｅｍ
ｉｃａｌＴｅｓｔｓ　ｉｎ　Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ　Ｍ
ｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ月、ジョン・ウィリー・アンド
・サンズ・インコーポレイテ゛ンド（Ｊｏｈｎ　ＷｉＬ
ｅｙ　ａｎｄ　５ｏｎｓ　、Ｉｎｃ、上ニューヨーク、
１９７５、Ｐ、１３６　）。

（以下余白ン 形態は、光学顕微鏡を使用しで調べた。胞子表面の修飾
を調べるために、走査式電子顕微鏡（ＳＥＭ）を使用し
た。

ＮａＣ／　　耐性は、ＩＳＰ＆２寒天に所望の濃度まで
Ｎ　ａ　Ｃ／　　を添加することによって測定した。

色名を表わすために、ＩＣ５Ｓ−ＮＢＳ　　セントロイ
ト・カラー・チャート（Ｃｅｎｔｒｏｉｄ　Ｃｏ１ｏｒ
Ｃｈａｒｔｓ　）、標準サンプル＆２１０６　　（ナシ
ョナル・ビューロー・オブ・スタンダーズ、米国商務省
、ワシントン、Ｄ、Ｃ，１９５８）およびザ・カラー・
ハーモニー・マニュアル（ｔｈｅ　ＣｏｌｏｒＨａｒｍ
ｏｎｙ　Ｍａｎｕａｌ　）　（第４版、カラー−スタン
ダーズ・デパートメント、コンテナー・コーポレイショ
ン・オブ・アメリカ、シカゴ、イリノイス、１９５８）
を使用した。

細胞全体の氷解物中のジアミノピメリン酸（ＤＡＰ）の
異性体および炭水化物は、ベラカー等〔ベラカー（Ｂ、
　Ｂｅｃｋｅｙ　）、レチェバリ７（Ｍ、Ｐ。

Ｌｅｃｈｅｖａｌ　ｉｅｒ　）、ゴードア　（ＲｌＥ、
Ｇｏｒｄｏｎ　）およびＬ／　チｊｌ−／ｆす７　（Ｈ
，Ａ、　Ｌｅｃｈｅｖａｌ　ｉｅｒ　）、［全細胞氷解
物のペーパークロマトグラフィーによるノカルディアと
ストレプトマイセスの迅速な識別（Ｒａｐｉｄ　　Ｄｉ
ｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎＮｏｃａ
ｒｄｉａ　　ａｎｄ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　　ｂ
ｙ　ＰａｐｅｒＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ　ｏｆ　
Ｗｈｏｌｅ　　−ＣｅｌｌＨｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ　
）　Ｊ、アプライド・マイクロバイオロジー（Ａｐｐｌ
、　　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、　）　１２．４２１−４２
３　（１９６４））およびレチェバリア〔レチェハリ７
　（Ｍ、　Ｐ、Ｌｅｃｈｅｖａｌ　ｉｅｒ　）、臨床上
重要な好気性アクチノマイセテ （以下余白） スの同定（Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａｅ
ｒｏｂｉｃ　Ａｃｔ　−ｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ　ｏｆ　
Ｃ１１ｎｉｃａｌ　Ｉｍｐｏｒｔａｎｃす」、ジャーナ
ル・オブ・ラボラトリ−・アンド・クリニｆｙ　ル、ｌ
　ｆ　イスン（Ｊ、Ｌａｂ、Ｃｌ１ｎ、Ｍｅｄ、）　７
１　．９３４−９４４（１９６Ｂ）コのクロマトグラフ
ィーによる方法で調べた。

抗生物質に対する耐性は、菌を蒔いたｌ５Ｐ７Ｆ５゜２
寒天プレートの表面に抗生物質感受性ディスクを当てる
ことによって調べた。

培養特性 この株の培養特性を調べるために、合計１５個の寒天培
地を使用した。多数の培地で豊富な生育が観察されたが
、良好な気体生成はわずか数個の培地に限られた。この
培養は、酵母麦芽エキス寒天（ＩＳＰ　Ａ　２　）、グ
リセロールアスパラギン寒天（ＩＳＰ　＆　５大　グル
コース−アスパラギン寒天、トマトペースト−オートミ
ール寒天およびチロシン寒天（ＩＳ’Ｐ　Ａ　７　）に
おいて、灰色系の気中菌糸を生成した。トレズナー・ア
ンドバッカス・システム〔トレズナ−Ｌ　Ｈ，Ｄ、Ｔｒ
ｅｉｎｅｒ　）およびバツカス（Ｅ、Ｊ、Ｂａｃｋｕｓ
　）、［ストレプトマイセテス分類のためのカラーフィ
ールのシステム（Ｓｙｓｔｅｍｏｆ　Ｃｏ１ｏｒ　Ｗｈ
ｅｅｌｓ　ｆｏｒ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｔｅ　Ｔａ
ｘ　−ｏｎｏｍｙ）Ｊ、アプライド・マイクロバイオロ
ジー（Ａｐｐｌ、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、）　１１　　：
３３５−３３８　（１９５６）〕において最もよく合っ
ている色の札はｔｄ）淡灰色である。オートミール寒天
（ＩＳＰ／ＩＧ、３）、ツアペック寒天、アニオーヘン
センス寒天およびポテト−ニンジン寒天において非常に
わずかな生育および気体生成が観察された。これらの培
地での胞子塊の色は白であった。デンプン塩類（ＩＳＰ
厖４）または水道水−寒天において生育は観察されなか
った。分生子束および不稔の気中菌糸は、多数の寒天培
地上で生成された。Ａ３０３７３　は、灰色系に位置づ
けられる。

Ａ３０３７３の裏側は黄−茶〜暗赤−茶色であり、これ
は培地によって決まる。この培養がｌｓＰ　Ａ。

２．５、および７培地で生育する場合、淡茶色の。

可溶性色素が存在する。６個の主要な培地における培養
特性を表１に示す。

表１　選ばれた寒天培地におけるＡ３０３７３　の培養
特性 表１（続き） Ｇ＝生育 に＝裏 顯す気中菌糸 ５ｐ＝可溶性色素 形態特性 Ａ３０３７３　　は、ＩＳＰ　厖５．７培地およびグル
コースアスパラギン寒天上で不稔の気中菌糸をつくる。

この培養は、エマーソン、グルコース−アスパラギンお
よび酵母デキストロース寒天において分生子束をつくる
。

３〜５回転のコイル状の単胞子体は、多数の培地に見ら
れる。これはツアペック溶液寒天上に最もよく表われて
いる。培養８０３７３は、プリダム〔プリダム（Ｔ、Ｇ
、　Ｐｒｉｄｈａｍ）およびリョンズ（Ａ、Ｊ、　Ｌｙ
ｏｎｓ　、Ｊす、［工業的微生物学における発展（Ｄｅ
ｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ　　Ｉｎ　　Ｉｎｄｕｓｔｒｉａ
ｌ　　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ−Ｏｇｙ）」、１０巻、アメ
リカン・インステイチュート・オブ・バイオロジカル・
サイエンシス（Ａｍｅ　−ｒｉｃａｎ　Ｉｎ５ｔｉｔｕ
ｔｅ　ｏｆ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　５ｃｉｅｎｃｅす
、ワシントン、Ｄ、Ｃ１１９６９中の「幾つかの問題ア
クチノマイセテスの分類上および命名上の地位の解説に
おける進歩（Ｐｒｏｇｒｅｓｓ　ｉｎ　Ｃ１ａｒｉｆｉ
ｃａ　−ｃｉｏｎ　　ｏｆ　　ｔｈｅ　　Ｔａｘｏｎｏ
ｍｉｃ　　ａｎｄ　　ＮａｍｅｎｃｌａｔｕｒａｌＳｔ
ａｃｕｓ　ｏＥ　Ｓｏｍｅ　Ｐｒｏｂｌｅｍ　Ａｃｔｉ
ｎ、ｏｍｙｃｅｔｅｓ月〕のらせん＜−５）セクション
に位置づけられる。胞子は、１０〜５０個連らなって並
んでいる。

走査式電子顕微鏡で調べた場合、胞子−表面の修飾は、
とげがある（ＳＰ）か、非常に短かい非特徴的な毛でお
おわれている（ｈａ）である。

生理学的特性 加水分解された細胞全体の分析の結果は、ＬＬ−ＤＡＰ
　は存在するが、メン異性体は存在していないことを示
す。従って、Ａ３０３７３　は、タイプＩの細胞壁（レ
チェバリア、前記〕を有している。

細胞全体の糖成分は、グルコース、アラビノースおよび
ラムノースである。アラビノースは通常、ストレプトマ
イセスの細胞壁に存在しなＧ）が、上記プリダムは、存
在している種を挙げている。糖のパターンは、ＮＧ（非
特徴的つとして分類される。培養Ａ３０３７３　は、ス
トレプトマイセス属に属するものとして分類される。

Ａ３０３７３　の炭素利用パターンは以下の通りである
：Ａ３０３７３　は、アドニトール、フルクトース、グ
ルコースおよびリボースを利用する。Ａ３０３７３　は
、Ｌ−アラビノース、セロビオース、セルロース、デキ
ストラン、ガラクトース、イノシトール、イヌリン、ラ
クトース、マンニトール、マンノース、メレジトース、
メリビオース、ラフィノース、Ｌ−ラムノース、サリシ
ン、スクロース、トレハロース、キシリトールマｆ、：
、　バー１−シロースを利用しない。

培養Ａ３０３７３　は、セファロチン（３０μｇ）、リ
ンコマイシン（２μｇ）、ペニシリンＧ（１０単位）お
よびストレプトマイシン（１０μｇ）に耐性である。培
養へ８０３７３は、バシトラシン（１０単位）、ゲンタ
マイシン（１０μｇ）、ネオマイシン（３０μｇつ、オ
レアンドマイシン（１５μｇ）、リフアンピン（５μｇ
）、テトラサイクリン（３０μｇ）、トブラマイシン（
１０μｇ）およびヴアンコマイシン（３０μｇ）に感受
性である。

培養Ａ３０３７３　は、有機硝酸塩ブロス（ＩＳＰ黒８
）で硝酸塩を亜硝酸塩に還元しないし、脱脂乳あるいは
デンプンを加水分解しない。この培養は、カタラーゼを
産生じ、ゼラチンを液化し、マレイン酸カルシウムを加
水分Ｈし、５０℃、８時間で生き残る。Ａ８０３７３　
は、１％のＮａＣ４ニのみ耐性であり、５〜３０℃の温
度で生育する。八８０３７３がトリプトン酵母エキスブ
ロス（ＩＳＰ／ＩＧ、１）中、またはペプトン酵母エキ
ス鉄寒天（ＩＳＰ　ｌ１６．６）およびｔｓＰＡ７の斜
面培地で生育する場合、メラノイド色素を生産しない。

Ａ３０３７３　　と、別のＡ８０４３８　−産生株であ
るストレプトマイセス・ボビリＮＲｋＬ１５９７１を比
較すると、これらは多（の共通の性質を有しており、両
培養が同じ抗生物質を産生ずるが、別の種であることを
示している。

類似点 メラノイド色素が存在しない マレイン酸カルシウムの加水分解 カタラーゼの産生 分生子束の生成 脱脂乳反応、陰性 デンプン加水分解、陰性 細胞壁における糖成分 相違点 抗生物質−耐性パターン 炭素−利用パターン 培養特性： 気中菌糸 裏の色 可溶性色素 ゼラチンの液化 形態 Ｎａ（ｌｌｊ７耐性 硝酸塩の還元 胞子表面の修飾 ５０℃、８時間での生存 温度範囲 種の決定 ストレプトマイセス種に対する幾つかの「キー（ｋｅｙ
ＱＪを用い、Ａ３０３７３の培養上、形態上および生理
学的特性を使用して類似した性質を有している株群を選
択した。次いで、公表されてＧ）る記述を調べ、Ａ３０
３７３　と比較した。以下の６種が、Ａ３０３７３　に
非常に類似しているものとして選ばれた。

ストレプトマイセス・アルブルス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙ
ｃｅｓ　ａｌ’１）ｕｌｕｓ）ａ ストレプトマイセス・チャタノオゲンシス（Ｓｔｒｅｐ
ｔｏｍｙｃｅｓ　ｃｈａｔｔａｎｏｏｇｅｎｓｔｓ）ス
トレプトマイセス・タラテリフェル（Ｓｔｒｅｐｔｏｍ
ｙｃｅｓ　ｃｒａｔｅｒｉｆｅｒ）ｃストレプトマイセ
ス・ガルテリ（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　　ｇａｌｔ
ｅｒ＋つ ストレプトマイセス・カルナタケンシス（５ｔｒｅｐｔ
ｏｍｙｃｅｓ　ｋａｔ’１ｌａｔａｋｅｎＳ１ｓ）スト
レプトマイセス・パクトウム（ＳＬｒｅｐＬｏｍｙｃｅ
ｓ　ｐａｃｔｕｍ）ａ ａ：シャーリング（Ｅ、Ｂ、　Ｓｈｉｒｌｉｎｇ）およ
びゴツトリーブ（Ｄ、　Ｇｏｔ、ｔｌｉｅｂ）、［スト
レフトマイセスのタイプカルチャーに関する共著＜、　
Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ　Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉｏｎ　ｏ
Ｅ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅｓ　ｏｆ　！Ｍｒｅｐｔ
ｏｍｙｃｅＳ）」、インターナショナル・ジャーナル・
オブ・システマテイツク・バクテリオロジ−（Ｉｎｃ。

Ｊ、５ｙｓｔ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、）２２（４１：２
６５　３９４ｂ：シャーリング（Ｅ、Ｂ、　Ｓｈｉｒｌ
ｉｎｇ）およびゴツトリーブＣＤ、　Ｇｏｔｔｌｉｅｂ
　）、［ストレプトマイセスのタイプカルチャーに関す
る共著（Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ　Ｄｅｓｃｒｉｐｔｉ
ｏｎ　ｏｆ　ＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅｓ　ｏＥ　ＳＬｒ
ｅｐＬｏｍｙｃｅｓ月、インターナショナル・ジャーナ
ル・オブ・システマティック・バクテリオロジ−（Ｉｎ
ｔ・Ｊ・５ｙｓｔ、Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、）１８　（２
１：　６９−１８９Ｃ：シャーリング（Ｅ、Ｂ、　Ｓｈ
ｉｒｌｉｎｇ）およびコ゛ットリーブ（Ｄ、　Ｇｏｔｔ
ｌｉｅＪ、「ストレプトマイセスのタイプカルチャーに
関する共著（Ｃｏｏｐｅｒａｔｉｖｅ　Ｄｅｓｃｒｉｐ
ｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕ１ｔｕｒｅｓ　ｏｆ　
ＳＬｒｅｐＬｏｍｙｃｅｓ月、インターナショナル・ジ
ャーナル・オプ・システマテイツク・バクテリオロジ−
（Ｉｎｔ。

Ｊ　　、Ｓｙｓ　ｔ　　、　　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ　　
、つ１９（４）：　３７５−５１２１．１９’６９Ｊ 公表されているデータの精密な調査の結果、Ａ３０３７
３は、Ｓ、カルナタケンシスに最もよく似た性質を有し
ていることがわかった。更に、Ａ３０３７３は幾つかの
事実においてまさにこの種と合ってし）る。

Ｓ、カルナタケンシスと５．バクトラムは、２つの別個
の数量的表型的分類研究〔クリロウイツツ（Ｗ、　Ｋｕ
ｒｙｌｏｗｉｃｚ）　、バラキーライ７　ツ（Ａ、Ｐａ
５ｚｋ　−ｉｅｗｉｃす、ウオツ二カ（Ｗ、Ｗｏｚｎｉ
ｃｋりおよびクルザトコウスキ（Ｗ、Ｋｕｒｚａｔｋｏ
ｗｓｋｉ）　、ｒ　ストレフトマイセスの数字による分
類（Ｎｕｍｅｒｉｃａｌ　Ｔａｘ。

ｎｏｍｙ　ｏＥ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｔｅｓ）」、
ポーリフシュ・メディカル・パブリツシャーズ（、Ｐｏ
ｌ　ｉｓｈ　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ）
、ワルシャワ、１９７５；ウィリアム７、　（Ｓ　、Ｔ
、Ｗｉ　ｌ　ｌ　ｉａｍｓ　）　、グツド７　工ｏ−（
Ｍ＠Ｇｏｏｄｆｃ目ＯＷ）、アルダ−７ン（Ｇ、Ａｌｄ
ｅｒｓｏｎ　）、ウニリフ４）　ン（Ｅ、Ｍ、Ｈ，Ｗｅ
ｌｌ　ｉｎｇｔｏｎ）、ス＝　−ス（Ｐ、Ｈ６Ａ、　５
ｎｅａｃＪ　オＪ−ヒサｙ　キ７　（Ｍ、Ｊ、　５ａｃ
ｋｉｎつ、「ストレプトマイセスおよび同類の属の数字
による分類（Ｎｕｍｅｒｉｃａｌ　Ｃ１ａｓｓ　１ｆｉ
ｃａｔ　１ｏｎｏｆ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ａｎ
ｄ　Ｒｅ１ａｔｅｄ　Ｇｅｎｅｒす」、ジャーナル・オ
ブ・ジェネラル・マイクロバイオロジー（Ｊ、Ｇｅｎ、
Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、）１２旦、１７４３−１８１３（
１９８３Ｊｌにおいてぴったり一致する。

ウィリアムスは、これらは９６％の類似レベルで一緒に
されると述べている。彼は這カルナタケンシスという名
を中止し、集団名としてＳ、パフトラムを使用している
。これら２つの名前の内、Ｓ、パフトラムだけが公認リ
スト〔スカーマノ（Ｖ、Ｂ、Ｄ。

ＳｋｅｒｍａｎＪ等、［バクテリア名の公認リスト（Ａ
ｐｐｒｏｖｅｄ　Ｌｉ５ｔｓ　ｏｆ　Ｂａｃｔｅｒｉａ
ｌ　Ｎａｍｅｓ）」、インターナショナル・ジャーナル
・オブ・システマテイク・バクテリオロジーＣＩｎｔ、
Ｊ、５ｙｓｔ、Ｂａｃｃｅｒｉｏｌ、）３０（ＩＪ：２
２５　４２０（１９８０）］　　に記載されている。従
って、これが正当に発表されている唯一つのものである
。それ故、Ｓ、バクトラムという名前を使用する。

培養Ａ３０３７３　　とＳ、パフトラムの両培養は、灰
　　　　　−色糸に属しており、類似の裏側の色を呈し
、幾つかの可溶性色素を有し、ツアペック寒天でわずか
Ｓこ生育し、はとんど同じ炭素−利用パターンを有し、
らせん形態および有毛胞子を有している。どちらもメラ
ノイド色素を生成しない。これらは、グリセロールアス
パラギンおよびオートミール寒天での生育、分生子束を
つくる能力、マレイン酸カルシウムの加水分解およびＮ
ａＣｊ７耐性において異なっている。

Ａ３０３７３　　とＳ、バクトラムの類似点および相違
点を以下にまとめる： 類似点 メラノイド色素が存在しない 気中胞子塊の色 炭素−利用パターン ツアペック寒天での培養形態 裏側の色 可溶性色素 らせん状単胞子体の形態 胞子表面の修飾 相違点 マレイン酸カルシウムの加水分解 分生子束 数種の培地での生育 ＮａＣ４耐性 これら２つの培養の炭素−利用パターンを表２に示す。

表２　　Ａ３０３７３　株と５．パフトラムＮＲＲＬ２
９３９による炭素源の利用 十二利用されるもの ｍ＝利用されないもの Ａ３０３７３の特性の一覧表を表３に示す。

表３　　Ａ３０３７３　の生理学的特性表３（続き） ａ：十二陽性反応 一一陰性反応 これらの比較は、Ａ３０３７３　は、Ｓ、パフトラムに
類似していることを示している。Ａ３０３７３の胞子表
面は明らかにＳ、バクトラムの様に毛でおおわれていな
いが、この相違点はＡ３０３７３を別の種に特定するの
に十分ではないと思われる。従って、培養Ａ３０３７３
　は、ストレプトマイセス・パクトウム・ビュイア７　
（Ｂｈｕｙａｎ）、ディーｒ−”７　（Ｄｉｅｌ）−ア
ンド・スミス（Ｓｍｉ　ｔｈ）１９６２の株として分類
される。

他の微生物と同様に、本発明のＡ８０４３８　−産生培
養、ストレプトマイセス・パクトウムＮＲＲＬ１５９７
０の性質は変異し易い。この株の組み換え株、突然変異
株または変異株は、当技術分野における方法で得ること
ができる。例えば突然変異株は、紫外光、Ｘ線、ガンマ
線、およびＮ−メチルＮ′−二トロζ４−Ｎ−ニトロソ
グアニジンのような化学物質等の種々の既知の物理的お
よび化学的突然変異誘発物質で処理することによって得
ることができる。Ａ８０４３８産生の性質を有している
ストレプト薔イセス・パフトラムＮＲＲＬ　１５９７０
の天然株、誘発された変異株、突然変異株および組み換
え株は、本発明の範囲に含まれる。

ストレプトマイセス・ボビリＮＲＲＬ　１５９７１また
はストレプトマイセス・パクトウムＮＲＲＬ１５９７０
を増殖させるために使用される培養培地は、多数の培地
のいずれかであってもよい。しかしながら、経済的な生
産、最高収率および生成物単離の容易さのために、ある
種の培養培地が好ましい。例えば、Ｓ、ボビリのための
大量発酵における好ましい炭水化物供給源はグルコース
であるが、リホース、キシロース、フルクトース、ガラ
クトース、ポテトデキストリン等を使用してもよい。グ
ルコースは、Ｓ、バクトラムのための好ましい炭水化物
供給源であるが、スクロース、フルクトース、ブラック
ストラップ糖蜜、デンプン等を使用してもよい。

Ｓ、ボビリおよびＳ、パフトラム両培養のための好まし
い窒素源は、酵素−加水分解されたカゼインである。Ｓ
、パフトラムのためのその他の好ましい窒素源は、肉ペ
プトンである。フィツシュミール（ｊｉｓｈ　ｍｅａｌ
）、レバーミール（ｌ　１ｖｅｒ　ｍｅａｌ　）等のよ
うなその他の窒素源も有用な窒素源となるであろう。

培養培地に含ませるのに都合がよい栄養無機塩類には、
亜鉛、ナトリウム、マグネシウム、カルシウム、アンモ
ニウム、塩素、炭酸、硫酸、硝酸等のイオンを生ずるこ
とができる通常の可溶性塩類がある。

微生物の増殖および発生のために必要な欠くことのでき
ない微量元素も、培養培地に含まれねばならない。この
ような微量元素は、通常、微生物の増殖要求に合うのに
十分な量が、培地中の他の成分中に不純物として含まれ
ている。泡立ちは通常問題ではないが、必要に応じて大
量発酵培地にポリプロピレングリコールのような抑泡剤
少量（ｉ、ｅ、　０．２　ｍｒＬ　）を加えてもよい。

抗生物質Ａ８０４３８　の十分惜の生産のために、タン
クでの液中好気発酵が好ましい。少量のＡ８０４３８を
振数−フラスコ培養によって得てもよい。

抗生物質産生におけるタイムラグは通常、微生物の胞子
形を大きなタンクに接種することに関係するので、増殖
期の接種物を使用するのが好ましい。

この増殖期の接種物は、少量の培養培地に微生物の胞子
形または菌糸部分を接種して、微生物の新鮮な、活動的
に増殖している培養を得ること（こよって調製される。

次いで、この増殖期の接種物をより大きなタンクに入れ
る。増殖期接種物の培地は、より大口の発酵のために使
用される培地と同じであってもよいが、その他の培地で
あってもよし１０ Ａ８０４３８　は、約２５°〜約３７℃の温度で増殖巻
する場合のストレプトマイセス・ボビリまたはストレプ
トマイセス・パクトウムによって産生される。Ａ８０４
３８産生に好適な温度は、約３０℃であるらしい。

液中好気培養方法で通常行なわれるように、培地を通常
゛のタービン羽根車で撹拌しながら、滅菌空気を底部か
ら容器内に吹きこむ。これまでに使用された条件丁では
、発酵の最大酸素取り込みは約０．２ｍＭ／Ｌ／分を越
えなかった。約１１５１のブロスを含んでいる十分撹拌
されている１６５１発酵槽では、曝気速度０．１２５　
ｖ／ｖ／ｍ、撹拌速度１ｌ５０−２０Ｏｒｐは、溶存酸
素濃度を気体飽和の３０チまたはそれ以上に維持するの
に十分である。

抗生物質Ａ８０４３８の産生は、この抗生物質に感受性
であると知られている微生物に対し、抗生物質活性につ
いてこのブロスのサンプルを試験することによって発酵
中に追跡することができる。

Ａ８０４３８　を試験するのに有用な１つの検定微生物
は、バチルス・サブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　５ｕｂ
ｔｉ１ｉｓ）　ＡＴＣＣ６６３３である。この生物検定
は、寒天−ウェルプレート試験によって行なわれるのが
都合よい。

液中好気発酵条件ｔでＡ８０４３８が産生された後、Ａ
８０４３８　は発酵技術分野で使用される方法で発酵培
地から回収することができる。Ａ３０４３３−産生微生
物の発酵によって生産された抗生物質の活性は、濾過さ
れたブロスおよび菌糸塊中に見い出される。従って、Ａ
８０４３８　の最大回収は、先に培地を濾過して菌糸塊
からブロスを分離することによって行なうことができる
。次いで、濾過されたブロスおよび菌糸塊を別々に精製
して、Ａ８０４３８　の各部分を得る。この精製には種
々の手法を使用することができる。

濾過したブロスの精製のために好ましい方法は、このブ
ロスを゛約９のｐＨに調節し、例えば酢酸エチルのよう
な適当す溶媒で抽出することである。

次ぎにこの抽出溶媒を減圧留去して、Ａ８０４３８のブ
ロス由来分を得ることができる。

菌糸塊を精製する好ましい方法は、分離された菌糸のｐ
過ケーキを、例えばメタノールのような適当な溶媒で抽
出することである。次いで、この抽出溶媒を減圧留去し
て、濃縮された水溶液を得る。次ぎにこの水溶液を約９
のｐＨに調節し、例えば酢酸エチルのような適当な溶媒
で抽出する。

次いで、この抽出溶媒を減圧下で濃縮して、八８０４３
８　の菌糸由来分を得る。

こ、のＡ８０４３８複合体のブロスおよび菌糸由来分を
同様の方法で更に精製する。好ましい方法は、シリカゲ
ルクロマトグラフィーであるっ抗生物質Ａ８０４３８の
分離後、薄層クロマトグラフィーＣＴＬＣ）または高速
液体クロマトグラフィーＣ−ＨＰＬＣ）を行なってもよ
い。好適なシリカゲルＴＬＣ溶媒系の１つは、トルエン
：エタ／−ル（４：１）である。この抗生物質は、例え
ばバチルス・サブチリスを使用するバイオオートグラフ
ィーまたは、例えばバニリン−硫酸噴霧試薬のようなそ
の他の方法で検出することができる。

また、培地成分および菌糸を含んでいる培養固形物を、
抽出または分離を行なわずに、しかし好ましくは水を除
去した後に、Ａ８０４３８　の供給源として使用しても
よい。例えば、Ａ８０４３８　の産生後、発酵ブロス全
体を凍結乾燥、ドラム−乾燥または共沸蒸留して乾燥す
ることによって乾燥してもよい。次いで、この乾燥ブロ
スを直接、飼料プレミックスに混合する。

Ａ８０４３８　およびその誘導体の塩類は、この抗生物
質を分離および精製するの）こ有用である。薬学的に許
容し得る塩類は、特に有用である。塩類の例は、Ａ８０
４３８　およびその誘導体のアルカリ金属、アルカリ土
類金属およびアミンの塩である。

Ａ８０４３８　の典型的かつ好適なアルカリ金属および
アルカリ土類金属塩は、ナトリウム、カリウム、リチウ
ム、セシウム、ルビジウム、バリウム、カルシウムおよ
びマグネシウムの塩類を包含する。

Ａ８０４３８　の好適なアミン塩は、アンモニウムおよ
び１級、２級、３級のＣ１−Ｃ４−アルキルアンモニウ
ムおよびヒドロキシ−ζ−Ｃ４−アルキルアンモニウム
塩を包含する。代表的なアミン塩は、Ａ８０４３８　　
と水酸化アンモニウム、メチルアミン、５ｅｃ−ブチル
アミン、イソプロピルアミン、ジエチルアミン、ジ−イ
ソプロピルアミン、エタノールアミン、トリエチルアミ
ン、３−アミノ−１−プロパツール等の反応によって生
成されるアミン塩である。

獣医学分野では、動物を抗生物質で治療する場合、抗生
物質の形態は通常あまり重要ではないことがよく知られ
ている。多くの場合、動物体内の条件によって投与され
た薬物は、それ以外の形態に変化する。従って、投与さ
れる塩の形態はあまり重要ではない。しかしながら、経
済、便利さ、毒性の理由で塩の形態が選ばれる。

Ａ８０４３８のアルカリ金属およびアルカリ土類金属陽
イオンの塩類は、陽イオンの塩の製造に通常使用される
方法に従って製造される。例えば、Ａ８０４３８の遊離
の酸の形態をアセトンのような適当な溶媒に溶解し；約
楼容量の水を加えた後、所望の陽イオンの塩の塩基（例
、ＮａＯＨ，ＫＯＨ）でこの溶液を約９〜１０のｐＨに
調節する。このようにして生成された塩を、濾過または
溶媒の蒸発のような常法によって単離することができる
。

塩類を生成する好ましい方法は、八８０４３８（酸の形
態）を酢酸エチルのような水と混和しない溶媒に溶解し
、等容量の水を加え；この混合物を対応する陽イオンの
塩基（例、ＮａＯＨ，ＫＯＨ等）でＰＨＩ（ｌに調節す
ることである。分離した有機相を水で洗浄して、濃縮乾
固する。残留物をジオキサンから凍結乾燥する。この塩
をペンタンのような適当な溶媒から結晶化してもよい。

同様の方法で、有機アミン類を使用して生成された塩類
を製造することができる。例えば、アセトンのような適
当な溶媒中のＡ８０４３８　溶液に、気体または液体の
アミンを加えてもよい；溶媒および過剰量のアミンは、
蒸発によって除去することができる。

Ａ８０４３８　アシル−エステル誘導体は、Ａ８０４３
８を、対応する酸無水物または、例えばクロリドのよう
な酸ハライドで処理することによって製造される。エス
テル化は、Ａ８０４３８　水酸基の１個で起こる。この
ようなエステルは、通常、Ａ８０４３８を、例えば対応
する酸無水・物と室温で反応させることによって製造さ
れるっ Ａ８０４３８　アルキルエステル誘導体は、常法により
、カルボキシ基のエステル化によって製造される。この
Ａ１８０４３８　アルキルエステル誘導体は、通常、イ
ン・ビトロで活性が低い。しかしながら、動物に投与さ
れる場合、このエステル類は、イン・ビボでＡ８０４３
８　　に変換されるプロ・ドラッグとして作用し得る。

Ａ８０４３８　のアルキルエーテル誘導体は、１または
それ以上の水酸基が、ＹＲ基 〔式中、ＹはＯまたはＳを表わし、 艮はＣ，−Ｃ６−アルキル、’１−Ｃ４−アルコキシー
ｃ２−Ｃ５−アルキル、’１−０４−アルコキシカルボ
ニル−Ｃ２−ｃＳ−アルキル、Ｔ　ミ／　−Ｃ，、−Ｃ
５−アルキル、メルカプト−Ｃ２−ＣＳ−アルキル、ヒ
ドロキシアルキル、ハロアルキルまたｌ！　（Ｂ−’）
ｍ　　フェニル（ＣＨ２）ｎ−を表わす（ただし、Ｋ′
はＣ１−６４−アルキル、Ｃ１−Ｃ４−アルコキシまた
はヒドロキシを表わし、ｍは０−２を表わし、ｎは０−
３を表わす）〕 で置換されている化合物である。アルキルおよび７／Ｌ
／コキシという語句は、前記の意味を有しているが、特
定の炭素原子数に限られている。

「ヒドロキシアルキル」という語句は、モノヒドロキン
−Ｃ，、−ＣＳ−アルキル基または、Ｙが０である場合
、２，３−ジヒドロキシプロパン−１−イル基のいずれ
かを意味する。

「ハロアルキル」という語句は、臭素、塩素およびフッ
素からなる群から選択される１〜３個のハロゲン置換分
を有しているＣ２−Ｃ５−アルキル基を意味する。アル
キル基がジハロ−またはトリフ１０−置換されている場
合、このハロー置換分は同一のハロゲン部分でなければ
ならない。

好ましいＡ８０４３８　　エーテル誘導体は、Ｙが０を
表わし、ｋが貢−％−アルキルを表わしている化合物で
ある。このエーテル誘導体は、Ａ８０４３８またはその
塩を、対応する１級アルコールまたはチオールと反応さ
せることによって製造される。

出発アルコールまたはチオールの幾つかについては、反
応に酸触媒を加える必要があることがある。好適な触媒
は、塩酸、硫酸、過塩素酸、メタンスルホン酸、ベンゼ
ンスルホン酸、トルエンスルホン酸、二酸化セレンおよ
び三フッ化ホウ素を包含する。

例えば水、アセトン、ベンゼン、エーテル、テトラヒド
ロフランまたはジオキサンのようｆｉ　ｍ　媒を加えて
反応を促進してもよい。反応は通常、室温で起こるが、
より高い温度を使用してもよい。

通常の反応促進方法で十分であることもあるが、本発明
の化合物を得るために更に精製が必要であることがある
。このようｐ　ｍ製は、例えばカラムクロマトグラフィ
ー、薄層クロマトグラフィー、分別結晶等のような周知
の方法で行なうことができる。

式（、ＩＩ）で示されるＡ８０４３８　　ウレタン誘導
体は、Ａ８０４３８　またはＡ８０４３８の塩を、式（
ＩＩＩ）　：Ｒ−ＮＧＯ（１） 〔式中、ｋは前記と同意義である〕 で示されるインシアネートで処理することによって製造
することができる。

Ａ８０４３８　の塩、とりわけナトリウム塩が使用され
るのが好ましい。モノ誘導体を最大の量で生成させるた
めには、式（、ＩＩＩ）で示されるイソシアネートを少
し過剰量、例えば約１０％過剰量で加えなければならな
い。反応は、例えば四塩化炭素、塩化メチレンあるいは
クロロホルムのような塩素化炭化水素、エーテル、酢酸
エチルのような不活性な溶媒中、またはベンゼンあるい
はトルエンのような芳香族炭化水素溶媒中で行なうのが
好ましい。反応温度は重要ではなく、０℃以上〜反応混
合物の沸点であってよいが、略室温が好ましい、Ａ８０
４３８　化合物は、動物および植物に対し病原となる細
菌および菌類の増殖を阻害する。例えば表出　は、Ａ８
０４３８　がある種の微生物を阻害する阻害濃度（、Ｍ
ＩＣ）を示すものである。表■におけるＭＩＣ値は、通
常の寒天−希釈検定法（こよって求めた。

表ＩＩＩ　　Ａ８０４３８　　（Ｎａ塩）の抗菌活性Ａ
８０４３８　化合物は、嫌気性細菌に対しても活性であ
る。表■は、標準寒天−希釈検定法によって求められた
、Ａ８０４３８が種々の嫌気性細菌を阻害するＭＩＣ値
を示す。終点は、２４時間インキュベーション後に読み
取った。

（以下余白） 表ＩＶ　　Ａ８０４３８（Ｎａ塩）に対する嫌気性細菌
単離体の感受性 腹腔内注射によって投与し、Ｌ　Ｄｓｏとして表わした
、マウスにおけるＡ８０４３８　の急性毒性値は８．８
４ＮＩ９／に９である。

抗胞子虫（抗コクシジウム）症活性は、Ａ８０４３８化
合物の重要な性質である。表Ｖは、Ａ−８０４３８が！
イメＩＪ７−テネラ（Ｅｉｍｅｒｉａ　ｔｅｎｅｌｌａ
）を阻害した、２個のイン・ビトロ組織−培養試験の結
果を表わす。

表Ｖ　イン・ビトロにおけるエイメリア・テネＣ〜細胞
毒性 Ａ＝活性 表■は、ニワトリのエイメリア・テネラ感染の抑制にお
けるＡ８０４３８の効果の研究結果を表わしたものであ
る。この研究では、５羽の生後７日のヒナ鳥からなる群
に、本発明の抗生物質を含んでいるつぶした常用飼料を
与えた。この飼料を４８時間与えた後、各ヒナ鳥にＥ、
テネラの胞子形成している嚢胞体（ｏｏｃｙｓｔｓ）を
接種した。５羽の生後７日のヒナ鳥からなるその他の２
群に、Ａ８０４３８を含んでいないつぶした常用飼料を
与えた。これらの内の１群にも、４８時間後にＥ、テネ
ラを接種した（感染させた対照群）。別の群にはＥ、テ
ネラを接種しなかった（正常な対照群）。接種の７日後
に結果を評価した。ヒナ鳥を秤蓋して殺し、胞子虫症病
変の徴候を調べた。胞子虫症の発症を、０（胞子虫症の
徴候なし）〜４（エイメリア種のための最大の発病）の
段階で評価した。感染させた対照群の病変段階平均値か
ら処置群の病変段階平均値を引き、この差を感染させた
対照群の病変段階平均値で割ってから１００倍して、病
変段階における減少％を計算した。体重増加％は、正常
な対照群の体重増加を１００％として計算した。

表■　イン・ビボにおけるエイメリア・テネラに対する
Ａ８０４３８（Ｎａ塩）の活性家禽の胞子虫症を処置す
るためには、Ａ８０４３８化合物の非毒性抗胞子虫症蓋
を、感染したまたは感染しやすい鳥類に、好ましくは毎
日経口投与する。Ａ８０４３８化合物は、多くの方法で
与えることができるが、薬学的に許容し得る担体、好ま
しくは鳥類に接取される飼料と一緒に与えるのが最も好
都合である。Ａ３０４３Ｂ　化合物の好適な濃度を決め
るのに種々の因子を考慮しなければならないが、投与の
割合は通常、飼料中、約２〜約１１００ＰＰの範囲であ
り、飼料の約２５〜約７５　ｐｐｍの範囲であることが
好ましい。

本発明はまた、家禽の胞子虫症を治療するためのＡ８０
４３８化合物含有組成物に関するものである。これらの
組成物の１つは、胞子虫症を治療するためのＡ８０４３
８化合物の有効量を適当な賦形剤と共に含有してなる組
成物である。その他の組成物は、 １）Ａ８０４３８化合物と共に ２）ａ）ニカルバジン、 ｂ）　４．４’−ジニトロ力ルバニリド、Ｃ）式（■）
： Ｎ０２ 〔式中、Ｒ２はｃｌ−Ｃ４アルキルであり、Ｒ３ハハロ
ゲン、Ｃｌ−Ｃ４フルオロアルキル、Ｃ１−０４フルオ
ロアルコキシまたはＣ１−Ｃ４フルオロアルキルチオで
あり、 Ｒ４はハロゲンであり、 Ｒ５は水素またはハロゲンであり、 ｍは０．１または２であり、 ｎはＯまたは１である。

ただし、　置換分が存在する場合、それは２−位以外に
ある。〕 で示されるナフタレンアミン化合物、 ｄ）２．４−ジニトロ−Ｎ＜４−（）リフルオロメトキ
シ）フェニル〕−６−（トリフルオロメチル）ベンゼン
アミン、２．４−ジニトロ−Ｎ−［４−（１，１，２，
２−テトラフルオロエトキシ）フェニル）−６−（トリ
フルオロメチル）ベンゼンアミンまたは２，４−ジニト
ロ−Ｎ−（４−（ペンタフルオロエトキシ）フェニル３
−６−　（トリフルオロメチル）ベンゼンアミンから選
ハれルヘンゼンアミン、 ｅ）メチクロルピンドールまたは ｆ）（ａ）−（ｅｉ化合物の薬学的に許容し得る塩から
なる群から選ばれる化合物 の有装置を含有している組成物である。

式（ＩＶ）において、Ｃ１−Ｃ４アルキルは、メチル、
エチル、ｎ−プロピノヘイソプロピル、ｎ−ブチル、５
ｅｃ−ブチル、イソブチル、ｔｅｒｔ−ブチル等を包含
する。

「ハロゲン」という語句は、フッ素、塩素、臭素および
ヨウ素を表わす。

Ｃ１−Ｃ４フルオロアルキルは、１またはそれ以上のフ
ッ素原子を有しているＣ１−０４アルキル基である。こ
のようなフルオロアルキル基は、トリフルオロメチル、
１，１，２．２−テトラフルオロエチル、ペンタフルオ
ロエチル、１，２，３．３−テトラフルオロプロピノペ
ノナフルオロブチル等を包含する。

Ｃ１−０４フルオロアルコキシは、１またはそれ以上の
フッ素原子を有しているＣ１−Ｃ４アルコキシ基である
。このようなフルオロアルコキシ基は、ジフルオロメト
キシ、トリフルオロメトキシ、１−フルオロエトキシ、
１，１，２．２−テトラフルオロエトキシ、ペンタフル
オロエトキシ、１，２，２，３．３−ペンタフルオロプ
ロポキシ、ヘプタフルオロプロポキシ、４，４．４−ト
リフルオロブトキシ等を包含する。

Ｃ１−Ｃ４フルオロアルキルチオは、１またはそれ以上
のフッ素原子を有しているＣ□−０４アルキルチオ基で
ある。このようなフルオロアルキルチオ基は、トリフル
オロメチルチオ、１，１，２．２−テトラフルオロエチ
ルチオ、ペンタフルオロエチルチオ、４、４．４−トリ
フルオロブチルチオ等を包含する。

好ましい式（ＩＶ）の化合物は、ｍとｎが０であり、Ｒ
５が水素である化合物である。

代表的な式（ＩＶ）の化合物群は、 ４−フルオロ−Ｎ−（２，４−ジニトロ−６−（トリフ
ルオロメチル）フェニル〕−１−す７タレンアミン、 ４−ヨード−Ｎ−［２，４−ジニトロ−６−（トリフル
オロメチル）フェニルツー１−ナフタレンアミン、 ４−トリフルオロメチル−Ｎ−４２，４−ジニトロ−６
−（１−リフルオロメチル）フェニルツー１−ナフタレ
ンアミン、 ４−ペンタフルオロエチル−Ｎ−［２，４−ジニトロ−
６−（）リフルオロメチル）フェニル〕−１−す７タレ
ンアミン、 ６．７−シメチルー４−　（１，１，２，２−テトラフ
ルオロエトキシ）−Ｎ−（２，４−ジニトロ−６−（ト
リフルオロメチル）フェニルツー１−ナフタレンアミン
、 ２−インプロピル−４−クロロ−Ｎ−〔３−クロロ−２
，４−ジニトロ−６−（）リフルオ口メチル）フェニル
〕−１−ナフタレンアミン、８−ｎ−ブチル−４−（４
，４，４−トリフルオロブトキシ）−Ｎ−（３−ブロモ
−２，４−ジニトロ−６−（１−リフルオロメチル）フ
ェニル：ｌ　−１−ナフタレンアミン、 ３−メチル−６−ブロビルー４−へブタフルオロプロピ
ル−Ｎ−４２，４−ジニトロ−６−（トリフルオロメチ
ル）フェニル〕−１−ナフタレンアミン、 ３．４−ジクロロ−Ｎ−４２，４−ジニトロ−６−（ト
リフルオロメチル）フェニル〕−１−ナフタレンアミン
、 ４−（１，１−ジフルオロエトキシ）−Ｎ−（２゜４−
ジニトロ−６−（１−リフルオロメチル）フェニル〕−
１−ナフタレンアミン、 ４−　（１，１，２，２−テトラフルオロエトキシ）−
Ｎ−Ｃ２，４−ジニトロ−６−（トリフルオロメチル）
フェニル〕−１−ナフタレンアミンおヨヒ４−（１，１
，２，２−テトラフルオロエチルチオ）−Ｎ−［２，４
−ジニトロ−６−（トリフルオロメチル）フェニル〕−
１−ナフタレンアミンである。

ニカルバジンあるいハ４．４’−シニトロカルノくニリ
ドとポリエーテル抗生物質を含有している抗胞子虫症配
合剤が、カレンダー（Ｍａｕｒｉｃｅ　Ｅ。

Ｃａ１ｌｅｎｄｅｒ）およびジエファーズ（Ｔｈｏｍａ
ｓ　Ｋ。

Ｊｅｆｆｅｒｓ　）による、１９８０年８月１９日に発
行された米国特許第４，２１８，４３８号に開示されて
いる。式（ＩＶ）で示されるナフタレンアミンとポリエ
ーテル抗生物質の抗胞子虫症配合剤か、クリントン（Ａ
ｌｂｅｒｔ　Ｊ、　Ｃ１１ｎｔｏｎ　）およびオドバー
ティ（ＧｅｏｒｇｅＯ，Ｐ、　Ｏ’Ｄｏｈｅｒｔｙ　）
による、１９８４年７月１７日に提出された米国特許出
願第６３１，６６５号に開示されている。さらに、特定
のベンゼンアミンとポリエーテル抗生物質を含有してい
る抗胞子虫症配合剤が、クリントンおよびオドバーティ
によって米国特許４，３６６，１６８号に開示されてお
り、モネンシン（ポリエーテル抗生物質）とメチクロル
ピンドールの抗胞子虫症配合剤が、マクダウガルド（Ｌ
ａｒｒｙ　Ｒ，ＭｃＤｏｕｇａｌｄ　）による、１９７
７年１２月６日発行の米国特許第４，０６１，７５５号
に開示されている。

ニールバジント４．４’−ジニトロ力ルバニリドは、米
国特許４２，７３１，３８２号に教示されている。ニー
カルバジンは、４，４′−シニトロ力ルバニリドと２−
ヒドロキシ−４，６−シメチルピリミジンの混合物であ
るが、４，４′−ジニトロ力ルバニリドだけが抗胞子虫
症活性を示す。サイエンス（５ｃｉｅｎｃｅ　）　１２
２．２４４（１９５５）参照。

Ａ８０４３８　化合物と化合物群２　（ａｌ−（ｅ）を
組み合わせた配合剤中の各成分は、それらを併用した場
合、少なくとも１種の胞子虫症の原因である微生物につ
いて相乗効果を表わす量で使用される。通常、この配合
剤に使用されるべき最大量は、個々の成分による抗胞子
虫症処置のための最大量と同じである。下限は、通常、
個々の成分による治療に要求される限界以下である。従
って、本発明は通常、１）Ａ８０４３８８０４３８化約
１００　ｐｐｍおよび２）ａ）ニールバジン約５〜１２
５ｐｐｍ、　ｂ）　　４．４’−ジニトロ力ルバニリド
約２５〜約１５０　ｐｐｍ、　ｃ）特定のす７タジンア
ミン約１〜約１ｏｏｏｐｐｍ、ｄ）特定のベンゼンアミ
ン約５〜約１２５ｐｐｍまたはｅ）メチクロルピンドー
ル約２０〜約７０ＰＰｍを含有してなる組成物を使用し
て行なわれる。このＡ−８０４３８化合物は、＝カルバ
ジンと共に投与される場合、とりわけ有効となるであろ
う。好ましい配合剤は、Ａ８０４３８化合物約２〜約２
０　ｐｐｍと屯カルバジン約５〜約５０　ｐｐｍを含有
している。

Ａ８０４３８化合物のその他の重要な性質は、動物の飼
料利用効率を高める能力である。例えば、Ａ８０４３８
化合物は、発達した反別機能を有している反別動物の飼
料利用効率を高める。

飼料利用の効率は、ラウ７　（Ａｒｔｈｕｒ　Ｐ、Ｒａ
ｕｎ　）によって米国特許第３，７９４，７３２号（特
に実施例５参照）に記載されている方法を使用して、反
別動物におけるプロピオネート化合物の生成および濃度
を観察することによってモニターすることができる。表
■は、この試験における、Ａ８０４３８で処理したフラ
スコ中の揮発性脂肪酸（ＶＦＡ）濃度の、対照フラスコ
の濃度に対する割合を示している。

表■　反與動物の飼料利用効率におけるＡ８０４３８の
効果 米ＬＳＤ　ｉ八尾む一検定ｉＰ＜０．０１での有意性；
Ｃａ＞　９９パ一セント上部信頼限界Ａ８０４３８化合
物は、通常プロピオネートを増加させ、従って、反別動
物に約０．０２Ｍ９７ｋＱ１日〜約１，５〜／ｋＱ／日
の割合で経口投与される場合、飼料利用の効率を高める
のに有効である。投与の好ましい割合は、約０．０５Ｍ
９７ｋＱ１日〜約０．５〜／　ｋＱ　／日である。投与
の好ましい方法は、この化合物を動物の飼料と混合する
ことである。

本発明は更に、飼料および２．５〜２５グラム／トンの
Ａ８０４３８化合物を含有している、反別動物の飼料利
用効率を高めるのに適した飼料組成物に関する。

前記のように、Ａ８０４３８化合物は、クロストリンラ
ム・ベルフリンゲンス（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｐｅｒ
ｆｒｉｎｇｅｎｓ　）を含む嫌気性細菌に対しても活性
である。従って、Ａ８０４３８化合物は、ニワトリ、ブ
タ、ウシおよびヒツジにおける腸炎の治療（予防を含む
）に有用であろう。Ａ８０４３８化合物は、反別動物に
おける腸性中毒症の治療にも有用であろう。

別の態様では、Ａ８０４３８化合物はブタの赤痢の治療
に有用である。Ａ８０４３８は、ブタの赤痢を引き起こ
す作用因であるトレボネマ・ヒオジセンテリア（Ｔｒｅ
ｐｏｎｅｍａ　ｈｙｏｄｙｓｅｎｔｅｒｉａｅ　）の増
殖を０、３９　ｍＣｇ／ｍｇ、以下の濃度で阻害する。

ブタにＡ８０４３８化合物を投与する好ましい方法は、
この化合物の有効量を飼料または飲用水に混ぜることで
ある。適切な有効量は、病気にさらされているブタにお
ける赤痢を予防するための処置であるかまたは既に病気
に感染しているブタを治すためのものであるかによって
決まる。通常、感染を予防するには、既に罹患している
動物（こおける感染を治すのに必要とされるよりも低い
濃度の活性化合物でよい。通常、飼料１トンにつきＡ３
０４３Ｂ化合物約２０〜約１００グラムの範囲の址が、
感染を予防するのに有効である。飼料１トンにつきＡ８
０４３８化合物約５０〜約２５０グラムの範囲の量が、
赤痢に罹患しているブタを治療するのに適切である。こ
れらの量は、約１〜約５ｍｇ／　ｋＱ体体重日日予防的
処置）または約２．５〜約１−２．５１Ｎｌ／ｋＱ体重
７日（感染動物の処置）に相当する。飲用水に添加され
る場合、水１ガロンにつきＡ８０４３８化合物約０．０
４〜約０．２，９（予防的）または約０．２〜約１ｇ（
治療的）の髄が好ましい。

本発明は更に、ブタ用飼料および有効量のＡ８０４３８
化合物を含有しているブタの赤痢を治療するための飼料
組成物に関する。上記のように、有効量は通常、飼料１
トンにつきＡ３０４３Ｂ約２０〜約２５０グラムの範囲
の量である。

Ａ８０４３８化合物は、ポリオ（灰白を飼犬）ウィルス
に対して活性である。例えば、組織培養試験の結果、Ａ
８０４３８は２０００　ｍｃｇ／ｍＬの濃度でポリオ■
ウィルスに対して活性であることがわかった。

抗生物質Ａ８０４３８は、イオン−輸送特性を示し、従
ってイオン透過担体（イオン−伝達体）である（プレス
？　７　（Ｂ、Ｃ，Ｐｒｅｓｓｍａｎ　）、「無機生化
学（Ｉｎｏｒｇａｎｉｃ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　
）　Ｊ、アイクホルン（Ｇ、Ｌ、　Ｅ　１ｃｈｈｏｒｎ
　）編、エルセピア−（Ｅｌｓｅｖｉｅｒ　）、ニュー
ヨーク、１９７３￥３１巻、第６章参照）。

Ｑ、５　ｍｃｇ／ｍＬ濃度で、Ａ８０４３８はイオン透
過担体活性を示した。Ｎａ＋、Ｋ＋およびＲｈ共存下で
のこの化合物の活性は、ＣｓまたはＬｌ　共存下のこの
化合物の活性より大きかった。より低い濃度（０、２ｍ
ｃｇ　／ｍＬ　）では、Ａ３０４３Ｂは、その他のアル
カリ−金属陽イオンよりＮａを選択するようであった。

従って、特定の陽イオンの選択的除去が望まれる場合、
Ａ３０４３Ｂを使用することができる。このような利用
の例として、写真における溶液からの銀イオンの除去お
よび回収、工場排水が環境に出される前に工場排水から
毒性陽イオンを回収すること、および海水の脱塩（淡水
化）が挙げられる。Ａ８０４３８は、イオン特異的電極
の１成分として使用することができる（ケデム等（０，
Ｋｅｄｅｍ。

ｅｔ　ａｌ、　）　、１９７３年８月２１日、米国特許
第３，７５３．８８７号参照）。

Ａ８０４３８は、天然および人工の両方の膜の陽イオン
透過性を変える。従って、濃度勾配に対する陽イオンの
選択的輸送のために使用される膜の成分としてＡ８０４
３８を使用することができる。

（Ｅ、Ｌ、Ｃｕ５ｓｌｅｒ　）、ｘ　ハフ　ス（Ｄ、Ｆ
、Ｅｖａｎｓ）およびメイトシラ／ｙ　（５ｉｓｔｅｒ
　Ｍ、Ａ、Ｍａｔｅｓｉｃｋ　）　、サイエンス（Ｓｉ
ｅｎｃｅ）　１’７２．３７７（１９７１）参照〕。

更に別の態様では、Ａ８０４３８は、酵素ＡＴＰａｓｅ
の抑制因子として活性である。細胞膜に存在するアルカ
リ金属−感受性酵素であるＡＴＰａｓｅは、能動輸送に
必要なエネルギーに関係している。「能動輸送」とは、
細胞内および細胞外の流体がその成分を一定に維持する
ためのエネルギ要求性ノ一連の働きをいう。ＡＴＰａｓ
ｅの抑制因子は、能動輸送に必要なエネルギーを減少さ
せる。イン・ビボ試験の結果、Ａ８０４３８は０．５ｍ
ｃｇ／ｍＬの半有効濃度（ＩＣ５ｏ）でミトコンドリア
のＡＴＰａｓｅを抑制することが確認された。

また非経口投与してもよい。Ａ８０４３８化合物を投与
するための最も実際的な方法は、飼料中に製剤化するこ
とである。通常の乾燥飼料、液体飼料およびペレットに
した飼料を包含する種々の飼料を使用することができる
。投与の好適な方法は、この化合物を動物の飼料に混ぜ
ることによるものであるが、例えば錠剤、トレンチ剤、
ポーラスまたはカプセル剤のような他の方法で投与して
もよい。各々の投与量単位は、処置しようとする動物の
ための適切な１日の投与量に直接関係する量のＡ８０４
３８化合物を含有しているのがよい。

動物の飼料に薬物を製剤化する方法は、よく知られてい
る。好ましい方法は、濃縮薬剤プレミックスを製造し、
次いでこれを使用して、薬物添加飼料を製造する。通常
のプレミックスは、プレミックス１ポンド当たり、薬物
約１〜約２００ｇを含有している。プレミックスは、液
体または固形製剤のいずれであってもよい。

動物のための飼料の最終製剤は、投与されるべき薬物の
量によって決まる。飼料を製造し、混合し、ペレット化
する通常の方法を、Ａ８０４３８化含物を含有している
飼料を製造するために使用することができる。

Ａ８０４３８化合物は、獣医学分野で知られている方法
によって非経口投与用に製剤化してもよい。

Ａ８０４３８化合物を含有している有効な注射用組　゛
酸物は、懸濁液または溶液のいずれの形態であってもよ
い。溶液形態の場合は、Ａ８０４３８化合物を生理学的
に許容し得る担体に溶解する。このような担体には、適
当な溶媒、ベンジルアルコール。

のような保存剤、および必要ならば緩衝液が含まれる。

有用な溶媒としては、例えばアルコール類、グリコール
類または植物油あるいは高度に精製された鉱油のような
不活性な油類が挙げられる。

注射用＠濁液組成物は、化合物に対する非溶剤と、担体
としての補助薬を使用して製造される。

この非溶剤は、例えは水またはポリエチレングリコール
のようなグリコール類てあってもよい。

適切な生理学的に許容し得る補助薬は、懸濁液組成物中
に化合物を懸濁してお（のに必要である。

この補助薬は、カルボキシメチルセルロース、ポリビニ
ルピロリドン、ゼラチンおよびアルギネート類のような
増量剤の中から選ぶことができる。

多数゛の界面活性剤も、化合物を懸濁するの番こ有用で
ある。レシチン、アルキルフェノールポリエチレンオキ
サイド付那物、ナフタレンスルホネート、アルキルベン
ゼンスルホネートおよびポリオキシエチレンソルビタン
エステルは、液状非溶剤における有用な懸濁化剤である
。

液状非溶剤の親水性、密度および表面張力に影響を及ぼ
す多数の物質は、個々の場合において注射用懸濁液を製
造するのに役立つ。例えばシリコン抑泡剤、グリコール
、ンルビト・−ルおよび糖は、有用な＠濁化剤である。

本発明の方法をより詳細に説明するために、以下に実施
例を挙げる。

実施例１　ストレプトマイセス・ボビリを使用する抗生
物質Ａ８０４３８の製造 Ａ、ストレプトマイセス・ボビリの振盪−フラスコ発酵 凍結乾燥したペレットまたは液体窒素中に保持された＠
濁液のいずれかの形のストレプトマイセス・ボビ’ＪＮ
ＲＲＬ１５９７１培養物を使用して、以Ｆの組成を有す
る増殖培地に接種するニゲルコース　　　　　　　　　
　　　　　　１５ポテトデキストリン　　　　　　　　
　　１ＯＮ　ａ２　Ｓ　０４　　　　　　　　　　　　
　　　　２カゼインのすい臓消化物７５ 酵母エキス　　　　　　　　　　　　　　５水道水　　
　　　　　　　　　　十分量１ｅ米ハ’）　ト−トＩＪ
ブト７　（Ｂａｃｔｏ　−ｒｒｙｐｔｏｎｅ　）（ディ
フコ・ラボラトリーズ、デトロイト、ミシガン（ＤｒＥ
ｃｏ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、　Ｄｅｔｒｏｉｔ　
、　Ｍｉｃｈ、）〕接種培地に２，５％の寒天を加えて
、スラントまたはプレートを調製する。接種したスラン
トを３０℃で約１０〜約１４日間インキュベートする。

成長したスラント培養を滅菌具で引っかいて胞子体をほ
ぐし、菌糸体マットを取ってふやかす。このようにして
得たほぐした胞子体と培養増殖の約１／４を使用して、
第１段階接種培地５　Ｑ　ｍＬに接種する。

接種した第１段階の培地を２５０　ｍＬエーレジンイヤ
ーフラスコ中、３０℃で約７２時間、２５０ｒｐｍで２
インチ（５，０８ｃｍ）の円を描いている振盪機でイン
キュベートする。

このインキュベートした第１段階培地（１，２５ｍＬ）
を使用して、以下の組成を有する生産培地５ＱｍＬに接
種する： 成分　　　　　　　　　　　　　鮎（ｇ／Ｌ　）グルコ
ース　　　　　　　　　　　　　４０．０ダイズ粉　　
　　　　　　　　　　　　　　７・５酵素−加水分解さ
れたカゼイン７３．。

Ｎ　ａ　２　Ｓ　０４　　　　　　　　　　　　　　２
−　ＯＣａ　Ｃ０３２−０ 水　　　　　　　　　　　　　　十分量ＩＣ米７　：／
　バー　ＥＨＣ（Ａｍｂｅｒ　ＥＨＣ）　［アンバー・
ラボラトリーズ、シュノー、ライスコンシン（Ａｍｂｅ
ｒ　ＬａｂｏｒａＣｏｒｉｅｓ、　Ｊｕｎｅａｕ、　Ｗ
ｉｓｃ、月接種した生産培地を２５０　ｍＬ広ロエーレ
ジンイヤーフラスコ中、３０℃で８〜１ｏ日間、２５゜
ｒｐｍで２インチの円を描いている振盪機でインキュベ
ートする。

Ｂ、ストレプトマイセス・ボビリのタンク発酵大鼠の接
種物を得るために、セクションＡの記載ζこ従って調製
した接種された第１段階培地１゜ｍＬを使用して、第１
段階培地の組成と同じ組成を有する第２段階増殖培地４
００　ｍＬに接種する。

この第２段階増殖培地を、２１の広ロエージンマイヤー
フラスコ中、３０℃で約４８時間、２５０ｒｐｍで２イ
ンチの円を描いている振盪機でインキュベートする。

このようにして調製したインキュベートされた第２段階
増殖培地（４００ｍＬ）を使用して、セクションＡの記
載に従って調製された滅菌生産培地１００１に接種する
。接種した生産培地を、１６５ｅの撹拌されている発酵
タンク中、３０℃の温度で８〜１０日間発酵させる。撹
拌されている容器中、弱い空気流（０，１２−０，２５
Ｖ／Ｖ／ｍ　）および緩慢なｒＰｍ（１５０−２００）
によって、溶存酸素濃度を気体飽和の３０％以上に維持
する。

実施例２　ストレプトマイセス・ボビリによって産生さ
れたＡ８０４３８の単離 ３％のバイア０−スーパー−１ｚ　／ｌ／　（Ｈｙｆｌ
ｏ　５ｕｐｅｒ−ｃｅｌ　）　　を含有している発酵ブ
ロス全体（２００Ｌ）を、フィルタープレスを通して濾
過した。メタノール（５０−６０Ｌ）をこのプレスを通
して循環させて、菌糸体ケーキを２回抽出した。

この抽出液を減圧ａ縮してメタノールを除去した。得ら
れた水溶液（３８Ｌ）をＮａ　ＯＨでｐＨ８に調節し、
酢酸エチル（１／３容Ｍ）で２回佃出した。

ブロスのＰ液をＮ　ａ　０１−１でｐＨ８に調節し、酢
酸エチル（１／２容量）で２回抽出した。酢酸エチル抽
出液を合し、ＩＬの容量まで減圧濃縮した。

ブロスおよび菌糸体の酢酸エチル抽出液を合し、ＩＬの
容量に減圧ａ絹した。

この方法によって発酵ブロス全体（４００Ｌ）から得た
抽出物を合して減圧濃縮し、油状残留物を得た。この残
留物をトルエン（４００ｍＬ）に溶解し、トルエン中に
充填されたシリカゲル〔ウールム（Ｗｏｅｌｍ　）、２
Ｌ）を含んでいるカラムに流した。

カラムハ、トルエン（６Ｌ）おヨヒトルエン：酢酸エチ
ル混合液［９：　１　（６Ｌ）、４：１（８Ｌ）および
３：２（４Ｌ）］て順順次閉した。初めの１２Ｌの溶出
の間（こＩＬの容量のフラクションを集め、次いで５０
０ｍＱの７ラクシヨンを集めた。溶出後に、１）バチル
ス・サブチリスを使用する生物検定および２）トルエン
：エタ／−ル（４：１）溶媒系を使用するシリカゲルＴ
ＬＣ（メルク（Ｍｅｒｃｋ）のプレート）および検出の
ためのバニリン−Ｈ２ＳＯ４噴霧を行なった。Ａ８０４
３８を含有しているフラクション〔トルエン：酢酸エチ
ル（４：１）溶出液から〕を合し、８０ｍＬの容量に減
圧濃縮した。

この濃縮物の１部分（・ｌＱｍＬ）を、トルエン中に充
填されているシリカゲル（ウールム１０〇−２００）７
０ｍＬを含んでいるカラムに流した。このカラムをトル
エン：酢酸エチル（９：１．４：１および３：２）で順
次展開してｌＱｍＬの７ラクシヨンを集めた。ｒＬＣて
溶出をモニターした。

Ａ８０４３８を含有しているフラクションを合し、減圧
Ｆで濃縮乾固した。残留物を少社のジオキサンに溶解し
、水（１／４容量）を加え、この溶液を凍結乾燥して非
品性Ａ８０４３８　　（２５７Ｊ＃）を粉末として得た
。この粉末をアセトン（３，５ｍＬ）に溶解し、水（１
，５ｍＬ）を加え、この混合物を５℃で一夜放置した。

生成した結晶をｐ過によって分離し、アセトン：水（１
：１）で洗浄し、減圧丁で乾燥して、結晶性のＡ８０４
３８（２３３ｊ響）を得た。

実施例３　ストレプトマイセスパフトウムラ使用する抗
生物質Ａ８０４３８の製造 Ａ、ス１−レプトマイセス・パフトラムの振盪−フラス
コ発酵 凍結乾燥されたペレットまたは液体窒素中に保持されて
いる＠濁液のいずれかの形の培養ストレプトマイセス・
パクトウムＮＲＲＬ　１５９７０を使用して、以下の組
成を有する寒天スラントに接種する。

寒天スラント培地 成分　　　　　　　　　　　　　量（、Ｆ／Ｌ）グ″７
−ス　　　　　　　　　　　　　２．５＝Ｔ溶性デンプ
ン　　　　　　　　　　５．０酵母エキス　　　　　　
　　　　　　１．２５酵索−加水分解されたカゼイン″
に１．２５ＣａＣ（）３　　　　　　　　　　　　　　
０．２５寒天　　　　　　　　　　　　　　１５．０脱
イオン水　　　　　　　十分鼠加えて１１とする調節前
（７）　ｐｔ（＝　６．３　漬ＮａＯＨでｐＨ７，５ｆ
こ調節；滅菌後のｐＨ＝６．９ 米Ｎ−ＺアミンＡ　％ハムコーシェフィールド・ケミカ
ル、リントバースト、ニューシャーシー（１（ｕｍｋｏ
−５ｃｈｅｆｆｉｅｌｄ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ、　Ｌｙｎ
ｄｈｕｒｓｔ　ＮＪ　）接種されたスラントを、３０℃
で約１０〜約１４日間インキュベートする。生長したス
ラント培養を滅菌具で引っかいて胞子体をほぐし、菌糸
体マットを取ってふやかす。このようにして得たほぐし
た胞子体と培養増殖の約１／４を使用して、以下の組成
を有する第１段階増殖培地５ＱｍＬに接種する： 増殖培地 成分　　　　　　　　　　　　　量（ｇ／Ｌ）グルコー
ス　　　　　　　　　　　　　１０町溶性デンプン　　
　　　　　　　　２゜酵累−加水分解されたカゼイン７
５ 酵母エキス　　　　　　　　　　　　　　５ＣａＣ０３
１ 水道水　　　　　　　　　　　十分址で１４にする調節
前（７）　ＰＨ＝　６．６　；　ＮａＯＨテｐＨ’ｙ、
　２　ＧＣｉ節；滅菌後のｐｉ−１＝　６．８ 米Ｎ−ＺアミンＡ 接種したｇ１段階の培地を、２５０ｍＬエーレンマイジ
ンフラスコ中、３０℃で約４８時間、２５０ｒｐｍで２
インチ（５，０８ｏｎ　）の円を描いている振盪機でイ
ンキュベートする。

このインキュベートされた第１段階の培地（１，２５ｍ
Ｌ　）を使用して、以Ｆの組成を有する生産培地５Ｑｍ
Ｌに接種するニ ゲルコース　　　　　　　　　　　　２０　ｇ／Ｌブラ
ックストラップ糖！　　　　　　　２０．Ｆ／Ｌペプト
ン’　　　　　　　　　　　　　　　　５１／／ＬＣａ
６０３　　　　　　　　　　　　　　　　２ｇ／Ｌア 吟テツタのミネラルストック”　　　　　２ｍＬ脱゛イ
オン水　　　　　　　十分値加えて１１にする米ハクト
ヘプト７　（Ｂａｃｔｏ　Ｐｅｐｔｏｎｅ　）　（ディ
フコ・ラボラトリーズ、デトロイト、ミシガン（Ｄｉｆ
ｃ。

Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、　Ｄｅｆｒｏｉｔ　ＭＩ　
）未来ηぐツクのミネラルストック（Ｃｚａｐｅｋ’　
５Ｍ１ｎｅｒａｌ　５ｔｏｃｋ　）は、以下ノルｍ成を
有しティル：ＫＬ；ｌ　　　　　　　１０％ Ｍｇ　５０４．７Ｈ２０１０％ ＦｅＳＯ４・７Ｈ２００，２％（＃　ＨＣ（１２ｍＱに
溶解）脱イオン水　　十分値加えて１ｇにするこの接種
した生産培地を２５０　ｍＬ広ロエーレジンイヤーフラ
スコ中、３０℃で８〜１０日間、２５　Ｏｒｐｍで２イ
ンチの円を描いている振盪機でインキュベートする。

の Ｂ、ストレプトマイセス・バクトウムＸン’／”Ｓ　酵
大量の接種物を得るために、セクションＡの記載に従っ
て調製した接種された１段階培地ＩＱｍＬを使°用して
、第１段階培地の組成と同じ組成を有している第２段階
増殖培地４００　ｍＬに接種する。

この第２段階増殖培地を、２１の広ロエージンマイヤー
フラスコ中、３０℃で約４８時間、２５Ｏｒｐｍテ２イ
ンチの円を描いている振盪機でインキュベートする。

このようにして調製したインキュベートされた第２段階
増殖培地（４００ｍＬ）を使用して、セクションＡの記
載に従って調製された滅菌生産培地１００βに接種する
。この接種された生産培地を、１６５ｇの撹拌されてい
る発酵タンク中、３０℃の温度で８〜１０日間発酵させ
る。撹拌されている容器中、ゆるい空気流（０，１２５
ｖ／ｖ／ｍ　）および緩慢なｒＰｍ（１５０−１７５）
ｉｎよッテ、溶存酸素濃度を気体飽和の３０％以上に維
持する。

実施例４　ストレプトマイセス・パクトウム、によって
産生されたＡ８０４３８の単離 実施例３の記載に従って調製し、バイフロス−バーセル
（３％）を混合した発酵ブロス全体（１１４Ｌ）をｌ（
Ｃ召でｐＨ３，０に調節し、フィルタープレスを通して
濾過した。１％のＮａＨＣＯ２を含んでいるメタノール
：水（９：１）の溶液（３０Ｌ）を使用し、このプレス
において菌糸体ケーキを２回抽出した。このメタノール
佃出液を合しく６０Ｌ）、１４Ｌの容量に減圧濃縮し、
Ｎａ０ｆ（テｐＨ８，５ｉｃ　調節した。この濃縮物を
酢酸エチル（１／２容量）で２回抽出し、合した抽出液
（１２Ｌ）を０６６Ｌの容積に減圧濃縮した。

この方法で３回の１０ＯＬ発酵から得た濃縮物を合し、
減圧下で蒸発乾固した。残留物をＣＨＣ４（２００ｍＱ
）　　に溶解し、ＣＨＣｌ３中に充填サレテいるシリカ
ゲルの６×４０αカラム（ｌＬ、ウールム、１００−２
００μｍ）にかけた。カラムをＣＨＣｌ１３（６Ｌ）お
よびＣＨＣｌ３：　Ｅ　ｔ　ＯＡ　ｃ　（４９’　１　
（Ｉ　Ｌ）および９　：　１　（４Ｌ））で溶出した。

ＴＬＣおよび生物検定によって溶出をモニターした。Ａ
８０４３８を含有しているフラクションを合し、減圧下
で濃縮乾固した。

このようにして得られた残留物をアセトン（１５０ｍＬ
）　　に溶解し、少輩のシリカゲル（ウールム１００−
２００μｍ）にかけた後、乾燥した。次いで、このＡ８
０４３８を含有しているシリカゲルを、ＣＨＣｌ３中に
充填されているシリカゲル（ｌＬ、ウールム１００−２
００μｍ）を含んでいる６×４０αカラムに付した。カ
ラムをＣＨＣｌ３（６Ｌ）およびＣＨＣ，ｇ３：ＥｔＯ
Ａｃ　（９：　１　（５Ｌ）および４　：；　：ｒ、（
２Ｌ）〕で順順次間した。溶出は、ＴＬＣおよび生物検
定によってモニターした。Ａ８０４３８を含有している
フラクションを合して減圧Ｆで濃縮乾固した。

得られた残留物をアセトンから結晶化し、結晶性Ａ８０
４３８　１４．２７，９をナトリウム塩として得た（添
付の図面の第２図参照）。

実施例５　　Ａ８ｏ＋３ｓＮａカら（７）Ａ８０４３８
遊離酸の製造 Ａ８０４３８ナトリウム塩（１ｇ）をアセトン（５ｍＬ
）に溶解し、水（２５ｍＬ）　　を加え、この溶液のｐ
ＨをＩＮ）ＩＣｎで３．０に調節した。水（２５ｍＬ）
を加えると、ゴム状沈殿が生成した。この混合物を酢酸
エチル（各１００ｍＬ）で２回抽出した。合した抽出物
を減圧下で蒸発乾固した。残留物をアセトン（５ＱｍＬ
）　　に溶解し、水（２５ｍｔ）を加えた。この混合物
を、ゴム状沈殿が生成するまで、再び室温で放置したつ
沈殿を分離し、温ペンタン（ｉｏｏｍＬ）に溶解した。

このペンタン溶液を室温で放置した。次いてペンタンを
デカントし、減圧ドで蒸発させて、酸の形のＡ８０４３
８（８４９■）（ｍｐ５５−５６℃）を白色粉末として
得た（添付の図面の第１図参照）。

実ｍ例６　　Ａ８０４３８カリウム塩の製造Ａ８０４３
８（酸の形、４０ｏｎ）をアセトン（５０ｍＬ）に溶解
し、水（２５ｍＬ）　　を那え、ＩＮＫＯＨでｐＨを１
０．０にＸｌ５ｆｊした。水（２５ｍＬ）　　を加えた
後、ｐＨを１０に維持しながらこの混合物を１５分間撹
拌した。次いで、酢酸エチル（各１００ｍＬ）で混合物
を２回抽出し、合した抽出液を減圧下で蒸発乾固した。

残留物をアセトン（５０ｍＬ）ｉこ溶解し、水（５Ｑｍ
Ｌ）　　を加え、この混合物を室温で一夜放置した。生
成した結晶を濾過によって分離して水で洗浄し、５０℃
の真空オーブンで乾燥して、Ａ８０４３８　カリウム塩
（ｍＰ１５７−１５９℃）１７９ｑを得た。

【図面の簡単な説明】

第１図はＡ８０４３８の遊離酸の赤外吸収スペクトルを
示すグラフであり、第２図はＡ８０４３８のナトリウム
塩の赤外吸収スペクトルを示すグラフである。 特許出願人　　イーライ・リリー・アンド・カンパニー
化　理　人　弁理士青白　葆　外１名 やり薪２

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式（ I ）： ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） で示される抗生物質Ａ８０４３８あるいはそのアシル、
   アルキルエステル、アルキルエーテル、またはウレタン
   誘導体並びにそれらの塩。 ２、Ａ８０４３８である第１項に記載の化合物。 ３、Ａ８０４３８のナトリウム塩である第１項に記載の
   化合物。 ４、微生物感染を予防または治療するのに使用される第
   １項〜第３項のいずれかに記載の式（ I ）の化合物を
   必須成分とする組成物。 ５、成長促進剤として使用される第１項〜第３項のいず
   れかに記載の式（ I ）の化合物を必須成分とする組成
   物。 ６、第１項〜第３項のいずれかに記載の式（ I ）の化
   合物を製造するための方法であつて、ストレプトマイセ
   ス・ボビリＮＲＲＬ１５９７１またはストレプトマイセ
   ス・パクトウムＮＲＲＬ１５９７０またはそのＡ８０４
   ３８−産生変異株、突然変異株、組換え株を、液中好気
   的発酵条件下、炭素、窒素および無機塩類の同化し得る
   供給源を含有している培地で、抗生物質Ａ８０４３８が
   産生されるまで培養し、次いで所望により培養培地から
   Ａ８０４３８を分離することからなる方法。 ７、ストレプトマイセス・ボビリＮＲＲＬ１５９７１。 ８、ストレプトマイセス・パクトウムＮＲＲＬ１５９７
   ０。 ９、第１項〜第３項のいずれかに記載の式（ I ）の化
   合物である第１成分と、ａ）ニカルバジン、ｂ）４，４
   ′−ジニトロカルバニリド、 ｃ）式： ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒ＾２はＣ＿１−Ｃ＿４アルキルであり、Ｒ＾
   ３はハロゲン、Ｃ＿１−Ｃ＿４フルオロアルキル、Ｃ＿
   １−Ｃ＿４フルオロアルコキシまたはＣ＿１−Ｃ＿４フ
   ルオロアルキルチオであり、 Ｒ＾４はハロゲンであり、 Ｒ＾５は水素またはハロゲンであり、 ｍは０、１または２であり、 ｎは０または１であり、 ただし、Ｒ＾４置換分が存在する場合、それは２−位以
   外である〕 で示されるナフタレンアミン、 ｄ）２，４−ジニトロ−Ｎ−〔４−（トリフルオロメト
   キシ）フェニル〕−６−（トリフルオロメチル）ベンゼ
   ンアミン、２，４−ジニトロ−Ｎ−〔４−（１，１，２
   ，２−テトラフルオロエトキシ）フェニル〕−６−（ト
   リフルオロメチル）ベンゼンアミンまたは２，４−ジニ
   トロ−Ｎ−〔４−（ペンタフルオロエトキシ）フェニル
   〕−６−（トリフルオロメチル）ベンゼンアミンから選
   ばれるベンゼンアミン、 ｅ）メチクロルピンドールまたは ｆ）（ａ）−（ｅ）の化合物の薬学的に許容し得る塩か
   らなる群から選ばれる第２成分を含有している家禽の飼
   料組成物であつて、これらの成分が、一緒になつて少な
   くとも１種の、胞子虫症の原因となるエイメリア株につ
   いて相乗作用をする量で飼料中に含まれている家禽の飼
   料組成物。