JPS6135335A - 粒子解析装置 - Google Patents
粒子解析装置Info
- Publication number
- JPS6135335A JPS6135335A JP15851684A JP15851684A JPS6135335A JP S6135335 A JPS6135335 A JP S6135335A JP 15851684 A JP15851684 A JP 15851684A JP 15851684 A JP15851684 A JP 15851684A JP S6135335 A JPS6135335 A JP S6135335A
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- sample
- light
- specimen
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- Pending
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-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
- G01N15/1456—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry without spatial resolution of the texture or inner structure of the particle, e.g. processing of pulse signals
- G01N15/1459—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry without spatial resolution of the texture or inner structure of the particle, e.g. processing of pulse signals the analysis being performed on a sample stream
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
本発明は、フローサイトメータ等に用いられ、検体に光
を照射し、その側方散乱光を複数方向から測定し、測定
値を平均化する粒子解析装置に関するものである。
を照射し、その側方散乱光を複数方向から測定し、測定
値を平均化する粒子解析装置に関するものである。
フローサイトメータとは、高速で流れる細胞浮遊溶液に
例えばレーザー光を照射し、その散乱光による光電信号
を検出し、細胞の性質嚇構造を解明する装置であり、細
胞化学、免疫学、血液学、腫瘍学、遺伝学等の分野で使
用されつつある。
例えばレーザー光を照射し、その散乱光による光電信号
を検出し、細胞の性質嚇構造を解明する装置であり、細
胞化学、免疫学、血液学、腫瘍学、遺伝学等の分野で使
用されつつある。
従来の粒子解析用光学系では、検体に光を照射したとき
に発する側方散乱光を一方向から測光している。即ち、
第1図に示すフローセルlの中央部の例えば70pmX
20ILmの微小な矩形状断面を有する流通部2内を、
シース液に包まれて通過する血球細胞などの検体Sに、
図示しないレーザー光源からの平行光を第2図に示すよ
うにレンズ3を介して集光し、この照射光の直進方向の
前方散乱光をレンズ4を介して光電検出器5上で受光し
、検体Sの大きさの情報を得る。また、照射光の直進方
向に対してほぼ直交する方向で得られる側方散乱光は、
レンズ6と光電検出器7により検出され、検体Sの内部
状態の情報を得ることができる。更に、細胞に蛍光標識
を施して、細胞化学的解析を行う場合には、図示しない
バリアフィルタ、レンズ6、光電検出器7の組み合わせ
により測定が可能である。
に発する側方散乱光を一方向から測光している。即ち、
第1図に示すフローセルlの中央部の例えば70pmX
20ILmの微小な矩形状断面を有する流通部2内を、
シース液に包まれて通過する血球細胞などの検体Sに、
図示しないレーザー光源からの平行光を第2図に示すよ
うにレンズ3を介して集光し、この照射光の直進方向の
前方散乱光をレンズ4を介して光電検出器5上で受光し
、検体Sの大きさの情報を得る。また、照射光の直進方
向に対してほぼ直交する方向で得られる側方散乱光は、
レンズ6と光電検出器7により検出され、検体Sの内部
状態の情報を得ることができる。更に、細胞に蛍光標識
を施して、細胞化学的解析を行う場合には、図示しない
バリアフィルタ、レンズ6、光電検出器7の組み合わせ
により測定が可能である。
前方散乱光側の光電検出器5は、通常の検出能力を有す
る半導体検出器でも十分に検出可能であるが、側方散乱
光は前方散乱光に比較して極めて微弱であるので、光電
検出器7等には例えばホトマルチプライヤなどの光増強
管が使用されている。また、大きな受光量の側方散乱光
を得るためには、光源の出力を大きくすることが考えら
れるが、例えばレーザー光源の場合にその出力は数ワッ
トのものが要求される。一方、光源出力を軽減させるに
は、側方散乱光の集光能力の増加が望まれるが、そのた
めには通常では集光光学系の開口数を大きくすることに
より実現できる。ところが、このように集光光学系の開
口数を大きくすると、検体Sの分布が流通部2内でレン
ズ6の光軸方向を移動した場合に、測定光量にばらつき
が生じ易くなる問題がある。
る半導体検出器でも十分に検出可能であるが、側方散乱
光は前方散乱光に比較して極めて微弱であるので、光電
検出器7等には例えばホトマルチプライヤなどの光増強
管が使用されている。また、大きな受光量の側方散乱光
を得るためには、光源の出力を大きくすることが考えら
れるが、例えばレーザー光源の場合にその出力は数ワッ
トのものが要求される。一方、光源出力を軽減させるに
は、側方散乱光の集光能力の増加が望まれるが、そのた
めには通常では集光光学系の開口数を大きくすることに
より実現できる。ところが、このように集光光学系の開
口数を大きくすると、検体Sの分布が流通部2内でレン
ズ6の光軸方向を移動した場合に、測定光量にばらつき
が生じ易くなる問題がある。
第3図に検体の粒子が測定光軸上を移動した場合の結像
の様子を示している。この第3図において、0の位置に
ある粒子が発する光を集光レンズ6を介して光電検出器
7に導くと、その光信号の強さは立体角2π (1−c
osφ1)に比例する。同様に、0′の位置にある粒子
の発する光は、立体角2π (1−cosφ2)に比例
する。従って、粒子が測定光軸上でOからO”へと移動
すれば、同一の粒子を測定しているにも拘らず、光電検
出器7の出力信号が変動し、測定が不正確なものになる
。これは、特に立体角φが大きい程、つまり集光レンズ
6の開口数が大きくなればなる程その影響が大きくなる
。このように従来の粒子解析用晃学系では、側方散乱光
の大きな受光量を得るために集光光学系の開口数を大き
くすると、検体Sの光軸方向への移動による測定光量の
ばらつきが生じ易くなるという欠点がある。
の様子を示している。この第3図において、0の位置に
ある粒子が発する光を集光レンズ6を介して光電検出器
7に導くと、その光信号の強さは立体角2π (1−c
osφ1)に比例する。同様に、0′の位置にある粒子
の発する光は、立体角2π (1−cosφ2)に比例
する。従って、粒子が測定光軸上でOからO”へと移動
すれば、同一の粒子を測定しているにも拘らず、光電検
出器7の出力信号が変動し、測定が不正確なものになる
。これは、特に立体角φが大きい程、つまり集光レンズ
6の開口数が大きくなればなる程その影響が大きくなる
。このように従来の粒子解析用晃学系では、側方散乱光
の大きな受光量を得るために集光光学系の開口数を大き
くすると、検体Sの光軸方向への移動による測定光量の
ばらつきが生じ易くなるという欠点がある。
本発明の目的は、このような従来粒子解析用光学系の欠
点を除去し、複数の側方方向から検体の側方散乱光を測
定し、得られた複数の出力を演算処理することにより、
側方への検体の移動による測定光量のばらつきを補正し
、安定した測定が可能で精度の良い測定がなし得る粒子
解析装置を提供することにあり、その要旨は、検体を通
過させる流通部を有するフローセルと、光源からの前記
検体に対する照射光の進行方向にほぼ直交する両側方へ
の検体の散乱光を測光するための光電検出器をそれぞれ
有する複数個の光学系と、前記複数個の光電検出器から
の出力信号を演算するための演算処理回路部とを具備す
ることを特徴とするものである。
点を除去し、複数の側方方向から検体の側方散乱光を測
定し、得られた複数の出力を演算処理することにより、
側方への検体の移動による測定光量のばらつきを補正し
、安定した測定が可能で精度の良い測定がなし得る粒子
解析装置を提供することにあり、その要旨は、検体を通
過させる流通部を有するフローセルと、光源からの前記
検体に対する照射光の進行方向にほぼ直交する両側方へ
の検体の散乱光を測光するための光電検出器をそれぞれ
有する複数個の光学系と、前記複数個の光電検出器から
の出力信号を演算するための演算処理回路部とを具備す
ることを特徴とするものである。
本発明を第4図、第5図に図示の実施例に基づいて詳細
に説明する。
に説明する。
ここで、第4図は光学系の構成図、第5図は信号処理系
のブロック回路構成図である。なお、第2図と同一の符
号は同一の部材を表している。
のブロック回路構成図である。なお、第2図と同一の符
号は同一の部材を表している。
フローセル1の流通部2の長辺側の側面に、図示しない
レーザー光源からの平行光を検体Sに集光させるための
レンズ3を配置し、照射光の入射方向の前方散乱光を測
光するためのレンズ4と光電検出器5を設置しているの
は第1図に示した従来例と同様である。
レーザー光源からの平行光を検体Sに集光させるための
レンズ3を配置し、照射光の入射方向の前方散乱光を測
光するためのレンズ4と光電検出器5を設置しているの
は第1図に示した従来例と同様である。
ここで、流通部2の両短辺側に出射される側方散乱光を
測定するために、上述の入射光束に対してほぼ直交する
両2方向に、それぞれレンズ10a、光電検出器11b
、及びレンズ10a、光電検出器11bが設置されてい
る。
測定するために、上述の入射光束に対してほぼ直交する
両2方向に、それぞれレンズ10a、光電検出器11b
、及びレンズ10a、光電検出器11bが設置されてい
る。
そして、第5図に示すように光電検出器11a、llb
の出力は、演算部12、記憶部13、表示部14に接続
されている。即ち、検体Sからの側方散乱光の一方向の
散乱光Laと、その反対方向の散乱光Lbは、それぞれ
レンズloa、10bを介し光電検出器11a、llb
で光信号出力とに変換され、演算部12に入力される。
の出力は、演算部12、記憶部13、表示部14に接続
されている。即ち、検体Sからの側方散乱光の一方向の
散乱光Laと、その反対方向の散乱光Lbは、それぞれ
レンズloa、10bを介し光電検出器11a、llb
で光信号出力とに変換され、演算部12に入力される。
そして、この演算部12で演算された結果は記憶部13
に入力され、更に表示部14に表示される。
に入力され、更に表示部14に表示される。
例えば、光電検出器11a、llbの出力の和の1/2
を検体Sのデータとして、記憶部13に刻々と記憶され
、最終的にはヒストグラムデータとして例えばCRTな
どの表示部14に表示される。
を検体Sのデータとして、記憶部13に刻々と記憶され
、最終的にはヒストグラムデータとして例えばCRTな
どの表示部14に表示される。
かくすることにより、流通部2内の検体Sの流れが、流
通部2の長辺方向に沿って偏位しても、移動方向の両側
から散乱光を検出して演算処理しているために、検体S
の移動の影響は緩和されることになる。
通部2の長辺方向に沿って偏位しても、移動方向の両側
から散乱光を検出して演算処理しているために、検体S
の移動の影響は緩和されることになる。
また演算部12における演算は、光電検出器11a、l
lbの出力の和を単純に平均することが最も普通である
が、単に和を求めただけでもよいし、検体Sの流通部2
の長辺方向への分布関数を考慮して、例えば二乗平均と
か他の統計的処理方法を駆使することも考えられる。
lbの出力の和を単純に平均することが最も普通である
が、単に和を求めただけでもよいし、検体Sの流通部2
の長辺方向への分布関数を考慮して、例えば二乗平均と
か他の統計的処理方法を駆使することも考えられる。
また、検体Sに蛍光標識を施した場合には、2つの側方
散乱光の検出光学系中にバリアフィルタを挿入すればよ
い。
散乱光の検出光学系中にバリアフィルタを挿入すればよ
い。
以上説明したように本発明に係る粒子解析装置は、側方
散乱光を検体を挟む複数方向で測定し、その値を平均化
して出力信号とすることにより、精度の高い安定した測
定値が得られる。また、光源の出力を小さくしても、従
来と同等程度の精度を得ることが可能となる。
散乱光を検体を挟む複数方向で測定し、その値を平均化
して出力信号とすることにより、精度の高い安定した測
定値が得られる。また、光源の出力を小さくしても、従
来と同等程度の精度を得ることが可能となる。
第1図はフローセルの斜視図、第2図は従来装置の光学
系の構成図、第3図はレンズの集光効率の説明図、第4
図以下は本発明に係る粒子解析装置の一実施例を示し、
第4図はその光学的構成図、第5図は信号処理系のブロ
ック回路構成図である。 符号1はフローセル、2は流通部、3,4.10a、i
obはL/ンズ、5、lla、llbは光電検出器、1
2は演算部、13は記憶部、14は表示部、Sは検体で
ある。
系の構成図、第3図はレンズの集光効率の説明図、第4
図以下は本発明に係る粒子解析装置の一実施例を示し、
第4図はその光学的構成図、第5図は信号処理系のブロ
ック回路構成図である。 符号1はフローセル、2は流通部、3,4.10a、i
obはL/ンズ、5、lla、llbは光電検出器、1
2は演算部、13は記憶部、14は表示部、Sは検体で
ある。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 1、検体を通過させる流通部を有するフローセルと、光
源からの前記検体に対する照射光の進行方向にほぼ直交
する両側方への検体の散乱光を測光するための光電検出
器をそれぞれ有する複数個の光学系と、前記複数個の光
電検出器からの出力信号を演算するための演算処理回路
部とを具備することを特徴とする粒子解析装置。 2、前記演算処理回路部は前記検体を挟んで配置された
複数個の光電検出器の出力信号を平均するようにした特
許請求の範囲第1項に記載の粒子解析装置。 3、蛍光標識を付した検体を検出するため、前記光電検
出器を含む光学系中にバリアフィルタを挿入できるよう
にした特許請求の範囲第1項に記載の粒子解析装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15851684A JPS6135335A (ja) | 1984-07-28 | 1984-07-28 | 粒子解析装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP15851684A JPS6135335A (ja) | 1984-07-28 | 1984-07-28 | 粒子解析装置 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6135335A true JPS6135335A (ja) | 1986-02-19 |
Family
ID=15673445
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP15851684A Pending JPS6135335A (ja) | 1984-07-28 | 1984-07-28 | 粒子解析装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6135335A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5085500A (en) * | 1989-11-28 | 1992-02-04 | Tsi Incorporated | Non-imaging laser particle counter |
| JP2006510902A (ja) * | 2002-12-20 | 2006-03-30 | オプトキュー アーベー | 血中測定のための方法及び装置 |
| WO2021099081A1 (en) * | 2019-11-22 | 2021-05-27 | Ams Ag | Optical based particulate matter sensing |
-
1984
- 1984-07-28 JP JP15851684A patent/JPS6135335A/ja active Pending
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5085500A (en) * | 1989-11-28 | 1992-02-04 | Tsi Incorporated | Non-imaging laser particle counter |
| JP2006510902A (ja) * | 2002-12-20 | 2006-03-30 | オプトキュー アーベー | 血中測定のための方法及び装置 |
| WO2021099081A1 (en) * | 2019-11-22 | 2021-05-27 | Ams Ag | Optical based particulate matter sensing |
| US12345638B2 (en) | 2019-11-22 | 2025-07-01 | Ams Ag | Optical particle counter for air quality assessment |
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