JPS6136230A - 神経再生促進方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ニューロ／は細胞分裂或いは有糸分裂を行わない伏゛有
糸分裂細胞であり、従って抗有糸分裂剤に対して耐性を
有する。ニューロンは増殖し、抗有糸分裂剤に対して感
受性を有する神経膠細胞即ち長状細胞と密接に関連し、
これに取り囲まれている。神経繊維が損傷或いは引き裂
かれた後に再生全達成する際の困難の１つは神経膠細胞
が増殖し、再生神経繊維に対して障壁を形成することで
ある。

その結果、予想される付着箇所に向っての繊維の更なる
動きが妨害され、構造及び機能の再生が終ってしまう。

酸素は神経の正常な機能及び発達に極めて重要である。

酸素供給が増加されるならば、これは新たな成長に好ま
しいものである。Ｒ。リナス等（Ｒ。

Ｌｌｉｎａｓ　ｅｔ　ａｌ、　Ｆｅｄ、Ｐｒｏｃ、　４
０．　４−８．２２４０−４５（１９８１））　　によ
り示されているように、咄乳動物のリンゲル溶液中のＨ
２Ｏ２は神経の生存及び活性に好ましい結果を与え得る
ものである。

本発明に従えば、抗有糸分裂剤を使用することにより神
経膠細胞の成長を調整することができることが見出され
た。有効量の抗有糸分裂剤を神経損傷箇所に投与するこ
とにより神経膠細胞の成長全抑制することができ、妨害
され々い神経組織の成長を可能にする。

従って、本発明の１つの側面は、有効量の抗有糸分裂剤
を損傷箇所に投与することを特徴とする咄乳動物（例え
ば、ヒト）における損傷神経箇所の再生を促進する方法
である。抗有糸分裂剤の適当な量は神経膠細胞成長が神
経組織の成長を妨害しない程度に神経膠細胞の成長速度
を減少させるに十分な量である。抗有糸分裂剤は約３〜
約２０マイクロモルの濃度で投与される。好ましい抗有
糸分裂剤はシトシンアラビノシト８．５−フルオロウラ
シル、ヒドロキシ尿素及びメトトレキセートである。

血液供給が限られ、浮腫が広がる神経損傷の領域におい
てはプロトンの過剰及び低ｐＨが通常生ずる。本発明に
おいて、一般的に「緩衝剤」と称されるプロトン−引き
抜き物質が神経損傷の箇所においてプロトンを除去し、
ｐＨｋ増加させるために使用される場合に神経膠組織の
成長を抑制するのに役立つことが見出された。更にその
様な緩衝剤は予想外に膜流動性、代謝輸送、ｒ−アミノ
酪酸（ＧＡＢＡ）の輸送、カルシウム輸送、及びその他
の神経組織における膜機能を予想外に促進する。

又、これらの膜−高揚特性の明らかな結果として、緩衝
剤は損傷神経組織の成長及び修復を促進し、及び損傷箇
所における酸素の利用可能性を促進することを見出した
。

又哺乳動物における損傷神経組織の再生を促進する方法
において損傷箇所のｐＨｋ約７〜８、好ましくは７３に
増加させる工程を含んでなる方法を含むものである。こ
のｐＨは損傷箇所に緩衝剤（プロトン−引き抜き剤）を
投与することにより増加される。この緩衝剤は約０５〜
約２０ミリモル、好ましくは約１．５〜約８ミリモルの
緩衝剤濃度を有する溶液或いは組成物において投与する
のが好ましい。好ましい緩衝剤即ちプロトン−引き抜き
物質としてはＨＥＰＥＳ及びＴＲＥＡが挙げられる。

本発明の好ましい実施態様においては、損傷神経組織の
再生を促進する方法は抗有糸分裂剤及び緩衝剤の両者を
損傷箇所に投与することを含んでなるものである。又、
任意に薬理学的に許容可能な過酸化物類特に過酸化水素
などの酸素供給物質を損傷箇所に緩衝剤及び／又は抗有
糸分裂剤と共に投与するのが好ましい。過酸化水素の適
当な濃度は０００２〜０００５容量チである。

本発明は又、薬理学的に許容可能な担体及び担体中に約
３〜約２０マイクロモルの濃度で含まれる抗有糸分裂剤
よりなる損傷神経組織の再生を促進するための薬学的組
成物金倉むものである。好ましい抗有糸分裂剤はシトシ
ンアラビノシト、５−フルオロウラシル、ヒドロキシ尿
素及びメトトレキセートである。

本発明の範囲内にあるもう１つの組成物は薬理学的に許
容可能な担体及び約０５〜約２０ミリモルの濃度を有す
る緩衝剤、好ましくはＨＥＰＥＳ或いはＴＲＥＡ　ｉ含
んでなる損傷神経組織の再生を促進するための薬学的組
成物である。

本発明による好ましい組成物は抗有糸分裂剤及び緩衝剤
の両者を上記濃度及び種類のものを含むものである。

本発明の組成物は又過酸化水素などの酸素供給化合物を
好ましくは約０００２％〜約０．００５％の濃度で含む
ことが出来る。

本発明の方法及び組成物を使用することにより、ニュー
ロン及び神経膠細胞の成長が適当な条件下において適用
される緩衝剤及び抗有糸分裂剤によシ調整することがで
き、神経繊維の成長を秩序だって行うことができ、神経
再生を達成することができる。中枢神経系統或いは末梢
神経系統の如何を問わず、大きな神経損傷或いは離断が
ある場合には、過度の成長は妨害するが、秩序だった発
育が進行し得る足場のための適当な成長は許容するに十
分に神経膠細胞の増殖を抑制し、神経繊維の再生に好ま
しい条件が開発される。

適当な抗有糸分裂剤は例えばメトトレキセートなどの各
種葉酸拮抗薬、シトシンアラビノシト、５−フルオロウ
ラシル、フロクスウリジン、Ｎ−ホスホノアセチル−Ｌ
−アスノξルテート、アザウリジン、アザリビン、及び
イドクスウリジンなどのピリミジン類縁体、メルカプト
プリン、及びチオグアニンなどのプリン類縁体、ナイト
ロジエンマスタート、タカルハシン、カルムスチン、ロ
ムステン及びセムスチンなどのアルキル化剤、ダウノル
ビシン、ダウノルビシン、ト９クソルビシ／及びプレオ
マイシンなどの抗生物質、及びシスプラチンヒト９０キ
シ尿素、及びグアナゾールなどのその他の抗増殖剤など
から選択することができる。

特に好ましい抗有糸分裂剤はヒドロキシ尿素、シトシン
アラビノシトゝ、メトトレキセート、及び５−フルオロ
ウラシルである。

ｐＨ’ｅ増加させることにより神経膠細胞の成長を抑制
或いは制御するのに有用な緩衝剤（プロトン−引き抜き
化合物）としては次のものが挙げられる：　ＡＣＥＳ（
２（２−アミノ−２−オキソエチル）−アミノコエタン
スルホン酸）；ＡＤＡ（Ｎ−（２−アセタミド）−２−
イミノジ酢酸）；　ＡＥＰＤ（２−アミノ−２−エチル
−１，３−プロパンジオール）；ＡＭＰ（２−アミノ−
２−メチル−１−プロパツール）；ＡＭＰＤ（２−アミ
ノ−２−メチル−１，３−プロパンジオール）；ＢＥＳ
（Ｎ、Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）−２−アミノ
エタンスルホン酸）；ビシン（Ｎ、Ｎ−ビス（２−ヒド
ロキシエチル）−プリン／）：ビスートリス（ビス（２
−ヒト９０キシエチル）−イミノ−トリス（ヒト９０キ
シメチル）メタン）；ヒスートリスゾロノξン（ｔ　３
．　ヒス〔トリス（ヒト８０キシメチル）−メチルアミ
ンクプロパン）；ＤＥＡ（ジェタノールアミン）　；　
ＥＰＰＳ（Ｎ−（２−ヒドロキシエチル）−１−ピペラ
ジンプロパンスル＊ン［）；　ＨＥＰＥＳ（Ｎ−２−ヒ
トゝロキシエチルピベラジ／−Ｎ’−２−エタンスルホ
ン酸）；　ＭＥＡ（モノエタノールアミン）；ＭＥＳ（
２−（Ｎ−モルホリノ）エタンスルホ／酸）；Ｍｏｐｓ
（３−（Ｎ−モルホリノ）フロパンスルホン酸）；ＰＩ
ＰＥＳ　　（ピペラジン−Ｎ、Ｎ／−ビス（２−エタン
スルホン酸）　）　；ＴＡＰＳ　（）リス（ヒト８０キ
シメチル）メチルアミノゾロパンスルホ／酸）：ＴＥＳ
（Ｎ−）リス（ヒドロキシメチル）−メチル−２−アミ
ノエタンスルホン酸）　；　ＴＨＥＡ　（）ジェタノー
ルアミン）；）！Ｊシン（Ｎ−）、！Ｊス（ヒト９０キ
ジメチル）メチルグリシン）；及びトリス（トリス（ヒ
ト９０キシメチル）アミノメタン）。

好ましい緩衝剤はＴＲＥＡ、　ＨＥＰＥＳ及びトリスで
ある。

神経再生の促進剤として有用と考えられるこれらの物質
の量は神経膠細胞成長を抑制するに必要な濃度に応じて
変化するが一般的には抗有糸分裂剤については３〜２０
マイクロモルの範囲であり、緩衝剤及びその他のプロト
ン引き抜き物質については０５〜２０ミリモルの範囲で
ある。

ｐＨ７，３（生理学的ｐＨ）におけるモルベースの各種
緩衝剤の有効性は非プロトン添加形態の濃度に直接関連
している。これは全モルばビスに対する異ったｐＫａ値
を有する緩衝剤間の相違を説明し、よシ高い値のものは
任意のｐＨにおける非プロトン添加形態のよシ小さい濃
度の故によシ効率が低い。有効である非プロトン形態の
濃度は１×１０−５Ｍ−ＩＸＩＯ−３Ｍ、好ましくは２
〜８　Ｘ　１０−４Ｍである。

損傷或いは切断した神経を有するヒト及び動物に適用す
るのに適した薬学的組成物としては抗有糸分裂剤と代表
的なゾロトン捕捉剤及び緩衝剤との等モル無菌調剤が挙
げられる。これらの抗有糸分裂剤は通常３〜２０マイク
ロモルの範囲で利用可能であシ、７〜８のｐＨに緩衝化
されるのが好ましく、ｐＨ７，３が最適と考えられる。

薬学的組成物は溶液、ゲル、水性或いは油性懸濁液、エ
マルジョン、クリーム及び粉末の形態であり得る。無菌
等張塩溶液を本発明の組成物の稀釈剤として有利に使用
することができる。

これらの組成物は、損傷箇所に投与されることが重要で
ある。前記説明より本発明の組成物は局所的、皮膚内鞘
内に注射及びシリコーンチューブを通しての遅い潅流に
よシ投与することが可能なことが明らかである。

方法 神経−成長促進物質の影響全試験するための最も簡単な
モデルは組織培養液中に維持された切り出されたヒヨコ
胚神経節である。これらの神経節はナノモル濃度の神経
成長因子（ＮＧＦ’　）に応答することが知られている
。

７〜８日のヒヨコ胚からのを髄神経節（ＤＲＧ）、三叉
神経節及び交感神経節をダルベツコ−のリン酸緩衝塩水
（Ｇｔｂｃｏ）　　中で細断し、各種濃度のトリエタ／
　−ルア　ミ７　（ＴＲＥＥＡ）、ＨＥＰＥＳ及ヒＴＲ
工ｓ緩衝剤の存在下において培養した。各緩衝剤の２５
及び５ｍＭの濃度が神経突起延長の最大応答を刺戟した
。その後、専ら残りの実験のためにＤＲＧを使用した。

６個のＤＲＧ　２各々６０ｍｍの培養皿（Ｆａｌｃｏｎ
３００２）中に入れた。正常の培養条件系列においては
、５ｍｌの完全培地を各面に添加した。この培地は８５
チのダルベツコ−の修正イーグル培地（Ｄｕｌｂｅｃｃ
ｏ’ｓ　Ｍｏｄｉｆｉｅｄ　Ｅａｇｌｅｓ’　Ｍｅｄｉ
ｕｍ）、１０％透析ウシつ児血清（共にＧｉｂｃｏ製）
、３％グルコース（６００■チ最終濃度）、１％グルタ
ミ７　（２００ｍＭ最終濃度）及び１％投ニジリンース
トレプトマイシンミックス（Ｇｌｂｃｏ）を含有した。

３〜４回繰シ返された各組の実験は、処理当り２〜４の
皿よシ構成された。全ての皿は３９℃で３日間インキュ
ベートされた。各日毎の実験について、対照群（未処理
）及び１０　ｍＭの最終濃度で神経成長因子（ＮＧ’Ｆ
）で処理された群を緩衝剤−処理群と並行して実験を行
った。

各緩衝剤は緩衝剤を完全培地中に溶解し、ｐＨ７２〜７
．４に調整することにより１０Ｘ原液として調製した。

各系列において、ＴＲＥＡ、　ＨＥＰＥＳ及びＴＲｌ５
は２．５ｍＭ及び５．０］ＩＩＭの最終濃度で試験した
。

一連の神経節も又、シトシンアラビノシド（ａｒａ　Ｃ
；　Ｃｙｔｏｓａｒ、　Ｕｐｊｏｈｎ）’ｅ完全培地中
に２７マイクロモルの最終濃度で添加することにより実
験を行った。このａｒａ　Ｃ培地中のＤＲＧには各種緩
衝削成いはＮＧＦ’が添加されるか或いは直流電流がか
けられた。

神経突起成長は３．５％グルタルアルデヒド中で固定後
、ｉｎ　ｖｉｔｒｏで３日後培養液中において決定され
た。評点技術はフェントン（Ｆｏｎｔｏｎ　、Ｅ、Ｌ、
。

Ｅｘｐ、　Ｃｅ１ｌ　Ｒｅｓ、　５９：３８３（１９７
０））のものである。この評点系は０〜＋５の範囲にあ
シ、標準ＮＧＦ’培養液中に観察される神経突起成長に
基づくものである。ＮＧＦ　ｉ用いて、殆んどの観察者
はｉｎ　ｖｉｔｒｏにおける３〜６日後の最大応答を認
める。この応答は９日目にょシ変化の□あるものとなる
。しかしながら、我々は実験においてこの後の時点を用
い、これらの実験において我々はカジャール（Ｃａｊａ
ｌ）の銀染色を用いて長期間の効果を求め神経突起成長
の位相差顕微鏡の評点を実証した。

第１の実験は１〜１０ｍＭのＴＲＥＡの濃度の存在下に
おける各種末梢神経節の培養を含むものであった。三叉
神経節、を髄神経節及び交感神経節の全ては２５及び５
ｍＭの濃度において神経突起を作シ出すことによシ応答
することが求められた。

対照三叉神経節に対比して５　ｍＭ　ＴＲＥＡ或いは２
．５ｍＭ　　ＴＲＥＡ中の三叉神経節培養液及び２．５
ｒｎＭ　ＴＲｆｆ１Ａ中で培養された交感神経節は全て
中心に位肯する神経細胞体から延び、下層の非神経細胞
の外及びそれを越えて伸長する長い繊維状の神経突起を
示した。神経突起成長の半定量的評価は完全培地中のを
髄神経節について行われた一連の実験において求められ
た。これらの培養液の評点は対照、＋１応答；　ＮＧＦ
、　＋５応答；　５　ｍ　Ｍ　ＴＲＥＡ。

＋３５応答であった。全系列から得られたデータを表１
にまとめて示す。全ての場合において、効果の有意性は
０．Ｏｌのｐ限界の対照試験金剛いたダンネツ）　（Ｄ
ｕｎｎｅｔｔ）の処理手段の多項目比較（Ｍｕｌｔｉｃ
ｏｍｐａｒｉｓｏｎ　ｏｆ　Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　Ｍｅ
ａｎ日）を用いて決定した。神経突起伸長における有意
的な増大が全ての処理について得られた。

シトシンアラビノシド（ａｒａ　Ｃ）の存在下における
定常的なインキュベーションはこの薬品の不存在下に得
られたものに対比して対照培養液中に神経突起成長を有
意的に増大させた。神経細胞の数はａｒａｃ’ｉ含有す
る培養液中においては顕著に減少したが、神経突起伸長
は対照及びｓ　ｍ　Ｍ　ＴＲＥＡ中に維持された神経節
の両者において高められた。

表　　１ 対照例　　　　１．５３（１６１０，７４−ＮＧＥ’　
１０−８Ｍ　　　４．４２（１，９＋　　　１．０７　
　　　０．００１ＴＲＥＡ２．５ｍＭ　３．０７（２８
）　］、、０３　０．００１５、ＯｍＭ　３．４２（３
２）　１，２１　０．００１Ｈ′ｆ２ＰＦ８２．５ｍＭ
　２．６６（１８）　１，１７　０．００１５．０ｍＭ
　３．１８（２９）　０．８９　０．００１ＴＲＩ８２
．５ｍＭ　２．５５（＋７１０．８６　０．００１５．
０ｍＭ　２．５５（＋７１０．６１　０．００１Ａｒａ
Ｃ２７Ｍ　　３．１０（４５１０，７２０，００１＊　
８５％ダルベツコ−の修正イーグル培地、１０％透析ウ
シつ児血清、３チグルコース、１％グルタミン及び１％
ペニシリンーストレプトマイシンミックスヲ含有する補
給されない培地中で行われた。

多くの最近のデータは何等かの成長及び修復を行う傷つ
いた哨乳動物の中枢神経系の固有の能力があることにつ
いては殆んど問題を残していない。

しかしながら、星状細胞及び結合組織の傷の形成及び進
行性壊死は有効な機能の再生及び再構成に対する深刻な
障害である。組織の修復及び再生を刺戟する治療を開発
する過去における全ての努力はを髄の傷に対する複雑且
つ協調不能な組織病理学的応答を修正することができな
かったために不成功であった。本発明においてはを髄損
傷の組織病理学的に再生可能なモデルが利用され、神経
及びそれらの支持細胞、神経節及び上衣細胞、及び結合
組織要素間の関係のバランスを取シ戻す治療が使用され
るより系統的な手法が採用された。

方法 硬膜を開き、ポリエチレンチューブをを椎及び隣接の柔
組織に一方の末端の開口部がを髄の傷ついた部分に直接
かぶさるように縫い合わせた。このチューブを皮下のト
ンネルを通してその他方の末端が頭蓋骨の×−スに表わ
れるようにした。外部開口部に薬物を注入するための注
射器アダプターを取り付けた。予備実験において、押し
潰された傷害の２日以内に硬膜が開かれると、浮腫は依
然として存在し、を髄の物質のヘルニア様突出及びこの
脆い組織に対する損傷が生じた。従って、我々はを髄を
押し潰した後２日間待機し、その時点において動物を再
手術し、硬膜を開き、チューブを埋め込み、治療を開始
する方法を採用した。

薬物は傷の箇所を十分に満たすものであることが判明し
た０、　５　ｍｌの容量で毎日４回投与した。全ての実
験は二重ブラインドに基づき行われ、各３匹の動物をそ
れぞれ１０ミリモルのＴＲＥＡ、６マイクロモルのシト
シ／アラビノシト？全含有する１０ミリモルのＴＲＥＡ
及び緩衝化稀釈塩水液で処理した。

各動物の治療は１４日間続けられ、その後動物を殺し、
組織学的切片を調製した。これらの組織学的標本はこの
分野の経験のある３人の科学者により独立に評価された
。

結果 この研究の結果は顕著に首尾一貫したものであつた。い
ずれの場合においても、薬物治療された動物は稀釈液で
治療された対照動物よりも顕著に大きな神経繊維による
病巣の侵入全示した。事実、塩水治療対照標本と未治療
動物間には明らかな相違がなかった。薬物治療動物にお
いては神経繊維が病巣箇所に最早それらが縦方向に配向
しておらずむしろ全ての方向にまちまちに成長する程に
多く成長していた。繊維はしばしば起伏を有し、且つ異
常に拡張しており、しばしば３〜６本の軸索を含む小さ
な束として配列されていた。これらの軸索は内径が極め
て小さく、それらの殆んどは１〜４ミクロンの直径であ
った。それらは光学顕微鏡の分解能には極めて近接して
いるので、電子顕微鏡によっては相当に大きな侵入が見
られたものと思われる。スライドに符号を付け、無作為
化した際にも標本を薬物治療した動物から稀釈液治療し
た動物を区別するのに何等の困難も見られなかった。

最も豊富な神経成長はシトシンアラビノシド及びＴＲＫ
Ａで治療された動物に生じた。ＴＲＥＡ或いはシトシン
アラビノシトのいずれかで治療された動物も又対照と比
較して大量の神経成長を示した。

実施例３〜８は、本発明に使用する薬学的調剤の調製を
詳説するものである。

実施例３： 次の様にして組成物全調製した： １ＯＯ１ｎｌ無菌等張塩溶液 ８５マイクロモルシトシンアラビノシド神経再生は傷の
箇所を前記組成物に浸すことにより促進された。

実施例４： 次の成分全有する組成物全調製した： １００ｍ＃無菌等張塩溶液 ｏ、　ｔ　ｍグヒドロキシ尿素 前記組成物は傷の箇所に直接投与された場合に損傷した
神経組織の再生を促進した。

実施例５： 下記成分を有する薬学的組成物を調製した：１００ｍ／
！無菌等張塩溶液 ０、２　ｍＬｉ５−フルオロウラシル この組成物を傷の箇所を浸すに十分な量を損傷神経組織
に投与した際に神経再生が容易になった。

実施例６： 薬学的組成物を実施例３〜５の組成物の各々に０．３ミ
リモルのＨＥＰＥＳ　−ｉ添加することによりｇ製され
た。

各組成物の神経再生活性はＨＥＰＥＳの添加のない各組
成物の活性よシも優れたものであった。

実施例７： 実施例３〜５の組成物の各々に０．３ミリモルのＴＲＥ
Ａを添加することにより、薬学的組成物全調製した。

これらの組成物の各々の神経組織再生を容易にする能力
はＴＲＥＥＡのない各組成物の活性よりも優れたもので
あった。

実施例８： 薬学的組成物を下記の如く調製した： Ｌｏｏｍ／無菌等張塩溶液 ０３ミリモルのＴＲ］ｉＥＡ この組成物を生きた哨乳動物の損傷した神経組織に投与
すると、神経組織再生を促進した。

実施例９： 実施例３〜７の組成物の各々に０．１　ｍｌの３％過酸
化水素溶液を添加することにより薬学的組成物を調製し
た。

これらの組成物の各々を生きた哨乳動物の損傷した神経
に投与すると神経再生を促進した。

前記発明を特別の実施態様により例示したが本発明によ
り各種変更及び追加が包含される。従って、本発明の範
囲は特許請求の範囲及びその合理的な均等な範囲によっ
てのみ測られるべきである。

（外５名）

Claims (38)

【特許請求の範囲】
1. （１）損傷した神経組織の再生を促進する方法において
   、損傷箇所に有効量の抗有糸分裂剤を投与することを特
   徴とする方法。
2. （２）抗有糸分裂剤の量が神経膠細胞の成長が神経組織
   の成長を防止しない程度に神経膠細胞の成長速度を減少
   させるに十分である特許請求の範囲第１項記載の方法。
3. （３）該抗有糸分裂剤が約３〜約２０マイクロモルの濃
   度で投与される特許請求の範囲第１項記載の方法。
4. （４）抗有糸分裂剤がシトシンアラビノシドである特許
   請求の範囲第１項記載の方法。
5. （５）抗有糸分裂剤が５−フルオロウラシルである特許
   請求の範囲第１項記載の方法。
6. （６）抗有糸分裂剤がヒドロキシ尿素である特許請求の
   範囲第１項記載の方法。
7. （７）損傷箇所におけるｐＨ値を増加させる工程を更に
   含んでなる特許請求の範囲第１項記載の方法。
8. （８）損傷箇所のｐＨ値が神経成長を高める量のｐＨ７
   〜８を有する緩衝剤を投与することにより増加される特
   許請求の範囲第７項記載の方法。
9. （９）緩衝剤が約０．５〜約２０ミリモルの緩衝剤濃度
   を有する組成物中において投与される特許請求の範囲第
   ８項記載の方法。
10. （１０）緩衝剤が約１×１０＾−＾５Ｍ〜１×１０＾−
    ＾３Ｍの非プロトン緩衝剤成分の濃度を有する組成物中
    において投与される特許請求の範囲第８項記載の方法。
11. （１１）緩衝剤がＡＣＤＳ、ＡＤＡ、ＡＥＰＤ、ＡＭＰ
    、ＡＭＰＤ、ＢＥＳ、ビシン（ＢＩＣＩＮＥ）、ビス−
    トリス、ビス−トリスプロパン、ＤＥＡ、ＥＰＰＳ、Ｍ
    ＥＡ、ＭＥＳ、ＭＯＰＳ、ＰＩＰＥＳ、ＴＡＰＳ、ＴＥ
    Ｓ、トリジン、或いはトリスである特許請求の範囲第８
    項記載の方法。
12. （１２）緩衝剤がＴＲＥＡである特許請求の範囲第８項
    記載の方法。
13. （１３）緩衝剤がＨＥＰＥＳである特許請求の範囲第８
    項記載の方法。
14. （１４）損傷箇所に酸素供給化合物を投与する工程を更
    に含んでなる特許請求の範囲第１項記載の方法。
15. （１５）酸素供給化合物がＨ＿２Ｏ＿２である特許請求
    の範囲第１４項記載の方法。
16. （１６）損傷神経組織の再生を促進する方法において、
    損傷箇所のｐＨ値を約７〜８に増加させることを特徴と
    する方法。
17. （１７）ｐＨ値が損傷箇所に緩衝剤を投与することによ
    り増加される特許請求の範囲第１６項記載の方法。
18. （１８）緩衝剤が約１×１０＾−＾５Ｍ〜１×１０＾−
    ＾３Ｍの非プロトン緩衝剤成分の濃度を有する組成物中
    において投与される特許請求の範囲第１７項記載の方法
    。
19. （１９）緩衝剤がＡＣＥＳ、ＡＤＡ、ＡＥＰＤ、ＡＭＰ
    、ＡＭＰＤ、ＢＥＳ、ビシン、ビス−トリス、ビス−ト
    リスプロパン、ＤＥＡ、ＥＰＰＳ、ＭＥＡ、ＭＥＳ、Ｍ
    ＯＰＳ、ＰＩＰＥＳ、ＴＡＰＳ、ＴＥＳ、トリジン、或
    いはトリスである特許請求の範囲第１７項記載の方法。
20. （２０）緩衝剤がＴＲＥＡである特許請求の範囲第１７
    項記載の方法。
21. （２１）緩衝剤がＨＥＰＥＳである特許請求の範囲第１
    ７項記載の方法。
22. （２２）緩衝剤が約０．５〜約２０ミリモルの緩衝濃度
    を有する組織中において投与される特許請求の範囲第１
    ７項記載の方法。
23. （２３）損傷箇所に酸素供給化合物を投与する工程を更
    に含んでなる特許請求の範囲第１７項記載の方法。
24. （２４）酸素供給化合物がＨ＿２Ｏ＿２である特許請求
    の範囲第２３項記載の方法。
25. （２５）哺乳動物における損傷神経組織の再生を促進す
    る方法において、損傷箇所における神経膠組織の成長を
    遅らせる工程、及び損傷箇所におけるｐＨ値を増加させ
    る工程を含むことを特徴とする方法。
26. （２６）損傷箇所に増加した酸素を供給する工程を更に
    含んでなる特許請求の範囲第２５項記載の方法。
27. （２７）神経再生を促進するための薬学的組成物におい
    て、薬理学的に許容可能な担体、有効量の抗有糸分裂剤
    及び該組成物に７〜８のｐＨ値を与える緩衝剤を含んで
    なることを特徴とする組成物。
28. （２８）該抗有糸分裂剤の濃度が約３〜約２０マイクロ
    モルの抗有糸分裂剤である特許請求の範囲第２７項記載
    の組成物。
29. （２９）該緩衝剤の濃度が約０．５〜約２０ミリモルで
    ある特許請求の範囲第２７項記載の組成物。
30. （３０）該緩衝剤の非プロトン成分の濃度が約１×１０
    ＾−＾５Ｍ〜１×１０＾−＾３Ｍである特許請求の範囲
    第２７項記載の組成物。
31. （３１）該緩衝剤の非プロトン成分の濃度が約２〜８×
    １０＾−＾４Ｍである特許請求の範囲第２７項記載の組
    成物。
32. （３２）該抗有糸分裂剤がシトシンアラビノシドである
    特許請求の範囲第２７項記載の組成物。
33. （３３）該抗有糸分裂剤が５−フルオロウラシルである
    特許請求の範囲第２７項記載の組成物。
34. （３４）該抗有糸分裂剤がヒドロキシ尿素である特許請
    求の範囲第２７項記載の組成物。
35. （３５）該緩衝剤がＡＣＥＳ、ＡＤＡ、ＡＥＰＤ、ＡＭ
    Ｐ、ＡＭＰＤ、ＢＥＳ、ビシン、ビス−トリス、ビス−
    トリスプロパン、ＤＥＡ、ＥＰＰＳ、ＭＥＡＮＭＥＳ、
    ＭＯＰＳ、ＰＩＰＥＳ、ＴＡＰＳ、ＴＥＳ、トリジン、
    或いはトリスである特許請求の範囲第２７項記載の組成
    物。
36. （３６）緩衝剤がＴＲＥＡである特許請求の範囲第２７
    項記載の組成物。
37. （３７）緩衝剤がＨＥＰＥＳである特許請求の範囲第２
    ７項記載の組成物。
38. （３８）更に約０．００２％〜約０．００５％のＨ＿２
    Ｏ＿２を含んでなる特許請求の範囲第２７項記載の組成
    物。