JPS6146781B2 - - Google Patents
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- JPS6146781B2 JPS6146781B2 JP55025899A JP2589980A JPS6146781B2 JP S6146781 B2 JPS6146781 B2 JP S6146781B2 JP 55025899 A JP55025899 A JP 55025899A JP 2589980 A JP2589980 A JP 2589980A JP S6146781 B2 JPS6146781 B2 JP S6146781B2
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44704—Details; Accessories
- G01N27/44717—Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones
- G01N27/4473—Arrangements for investigating the separated zones, e.g. localising zones by electric means
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- Health & Medical Sciences (AREA)
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- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
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- Pathology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】
この発明は、電気泳動分析装置、特に細管式等
速電気泳動分析装置における分析データ解析方法
に関するものである。
速電気泳動分析装置における分析データ解析方法
に関するものである。
細管式等速電気泳動分析法は周知のごとく、細
管（キヤピラリチユーブ）の端に試料のどの成分
イオンよりも易動度の大きいイオン（リーデイン
グイオン）を含む電解液（リーデイング液）と、
試料のどの成分イオンよりも易動度の小さいイオ
ン（ターミナルイオン）を含む電解液（ターミナ
ル液）とで境界面をつくり、この境界面にたとえ
ば易動度の異なる成分を含む混合試料を導入し、
泳動を開始すると、各試料成分のイオンは易動度
の大きさの順に配列するように分離が進行し、完
全に分離した状態では，分離されたイオンは単一
成分イオンのみを含んだゾーンとなり、互いに明
確な境界面を保持しながら各ゾーン（バンド）
は、イオン量で決まる一定の巾をもつて等速度で
移動するようになる。この場合、各ゾーンにはそ
れぞれ違つた電位勾配が形成されているのでこの
電位勾配を検出して各ゾーンの境界面を知り、分
離された単一成分イオン量を知り、よつて定性、
定量分析が可能となる。
管（キヤピラリチユーブ）の端に試料のどの成分
イオンよりも易動度の大きいイオン（リーデイン
グイオン）を含む電解液（リーデイング液）と、
試料のどの成分イオンよりも易動度の小さいイオ
ン（ターミナルイオン）を含む電解液（ターミナ
ル液）とで境界面をつくり、この境界面にたとえ
ば易動度の異なる成分を含む混合試料を導入し、
泳動を開始すると、各試料成分のイオンは易動度
の大きさの順に配列するように分離が進行し、完
全に分離した状態では，分離されたイオンは単一
成分イオンのみを含んだゾーンとなり、互いに明
確な境界面を保持しながら各ゾーン（バンド）
は、イオン量で決まる一定の巾をもつて等速度で
移動するようになる。この場合、各ゾーンにはそ
れぞれ違つた電位勾配が形成されているのでこの
電位勾配を検出して各ゾーンの境界面を知り、分
離された単一成分イオン量を知り、よつて定性、
定量分析が可能となる。
このように電位勾配値から定性、定量を行なう
には物質の電位勾配値が明確な階段信号で示され
るエレクトロフエログラムを必要とした。しかし
ながら試料によつては分子量分布などを有して明
確な階段信号を与えない場合が存在し、データの
解析に時間を要することが多く、ために有用な分
析手法でありながらこの分析装置の普及しない原
因がそこに存在していた。
には物質の電位勾配値が明確な階段信号で示され
るエレクトロフエログラムを必要とした。しかし
ながら試料によつては分子量分布などを有して明
確な階段信号を与えない場合が存在し、データの
解析に時間を要することが多く、ために有用な分
析手法でありながらこの分析装置の普及しない原
因がそこに存在していた。
この発明は、上記にかんがみなされたもので、
各試料成分の分離界面にともなう検出信号を等間
隔で分割（分画）するとともにこの各分割（分
画）点ごとにその直前の分割（分画）点からの経
過時間を求め各分割点に対する時間関係を表示す
ることにより各試料成分の定性、定量分析を行な
うようにした電気泳動分析データ解析方法であ
り、以下図によつて説明してゆく。
各試料成分の分離界面にともなう検出信号を等間
隔で分割（分画）するとともにこの各分割（分
画）点ごとにその直前の分割（分画）点からの経
過時間を求め各分割点に対する時間関係を表示す
ることにより各試料成分の定性、定量分析を行な
うようにした電気泳動分析データ解析方法であ
り、以下図によつて説明してゆく。
第１図は細管式等速電気泳動分析装置の基本原
理を示すもので、図において１はターミナル液電
極槽、２はリーデイング液電極槽でそれぞれの槽
中のターミナル液３リーデイング液４には電源５
に接続された電極６，７が挿入されている。
理を示すもので、図において１はターミナル液電
極槽、２はリーデイング液電極槽でそれぞれの槽
中のターミナル液３リーデイング液４には電源５
に接続された電極６，７が挿入されている。
８は両電極槽間に設けられている細管式泳動管
（キヤピラリチユーブ）で９の試料導入部からリ
ーデイング液、ターミナル液の境界面に導入され
た試料を泳動させるものである。
（キヤピラリチユーブ）で９の試料導入部からリ
ーデイング液、ターミナル液の境界面に導入され
た試料を泳動させるものである。
この泳動されて各ゾーンに分離された試料成分
は検出器１０でその分離境界面が検出され、この
分離境界面にともなう検出信号は演算部１１で演
算されて例えばエレクトロフエログラムとして表
示される。なお１２は恒温槽である。
は検出器１０でその分離境界面が検出され、この
分離境界面にともなう検出信号は演算部１１で演
算されて例えばエレクトロフエログラムとして表
示される。なお１２は恒温槽である。
第２図は上記のエレクトロフエログラムの一例
で縦軸に電位勾配値、横軸に距離（時間）をとつ
たものである。
で縦軸に電位勾配値、横軸に距離（時間）をとつ
たものである。
この図においてＰSiは試料の電位勾配値、ＰL
はリーデイングイオンの電位勾配値、ＰTはター
ミナルイオンの電位勾配値であり、一般に下式に
定義される定性指標PU値（ポテンシヤルユニツ
ト値）の比較により同定される。
はリーデイングイオンの電位勾配値、ＰTはター
ミナルイオンの電位勾配値であり、一般に下式に
定義される定性指標PU値（ポテンシヤルユニツ
ト値）の比較により同定される。
PU値＝ＰＳｉ−ＰＬ／ＰＴ−ＰＬ
また定量は各ゾーンの長さが導入されたイオン
量に比例するのでl1，l2……等の比較により行な
われる。
量に比例するのでl1，l2……等の比較により行な
われる。
しかしながら、第２図に示したごときエレクト
ロフエログラムのように各階段信号が明確であれ
ば上記のような手法により定性、定量が可能であ
るが、試料によつては分子量分布などを有して明
確な階段信号を与えない物質が存在しており、こ
のような物質は電気泳動分析の対象になり得なか
つた。この発明はこのような物質の分析手法に関
するもので、以下図面について説明してゆく。
ロフエログラムのように各階段信号が明確であれ
ば上記のような手法により定性、定量が可能であ
るが、試料によつては分子量分布などを有して明
確な階段信号を与えない物質が存在しており、こ
のような物質は電気泳動分析の対象になり得なか
つた。この発明はこのような物質の分析手法に関
するもので、以下図面について説明してゆく。
第３図は上記で説明した階段状信号が明確でな
いエレクトロフエログラムの一例である。
いエレクトロフエログラムの一例である。
この発明においてはリーデイングイオンとター
ミナルイオンの電位勾配値の差（ＰT−ＰL）を等
間隔に分割するとともに各分割点（Ｖo-1，Ｖo，
Ｖo+1……）ごとにその分割点の直前の分割点
（Ｖo-2，Ｖo-1，Ｖo……）からの経過時間（距
離）を各々求め（Ｔo-1−Ｔo-2，Ｔo−Ｔo-1，Ｔo
＋１−Ｔo……）ついで第４図のごとく等間隔の各
分割点（V1，V2……Ｖo-1，Ｖo，Ｖo+1……）上
に上記に求めた各点の経過時間（距離）をプロツ
トしてグラフを作成すると例えばこの図のように
エレクトロフエログラム（第３図）で示されなか
つた特徴が明確に示されるのである。
ミナルイオンの電位勾配値の差（ＰT−ＰL）を等
間隔に分割するとともに各分割点（Ｖo-1，Ｖo，
Ｖo+1……）ごとにその分割点の直前の分割点
（Ｖo-2，Ｖo-1，Ｖo……）からの経過時間（距
離）を各々求め（Ｔo-1−Ｔo-2，Ｔo−Ｔo-1，Ｔo
＋１−Ｔo……）ついで第４図のごとく等間隔の各
分割点（V1，V2……Ｖo-1，Ｖo，Ｖo+1……）上
に上記に求めた各点の経過時間（距離）をプロツ
トしてグラフを作成すると例えばこの図のように
エレクトロフエログラム（第３図）で示されなか
つた特徴が明確に示されるのである。
つぎに第５図は置換度1.2のカルボキシメチル
セルロース（CMC）のエレクトロフエログラム
でありこの実施例から本発明の有効性を説明して
ゆく。このカルボキシメチルセルロース
（CMC）の電気泳動分析条件は次のとおりであ
る。
セルロース（CMC）のエレクトロフエログラム
でありこの実施例から本発明の有効性を説明して
ゆく。このカルボキシメチルセルロース
（CMC）の電気泳動分析条件は次のとおりであ
る。
・リーデイング液；0.01モル／リツトル（ビス
チジン１塩酸＋ビスチジン）＋0.01％トリ
トン×−100 ・ターミナル液；0.01モル／リツトルモアフオ
リノエタンスルホン酸＋トリスハイドロキ
シメチルアミノメタン、PH7.0 ・泳動細管；20cm×0.5mmφ ・泳動電流；50μＡ ・チヤートスピード；40mm／min ・試料の処理；0.01モル／リツトル塩酸＋２ア
ミノ・２メチル−1.3プロパンジオールで
10mgの試料（CMC）を溶解して１mlと
し，そのうちの２μを泳動試料として使
用 以上の条件下で得られたエレクトロフエログラ
ムのリーデイングイオンの電位勾配値（ＰL）と
ターミナルイオンの電位勾配値（ＰT）間を図の
ように20等分し、上記第３，４図に説明した手法
を用いて各分割点ごとの距離（時間）をプロツト
してグラフを作成したのが第６図である。
チジン１塩酸＋ビスチジン）＋0.01％トリ
トン×−100 ・ターミナル液；0.01モル／リツトルモアフオ
リノエタンスルホン酸＋トリスハイドロキ
シメチルアミノメタン、PH7.0 ・泳動細管；20cm×0.5mmφ ・泳動電流；50μＡ ・チヤートスピード；40mm／min ・試料の処理；0.01モル／リツトル塩酸＋２ア
ミノ・２メチル−1.3プロパンジオールで
10mgの試料（CMC）を溶解して１mlと
し，そのうちの２μを泳動試料として使
用 以上の条件下で得られたエレクトロフエログラ
ムのリーデイングイオンの電位勾配値（ＰL）と
ターミナルイオンの電位勾配値（ＰT）間を図の
ように20等分し、上記第３，４図に説明した手法
を用いて各分割点ごとの距離（時間）をプロツト
してグラフを作成したのが第６図である。
なお、第６図にはカルボキシメチルセルロース
（CMC）の置換度1.2のもの以外に置換度（DS）
0.4，0.7，0.9のものも示した。
（CMC）の置換度1.2のもの以外に置換度（DS）
0.4，0.7，0.9のものも示した。
この第６図から明らかなように置換度（DS）
1.2のCMCも含めて、分割点６〜９にかけて特長
的なピークが出現し、置換度（DS）0.4のCMCに
ついては分割点13近辺にもピークが出現している
ことが判明し、置換度の相違によつてピークの出
現度合に大きな差があることが判明した。
1.2のCMCも含めて、分割点６〜９にかけて特長
的なピークが出現し、置換度（DS）0.4のCMCに
ついては分割点13近辺にもピークが出現している
ことが判明し、置換度の相違によつてピークの出
現度合に大きな差があることが判明した。
この実施例から明らかなようにエレクトロフエ
ログラム上では従来解析困難であつた物質であつ
ても本発明の解析手法によつて、その物質の特長
が認識できるようになるのである。
ログラム上では従来解析困難であつた物質であつ
ても本発明の解析手法によつて、その物質の特長
が認識できるようになるのである。
なお、以上の説明では理解しやすいようにエレ
クトロフエログラムを利用しての解析法について
説明したが、これに限らず記憶部を有する演算装
置（計算機）を利用することにより簡単にこの発
明を達成することが可能である。
クトロフエログラムを利用しての解析法について
説明したが、これに限らず記憶部を有する演算装
置（計算機）を利用することにより簡単にこの発
明を達成することが可能である。
すなわち検出器からのエレクトロフエログラム
用の分離界面にともなう検出信号を全て記憶して
おき、ついでこの記憶内容を読み出し、必要な指
命のもとに演算させることにより容易に第６図の
ごときグラフをデイスプレイ上に表示することが
できるのである。
用の分離界面にともなう検出信号を全て記憶して
おき、ついでこの記憶内容を読み出し、必要な指
命のもとに演算させることにより容易に第６図の
ごときグラフをデイスプレイ上に表示することが
できるのである。
また、上記の実施例においてはリーデイングイ
オンの電位勾配値とターミナルイオンの電位勾配
値との差を等間隔で分割するとしたが、このよう
に両イオンの電位勾配値の差を全て分割すること
なく一部の区域のみを分割することにより、その
区域のみを選択的に取り出し、上記と同じような
手法でその区域の特長を見つけ出すようにするこ
とも可能である。
オンの電位勾配値とターミナルイオンの電位勾配
値との差を等間隔で分割するとしたが、このよう
に両イオンの電位勾配値の差を全て分割すること
なく一部の区域のみを分割することにより、その
区域のみを選択的に取り出し、上記と同じような
手法でその区域の特長を見つけ出すようにするこ
とも可能である。
さらに上記実施例においては分離界面の検出方
式として電位勾配検出法で説明したがこれ以外の
検出方式、例えばジユール熱の発生を利用する熱
電対検出方式等も利用できることは明らかであ
る。
式として電位勾配検出法で説明したがこれ以外の
検出方式、例えばジユール熱の発生を利用する熱
電対検出方式等も利用できることは明らかであ
る。
以上明らかなごとくこの発明を利用することに
よつて、従来等速電気泳動の分析の対象にならな
かつたような分子量分布などを有する試料物質の
分析ができるようになり、この分析手法の応用が
ますます広がることとなるのである。
よつて、従来等速電気泳動の分析の対象にならな
かつたような分子量分布などを有する試料物質の
分析ができるようになり、この分析手法の応用が
ますます広がることとなるのである。
第１図は、細管式等速電気泳動分析装置の基本
原理を説明する図、第２図はエレクトロフエログ
ラムの一例を示す図、第３図は階段状信号が明確
でないエレクトロフエログラムの一例を示す図、
第４図は第３図と合わせてこの発明の手法を説明
する図、第５図はカルボキシメチルセルロース
（CMC）のエレクトロフエログラムで第６図は、
この図にこの発明手法を実施した場合に得られた
図である。 １：ターミナル液電極槽、２：リーデイング液
電極槽、３：ターミナル液、４：リーデイング
液、５：電源、６，７：電極、８：キヤピラリー
チユーブ、９：試料導入部、１０：検出器、１
１：演算部。
原理を説明する図、第２図はエレクトロフエログ
ラムの一例を示す図、第３図は階段状信号が明確
でないエレクトロフエログラムの一例を示す図、
第４図は第３図と合わせてこの発明の手法を説明
する図、第５図はカルボキシメチルセルロース
（CMC）のエレクトロフエログラムで第６図は、
この図にこの発明手法を実施した場合に得られた
図である。 １：ターミナル液電極槽、２：リーデイング液
電極槽、３：ターミナル液、４：リーデイング
液、５：電源、６，７：電極、８：キヤピラリー
チユーブ、９：試料導入部、１０：検出器、１
１：演算部。
Claims (1)
- １ リーデイング液とターミナル液との境界面に
導入した試料を泳動させ各試料成分をその易動度
の相違により分離するとともに、この各試料成分
の分離界面を検出し表示するものにおいて、各試
料成分の分離界面にともなう検出信号を等間隔で
分割するとともにこの各分割点ごとにその直前の
分割点からの経過時間を求め、各分割点に対する
時間関係を表示することにより各試料成分の定
性、定量分析を行なうようにしたことを特徴とす
る電気泳動分析データ解析方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2589980A JPS56122944A (en) | 1980-02-29 | 1980-02-29 | Analyzing method for analytical data of electrophoresis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2589980A JPS56122944A (en) | 1980-02-29 | 1980-02-29 | Analyzing method for analytical data of electrophoresis |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS56122944A JPS56122944A (en) | 1981-09-26 |
| JPS6146781B2 true JPS6146781B2 (ja) | 1986-10-16 |
Family
ID=12178630
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2589980A Granted JPS56122944A (en) | 1980-02-29 | 1980-02-29 | Analyzing method for analytical data of electrophoresis |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS56122944A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0548284U (ja) * | 1991-12-02 | 1993-06-25 | 富士通株式会社 | 電源接続構造 |
| KR20200089630A (ko) * | 2019-01-17 | 2020-07-27 | 주식회사 엘지화학 | 폴리에틸렌 및 이의 염소화 폴리에틸렌 |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2541239B1 (en) * | 2003-09-05 | 2019-05-01 | Caliper Life Sciences, Inc. | Isotachophoresis method |
| KR20070094669A (ko) * | 2003-12-23 | 2007-09-20 | 칼리퍼 라이프 사이언시즈, 인크. | 분석물 주입 시스템 |
-
1980
- 1980-02-29 JP JP2589980A patent/JPS56122944A/ja active Granted
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH0548284U (ja) * | 1991-12-02 | 1993-06-25 | 富士通株式会社 | 電源接続構造 |
| KR20200089630A (ko) * | 2019-01-17 | 2020-07-27 | 주식회사 엘지화학 | 폴리에틸렌 및 이의 염소화 폴리에틸렌 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS56122944A (en) | 1981-09-26 |
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