JPS61500613A - ２，６−ジオキソピペリジン誘導体、その製造法およびこれを含む医薬組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ２．６−シオキソビペリジン誘導体、その製造法およびこれを含む医薬組成物 本発明はグルタルイミドとしても知られる２、６−シオキソビベリジン誘導体、 その製造法およびこれを含む医薬組成物に関する。

２、先行技術の開示 米国特許第２，６７３，２０５号（チル）の特許請求の範囲は式： （式中、Ｒ１は炭素数１〜６の脂肪族炭化水素基、Ａｒはフェニル基またはピリ ジル基、Ｒ″は水素またはアルキル、アシル、フェニル、ベンジルなどの置換基 を表す。） で示される３、３−ジ置換グルタルイミド類を対象としている。そこでは１２種 の化合物が合成され、その特表昭６１−５００６１．３　（２） うち１１種は３−フェニル誘導体（式（１）のＡｒがフェニル）と式： （式中、Ｅｔ＝エチル） で示される３−エチル−３−（３−ピリジル）グルタルイミドであった。米国特 許第２，６７３，２０５号で請求されている一連の化合物は抗けいれん効果を有 すると述べられている。しかしながら、好ましい化合物である３−エチル−３− フェニルグルタルイミドはその後鎮静催眠剤グルテチミドとして上市された。続 いて米国特許第２．８４８，４５５号（チル）は抗けいれん剤として３−メチル −３−（４−アミノフェニル）グルタルイミドおよび３−エチル−３−（４−ア ミノフェニル）グルタルイミドを請求している。この３−エチル化合物はアミノ グルテチミドとして知られている。ブイ・カレリ（Ｖ　、　ＣａｒｅＨｉ）、ア ナリ・デ・キミカ（ローマ）ｌ）には「ツタ（Ｎｏｔａ）Ｊ３−ｚチル−３−（ ２−ピリジル）グルタルイミドが鎮静催眠効果を有する旨を開示している。米国 特許第３，０５７，８６７号は鎮静および抗けいれん作用を有する多数のＮ−ア ミノグルタルイミド類を請求している。

本発明は全く異質の治療分野、すなわち抗ガン治療、とくにエストロゲン依存腫 ・瘍の治療に関する。かかる腫瘍はごく普通には哺乳類雌の胸部組織に生成され る。

最近の約５年以内にアミノグルテチミドは閉経期後の患者における進行した胸部 ガンの治療に真剣に注目されてきた。アイ・イー・スミス（Ｉ　、　Ｅ　、　Ｓ 　ｍ１ｔｈ）ら、ブリティシュ・メゾカル・ジャーナル（Ｂ　ｒｉ’ｔ’ｉｓｈ 　Ｍｅｄ−ｉｃａｌ　Ｊｏｕｒｎａ＋）２８３．１４３２〜１４３４（１９８１ ）による最近の報告によると、タモキシフェンに対するその優越性が記載されて いる。これに関連してアミノグルテチミドの成功における重要な因子は末梢組織 における酵素アロターゼの作用を生体内で阻害する能力である。この酵素はアン ドロゲンをエストロゲンに変換するために必要である。それ故にアミノグルテチ ミドはエストロゲンへの代謝経路を破壊する。しかしながら、アミノグルテチミ ドは不幸にしてコレステロールからコルチコステロイドへの代謝系変換に必要な 酵素デスモラーゼをも阻害する。身体がコルチコステロイドを必要とするので、 アミノグルテチミドによる治療をコーチシン置換療法で補足する必要がある。さ らにコルチコステロイドの欠乏は副腎皮質刺激ホルモン（ＡＣＴＨ）の反射増量 をもたらすが、ＡＣＴＨは酵素デスモラーゼによるコレステロールからプレグネ ノロンへの変倍を刺激し、ひいてはエストロゲン先駆体を生成させる。

発明の要旨 広範な実験によって、グルタルイミド類はアロマターゼを阻害するが、デスモラ ーゼは阻害しないことを見出した。その上、試験の結果では、副作用としてのそ の鎮静抗けいれん作用（Ｓｅｄａｔｉｖｅｃａｌ　ａｎｔｉ−ｃｏｎ−ｖａｌｓ ａｎｔ）はアミノグルテチミドよりも低いことが明らかになった。この化合物は 哺乳類の胸部ガンの治療に効果的に使用できることが見出された。この化合物は ３−エチル−３−（４−ピリジル）グルタルイミドである。またピリジン環の窒 素原子に対してオルト位に置換基を有する、若干の誘導体もアロマターゼを阻害 するが、デスモラーゼを全く阻害しないか僅かに阻害する。これらの化合物は新 規物質であると考えられる。

すなわち、本発明は一般式： （式中、Ｒは水素原子または炭素数ｌ〜４のアルキル基（プロピルおよびブチル の場合、直鎖または分枝状であってもよい）を表す。） で示されるこれらの化合物およびその酸付加塩そのものおよび哺乳類におけるエ ストロゲン依存性腫瘍の治療における用途のためのものを提供する。

式（３）の化合物は光学活性である。本発明は各光学異体およびその混合物、と くにラセミ体としての化合物を対象とする。現異性体〔アミノグルテチミドの現 異性体、グレイブス（Ｇ　ｒａｖｅｓ）およびサルハニック（Ｓ　ａｌｈａｎｉ ｃｋ）、エンドクリノロジー（Ｅ　ｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ）。

１０５．５２（１９７９）参照〕は一層大きなアロマターゼ阻害作用を示すこと が予想される。

本発明は３−エチル−３−ピリジルグルタルイミド類の上記一般的記載に関する 選択の一つと考えてもよい。デスモラーゼおよびアロマターゼ活性の試験の結特 表昭６１−５００６１３　（３） 果ｇ４上ると、ピリジル化合物の３種の異性体の、うちピリジン環の４位に環窒 素を有する異性体のみがデスモラーゼに対する作用を示さない１アロマターゼ阻 害剤であることが明らかである。ビリ・ジン環の２位または３位に環窒素を有す る異性体はアロマターゼおよびデスモラーゼ両方に対して無効である。

さらに、試験の対象となった多くの他のグルタルイミド類は所望の性質、すなわ ちデスモラーゼに有意義な効果を示さずにアロマターゼに対する阻害作用を示さ ない。これら諸性質は次のように要約される（＋十＋＝強い阻害作用；＋＝弱い 阻害作用；Ｏ＝有意義な効果なし）ニー デスモラーゼ　アロマターゼ 阻害作用　阻害作用 アミノグルテチミド、即ち ３−エチル−３−（４−アミ　＋＋＋　＋＋＋ノフェニル）−グルタミド Ｎ−アミノグルテチミド 本発明はまた治療上有効量の式（３）の化合物またはその酸付加塩ならびに製薬 上許容できる担体または希釈剤を含有する医薬組成物を提供する。

３−エチル−３−（４−ピリジル）グルタルイミドは式： （式中、Ｅｔ＝エチル、ＹおよびＺはそれぞれ独立にカルボキシ基または閉環反 応可能なその誘導基あるいは上記カルボキシ基もしくは誘導基の先駆基、Ｙおよ びＺの少なくとも一方はアミド基またはその先駆基を表す。） で示される化合物を、アミド基と上記カルボキシ基もしくはその誘導基（アミド 基であっても、アミド基でなくてもよい）との間で閉環反応を生起させて、ピペ リジン−２，６−ジオン環を形成させるのに有効な条件下に反応させることを特 徴とする方法で得られる。

式（３）の低級アルキル誘導体は（ａ）ピリジン環のＮ−オキシド化、次いで（ ｂ）遊離ラジカル生成条件下にＮ−オキシド体に適当なアルカン遊離ラジカル生 成可能な化合物を反応させたのち、Ｎ−オキシド基を還元して得られる。

好ましい態様の開示 ３−エチル−３−（４−ピリジル）グルタルイミドの合成および上記式（４）に 関して、ＹおよびＺの一方がアミド基またはシアノ（ＣＮ）基であれば好都合で ある。

シアノ基は強鉱酸の作用によりアミド基に変換できるので、アミド基の先駆基で あり、これに必要な条件は一般に強鉱酸を加えたのち、好ましくは加熱すればよ い、ＹおよびＺの他方もまたアミドまたはシアノであり、その場合もちろんアミ ドの加水分解のための条件であればよい。ＹおよびＺの他方がカルボキシ基また はアミド以外のその誘導基、例えばエステル、好ましくはメチルエステルもしく はエチルエステルである場合、閉環反応を生起させるため一般に加熱が必要であ る。例えば、酸クロリド、アジドなどのその他の反応性基も適当な条件下で使用 できる。多数の同様な閉環反応は、例えばイー・タグマン（Ｅ　、　Ｔ　ａｇｍ ａｎｎ）ら、へルペチカ・キミカ・アクタ（Ｈｅｌｖ、　Ｃｈｉｎ、　Ａｃｔａ ）３５．１５４１（１９５２）、ケイ・ホフマン（Ｋ。

Ｈｏｆｆｍａｎｎ）ら、同４６．３８７（１９５７）、米国特許第２．６７３， ２０５号および同第２．８４８．４５５号、ニス・クコルジャ（Ｓ　、Ｋ　ｕｋ ｏｌｊａ）ら、クロアチヵ・キミカ・アクタ（Ｃｒｏａｔｉｃａ　Ｃｈｉａｉｃ ａ　Ａｃｔａ）３３　。

４１（１９６１）、アール・ポール（Ｒ、Ｐ　ａｕｌ）ら、ジャーナル・オン・ メジシナル・ケミストリイ（Ｊ、Ｍｅｄ。

Ｃｈｅａｐ、）１７　、　５３９（１９７２）およびジー・ピフェーリ（Ｇ　、 　Ｐ　１ｆｆｅｒｉ）ら、ジャーナル・オン・メジシナル・ケミストリイ（、ｒ 、　Ｍｅｄ、　Ｃｈｅｗ、）上８，７４１（１９７５）に開示されている。それ 故、適当な条件は当該技術に熟達した者には推定可能である。

本発明の好ましい方法は、４−（４−ピリジル）へキサノー１．４−ジニトリル を強鉱酸、例えば硫酸および／または塩酸と加熱してアミド生成反応を生起させ たのち、加水分解条件下にアミドを閉環し、反応混合物から所望の３−エチル− ３−（４−ピリジル）グルタルイミドを分離させる。

原料ジニトリルは２−（４−ピリジル）ブチロニトリルにアクリロニトリルを反 応させて得られる。２−（４１８表昭６ｌ−５００６１３　（４） −ピリジル）ブチロニトリルは種々の方法で得られる既知物質である。例えば、 ４−ピリジルアセトニトリルに水素化ナトリウムまたはナトリウムアミドを反応 させ、次いでヨウ化エチルまたは臭化エチルを反応させて得られる。エチル化は α−炭素の両水素に生起し、不必要なジエチル体である２−エチル−２−（４− ピリジル）ブチロニトリルを生成する。これを、例えばクロマトグラフィーによ って分離でき、あるいは所望のモノエチル体である２−（４−ピリジル）ブチロ ニトリルとの混合物をアセトニトリルと反応させたのち、上記の閉環反応に付し て、不必要な副生物を合成の最後に分離してもよい。別法として２−（４−ピリ ジル）ブチロニトリルはエム・ピー・サムズ（Ｍ　、　ｐ　、　Ｓ　ａｍｍｅｓ ）ら、ジャーナル・オン・ザ・ケミカル・ソサイアティ（Ｊ　、　Ｃｈｅａｐ、 　Ｓｏｃ、）、パーキン（Ｐ　ｅｒｋｉｎ）　Ｉ　、　２７４６（１９８１）に 記載された方法で合成される。この合成法は、無水条件下にＮ）リフェニルピリ ジニウムテトラフルオボレ−ト（市販のトリフェニルカルベニウムテトラフルオ ボレートから容易に得られる）とブチロニトリルのリチウム誘導体（ブチロニト リルとｎ−ブチルリチウムおよびジイソプロピルアミンとの反応により得られる ）とを反応させる方法である。

塩酸塩などの酸付加塩は常法により製造できる。

式（３）のアルキル誘導体の中では、採択される遊離ラジカル経路では４級アル コールおよび二級アルコールよりも合成が容易であることから、ｔ−ブチル誘導 体が好ましい。この合成経路は、類似化合物について本来知られている方法など でＮ−オキシドへ酸化したのち、遊離ラジカル生成条件下、例えば過硫酸カリウ ムの存在下にＮ−オキシドにアルカン遊離ラジカル生成可能な化合物、例えば炭 素数２〜５の低級アルカンカルボン酸を反応させる方法である。得られる２−置 換Ｎ−オキシドは容易に水素化されて、ピリジン環窒素原子を再び生成する。

３−エチル−３−（４−ピリジル）グルタルイミドは一般にラセミ型として得ら れるが、所望により、例えば酒石酸塩の合成と分離ののち、光学活性遊離塩基の 再遊離化などの常法によりその光学異性体に分割できる。別法として、ジニトリ ル先駆体、すなわち４−（４−ピリジル）へキサノー１．４−ジニトリルをその 光学異性体に分割したのち、所望の異性体について閉環合成反応を実施して、目 的とするグルタルイミドの対応する光学異性体を製造してもよい。

本発明の製剤は、例えば非経口投与（例えば、静注、筋注、洞内投与など）、経 口投与、局所投与または直、腸投与のために適した剤型をとることができる。特 別な剤型としては、溶液、懸濁液、乳液、クリーム、錠剤、カプセル、リボゾー ム（脂肪粒子）、マイクロ貯蔵器などが例示され、とくに経口摂取製剤、滅菌注 射剤などが挙げられる。想定される好ましい剤型としては、乾燥固形製剤例えば 、カプセル、顆粒、錠剤、丸剤、巨丸薬などである。固形担体としては、賦形剤 、例えば、ラクトーズ、増量剤、崩壊剤、結合剤、例えば、セルローズ、カルボ キシメチルセルローズ、でんぷんなど、錠剤機に錠剤が付着するのを防止するた めのステアリン酸マグネシウムなどの付着阻止剤などの１種以上が挙げられる。

錠剤、丸剤および巨丸薬は迅速に崩壊させたり、有効成分を徐々に放出させたり するように製剤化してもよい。本発明は、治療上有効量、例えば治療期間中１日 当たり５〜５ｏｘｙ／ｈｙ体重の本発明化合物を哺乳類患者に投与することを特 徴とする哺乳類身体のエストロゲン依存性腫瘍の治療法を対象とする。

その単剤としての使用の他に、本発明の化合物は、上記種類の腫瘍に対して有効 な他の併用できる薬剤、例えばアミノグルテチミド、クモキシフェンまたはブタ ノールと一緒に投与したり、これらに続いて投与したり、これらとの合剤に使用 してもよい。また、例えば放射線療法および／または手術を含む、形態上の併用 療法の要素として使用できる。

以下の実施例によって本発明を説明する。　、Ｋ１鮭上 ３−エチル−３−（４−ピリジル）−２，６−ピペリジンジオンの製造 シアン化カリウム２５ｇを水１３３ｍ１２にとかした溶液に４−ピコリルクロリ ド塩酸塩３０ｇを試薬級メタノール２６８ｍＱにとかした溶液を加え、２時間加 熱還流し、減圧濃縮し、水５００峠で希釈し、クロロホルム４ＸＩ００ｘｊで抽 出した。抽出物を蒸留すると、４−ピリジルアセトニトリル８，０２６９、沸点 ８４℃１０．１５ｍｍＨ９の単一フラクションを得た。これを乾燥ジメチルホル ムアミド１３０１１２にとかしたのち、水素化ナトリウム３．４１Ｆ（５０ｖ／ ｖ油分散液）を加えて２゜５時間攪拌し几。冷却攪拌下にヨウ化エチル５　、７ 　ｘＱ、特衣Ｂ胚１−５００６１３　（５） １　、９３９／ｌｌ７２を徐々に加えた。１８時間後に、過剰の溶媒を留去し、 残渣を水１５０ｍ（７で希釈し、ジエチルエーテル３ｘ３００ｘＱで抽出した。

抽出物をフラッシュ・クロマトグラフィー（メルク・アート　９３８５゜ＣＨＣ ：Ｉ２ｓ、　４．５　Ｘ　１５ｃｚカラム）に付すと、２−（４−ピリジル）ブ チロニトリルおよび２−エチル−２−（４−ピリジル）ブチロニトリルの混合物 ９．８５ｇを得た。

上記混合物をｔ−ブタノール１８ｍ＋２にとかした溶液と「トライトンＢＪ０． ３２ｚＱとの混合物に冷却攪拌下アクリロニトリル４．４６ｚＱとｔ−ブタノー ル５　、５　ｘ（ｌとの混合物を加えた。（「トライトンＢ」は英国その他多数 の国で登録されている商標である。）２時間後に、過剰の溶媒を留去し、残渣を 水１５０ｘ１２で希釈し、クロロホルム２Ｘ５０Ｊ！１２で抽出した。抽出物を フラッシュ・クロマトグラフィー（ＣＨＣＩ２＊、、４．５Ｘ　ｌ　５ｃ膚カラ ム）に付すと、２−エチル−２−（４−ピリジル）ブチロニトリルおよび４−シ アノ−４−（４−ピリジル）ヘキサノニトリルの混合物８ｇを得た。この混合物 を氷酢酸１５ｍ１および濃硫酸３ｘ（ｌとともに０．５時間加熱還流し、さらに ５Ｎ塩酸１５ｉ１２を加えて３時間還流し、冷却し、水で希釈し、水素化炭酸ナ トリウムでｐＨ７〜７．５に調節し、塩化メチレンで抽出した。シリカゲル（メ ルク、キーゼルゲル６０）のカラム（４，５ｘ３０ＣＸ）をクロロホルムで溶出 すると、標記化合物２．９５２を得た（４−ピリジルアセトニトリルからの収率 ２０％）。；融点１３８−１３９℃（補正済み）（トルエンから結晶化）：マス スペクトル、イソブタン化学イオン化（ＭＨ＝）ｍ／ｚ＝　２１９　；　Ｉ　Ｒ （ＫＣ１２）ＣＩ−’　２９９０（ＣＨ芳香族フェニル）、２８００（ＮＨ）、 １７２０゜１７８４（Ｃ＝Ｏイミド）、１６０５（Ｃ＝Ｃ，芳香族フェニル）； 　’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＱｓ）、δ　０．８７（ｔ、３Ｈ。

ＣＨｊＣＨｔ）、１．８０〜２．８２（ｍ、６Ｈ，ＣＨ，ｌ。

Ｈ（４）、Ｈ（５））、７．１５（ｄ、　２Ｈ，芳香族Ｈ（３）。

Ｈ（５）、Ｊ＝４．７Ｈｚ）、８．５５（ｄ、２Ｈ，芳香族Ｈ（２）、Ｈ（６） 、Ｊ＝４．７Ｈｚ）、９．１３（ｂｒ、ｓ、、Ｉ　Ｈ。

ＮＨ）。

元素分析　Ｃ＋＊Ｈ＋＊ＮｔＯｔ　２１８．２５として計算値　Ｃ６６，０３， Ｈ６，４７，Ｎ　１２．８４（％）実験値　Ｃ６６，００；　Ｈ６，５８：　Ｎ 　１２．８７（％）２〜（４−ピリジル）ブチロニトリルの単離２−（４−ピリ ジル）ブチロニトリルはそのジエチル副生物である２−エチル−２−（４−ピリ ジル）ブチロニトリルとの混合物から、小規模に混合物０．２６ｇを用いて分離 した。溶離剤としてクロロホルム：エタノール＝９７：３ｖ／ｖ使用するフラッ シュ・クロマトグラフィーにおいて、ジエチル副生物が初めに溶出し、次いで混 合物と最後に所望の成分（油状物０．５６ｇ）を溶出した。これをエタノールに とかし、ピクリン酸０．１２６９のエタノール溶液で処理すると、融点１２７° の結晶性ビクレー）０．０８２９を得た。

元素分析　Ｃｌ５Ｈ１３ＮＳＯ？（３７５，３０）として計算値　Ｃ４８，００ ，Ｈ３，４９，Ｎ　１ｇ、６７（％）実験値　Ｃ４ｇ、０９．　Ｈ３，５４，Ｎ 　１８．７６（％）実施例２ 次の組成の錠剤を調製する： 活性成分（微粉状）　１ｌ１３．３ｗ／ｗ％「アビセル（Ａｖｉｃｅｌ）Ｊ （微結晶状セルロース）１２°７ｗ／ｗ％ポリビニルピロリドン　１　ｖ／ｖ％ アルギン酸　２　ｖ／ｖ％ ステアリン酸マグネシウム　１　ｖ／ｗ％ロリドンを加える。混合物を工業用メ チル化スピリット（ｍｅｔｈｙｌａｔｅｄ　５ｐｉｒｉｔｓ）（７４’″ＯＰ） にとかし、顆粒化に適した塊を得る。この塊を２０メツシユのふるいにより顆粒 化しくメツシュの大きさはここでは全て英国標準である。）たのち、得られる顆 粒を５０℃以下の温度で乾燥する。乾燥した顆粒を２０メツシユのふるいを通し たのち、アルギン酸とステアリン酸マグネシウムを加えて顆粒と混合する。これ を錠剤に打つ。

下記の処方の錠剤を同様の方法で調製する：活性成分（微粉状）　６２．５ｗ／ ｖ％「アビセル」（微結晶状セルロース）　３３．５ｖ／ｖ％ポリビニルピロリ ドン　１　ｖ／ｖ％ アルギン酸　２　ｖ／ｖ％ ステアリン酸マグネシウム　１　ｖ／ｖ％Ｘ監丘ｌ 下記処方の錠剤を得る： 活性成分（微粉状）　８３．３ｗ／ｖ％ラクトース（３００メツシユ）　６．３ ｖ／ｗ％とうもろこしでんぷん　５　ｖ／ｖ％ ゼラチン　３．：（ｖ／ｖ％ ステアリン酸マグネシウム　２　ｗ／ｗ％活性成分にラクトーズおよび所要のと うもろこしでん竹表昭６ｌ−５００６１３（６） ふんの半量を混合したのち、混合物にゼラチンの５Ｗ混合物を１６メツシユのふ 石いにかけて顆粒化し、得られる顆粒を６０℃以下の一定温度で乾燥する。乾燥 した顆粒を２０メツシユのふるいをとおしたのち、ステアリン酸マグネシウムお よび残り半量のとうもろこしでんぷんを加える。これを錠剤に打つ。

３−エチル−３−（４−ピリジル）−２，６−ビペリジンジオン０．０４３６９ （０，２ミリモル）をベンゼンＩＲＱにとかした溶液に４−クロロ過安息香酸０ ．０４９（０，３ミリモル）を加えた。１６時間室温下で反応させたのち、合成 用薄層クロマトグラフィーＣＣＨＣＱｓ：メタノール＝１９：ｌ）にて得られる Ｎ−オキシドを未反応のｍ−クロロ過安息香酸およびその分解生成物から分離し た。Ｎ−オキシドをエタノールから再結晶し、融点１９５〜！９６℃の無色プリ ズム晶ｏ、０２ｇ（収率４３％）、マススペクトル：ａ／ｚ２３４（Ｍ”）を得 た。

上記で得られた３−エチル−３−（４−ピリジル）ピペリジン−２，６−ジオン Ｎ−オキシド　２００肩ｇ（０，８５４ミリモル）の水溶液１０ｍＱに、ピバリ ン酸２６２ｍｇ（２，５６ミリモル）と水酸化ナトリウム・６８ｘｇ（１，７ミ リモル）を加え、混合物を沸とうするまで加熱した。この混合物に過硫酸カリウ ム２３０Ｂ（０，８５４ミリモル）の溶液６ｍｌ！を滴下した。加熱をさらに３ 時間続けた。冷却後ただちに、反応混合物を炭酸水素ナトリウムで中和したのち 、濃縮乾固した。乾燥したペーストをメタノールにとかし、カラム（１５ｘ４０ ｚｍ、メルク　９３８５）にかけて、メタノールで溶出した。集めた溶出液を濃 縮し、合成用薄層クロマトグラフィー・プレート（４、２０ｘ　２０ｃｍ、　厚 ｂ　１ｘｘ。

ＣＨＣ（ｂ：メタノール＝１９：ｌ）にて精製した。黄白色油状物として得られ る、マススペクトル：ｍ／ｚ２９１ＣＭ＋１）＋の３−エチル−３−（４−（２ −を−ブチル）ピリジルコピペリジン−２，６−シオンーＮ−オキシド３０ｘｇ をエタノール９１０％パラジウム炭素１００Ｂで１６時間水素化し、濾過したの ち、合成用薄層クロマトグラフィー・プレート（２０Ｘ　２０ｃｘ。

厚さ１ｍｍ、　ＣＨＣＱｓ：メタノール＝１９：ｌ）にて精製した。標題化合物 はマススペクトルｍ／ｚ２７４（Ｍ　）＋の無色油状物として得られた。

生化学試験 種々のグル′タルイミド類の酵素アロマターゼおよびデスモラーゼに対する活性 を以下に示すように調べた。

各化合物は一定範囲の濃度について調べた。阻害剤の各濃度ごとに３種の時間に つき試料を除去した。結果は培養時間に対する放出した化合物のグラフ上に記入 した。阻害剤の各濃度における酵素反応の速度を決定するために得られる線状グ ラフを使用した。

結果をＩＣｓ。の値で表すが、このＩＣ，。は酵素アロマターゼに対する基質濃 度としてｌＨテストステロン１．５マイクロモルおよび酵素デスモラーゼに対す る基質濃度として１４Ｃコレステロール７マイクロおいて酵素活性をコントロー ル値の５０％に減少させるに必要な阻害剤の濃度である。

Ａ，デスモラーゼ　半開腎皮質のミトコンドリア区分がデスモラーゼの原料とな り、その分離方法は主としてアール・ビー・ホッホバーグ（Ｒ　、　Ｂ　、　Ｈ 　ｏｃｈｂｅｒｇ）ら、１９７４）に開示されたとおりである。酵素活性は、基 質として２６−”Ｃ−コレステロールを使用し、放出された１４ｃｍイソカプロ ン酸を測定して、調べた〔アール・ビー・ホッホバーグら、同上およびブイ・ア イ・ウッジリス（Ｖ　、　［、Ｕ　ｚｇｔｒｔｓ）ら、エンドクリノロジー（Ｅ 　ｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ）、１０１．８９（１９７７）参照〕。阻害剤化合 物をエタノール１０マイクロリツトルに加え、同量のエタノールをコントロール 検体に加えた。試験混合物の全量を１．０１とした。試験管を３０℃で５分間前 培養に付したのち、ミトコンドリア蛋白質１１１９を添加することにより反応を 開始した。培養時間２，４．６分後に検体を除去し、試験を上記のとおり完了し た。

Ｂ、アロマターゼ　ケイ・ジエイ・ライヤン（Ｋ、Ｊ。

Ｒｙａｎ）、ジャーナル・オン・ザ・バイオロジカル・ケミストリイ（Ｊ、Ｂｉ ｏｌ、Ｃｈｅｍ、）２３４，２６８（１９５９）の方法により、アロマターゼを ヒトの胎盤組織（微粒状）から入手した。芳香化中に１．２−”Ｈテストステロ ンから生成される”Ｈ，０を測定することにより活性を調べた〔ビー・イー・グ レイゲス（Ｐ、Ｅ、Ｇｒａｖｅｓ）ら、エンドクリノロジー（Ｅ　ｎｄｏｃｒｉ ｎｏｌｏｇｙ）、１０５゜５２（１９７９）参照〕試験方法は上記と同様である が、特炎昭６１−５００６１３　（７） 例外として基質の濃度を１．５マイクロモルとし、試験管を３０℃で５分間前培 養したのち、微粒状蛋白質０．５ｘ９を添加して反応を開始することにした。培 養時間５．１０および１５分後に検体を分離した。

結果を下記の表−１に示す。３−エチル−３−（４・−ピリジル）グルタルイミ ドはアロマターゼ活性の強力な競争的阻害剤（試験管内）である。２−ピリジル グルタルイミドおよび３−ピリジルグルタルイミドなどの類似物質はアロマター ゼに対する阻害作用を示さない、３種のピリジルグルテチミド化合物はすべてデ スモラーゼ活性の阻害効果を示さない。

表−１ アロマターゼおよびデスモラーゼに対するグルタルイミド誘導体の阻害作用 ＩＣｓ。マイクロモル濃度 １隼後退に関する生体内試験 ＭＮｔＪ（Ｎ−メチル−Ｎ−ニトロソ尿素）により誘導されたラット胸部腫瘍は 、エストロゲン受容体を含み、卵巣射除術によって後退するので、ホルモンに応 答することが明らかになった〔グリノ（Ｇ　ｕｌｌｉｎｏ）ら、ジャーナル・オ ン・ザ・ナショナル・キャンサー・インスチチュート（ＪＮＣＩ）５土、　４０ （１９７５）およびウイリャムズ（Ｗ　ｉｌｌｉａｍｓ）ら、同上６６．１４７ （１９８１）参照〕。

ＤＭＢＡ（７，１２−ジメチルベンズ（ａ）アントラセン）誘発腫瘍と違って、 ＭＮＵ腫瘍はプロラクチン依存性というより、むしろ主としてエストロゲン依存 性であろう〔プリニート（Ｐ　ｒｕｉｔｔ）、　ローズ（Ｒｏｓｅ）。

ブライヤン（Ｂ　ｒｙａｌ）、プロシーディンゲス・才ブ・アニュアル・キャン サー・リサーチ（Ｐｒｏｃ、　Ａｎｎ。

Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅｓ、）、２０，８７（１９７９）参照〕。この理由から、３ −エチル−３−（４−ピリジル）グルタルイミドの生体内における腫瘍伸長に対 する効果を評価するためにＭＮＵモデルを使用した。

上記ウイリャムズらの文献の方法を用いて、近親交配のルードウイッヒ（Ｌ　ｕ ｄｗｉｙ）、ウィスター（Ｗｉｓｔａｒ）／オシー（ＯＩａＸＷＦ／Ｉ　ＣＲＦ ｌｏＬａ）種処女ラットにＭＮＵを静注して胸部腫瘍を誘発させた。酢酸でｐＨ ５に酸性にした０、９％食塩水溶液にＭ　Ｎ　Ｌ＋をとかした。５０日令から開 始し、１４日間隔で３回尾静脈に注射した（Ｍ　Ｎ　Ｕ　５　ｍ９／体重１００ ９／注射；注射容量０．５　ｘＱ／ラット）。

１群１２匹からなる動物につき初回の注射から１２５〜１４０日目を実日月とし た。この時点で動物ごとに１〜３個の腫瘍を生じた。

アミノグルテチミドおよび３−エチル−３−（４−ピリジル）グルタルイミドを ジメチルスルホキシド（１９ｕ／　ｘＱ）にとかしたのち、各ラットに０．１６ ５ミリモル／体重に９／日を朝夕２回同量づつ皮下注射した。

コントロール群には同量のＤＭＳＯのみを投与した。

アミノグルテチミドおよび３−エチル−３−（４−ピリジル）グルタルイミドを ４２日間投与し、この時点の終わりに腫瘍を再び測定した、各腫瘍につき４２日 の治療後に初めの腫瘍容量のパーセントで表した。

下記の表２は、容量未変化のもの、後退したもの、伸長したものを腫瘍数で示す 。結果によると、アミノグルテチミドの治療では後退する腫瘍のパーセントが増 加する。３−エチル−３−（４−ピリジル）グルタルイミドも同様の効果を示す 。両治療群において、後退を示さない腫瘍をもつコントロールに比べ、容量増加 １００％以下を示す割合がはるかに大きい。

３−エチル−３−（４−ピリジル）グルタルイミドは少なくともアミノグルテチ ミドと同程度であるこの試験において腫瘍伸長の有効な阻害剤であると思われる 。

表−２ ３−エチル−３−（４−アミノフェニル）グルタルイミド（アミノグルタルイミ ドとしても知られ、以下「ＡＰＧＪと称す。）、クロルプロマジン（以下ｒｃＰ ＺＪ）およびブランク・コントロールと比べた、３−エチル−３−（４−ピリジ ル）グルタルイミド（以下ｒＰｙＧＪ）の中枢神経系に対する作用を調べるため に試験を行った。

８−１２週余り雌雄ＨＰＧ（正常）マウスを使用した。

全ての薬物を腹腔内に投与した。

ＡＰＧＪ０幻をＭＨＣ１２０，９ｚＱにとかし、ＭＮａＯＨを加えてｐＨ３，５ 〜４に調整して、ＡＰＧ溶液を８製した。脱イオン水を加えて容１１２ｇｆ２と した。

溶液を２時間以上放置すると、塩が析出した。これを加熱攪拌すると、溶解した 。ＰｙＧ５０ｕをＭ　ＨＣｌ！０．９ｚＱにとかしてＰｙＧ溶液を調製した。こ れは低いｐＨで好都合に溶液となる。ＭＮａＯＨを加えてＩ）Ｈ３。

５〜４とした。脱イオン水を加えて容量を補正した。

塩は安定にとけずに、１５分以内に溶液から析出した。

溶液を保温しておく必要があり、冷めないうちに注射することがしばしば必要で あった。コントロール溶液については、脱イオン水２容量部にＭＨＣｆ２９容量 部を加えたのち、ＭＮａＯＨを加えてｐＨ３、５〜４としントロールで前処理し たのち、それぞれ小部屋に入れ、興奮剤ペンチレンチトラゾール５０　ｘ９／　 ｋｇにより誘発されるけいれん作用を観察した。ペンチレンチトラゾールは、食 塩賦型剤の注射に続けて投与されるが、注射から５分間以内に一連の特徴ある作 用を示した。増加した運動作用に緊張性けいれんが続き、さらに死に至るはげし い間代性伸筋けいれんが生起した。予期したように、ＡＰＧはけいれんを防止し た。ＰｙＧは投与量４００　ｘ９／　ｋｇ、３００３１９／　ｋｇ、２００夏ｙ ／ｋｙで試験を行った。これらの投与量ではいずれもペンチレンチトラゾール誘 発けいれん防止できなかった。

回転棒試験：試験化合物またはコントロールの投与後に、回転棒試験により薬物 誘発性運動失調を各マウスにつき調べた。キモグラフを使用し、そばに置いた。

試験は速度１　ｒ、ｐ、ｍ、および３　ｒ、ｐ、ｍ、で行った。２分間隔で落下 数を注射から１５分後と３０分後に記録した。

２種の異なる速度で得られた結果は密接な相関関係を示した。ＡＰＧとＰｙＧの 両者にとって注射から１５分後に効果のピークが現れた。ＡＰＧは運動相互調整 につき著明な効果を示した。大部分のマウスは重く鎮静したため、いずれの速度 でも棒上に自己を保持することは完全に不可能でありん。ＰｙＧ　３００ｘ９／ ｋｇではコントロールとほとんど差異を示さなかった。４０００／に９の高い投 与量ではマウスは一層硬くなり、回転の速い棒では頻繁に落下するが、回転の遅 い棒では棒上にすわりこんで、長い開山（、ろうとした。この種の効果は、クロ ロプロマシン処理したマウスの場合にもみられ、このマウスも著しく鎮静した。

行動観察；ニス・アーウィン（Ｓ　、　１　ｒｖｉｎ）、サイコファルマコロジ ｙ　（Ｐ　ｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｇｉｉ　）　１３　、２２２Ｃ１９６ ８）に記載された薬物誘発行動活性の総合観察評価を用いた。試験化合物または コントロールで処理したマウスを下記の試験に付した。

受動性−通常の闘争反応の減少を評価する試みとして前肢または後肢により垂直 に懸垂するなど異常な位置にマウスを置いた。この試験は注射から２０〜３０分 後に行い、マウスを０〜４の段階で評価した。点数０は、通常の無処理動物に認 められる闘争反応の減少を全く示さない場合を意味した。点数４は若干の処理の 場合に認められる重いカタレプシーまたは催眠状態を示した。

反射作用：動物をひっくり返したとき常態にかえれるかどうかを調べるため、真 っすぐにする反射を試験した。マツチ棒の端を眼のそばに運んだとき、眼をまだ たきすることを試験することにより角膜反射を評価した。鉗子でマウスの足指を はさむことによって屈筋反射を試験した；後肢を引けば積極的結果を示した。

マウスについて起毛、冗進した身づくろい作用、震え、けいれん、異常歩調、腹 部調子および全面的自発運動作用も観察した。

さらに何らかの異常行動も記録した。

ＡＰＧ（１００Ｈ／に９＞は、自発運動作用の減少、震えのついた運動、よろめ く歩調、闘争反応の減少により明らかとなる著明な鎮静を示した。角膜反射、真 っすぐになる反射および屈筋反射はなお明らかであるが、屈筋反射は未処理動物 に比較して僅かに増加した。ＡＰＧ　２００ｚ９／に９を動物３匹に投与すると 、全て注射から数分間以内に睡眠に落ちた。

Ｐ　ＹＧ　２００　ｘ９／に？ではコントロールのマウスの場合と比べて全体と して観察できる差異を示さなかった。

３０ＯＮｇ／に９の投与では、若干のマウスは自発運動作用の僅かな減少と闘争 反応の減少を示したが、その他の点では治療による効果はなかったように思われ る。

４００　ｕ／に９では全てのマウスは著しく活発さがなくなり、一層受動的とな り、その後肢の制御を若干失っていた；すなわち、マウスは僅かによるわき、不 活発に行動する傾向をみせた。全ての反射はなお明白であて、ＡＰＧやＣＰＺを 処理した動物について注視したように、屈筋反射の亢進は認められなかった。Ｐ ｙＧ５００　ｕ／　ｋｙの投与では試験した３匹のマウスを死に至らしめた。

クロルプロマジン１０ｘｙ／に９の投与では闘争反応の完全な減少、不活発な運 動、警戒心の減少をもたらした。これらのマウスで認められる筋肉の硬直および 活動の減少はカタレプシーの典型的徴候である。直立反射の喪失はマウス６匹の うち２匹に認められ、屈筋反射は冗進し、角膜反射は正常でありた。マウス８匹 のうち５匹は、と（に回転棒の上にのせたとき、予測できない跳びと突進運動を 示した。

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Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. １．式： ▲数式、化学式、表等があります▼（３）（式中、Ｒは水素または炭素数１〜４ のアルキル基を表す。） で示される、光学異性体また光学異性体の混合物としての３−エチル−３−（４ −ピリジル）グルタルイミド、その誘導体およびそれらの治療上許容できる酸付 加塩。
2. ２．式： ▲数式、化学式、表等があります▼（４）（式中、ＹおよびＺはそれぞれ独立に カルボキシ基または閉環反応可能なその誘導基あるいは上記カルボシ基もしくは 誘導基の先駆基、ＹおよびＺの少なくとも一方はアミド基またはその先駆基を表 す。）で示される化合物を、アミド基と上記カルボキシ基もしくはその誘導基と の間で閉環反応を生起させて、ピペリジン−２，６−ジオン環を形成させるのに 有効な条件下に反応させることを特徴とする３−エチル−３−（４−ピリジル） グルタルイミドの製造法。
3. ３．４−（４−ピリジル）ヘキサノ−１，４−ジニトリルを強鉱酸とともに加熱 してアミド形成反応を生起させ、次いでこのアミドを加水分解条件下に閉環させ 、反応混合物から所望の３−エチル−３−（４−ピリジル）グルタルイミドまた はその塩を分離することを特徴とする特許請求の範囲第２項による方法。
4. ４．治療用の、特許請求の範囲第１項による化合物。
5. ５．治療上有効量の特許請求の範囲第１項による化合物および製薬上許容される 担体または希釈剤を含有する医薬組成物。
6. ６．治療上有効量の特許請求の範囲第１項による化合物を方哺乳類患者に投与す ることを特徴とする哺乳類の身体のエストロゲン依存性腫瘍を治療する方法。