JPS615100A - 蛋白質の分離および固定用吸着剤 - Google Patents

蛋白質の分離および固定用吸着剤

Info

Publication number
JPS615100A
JPS615100A JP60105769A JP10576985A JPS615100A JP S615100 A JPS615100 A JP S615100A JP 60105769 A JP60105769 A JP 60105769A JP 10576985 A JP10576985 A JP 10576985A JP S615100 A JPS615100 A JP S615100A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
adsorbent
adsorbent according
crosslinked
net
polymer
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP60105769A
Other languages
English (en)
Other versions
JPH044018B2 (ja
Inventor
イエルカー・ポラート
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Individual
Original Assignee
Individual
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Individual filed Critical Individual
Publication of JPS615100A publication Critical patent/JPS615100A/ja
Publication of JPH044018B2 publication Critical patent/JPH044018B2/ja
Granted legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/14—Blood; Artificial blood
    • A61K35/16—Blood plasma; Blood serum
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3202—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
    • B01J20/3204—Inorganic carriers, supports or substrates
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3202—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the carrier, support or substrate used for impregnation or coating
    • B01J20/3206—Organic carriers, supports or substrates
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3268—Macromolecular compounds
    • B01J20/327—Polymers obtained by reactions involving only carbon to carbon unsaturated bonds
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3268—Macromolecular compounds
    • B01J20/3272—Polymers obtained by reactions otherwise than involving only carbon to carbon unsaturated bonds
    • B01J20/3274—Proteins, nucleic acids, polysaccharides, antibodies or antigens
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3231—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating characterised by the coating or impregnating layer
    • B01J20/3242—Layers with a functional group, e.g. an affinity material, a ligand, a reactant or a complexing group
    • B01J20/3268—Macromolecular compounds
    • B01J20/328—Polymers on the carrier being further modified
    • B01J20/3282—Crosslinked polymers
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J20/00—Solid sorbent compositions or filter aid compositions; Sorbents for chromatography; Processes for preparing, regenerating or reactivating thereof
    • B01J20/30—Processes for preparing, regenerating, or reactivating
    • B01J20/32—Impregnating or coating ; Solid sorbent compositions obtained from processes involving impregnating or coating
    • B01J20/3291—Characterised by the shape of the carrier, the coating or the obtained coated product
    • B01J20/3293—Coatings on a core, the core being particle or fiber shaped, e.g. encapsulated particles, coated fibers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
    • C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
    • C07K1/20—Partition-, reverse-phase or hydrophobic interaction chromatography
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/814—Enzyme separation or purification
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/814—Enzyme separation or purification
    • Y10S435/815—Enzyme separation or purification by sorption
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
    • Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
    • Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
    • Y10S530/815—Carrier is a synthetic polymer
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
    • Y10S530/81—Carrier - bound or immobilized peptides or proteins and the preparation thereof, e.g. biological cell or cell fragment as carrier
    • Y10S530/812—Peptides or proteins is immobilized on, or in, an organic carrier
    • Y10S530/815—Carrier is a synthetic polymer
    • Y10S530/816—Attached to the carrier via a bridging agent

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 生化学および生物工学の分野において、高分子並びに「
低分子」の分離用に、また例えば技術的に応用可能な酵
素並びに病気の診断用抗源および抗体の固定用に、さま
ざまな種類の吸着剤が使用されている。本発明はこのカ
テゴリーの吸着剤に属するが、いくつかの特徴的な点で
従来の吸着剤と異なっている。
本発明の物質は１〜１０００μｍ程の直径を有する特に
有用な球状の形をした粒子から成る細かく分割された吸
着剤である。これら粒子は重合体ネットから成り、この
ネットは全体的に粒子に浸透しており、またはその表面
を被覆しており、かつ置換基または架橋結合を含んでお
り、この置換基または架橋結合は、チオエーテルのイオ
ウからエチレン橋を経て分離されたスルホン基を有する
鎖の形の特徴的な原子連続体Ｘ−５Ｏ□−（１，Ｈ２−
ＣＨ，−３−Ｙを有する。さらに、チオエーテルのＳの
一方は基Ｙに結合しており、この基Ｙはエーテル結合し
ている鎖の一端に位置し、他端には基Ｘが位置しており
、このＸは２つ以上の炭素原子を有し、このようにして
重合体ネットが構成されている。これら基ＹおよびＸは
ネットの別の枝に共に結合することもでき、この場合５
−ｓｏ□−ＣＨｚ　　ＣＨｚ　　Ｓはネット内で２つの
重合体の鎖間に架橋結合を生成する。
本発明の物質のきわ立った特徴はその吸着性にあり、こ
の特性はいわゆる疎水性吸着剤のそれと同種のものであ
る。例えば、蛋白質の吸着は例えば塩化アルカリ、硫酸
アルカリおよび硫酸マグネシウムのような高濃度の水性
構造有機性塩の存在の下で増加する。しかしながら、明
らかに本発明の吸着剤は、例えば８〜１８個の炭素原子
を含むアルキル基を基本的に内在する疎水性吸着剤によ
る場合以外の蛋白質を好ましく吸着する。しかしながら
、予期しないことは、このようにして構造全体を比較的
親水性にする水酸基がＹの端部に位置することである。
この結果、　５０２　　ＣＨ２ＣＨ２Ｓ　　ＣＨ２ＣＨ
２０Ｈ基は例えば血清蛋白（これは疎水性アルキル化ゲ
ル上に容易に吸着されない）用の優れた吸着剤を生成す
る。この基の吸着力はＸの性質によって弱めることも強
めることもできる。この特徴的な連続状の基が次のよう
に２続になると吸着力が増加する。
−ＳＯ□−ＣＨ２−ＣＨ２−５−ＣＨ２−ＣＨ２−３ｏ
。−ＣＨｚ−ＣＨ２−５−Ｃ）１２−ＣＨｚＯＨイオン
発生基が導入されると、例えば−８Ｏ□−ＣＯ□−ＣＨ
２−５−ＣＩｌ□−ＣＨ２−Ｃ０ＯＨのようになると、
吸着特性は変化する。
このような変性吸着剤でも、蛋白質および核酸に対して
クロマトグラフィーを扱う分野において現在使用されて
いる多くの分離用化合物にとって有効な補体である。
すなわち、本発明の吸着剤は、核酸、ヌクレオチド、蛋
白質、血清蛋白およびポリペプチドのような生体高分子
の分別用に用いることができる。
本発明の基Ｙの他の例としては、置換芳香族炭化水素お
よび複素環配位子を挙げることができる。これらのいく
つかは下記実施例に述べられている。疎水性の強いＭＹ
、例えばＣ，、ｌ１２．。＋（ｎ≧６）は特に有益なも
のである。疎水性相互作用および−ＳＯ□−によって強
化されたーＳ−に基づく吸着性の組合わせ効果は、蛋白
質の固定に利用することができる。
本発明の１つの具体例は、中心までずっと浸透可能な蛋
白質用ネットを構成する粒子から成る、ということが上
記事項から明らかである。第２の具体例によれば、粒子
の表層のみが蛋白質に対して浸透可能であり、この場合
、粒子は吸着特性を有する基を含む必要がない。第３の
具体例は不浸透性核を包囲する多少厚い層のネットから
成る。この核は任意に生成することができ、例えば繊維
並びにホース、ビーカーまたは他の容器の内面から成る
ものである。
高分子を浸透させるために、かつ特徴的な吸収性を適切
に発現させるために、重合体ネットは特有の性質を持っ
ていなければならない。即ち、重合体ネットは親水性で
あり、かつ重合体に対して浸透性がなければならず、ま
た損傷させることなく、蛋白質を吸着するｐＨ範囲内に
おいて、好ましくはｐ１１４〜８の範囲内において、し
かし望ましくは広い範囲内において耐性がなければなら
ない。また、重合体ネットの化学的性質は吸着特性にか
かわる基を充分に受入れるものでなければならない。重
合体ネットに関して、本発明はこれらの要件により次の
ような親水性重合体に限定される。即ち、例えばポリビ
ニルアルコール５ポリヒドロキシメタン、多糖類および
架橋ヘキシトールのようなポリアルコール並びに架橋ポ
リアクリルアミドのようなポリアミド。さらに架橋ポリ
アミンおよび多酸も挙げることができるが、この場合、
無機基の存在により吸着がさらに複雑になることが認め
られる。さらにゲルネットは、グリセロール置換基のよ
うな親水基、または次の基ＣＨ。
０５ｔＣＨ２ＣＨ２ＣＨ２ＮＨ− によって置換されたシリカゲルから成る。
本発明の特に有用な吸着剤は架橋寒天である。吸収特性
基の導入は次のように有利に行なうことができる。まず
、重合体の母材をジビニルスルポンと反応させ、次にこ
のようにして架橋し同時に活性化した生成物を次の化合
物で変換する。メルカプタン、例えばメルカプトエタノ
ール ■覆永売０−ＣＨｚ−Ｃ１１ｚ−３Ｏｚ−Ｃｌｌｚ−Ｃ
ｆｌｚ−３−ＣＨｚ−Ｃｌｌ□−ＯＨ：またはシスティ
ン： またはチオフェノール： ＃Ｏ−Ｃｔｌ　ｚ　−ＣＩｌ　ｚ−５Ｏｚ−ＣＨｚ　−
ＣＨｚ　−Ｓ−○またはチオ置換複素環式化合物、例え
ば６−チオアプニン： また、上記ジビニルスルホンで活性化した母材はジチオ
ール、例えば次の化合物と反応させることができる。
■−０−ＣＨ２−ＣＨｚ−５（ｌｚ−ＣＨ＝ＣＨｚ±Ｈ
３−ＣＩｌ□−ＣＩｌ２−３Ｈ→■−０−ＣＨ２−ＣＨ
２−３Ｏ□−ＣＨｚ−ＣＨｚ−３−ＣＨｚ−Ｃ１１２−
３ｌｌ後者の生成物はさらにジビニルスルホン（ＤＶＳ
）と反応して、次の新しい架橋生成物を得る。
■−〇−Ｃｌｌ　Ｚ−Ｃ）Ｉ　ｚ−３Ｏｚ−Ｃ）１２−
ＣＩ（ｚ−３−ＣＨ２−Ｃ）ｌ　Ｚ−３−Ｃ）ｌ　ｚ−
ＣＹＩｚ−５Ｏ２−Ｃ）＋　２−Ｃ１１２■ また、２度活性化した母材をメルカプトエタノールと反
応させて次の生成物を得ることもできる。
■−Ｃ１ｈ−ＣＩｌ□−５Ｏｚ−Ｃ１ｌｚ−ＣＨｚ−５
−ＣＨｚ−Ｃ１ｈ−５−ＣＨｚ−ＣＨｚ−ＣＨｚ−３ｏ
□Ｃ１＋□ 鳥 Ｉｔ　Ｏ−Ｃ１１□−Ｃ１１２−３ 置換重合体ネットの上記のすべての変更例は、本発明の
すべての吸着剤を生成する。
去犯側士 ブフナ炉斗内で粒状アガロースゲルを脱イオン水で洗浄
した。中間溶液からゲルを吸引し、１ｇのゲルを秤量し
て丸底フラスコ内の０．５ｍＡのＮａｚＣＯ３溶液中に
ＱＱ５した。０．１ｍＡのジビニルスルボンを加え、得
られた混合物を攪拌しながら室温で一晩反応させた。
このようにして得られた活性化ゲルをプフナ炉斗に移し
て、脱イオン水で洗浄した。
１ｍＡの０．１モルＮａＨＣＯ：＋溶液および０．１ｍ
Ａのメルカプトエタノールを加えながら、上記活性化ゲ
ルを反応容器に投入した。１５時間接触させた後、ゲル
をブフナ炉斗に移し、脱イオン水で洗浄した。
蛋白質吸着能についてゲルを試験した。０．５モルのに
２Ｓ０４を含むｐｌ＋７．６の０．１モルトリス−ＨＣ
ｊ！緩衝液中においてゲルをクロマトグラフの床に充填
した。
各分量の人間の血清をゲル床において種々のクロマトグ
ラフィーの実験に分けた。９０吸収単位（２８０ｎｍ）
を床に導入すると、３ｓ、ｉｉ位が吸着され、その後硫
酸カリウムを含まない緩衝液で床を洗浄することにより
、そのうちの２６単位が脱着された。残部は３０％のイ
ソプロパツールを含む緩衝液により脱着された。
次の実験では、１３００の吸収単位の透析した人間の血
清を供給した。２８０単位が吸着され、そのうちの２４
０単位が硫酸塩を含まない緩衝液で洗浄した時に脱着さ
れた。
従って、それぞれ３９％および２３％の血清蛋白が吸着
されたわけである。ゲルの電気泳動分析によれば、免疫
グロブリンが吸着材の主成分であり、また血清アルブミ
ンは、メルカプトエタノールと結合したジビニルスルホ
ンで活性化した寒天ゲルに全く吸着されず、またはほん
のわずがだけ吸着されたことがわかった。
実施例２ アガロース粒子の代りにセルロース粉末を使用し、かつ
ビニルスルホンの含有量を活性化に基づいて２０％引上
げたことを除いて、実施例１と同様にして効力検定を行
った。
吸着試験の結果によれば、血清蛋白の吸着能力は対応す
る量のアガロースゲルの約３０％であった。
天施貫盈 エピクロロヒドリンで処理したポリアクリルアミド（市
販のニーパーガイド（Ｅｕｐｅｒｇｉｔｅ）Ｃ１を用い
て、効力検定を行った。ｐＨ９の０．１モルのＮａＨＣ
Ｏ＋中においてＮａ５Ｈで１晩処理することにより、オ
キシランゲルをＳＨに変換し、その後実施例１における
寒天ゲルのように処理した。
ポリアクリルアミド誘導体の吸着能力は、ゲル床の１ミ
リリットル当りアガロ１−ス誘導体の約半分であったの ス１１丸先 メルカプトエタノールの代りにエタノールアミンを用い
たことを除いて、実施例１と同じ方法で効力検定を行っ
た。吸着試験の結果によれば、ごく少量の血清蛋白が吸
着されたにすぎず、かつ蛋白質は硫酸塩を含まない緩衝
液中でも緩衝液中に含まれるイソプロパツールによって
も脱着されなかった。
尖施開】 ０、１ｍβのメルカプトエタノールの代りにｏ、ｉｍｘ
のグリシンを用いたことを除いて、実施例１と同じ操作
を繰返した。１つの血清試験からのすべての蛋白質が実
施例１と同様に生成されたゲル床を通過した。
実施例６ メルカプトエタノールの代りに２．３−ジメルカプトエ
タノールを用いたことを除いて、実施例１と同じ方法で
効力検定を行った。吸着試験の結果によれば、１００吸
着単位の血清蛋白をカラムに導入すると、３２単位が吸
着され、そのうちの１５単位がＸ２ＳＯ４を除去した緩
衝液により溶出された。

Claims (7)

    【特許請求の範囲】
  1. （１）親水性分子重合体ネットにより全体的に、または
    部分的に浸透または表面被覆されている固相を有する分
    離および固定用吸着剤において、下記構造式で表わされ
    る連続鎖を有する置換基または架橋結合が上記重合体ネ
    ットに結合されていることを特徴とする吸着剤。 Ｙ−Ｓ−ＣＨ＿２−ＳＯ＿２−ＣＨ＿２−ＣＨ＿２−Ｘ
    −（式中、Ｙは未置換の、またはアルキル基、アシル基
    、ヒドロキシル基またはアミノ基で置換された、少なく
    とも１つの窒素原子を有する複素芳香族環、またはニト
    ロ基を有するフェニル基の形のπ電子系であり、Ｘはエ
    ーテルの酸素、チオエーテルのイオウまたは窒素である
    。）
  2. （２）固相が１ｍｍ以下の直径を有する粒子から成るこ
    とを特徴とする特許請求の範囲第（１）項記載の吸着剤
    。
  3. （３）分子重合体ネットが架橋ポリヒドロキシ重合体で
    あることを特徴とする特許請求の範囲第（１）項または
    第（２）項のいずれかに記載の吸着剤。
  4. （４）架橋ポリヒドロキシ重合体が多糖類であることを
    特徴とする特許請求の範囲第（３）項に記載の吸着剤。
  5. （５）架橋ポリヒドロキシ重合体が寒天またはアガロー
    スであることを特徴とする特許請求の範囲第（３）項記
    載の吸着剤。
  6. （６）分子重合体ネットが架橋ポリアミドであることを
    特徴とする特許請求の範囲第（１）項または第（２）項
    のいずれかに記載の吸着剤。
  7. （７）架橋ポリアミドがポリアクリルアミドであること
    を特徴とする特許請求の範囲第（６）項記載の吸着剤。
JP60105769A 1984-05-17 1985-05-17 蛋白質の分離および固定用吸着剤 Granted JPS615100A (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SE8402663A SE470099B (sv) 1984-05-17 1984-05-17 Sulfonaktiverade tioeteradsorbenter för separation av t ex protein
SE8402663-2 1984-05-17

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPS615100A true JPS615100A (ja) 1986-01-10
JPH044018B2 JPH044018B2 (ja) 1992-01-27

Family

ID=20355914

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP60105769A Granted JPS615100A (ja) 1984-05-17 1985-05-17 蛋白質の分離および固定用吸着剤

Country Status (5)

Country Link
US (1) US4696980A (ja)
EP (1) EP0168363B1 (ja)
JP (1) JPS615100A (ja)
DE (1) DE3572602D1 (ja)
SE (1) SE470099B (ja)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH07142997A (ja) * 1990-11-29 1995-06-02 Internatl Business Mach Corp <Ibm> ディレイ・ライン較正回路
WO2012128353A1 (ja) * 2011-03-24 2012-09-27 株式会社カネカ タンパク性物質結合性低分子化合物
JP2016190204A (ja) * 2015-03-31 2016-11-10 国立大学法人京都工芸繊維大学 クロマトグラフィー用充填剤

Families Citing this family (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4794002A (en) * 1985-11-01 1988-12-27 Monsanto Company Modified polymeric surfaces and process for preparing same
SE500574C2 (sv) * 1986-02-13 1994-07-18 Gel Innovation Handelsbolag Nitrilofor adsorbent för separation och immobilisering av proteiner, sätt att framställa adsorbentet, samt dess användning för fraktionering och immobilisering av biopolymerer
IL88599A0 (en) * 1987-12-10 1989-07-31 Cell Bio Group Ltd Glycoprotein cell growth modulating materials,their preparation and compositions containing them
SE462165B (sv) * 1988-02-26 1990-05-14 Porath Jerker Saett att paa en baerare adsorbera sammansatta proteinkomplex, saerskilt vid biospecifika bestaemningsmetoder
WO1989011871A1 (en) * 1988-06-01 1989-12-14 Cetus Corporation One-step chromatographic purification of immunotoxin conjugates using a thiophilic matrix
US5173293A (en) * 1989-02-23 1992-12-22 Becton Dickinson And Company Anti-T-cell antibodies as adjuvants
US5136032A (en) * 1989-12-07 1992-08-04 Daicel Chemical Industries, Ltd. Method for separating phosphopolyol compounds using a separating agent
US6552170B1 (en) * 1990-04-06 2003-04-22 Amgen Inc. PEGylation reagents and compounds formed therewith
DK130991D0 (da) * 1991-07-04 1991-07-04 Immunodex K S Polymere konjugater
DE4221711A1 (de) * 1992-07-02 1994-01-05 Bayer Ag Optisch aktive Aminosäuresulfoxid- und sulfon-Derivate, ihre Herstellung, ihre Polymerisation und Verwendung als Adsorbentien für die chromatographische Racematspaltung
US5446090A (en) * 1993-11-12 1995-08-29 Shearwater Polymers, Inc. Isolatable, water soluble, and hydrolytically stable active sulfones of poly(ethylene glycol) and related polymers for modification of surfaces and molecules
US5502022A (en) * 1994-05-16 1996-03-26 Biosepra, Inc. Chromatography adsorbents utilizing mercapto heterocyclic ligands
SE9401960L (sv) * 1994-06-07 1995-12-08 Sven Oscarsson Alkalibeständigt proteinadsorbent
TW555765B (en) * 1996-07-09 2003-10-01 Amgen Inc Low molecular weight soluble tumor necrosis factor type-I and type-II proteins
EP1386660B1 (en) 1996-08-30 2009-09-02 Upfront Chromatography A/S Isolation of immunoglobulins
SE9700769D0 (sv) 1997-03-04 1997-03-04 Pharmacia Biotech Ab Matriser för separation och separation som utnyttjar matriserna
GB9716454D0 (en) * 1997-08-05 1997-10-08 Univ St Andrews Polymer
US5912342A (en) * 1997-08-12 1999-06-15 Heinonen; Petri Compounds a containing a solid support
FR2784108A1 (fr) 1998-09-11 2000-04-07 Inst Francais Du Petrole Nouveaux polymeres reticules a base de derives bis-silanes, bis-thioethers, bis-sulfoxydes, bis-sulfones et butane di-yl de polysaccharides et d'oligosaccharides, et leur mise en forme en materiaux supports
US6660843B1 (en) * 1998-10-23 2003-12-09 Amgen Inc. Modified peptides as therapeutic agents
US6623655B1 (en) * 2000-04-24 2003-09-23 Sigma-Aldrich Co. Metal chelating compositions
GB2377447B (en) * 2001-04-18 2003-06-25 Amersham Biosciences Ab Isolation of dna molecules
SE0200543D0 (sv) * 2002-02-21 2002-02-21 Amersham Biosciences Ab Method of separation using aromatic thioether ligands
GB0219681D0 (en) * 2002-08-23 2002-10-02 Anglo Platinum Ltd Chromatographic medium
CA2500903A1 (en) * 2002-09-13 2004-03-25 Pall Corporation Preparation and use of mixed mode solid substrates for chromatography adsorbents and biochip arrays
US6783692B2 (en) 2002-10-17 2004-08-31 Dow Corning Corporation Heat softening thermally conductive compositions and methods for their preparation
US8021889B2 (en) * 2004-01-20 2011-09-20 Pall Corporation Chromatographic material for the absorption of proteins at physiological ionic strength
KR20070091098A (ko) * 2004-06-07 2007-09-07 에이브이티 플라즈마 리미티드 단백질 분리 방법
US8288169B2 (en) * 2005-01-21 2012-10-16 Argylla Technologies Surface mediated self-assembly of nanoparticles
US7964380B2 (en) * 2005-01-21 2011-06-21 Argylia Technologies Nanoparticles for manipulation of biopolymers and methods of thereof
US20090208919A1 (en) * 2005-01-21 2009-08-20 Argylla Technologies, Llp Particle matrix for storage of biomolecules
WO2007064281A1 (en) * 2005-12-02 2007-06-07 Ge Healthcare Bio-Sciences Ab Hydrophobic interaction chromatography
SG144809A1 (en) * 2007-01-11 2008-08-28 Millipore U K Ltd Benzimidazole compounds and their use as chromatographic ligands
WO2009076645A1 (en) * 2007-12-12 2009-06-18 Progentech Usa, Inc. Method for nucleic acids isolation
CN105506691A (zh) * 2015-12-28 2016-04-20 广东欧珀移动通信有限公司 一种不锈钢的表面处理方法、不锈钢外壳和移动终端
CN117920163A (zh) * 2018-11-06 2024-04-26 Jsr株式会社 有机硫化合物的制造方法

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3085072A (en) * 1963-04-09 Ion exchange resin
US3396198A (en) * 1961-12-19 1968-08-06 Agriculture Usa Vinylsulfonylethyl-hydroxy ethers
GB1023716A (en) * 1963-05-01 1966-03-23 I C I Organics Inc Hydrophobic vinyl sulphones and related sulphone compounds and the treatment of textiles therewith
BE686440A (ja) * 1965-09-20 1967-02-15
US3556714A (en) * 1967-02-08 1971-01-19 Stevens & Co Inc J P Novel unsymmetrical sulfones and method of crosslinking cellulosic materials therewith and reaction products produced thereby
US3875084A (en) * 1971-12-30 1975-04-01 Hooker Chemical Corp Polyvinyl halide thioether polymers
SE361320B (ja) * 1972-03-14 1973-10-29 Exploaterings Ab Tbf
DE2319495C2 (de) * 1973-04-17 1985-01-10 Yeda Research And Development Co., Ltd., Rehovot Verfahren zum selektiven, reversiblen Binden von Biomolekülen an ein Adsorbens in einer chromatographischen Säule
SE449225B (sv) * 1980-12-18 1987-04-13 Gelinnovation Hb Gelprodukt baserad pa partiklar innehallande galaktan for separationsendamal, molekyl- och partikelimmobilisering
GB2092470B (en) * 1981-02-10 1984-07-18 Tanabe Seiyaku Co Method for reducing the pyrogen content of or removing pyrogens from solutions contaminated therewith
US4374061A (en) * 1981-07-27 1983-02-15 Center For Blood Research, Inc. Means and methods for purifying Clq, Clr and Cls

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH07142997A (ja) * 1990-11-29 1995-06-02 Internatl Business Mach Corp <Ibm> ディレイ・ライン較正回路
WO2012128353A1 (ja) * 2011-03-24 2012-09-27 株式会社カネカ タンパク性物質結合性低分子化合物
US9273151B2 (en) 2011-03-24 2016-03-01 Kaneka Corporation Proteinaceous-substance-binding low-molecular-weight compound
JP2016190204A (ja) * 2015-03-31 2016-11-10 国立大学法人京都工芸繊維大学 クロマトグラフィー用充填剤

Also Published As

Publication number Publication date
SE470099B (sv) 1993-11-08
EP0168363A2 (en) 1986-01-15
DE3572602D1 (en) 1989-10-05
SE8402663D0 (sv) 1984-05-17
EP0168363A3 (en) 1987-03-25
EP0168363B1 (en) 1989-08-30
JPH044018B2 (ja) 1992-01-27
US4696980A (en) 1987-09-29
SE8402663L (sv) 1985-11-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4696980A (en) Sulfone activated thioether adsorbents for the separation of proteins and the like
US5728296A (en) Selective recognition of solutes in chromatographic media by artificially created affinity
Porath et al. Immobilized metal affinity adsorption and immobilized metal affinity chromatography of biomaterials. Serum protein affinities for gel-immobilized iron and nickel ions
US5092992A (en) Polyethyleneimine matrixes for affinity chromatography
US4677027A (en) Polymer coated particles having immobilized metal ions on the surfaces thereof
CA1320718C (en) Chromatographic material
EP0165912B1 (en) Thioether adsorbent intended for the separation of proteins and the like
US5085779A (en) Polyethyleneimine matrixes for affinity chromatography
JPH0724770B2 (ja) 金属イオン、蛋白質及びその他の無機あるいは有機物質用吸着剤
Maisano et al. Synthesis of new hydrophobic adsorbents based on homologous series of uncharged alkyl sulphide agarose derivatives
EP0180563A2 (en) An amphiphathic gel-product for chromatographic and batchwise adsorption
EP0491688B1 (en) Methods for activating polymeric carriers and compositions prepared therefrom for use in affinity chromatography
Porath et al. A new kind of “thiophilic” electron‐donor‐acceptor adsorbent
KR20050105496A (ko) 금속 킬레이트 친화성 리간드의 형성 방법
JP5306568B2 (ja) 吸着方法およびリガンド
EP0085661B1 (en) Metal ion adsorbent
CA1332598C (en) Polyethyleneimine matrixes for affinity chromatography
JP4570052B2 (ja) 疎水性相互作用クロマトグラフィー用リガンドの製造法
Šėrys et al. Preparation and characterization of cellulose based adsorbents for large scale hydrophobic interaction chromatography
EP1455920B1 (en) Separation method
Absolom Affinity chromatography
JP7114150B2 (ja) 新規のクロマトグラフィー媒体
Berna et al. Cyanocarbons as ligands for electron donor acceptor chromatography of human serum proteins
KR950004134B1 (ko) 어피니티 크로마토그라피용 폴리에틸렌이민 매트릭스
CA2190379C (en) Chromatography adsorbents utilizing mercapto heterocyclic ligands