JPS6157628A - 生理活性物質固定化膜の製造法 - Google Patents

生理活性物質固定化膜の製造法

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JPS6157628A
JPS6157628A JP59178044A JP17804484A JPS6157628A JP S6157628 A JPS6157628 A JP S6157628A JP 59178044 A JP59178044 A JP 59178044A JP 17804484 A JP17804484 A JP 17804484A JP S6157628 A JPS6157628 A JP S6157628A
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JP
Japan
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polysulfone
enzyme
compound
film
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Masao Goto
正男 後藤
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  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、生物活性物質固定化膜の製造法に関する。更
に詳しくは、酵素、微生物などの生物活性物質を固定化
せしめるのに用いられるポリスルホン膜の製造法に関す
る。
〔従来の技術〕
従来から、酵素、微生物などの生物活性物質を種々のM
洞°料上に固定化し、例えば医用材料、バイオリアクタ
ー、バイオセンサーなどの用途に用  。
いることが行われている。膜材料として代表的なポリス
ルホンを用いる場合には、ポリスルホンのドープ液に所
定の酵素を添加し、その混合液を製膜した後、酵素架橋
試薬であるグルタルアルデヒドの水溶液中に浸漬するこ
とによって、酵素を膜内部に固定化せしめている。
このような酵素の固定化方法によると、酵素と比較して
グルタルアルデヒド分子の方がきわめて小さいため、酵
素同士の架橋以外に、酵素分子中に存在するアミノ基同
士を架橋させてしまうため、酵素活性の失活を招き、活
性の低下や不安定化などがみられるようになる。また、
膜材料として用いられるポリスルホンは、酵素を固定化
するのに必要な官能基を有していないため、その固定化
力は更に弱いものとなっている。
〔発明が解決しようとする問題点〕
前述の如く、ポリスルホンは代表的な膜材料であり、し
かもそこに酵素を固定化せしめたものに各種の有用な用
途を有しているので、酵素固定膜の活性およびその持続
性の向上は、それの有用性を更に高めることが期待され
る。本発明者は、かかる課題の解決方法を求めて種々検
討の結果、アルデヒド化合物のみによって酵素を固定化
させるのではなく、その間にスペーサーとしてトリアミ
ン化合物を導入することにより、上記i!l!題が有効
に解決されることを見出した。このような解決方法はま
た、酵素だけではなく、微生物およびその構造中にアミ
ン基を有するたん白質などの生物学的活性を有する他の
物質にも適用することができる。
〔問題点を解決するための手段〕および〔作用〕従って
、本発明は生物活性物質固定化膜の製造法に係り、生物
活性物質固定化膜の製造は、ポリスルホンのドープ液中
にアルデヒド化合物およびトリアミン化合物を添加した
混合液を製膜することによって行われる。
ポリスルホンのドープ液は、ポリスルホンをジメチルホ
ルムアミド、ジエチルアセトアミド、ジエチルホルムア
ミド、ジエチルアセトアミド、モルホリン、N−メチル
−2−ピロリドン、テトラヒト田フラン、ジメチルスル
ホキシド、トリメチルホスフェートなどの溶媒中に、約
10〜30重電%程度の濃度で溶解させることにより調
製される。
このポリスルホンドープ液には、グルタルアルデヒド、
ホルムアルデヒド、アセトアルデヒドなどのアルデヒド
化合物および1,8−ジアミノ−4−アミノメチルオク
タンによって代表されるトリアミン化合物が、そのit
の状態あるいは水溶液などの溶液状態で、ドープ液10
−当りアルデヒド化合物として約0.2〜5.0d、ま
たトリアミン化合物として約0.1〜2.OTntの量
で添加される。
ポリスルホンドープ液からの製膜は、それをガラス板、
フッ素樹脂などの基質上にそれを流延し、乾燥させる方
法、水中に浸漬してゲル化させる方法、環状ノズルから
水中に紡糸してゲル化させる方法などによって、平膜状
、中空糸状などに成形することにより行われる。
このようにして製膜されたポリスルホン膜への生物活性
物質の固定は、例えば酵素の場合には一般に約0.1〜
10m9/ゴの濃度の水溶液中に浸漬することによう行
わ几る。
酵素としては、例えばグルコースオキシダーゼ、アミノ
酸オキシダーゼ、コレステロールオキシダーゼ、ウリカ
ーゼなどのオキシダーゼ類、ウリアーゼ、タレアキニナ
′−ゼ、グルタミナーゼ、ベニシリナーゼ、カタラーゼ
、パーオキシダーゼ、インベルターゼ、ムタロターゼ、
アミラーゼ、パパイン、トリプシンなどのプロテアーゼ
類、グルコースイソメラーゼ、ウロキナーゼなどが挙げ
られる。また、微生物としては、例えばシュードモナス
・フルオレッセンス、バチルス・ズブチリス、シュード
モナス・エルギノーザなどの細菌類、アスペルギルス・
ニガー、リゾプス・ホルモセンシスなどの糸状菌類、ス
トレプトミセス・グリセウスなどの放線菌類、酵母菌、
かびなどが挙げられるO 〔発明の効果〕 本発明に係る生物活性物質固定化膜においては、トリア
ミン化合物をスペーサーとして用いることにより、アル
デヒド化合物と酵素、微生物などの生物活性物質とが穏
かに結合されており、かつトリアミン化合物による主鎖
延長によって生物活性物質はポリスルホン分子と絡み合
っており、この結果として生物活性物質はポリスルホン
膜中に強固に結合されることになるので、高活性で脱離
し難く、活性安定性の指標である活性残存率の高い固定
膜が形成される。
〔実施例〕
次に、実施例について本発明を説明する。
実施例 ポリスルホン(日産化学製品P −3500) is重
量部およびジメチルホルムアミド85重量部よりなるド
ープ液1〇−中に150%グルタルアルデヒド水溶液2
.4−および1,8−ジアミノ−4−アミノメチルオク
タン1.OWLtを添加し、この混合液をガラス板上に
ガラス俸ヲ用いて製膜した。
得られたポリスルホン膜を1 cm X 1 cmの大
きさに切断し、濃度11y)/−の枯草菌起源アルカリ
プロテアーゼ(長潮産業販売品、酵素番号z、a、3.
4.4゜16)の水溶液中に、4℃の条件下に24時間
浸漬し、ポリスルホン膜に上記酵素を固定させた。その
彼、酵素固定膜は、100−の蒸留水で洗浄された。
この酵素固定膜の活性が、カゼイン基質を用い、アンソ
ン−荻原氏変法によって測定された。その測定条件は、
酢酸緩衝液中、−PH7,5、温度35℃、紫外線吸収
波数660 nmである。また、固定化酵素を、4℃の
酢酸緩衝液5−中に24時間浸漬しfc後、同様に酵素
活性を測定することにより、固定化酵素の脱離の有無が
判定された。更に、固定化酵素を、4℃の酢酸緩衝液中
に30日間浸漬した後の酵素活性を測定して、残存活性
率を算出した。得られた結果は、後記表に示される。
比較例 実施例において、1,8−ジアミノ−4−アミノメチル
オクタンが用いられなかった。得られた酵素固定ポリス
ルホン膜について、実施例と同様の測定が行われた。
なお、ポリスルホン膜中の固定化酵素針は、ケルダール
窒紫分析計(三菱化成製)の測定結果から、上記実施例
および比較例の農兵はぼ同一であることがi認されてい
る。

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 1、ポリスルホンのドープ液中にアルデヒド化合物およ
    びトリアミン化合物を添加した混合液を用いて製膜する
    ことを特徴とする生物活性物質固定化膜の製造法。 2、アルデヒド化合物がグルタルアルデヒドである特許
    請求の範囲第1項記載の生物活性物質固定化膜の製造法
    。 3、トリアミン化合物が1,8−ジアミノ−4−アミノ
    メチルオクタンである特許請求の範囲第1項記載の生物
    活性物質固定化膜の製造法。 4、酵素の固定化に用いられる特許請求の範囲第1項記
    載の生物活性物質固定化膜の製造法。 5、微生物の固定化に用いられる特許請求の範囲第1項
    記載の生物活性物質固定化膜の製造法。
JP59178044A 1984-08-27 1984-08-27 生理活性物質固定化膜の製造法 Granted JPS6157628A (ja)

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JP59178044A JPS6157628A (ja) 1984-08-27 1984-08-27 生理活性物質固定化膜の製造法

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JPS6157628A true JPS6157628A (ja) 1986-03-24
JPH047377B2 JPH047377B2 (ja) 1992-02-10

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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH01158054A (ja) * 1987-09-14 1989-06-21 Gelman Sciences Inc ポリアルデビトで活性化した膜
JP2002246891A (ja) * 2001-02-16 2002-08-30 Mitsubishi Electric Corp 入力バッファ回路および半導体装置
CN116120555A (zh) * 2023-04-14 2023-05-16 富海(东营)新材料科技有限公司 酶固载聚砜的制备方法及聚砜的应用

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JP2002246891A (ja) * 2001-02-16 2002-08-30 Mitsubishi Electric Corp 入力バッファ回路および半導体装置
CN116120555A (zh) * 2023-04-14 2023-05-16 富海(东营)新材料科技有限公司 酶固载聚砜的制备方法及聚砜的应用

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