JPS6196988A - 新規アクチノプラネス菌株により生産された抗生物質ａ２６２０１‐１および抗生物質ａ２６２０１‐２ - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は抗生物質の分野に関する。特に、本発明はアク
チノプラネス種（ｋａｔｉｎｏｐｌａｔｓｇｓ）Ａ２６
２０１の発酵によって生産された抗生物質Ａ２６２０１
−１およびＡ２６２０１−２に関する。これらの抗生物
質は動物の成長促進剤および抗菌剤として有用である。

微生物に対して活性である物質は多くの有利を用途を持
っている。これらの用途はヒトの健康管理、獣医学、動
物育種などの分野に含まれる。抗菌剤は病気の予防また
は治療および動物の成長促進のような多くの望ましい効
果を有している。

いくつかの理由のために新しい抗菌剤の出現が望まγし
てお９．こ１らの理由には治療しようとする動物の既知
抗菌剤に対する不耐性、ならびに既知抗菌剤に対する耐
性菌株の発生が含まれる。従って、新しい抗菌剤を生産
する未知の微生物の性状決定が非常に望まれている。

本発明は新規微生物アクチノプラネス種Ａ２６２０１の
発酵によって生産される生物学的に活性な新規物質、お
よびそれらの生産方法に関する。この微生物はアクチノ
プラネス属の一員であるが、既知のアクチノプラネ゛１
種のいずれにも属さず、従ってアクチノプラネスのまだ
知られていない菌種である。本明細書において述べるこ
の菌種由来の突然変異体、変異体（突然変異以外の原因
によるもの）または組換え体を使用する方法も１本発明
の範囲内に含まれると考えられる。アクチノプラネス種
Ａ２６２０１由来の突然変異体。

変異体または組換え体は既知の化学的または物理的技術
により、あるいは当分針で認められるその他の技術によ
シ得ることができる。アクチノプラネス種Ａ２６２０１
の継代培養はメリーランド州ロックビル、ノセークロー
ン・ドライブ１２３０１のアメリカン・タイプ・カルチ
ャー・コレクションにＡＴＣＣ３９５７３として寄託さ
れた。１つの面において、本発明はアクチノプラネス種
Ａ２６２０１ｔたはその突然変異体、変異体もしくは組
換え体の生物学的に純粋な培養物に関する。

本発明はまた微生物アクチノプラネス種Ａ２６２０１ま
たはその突然変異体と、該微生物の培養に必要な栄養素
を含む水性栄養培地とからなる培養培地に関する。

本発明の他の面は、適当な水性培地で好気的発酵条件下
に微生物アクチノプラネス種Ａ２６２０１またはその突
然変異体、変異体もしくは組換え体を培養することから
なる生物学的に活性な物質の生産方法に関する。アクチ
ノプラネス種Ａ２６２０１の発酵によって生産される本
発明の生物学的に活性な新規物質は、抗菌作用および／
または成長促進作用を有する。これらの物質は便宜上「
抗生物質」と称されるであろう。「粗ブイヨン物質」と
いう用語は、アクチノプラネス種Ａ２６２０１による発
酵後の抗菌作用および／または成長促進作用を有する培
地の乾燥アリコートまたは水性アリコートからなる未精
製の抗生物質混合物を意味する。「抗生物質Ａ２６２０
１Ｊという用語は、粗ブイヨン物質から得られる部分精
製された抗生物質混合物を意味する。この部分精製され
た物質（２つの新規活性成分を含む）を得るために、逆
相調製用液体クロマトグラフィーおよびアセトニトリル
ｌ水の段階的勾配溶離剤が使用された。　　　　　′［
抗生物質Ａ２６２０１−ＩＪおよび「抗生物質Ａ２６２
０１−２Ｊという用語は、粗ブイヨン物質および抗生物
質Ａ２６２０１に含まれる２つの分離精製された活性成
分を意味する。「適当な微生物」という用語は、−前記
抗生物質の少なくとも１つを生産することができるアク
チノプラネス種Ａ２６２０１またはその突然変異体、変
異体もしくけ組換え体のような抗生物質Ａ２６２０１−
１および／まだは抗生物質Ａ２６２０１−２を生産しう
る微生物を意味する。

本発明抗生物質はそれらの化学的および物理的性状なら
びにそれらの抗菌活性範囲の点で既知物質と相違してい
る。「阻止」という用語は微生物の抑制、防除、殺滅、
静止または破壊のような抗菌作用、あるいは増殖速度を
よシ遅くする微生物増殖の妨害を意味する。「有効量」
という用語は。

微生物の阻止を・もたらすのに十分な生物学的活性物質
の量を意味する。

本発明はまた適当な栄養培地でアクチノプラネス種Ａ２
６２０１を増殖させ、そしてその培地から抗生物質を単
離することからなる本発明の新規抗生物質の生産方法に
関する。本発明抗生物質は抗菌剤および／または単胃動
物および反すう動物の成長促進剤として有用である。「
動物」という用語は成長速度および／または飼料転化効
率を増すことが望ましい動物を意味し、「単胃動物」と
いう用語は成長速度および／または飼料転化効率を高め
ることが望ましいところの発達したこぶ胃機能をもたな
い豚や家禽のような動物を意味し。

「反すう動物」という用語は成長速度および／または飼
料転化効率を増すことが望ましいところの発達したとぶ
胃機能を有する牛や羊のような動物を意味する。「成長
促進量」という用語は、有意な副作用を生ずることなく
処理動物の成長速度お、よび／または飼料転化効率を増
すのに十分な抗生物質の量を意味する。「標準動物飼料
」という用語は描分野で普通に知られる単胃動物および
／または反する動物用の通常の動物飼料を意味する。

アクチノプラネス属は［限定細菌学におけるベルゲイの
マ＝ニアｋ　（Ｂａｒｇａｙ’ｓ　Ｍａｎ１＆ａｌ　ｏ
ｆＤｍｔａｒｔｎｉ＊ａｔ４ｖｅ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ
ｏｇｙ）Ｊ第８版、ウィリアムス＆ウイルキンス社、１
９７４年において、大きさが３〜２０×６〜３０μ惧の
胞子溝を有するものとしてその性状決定がなされている
。

その胞子溝は球状、はぼ球状１両端が丸い円筒状。

または非常に不規則で、１５る。胞子は直径が１〜１．
５μ濯の球状またはほぼ球状であって、コイル状または
ほぼ直鎖状に見出され、あるいは胞子嚢内に不規則に配
置されている。この胞子はまた長さが２〜６μｍの極性
鞭毛の束によって運動性である。菌糸は直径が０．２〜
２．６μ毒であシ１分枝状、不規則なコイル状１曲線状
または直線状であって隔壁をほとんど持たない。ある種
の寒天りに直立の柵状菌糸を形成し、Ａ、アルコメニア
クス（Ａ、　ａｒｍａｎｉａａ％ａ）を除いて気中菌糸
は貧弱である。大部分の菌種はペブトンクザイツク（Ｃ
ｇａｐｓ＆）およびある一種の他の寒天とにおいて光沢
のある色彩を帯びており、その色は橙色、赤色、黄色、
すみれ色および紫色である。若干の菌種は寒天を青、赤
、黄、緑または褐色に着色させる分散性色素を生成する
。有機増殖因子を全く必要としない。若干の菌種からは
硫化水素が生成される。この属の菌種は全て個性好気性
菌である。増殖に適する温度範囲は１８〜３５℃である
。この微生物は各種の植物の丘に見出され１毛、ひずめ
およびヘビの皮のような死亡動物の部分にはあまシ見ら
れない。

研究された２つの菌種のＤＮＡのグアニン＋シトシン含
有量は７２．１〜７２．６モルチである。

新規微生物、であるアクチノプラネス種Ａ２６２０１は
土壌試料から単離された。この菌種は種々の栄養培地上
でよく増殖し、肉眼で見える特徴ある形態を示す。例え
ば、オートミール寒天とで５−７７日間インキュ（−ジ
ョンした後のコロニーハ直径が約５〜６ｆｉであって、
波形表面を有する。貧弱な菌糸と橙色の色素を生成する
。また、その他の若干の培地ではたくさんの気中菌糸を
生成する。

寒天培地で増殖させる場合に、アクチノプラネス種Ａ２
６２０１は大抵胞子嚢を作り、これらの胞子溝はしばし
ばｉ々のコロニーの中央部分（見られる。胞子溝の形状
は球形ないし卵形であシ。

一定の外形を有し、そして直径は約１５〜２５μｍであ
る。胞子嚢胞子は直線状であシ、長さが約１５μ常であ
って直径が約２μｍである。胞子は非常に運動性であシ
、直径が約１．５〜２μ雷の球形ないし卵形である。

アクチノプラネスｇｉＡ２６２０１の発酵後、抗生物質
Ａ２６２０１−１およびＡ２６２０１−２は発酵ブイヨ
ン中に見出される。粗ブイヨン物質はいろいろなりロマ
トグラフ技術などの標準精製法を使って部分精製するこ
とができる。好適な方法は抗生物質Ａ２６２０１をもた
らすところの段階的勾配を使用する調製用逆相液体クロ
マトグラフィである。その後、抗生物質Ａ２６２０１は
半調製用逆相高性能液体クロマトグラフィーのような分
離技術によって抗生物質Ａ２６２０１−１と抗生物質Ａ
２６２０１−２とに分割される１次いで、それぞれの抗
生物質は分離方法において用いた緩衝剤および溶媒を全
て除去することによシさらに精製される。その後、精製
された抗生物質は凍結乾燥する。

抗生物質Ａ２６２０１はアミノ酸を含み、また細胞壁の
合成を阻止する。これらの性質は他のアクチノプラネス
種によって生産される既知抗生物質に共通するものであ
る〔米国特許第４２３９７５１号、同第４３０３６４６
号、同第４３７５５１３５１１〜５１５（１９７６）を
参照されたい〕。

アクチノプラネス種Ａ２６２０１によって生産される抗
生物質は、アクチノプラネス・ガルバジネンシス（Ａａ
ｔｉｎｏｐｌａｎｇｓ　ｇａｒｂａｄｉｓｇｎｔｔｉｓ
）　　またはアクチノプラネス・リグリアエ（Ａｃ　ｔ
　ｉ％ｏｐｌα％ａ８１ｉｇｔｃｒｉａｇ）によって生
産されるガルジマイシン（ｙａデｇｔｍｙａｉ％）　釦
非常に類似している。しかし。

抗生物質Ａ２６２０１−　１．　抗生物質Ａ２６２０１
−２およびガルジマイシンはそれらのそれぞれの物理的
および化学的性質によって区別することができる。さら
に、アクチノプラネス種Ａ２６２０１゜アクチノプラネ
ス・ガルバジネ／シスおよびアクチノプラネス・リグリ
アエはそれらの培養特性。

生化学的および生理学的性質、ならびに桓々の炭素源を
利用するそれらの能力によって区別することができる。

本発明の新規抗生物質は、アクチノプラネス種Ａ２６２
０１をその増殖に適する栄養培地で好気的条件下に培養
することによりｓ造される。例えば、本明細書に記載の
維持培地１種子培地および発酵培地は約２０〜３５℃（
好適には２８〜３０℃）の温度で約２〜１４日間（好適
には５〜７日間）接種およびインキュベートされる。水
性培地を用いて攪拌下にインキュベートすることが好ま
しい。接種前の培地のｐＨは約６〜８（好適には６．８
〜７．３）である。

アクチノプラネス種Ａ２６２０１は培地の約０．１〜１
０％の＃度のカザミノ酸、ＨＹ−８ＯＹ（商標名）、Ｎ
−Ｚアミン、脳心臓浸出液、トリブチカーゼ・ライ（Ｔ
ｒｙｐｔｉａａａｇ　５ｏｙ）、ペプトンおよびカシト
ン（Ｃαｓｓｔｏｓｇ）のような慣用窒素源の少なくと
も１種を利用できる。炭水化物源はグルコース、　澱粉
、マンノース、フルクトース、クリセロール、ラクトー
ス、スクロースおよびマルトースのような普通の炭水化
物の少なくとも１種であシ得、培地の約０．１〜１０％
の濃度のフルクトースとスクロースが好適である。必須
微量鉱物質および微量元素も培地に添加し得る。しばし
ば。

この種の微量鉱物質および微量元素は、微生物の増殖条
件を満足させるのに十分な量で、培地の他の諸成分中に
不純物として存在する。

トリプトファンまたはバリ／のような少なくとも１種の
アミノ酸を培地に添加すると、発酵作用がさらに刺激さ
れる。

抗菌活性を測定するために、ウェルシュ菌（Ｃｌｏａｔ
ｒｉｄｉｕｍ　ｐｇｒｆｒｉｎｇａｎａ）　　またはサ
ルシナ・ルテア（Ｓａｒｃｉｎａ　ｌｓｔｇａ）　　の
ような感受性菌を使用して検定を行うことができる。

本発明抗生物質は微生物の阻止が望まれるいろいろな用
途に使用される。本抗生物質は広く用いられている既知
抗生物質忙耐性の病原菌および非病原菌に対して活性で
ある。この活性ゆえに５本発明抗生物質は単独でまたは
薬学的に受容できる担体と組合せて治療用薬剤として使
用できる。

本発明抗生物質またはこれを含む組成物はさらに、対象
物および器具を消毒するための消毒剤として使用できる
。この新規抗生物質は細菌またはそれらの生息地と細菌
を阻止するのに十分な量とを接触させること忙よシ抗菌
剤としても使用できる。本発明抗生物質は微生物による
生産品の分解を防ぐために、微生物による分解を受けや
すい種種の生産品の中に配合することができる。

この新規抗生物質はさらに動物における成長促進剤とし
ても使用できる。本抗生物質は当分野で認められた通常
の手段を使って単胃動物または反すう動物へ投与される
（例えば、米国特許第４１８５０９１号、同第４２０９
５１８号、同　′第４３３３９２３号に開示された方法
を参照されたい）。単胃動物の場合は抗生物質を標準動
物飼料と組合せて投与し、この際抗生物質の濃度は最終
飼料組成物の約５〜２５　ｐｐｍ　　である。新規抗生
物質はまた標準動物飼料と組合せて反すう、動物に投与
することができ、この際の抗生物質のＳ度は最終飼料組
成物の約２〜２５　ｐｐｔｐｙ　　である。

本発明は以下の実施例によってさらに説明されるが、こ
れらの実施例は本発明の範囲を限定するものとして解釈
されるべきでない。

実施例１ アクチノプラネス種Ａ２６２０１　（ＡＴＣＣ３９５７
３）と本明細書において呼ばれる新しいアクチノプラネ
ス種を単離した。この菌種は抗生物質Ａ２６２０１−１
および抗生物質Ａ２６２０１−２の両活性物質を生産す
ることができる。アクチノプラネス種Ａ２６２０１なら
びに２つの関連したアクチノプラネス種（Ａ、ガルバジ
ネンシスおよびＡ、リグリアエ）のそれぞれ異なった培
地における培養特性を表１に示す。この培養特性は２８
〜３０℃で５〜７日間インキュベートした後に決定した
。

表１の文字数字式コート９はマエリーおよびポールによ
シ示された標準色の参照記号を意味する［”Ａ、Ｍａａ
ｒｙ　　およびＭ、　Ｐａｕｌのディクショナリー・オ
ブ・カラー（Ａ　　Ｄｉｃｔｉｏ引ｚｒｙ　ｏｆ　Ｃｏ
１０デ）。

第２°版、１９５０年、マツクグロウーヒル、ニューヨ
ークを参照〕。

表１ アクチノプラネス種の培養特性 Ａ２６２０１菌種 ベネット寒天　　　　　中程度の増殖、でこぼこな表（
Ｂ＃％％１１　ｔ　ｔ’ｓ　Ａｇａｒ）　　面、橙色な
いし淡橙色りザにツク・グルコ−中程度の増殖、隆起し
たでこス寒天　　　　　　　　ぼこな表面、橙色１０／
Ｇ／９クザはツク・スフロー　中程度の増殖、隆起した
でこス寒天　　　　　　　　ぼこな表面、菌糸あシ９／
Ａ培　地　　　培養特性 □ グルコース・アスパラギン厚味のある増殖、丸い平滑寒
天　　　　　　　　　　集落、橙色、貧弱な菌糸。

貧弱な胞子界 ジャガイモ寒天　　　　　貧弱な、橙色Ｑ％丸い平滑集
落 普通寒天　　　　　　　　橙色の貧弱な増殖１０／Ｇ／
６、胞子嚢少ない、黄褐色 の分散性色素１３／Ｅ／４ ペプトン・グルコース寒　　中程度の増殖、橙色のてこ
天　　　　　　　　　　　ぼこな表面１０　／Ｇ／　９
％褐色の分散性色素１３／Ｅ／８ ジャガイモ小片　　　　　薄い貧弱な増殖、しわ状表面
、淡橙色１０／Ａ／３ 酵母エキス・麦芽寒天　　厚味のある増殖、橙色のしわ
状表面、胞子嚢、菌糸９ ／Ａ／２ オートミール寒天２０％　　貧弱な増殖、橙色゛の波状
表面、広がった貧弱な菌糸９ ７Ａ／２ 培　地　　培養特性 無機塩寒天　　　　　　中程度の増殖、淡橙色の薄層１
０／Ｅ／４ グリセロール・アスパ　増殖、隆起した丸い平滑集落。

ラギン　　　　　　　　橙色、桃色の気中菌糸９／Ａ／
にプトンー酵母エキス　非常に少ない増殖、橙色１０／
鉄寒天　　　　　　　　Ｇ／９．紫色の可溶性色素５６
／チロシン寒天　　　　　厚味のある増殖、隆起した丸
い橙色の平滑集落１０／Ｇ／９．貧 弱な菌糸９／Ａ／２ スキムミルク寒天　　　中程度の増殖、橙色の丸い平滑
集落１０／Ｇ／９％貧弱な胞子界 ９／Ａ／２．褐色の可溶性色素 １３／Ｅ／８ 寒天　　　　　　　　　増殖しない 培　地　　培養特性 ベネット寒天　　　　十分な増殖、しわ状表面、淡橙色 クザイツク・グルコ−貧弱な増殖、平滑表面、淡橙ス寒
天　　　　　　　　色、微少の未発達気中菌糸クザベツ
ク・スフロー　貧弱な増殖、堅い表面、淡橙ス寒天　　
　　　　　　色 グルコース・アスパラ　　十分な増殖、堅い表面、Ｒ橙
ギン寒天　　　　　　　色 ジャガイモ寒天　　　　十分な増殖、しわ状表面、橙色
または淡褐色、微少の未発 達気中菌糸 普通寒天　　　　　　　中程度の増殖、堅い表面、橙色
または淡褐色 ペプトン・グルコース　非常に貧弱な増殖、平滑表面。

寒天　　　　　　　　　　透明 ジャガイモ小片　　　　貧弱な増殖、しわ状表面、橙色 酵母エキス・麦芽寒天　十分な増殖、しわ状表面、黄褐
色 オートミール寒天２０チ　中程度の増殖、平滑、不透明
。

端部ではクリーム色または橙 色 無機塩寒天　　　　　　中程度の増殖、平滑表面、深橙
色 グリセロール・アスパ　中程度の増殖、平滑表面、橙う
ギン寒天　　　　　　色 イブトン−酵母エキス　貧弱な増殖、ざらざらした表鉄
寒天　　　　　　　　面、暗褐色、褐色の色素チロシン
寒天　　　　　十分な増殖、堅い表面、コーヒー色、か
すかにＰＨ１色の色素 スキムミルク寒天　　　十分な増殖、しわ状表面、深橙
色 寒天　　　　　　　　　非常に貧弱な増殖、平滑で薄い
、透明 はネット寒天　　　　　十分な増殖、堅い表面培　地　
　培養特性 クザにツク・グルコース　　十分な増殖、平滑で薄い表
寒天　　　　　　　　　　面、橙色、胞子嚢の十分な生
産 クザにツク・スクロース　　貧弱な増殖、淡橙色、胞子
寒天　　　　　　　　　　嚢の中程度の生産グルコース
・アスパラギ　　モ分な増殖、平滑表面。

ン寒天　　　　　　　　橙色、若干の胞子嚢ジャガイモ
寒天　　　　　十分な増殖、平滑表面、黄褐色 普通寒天　　　　　　　　十分な増殖、平滑表面、橙色 はプトン・グルコース寒　十分な増殖、しわ状表面、天
　　　　　　　　　　深橙色 ジャガイモ小片　　　　　貧弱な増殖、しわ状表面。

淡橙色 酵母エキス・麦芽寒天　　十分な増殖、わずかにしわ状
の表面、淡橙色または淡 黄褐色 オートミール寒天２０％　　十分な増殖、平滑で薄い衣
培　地　　培養特性 面、淡橙色、若干の胞子嚢。

淡黄色の可溶性色素 無機塩寒天　　　　　　十分な増殖、平滑表面、橙色。

若干の胞子嚢、鮮黄色の可溶 性色素 グリセロール・アス　　十分な増殖、平滑表面、淡橙パ
ラギン寒天　　　　　色１色素の十分な生産、鮮黄色の
可溶性色素 イブトン−酵母エキス　中程度の増殖、平滑表面、橙鉄
寒天　　　　　　　　色 チロシン寒天　　　　　十分な増殖、平滑表面、淡江隅
色、胞子嚢の良好な生産。

浅紅褐色の可溶性色素 スキムミルク寒天　　　十分な増殖、わずかに堅い表面
、深橙色、黄色の可溶性色 素 寒　天　　　　　　　　極めて貧弱な増殖、薄くて平滑
、無色 表２において、アクチノプラネス種Ａ２６２０Ｉ４アク
チノプラネス・ガルバジネンシスおよびアクチノプラネ
ス・リグリア二の各種炭水化物源の利用能力について比
較する。通常の方法を用いて比較した。各炭水化物の最
終濃度は全培地の１％であった。

表２ 炭水化物利用パターン Ａ０種 Ｃ５アラビノース　　　　　＋　　　　　　　＋　　　
　　　　　＋キシロース　　　　　　＋　　　　　　　
＋　　　　　　　＋０６グルコース　　　　　　　＋　
　　　　　　＋　　　　　　　　＋フルクトース　　　
　　＋　　　　　　　＋　　　　　　　　＋マンノース
　　　　　　＋　　　　　　　＋　　　　　　　１マン
ニトール　　　　　＋　　　　　　　　　　　　　　　
＋イノシトール　　　　＋／−＋ （Ｃｓ）２スクロース　　　　＋　　　　　　　　　　
　　　　　＋（Ｃ６）３ラフイノース　＋／−−− （Ｃ６）％セルロース 澱粉　　＋　　　＋　　　＋ ＋　　；利用 ＋／−；不十分な利用 −＝未利用 表３において、アクチノプラネス種Ａ２６２０１、アク
チノプラネス・リグリアエおよびアクチノプラネス・ガ
ルバジネンシスの生化学的ならびに生理学的性状につい
て比較する。全ての生化学的・生理学的性状は慣用方法
に従ってベトリ皿の上で行うか、あるいはＡＰニストリ
ップ〔アナリタプ・プロダクト社（ｋｎａｌｙｔａｂ　
Ｐｒｏｄｕｃｔｓ）、　　プレインビュー、ニューヨー
ク州〕のとで行った。

＋＋＋＋＋＋＋ ＋＋＋＋＋＋＋ 葛 ＋＋＋　　　　＋　　　＼　　　＋　　　＋＋ 顕微鏡的および肉眼的形態からすると、菌種Ａ２６２０
１はアクチノプラネス属の一員であると認められる。そ
の他のデータは、アクチノプラネス種Ａ２６，２０１が
Ａ、リグリアエおよびＡ、ガルバジネンシスのような密
接に関係のある菌種と相違して新しいアクチノプラネス
種であることを示している。表３に示すように、アクチ
ノプラネス種Ａ２６２０１はゼラチン液化、エスクリン
加水分解。

馬尿酸加水分解、カタラーゼ、ロイシンアミノはブチダ
ーゼおよびアルギニンデヒドロゲナーゼ活性に関してＡ
、リグリアエと相違し、一方アクチノプラネス種Ａｆ６
２０１はウレアーゼ活性、ゼラチン液化、エスクリン加
水分解、カタラーゼ、ロイシンアミノペプチダーゼおよ
びアルギニンデヒドロゲナーゼ活性に関してＡ、ガルバ
ジネ／シスと相違している。表２はアクチノプラネス種
Ａ２６２０１　カマンニトール、イノシトール、スクロ
ース、ラクトースおよびラフィノースの利用の点でＡ、
リグリアエと相違し、一方イノシトール、ラクトースお
よびラフィノースの利用の点でＡ、ガルバジネンシスと
相違している。これら３つの菌株は３つの別々の菌種と
しての分類を是認するのに十分な程度に相違している。

実施例２ 表４に示す培地Ｅ２５．修飾ｇ２５．ＥＩＯおよびＣＡ
ＡＹＥは種子培養物および発酵培養物の増殖に適してい
る。表４に示すオートミール寒天は培養維持に適してい
る。

実施例３ オートミール寒天斜面培地にアクチノプラネス種Ａ２６
２０１の純粋培養物を接種し、２８〜３０℃で７日間イ
ンキュベートした。次に、この維持培養物を使って、５
００ｄの滅菌蓋つき培養フラスコ内の無菌修飾Ｅ２５種
子培地１００Ｍ１！に接種した。この種子培養物は約２
０ＯＲＰＭの振と５装置を用いて２８〜３０℃で２日間
インキュベートした。発酵後、この種子培地１０ｍを使
って、５００ｄの滅菌蓋つき培養フラスコ内の無菌修飾
Ｅ２５発酵培地１００！ＩＬｌに接種した。得られた発
酵培養物は約２０ＯＲＰＭの振と５装置を用いて２８〜
３０℃で６日間インキュベートした。

修飾Ｅ２５の種子培地および発酵培地の、Ｅｌは接種以
前に約７であった。

発酵ブイヨンの抗菌作用はＰ紙−円板寒天拡散法（ｐａ
ｐｅｒ−ｄｉｓｃ　ａｇｔＬｒ　ｄｉｆｆｕｓｉｏｎ　
５ｙａｔａｔｎ）を用いて測定した。Ｅ２５培地中の菌
８ｆＡ２６２０１によって生産された発酵ブイヨンの一
部は一２０℃で凍結貯蔵し、そして全部の検定の標品と
して使用した。１μｌの抗生物質標品が１単位の活性を
含むものと任意に定めだ。標品の各種希釈液を作り。

各希釈液２０μｌをピイットではかつて濾紙円板とに含
ませた。このディスクを予め播種しておいたウェルシュ
菌（Ｃ，ｐｇｒｆｒｉｎｇｇｎｓ）　　平板ｈｌ’１．
ｆＥ＜いた。ディスクは乾燥させて、抗生物質を寒天中
に拡散させた。その後、平板を３７℃で１６〜２４時間
嫌気的にインキュベートし、その険阻正帯の大きさを測
定した。標準曲線を作羨し、実験　　　　′データをこ
の標準曲線と比較して抗生物質の濃度を決定した。

アセトニトリル（ＣＨ３ＣＮ）　／水の段階的勾配溶離
系を使用する逆相調製用液体クロマトグラフィー（Ｗａ
ｔａｒｓＰｒｇｐ−５００ＬＣＥ３１ａｔｇｍ）によっ
て。

粗ブイヨン物質から活性成分（すなわち抗生物質Ａ２６
２０１−１および抗生物質Ａ２６２０１−２）を単離し
た。粗ブイヨン物質を濾過後、ｆ（７に調整してカラム
につめ、２０％アセトニトリル／水で洗い、次に３０％
アセトニトリル／水で活性成外を溶離した（３０％アセ
トニトリル／水での活性成分のこの調製は抗生物質Ａ２
６２０１である）。活性成分のその後の溶離は１００％
アセトニトリル・を使用しても起こらなかった。３０％
アセトニトリル中の活性成分は、半調装用逆相ＨＰ　Ｌ
　Ｃ（Ｚｏｒｂａｚ　　（デュポン社、商標名）逆相（
Ｃ□５）ＯＤＳ　　ＨＰＬＣカラム（内径９．４ｍｘ長
さ２５０葭））でトリエチルアミン−燐酸緩衝液（トリ
エチルアミンを用いてｐｆ（３，５に調整した０、　２
５　Ｎ　　Ｈ３Ｐｏ４）中の３４チＣＨ３Ｃ，Ｎ　　を
使って互いから昼離した。抗生物質Ａ２６２０１−１を
含有する分画と抗生物質Ａ２６２０１−２を含有する分
画との２つの活性分画が得られた（第１図参照）。

抗生物質Ａ２６２０１−１および抗生物質Ａ２６２０１
−２を含有する上記分画はそれぞれ次のように処理した
。活性分画を逆相（Ｚｏｒｂａｚ　。

ＯＤＳ）　　カラムに徐々に流し込み、そのカラムをＨ
２Ｏで洗い１次に１氏り６度のアセトニトリル／Ｈ２０
（５襲ＣＨ３ＣＮ　、　１０％ＣＨ３ＣＮ、　１５％Ｃ
Ｈ３ＣＮおよび２０％Ｃ１（３ＣＮ）で約１時間にわた
って洗った。精製成分け３５％ＣＨ３ＣＮ／Ｈ２０で溶
離した。

回転蒸発によシ溶剤（ｃａ３ＣＮ）　　を除去した後、
この溶液を４８時間凍結乾燥して、それぞれの場合に白
色微粉末の精製抗生物質を得た。

実施例５ 、抗生物質Ａ２６２０１−１および抗生物質Ａ２６２０
１−２の性状決定 Ａ）高性能液体クロマトグラフィー（ＨＰＬＣ）による
決定： 炉遇した粗ブイヨン物質をＣ−１８逆相分析用ＨＰＬＣ
カラムに注入し、３０％紫外５　（ｗ　ｖ　）ダレ−１
ナセトニトリル／　７０　％　　３２　ｍｔＡギ酸アン
モニウム水溶液を使用して溶離した。流速ば２ｄ／９−
であシ、縣ν検出は２２０ナノメートルで行った。抗生
物質Ａ２６２０１−１の保持時間は５．１１分であ）、
そして抗生物質Ａ２６２０１−２の保持時間は７，３７
分であった。

Ｂ）紫外線吸収スにクトル： 抗生物質Ａ２６２０１−１および抗生物質Ａ２６２０１
−２の紫外線吸収スペクトルをそれぞれ第２図および第
３図に示す。この測定のためにパーキン−エルマー・ラ
ムｐ’　−３＆光光度計（メチルアルコール吸光度の自
動的基底線補正を有する）を使用した。２つの抗生？！
７質の最大吸収は次の通シである。

濃　　度 １００チメチルアルコール　　　　　０．１％０、ＩＮ
塩酸含有メ升げルコール　　　　０．１％０、ＩＮ水酸
化ナトリウム含有　　　　０．１％メチルアルコール λ　帽Ｉ　　（ナノメートル） 抗生物質　　　　　　　抗生物質 Ａ２６２０１−Ｉ　　　　　　　Ａ２６２０１−２２０
５．７，２２０．８．　　　２０７．３，２２０．５゜
２９１（小吸収）、　　　　２７３（小吸収）。

２１８（変曲点）　　　　　２８２（小吸収）。

２９１．２　（小吸収）。

２１８（変曲点） ２０５．３，２２０．８．　　　２０４，２２０．９゜
２９２（小吸収）、　　　　２７１．３（小吸収）。

２１８（変曲点）　　　　　２８０．２（小吸収）。

２８９．５　（小吸収）。

２１２．３　（変曲点） ２１７．４，２９２．７　　　２１８．６゜（小吸収）
　　　　　　　２８０（小吸収）。

２８９．３　（小吸収） Ｃ）赤外線分析： 抗生物質Ａ２６２０１−１および抗生物質Ａ２６２０１
−２はＫＢデ　錠を使ってフーリエ変換赤外線分析にか
けた。抗生物質Ａ２６２０１−１および抗生物質Ａ２６
２０１−２の赤外線スにクトルをそれぞれ第４図および
第５図に示す。これらの図面は２つの成分間の類似性を
明示しておシ、かつ１６５０ｃｍ−”　　および１５２
０ｃｒｎ−”　　における二級アミド結合による吸収か
らはプチドの特性を示している。２６８０ｃｒＩＬ−１
には鋭いピークが現われ、また１　０００〜１０３０ｃ
ｍ−”　　には分裂したピークが見られる。

Ｄ）アミノ酸および炭水化物の分析： 抗生物質Ａ２６２０１−および抗生物質Ａ２６２０１−
２のアミノ酸分析ｆｉ、両方の＃：分中に次のアミノ酸
が存在することを示した：アラニン、システィン、クル
タミン酸、Ｉ’）シン、インロイシン、ロイシン、セリ
ン、トリプトファンおよびバリ／。トリプトファン以外
の全てのアミノ酸測定は、尚外野で知られた標準方法に
従って。

酸による加水分解その後の高性能液体クロマトグラフィ
ーによシ行われた。システィン測定の場合は酸加水分解
に先立って過ギ酸で試料を酸化した。

トリプトファン測定の場合はアルカリによる加水分解を
ともなうフグリ（Ｈｓｇｌｉ’）　　およびムーブ（Ｍ
ｏｏｒｓ）　　の、ＴＢＣ，２４７，２８２８（１９７
２）に記載の方法を使用した。

両抗生物質の炭水化物分析〔１フエノール法１゜Ｍ、デ
ュボイス（Ｄｕｂｏｉｇ）、　Ｋ、　Ａ、ギレス（Ｇｉ
ｌｌｇｓ）。

Ｊ、　Ｋ、　ハミルトｙ　（Ｈａｍｉｌｔｏｔ）、　Ｐ
、　Ａ、　　レバース（Ｒｖｂｇｒｓ）およびＦ、スミ
ス（ＳｍｉｔＡ）のＡｎａｌ。

ＣＡｌ＆、２８．３５０〜３５６（１９５６）　　を参
照〕は極微量の糖の存在を示した。

Ｅ）核磁気共鳴（ＮＭＲ）分析： Ｄ２０　　中の抗生物／］Ａ２６２０ニー１および抗生
物質Ａ２６２０１−２について２００　ｐｐｍ　　でプ
ロトンＮＭＲｆｉ析を行い、その結果を第６図および第
７図に示す。２．８〜３．３　ｐｐｍ　　および７．２
〜７．’ｌｐｐｍ　　のピークは両方ともトリプトファ
ンの存在を示す。特性ピークはその他に大体１．０　ｐ
ｐｍ　。

１．５　ｐｐｍ、　２．２　ｐｐｍ、　２．４　ｐｐｍ
、　３．７　ｐｐｍおよび４．６ｐｐｍ　　にもそれぞ
れ存在する。

Ｆ）元素分析： 抗生物質Ａ２６２０１−１および抗生物質Ａ２６２０１
−２の元素分析は、乾燥（氷点下の温度で４８時間凍結
乾燥し、次に熱風炉の中で乾燥）後に行った。その結果
は次の通シである。

Ｃ＊　　　　　　　　　３３．２　　　　　４５．９Ｈ
＊　　　　　　　　　　７．０　　　　　　６．８Ｎ＊
６゜７　　　　　１２．０ ０＊＊　　　　　　　　　５１．７　　　　　２９．８
Ｓ　＊　　　　　　　　　１．．４　　　　　５．５＊
　＝燃焼分析 ＊＊＝差（引き算）による ＊＊＊＝中性子活性化 元素分析から１次のような仮の実験式が単純な計算によ
って得られた。

抗生物質　　　　　　抗生物質 ０５５Ｈ１４００６４Ｎ１０ＳＣ４５Ｈ８００２２Ｎ１
０Ｓ２丘記実験式に基づくと、２つの成分の推定との最
小分子量はそれぞれ約２０００および約１２００である
と決定された。相対硫黄分析は２つの成分のシスティン
残基間の比と一致する。

実施例６ 本発明の新規抗生物質の生物学的作用は以下のようない
ろいろな方法によって調べられた。

Ａ）抗菌作用： 粗ブイヨン物質、抗生物質Ａ２６２０１．抗生物質Ａ２
６２０１−１．抗生物質Ａ２６２０１−２％およびガル
ジマイシン（ｇａｒｄｔｍｙｃｉｎ）　ＣＤ多数の異な
る微生物に対する最小阻止＃ｉ（ＭＩＣ）をそれぞれ測
定した。ＭＩＣを測定するために次の方法を使用した。

トリブチカーゼ・ンイ寒天のアリコート３０ｄを個々の
試験管に入れた。この寒天を溶融し１次に約４５〜５０
℃に冷却した。一定濃度（試験される最高濃度の段階的
２倍希釈）の試験抗生物質を各試験管に加えた。それぞ
れの試験混合物を攪拌し、そして各−＜トリ皿が単一濃
度の抗生物質を含むように個々のベトリ皿に注入した。

寒天か固化したとき、その平板に好気性または嫌気性試
験微生物を接種した。好気性微生物を接役した平板は３
７℃で２４時間インキュベートし、そして細菌増殖につ
いて判定した。同じ平板を再び３０℃でさらに４８時間
イノキュイートシ、この時点で酵母および真菌の増殖に
ついて調べた。嫌気性微生物を接種した平板は酸素を欠
く室内において３７℃でインキュベートし、そして４８
時間で判定した。全ての場合に、ＭＩＣは増殖抑制を表
わすところの抗生物質の最低濃度である。これらの結果
を表５に示す。

△△△△△△△△八△ Ｂ）単胃動への成長促進 アクチノプラネス種Ａ２６２０１の発酵からの粗ブイヨ
ン物質を標準飼料の一部分の上で乾燥し。

その後このブイヨンを含む飼料を常用試験飼料と混合し
て若い鶏（ひよこ）に与えた。これらのひよこの体重を
、粗ブイヨン物質を含まない常用試験飼料を与えたひよ
この体重と比較した。この比較から粗ブイヨン物質が若
い鶏の成長を促進させるとわかった。

Ｃ）反すう動物の成長促進： 本発明抗生物質は２４時間のインビトロ反すう動物成長
促進系において試験した。

ここに述べる評価法の実施に有用な発酵培地は次の諸成
分を混合することにより調製した。

鉱物溶液１　　　　　　　　　　７．５ｄ鉱物溶液２　
　　　　　　　　　７．５Ｍ微量鉱物溶液　　　　　　
　　　１．５ｍＡ’レザズリン溶液０．１％　　　　　
０．１罰透明こぶ胃液　　　　　　　　１０．０ｙｔｔ
Ｎ５ＨＣＯ３（６，３３’％浴溶液　　　　　　８．ｏ
ｍｔＮａ２Ｓ−９Ｈ２０（２，５％溶液）　　　　　　
０．５ｄ蒸留水　　　　６４．９ｄ １００．０ｄ と記調製物の各１００１Ｒ１に乾燥栄養ｏ、ｓ、ｐを加
えた。この乾燥栄養はアビセル（Ａｙ＜ａｇＪ、商標名
）ｐＨ１０１−微結晶質セルロース０．３＃、カゼイン
０．３Ｆ、無水グルコース０．Ｉｌｌ、および可溶性澱
粉０．１１から成っていた。培地のｐｌｉＶｉｃＯ２を
用いてｐｋ１６．８〜７．２に調整した。

発酵培地の透明とぶ胃液は、飼料供給後約１２時間して
干し草飼料との未処理のフィステル形成雌牛からこぶ胃
液を集めることによシ調製した。

とぶ胃液はガーゼを通して濾過し、５０００ｒｐｍで遠
心分離した。上清を１ノの褐色ビンに入れて（ピン１本
当た）約４０　ｏｙ）約１５ポンドの圧力でオートクレ
ーブ滅菌した。

発酵培地の全ての溶液は次の組成を有する原料溶液（水
１リットル嶺たシのグラム数）を調製して加えた。

鉱物溶液１　　　　　　　　　１／１ｌＫ２ＨＰＯ４１
２，５ 鉱物溶液２ ＫＨ２ＰＯ４１゜、５ Ｍｌ１ＳＯ４−７Ｈ２０３，Ｏ Ｍａｉｌ　　　　　　　　　　　　　１２．ＯＣαＣ１
２・２Ｈ２０１，６ Ｆ　ａＳ０４　・７Ｈ２００，２００ Ｈ３ＢＯ３０，０３０ ＣｏＣ１２”６Ｈ２００，０２０ ムＳＯ４・７ｕ２ｏ　　　　　　　　　　ｏ、ｏ　１０
Ｍ％Ｃ１２・４Ｈ２００，００３ Ｈａ　２Ｍ（＋０４　・２Ｈ２００，００３ＮゼＣ１２
・６Ｈ２００，００２ Ｃ％Ｃ１２・２Ｈ２００，００１ （約ｐＨ２に調整） レザズリン　　　　　　　　　　１．０炭酸水素ナトリ
ウム溶液　６．３３％ Ｎ５ＨＣＯ３６３，３ （Ｃｏ２で飽和させ、１　ｏ　Ｏｆｙ　ＣＯ２下に保存
）硫化ナトリウ、ム溶液２．５％ ＮｃＬ２Ｓ・９Ｈ２０２５，０ （窒素下に保存） 抗生物質Ａ２６２０１．抗生物質Ａ２６２０１−１およ
び抗生物質Ａ２６２０１−２のインビトロ評価は、気体
および液体の抜取り口と発酵中に生産された気体の全量
を測定するだめのマノメーターを備えた酸素を欠くグイ
ジエスター内での２４時間のバッチ弐発隣において実施
した。異なる濃度の抗生物質Ａ２６２０１　（１０，２
５および１００　ｐｐｍ）および抗生物質Ａ２６２０１
−１（２，５，１０および５０　ｐｐｍ）および抗生物
質Ａ２６２０１−２　（２，５ｐｐｍ）を１０係メタノ
ール溶液中で作）、そして別々の群のグイジエスターの
中に入れた。

未処理のフイステル形成雌牛からの新鮮なこぶ胃液７０
０−を先に述べた発酵培地１３００．ｄに加えて混合し
た。混合後１０ｄを取シ出して対照として分析し％２０
０ｄを各ダイジェスタ−に入れた。マノメーターを取シ
付け、酸素を除くために窒素を通した。その後、連続攪
拌下にグイジエスターを４０℃に保持した。

培養物は０．５および２４時間で抜取った。５時間試料
を主に使用して窒素代謝作用を調べた。

発酵後５時間のタンパク質、アミノ酸およびアンモニア
の濃１［Ｋ化の測定は、タンパク質分解および脱アミノ
化の速度が抗生物質によって阻害される程度を示すもの
であった。イソ酸、すなわちイソ酪酸、イソ吉草酸およ
び吉草酸の濃度は２４時間後に測定し、これらの酸の主
要原因がバリン。

ロイシンおよびプロリンのそれぞれのアミノ酸の脱アミ
ン化であるので脱アミノ化の尺度として使用した。

２４時間試料は揮発性脂肪酸の生産量を測定するために
使用した。酢酸対プロピオン酸（Ａ／Ｐ）のモル比は、
抗生物質が全揮発性脂肪酸濃度中のプロピオン酸のモル
比率を高めたかどうかを測定するために使用した。気体
の組成も２４時間後に測定して、生産されたメタン量を
調べた。気体が生産される速度は３．４および５時間後
にマノメーターを読み取ることによシ測定し、それによ
シ微生物代謝を監視した。インビトロ発酵の結果を表６
に示す。これらのデータは一般に抗生物質Ａ２６２０１
、抗生物質Ａ２６２０１−１．および抗生物質Ａ２６２
０１−２がプロピオン酸生産の刺激（プロピオン酸はグ
ルコース新生のための主要前駆体である）およびエネル
ギー効率がよシ劣る酸の阻害から明らかなように、こぶ
前発酵効率を改善することを示している。これらのデー
タはまたアミノ−Ｎ−増加および吉草酸とその他のイソ
酸の減少から明らかなように脱アミノ化の低下を示して
いる。〔こぶ胃代謝に関する一層完全な議論はチャーチ
（Ｃｈｕｒｃｈ）らの「反すう動物の消化生理学および
栄養学」、第２巻、１９７１゜６２２および６２５頁を
参照されたい。〕

【図面の簡単な説明】

第１図は抗生物質Ａ２６２０．１−１および抗生物質Ａ
２６２０１−２を含む分画の分離を示す逆相高性能液体
・クロマトグラフである。 第２図は抗生物質Ａ２６２０１−１の紫外線吸収スペク
トルである。 第３図は抗生物質Ａ２６２０１−２の紫外線吸収スペク
トルである。０．Ｉ　Ｎ　　Ｎａ０Ｅ含有メチルアルコ
ール（Ｍ　ａ　ＯＨ）　　を示す破線の縦座標限界は。 ２１８．６ナノメードルでの新しいλ惰α２を収容する
ために２．０に変えられた。 第４図は抗生物質Ａ２６２０１−１の赤外線吸収スペク
トルである。 第５図は抗生物質Ａ２６２０１−２の赤外線吸収スペク
トルである。 第６図は抗生物質Ａ２６２０１−１のプロトン核磁気共
鳴スペクトルである。このスペクトルは内部対照として
包含されたジオキサンのピークを有する。 第７図は抗生物質Ａ２６２０１−２のプロトン核磁気共
鳴スペクトルである。 特許出願人　　ザ・ダウ・ケミカル・カン、Ｒニー（外
５名） Ｐ　ｍ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 （１）アクチノプラネス（Ａｃｔｉｎｏｐｌａｎｅｓ）
   種Ａ２６２０１またはその突然変異体、変異体もしくは
   組換え体の生物学的に純粋な培養物。 （２）微生物アクチノプラネス種Ａ２６２０１またはそ
   の突然変異体、および前記微生物の培養に適する栄養素
   を含有する水性栄養培地からなる培養培地。 （３）次の特性を有する抗生物質Ａ２６２０１−１。 （イ）紫外線吸収スペクトル： 　　　　　　　　　　　　　　　濃度　　　　　　￥λ
   ｍａｘ（ナノメートル）￥ ￥溶剤￥　　　　　　　　　￥（重量／容量）￥　￥抗
   生物質Ａ２６２０１−１￥ １００％メチルアルコール　　　０．１％　　　　２０
   ５．７、２２０．８ 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２９
   １（小吸収） 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２１
   ８（変曲点） ０．１Ｎ塩酸含有メチルアルコール　０．１％　　２０
   ５．３、２２０．８ 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２９
   ２（小吸収） 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２１
   ８（変曲点） ０．１Ｎ水酸化ナトリウム含有メチルアルコール　０．
   １％　２１７．４ 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
   　　　２９２．７（小吸収） （ロ）赤外線スペクトル： 最も重要な吸収帯は次の振動数（ｃｍ＾−＾１）に生ず
   る：１６５０、１５２０、２６８０（鋭いピーク）、１
   ０００〜１０３０（分裂ピーク）。 （ハ）アミノ酸分析： アラニン、システイン、グルタミン酸、グリシン、イソ
   ロイシン、ロイシン、セリン、トリプトファン、および
   バリンの存在。 （ニ）プロトンＮＭＲ　分析： ２．８〜３．３、７．２〜７．７．１．０、１．５、２
   ．２、２．４、３．７および４．６ｐｐｍに特性ピーク
   。 （ホ）元素分析： ￥元素￥　￥重量％￥ 炭素　　　３３．２ 水素　　　　７．０ 窒素　　　　６・７ 酸素　　　５１．７ 硫黄　　　　１．４ 塩素　　　微量 （ヘ）元素分析に基づく概算上の実験式は Ｃ＿５＿５Ｈ＿１＿４Ｏ＿６＿４Ｎ＿１＿０Ｓであり、
   概算上の分子量は２０００である。 （４）次の特性を有する抗生物質Ａ２６２０１−２。 （イ）紫外線吸収スペクトル： 　　　　　　　　　　　　　　　濃度　　　　　　￥λ
   ｍａｘ（ナノメートル）￥ ￥溶剤￥　　　　　　　　　￥（重量／容量）￥　￥抗
   生物質Ａ２６２０１−２￥ １００％メチルアルコール　　　０．１％　　　　２０
   ７．３、２２０．５ 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２７
   ３（小吸収） 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２８
   ２（小吸収） 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２９
   １．２（小吸収） 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２１
   ８（変曲点） ０．１Ｎ塩酸含有メチルアルコール　０．１％　　２０
   ４、２２０．９ 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２７
   １．３（小吸収） 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２８
   ０．２（小吸収） 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２８
   ９．５（小吸収） 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２１
   ２．３（変曲点） ０．１水酸化ナトリウム含有メチルアルコール　０．１
   ％　２１８．６ 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
   　　２８０（小吸収） 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
   　　２８９．３（小吸収） （ロ）赤外線スペクトル： 最も重要な吸収帯は次の振動数（ｃｍ＾−＾１）に生ず
   る：１６５０、１５２０、２６８０（鋭いピーク）、１
   ０００〜１０３０（分裂ピーク）。 （ハ）アミノ酸分析： アラニン、システイン、グルタミン酸、グリシン、イソ
   ロイシン、ロイシン、セリン、トリプトファンおよびバ
   リンの存在。 （ニ）プロトンＮＭＲ分析： ２．８〜３．３、７．２〜７．７、１．０、１．５、２
   ．２、２．４、３．７および４．６ｐｐｍに特性ピーク
   。 （ホ）元素分析： ￥元素￥　￥重量％￥ 炭素　　４５．９ 水素　　　６．８ 窒素　　１２．０ 酸素　　２９．８ 硫黄　　　５．５ 塩素　　微量 （ヘ）元素分析に基づく概算上の実験式は Ｃ＿４＿５Ｈ＿８＿０Ｏ＿２＿２Ｎ＿１＿０Ｓ＿２であ
   り、概算上の分子量は１２００である。 （５）微生物アクチノプラネス種Ａ２６２０１またはそ
   の突然変異体、変異体もしくは組換え体を適当な培地で
   好気的水性発酵条件下に培養することからなる生物学的
   に活性な物質の生産方法。 （６）生物学的に活性な物質を培地から単離する、特許
   請求の範囲第５項記載の方法。 （７）生物学的に活性な物質は抗生物質Ａ２６２０１−
   １または抗生物質Ａ２６２０１−２である、特許請求の
   範囲第６項記載の方法。 （８）アクチノプラネス種Ａ２６２０１またはその突然
   変異体、変異体もしくは組換え体により生産される生物
   学的に活性な物質の成長促進量と、標準動物飼料との混
   合物からなる動物の成長を促進させるための動物飼料組
   成物。 （９）生物学的に活性な物質が抗生物質Ａ２６２０１一
   １または抗生物質Ａ２６２０１−２の少なくとも１種で
   ある、特許請求の範囲第８項記載の動物飼料組成物。 （１０）動物の成長促進剤として使用するための、アク
   チノプラネス種Ａ２６２０１またはその突然変異体、変
   異体もしくは組換え体の発酵により生産される生物学的
   に活性な物質。 （１１）抗菌剤として使用するための、アクチノプラネ
   ス種Ａ２６２０１またはその突然変異体、変異体もしく
   は組換え体の発酵により生産される生物学的に活性な物
   質。