JPS62121331A

JPS62121331A - 顕微鏡観察用標本及びその作成器具

Info

Publication number: JPS62121331A
Application number: JP25990385A
Authority: JP
Inventors: Makoto Aoki; 真青木
Original assignee: JOHOKU IKA KIKI SEISAKUSHO KK
Current assignee: JOHOKU IKA KIKI SEISAKUSHO KK
Priority date: 1985-11-21
Filing date: 1985-11-21
Publication date: 1987-06-02

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明は、顕微鏡によって観察するための細胞等の標本
、及びその標本を作成するために用いられる器具に関す
るもので、特に、その細胞等を培養液等から分離するた
めのフィルタを備えた標本及びその作成用器具に関する
ものである。

（従来の技術）例えば、がん細胞の有無、成育状態、あるいは試薬に対
する反応等を調べるときには、採取した細胞を顕微鏡下
で検査する細胞診という手法が採られることが多い。こ
のような細胞診を行うときには、一般に、採取した検体
を細分し、薬品を加えて１〜２週間培養した後、スライ
ドグラス上に標本を作成して、４００〜６００倍程度の
顕微鏡によって検鏡する。

このような標本を作成する場合、従来は、培養された細
胞片を培養液とともにスライドグラス上に塗抹して、洗
浄液によって培養液を洗い流した後、染色するようにし
ていた。

しかしながら、このような塗抹法による標本作成では、
スライドグラス上に塗抹するとき、その塗抹作業に伴う
物理的要因によって細胞が破壊されてしまったり、培養
液を洗い流すとき、細胞がともに流されてしまったりし
て、正確な分析ができなくなることが多い。そのために
、この方法による標本作成には、かなりの熟練を要する
こととなり、時間がかかってコストも高いものとなって
いる・このようなことから、一部では、培養された細胞片をフ
ィルタによって培養液から分箸させ、フィルタに付着し
た細胞片をそのまま染色して、これを標本として検鏡す
るという試みも行われている。そのような場合、従来は
、そのフィルタとして、セルロース系あるいはポリプロ
ピレン系の合成樹脂製フィルタが多く用いられていた。

（発明が解決しようとする問題点）しかしながら、このようなセルロース系あるいはポリプ
ロピレン系合成樹脂製のフィルタでは、液を通過させる
フィルタの細孔、すなわちフィルタポアの形状、大きさ
、方向等が一定していないので、細胞がそのボアを通し
て流れてしまったり、そのボア内に入り込んで形状が変
えられてしまったりするという問題がある。また、染色
時、染料がボア壁面に付着して、細胞との区別がつきに
くくなるという問題もある。

そのために、このようなフィルタ法による標本作成は、
現実にはほとんど行われていない。

更に、このような顕微鏡観察用標本は、一般には一つの
試料ごとに１枚の標本とされている。しかしながら、試
薬に対する細胞の反応等を調べるときには、薬品の種類
によって細胞に作用する度合が異なるので１通常は、−
人の患者につき平均３０点程度の標本を作成することが
必要となっている。そのために、１枚の標本に１試料の
みを配置したものでは、多数枚の標本が必要となるばか
りでなく、１点の検鏡ごとに標本を取り換えなければな
らず、検鏡作業に非常な手間がかかってしまうという問
題がある。

本発明は、このような問題に鑑みてなされたものであっ
て、その第１の目的は、紺胞等が正確に捕捉されていて
、しかも数点の試料を容易に検鏡することのできる顕微
鏡観察用標本を提供することである。

また、本発明の第２の目的は、そのような顕微鏡観察用
標本を容易に作成することのできる作ｒ＆器具を提供す
ることである。

（問題点を解決するための手段）この目的を達成するために、本発明では、その標本を、
多数の円形細孔を有するポリカーボネート製の薄膜帯状
フィルタによって形成するようにしている。そして、そ
のフィルタの」二面に、複数の異なる試料を並列状に配
置するようにしている。

また、その標本を作成するための器具は、薄膜状のフィ
ルタが貼り付けられる板状のフィルタ座と、そのフィル
タ座を両面から挟み付ける一対の板状パツキンと、その
パンキンをフィルタ及びフィルタ座に圧着させる一対の
ホルダとによって構成するようにしている。そのフィル
タ座には、複数の透孔が並列して形成されている・そし
て、パツキンには、そのフィルタ座の各透孔にそれぞれ
対応する開口が設けられ。

フィルタが貼り付けられたフィルタ座を挾み付けたとき
、そのフィルタ座の各透孔の周囲をそれぞれ独立した通
路に仕切るようにされている。更に、各ホルダには、そ
れぞれパツキンの開口に連通ずる注入口あるいは排出口
が設けられている。

（作用）このように、多数の円形細孔を有するポリカーボネート
製のフィルタを用いることにより、その細孔の径、すな
わちボア径が最適のものを選べば、細胞等は確実にその
表面に付着させることができる。したがって、その細胞
等が変形することは防止されるようになる。そして、そ
のボアは円形であるので、細胞等とは容易に見分けるこ
とができる。しかも、１枚のフィルタ上に複数の試料が
並列して配置されているので、そのフィルタをスライド
させていくだけで、異なる試料を順に検鏡することがで
きる。

また、上述のように構成された標本作成器具を用いるこ
とにより、フィルタを貼り付けたフィルタ座を両面から
パンキンで挟み、そのパツキンをホルダによりフィルタ
及びフィルタ座に圧着させれば、フィルタ座の各透孔に
対応するそれぞれ独立した通路が形成されるので、ホル
ダに設けられた注入口の一つに細胞片を含む培養液等を
注入すれば、フィルタ座の透孔部分に位置するフィルタ
の上面に細胞片等が付着し、培養液等から分離される。

したがって、ホルダの各注入口にそれぞれ異なる試料液
を注入すれば、フィルタの上面にはそれぞれ異なる複数
の試料が配置されることになる。そして、そのままの状
態で、ホルダの各注入口にメタノール及び染色剤を注入
すれば、各試料が染色される。そこで、ホルダ及びパツ
キンを外せば、上述のような標本がフィルタ座に貼り付
けられた状態で得られることになる。このようにフィル
タがフィルタ座に貼り付けられていることにより、薄膜
状のフィルタであってもその取り扱いが容易となる。そ
して、そのフィルタをフィルタ座から剥がしてスライド
グラスに載せれば、容易に検鏡することができるように
なる。

（実施例）以下１図面を用いて本発明の詳細な説明する。

図中、第１図は本発明による顕微鏡観察用標本の作成器
具の一実施例を示す一部縦断側面図であり、第２図はモ
の垂直横断面図である。また、第３図は、その標本作成
器具の分解斜視図である。

これらの図から明らかなように、この標本作成器具１は
、フィルタ２が貼り付けられるフィルタ座３と、そのフ
ィルタ２及びフィルタ座３を上下から挟み付ける一対の
パツキン４．５と、更にそのパー７キン４．５を上下か
ら挟み付ける上ホルダ６及び下ホルダ７とによって構成
されている。

フィルタ２は、スライドグラス８（第４図参照）と同程
度の面積を有する横長の薄膜状のもので、米国のニュー
クリボア社が製造し、「ニュークリポアフィルタ」とい
う商品名で重版されているものによって形成されている
。この「ニュークリボアフィルタ」は、薄膜状のポリカ
ーボネートに原子炉内で中性子を通すことによって多数
の細孔を形成したもので、膜厚が薄くても極めて強度が
高く、しかも、ボア形状が一定径の円形となっている。

この「ニュークリポアフィルタ」にも種々の寸法のもの
があるが、がん細胞の細胞診のようなときには、ボア径
が１ミクロン、厚さが５〜１０ミクロン程度のものとす
ればよい。

フィルタ座３は、塩化ビニル等の硬質合成樹脂からなる
横長の薄板状のもので、その中央部には、複数の細長い
透孔９，９．・・・が並列状に形成されている。フィル
タ２は、このフィルタ座３の上面に接着剤によって貼り
付けられ、それによって各透孔９，９．・・・を同時に
覆うようになっている。したがって、そのフィルタ座３
の透孔９は、スライドグラス８の面積の範囲内に設けら
れ、スライドグラス８の長手方向にほぼ直交する方向に
延びるものとされている。また、フィルタ座３の両端に
は、位置決め用のピン挿通孔１０．１０が設けられてい
る。

バ、キン４，５は互いに同形状のもので、フィルタ座３
よりわずかに小さい面積で比較的肉厚の大きい合成ゴム
によって形成されている。そして、各パツキン４．５に
は、フィルタ座３の透孔９に対応する位置に、その透孔
９よりやや大径の開口１１，１１．・・・；１２゜１２
、・・・がそれぞれ設けられている。また、各パツキン
４，５の両端には、フィルタ座３のピン挿通孔１０と同
じ位置に、同様のピン挿通孔１３．１３及び１４．１４
がそれぞれ設けられている。

上側のパンキン４は、上ホルダ６の下面に形成された凹
部に嵌め込まれて、パツキン４の下面が上ホルダ６の下
面から突出する状態で支持されるようになっている。そ
して、その上ホルタ６には、パツキン４の各開口１１，
１１．・・・に連ｄする注入口１５，１５．・・・が形
成されている。この注入口１５は、上端部が拡開し、下
端部がフィルタ座３の透孔９と同程度の大きざに絞られ
たものとされている。また、上ホルダ６には、パンキン
４のピン挿通孔１３と同じ位置に、同様のピン挿通孔１
６，１６が設けられている。更に、上ホルダ６の両端部
中央には、締め付は用の切り込み１７．１７が形成され
ている。

下側のパツキン５は、下ホルダ７の上面に形成された凹
部に嵌め込まれて、パツキン５の上面が下ホルタ７の上
面から突出する状態で支持されるようになっている。そ
して、その下ホルタ７には、パツキン５の各開口１２，
１２．・・・に連通する排出口１８．１８．・・・が形
成されている。この排出口１８は、上端側がフィルタ座
３の透孔９と同程度の大きさのもので、その下端側は絞
られて、下ホルダ７の下面から突出するパイプ状の接続
ボート１９に連なるようにされている。この接続ボート
１９は、隣り合うものが下ホルダ７の中心線から反対方
向に外れた位置に設けられ、ジグザグ状に配置されるよ
うになっている。

また、下ホルダ７には、パツキン５のピン挿通孔１４に
対応する位置に、位置決め用のビン２０．２０が、上方
に垂直に突出するようにして固定されている。更に、下
ホルダ７の両端部中央には切り込み２１．２１が形成さ
れ、その切り込み２１に、蝶ナツト２２付きのねじ２３
か上下方向に回動自在に取り付けられている。

このような標本作成器具ｌを用いて顕微鏡観察用標本を
作成するときには、まず、下ホルダ７にパツキン５を嵌
め込む。このとき、パツキン５のピン挿通孔１４に下ホ
ルダ７の位置決め用ビン２０を挿通させることによって
、パツキン５が位置決めされる。そして、そのパツキン
５上に、上面にフィルタ２が貼り付けられたフィルタ座
３を４＆　Ｆｉする。このときにも、フィルタ座３のピ
ン挿通孔１０に位置決め用ビン２０を挿通させることに
よって、フィルタ座３が位置決めされる。次いで、その
フィルタ２及びフィルタ座３の上面にパツキン４及び上
水ルダ６を載せる。このときにも、ピン挿通孔１３及び
１６に位置決め用ビン２０を挿通させて、パツキン４及
び上ホルダ６が下ホルダ７に対して位置決めされるよう
にする。

この状態で、下ホルダ７に増り付けられたねじ２３を上
方に回動させ、上ホルダ６の切り込み１７に嵌合させて
、蝶ナツト２２により上ホルダ６と下ホルダ７とを締め
付ける。すると、上下のパツキン４，５がフィルタ２及
びフィルタ座３に圧着され、ｍｌ、２図に示されている
状態となる。この状ｙＥでは、フィルタ座３の各透孔９
の周囲は完全に密封され、上ホルダ６の注入口１５から
パツキン４の開口１１、フィルタ座の透孔９．パツキン
５の開口１２、及び下ホルダ７の排出口１８を経て接続
ボート１９に至る各通路は、それぞれが独立したものと
なる。

そこで、各接続ボート１９にバルブ２４を備えたホース
２５をつなぎ、適宜真空ポンプ等に接続する。そして、
上ホルダ６の注入口１５に、スポイト等によって試料液
を注入する。この試料液は、がん細胞等を培養液中で培
養し、試薬を加えたもので、各注入口１５に注入される
試料液は、それぞれ異なる試薬を加えたものとする。

すべての注入口１５，１５．・・・に試料液を注入した
後、バルブ２４を開く、すると、試料液中の液体はフィ
ルタ２のボアを通して吸い出され、細胞片のみがフィル
タ２の上面に残る。このとき、そのフィルタ２として適
切なボア径の「ニュークリボアフィルタ」が用いられて
いるので、すべての細胞片が正確な形状で確実に残され
る。

次いで、バルブ２４を閉じ、注入口１５からメタノール
及びギムザ等の染色剤を注入して、所定時間その状態を
保持して染色を行う、染色完了後、バルブ２４を開いて
乾燥させ、更に洗浄液を注入して洗浄する。

洗浄が終了すると、蝶ナツト２２を緩めて上ホルダ６か
らねじ２３を外す。そして、上ホルダ６及びパツキン４
を外し、フィルタ２をフィルタ座３とともに器具ｌから
取り出して、フィルタ２の上面に封入剤を塗布する。

封入剤が固まれば、フィルタ２をフィルタ座３から剥が
し、第４図に示されているようにスライドグラス８上に
載せる。フィルタ座３が透明のものである場合には、そ
のフィルタ座３をスライドグラス８としてそのまま使用
することもできる。

こうして、スライドグラス８上に載せられた顕微鏡標本
２６が得られる。この標本２６は、ポリカーボネート製
フィルタ２の一方の面に、複数の異なる試料２７，２７
．・・・が並列状に配置されたものとなる。しかも、そ
の試料２７は、スライドグラス８の長手方向に対して直
交する方向に延びる細長いものとなる。したがって、顕
微鏡下でそのスライドグラス８を長手方向にスライドさ
せれば、各試料２７　、２７　、・・・が必ずその顕微
鏡の下を横切ることになるので、スライドグラス８ある
いは標本２６を取り換えることなく、複数の試料２７，
２７．・・・を順に検鏡することができる。すなわち、
検鏡作業が容易となる。

このとき、ポリカーボネート製のフィルり２は透明であ
るので、その検鏡の支障となることはない。また、その
ボアは円形であるので、細胞等とは容易に区別すること
ができる。しかしながら、より見やすくするためには、
フィルタ２をポリカーボネートと光透過率の等しい液に
浸し、そのボアを埋めてしまうことが望ましい。また、
フィルタ２を、ジクロエタンやジクロエタン等のポリカ
ーボネートの溶剤によって溶解させることも考えられる
。

こうして、複数の異なる試料２７を、容易に、かつ正確
に検鏡することができるようになる。

なお、上記実施例においては、標本２６に配置される各
試料２７が細長い形状となるものとしているが、これが
円形状などとなるようにすることもできる。そのように
すると、上記実施例のものほど数多くの試料２７をフィ
ルタ２の長手方向に配置することはできないが、フィル
タ２の長手方向に直交する方向に複数段配意することが
できるようになる。

また、上記実施例においては、フィルタ２がスライドグ
ラス８と同程度の大きさのもとしているが、そのフィル
タ２はより長いものであってもよい、そのような場合に
は、フィルタ２を適宜の長さに切断して、スライドグラ
ス８上に載置するようにすればよい。

（発明の効果）以上の説明から明らかなように、本発明によれば、顕微
鏡観察用標本を、円形ボアを有するポリカーボネート製
フィルタによって形成するようにしているので、細胞等
の試料が正確な形状で確実に捕捉されるとともに、それ
を正確に検鏡することができるようになる。しかも、そ
のフィルタ上に複数の異なる試料を並列して配置するよ
うにしているので、そのフィルタをスライドさせるだけ
で複数の試料を検鏡することができるようになり、その
検鏡作業が極めて容易となる。

また、フィルタが貼り付けられる複数の透孔が並列して
形成されたフィルタ座の両面に、その透孔に対応する開
口を備えたパツキンが圧着されるようにした器具によっ
て、標本を作成するようにしているので、異なる試料液
を隣り合う開口に注入した場合にも、それらが干渉する
ことはなくなり、フィルタ上に複数の異なる試お１が配
置された標本が容易に得られるようになる。しかも、そ
の開口が並列状に設けられるので、試料液の注入も容易
に自動化することができるようになる。更に、フィルタ
がフィルタ座に貼り付けられることにより、薄膜状のフ
ィルタであっても、その取り扱いが容易となる。

【図面の簡単な説明】

第１図は、本発明による顕微鏡観察用標本の作成器具の
一実施例を示す一部縦断側面図、第２図は、第１図の■−■線によるその標本作成器具の
屯直横断面図、第３図は、その標本作成器具の分解斜視図、第４図は、
その標本作成器具によって作成された標本をスライドグ
ラスに載置した状態を示す斜視図である。１・・・標本作成器ｎ、２・・・フィルタ３・・・フィ
ルタ座　　　　　４．５・・・パ・ンキン６・・・上ホ
ルダ　　　　　　７・・・下ホルタ８・・・スライドグ
ラス９・・・透孔　　　　　　　１１．１２・・・開口１５
・・・注入口　　　　　　１８・・・排出口２０・・・
位置決め用ビン

Claims

【特許請求の範囲】

（１）多数の円形細孔を有する薄膜帯状ポリカーボネー
ト製フィルタ２の上面に、複数の異なる試料２７が並列
状に配置されている、顕微鏡観察用標本。
（２）複数の透孔９が並列して形成され、その各透孔９
を同時に覆う薄膜状のフィルタ２が貼り付けられる板状
のフィルタ座３と、そのフィルタ座３の各透孔９にそれ
ぞれ対応する開口１１、１２を有し、前記フィルタ２が
貼り付けられたフィルタ座３を両面から挟み付けて、前
記各透孔９の周囲をそれぞれ独立した通路に仕切り得る
、一対の板状のパッキン４、５と、そのパッキン４、５
の各開口１１、１２に連通する注入口１５あるいは排出
口１８を有し、各パッキン４、５を前記フィルタ２及び
フィルタ座３に圧着させ得る一対のホルダ６、７と、を
備えてなる、顕微鏡観察用標本の作成器具。
（３）前記フィルタ座３の透孔９が、スライドグラス８
の面積の範囲内に設けられ、その長手方向に対してほぼ
直交する方向に延びる細長い開口である、特許請求の範
囲第２項記載の顕微鏡観察用標本の作成器具。
（４）前記ホルダ７に、前記各パッキン４、５及びフィ
ルタ座３を貫通する位置決め用ピン２０が設けられてい
る、特許請求の範囲第２項記載の顕微鏡観察用標本の作
成器具。