JPS62294965A - 網状赤血球の分析方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ３、発明の詳細な説明 ［発明の目的］ （産業上の利用分野） 本発明は血液中の網状赤血球の分析に関する臨床検査分
野に適用できる。

（従来の技術） 血液中の血球を計数することは病気の診断にとって欠く
べからざる検査である。通常、血球計数は赤血球数、白
血球数、血小板数を計測するが、近年、診断をより確実
にするために、網状赤血球数、リンパ球数、ヘマトクリ
ット値、ヘモグロビン濃度、平均赤血球容積等が同時に
測定されることが要求されている。

網状赤血球は赤血球の幼若のもので、染色したときに網
状の模様が現れることからこのような名称で呼ばれてい
る。網状赤血球は骨髄で新しく産生された赤血球で２４
〜２８時間後に成熟した赤血球に成長する。通常、赤血
球の２％程度が網状赤血球である。網状赤血球の計数は
診断の情報として重要なもので、特に貧血症の診断に有
用である。網状赤血球数が上昇することは、赤血球が何
らかの原因で破壊されていることを意味するし、反対に
その数が減少しているときは、赤血球の産生が何らかの
原因で低下していることを意味している。

現在行われている網状赤血球の測定方法は特殊な染料で
ＲＮＡ等の細胞核質を染色し、顕微鏡下で計測するもの
である。最近は、染色した網状赤血球をコンピューター
技術を使った自動血球分類装置で分析することも行なわ
れている。

（発明が解決しようとする問題点） しかしながら上記測定方法は、いずれにしても染色する
手間はさけられず、網状赤血球の検査の増加に対して隘
路となっている。

即ち、上述のように、網状赤血球の計測は染色という操
作が必要なため煩雑であり、迅速性に欠ける。また顕微
鏡下で計測することは検査技師に大変な労働を強いる結
果となり好ましくない。又、自動血球分類装置は高価な
ため、中小病院等には普及していない現状である。

本発明の目的は以上のような問題点を解決し、染色を必
要としない、迅速で簡便な網状赤血球を分析する方法を
提供することにある。

［発明の構成］ （問題点を解決するための手段） 上記目的を達成するため本発明は、被検液中の網状赤血
球を分析するに際し、網状赤血球に特有の抗原決定基に
対する抗体と標識物質とを結合した標識抗体を前記被検
液と反応させ、その反応液を、一定の孔径を有する膜で
形成された濾過手段を通過させて、綱状赤血球と結合し
ていない標識量を測定することにより被検液中の網状赤
血球を定量分析することとした。

（作　用） 本発明は上記の構成としたので、次のように作用する。

即ち、網状赤血球に特有の抗原決定基に対する抗体と標
識物質とを結合した標識抗体を被検液と反応させると標
識抗体の二部が網状赤血球のみに特異的に結合する。そ
こで、この反応液を一定の孔径を有する膜で形成された
濾過手段に通すと、膜孔径よりも大きい、網状赤血球に
結合した標識抗体は濾過手段の膜内に残り、小さいフリ
ーの標識抗体は濾過手段の膜外に溶出する。そこで、し
かる後に膜内又は膜外の標識量を測定することにより被
検液中の網状赤血球を定量分析することができる。

このように本発明によれば、染色を必要とせず、迅速且
つ簡便に綱状赤血球を分析することができる。

（実施例） 本発明に係る分析方法の一例について第１図を参照して
説明する。

先ず、反応液中には緩衝液４と赤血球を含む液１が含ま
れている。これに、網状赤血球特有のトランスフェリン
レセプターまたはトランスフェリンレセプターに対する
抗体に標識物質を結合したもの（標識抗体２）を添加す
る。ここで標識物質としては一般に免疫分析で用いられ
ている種々の物質、例えばラジオアイソトープ、酵素、
蛍光物質等を用いることができる。

標識抗体２を添加すると、標識抗体２の一部は、赤血球
を含む液１のうち、網状赤血球のみに特異的に結合する
。その後、反応液を、一定の小さな孔径を有する膜で形
成された濾過手段を構成するホローファイバー５中に通
す。これにより、網状赤血球に結合しなかったフリーの
標識抗体２はホローファイバー５外に溶出する。ここで
ホローファイバー５としては、例えばミリポア社製中空
子膜（孔径２μｍ）を用いることができる。外液７に接
触させたホローファイバー５中に反応液を通過させるこ
とにより、膜孔径よりも大きい、網状赤血球に結合して
標識抗体はホローファイバー５内に残り、小さいフリー
の標識抗体はホローファイバー５外に出てしまう。

以上の方法により、ホローファイバー５内又は外の標識
量を測定することにより、血球中の網状赤血球の母を知
ることができる。

第２図は本発明網状赤血球分析方法を利用した分析装置
のシステム構成図である。これは、ホローファイバー５
中を緩衝液４が常に流れるフローシステムとなっている
。緩衝液４は、血球液１と標識抗体２が添加された後、
恒温槽６中を螺旋状に回転しながら通過し、攪拌される
と同時に恒温され、免疫反応が促進されるようになって
いる。

緩衝液４は、次に外液７と接触したホローファイバー５
中を通過する。このとき反応液が、螺旋状に回転するこ
とにより攪拌され、フリーの標識抗体のホローファイバ
ー外への溶出が促進されるようになっている。

その後、反応液はそれぞれの検出装置８又は９に導かれ
、標識物量が測定されるようになっている。

このように本分析方法によれば、染色を必要とせず、迅
速且つ簡便に網状赤血球を分析することができ、更には
、より自動化した網状赤血球の分析装置をも提供するこ
とができる。

以上本発明の一実施例について説明したが、本発明は上
記実施例に限定されるものではなく、本発明の要旨の範
囲内において適宜変形実施可能であることは言うまでも
ない。

［発明の効果］ 以上詳述したように本発明によれば、染色を必要とぜず
、迅速且つ簡便に網状赤血球を分析することができる。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明に係る分析方法の一実施例を模式的に表
わした説明図、第２図は本発明を利用した網状赤血球分
析装置のシステム構成図である。 １・・・血球を含む液、２・・・標識抗体、５・・・濾
過手段。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 被検液中の網状赤血球を分析するに際し、網状赤血球に
   特有の抗原決定基に対する抗体と標識物質とを結合した
   標識抗体を前記被検液と反応させ、その反応液を、一定
   の孔径を有する膜で形成された濾過手段を通過させて、
   網状赤血球と結合していない標識抗体を膜外に溶出させ
   、しかる後に膜内又は膜外の標識量を測定することによ
   り被検液中の網状赤血球を定量分析することを特徴とす
   る網状赤血球の分析方法。