JPS6232726B2

JPS6232726B2 -

Info

Publication number: JPS6232726B2
Application number: JP4982080A
Authority: JP
Inventors: Haruo Oonishi; Chihiro Ito; Suguru Mochida
Original assignee: Mochida Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Mochida Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1980-04-15
Filing date: 1980-04-15
Publication date: 1987-07-16
Also published as: JPS56147717A

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は血清中の高比重リポ蛋白（High
density lipoprotein、以下HDLという）を上昇さ
せるとともに、低比重リポ蛋白（Low density
lipoprotein、以下LDLという）を低下せしめ
て、LDL／HDL比を小さくする作用を有する医
薬に関する。動脈硬化の発症には多数の因子が関与している
ことは周知の事実であり、高脂血症、高血圧症、
喫煙、肥満が四大リスクフアクターとしてあげ
られている。動脈硬化、特に粥状硬化の特徴は動脈壁へのコ
レステロールの蓄積であり、このコレステロール
の殆どは血清LDLコレステロールに由来してい
ることから、血清LDLの高値が動脈硬化の重要
な因子と考えられ、従来、血清LDLの高値を改
善することによつて動脈硬化の進展を阻止しよう
とする試みがなされ、血清LDLを低下せしめる
作用を有する薬剤が多数開発されている。ところが、最近、HDLが粥状動脈硬化進展の
防禦因子として注目されてきている。例えば
Glueckら〔Glueck、C.J.、et al.、J.Lab.Clin.
Med.、88、941（1976）〕の調査によると長寿家
系には高HDL血症や低LDL血症を示す者が多
く、高HDL血症者及び低LDL血症者のLDLコレ
ステロール／HDLコレステロールの比は対照群
2.41±0.1に対してそれぞれ1.50±0.10及1.12±
0.18で、冠動脈硬化性心疾患の発生率が極めて低
く、また、高HDL血症と低LDL血症の両者を併
有する場合は平均寿命がさらに延長することが明
らかにされている。さらに、Miller〔Miller、G.J.、et al.、
Lancet、１、16（1975）〕はHDLが虚血性心疾患
発現と負の相関を有することから、HDLが抗動
脈硬化作用を有することを示唆し、この説は
Bergら〔Berg、K.、et al.、Lancet、１、499
（1976）〕あるいはGordon〔Gordon、T.、et al.
、Ann.Int.Med.、87、393（1977）〕によつて確
認されている。その結果、HDLの低値は従来か
ら動脈硬化のリスクフアクターとして認められ
ていた高脂血症、高血圧症、喫煙及び肥満に加え
て新たなリスクフアクターと考えられるように
なつた。このようなことから、動脈硬化の発生を予防
し、その進展を阻止するためには、動脈硬化の発
生を促進する作用を有するLDLを低下せしめる
とともに、動脈硬化の発生を阻止する作用を有す
るHDLを高めることによつてLDL／HDL比を低
下させることが極めて重要であると考えられるよ
うになり、現在では単にLDLを低下せしめるの
みならず、特にHDLを高める作用を有する薬剤
の開発が精力的に行なわれている。このような現況に鑑み、本発明者らは研究を重
ねた結果、先に、総合的な循環器疾患治療剤とし
て特許出願（特願昭53−67901）した７−ジエチ
ルアミノ−５−メチル−ｓ−トリアゾロ−〔１・
５−ａ〕−ピリミジンが単にコレステロールを低
下させるのみならず、LDLコレステロールを低
下させる作用とともにHDLコレステロールを上
昇させる作用が強力であることを見出し、本発明
を完成した。７−ジエチルアミノ−５−メチル−ｓ−トリア
ゾロ−〔１・５−ａ〕−ピリミジン（一般名トラピ
ジル）は式：で表わされる既知の化合物であり、水および有機
溶媒に溶け易く、苦味を有する白色〜微黄色の結
晶性粉末であり、冠血管拡張作用、血小板凝集抑
制作用等を有する。次にトラピジルのHDLコレステロールの上昇
作用及びLDLコレステロールの低下作用を主と
する脂質代謝改善作用を実験例によつて明らかに
する。なお、特に明記しないかぎりトラピジルは
蒸留水に溶解して経口投与した。また試薬はオリ
ーブ油（山田製薬）、コレステロール、蔗糖、カ
ゼイン（以上、和光純薬）、コール酸ナトリウム
および６−ｎ−プロピル−２−チオウラシル（以
上、東京化成）を使用した。脂質の測定は血清総コレステロール（TC）を
酵素法、遊離コレステロール（FC）を酵素法、
HDL−コレステロール（HDL−Ｃ）をリンタン
グステン沈澱法、LDL−コレステロール（LDL
−Ｃ）をリンタングステン沈澱法、リン脂質
（PL）をトリクロル酢酸沈澱法、トリグリセライ
ド（TG）をVan Handel変法、遊離脂肪酸
（FFA）をDuncombe法、総脂質（TL）をSulfo
−phospho−vanillin法で各々測定した。また、
TCとFCの差からコレステロールエステル
（CE）を、TCとPLとからＣ／Ｐ比を、LDL−Ｃ
とHDL−ＣとからLDL／HDL比を算出した。実験例１高脂肪食誘発高脂血症マウスにおける作用 Tammiら〔Tammi、M.、et al.、Acta
Physiol.Scand.、105、188（1979）〕はオリーブ
油含有高脂肪食でラツトを飼育することにより低
HDL性高脂血症を誘発することを報告した。そ
こで、この方法を参考にし、Tammiらの高脂肪
食と同様の組成を有する高脂肪食をddN系マウス
に７日間摂取させることにより低HDL−Ｃ性高
脂血症を作成した。すなわち、ddN系マウスを１
群12〜15匹とし、高脂肪食（粉末飼料クレアCE
−２１Kg、カゼイン200ｇ、オリーブ油385ｇ、
蔗糖560ｇ、コレステロール33ｇおよびコール酸
ナトリウム11ｇの混合飼料）５ｇ／マウス／日を
６日間摂取させた。トラピジル３および10mg／Kg
を毎日朝夕２回経口投与した。７日目に採血して
血清脂質をを測定した。第１表に示すように、高脂肪食摂取により
TC、LDL−ＣおよびLDL／HDL比が上昇し、
HDL−Ｃが低下した。この変化はトラピジル経
口投与により軽減された。特に、トラピジル10
mg／Kg投与によりHDL−Ｃが有意に上昇し、
LDL−ＣおよびLDL／HDL比は有意に低下し
た。

【表】

【表】実験例２脂肪乳濁液誘発高脂血症マウスにおける作用マウスを用いて簡便に高脂血症を作成するため
に、Tammiらの高脂肪食と同一組成の脂肪乳濁
液をddYマウスに経口投与して、高脂血症を誘発
させた。 ddY系マウスを１群10匹とし、トラピジル10お
よび30mg／Kgを経口投与し、直ちに脂肪乳濁液
（コレステロール９ｇ、オリーブ油120ｇ、蔗糖
155ｇ、コール酸ナトリウム３ｇおよび水77.5ｇ
の混合乳濁液）25.5ml／Kgを経口投与した。７時
間後再びトラピジルを経口投与し、その17時間後
採血し血清脂質を測定した。第２表に示すように、脂肪乳濁液投与により
TC、HDL−Ｃ、LDL−ＣおよびLDL／HDL比は
上昇した。一方、トラピジル投与によりHDL−
Ｃの上昇とLDL−ＣおよびLDL／HDL比の低下
傾向が認められたが、TCへの影響は観察されな
かつた。

【表】実験例３脂肪乳濁液誘発高脂血症ラツトにおける作用ラツトを１群６〜８匹とし、脂肪乳濁液25.5
ml／Kg／日を３日間経口投与した。トラピジル10
および30mg／Kgを脂肪乳濁液投与の直前およびそ
の７時間後毎日経口投与した。４日目に採血して
血清脂質を測定した。第３表に示すように、脂肪乳濁液投与による
TC、LDL−Ｃ、LDL／HDL比およびTGの上昇
とHDL−Ｃの低下が認められた。TCおよびTG
の上昇はトラピジル10mg／Kg以上の投与により、
HDL−Ｃの低下、LDL−ＣおよびLDL／HDL比
の上昇はトラピジル30mg／Kg投与により抑制され
た。

【表】実験例４高脂肪食誘発高脂血症ラツトにおける作用ラツトを１群７匹とし、トラピジル10および30
mg／Kgを経口投与した。その直後より高脂肪食20
ｇ／ラツトを摂取させた。トラピジル投与７時間
後再びトラピジルを経口投与し、その17時間採血
し血清脂質を測定した。第４表に示すように、高脂肪食摂取により
TC、LDL−Ｃ、LDL／HDL比およびTGは上昇
し、HDL−Ｃは低下した。このような高脂血症
ラツトにトラピジルを経口投与したところ、
TC、HDL−Ｃ、LDL−ＣおよびLDL／HDL比の
変化は改善される傾向を示した。

【表】実験例５６−ｎ−プロピル−２−チオウラシル誘発高脂
血症ラツトにおける作用高コレステロール食と同時に６−ｎ−プロピル
−２−チオウラシルを負荷することにより高脂血
症が増悪するとの報告がある。そこで本発明者ら
は脂肪乳濁液投与ラツトに６−ｎ−プロピル−２
−チオウラシルを同時負荷したラツトを１群６〜
７匹とし、脂肪乳濁液25.5ml／Kgを経口投与し
た。その直前および７時間後にトラピジル10およ
び30mg／Kgを経口投与した。また0.08％６−ｎ−
プロピル−２−チオウラシル水溶液を飲料水とし
て与えた。薬物最終投与17時間後に採血し血清脂
質を測定した。第５表に示すように、６−ｎ−プロピル−２−
チオウラシルおよび脂肪乳濁液投与により上昇し
たLDL−ＣおよびLDL／HDL比と低下したHDL
−ＣおよびTGとはトラピジル経口投与によりお
のおの低下および上昇した。特に、トラピジル30
mg／Kg投与によるHDL−Ｃの上昇は有意であつ
た。

【表】実験例６高脂血症ハムスターにおよぼす影響ハムスターを１群８匹とし、実験例１と同様の
高脂肪食を14日間摂取させた。トラピジル３、10
および30mg／Kgを毎日朝夕２回経口投与した。15
日目に採血して血清脂質を測定した。第６表に示すように、本高脂血症のHDL−Ｃ
は正常対照群のそれよりも増加してはいるもの
の、LDL−Ｃの上昇が著しいためLDL／HDL比
は上昇した。トラピジル投与により、TC、LDL
−ＣおよびLDL／HDL比は有意に低下し、HDL
−Ｃも上昇傾向を示すなどトラピジルの改善作用
は明白であつた。

【表】実験例７ウズラ高脂血症における作用ウズラ高脂血症については多くの報告があり、
Dayら〔Day、C.E.、et al.、Adv.Exp.Med.Biol.
、109、277（1978）〕は高脂血症の実験動物とし
て、ウズラが有益であるとしている。ウズラを１群９〜10羽とし、高脂肪食（ヤマコ
製ウズラ飼料9.75ｇ、コレステロール0.2ｇおよ
びコール酸ナトリウム0.05ｇの混合飼料）10ｇ／
ウズラ／日を７日間摂取させた。トラピジルを毎
日朝夕２回３および10mg／Kg経口投与した。８日
目に採血し血清脂質を測定した。第７表に示すように、高脂肪食摂取により
TC、LDL−Ｃ、LDL／HDL比およびTGは著明
に上昇した。このような高脂血症はトラピジル経
口投与により改善された。特に、トラピジル30
mg／Kg投与によりHDL−Ｃの有意な上昇と
LDL／HDL比の有意な低下とが認められた。

【表】実験例８高コレステロール食摂取高脂血症ウサギにおけ
る作用 Anitshkowがウサギに高コレステロール食を与
え、実験的動脈硬化症を作製して以来高コレステ
ロール負荷ウサギ高脂血症についての多くの報告
がある。日本白色在来種ウサギを１群10羽とし、１％コ
レステロール含有飼料（オリエンタル酵母社製
RC−４）200ｇ／ウサギ／日を６週間摂取させ
た。トラピジル200mg／ウサギ／日を毎日飼料に
混合して投与し、２週間毎に採血し血清脂質を測
定した。第２表に示すように、高コレステロール食摂取
によりTC、LDL−ＣおよびLDL／HDL比は著明
に上昇し、HDL−Ｃ、TGおよびリン脂質も上昇
した。このような高脂血症ウサギにトラピジルを経口
投与した結果、TCおよびLDL−Ｃの低下は約３
％にすぎなかつたが、HDL−Ｃは31％増加し、
LDL／HDL比は23％低下し、明らかに、HDL−
Ｃの増加を主とする血清脂質代謝改善作用がもた
らされている。

【表】実験例９脂肪乳濁液誘発高脂血症ウサギにおける作用 LDL−Ｃの異化過程を司どる重要な因子とし
て血中のリポプロテインリパーゼおよびホルモン
感受性リパーゼがあげられる。そこでトラピジル
の作用機序を知る目的で実験を行つた。日本白色在来種ウサギを１群４羽とし、脂肪乳
濁液25.5ml／Kgを経口投与した。24時間後にトラ
ピジル３mg／Kgを静注し、15分後に血清脂質およ
びBobergらの方法〔Boberg、J.and Carlson、L.
A.、Clin.Chim.Acta、10、420（1964）〕により
リポプロテインリパーゼ活性を測定した。なお、
測定値をトラピジル静注前の値を100として表わ
した。第９表に示すように、脂肪乳濁液投与ウサギに
トラピジルを静注したところ、LDL−Ｃの著明
な低下とリポプロテインリパーゼ活性の上昇が認
められ、TC、HDL−ＣおよびLDL／HDL比も改
善される傾向を示した。

【表】このように、トラピジル投与によりリポプロテ
インリパーゼ活性の上昇が認められたことは、
HDL−Ｃとリポプロテインリパーゼ活性との相
関が報告されていることから、トラピジルの
HDL−Ｃ上昇作用にリポプロテインリパーゼが
介在していることが考えられた。実験例 10 高血圧症あるいは動脈硬化症を合併した高脂血
症患者で、血清総コレステロール値220mg／dl以
上を対象として、トラピジル300mgを１日３回に
分けて４週間経口投与した。この間、他の脂質代
謝改善剤、ニコチン酸およびその誘導体、抗うつ
剤、利胆剤、フエノチアジン系薬剤、ステロイド
ホルモン、甲状腺剤、ピリジノールカルバメート
製剤、サリチル酸誘導体の併用は避けた。血清脂
質の測定はトラピジル投与前、経口開始２週間後
及び４週間後に行なつた。第10表に示すように、HDL−Ｃの有意の増
加、LDL−Ｃの有意の減少がみられ、LDL／
HDL比も有意に低下した。また、TC、TGも有
意に減少していることが観察された。

【表】実験例 11 急性毒性マウス（ICR系）及びラツト（Donryu系）を
それぞれ10匹を１群とし、各群に固型飼料〔CE
−２、日本クレア(株)製〕と水道水を自由に摂取さ
せて飼育するとともに、トラピジルを経口、静脈
注射及び皮下注射により投与して、その急性毒性
を調べた。 LD₅₀の算出は、経口投与の場合は投与後７日
間の死亡率から、静脈注射及び皮下注射の場合は
投与後３日間の死亡率から、それぞれリツチフイ
ールド・ウイルコツクソン（Litchfield
Wilcoxon）法によつて行なつた。結果を第11表
に示す。

【表】高脂肪食誘発実験的高脂血症は、Antiskow以
来多くの報告があるものの、問題点も皆無ではな
いため、薬物の有効性を論ずるには、多種の動物
を用い、種々の高脂肪負荷法を組合せた多くの高
脂血症における作用を総合的に検討する必要があ
る。このような観点より、本発明者らはトラピジ
ルの作用を種々の実験的高脂血症を用いて検討し
た。第11表は各種実験的高脂血症におけるトラピジ
ルのHDL−Ｃ上昇作用とLDL−Ｃ低下作用とを
まとめたものである。トラピジルのHDL−Ｃ上
昇作用は全実験において認められ、特に、高脂肪
食誘発マウス、ウズラ高脂血症、脂肪乳濁液誘発
ラツト高脂血症、脂肪乳濁液、６−ｎ−プロピル
−２−チオウラシル誘発ラツト高脂血症および高
コレステロール食負荷ウサギ高脂血症において著
明なHDL−Ｃ上昇作用が認められた。また、LDL−Ｃ低下作用も全実験において認
められ、特に、高脂肪食誘発マウス、ハムスタ
ー、ウズラ、ウサギ高脂血症および脂肪乳濁液誘
発ラツト高脂血症におけるトラピジルの作用は明
らかであつた。更に、これらのことは、実験例10の結果から、
単に動物実験のみならず臨床試験においても証明
された。 HDL−Ｃは虚血性心疾患発現と負の相関を有
し、動脈硬化の発生を抑制するが、LDL−Ｃは
虚血性心疾患発現と正の相関を有し、動脈硬化の
発生において血管内皮細胞間隙へ侵入すると言わ
れている。トラピジルがこのように動脈硬化を抑
制するHDL−Ｃを増やし、動脈硬化を促進させ
るLDL−Ｃを減少させることは、トラピジルが
動脈硬化を基礎にもつ疾患の予防又は治療に極め
て重要な意義を有していることを示している。

【表】トラピジルを人体に投与する場合は、通常、１
日量100〜500mgを経口的に服用するが病状等に応
じて適宜増減してさしつかえない。剤形としては
常法に従い、錠剤又はカプセル剤とするのが有利
である。即ち、乳糖、澱粉、マンニツト等の賦形
剤、カルボキシメチルセルロース、馬鈴薯澱粉等
の崩壊剤、馬鈴薯澱粉、アラビアゴム等の結合
剤、ステアリン酸マグネシウム、タルク、シリカ
等の滑沢剤を用いて錠剤またはカプセル剤を製造
することができる。又、錠剤には必要に応じて糖
衣を施してもよい。以下に製剤を実施例として示すが、製剤はこれ
のみに限定されるものではない。実施例１錠剤 (i) トラピジル 50ｇ (ii) 乳糖適量 (iii) 結晶セルロース 60ｇ (iv) 馬鈴薯澱粉 54ｇ (v) ステアリン酸マグネシウム２ｇ上記のうち、(i)〜(iv)を混合し、予め別けておい
た(iv)の一部を10％の糊として添加して顆粒を製造
し、乾燥する。次いで、これに(v)を添加して混合
して、１錠200mgの錠剤とする。前記錠剤は必要
に応じて常法により糖衣を施してもよい。実施例２カプセル剤 (i) トラピジル 50ｇ (ii) リン酸水素カルシウム 50ｇ (iii) ケイ酸アルミニウム適量 (iv) 結晶セルロース 60ｇ (v) ステアリン酸マグネシウム２ｇ上記の(i)〜(v)を混合し、更にふるいを通してよ
く混合した後、常法に従い１カプセル200mgのカ
プセル剤とする。実施例３注射剤トラピジルの結晶100ｇをとり、これを２の
注射用蒸留水に溶解した後、常法によつて１アン
プル当り100mg／２の注射剤とする。

Claims

【特許請求の範囲】１７−ジエチルアミノ−５−メチル−ｓ−トリ
アゾロ−〔１・５−ａ〕−ピリミジンを有効成分と
し、血清中の高比重リポ蛋白上昇作用を有する脂
質代謝改善剤。