【発明の詳細な説明】[Detailed description of the invention]
本発明は、サフラシン誘導体に関する。
本発明者らは、新規な抗生物質を得ることを目
的として鋭意研究を重ねた結果、抗菌および抗腫
瘍活性を有する抗生物質Ｙ−16482α物質および
抗生物質Ｙ−16482β物質をシユードモナス属に
属する抗生物質Ｙ−16482物質生産菌（その一例
は、工業技術院微生物工業技術研究所に微工研条
寄第14号として受託されているシユードモナス・
フルオレスセンスA2−２株があげられる。な
お、本菌株は、（財）発酵研究所にもIFO14128と
して寄託されている。）の培養液から単離・精製
することに成功した（特開昭57−18633号、日本
農芸化学会昭和56年度大会（京都）講演要旨集第
142頁、日本薬学会第102年会（大阪）講演要旨集
第568頁）。
その後、抗生物質Ｙ−16482物質のαおよびβ
成分の化学構造について検討したところ、その理
化学的性質、核磁気共鳴スペクトル、Ｘ線解析な
どに基づき、一般式
（式中、Ｒは水素または水酸基を示す。）
で表わされる化合物であることが判明し、これを
サフラシン（Safracin）と命名した。
式中、Ｒが水素である化合物はβ成分であつ
て、サフラシンＡと称し、α成分であるＲが水酸
基の化合物をサフラシンＢと称する。
今回、本発明者らは、このサフラシンＡおよび
Ｂを脱アラニル化することにより、それ自体抗
菌・抗腫瘍作用を有するばかりでなく、それらの
活性を有する化合物の合成中間体として有用であ
る一般式
（式中、Ｒは前記と同義である。）
で表わされる化合物が製造されることを見出し、
本発明を完成させるに至つた。
すなわち、本発明は、上記一般式（）で表わ
される脱アラニルサフラシンＡおよびＢに関す
る。
本発明の一般式（）で表わされる化合物は、
その分子の他の部分を破壊しない条件で一般式
（）の化合物のアミド結合を化学的または酵素
的に分解することにより製造することができる。
この分解方法としては、一般に蛋白質もしくはペ
プチド鎖の化学的または酵素的分解法、あるいは
ペニシリン、セフアロスポリン核のアミノ体を得
る方法（イミノエーテル法など）などのいかなる
方法も適用できるが、好ましくは、PTC法によ
る蛋白質およびペプチドのＮ末端分解法
（Edman分解法）を用いるのがよい。すなわち、
本発明の化合物（）は、一般式（）の化合物
に一般式
〔式中、フエニル環Ａは置換基として任意の組
合せで任意個のハロゲン（塩素、臭素、ヨウ素な
ど）、ニトロ、低級アルキル（メチル、エチル、
プロピル、イソプロピル、ブチルなど）、低級ア
ルコキシ（メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブ
トキシなど）を有していてもよい。〕
で表わされる化合物を反応させて得られる一般式
（式中、Ｒおよびフエニル環Ａは前記と同義で
ある。）
で表わされる化合物またはその酸付加塩を酸で処
理することにより得られる。
式（）および（）の化合物の水酸基は、場
合によつてはアセチル基などで保護されていても
よい。
一般式（）および（）の化合物は常法によ
り無機酸（塩酸、硫酸、臭化水素酸、リン酸な
ど）または有機酸（シユウ酸、フマール酸、マレ
イン酸、コハク酸、トルエンスルホン酸、パモ酸
など）と処理することにより、対応する酸付加塩
とすることができる。
本発明の化合物のうち、Ｒが水酸基である脱ア
ラニルサフラシンＢの抗菌活性については、たと
えば日本化学療法学会標準法に準じて細菌類に対
する最小発育阻止濃度（mcg／ml）を測定したと
ころ、結果は第１表の通りであつた。
The present invention relates to safracin derivatives. As a result of extensive research aimed at obtaining new antibiotics, the present inventors have discovered that the antibiotic Y-16482α substance and the antibiotic Y-16482β substance, which have antibacterial and antitumor activities, are antibiotics belonging to the genus Pseudomonas. Y-16482 substance-producing bacteria (an example is Pseudomonas, which has been entrusted to the Institute of Microbiology and Industrial Technology of the Agency of Industrial Science and Technology as part of the Microbial Research Institute No. 14).
Fluorescens A2-2 strain is mentioned. This strain has also been deposited with the Fermentation Research Institute as IFO14128. ) was successfully isolated and purified from the culture solution (JP-A-57-18633, Japanese Society of Agricultural Chemistry 1986 Conference (Kyoto) Abstracts No.
142 pages, Proceedings of the 102nd Annual Meeting of the Pharmaceutical Society of Japan (Osaka), page 568). Then, α and β of antibiotic Y-16482 substance
After examining the chemical structure of the component, we found a general formula based on its physical and chemical properties, nuclear magnetic resonance spectrum, X-ray analysis, etc. (In the formula, R represents hydrogen or a hydroxyl group.) It was found to be a compound represented by the following formula, and this was named Safracin. In the formula, the compound in which R is hydrogen is the β component and is referred to as safracin A, and the compound in which R, which is the α component, is a hydroxyl group is referred to as safracin B. This time, the present inventors have developed a general formula by dealanylating safracins A and B that not only have antibacterial and antitumor activities themselves, but also are useful as intermediates for the synthesis of compounds having these activities. (In the formula, R has the same meaning as above.) It was discovered that a compound represented by the following is produced,
The present invention has now been completed. That is, the present invention relates to dealanylated safracins A and B represented by the above general formula (). The compound represented by the general formula () of the present invention is
It can be produced by chemically or enzymatically decomposing the amide bond of the compound of general formula () under conditions that do not destroy other parts of the molecule.
As this decomposition method, any method can be applied, such as chemical or enzymatic decomposition of protein or peptide chains, or methods for obtaining amino forms of penicillin and cephalosporin cores (imino ether method, etc.). Preferably, PTC It is preferable to use the N-terminal degradation method (Edman degradation method) for proteins and peptides. That is,
The compound () of the present invention is a compound of the general formula () with the general formula [In the formula, phenyl ring A is a substituent that can be any combination of any number of halogens (chlorine, bromine, iodine, etc.), nitro, lower alkyl (methyl, ethyl,
(propyl, isopropyl, butyl, etc.), lower alkoxy (methoxy, ethoxy, propoxy, butoxy, etc.). ] General formula obtained by reacting the compound represented by (In the formula, R and phenyl ring A have the same meanings as above.) It can be obtained by treating a compound represented by the following or an acid addition salt thereof with an acid. The hydroxyl group of the compounds of formulas () and () may be protected with an acetyl group or the like as the case may be. Compounds of general formulas () and () can be prepared with inorganic acids (hydrochloric acid, sulfuric acid, hydrobromic acid, phosphoric acid, etc.) or organic acids (oxalic acid, fumaric acid, maleic acid, succinic acid, toluenesulfonic acid, pamoic acid, etc.) using conventional methods. The corresponding acid addition salt can be obtained by treatment with an acid (such as an acid). Among the compounds of the present invention, the antibacterial activity of dealanyl safracin B, in which R is a hydroxyl group, was determined, for example, by measuring the minimum inhibitory concentration (mcg/ml) against bacteria according to the standard method of the Japanese Society of Chemotherapy. The results were as shown in Table 1.
【表】【table】
【表】
（培地は、トリプトソイ寒天を用い、※を付し
たものは、10％血液添加トリプトソイ寒天を用い
た。）
また、NCIの方法に従つて、マウス白血病細胞
を腹腔内に移植したCDFI系マウスに、脱アラニ
ルサフラシンＢを10mg／Kg／日の投与量で１日、
５日、９日の３回腹腔内投与したところ、130％
の延命率（Ｔ／Ｃ）が得られた。
本発明の化合物を医薬として用いる場合、好ま
しくは医薬上許容されうる担体、賦形剤、希釈剤
などと混合し、散剤、錠剤、カプセル剤、注射剤
の形で投与されうる。投与量は、症状、投与法な
どにより異なるが、通常成人１日あたり経口投与
で５〜100mg／Kg体重が適当である。
以下、実施例により本発明を具体的に説明する
が、これら実施例は本発明の範囲に何ら制限を加
えるものではないことは言うまでもない。
実施例 １
サフラシンA1.0ｇをメタノール10mlで攬拌下
溶解する。これに、フエニルイソチオシアネート
0.3ｇを攬拌下に加え室温で５時間放置する。反
応終了後メタノールを減圧下、室温で留去し、残
査にベンゼン50mlを加える。過剰のフエニルイソ
チオシアネートは溶解し、反応生成物は、結晶化
する。この結晶を取し、減圧下乾燥することに
より黄色粉末として、化合物（）（ただし、Ｒ
は水素を、フエニル環Ａはフエニルを示す。）1.1
ｇが得られる。収率87％
実施例 ２
上記実施例１で得られた化合物0.1ｇをニトロ
メタン10mlに溶解した後、氷浴中にて４℃に冷却
する。この溶液に塩酸ガスを飽和するまで吹き込
み、４℃にて５分間放置する。反応終了後、４℃
の蒸留水10ml、クロロホルム30mlで３回洗う。水
層を凍結乾燥すると、黄色粉末として脱アラニル
サフラシンA0.05ｇが得られる。収率65％、融点
221℃（分解）。
実施例 ３
サフラシンB1.0ｇをメタノール10mlで攬拌下溶
解する。これにフエニルイソチオシアネート0.3
ｇを攬拌下に加え、室温で５時間放置する。反応
終了後メタノールを減圧下、室温で留去し、残査
にベンゼン50mlを加える。過剰のフエニルイソチ
オシアネートは溶解し、反応生成物は結晶化す
る。この結晶を取し、減圧下乾燥することによ
り黄色粉末として、化合物（）（ただし、Ｒは
水酸基を、フエニル環Ａはフエニルを示す。）1.0
ｇが得られる。収率80％。
実施例 ４
前記実施例３で得られた化合物1.0ｇをニトロ
メタン10mlに溶解した後、氷浴中にて４℃に冷却
する。この溶液に塩酸ガスを飽和するまで吹込
み、４℃にて５分間放置する。反応終了後、４℃
の蒸留水10ml、クロロホルム30mlで３回洗う。水
層を凍結乾燥すると、黄色粉末として脱アラニル
サフラシンB0.05ｇが得られる。収率64％、融点
200℃以上。[Table] (Trypto soy agar was used as the culture medium; 10% blood-added trypto soy agar was used for those marked with *.) In addition, a CDFI system in which mouse leukemia cells were intraperitoneally transplanted according to the NCI method. Mice were treated with dealanyl safracin B at a dose of 10 mg/Kg/day for 1 day.
When administered intraperitoneally three times on days 5 and 9, 130%
The life extension rate (T/C) was obtained. When the compound of the present invention is used as a medicine, it can be preferably mixed with a pharmaceutically acceptable carrier, excipient, diluent, etc., and administered in the form of a powder, tablet, capsule, or injection. The dosage varies depending on symptoms, administration method, etc., but 5 to 100 mg/Kg body weight per day is usually appropriate for adults. EXAMPLES Hereinafter, the present invention will be specifically explained with reference to Examples, but it goes without saying that these Examples do not limit the scope of the present invention in any way. Example 1 1.0 g of Safracin A was dissolved in 10 ml of methanol under stirring. In this, phenyl isothiocyanate
Add 0.3 g under stirring and leave at room temperature for 5 hours. After the reaction is complete, methanol is distilled off at room temperature under reduced pressure, and 50 ml of benzene is added to the residue. Excess phenyl isothiocyanate dissolves and the reaction product crystallizes. The crystals were taken and dried under reduced pressure to give a yellow powder of compound () (with R
represents hydrogen, and phenyl ring A represents phenyl. )1.1
g is obtained. Yield: 87% Example 2 0.1 g of the compound obtained in Example 1 above is dissolved in 10 ml of nitromethane, and then cooled to 4° C. in an ice bath. Hydrochloric acid gas was blown into this solution until it was saturated, and the solution was left at 4° C. for 5 minutes. After the reaction is completed, 4℃
Wash three times with 10 ml of distilled water and 30 ml of chloroform. Lyophilization of the aqueous layer yields 0.05 g of dealanyl safracin A as a yellow powder. Yield 65%, melting point
221℃ (decomposition). Example 3 1.0 g of Safracin B was dissolved in 10 ml of methanol under stirring. Phenyl isothiocyanate 0.3 to this
g under stirring and left at room temperature for 5 hours. After the reaction is complete, methanol is distilled off at room temperature under reduced pressure, and 50 ml of benzene is added to the residue. Excess phenyl isothiocyanate dissolves and the reaction product crystallizes. The crystals were taken and dried under reduced pressure to form a yellow powder, compound () (where R represents a hydroxyl group and phenyl ring A represents phenyl) 1.0
g is obtained. Yield 80%. Example 4 1.0 g of the compound obtained in Example 3 is dissolved in 10 ml of nitromethane, and then cooled to 4° C. in an ice bath. Hydrochloric acid gas was blown into this solution until it was saturated, and the solution was left at 4° C. for 5 minutes. After the reaction is completed, 4℃
Wash three times with 10 ml of distilled water and 30 ml of chloroform. Lyophilization of the aqueous layer yields 0.05 g of dealanyl safracin B as a yellow powder. Yield 64%, melting point
Over 200℃.