JPS6236483B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は子豚の感染病予防剤に関するものであ
る。 わが国における２〜３週令哺乳豚の45〜70％
は、いわゆる白痢に罹患し、そのかなりの割合の
罹患豚は斃死する。従つてその経済的損失は養豚
産業上きわめて大きい。この傾向は先進諸国も同
様であつて、これが予防、治療に関する報告は枚
挙にいとまがない。それらの報告ならびに現在と
られている対策は、種々の抗生物質、サルフア剤
など抗菌剤を投与するか、また一部は大腸菌によ
るワクチンも開発されているが、その効果もまち
まちで十分なものとはいえなかつた。 本発明者らは子豚のこの様な疾病に対する薬剤
を得る目的で種々研究を行つた。その結果、これ
らの疾患は主として子豚の出生直後の免疫不全の
結果生ずるのではないかと考え、先にγ−グロブ
リンの投与によつて、これが予防を行つた。（特
公昭46−43899） γ−グロブリン製剤の投与によつて、大腸菌、
日本脳炎、豚コレラ等の感染疾病の予防に有効で
あることが認められた。 しかしながら、最も頽発する白痢に対しては未
だ十分な効果が得られなかつた。 そこで、本発明者らは更に子豚の免疫増強につ
いて研究を続けた結果、成豚の血液中の白血球よ
り分離して得られたトランスフアーフアクターを
出生直後の子豚に投与したところ、従来動物のト
ランスフアーフアクターは無効であるとの常識に
反し、意外にも子豚の免疫力は強化し、各種感染
症に対し非特異的に予防することを見い出し本発
明を完成した。 本発明は成豚の血液中の白血球より分離採取し
たトランスフアーフアクターを有効成分とする子
豚の感染病予防剤である。 本発明の有効成分であるトランスフアーフアク
ターは成豚好ましくは多数の成豚の血液を採血
し、この血液より白血球を分離し、凍結乾燥融解
法又は凍結乾燥融解の前又は後にDNアーゼ処理
を施して分離採取される。白血球を分離するには
一般に行なわれている方法でなされる。例えば豚
血液を抗凝固剤および食塩水を入れた容器にと
り、デキストラン法、溶血法等により白血球を分
離する。デキストラン法は採血中の白血球の多い
上層部を集め、これにデキストラン食塩水溶液を
加え、赤血球を沈殿させ、上層部の白血球を多く
含まれている上層部を採集し、遠心分離して白血
球のみを集める。溶血法は採血を室温に放置し赤
血球が沈殿し、その上清の血漿部分を採集し、遠
心し、その上清を除いた後、沈殿物に蒸留水を注
ぎ撹拌しながら凝固剤、食塩水を加え、遠心し、
その沈殿物を集め、この操作をくり返し行つて純
粋の白血球を集める。本発明の有効成分を得るに
は溶血法の方が好適である。 以上の如くして得られた白血球よりトランスフ
アーフアクターを分離採取する方法は、一般に行
われている凍結融解法および、凍結融解法にDN
エース処理を施した方法が採用される。例えば、
前述の如くして得られた白血球をメタノール加ド
ライアイスと37℃の恒温槽を用いて、凍結、融解
を６〜12回反復し、完全に白血球を破壊する。こ
れを蒸留水で透析し、透析外液を凍結乾燥してト
ランスフアーフアクターを得る。また、この凍
結、融解の終了したものに、DNエースおよび硫
酸マグネシウムを加えて37℃前後で30分位反応さ
せて、後の透析、凍結乾燥させてもよく、また、
このDNエース処理は凍結、融解の操作前に行つ
てもよい。 以上の如くして得られた本発明の有効成分であ
るトランスフアーフアクターは白血球１×10⁹由
来のものをトランスフアーフアタクー１単位と
し、１単位のトランスフアーフアクター中のポリ
ペプチド量は11.5mg、リボース量はおよそ500μ
ｇ、イオン濃度はナトリウム3.7mg、カリウム
0.34mg、カルシウム８μｇ、マグネシウム1.1mg
であり、吸光比はOD₂₆₀／OD₂₈₀比は約1.8であ
る。 本発明の子豚の感染症予防剤はトランスフアー
フアクターを生理食塩水に溶解して製剤とする。
この製剤は、主として出生直後から３週令の子豚
に対し投与し、投与量は大体１回に0.5〜５トラ
ンスフアーフアクター単位皮下または筋肉に注射
する。そして１週間に数回注射すれば、子豚の各
種の感染症に対し免疫力を強化し、体質が改善さ
れ、健康な発育のよい豚が得られる。さらに、本
発明の製剤の投与と同時に、多数の豚舎の成豚よ
り採取した血清中のガンマーグロブリン製剤（特
開昭46−43899号、特開昭48−35021号公報記載の
製剤）と併用すると、生後間もない子豚の殆どの
感染症に対し免疫力を強化し完全に予防すること
ができる。このことにより、従来の子豚の出生直
後の斃死は防止され、健康な発育のよい子豚が得
られ、養豚産業上極めて有用である。 次に本発明の子豚の感染症予防剤の主成分であ
る豚のトランスフアーフアクターの採取法の実施
例をあげる。 実施例 成豚より採取した血液25を室温で約１〜２時
間放置し、赤血球が沈殿し、白血球が浮遊の状態
の時、その上清の血漿部分を採集し2000rpm7分
間遠心した。この上清を除いた後、沈殿物に蒸留
水をすばやく注ぎこみ撹拌しながら25秒後0.5％
EDTA（エチレンジアミン酒石酸２−ナトリウム
塩）加3.4％食塩水を加え、1000rpm5分間遠心
し、その沈殿物を集めた。同様の操作を２〜３回
くり返して純粋の白血球を77×10⁹個集めた。 かくして得られた白血球をメタノール加ドライ
アイスと37℃の恒温槽を用いて、凍結、融解を12
回くり返し、完全に白血球を破壊する。ついで
DNアーゼを白血球10⁹あたり0.2mgと10％硫酸マ
グネシウム液0.2mlとを加え37℃30分間静置後、
外液に50倍量の蒸留水を用いて４℃、48時間撹拌
しながら透析する。透析外液は一旦凍結乾燥し
637mgのトランスフアーフアクターの乾燥物が得
られる。これを10⁹個白血球／0.5mlとなる様蒸留
水で再融解し、0.22μのミリポアフイルターで除
菌過しながら0.5mlずつバイヤル瓶に分注し、
再度凍結乾燥してトランスフアーフアクターの乾
燥物が得られる。 以上の如くして得られたトランスフアーフアク
ターの１バイヤル瓶を適量の生理食塩水に溶解し
本発明の薬剤を得る。 次に、本発明の薬剤を用いて子豚の感染症に対
する予防効果の試験成績を示す。 試験例 母豚６頭からそれぞれ生れた８頭の子豚を生後
直ちに４頭ずつに分け、一方を試験群他方を対照
群とした。そして、試験群に出生初日に本発明の
トランスフアーフアクターを１単位含有している
製剤を皮下注射し、後３日齢に1/2単位、５日齢
に1/2単位注射した。 対照群はトランスフアーフアクターを投与する
ことなく、両者同一の条件で飼養し、各群を観祭
員３名が１頭ずつの個体について生下時から28日
齢まで正確に観祭し、(a)軟便が３日以上持続、(b)
水様性が２日以上持続、(c)白痢が１日以上みられ
るものを下痢陽性とした。 なお、本発明の薬剤を投与しても副作用は全く
認められなかつた。 試験結果は次の表の通りであつた。

【表】

【表】 本表の下痢発生頭数の分数中、分母は供試頭
数、分子は下痢発生頭数を示す。 以上試験結果より明らかな通り、本発明の薬剤
投与により子豚の下痢発生率が著しく低下した。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 成豚の血液中の白血球より分離採取したトラ
   ンスフアーフアクターを有効成分とする子豚の感
   染病予防剤。 ２ 白血球が多数の成豚の血液中の白血球である
   特許請求の範囲第１項記載の子豚感染病予防剤。