JPS6255097A - Ｌ−アミノ酸の製造法 - Google Patents
Ｌ−アミノ酸の製造法Info
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- JPS6255097A JPS6255097A JP60193867A JP19386785A JPS6255097A JP S6255097 A JPS6255097 A JP S6255097A JP 60193867 A JP60193867 A JP 60193867A JP 19386785 A JP19386785 A JP 19386785A JP S6255097 A JPS6255097 A JP S6255097A
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- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
- C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/006—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by reactions involving C-N bonds, e.g. nitriles, amides, hydantoins, carbamates, lactames, transamination reactions, or keto group formation from racemic mixtures
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
産 上の１用ノ
本発明はＬ−アミノ酸の製造法に関する。より詳しくは
特定の微生物が産生ずる酵素の作゛用により、ＤＬ−ま
たはし−アミノ酸アミドからＬ−アミノ酸を製造する方
法に関する。
特定の微生物が産生ずる酵素の作゛用により、ＤＬ−ま
たはし−アミノ酸アミドからＬ−アミノ酸を製造する方
法に関する。
Ｌ−アミノ酸は、食品添加物、飼料添加物、医薬品およ
び各種工業薬品の中間体として重要な化合物である。
び各種工業薬品の中間体として重要な化合物である。
眉ｍ週−
Ｌ−アミノ酸は、一般に直接発酵法または、有機合成化
学的に製造されたＤＬ−アミノ酸を光学分割する方法に
より製造されているが、最近では化学合成により安価に
得られる前駆物質を酵素により転換させる、いわゆるケ
ミコエンザイマチノク（Ｃｈｅｓｉｃｏ−Ｅｎｚｙ＋ｍ
ａｔｉｃ）な方法による製法も数多く提案、実用化され
ている。
学的に製造されたＤＬ−アミノ酸を光学分割する方法に
より製造されているが、最近では化学合成により安価に
得られる前駆物質を酵素により転換させる、いわゆるケ
ミコエンザイマチノク（Ｃｈｅｓｉｃｏ−Ｅｎｚｙ＋ｍ
ａｔｉｃ）な方法による製法も数多く提案、実用化され
ている。
例えば、ＤＬ−アミノ酸のＮ−アシル誘導体に微生物の
産生ずるアシラーゼを作用させる方法（特公昭４１−２
２３８０号公報）、ＤＬ−アミノ酸のヒダントイン誘導
体に微生物の産生ずるヒダントイナーゼを作用させる方
法（特公昭５４−２２７４号公報°）、フマル酸に微生
物の産生するアスパルターゼを作用させる方法（特公昭
５７−１８８６７号および、特開昭５９−１４０８９号
各公ｆＩｌ）および桂皮酸に微生物の産生ずるフェニル
アラニンアンモニアリアーゼを作用させる方法（＾ｐｐ
１．ＥｎｖｉｒｏｎＳＭｉｃｒｏｂｉｏｌ、４２７７３
（１９８１） ”ＩなどはＬ−アミノ酸のケミコエンザ
イマチソクな製法の代表例である。
産生ずるアシラーゼを作用させる方法（特公昭４１−２
２３８０号公報）、ＤＬ−アミノ酸のヒダントイン誘導
体に微生物の産生ずるヒダントイナーゼを作用させる方
法（特公昭５４−２２７４号公報°）、フマル酸に微生
物の産生するアスパルターゼを作用させる方法（特公昭
５７−１８８６７号および、特開昭５９−１４０８９号
各公ｆＩｌ）および桂皮酸に微生物の産生ずるフェニル
アラニンアンモニアリアーゼを作用させる方法（＾ｐｐ
１．ＥｎｖｉｒｏｎＳＭｉｃｒｏｂｉｏｌ、４２７７３
（１９８１） ”ＩなどはＬ−アミノ酸のケミコエンザ
イマチソクな製法の代表例である。
しかしながら、これらの方法は、反応系が複雑であった
り、反応条件が苛酷であったり、また原料が高価である
などの問題点があり、工業的製法として、なお改善の余
地が残されている。
り、反応条件が苛酷であったり、また原料が高価である
などの問題点があり、工業的製法として、なお改善の余
地が残されている。
また、最近、微生物が産生ずる酵素により各種ＤＬ−ま
たはＬ−アミノ酸アミドから対応するし一アミノ酸を生
成させる反応について、バチルス届、バタテリジウム属
、ミクロコツカス属およびプレビバクテリジウム属の微
生物が産生する酵素Ｌ−アミダーゼを用いる方法（公表
昭５６−５００３１９号公報）、種々の酵母、細菌類が
産生ずるし一アミダーゼを用いる方法（特開昭５７−１
３０００号、同５９−１５９７８９号および同６０−３
６４４６号各公報）などが提案されている。
たはＬ−アミノ酸アミドから対応するし一アミノ酸を生
成させる反応について、バチルス届、バタテリジウム属
、ミクロコツカス属およびプレビバクテリジウム属の微
生物が産生する酵素Ｌ−アミダーゼを用いる方法（公表
昭５６−５００３１９号公報）、種々の酵母、細菌類が
産生ずるし一アミダーゼを用いる方法（特開昭５７−１
３０００号、同５９−１５９７８９号および同６０−３
６４４６号各公報）などが提案されている。
しかしながら、これらの方法はいずれもし一アミダーゼ
活性が弱く、多量の菌体を用いてＬ−アミノ酸の生成反
応を行った実験例であったり、ただ単にいろいろの種属
の公知菌株が種々のＤＬ−またはＬ−アミノ酸アミドを
加水分解して対応するＬ−アミノ酸を生成するというこ
とを見出した、などの知見にすぎず、微生物が産出する
酵素の作用によるＤＬ−またはＬ−アミノ酸アミドから
のし一アミノ酸の工業的製造法という観点からみた場合
、これら微生物を用いたのでは到底経済的に有利な製造
法とはなり得ない。
活性が弱く、多量の菌体を用いてＬ−アミノ酸の生成反
応を行った実験例であったり、ただ単にいろいろの種属
の公知菌株が種々のＤＬ−またはＬ−アミノ酸アミドを
加水分解して対応するＬ−アミノ酸を生成するというこ
とを見出した、などの知見にすぎず、微生物が産出する
酵素の作用によるＤＬ−またはＬ−アミノ酸アミドから
のし一アミノ酸の工業的製造法という観点からみた場合
、これら微生物を用いたのでは到底経済的に有利な製造
法とはなり得ない。
支１立且！
かかる状況から、本発明者らは、特に化学合成で容易か
つ安価に製造できるＤＬ−アミノ酸アミドを原料とし、
これから対応するし一アミノ酸を効率良（生成すること
のできる高いし一アミグーゼ活性をもつ酵素を産生ずる
微生物を得るべく、各地の土壌、汚泥等より菌のスクリ
ーニングを行った結果、エンテロバクタ−・クロアノセ
４Ｎ−７９０１、シュードモナスＳＰ、 Ｎ−７１３１
およびシュードモナスＳＰ、 Ｎ−２２１１の微生物の
産生ずる酵素が極めて高いし一アミダーゼ活性を有し、
本発明の目的達成に極めて有効であることを見出し、本
発明を完成するに到った。
つ安価に製造できるＤＬ−アミノ酸アミドを原料とし、
これから対応するし一アミノ酸を効率良（生成すること
のできる高いし一アミグーゼ活性をもつ酵素を産生ずる
微生物を得るべく、各地の土壌、汚泥等より菌のスクリ
ーニングを行った結果、エンテロバクタ−・クロアノセ
４Ｎ−７９０１、シュードモナスＳＰ、 Ｎ−７１３１
およびシュードモナスＳＰ、 Ｎ−２２１１の微生物の
産生ずる酵素が極めて高いし一アミダーゼ活性を有し、
本発明の目的達成に極めて有効であることを見出し、本
発明を完成するに到った。
すなわち、本発明は、エンテロバクタ−・クロ７ノセイ
（ＩＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ Ｃ１ｏａｃａｅ）Ｎ−
７９０Ｉ Ｃ’ＲＩ工研条寄第８７３号〕、シュードモ
ナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）ＳＰ、Ｎ−７１３１（
微工研条寄第８７４号〕またはシュードモナス（Ｐｓｅ
ｕｄｏｍｏｎａｓ）ＳＰ、 Ｎ ２２１１ （微工研
条寄第８７５号〕の微生物が産生ずるし一アミノ酸アミ
ド加水分解活性を有する酵素の作用により、一般式
Ｒ−ＣＨ−ＣＯＮＩ＋□Ｎ１１□ 〔式中、Ｒはアルキル基（炭素数１〜４）、フェニル基
、アラルキル基または置換基を存するこれらの基を表す
。〕 で示されるＤＬ−またはＬ−アミノ酸アミドから対応す
るし一アミノ酸を生成せしめること、を特徴とするＬ−
アミノ酸の製造法を要旨とするものである。
（ＩＥｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒ Ｃ１ｏａｃａｅ）Ｎ−
７９０Ｉ Ｃ’ＲＩ工研条寄第８７３号〕、シュードモ
ナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）ＳＰ、Ｎ−７１３１（
微工研条寄第８７４号〕またはシュードモナス（Ｐｓｅ
ｕｄｏｍｏｎａｓ）ＳＰ、 Ｎ ２２１１ （微工研
条寄第８７５号〕の微生物が産生ずるし一アミノ酸アミ
ド加水分解活性を有する酵素の作用により、一般式
Ｒ−ＣＨ−ＣＯＮＩ＋□Ｎ１１□ 〔式中、Ｒはアルキル基（炭素数１〜４）、フェニル基
、アラルキル基または置換基を存するこれらの基を表す
。〕 で示されるＤＬ−またはＬ−アミノ酸アミドから対応す
るし一アミノ酸を生成せしめること、を特徴とするＬ−
アミノ酸の製造法を要旨とするものである。
口の具 的説日
本発明において使用される微生物は、前記のように本発
明者らにより新たに分離、見出されたものであり、それ
ぞれ微工研条寄第８７３号（エンテロバター・クロアッ
セイＮ−７９０１） 、同第８７４号（シュードモナス
ＳＰ、 Ｎ−７１３１）および同第８７５号（シュード
モナスＳＰ、 Ｎ−２２１１）として工業技術院微生物
工業研究所（微工研）に寄託されている。
明者らにより新たに分離、見出されたものであり、それ
ぞれ微工研条寄第８７３号（エンテロバター・クロアッ
セイＮ−７９０１） 、同第８７４号（シュードモナス
ＳＰ、 Ｎ−７１３１）および同第８７５号（シュード
モナスＳＰ、 Ｎ−２２１１）として工業技術院微生物
工業研究所（微工研）に寄託されている。
これら微生物の菌学的性質は以下の通りである。
Ｎ−７９０１菌株
＋１１ 形 態
桿 菌 ０．８〜１．２ ｘ １．０〜
１．５．１７ ｍ鞭 毛 周毛１本以上 運動性 十 グラム染色性 陰 性 （２） 生理学的性質 硝酸塩の還元 十 脱窒反応 − ＭＲテスト − ｖＰテスト ＋ インドールの生成 − 硫化水素の生成 − クエン酸塩の利用 十 色素の生成 − ウレアーゼ − オキシダーゼ − カタラーゼ ＋ 生育の範囲 ＰＩ（４〜１０ 至適温度 ３５〜３７℃ 酸素に対する態度 通性 嫌気性 ０−Ｆテスト Ｆ ＩＪ！類から酸 およびガスの生成 酸の生成 ガスの生成アドニトー
ル −− アラビノース ＋ ＋ キシロース ＋ ＋ グルコース ＋ ＋ マンノース ＋ ＋フラクトース
＋ ＋ ガラクトース ＋ ＋ マルトース ＋ ＋ シェークロース ＋ ＋ ラクトース ＋ ＋ ラフィノース ＋ ラムノース ＋ グリセリン ＋ ＋ ソルビトール ＋ ＋ マンニトール ＋ ＋ イノシトール − − ズルシトール − ズルシトール − − （３） その他 デンプンの分解 − ゼラチンの分解 − 尿素の分解 弱 マロン酸塩の利 用 十リジンの脱炭酸 反応 − オルニチンの脱 炭酸反応 十 フェニルアラニン の脱アミノ反応 − アルギニンジヒ ドロラーゼ ＋ β−ガラクトシ ダーゼ ＋ ムの耐性 十 Ｎ−７１３１菌株 ＋１１ 形 態 桿 菌 鞭 毛 極毛 １本以上 運動性 十 芽 胞 認めず グラム染色性 陰 性 （２） 生理学的性質 脱窒反応 十 インドールの生成 − 硫化水素の生成 − クエン酸塩の利用 十 色素の生成 水溶性色素 − 蛍光色素 − ウレアーゼ ＋ オキシダーゼ ＋ カタラーゼ ＋ ４０℃での生育 − ０−Ｆテスト ０ キシロース ＋ グルコース ＋ − マンノース ＋ ガラクトース ＋ ラクトース − マンニトール ＋ 資化性 グルコース ＋ フラクトース ＋ Ｌ−アラビノ 十 一ス シュークロース − マロネイト − エタノール − トレハロース − ｍｅｓｏ−イノシ トール＋ β−アラニン ＋ ＤＬ−アルギニン ＋ （３） その他 デンプンの分解 − ゼラチンの分解 − 尿素の分解 − トの蓄積 アルギニンヒド ラーゼ − アミノベブチダ ーゼ ＋ 下−二λυ」１０１ （１） 形 態 桿 菌 鞭 毛 極毛 運動性 十 芽 胞 認めず グラム染色性 陰 性 （２） 生理学的性質 脱窒反応 弱 インドールの生成 − ０ｇ化水素の生成 − クエン酸塩の利用 十 色素の生成 水溶性色素 弱 蛍光色素 − ウレアーゼ ＋ オキシダーゼ ＋ カタラーゼ ＋ ４０℃での生育 − ０−Ｆテスト Ｏ キシロース ＋ グルコース ＋ − マンノース ＋ ガラクトース ＋ ラクトース − マンニトール 弱 資化性 グルコース ＋ フラクトース ＋ Ｌ−アラビノ ＋ −ス シュークロース − マロ名イト − エタノール − トレハロース − ｍｅｓｏ−イノシ トール 弱 β−アラニン 弱 ＯＬ−アルギニン − （３） その他 デンプンの分解 − ゼラチンの分解 − 尿素の分解 十 ラーゼ − アミノペプチダ ーゼ ＋ 以上の菌学的性質をバージニーズ・マニュアル・オブ・
ブクミネイティブ・バクテリオロジー第８版（Ｂｅｒｇ
ｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｒ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉ
ｖｅ［１ａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ ８ｔｈ、 ｅｄ、）
に従って検索すると、Ｎ−７９０１菌株はエンテロバク
タ−・クロアッセイと、Ｎ−７１３１およびＮ−２２１
１菌株はシェードモナス属に属する細菌とそれぞれ同定
された。なお、Ｎ−７１３１菌株は細胞内にポリ−β−
ヒドロキシブチレートを蓄積し、・４０℃での生育およ
びアルギニンジヒドラーゼが共に陰性、脱窒反応は陽性
を示し、糖の資化性等に非典型的性状が認められたが、
本菌はシュードモナス・ソラナシエラムまたはその近縁
種と思われる。
１．５．１７ ｍ鞭 毛 周毛１本以上 運動性 十 グラム染色性 陰 性 （２） 生理学的性質 硝酸塩の還元 十 脱窒反応 − ＭＲテスト − ｖＰテスト ＋ インドールの生成 − 硫化水素の生成 − クエン酸塩の利用 十 色素の生成 − ウレアーゼ − オキシダーゼ − カタラーゼ ＋ 生育の範囲 ＰＩ（４〜１０ 至適温度 ３５〜３７℃ 酸素に対する態度 通性 嫌気性 ０−Ｆテスト Ｆ ＩＪ！類から酸 およびガスの生成 酸の生成 ガスの生成アドニトー
ル −− アラビノース ＋ ＋ キシロース ＋ ＋ グルコース ＋ ＋ マンノース ＋ ＋フラクトース
＋ ＋ ガラクトース ＋ ＋ マルトース ＋ ＋ シェークロース ＋ ＋ ラクトース ＋ ＋ ラフィノース ＋ ラムノース ＋ グリセリン ＋ ＋ ソルビトール ＋ ＋ マンニトール ＋ ＋ イノシトール − − ズルシトール − ズルシトール − − （３） その他 デンプンの分解 − ゼラチンの分解 − 尿素の分解 弱 マロン酸塩の利 用 十リジンの脱炭酸 反応 − オルニチンの脱 炭酸反応 十 フェニルアラニン の脱アミノ反応 − アルギニンジヒ ドロラーゼ ＋ β−ガラクトシ ダーゼ ＋ ムの耐性 十 Ｎ−７１３１菌株 ＋１１ 形 態 桿 菌 鞭 毛 極毛 １本以上 運動性 十 芽 胞 認めず グラム染色性 陰 性 （２） 生理学的性質 脱窒反応 十 インドールの生成 − 硫化水素の生成 − クエン酸塩の利用 十 色素の生成 水溶性色素 − 蛍光色素 − ウレアーゼ ＋ オキシダーゼ ＋ カタラーゼ ＋ ４０℃での生育 − ０−Ｆテスト ０ キシロース ＋ グルコース ＋ − マンノース ＋ ガラクトース ＋ ラクトース − マンニトール ＋ 資化性 グルコース ＋ フラクトース ＋ Ｌ−アラビノ 十 一ス シュークロース − マロネイト − エタノール − トレハロース − ｍｅｓｏ−イノシ トール＋ β−アラニン ＋ ＤＬ−アルギニン ＋ （３） その他 デンプンの分解 − ゼラチンの分解 − 尿素の分解 − トの蓄積 アルギニンヒド ラーゼ − アミノベブチダ ーゼ ＋ 下−二λυ」１０１ （１） 形 態 桿 菌 鞭 毛 極毛 運動性 十 芽 胞 認めず グラム染色性 陰 性 （２） 生理学的性質 脱窒反応 弱 インドールの生成 − ０ｇ化水素の生成 − クエン酸塩の利用 十 色素の生成 水溶性色素 弱 蛍光色素 − ウレアーゼ ＋ オキシダーゼ ＋ カタラーゼ ＋ ４０℃での生育 − ０−Ｆテスト Ｏ キシロース ＋ グルコース ＋ − マンノース ＋ ガラクトース ＋ ラクトース − マンニトール 弱 資化性 グルコース ＋ フラクトース ＋ Ｌ−アラビノ ＋ −ス シュークロース − マロ名イト − エタノール − トレハロース − ｍｅｓｏ−イノシ トール 弱 β−アラニン 弱 ＯＬ−アルギニン − （３） その他 デンプンの分解 − ゼラチンの分解 − 尿素の分解 十 ラーゼ − アミノペプチダ ーゼ ＋ 以上の菌学的性質をバージニーズ・マニュアル・オブ・
ブクミネイティブ・バクテリオロジー第８版（Ｂｅｒｇ
ｙ’ｓ Ｍａｎｕａｌ ｏｒ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉ
ｖｅ［１ａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ ８ｔｈ、 ｅｄ、）
に従って検索すると、Ｎ−７９０１菌株はエンテロバク
タ−・クロアッセイと、Ｎ−７１３１およびＮ−２２１
１菌株はシェードモナス属に属する細菌とそれぞれ同定
された。なお、Ｎ−７１３１菌株は細胞内にポリ−β−
ヒドロキシブチレートを蓄積し、・４０℃での生育およ
びアルギニンジヒドラーゼが共に陰性、脱窒反応は陽性
を示し、糖の資化性等に非典型的性状が認められたが、
本菌はシュードモナス・ソラナシエラムまたはその近縁
種と思われる。
上記微生物を培養して本発明の酵素を生成せしめるには
、炭素源、窒素源、無機塩および有機栄養源を含をする
通常の培地を用い好気的に咳微生物の培養を行えばよい
。
、炭素源、窒素源、無機塩および有機栄養源を含をする
通常の培地を用い好気的に咳微生物の培養を行えばよい
。
炭素源としてはグルコース、フラクトース、シュークロ
ース、マルトース等の糖類、酢酸、クエン酸等の有機酸
その他が適宜使用でき、その使用量は通常培地中に０．
１〜１０％（ｒｒＬ量％、以下同じ）である。窒素源と
してはペプトン、肉エキス、酵母エキス、コーンステイ
ープリカー、蛋白質加水分解物、アミノ酸等の一般天然
窒素源の他に各種の無機酸または有機酸のアンモニウム
塩等が使用できる。無機塩類としてはＫＩＩｊＰＯａ、
ＫｚｌｌＰＯｎ、 Ｎａ２１１ＰＯ４、ＮａＣｌ、Ｃ
ａＣＩ １、Ｍｇ５０ｍ ’ ＩＨｚＯおよびＦｅ、
Ｍｎ、 Ｚｎｓ Ｃ。
ース、マルトース等の糖類、酢酸、クエン酸等の有機酸
その他が適宜使用でき、その使用量は通常培地中に０．
１〜１０％（ｒｒＬ量％、以下同じ）である。窒素源と
してはペプトン、肉エキス、酵母エキス、コーンステイ
ープリカー、蛋白質加水分解物、アミノ酸等の一般天然
窒素源の他に各種の無機酸または有機酸のアンモニウム
塩等が使用できる。無機塩類としてはＫＩＩｊＰＯａ、
ＫｚｌｌＰＯｎ、 Ｎａ２１１ＰＯ４、ＮａＣｌ、Ｃ
ａＣＩ １、Ｍｇ５０ｍ ’ ＩＨｚＯおよびＦｅ、
Ｍｎ、 Ｚｎｓ Ｃ。
等の重金属イオンが必要に応じて適宜使用される。
なお、この際、高い酵素活性を誘導させるため炭素数２
〜５の脂肪属アミド（例えば、アセトアミド、プロピオ
ンアミド、ブチルアミド、サクシノアミド等）を少量添
加することが効果的であり、その添加量は使用する微生
物によって若干異なるが通常培地中０．０１％以上、と
りわけ０．１〜０．５χ程度とするのが好ましい。
〜５の脂肪属アミド（例えば、アセトアミド、プロピオ
ンアミド、ブチルアミド、サクシノアミド等）を少量添
加することが効果的であり、その添加量は使用する微生
物によって若干異なるが通常培地中０．０１％以上、と
りわけ０．１〜０．５χ程度とするのが好ましい。
培養はＰ１１５〜１０、温度２０〜４０℃の範囲で１〜
５日間好気的に行う。
５日間好気的に行う。
本発明は、微生物が産出する酵素の作用を利用するもの
であるが、その酵素作用は上記のように培養して得た微
生物の培養液、分離生菌体、または菌体処理物（例えば
菌体破砕物、菌体抽出物等）、さらには常法に従って菌
体または菌体処理物をポリアクリルアミド、カラギーナ
ン等で固定化した菌体等いずれの使用によっても得るこ
とが可能で、これらの使用形態は全て本発明に適用し得
る。
であるが、その酵素作用は上記のように培養して得た微
生物の培養液、分離生菌体、または菌体処理物（例えば
菌体破砕物、菌体抽出物等）、さらには常法に従って菌
体または菌体処理物をポリアクリルアミド、カラギーナ
ン等で固定化した菌体等いずれの使用によっても得るこ
とが可能で、これらの使用形態は全て本発明に適用し得
る。
加水分解反応は、通常、前記一般式で示されるＤＬ−ま
たはＬ−アミノ酸アミド濃度０．５〜５０％（反応基質
溶液はスラリー状であってもよい）、微生物等の使用量
は乾燥菌体として反応液泡たり０．０１〜１０％、反応
温度２０〜６０℃、ＰＩ＋６〜１１、反応時間５〜１０
０時間の範囲で行う。
たはＬ−アミノ酸アミド濃度０．５〜５０％（反応基質
溶液はスラリー状であってもよい）、微生物等の使用量
は乾燥菌体として反応液泡たり０．０１〜１０％、反応
温度２０〜６０℃、ＰＩ＋６〜１１、反応時間５〜１０
０時間の範囲で行う。
かくして、反応液中に生成、蓄積したし一アミノ酸は、
イオン交換法、その他公知の方法を組合せて分離、精製
し取得することができる。
イオン交換法、その他公知の方法を組合せて分離、精製
し取得することができる。
本発明に使用されるＤＬ−またはし・アミノ酸アミドは
、前記一般式中、Ｒがアルキル基（炭素Ｂ１〜４）、フ
ェニ、ル基、アラルキル基または置換基を有するこれら
の基で表される化合物であり、置換基としてはメルカプ
ト基、ヒドロキシル基、７ミノ基、カルボキシル基、フ
ェニル基、インドリル基、ピリジル基、イミダゾリル基
等である。
、前記一般式中、Ｒがアルキル基（炭素Ｂ１〜４）、フ
ェニ、ル基、アラルキル基または置換基を有するこれら
の基で表される化合物であり、置換基としてはメルカプ
ト基、ヒドロキシル基、７ミノ基、カルボキシル基、フ
ェニル基、インドリル基、ピリジル基、イミダゾリル基
等である。
本発明のし一アミノ酸の製造の具体例としては、例えば
、Ｌ〜フェニルアラニン、Ｌ−１−リプトファン、Ｌ−
ロイシン、Ｌ−メチオニン、Ｌ−セリン等を挙げること
ができる。
、Ｌ〜フェニルアラニン、Ｌ−１−リプトファン、Ｌ−
ロイシン、Ｌ−メチオニン、Ｌ−セリン等を挙げること
ができる。
以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、本
発明はこれらの例のみに限定されるものではない。なお
、各実施例中、Ｌ−アミノ酸の確認、定量はＷｊＷＩク
ロマトグラフィーによるニンヒドリン発色位置および高
速液体クロマトグラフィーにより行った。
発明はこれらの例のみに限定されるものではない。なお
、各実施例中、Ｌ−アミノ酸の確認、定量はＷｊＷＩク
ロマトグラフィーによるニンヒドリン発色位置および高
速液体クロマトグラフィーにより行った。
実施例１
下記の組成の培地を使用し、３０℃で４８時間Ｎ−７９
０１菌の振盪培養を行った。
０１菌の振盪培養を行った。
シュークロース １％
肉エキス ０，５尭
プロピオンアミド ０．５％
Ｈ５
この培養液１００ｍ ｌを遠心分離し、得られた生菌体
を５０＋ｗ Ｉ！のＴ ｒ ｉ ｓ −ＨＣｌ 緩衝液
（Ｐ １１９ ）に懸濁した。
を５０＋ｗ Ｉ！のＴ ｒ ｉ ｓ −ＨＣｌ 緩衝液
（Ｐ １１９ ）に懸濁した。
次いで、この懸濁液１ｍｌを第１表に示した各種アミド
のＯ，Ｓ％水溶液（Ｔｒｉｓ−ＨＣＩ緩衝液（ＰＨ９）
使用〕の生成アミノ酸量、Ｌ−アミノ酸／生成アミノ酸
を測定し、第１・表に示す結果を得た。
のＯ，Ｓ％水溶液（Ｔｒｉｓ−ＨＣＩ緩衝液（ＰＨ９）
使用〕の生成アミノ酸量、Ｌ−アミノ酸／生成アミノ酸
を測定し、第１・表に示す結果を得た。
第 １ 表
実施例２
下記の組成の培地を使用し、３０℃で４８時間Ｎ−２２
１１菌株の振盪培養を行った。
１１菌株の振盪培養を行った。
グリセロール １％
酵母エキス ０．０５χ
イソブチルアミド ０．５χ
Ｈ７
以下、実施例１において反応時間を１〜３時間とした以
外、実施例１と同様の操作を行い第２表に示す結果を得
た。
外、実施例１と同様の操作を行い第２表に示す結果を得
た。
第 ２ 表
実施例３
下記の組成の培地を使用し、３０℃で４８時間Ｎ−７１
３１菌の振盪培養を行った グリセロール １％ 肉エキス ０．５％ イソブチルアミド ０．５％ Ｈ７ 以下、実施例２と同様の操作を行い第３表に示す結果を
得た。
３１菌の振盪培養を行った グリセロール １％ 肉エキス ０．５％ イソブチルアミド ０．５％ Ｈ７ 以下、実施例２と同様の操作を行い第３表に示す結果を
得た。
第 ３ 表
実施例４
実施例１と同様にして得たＮ−７９０１菌の懸濁液１ｍ
ｊ！をＬ−フェニルアラニンアミドに加えて、４０℃で
１５分反応させたところ、フェニルアラニンの収率は７
５％で、生成したフェニルアラニンは全てＬ一体だけで
あった。
ｊ！をＬ−フェニルアラニンアミドに加えて、４０℃で
１５分反応させたところ、フェニルアラニンの収率は７
５％で、生成したフェニルアラニンは全てＬ一体だけで
あった。
Claims (2)
- （１）エンテロバクター・クロアッセイ（Ｅｎｔｅｒｏ
−ｂａｃｔｅｒ Ｃｌｏａｃａｅ）Ｎ−７９０１〔微工
研条寄第８７３号〕またはシュードモナス（Ｐｓｅｕｄ
ｏｍｏｎａｓ）ｓｐ．Ｎ−７１３１〔微工研条寄第８７
４号〕またはシュードモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
）ｓｐ．Ｎ−２２１１〔微工研条寄第８７５号〕の微生
物が産生するＬ−アミノ酸アミド加水分解活性を有する
酵素の作用により、 一般式▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、Ｒはアルキル基（炭素数１〜４）、フェニル基
、アラルキル基または置換基を有するこれらの基を表す
。〕 で示されるＤＬ−またはＬ−アミノ酸アミドから対応す
るＬ−アミノ酸を生成せしめること、を特徴とするＬ−
アミノ酸の製造法。 - （２）上記一般式で示されるＤＬ−またはＬ−アミノ酸
アミドがフェニルアラニンアミドまたはトリプトファン
アミドである特許請求の範囲第１項記載の製造法。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60193867A JPS6255097A (ja) | 1985-09-04 | 1985-09-04 | Ｌ−アミノ酸の製造法 |
| GB8619969A GB2182036B (en) | 1985-09-04 | 1986-08-15 | Process for producing l-amino acids |
| DE3629242A DE3629242C2 (de) | 1985-09-04 | 1986-08-28 | Verfahren zur Herstellung von L-Aminosäuren |
| FR868612429A FR2586702B1 (fr) | 1985-09-04 | 1986-09-04 | Procede pour la production de l-amino-acides |
| US07/525,302 US5215897A (en) | 1985-09-04 | 1990-05-17 | Process for producing L-amino acids |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP60193867A JPS6255097A (ja) | 1985-09-04 | 1985-09-04 | Ｌ−アミノ酸の製造法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6255097A true JPS6255097A (ja) | 1987-03-10 |
| JPH0552195B2 JPH0552195B2 (ja) | 1993-08-04 |
Family
ID=16315072
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP60193867A Granted JPS6255097A (ja) | 1985-09-04 | 1985-09-04 | Ｌ−アミノ酸の製造法 |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS6255097A (ja) |
| DE (1) | DE3629242C2 (ja) |
| FR (1) | FR2586702B1 (ja) |
| GB (1) | GB2182036B (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5130240A (en) * | 1988-03-24 | 1992-07-14 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Process for producing d-alpha-alanine and/or l-alpha-alanineamide by arthrobacter sp |
| US5252470A (en) * | 1988-03-24 | 1993-10-12 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | D-amidase and process for producing D-α-alanine and/or L-α-alanineamide |
| JP2007289205A (ja) * | 2007-07-31 | 2007-11-08 | Mitsubishi Rayon Co Ltd | 光学活性ｔｅｒｔ−ロイシン及び光学活性ｔｅｒｔ−ロイシンアミドの製造方法 |
Families Citing this family (8)
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|---|---|---|---|---|
| KR890701753A (ko) * | 1987-08-17 | 1989-12-21 | 원본미기재 | 아미노산 아미드의 라세미화 방법 |
| US4981799A (en) * | 1987-08-21 | 1991-01-01 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Acylamino acid racemase, production and use thereof |
| DE4014564C1 (ja) * | 1990-05-07 | 1991-07-18 | Forschungszentrum Juelich Gmbh, 5170 Juelich, De | |
| NL9100038A (nl) * | 1991-01-11 | 1992-08-03 | Stamicarbon | Enzym-gekatalyseerde bereiding van optisch aktieve carbonzuren. |
| EP0734453A1 (en) * | 1993-12-17 | 1996-10-02 | Dsm N.V. | Phenylserine amides and the preparation of phenylserines/phenylserine amides |
| JP3112090B2 (ja) | 1994-05-09 | 2000-11-27 | デグサーヒュルス アクチェンゲゼルシャフト | ペプチドアミダーゼを含有する微生物の獲得方法、それにより得られた微生物、その中に含有されるペプチドアミダーゼ及びその使用 |
| GB9615852D0 (en) | 1996-07-29 | 1996-09-11 | Allied Colloids Ltd | Production of amino acids and enzymes used therefor |
| US6949658B2 (en) | 2000-05-18 | 2005-09-27 | Mitsubishi Rayon Co., Ltd. | Process for producing optically active α-amino acid and optically active α-amino acid amide |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5713000A (en) * | 1980-06-24 | 1982-01-22 | Ube Ind Ltd | Preparation of optical active tryptophane |
| JPS6036446A (ja) * | 1983-08-09 | 1985-02-25 | Mitsubishi Gas Chem Co Inc | Ｌ−α−アミノ酸の製造方法 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| LU74142A1 (ja) * | 1976-01-08 | 1977-07-22 | ||
| GB1577087A (en) * | 1977-01-07 | 1980-10-15 | Novo Industri As | Enzyme preparation having l-amino acyl amidase activity |
| EP0193113B1 (en) * | 1985-02-25 | 1992-01-22 | Mitsubishi Gas Chemical Company, Inc. | Process for optically isomerizing optically active alpha-amino acid amides and process for producing optically active alpha-amino acids |
-
1985
- 1985-09-04 JP JP60193867A patent/JPS6255097A/ja active Granted
-
1986
- 1986-08-15 GB GB8619969A patent/GB2182036B/en not_active Expired
- 1986-08-28 DE DE3629242A patent/DE3629242C2/de not_active Expired - Fee Related
- 1986-09-04 FR FR868612429A patent/FR2586702B1/fr not_active Expired
Patent Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5713000A (en) * | 1980-06-24 | 1982-01-22 | Ube Ind Ltd | Preparation of optical active tryptophane |
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|---|---|---|---|---|
| US5130240A (en) * | 1988-03-24 | 1992-07-14 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Process for producing d-alpha-alanine and/or l-alpha-alanineamide by arthrobacter sp |
| US5252470A (en) * | 1988-03-24 | 1993-10-12 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | D-amidase and process for producing D-α-alanine and/or L-α-alanineamide |
| JP2007289205A (ja) * | 2007-07-31 | 2007-11-08 | Mitsubishi Rayon Co Ltd | 光学活性ｔｅｒｔ−ロイシン及び光学活性ｔｅｒｔ−ロイシンアミドの製造方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DE3629242A1 (de) | 1987-03-12 |
| GB8619969D0 (en) | 1986-09-24 |
| FR2586702B1 (fr) | 1989-12-15 |
| GB2182036B (en) | 1989-08-23 |
| DE3629242C2 (de) | 1993-12-02 |
| JPH0552195B2 (ja) | 1993-08-04 |
| GB2182036A (en) | 1987-05-07 |
| FR2586702A1 (fr) | 1987-03-06 |
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