JPS6257199B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

本発明は新規な抗生物質に関し、さらに詳しく
は、下記式 式中、Ｒは水素原子又はメチル基を表わす、 で示される化合物又はその塩、それらの製造方法
及び抗菌剤としての用途に関する。 上記式（）で示される化合物は、細菌、酵
母、糸状菌等に対して広い抗菌力を有し、且つマ
ウス白血病L1210細胞及びSarccoma180腹水癌等
に対し抗腫瘍活性を示す抗生物質であり、以下の
説明においては、上記式（）で示される化合物
を「抗生物質1907」と総称し、また、Ｒが水素源
子を表わす場合の式（）の化合物を「抗生物質
1907」と、そしてＲがメチル基を表わす場合の
式（）の化合物を「抗生物質1907」と称す
る。 抗生物質1907は、上記式（）から明らかなと
おり、新規アミノ酸である２−アミノ−４−メチ
ル−６−ヒドロキシ−８−オキソデカン酸１分
子、ロイシン２分子、α−アミノイソ酪酸３分
子、４−メチルプロリン１分子、β−ヒドロキシ
ロイシン１分子及びβ−アラニン１分子から構成
されたペプチド鎖のＮ末端に４−メチル−２−ヘ
キセン酸を有し且つＣ末端にＮ−メチル−１，２
−プロパンジアミン（Ｒ＝Ｈ）又はＮ，Ｎ−ジメ
チル−１，２−プロパンジアミン（Ｒ＝CH₃）が
結合したペプチド誘導体であり、塩基性を有し、
多くの無機又は有機の酸との塩を形成し得る。か
かる塩の例としては、塩酸塩、リン酸塩、硫酸塩
等の無機酸塩；酢酸塩、プロピオン酸塩、オレイ
ン酸塩、クエン酸塩、酒石酸塩、コハク酸塩、リ
ンゴ酸塩、グルタミン酸塩、パントテン酸塩等の
有機酸塩等が挙げられ、中でも製薬学的に許容し
うる酸との塩が好適である。 本発明に従えば、上記抗生物質1907は、抗生物
質1907を生産する能力を有するペシロミセス
（Paecilomyces）属に属する糸状菌を、PH値が約
8.5〜約11の栄養培地中で培養し、その培養液か
ら抗菌活性を有する成分として抗生物質1907を採
取することから成る方法により製造することがで
きる。 本発明の方法において使用しうる抗生物質1907
生産菌としては、後述する理化学的物質及び生物
学的性質を有する抗生物質1907を生産する能力を
有する微生物である限り、特に制限はないが、殊
にペシロミセス属に属する糸状菌が好適である。
かかるペシロミセス属に属する糸状菌の中からの
抗生物質1907生産菌の検索は例えば以下に述べる
如くして容易に行なうことができる。 抗生物質1907生産菌の検索は常法に従い以下に
示す如くして行なうことができる：土壌サンプル
約１ｇを無菌水約６mlに懸濁する。土壌懸濁液を
以下に示す寒天培地上に塗布する。培地組成はＣ
源、Ｎ源共に一般糸状菌の生育可能なものであれ
ばいずれでも良いが、培地に炭酸ナトリウム１〜
３％を加え、培地PHを10.0〜10.5にすることが重
要である。培地としては、グルコース１％、アス
パラギン0.03％、ペプトン0.02％、酵母エキス
0.01％、リン酸二カリウム0.1％、硫酸マグネシ
ウム0.01％、鉄、マンガン等の微量金属及び２％
寒天、更に炭酸ナトリウム１％を含む培地を用い
る。本培地に上記土壌懸濁液を塗布し、26.5℃で
約５〜10日間培養すると目的の菌のコロニーが得
られるので、更に試験管に作成した斜面培地に移
し、26.5℃で10日間培養し保存する。 上記の如く得られた菌株は、一般の糸状菌の培
養に用いられる培地を用いて液体培養を行なう。
この時培地の初期PHを炭酸ソーダ等を用いてPH
10.0〜PH10.5に調節することが重要であり、培養
は26.5℃で行ない、約５〜８日間好気的に培養す
る。培養終了後培養液とアセトンを１：１の割合
で良く混和し、上澄液をパルプデイスクに浸み込
ませ、下記の被検菌を用いた検定板上に置き抗菌
活性を調べる。被検菌としてスタフイロコツカ
ス・アウレウス（Staphylococcusaureus）、バチ
ルス・ズブチルス（Bacillussubtilis）、エシエリ
ヒア・コウライ（Escherichia Coli）、カンジ
ダ・アルビカンス（Candida albicans）等を用
い、抗菌活性を調べ、上記各被検菌に対し強い抗
菌スペクトルを示す菌株を抗生物質1907生産菌候
補として選出する。 このようにして選出された候補菌については、
さらにペーパークロマトグラフイーや薄層クロマ
トグラフイーを行ない、抗生物質1907の生産性を
確認する。 これにより、当業者は本発明の目的に適合した
抗生物質1907生産菌を容易に検索することができ
る。 上記の如くして検索された抗生物質1907生産菌
の代表的なものには、ペシロミセス属に属する抗
生物質1907生産菌が包含され、その好適な一例と
しては、東京都文京区の東京大学理学部付属植物
園内で採取した土壌から分離した糸状菌で本発明
者らがNo.1907菌株の番号を付した菌株が挙げられ
る。 上記の如くして分離されたNo.1907菌株の性状は
以下の通りである。 (a) 各培地における生育状態 麦芽エキス寒天培地 コロニーの生育は良く、26.5℃、10日間の
培地で、直径が38〜40cmであり、培地の着色
はみられない。表面は気中菌糸が豊富で、羊
毛状に生育し、中央部で山をなしている。色
調は薄赤紫色であり、山から周辺に向つて縦
に５〜６本のしわを生じている。裏面の生育
は密で、中心部より放射状に５〜６本のしわ
を生じている。色調は、中央部が褐色で周辺
部は白色である。分生子の形成は良好で分生
子柄の先端にほぼ円形の分生子を鎖状につけ
る。 バレイシヨ・ブドウ糖寒天培地 コロニーの生育は非常に良好で、26.5℃、
10日間の培養で、直径が40〜41cmであり、培
地の着色は見られない。表面は気中菌糸が豊
富で、羊毛状に生育し、中央部で山をなして
いる。色調は明灰紫色であり、山の頂上から
縦じわが多くみられ、放射状に６〜７本のし
わが観察される。裏面の生育は密で、中心部
より放射状に２〜３本のしわが見られる。色
調は中心部が焦げ茶色で周辺に行くに従つて
白となる。分生子の形成は良好で、分生子柄
の先端にほぼ円形の分生子を鎖状につける。 ツアペツク寒天培地 コロニーの生育は良く、26.5℃、10日間の
培養で、直径が30.5〜33.0cmであり、培地の
着色は見られない。表面は気中菌糸が豊富
で、綿毛状に生育し、中央部で山をなしてい
る。色調は白色だが、中央部は薄灰紫色を呈
す。山より放射状に４〜５本のしわを生じて
いる。山の中央部に水滴がみられる。裏面の
生育は密で、中心部より年輪状に３〜４本の
しわを生じ、また大きく４〜５当分するよう
な放射状のしわを生じている。色調は黄褐色
である。分生子の形成は良好で、分生子柄の
先端に鎖状にほぼ円形の分生子をつくる。分
生子柄の先端は曲つているものが見られる。 (b) 生理的、生態的性質 生菌の生理、生態的性状はツアペツク液体培
地を用いて試験した。 生育適温と生育温度範囲 生育適温は22.5℃〜33.6℃であり、26.5℃
での生育が最も良く、９℃〜35.2℃まで生育
可能である。 生育最適PHと生育PH範囲 生育最適PHはPH7.5〜PH9.00であり、PH2.5
〜PH11.00まで生育可能である。 本菌を、R.A.Samson（1974）の「ペシロミセ
ス・アンド・サム・アライド・ハイフオミセテス
（Paecilomyes and Some Allied
Hyphomycetes）」並びにAgnes H.S.Brown及び
George Smithの文献“The Genus
Paecilomyces Bainier And It′s Perfect Stage
Byssochlamys Westling”（Trans.Brit.mycol.
Soc.，40(1)，17〜89（1957））に示された
Paecilomyces Iilacinus（ペシロミセス・リラシ
ナス）の記載と比較したところ、コロニーの生育
度、コロニー表面の形態、色調が良く似ているこ
と、梗子及び分生子の形態が類似していること、
更に厚膜胞子が存在しないことなど多くの性状で
本菌とペシロミセス・リラシナス
（Paecilomyces Iilacinus）の記載性状とは一致
していることが認められた。従つて、本菌をペシ
ロミセス・リラシナス（Paecilomyces
Iilacinus）と同定した。ただし、ペシロミセス・
リラシナスのタイプカルチユアとしてペシロミセ
ス・リラシナスATCC10114及びIAM7002につい
て生産試験を行なつたが、抗生物質1907の生成は
全く認められなかつたので、本発明の菌株はペシ
ロミセス・リラシナスに属する生理的変種と認め
られ、ペシロミセス・リラシナスNo.1907と命名し
た。 尚、本菌は昭和55年９月26日に工業技術院微生
物工業技術研究所に微生物受託番号 微工研菌寄
第5715号として寄記されている。 以上に述べた抗生物質1907生産菌を用いて抗生
物質1907を生産するには、抗生物質1907生産菌、
例えば、ペシロミセス・リラシナスNo.1907を適当
な栄養培地中で好気性条件下に培養する。 該栄養培地のための栄養源としては、糸状菌の
栄養源として通常使用されるものが使用され、例
えば炭水化物、窒素源、無機塩などの同化しうる
栄養源が使用される。例えば、ぶどう糖、グリセ
リン、麦芽糖、蔗糖、糖蜜、デキストリン、殿粉
などの炭水化物や、大豆油、落花生油、ラードな
どの油脂、脂肪類の如き炭素源；ペプトン、肉エ
キス、大豆粉、綿実粉、乾燥酵母、コーンスチー
プリカー、酵母エキス、脱脂乳、カゼイン、硝酸
ナトリウム、硝酸アンモニウム、硫酸アンモニウ
ムなどの窒素源；燐酸二カリウム、食塩、炭酸カ
ルシウム、硫酸マグネシウムなどの無機塩が使用
でき、必要により微量金属例えばコバルト、マン
ガンなどを添加することができる。栄養源として
は、その他、抗生物質1907生産菌を利用して抗生
物質1907を生産するものであれば、いずれの栄養
源でも使用でき、公知の糸状菌の培養材料はいず
れも使用できる。また、加熱殺菌時及び培養中に
おける発泡を抑えるため、シリコン、植物物油な
どの消泡剤を添加することもできる。 上記の如き栄養源の配合割合は特に制約される
ものではなく、広範囲に亘つて変えることがで
き、使用する抗生物質1907生産菌にとつて最適の
栄養源の組成及び配合割合は、当業者であれば簡
単な小規模実験により容易に決定することができ
る。 また栄養培地は培養に先立ち殺菌することがで
き、この殺菌の前又は後で、培地のPHを約8.5〜
約11の範囲、特にPH9.0〜10.5の範囲に調節し、
培養中このPH範囲を維持するのが重要である。培
地のPHを上記範囲に調節維持する方法としては、
水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、炭酸ナトリ
ウム、重炭酸ナトリウム、アンモニア等の塩基性
物質を培地に適宜添加する方法が挙げられる。中
でも、培養の当初に、培地に炭酸ナトリウムを
0.5〜３ｇ／dlの濃度で添加しておくのが好都合
である。 かかる栄養培地での抗生物質1907生産菌の培養
は原則的には、一般の糸状菌による抗生物質の製
造において通常使用されている方法に準じて行な
うことができる。通常好気的条件下に培養するの
が好適であり、通常撹拌又は振盪しながら及び／
又は通気しながら行なうことができる。また、培
養方法としては静置培養、振盪培養、通気撹拌を
ともなう液内培養のいずれも使用可能であるが、
液内培養が有利である。 使用しうる培養温度は抗生物質1907生産菌の発
育が実質的に阻害されず抗生物質1907を生産し得
る範囲であれば特に制限されるものではなく、使
用する生産菌株に応じて変えることができるが、
一般に20〜35℃、好ましくは25〜30℃範囲内の温
度が好適である。 大規模な大量培養の場合、適宜種母培養を行な
い、これを栄養培地に接種し、液体培養するのが
有利である。 培養は通常抗生物質1907が充分に蓄積するまで
継続することができる。その培養時間は、培地の
組成や培養温度、使用生産株等により異なるが、
通常４〜８日間の範囲である。 なお、使用する培養条件は、使用する生産菌株
の特性に応じて、当業者であれば簡単な実験によ
り、最適条件を容易に決定することができる。 培養中の抗生物質1907の蓄積量はビオアツセイ
法及びビオオートグラフイーにより定量すること
ができ、それにより最適蓄積量を容易に知ること
ができる。 かくして、使用した培養条件、用いた菌株の種
類等に応じて、培養物中に抗生物質1907−及び
1907−のいずれか一方が主として生産され、或
いは両者が同時に生産される。このようにして培
養物中に蓄積された抗生物質1907は、主として菌
体外に存在するので、有利には、培養後、過、
遠心分離、抽出などのそれ自体公知の分離法によ
つて菌体を除去し、その液、上澄液、抽出液な
どより回収される。 回収はそれ自体公知の種々の方法で行なうこと
ができ、特にペプチド系物質の回収のために通常
使用される方法が有利に適用される。例えば、培
養液を先ず塩酸、硫酸等の希鉱酸で酸性に変えた
後、過、遠心分離、等の方法で固形分を除去
し、得られる液又は上澄液に水酸化ナトリウ
ム、水酸化カリウム、炭酸ナトリウム等のアルカ
リを加えてPH値約８〜約９のアルカリ性とする。
次いで、この液又は上澄液を酢酸エチル、クロ
ロホルム、ベンゼン、ｎ−ブタノール等の水−非
混和性溶媒で抽出し、この抽出液を必要に応じて
濃縮した後、活性炭、アンバーライトXAD（ロ
ーム・アンド・ハース社製）、ダイヤ・イオンHP
−20（三菱化成社製）等による吸着と、メタノー
ル水、アセトン水等による溶出；セフアデツクス
LH−20及びＧ−10（フアルマシヤ社製）、バイ
オ・ゲルＰ−２（バイオ・ラツド社製）、等によ
るゲル過；セルローズ、アビセルSF（アメリ
カン・ビスコース社製）、シリカゲル、アルミナ
等によるカラム法または薄層法のクロマトグラフ
イー；石油エーテル等の溶剤添加による強制沈殿
法；凍結乾燥法、等をそれぞれ単独で或いは適宜
組合せることにより、目的とする抗生物質1907を
単離することができる。例えば、上記抽出液をシ
リカゲルカラムクロマトグラフイーにかけ、最初
ベンゼン／メタノール（10／１υ／υ）混合溶媒
で溶出し、順次メタノールの割合を多くし、最後
にベンゼン／メタノール（１／１ υ／υ）混合
溶媒で溶出する。その結果、抗生物質1907−は
２番目のフラクシヨンとして溶出し、抗生物質
1907−は８番目のフラクシヨンとして溶出す
る。溶出せしめられた上記各フラクシヨンは例え
ば高速液体クロマトグラフイー及び／又はセフア
デツクスLH−20を用いるカラムクロマトグラフ
イー等によりさらに精製することができ、それに
よつて、抗生物質1907−及び1907−を白色粉
末として回収することができる。 このようにして得られる抗生物質1907は塩基性
の物質であり、各種の酸により酸付加塩を形成す
る。かかる酸付加塩の形成はそれ自体公知の造塩
反応により、該抗生物質を酸で処理することによ
り容易に行なうことができる。かかる酸付加塩の
形成に用いうる酸としては、例えば、塩酸、リン
酸、硫酸、等の無機酸；酢酸、プロピオン酸、オ
レイン酸、クエン酸、酒石酸、コハク酸、リンゴ
酸、グルタミン酸、パントテン酸等の有機酸等が
包含される。 本発明により提供される抗生物質1907−及び
1907−は広範囲の抗菌活性を有し、細菌、酵
母、糸状菌等の各種微生物、例えば、スタフイロ
コツカス属、サルシナ属、ミクロコツカス属、セ
ラチア属等に属する細菌；カンジダ属、クリプト
コツカス属、ロドトルラ属、トリコフイトン属、
スポロトリカム属、コシデイオイデス属、ペニシ
リウム属、アルターナリア属、ペリクラリア属、
ピリクラリア属、クラドスポリウム属等に属する
真菌に対して強力な抗菌力を示す。 特に本発明の抗生物質1907は糸状菌に対して優
れた抗菌活性を示し、中でも、水虫病原菌である
トリコフイトン・メンタグロフイテス
（Trichophiton Mentagrophytes）及びトリコフ
イトン・ルブラム（Trichophiton rubram）、ナ
シ紋枯病原菌であるアルターナリア・キクチアナ
（Alternaria Kikuchiana）、イネ紋枯病原菌であ
るペリクラリア・ササキイホツコー
（Pellicularia Sasakii Hokko）、並びにイネいも
ち病原菌であるピリクラリア・オリゼ−
（Piricularia Oryzae）等に対して顕著な抗菌活
性を示す。 本発明の抗生物質1907のかかる抗菌活性は、寒
天希釈法（細菌：ハート・インフユージヨン寒天
培地、真菌：サブロウ寒天培地）で各種病原性被
検菌に対する最小発育阻止濃度（M.I.C.）を測定
することにより立証することができる。本発明の
抗生物質の各種被検菌に対するM.I，C.の測定結
果は下記第１表に示すとおりである。

【表】

【表】

【表】 また、本発明の抗生物質1907は、下記の試験管
内及び生体内試験結果から明らかなように、優れ
た抗悪性腫瘍活性を示し、抗癌剤としての用途が
考慮される。 (1) 本発明の抗生物質1907−及び1907−の培
養細胞に対する作用をL1210マウス白血病細胞
を用いて調べた。 すなわちL1210細胞を20％仔牛血清を含む
RPMI培地（日本Rosewell Memorialpark
Institute1640）へ移植し、37℃、３日間炭酸ガ
ス培養器中で培養し、種々の濃度抗生物質1907
−及び1907−及びトレーサー、ブレーカー
サーを加え、その増殖度を薬剤の50％阻害濃度
（mcg／ml）で示した。下記第２表に示すよう
に、培地中に抗生物質1907−を1mcｇ／mlの
濃度添加することにより、核酸生合成及び細胞
増殖を50％以上抑制した。抗生物質1907−も
同様の作用を有し、核酸生合成に対する50％抑
制濃度は2.0mcｇ／mlであつた。 この実験に於けるRNA、DNA、蛋白質合成
は上記培地中に於ける60分間、37℃での ¹⁴C−
チミジン、 ¹⁴C−ウリジン、 ¹⁴C−ロイシンの
細胞内取り込み率で調べ、対照区と比べた50％
阻害濃度（IC₅₀）で示したものである。

【表】 (2) 本発明の抗生物質1907−及び1907−のマ
ウス白血病L1210細胞に対する抗腫瘍効果を調
べた。 即ち、体重19ないし24ｇのCDF₁マウスに
L1210細胞１×10⁵ケを腹腔内に移植し、抗生
物質1907−及び1907−を移植24時間後から
10日間連続的に毎日１回づつ、腹腔内に投与し
た。その結果を下記第３表に示す。この第３表
より明らかなように、抗生物質1907−はマウ
スの体重のKg当り0.125mgの投薬量で、これを
投与しないマウスに比較して、158％の延命率
を示した。抗生物質1907−も0.125mg／Kgの
投薬量で投与しないマウスに比較して、146％
の延命率を示した。

【表】 (3) 抗生物質1907−及び1970−の
Sarcoma180腹水癌に対する抗腫瘍効果を調べ
た。 体重22〜25ｇのICRマウスにSarcoma180細
胞４×10⁶ケを腹腔内に移植し、抗生物質1907
−及び1907−を移植24時間後から７日間連
続的に毎日１回づつ、腹腔内に投与した。その
結果を下記第４表に示す。この第４表より明ら
かなように、抗生物質1907−及び1907−は
体重のKg当り0.063mgの投薬量で、これを投薬
しないマウスに比較してそれぞれ161％及び168
％の延命率を示した。

【表】 (4) 毒 性 上記(2)及び(3)の実験データより、各々のマウ
スにおけるLD₅₀値を計算したところ、抗生物
質1907−及び1907−のLD₅₀値は約５mg／
Kgと推定された。 本発明により提供される抗生物質1907は、前
述したとおり、強い抗菌力を有しているので、
前述した如き各種病原菌に起因する感染症の予
防、治療及び／又は処理のための抗菌剤の有効
成分として、人間及び人間以外の動物に対する
感染症の予防、治療、処置のために使用するこ
とができる。例えば、本発明の抗生物質1907は
水虫の病原菌であるトリコフイトン・ルブラ
ム、トリコフイトン・メンタグロフイテス、ミ
クロスポラム・ジプセウムに対して顕著な抗菌
力を有しているので、水虫外用薬として、製薬
学的常法に従い、軟膏、クリーム、チンキ、ロ
ーシヨン等の剤形に製剤することができる。 また、本発明の抗生物質1907は前述したとお
り、植物病害菌、例えばナシ紋枯病原菌、イネ
紋枯病原菌、イネいもち病原菌等に対して顕著
な殺菌活性を有しているので、農薬として、有
用作物の感染症の予防、治療及び／又は処置の
ために利用することができる。該抗生物質1907
を植物殺菌剤として使用する場合には、農薬分
野の慣行法に従い、該抗生物質1907の有効量を
固体又は液体の不活性担体又は希釈剤（例え
ば、デンプン、カオリン、タルク、水、各種有
機溶剤）と共に、粉剤、濃厚乳剤、エーロゾ
ル、等の剤形に製剤することができる。 さらに、本発明の抗生物質1907はその優れた
抗菌力を生かして、工業分野、建築分野等にお
いて、塗料やプラスチツクに配合し、或いは木
材、皮革等の殺菌等に利用することができる。 以下実施例により本発明をさらに説明する。 実施例 ペシロミセス・リラシナス（Paecilomyces
Iilacinus）No.1907菌の種母培地及び生産培地は共
に次の組成とした：グルコース0.5ｇ／dl、溶性
澱粉3.0ｇ／dl、大豆粉1.5ｇ／dl、ペプトン0.3
ｇ／dl、乾燥酵母0.2ｇ／dl、K₂HPO₄0.1ｇ／
dl、NaCl0.1ｇ／dl、MgSO₄・7H₂O0.05ｇ／dl、
Fe₂（SO₄）₃・6H₂O0.001ｇ／dl、CuSO₄・
5H₂O0.0001ｇ／dl、ZnSO₄・7H₂O0.0001ｇ／
dl、MnSO₄・H₂O0.0001ｇ／dl、Na₂CO₃1.0ｇ／
dl。種母培地は、前記原料の内Na₂CO₃以外の原
料を水に溶解又は懸濁し、その100mlづつを500ml
坂口フラスコに分注し、120℃15分間蒸気滅菌し
た。一方Na₂CO₃は相当する量を少量の水に溶解
して、上記とは別に120℃15分間滅菌し、冷却後
に上記坂口フラスコに注入した。これにより培地
のPHは10.25となつた。 この種母培地に、ペシロミセス・リラシナスNo.
1907を接種し、28℃にて３日間振とう培養した。 次に第二段種母培地として前記原料の内
Na₂CO₃以外のものを全容30のジヤーフアーメ
ンターに15仕込み、更に消泡剤として日産デイ
スフオームCB−442（日本油脂(株)社製）を0.05
ｇ／dl添加し、120℃で15分蒸気滅菌した。別に
Na₂CO₃を少量の水に溶解した後、120℃で15分滅
菌し、これを上記ジヤーフアーメンターに加え
た。これによつて培地のPHは10.25となつた。こ
れに前記の坂口フラスコに培養した種母を100ml
接種し、28℃にて通気撹拌しながら１日培養し
た。 生産培地として全容200の発酵タンクに100
の培地を上記ジヤーフアーメンターの仕込みと同
様の方法で仕込んだ。培地PHは10.25となつた。
これに上記のジヤーフアーメンターにより培養し
た種母を１添加し、28℃にて通気撹拌しながら
６日間培養した。培養中のPHは10.25〜9.00の範
囲に保たれた。 この培養液（全量85）を取り出し、硫酸にて
PH4.0とした後、フイルタープレスで過し、
液80を得た。これを苛性ソーダにてPH8.0と
し、20づつのベンゼンで２回抽出し、ベンゼン
抽出液37を得た。これを減圧濃縮し、約15ｇの
褐色油状物質を得た。これをシリカゲル〔Wako
gel Ｃ−200；和光純薬工業(株)〕を用いたカラム
（φ７cm×52cm）クロマトグラフイーにかけ、含
有する成分を分離した。溶出溶剤としては、最初
ベンゼン：メタノール＝10：１の混合液を用い、
順次メタノールの割合を多くし、最後にはベンゼ
ン：メタノール＝１：１となるようにした。これ
によつて、11種類の分画を得た。それぞれの分画
を減圧濃縮し、さらに一夜真空乾燥した。これに
より本発明に係る抗生物質1907−を含有する分
画（２番目に溶出する分画）から約６ｇ、抗生物
質1907−を含有する分画（８番目に溶出する分
画）から約1.4ｇの黄褐色粉末を得た。 上記それぞれの物質を再びシリカゲルカラムク
ロマトにかけた。カラムはφ5.0cm×77cmのもの
を用い、クロロホルム：メタノール系の溶出液を
用いて精製した。抗生物質1907−はクロロホル
ム：メタノール（10：１）の溶出区より単一に得
られた。また、抗生物質1907−はクロロホル
ム：メタノール（１：１）の溶出区より単一に得
られた。得られた溶出区を各々減圧濃縮し、更に
セフアデツクスLH−20（フアルマシア社製）を
用いたカラムクロマトグラフイーにより最終的に
精製した。この場合φ５cm×50cmのカラムを用い
メタノールにより溶出した。この溶出液を減圧濃
縮し更に真空乾燥することにより、抗生物質1907
−の白色粉末750mgと抗生物質1907−の白色
粉末150mgを得た。 得られた抗生物質1907−及び抗生物質1907−
の理化学的性状は次の通りである。 抗生物質1907−及び1907−の理化学的性状 (1) 分子量 FD−mass（日本電子社製マススペクトロメー
ターモデルJMS−D300）スペクトル分析により
求めた。 1907−：1203 1907−：1217 (2) 元素分析 FD−MS分析より求めた分子量及びIn−Beam
マス（日立製作所マススペクトロメーターモデル
Ｍ−80）スペクトル分析により求まつた構造より
次の分子式が求められた。 1907−：C₆₁N₁₁O₁₃H₁₀₉ 1907−：C₆₂N₁₁O₁₃H₁₁₁ (3) In−Beamマススペクトル 1907−のアセチル体及び1907−のアセチル
体のIn−Beamマススペクトルを夫々添付の第１
図及び第２図に示す。第１図及び第２図のフラグ
メレテーシヨンパターンより、本発明の抗生物質
1907−及び1907−の構成々分の配列が決定さ
れた。 (4) 融 点 1907−：125〜133℃ 1907−：113〜120℃ (5) 比旋光度 1907−：〔α〕^２４ _Ｄ−38.1゜ （ｃ＝0.07、メタノール） 1907−：〔α〕^２４ _Ｄ−38.0゜ （ｃ＝0.05、メタノール） (6) 溶剤に対する溶解性 1907−および1907−：ベンゼン、トルエ
ン、酢酸エチル、クロロホルム、低級アル
コール類に易溶である石油エーテル、ヘキ
サン、水に難溶である (7) 呈色反応 1907−：ニンヒドリン反応＋；ビユーレツト
反応＋；モーリツシユ反応−；坂口反応− 1907−：ニンヒドリン反応−；ビユーレツト
反応＋；モーリツシユ反応−；坂口反応− (8) 塩基性、中性、酸性の別 1907−：塩基性 1907−：塩基性 (9) 物質の色 1907−：白色 1907−：白色 (10) 赤外線吸収スペクトル 1907−：添付の第３図に示す （ヌジヨール） 1907−：添付の第４図に示す（KBr錠） (11) 核磁気共鳴スペクトル（90メガヘルツ、重ク
ロロホルム中） 1907−：添付の第５図に示す。 1907−：添付の第６図に示す。 (12) 紫外線吸収スペクトル（メタノール中） 1907−、1907−共に末端吸収を示す。
220nmにわずかに肩が見られる。

【図面の簡単な説明】

第１図、第２図は抗生物質1907−及び抗生物
質1907−それぞれのアセチル化物のIn Beamマ
ススペクトル図である。第３図及び第４図は抗生
物質1907−及び抗生物質1907−それぞれの赤
外線吸収スペクトル図である。第５図及び第６図
は抗生物質1907−及び抗生物質1907−それぞ
れのプロトン核磁気共鳴スペクトル図である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 式 式中、Ｒは水素原子又はメチル基を表わす、 で示される化合物又はその塩。 ２ 式 式中、Ｒは水素原子又はメチル基を表わす、 で示される化合物を生産する能力を有するペシロ
   ミセス（Paecilomyces）属に属する糸状菌を、
   PH値が約8.5〜約11の栄養培地中で培養し、その
   培養液から上記式（）で示される化合物を採取
   することを特徴とする上記式（）で示される化
   合物の製造方法。 ３ 式 式中、Ｒは水素原子又はメチル基を表わす、 で示される化合物又はその塩を有効成分とするこ
   とを特徴とする抗菌剤。