JPS6281400A - 核酸の分離方法 - Google Patents
核酸の分離方法Info
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- JPS6281400A JPS6281400A JP22022185A JP22022185A JPS6281400A JP S6281400 A JPS6281400 A JP S6281400A JP 22022185 A JP22022185 A JP 22022185A JP 22022185 A JP22022185 A JP 22022185A JP S6281400 A JPS6281400 A JP S6281400A
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は核酸の分離方法、詳しくは平均細孔径が１５０
オングストローム以上の大きい細孔径を有するシリカゲ
ルに炭素数２０以上のアルキル基を有するシラン化合物
を反応させて得られる逆相クロマトグラフィー用充填剤
を用いることを特徴とする液体クロマトグラフィーによ
る核酸の分離方法に関するものである。
オングストローム以上の大きい細孔径を有するシリカゲ
ルに炭素数２０以上のアルキル基を有するシラン化合物
を反応させて得られる逆相クロマトグラフィー用充填剤
を用いることを特徴とする液体クロマトグラフィーによ
る核酸の分離方法に関するものである。
（従来の技術ｉよび問題点）
シリカゲルに炭素数１から１８のアルキル基を有するシ
ラン化合物を反応させて得られる充填剤は逆相クロマト
グラフィーにおいて広く用いられており、分子置の小さ
い核酸やその構成物質に対しても同様に極め【有用であ
ることは知られている。しかしながら、これらの通常の
充填剤を用いる場合には核酸の分子竜が太き（なるにつ
れてクロマトピークの幅が広くなり分離が困難になる。
ラン化合物を反応させて得られる充填剤は逆相クロマト
グラフィーにおいて広く用いられており、分子置の小さ
い核酸やその構成物質に対しても同様に極め【有用であ
ることは知られている。しかしながら、これらの通常の
充填剤を用いる場合には核酸の分子竜が太き（なるにつ
れてクロマトピークの幅が広くなり分離が困難になる。
（解決しようとする問題点）
本発明者らはシリカゲルの物性およびアルキルシラン化
合物の種類と核酸に対する分離能との関係について鋭意
研究を重ねた結果、平均細孔径が１５０オングストロー
ム以上の大細孔径のシリカゲルに炭素数２０以上のアル
キル基を有するシラ／化合物を反応させて得られる充填
剤は、塩基数１０以上の核酸に対しても極めて鋭いクロ
マトピ−りを与える核酸の分離方法を提供するものであ
る。
合物の種類と核酸に対する分離能との関係について鋭意
研究を重ねた結果、平均細孔径が１５０オングストロー
ム以上の大細孔径のシリカゲルに炭素数２０以上のアル
キル基を有するシラ／化合物を反応させて得られる充填
剤は、塩基数１０以上の核酸に対しても極めて鋭いクロ
マトピ−りを与える核酸の分離方法を提供するものであ
る。
（問題点を解決するための手段）
以下、本発明の詳細な説明する。
本発明で使用するシリカゲルは粒子の大きさが１から１
００ミクロン、好ましくは３から３０ミクロンの球状な
いし破砕状の多孔性シリカゲルで、平均細孔径が１５０
オングストローム以上のものである。細孔径が１５０オ
ングストローム未満の場合には塩基数が１０以上の核酸
に対して塩基数が大きくなるにつれてピークの鋭さが失
われ好ましくない。すなわち、細孔径が小さいと長鎖ア
ルキル７ラン化合物による表面改質において、細孔が閉
塞される傾向があることおよび核酸が大きくなるほど細
孔内において分子が円滑に移動できなくなるためと考え
られる。最適な細孔径は対象とする核酸の大きさくより
変わるが、本発明において主として対象とする塩基数５
０以下のオリゴマー領域においては１５０からｉ、 ｏ
ｏ ｏオングストロームの範囲が適当である。
００ミクロン、好ましくは３から３０ミクロンの球状な
いし破砕状の多孔性シリカゲルで、平均細孔径が１５０
オングストローム以上のものである。細孔径が１５０オ
ングストローム未満の場合には塩基数が１０以上の核酸
に対して塩基数が大きくなるにつれてピークの鋭さが失
われ好ましくない。すなわち、細孔径が小さいと長鎖ア
ルキル７ラン化合物による表面改質において、細孔が閉
塞される傾向があることおよび核酸が大きくなるほど細
孔内において分子が円滑に移動できなくなるためと考え
られる。最適な細孔径は対象とする核酸の大きさくより
変わるが、本発明において主として対象とする塩基数５
０以下のオリゴマー領域においては１５０からｉ、 ｏ
ｏ ｏオングストロームの範囲が適当である。
本発明で使用する長鎖アルキルシランとしては炭素数２
０以上のアルキル基を有するもので、例えばエイコシル
トリクロロシラン、エイコシルトリメトキシシラン、エ
イコシルトリエトキシシラン。
０以上のアルキル基を有するもので、例えばエイコシル
トリクロロシラン、エイコシルトリメトキシシラン、エ
イコシルトリエトキシシラン。
トコシルメチルジクロロシラン、トコシルメチルジメト
キシラン、トコシルメチルジェトキシ７ラン、トコジル
トリクロロシラン、トコジルトリメトキシシラン、トコ
ジルトリエトキシシラン、トリアコンチルジメチルクロ
ロシラン、トリアコンチルジメチルメトキシシラン、ト
リアコ／チルジメチルエトキシシラン、トリアコンチル
トリクロロシラン、トリアコンチルトリメトキシシラン
。
キシラン、トコシルメチルジェトキシ７ラン、トコジル
トリクロロシラン、トコジルトリメトキシシラン、トコ
ジルトリエトキシシラン、トリアコンチルジメチルクロ
ロシラン、トリアコンチルジメチルメトキシシラン、ト
リアコ／チルジメチルエトキシシラン、トリアコンチル
トリクロロシラン、トリアコンチルトリメトキシシラン
。
トリアコンチルトリエトキシシラン１などのノ１０ゲン
基またはアルコキシ基を１から３個有するアルキルシラ
ン化合物である。
基またはアルコキシ基を１から３個有するアルキルシラ
ン化合物である。
本発明において、シリカゲルとアルキルシラン化合物の
反応は通常の方法によって行われる。すなわち、乾燥さ
れたシリカゲルを適当な溶媒の存在下でアルキルシラ／
化合物とともに加熱する方法で反応を行うことができる
。
反応は通常の方法によって行われる。すなわち、乾燥さ
れたシリカゲルを適当な溶媒の存在下でアルキルシラ／
化合物とともに加熱する方法で反応を行うことができる
。
反応におけるアルキルシラン化合物の必要量はシリカゲ
ルのシラノール基に対して通常当量以下で十分である。
ルのシラノール基に対して通常当量以下で十分である。
なるべ（均一な単分子層を形成させることが好ましい。
アルギルシラン化合物の望ましい導入景はシリカゲルの
物性とアルキルシラン化合物の種類に依存する。通常炭
素の元素分析値で１０から２０鴫程度が適当である・ 反応に使用する溶媒はアルキルシラン化合物をよく溶解
し、かつ、アルキルシラン化合物に対して不活性である
ことが必要である。好ましい溶媒としてはｎ−ヘキサン
、ｎ−へブタン、ｎ−オクタン、ｎ−デカノ、イソオク
タン、シクロヘキサンなどの飽和炭化水素、クロロホル
ム、四塩化炭素。
物性とアルキルシラン化合物の種類に依存する。通常炭
素の元素分析値で１０から２０鴫程度が適当である・ 反応に使用する溶媒はアルキルシラン化合物をよく溶解
し、かつ、アルキルシラン化合物に対して不活性である
ことが必要である。好ましい溶媒としてはｎ−ヘキサン
、ｎ−へブタン、ｎ−オクタン、ｎ−デカノ、イソオク
タン、シクロヘキサンなどの飽和炭化水素、クロロホル
ム、四塩化炭素。
ジクロロエタン、トリクロロエタン、テトラクロロエタ
ン、ジクロロプロパンなどのハロゲン化炭化水Ｌベンゼ
ン、トルエン、キシレン、エチルベンゼンなどの芳香族
炭化水素およびクロロベンゼン、ジクロロベンゼン、ト
リクロロベンゼンなどの芳香族ハロゲン化物などを挙げ
ることができる。反応の温度は通常室温から溶媒の沸点
の間で選択すればよ（、一般には５０から１００°Ｃ程
度で数時間から２０時間程度反応をおこなう。
ン、ジクロロプロパンなどのハロゲン化炭化水Ｌベンゼ
ン、トルエン、キシレン、エチルベンゼンなどの芳香族
炭化水素およびクロロベンゼン、ジクロロベンゼン、ト
リクロロベンゼンなどの芳香族ハロゲン化物などを挙げ
ることができる。反応の温度は通常室温から溶媒の沸点
の間で選択すればよ（、一般には５０から１００°Ｃ程
度で数時間から２０時間程度反応をおこなう。
この様にして得られた充填剤は数ミクロモル／−の残存
するシラノール基を有する。使用するアルキルシラン化
合物が非常に大きいため、立体的障害によりシリカゲル
の有するシラノール基のうち反応に関与できるシラノー
ル基が限定されることと、多ハロゲン化アルキルシラン
化合物を用いる場合、新たにシラノール基が生成するこ
とによる。
するシラノール基を有する。使用するアルキルシラン化
合物が非常に大きいため、立体的障害によりシリカゲル
の有するシラノール基のうち反応に関与できるシラノー
ル基が限定されることと、多ハロゲン化アルキルシラン
化合物を用いる場合、新たにシラノール基が生成するこ
とによる。
したがって、残存するシラノール基が試料中に存在する
カチオン性物質の不可逆的な吸着に関与する恐れがある
ときは、なるべく消去しておくことが望ましい。残存す
るシラノール基を消去するＫは通常炭素数の少ないアル
キルシラン化合物と縮合反応させる方法が行われる。低
級アルキルシラン化合物としてはトリメチルクロロシラ
ン、トリメチルブロモシラ／、トリメチルメトキシシラ
ン。
カチオン性物質の不可逆的な吸着に関与する恐れがある
ときは、なるべく消去しておくことが望ましい。残存す
るシラノール基を消去するＫは通常炭素数の少ないアル
キルシラン化合物と縮合反応させる方法が行われる。低
級アルキルシラン化合物としてはトリメチルクロロシラ
ン、トリメチルブロモシラ／、トリメチルメトキシシラ
ン。
トリメチルエトキシシラン、トリメチルシリルアセトア
ミド、ビス（トリメチルノリル）アセトアミド、エチル
ジメチルクロロシランなどがある。
ミド、ビス（トリメチルノリル）アセトアミド、エチル
ジメチルクロロシランなどがある。
シラノール基を消去する反応には前述のシリカゲルにア
ルキルシラン化合物を反応させるのと同様の方法が適用
できる。通常、反応を完結させるために低級アルキルシ
ラン化合物をシラノール基に対して当量以上用い、低級
アルキルシラン化合物の沸点以下の温度で５から２０時
間反応を行う。
ルキルシラン化合物を反応させるのと同様の方法が適用
できる。通常、反応を完結させるために低級アルキルシ
ラン化合物をシラノール基に対して当量以上用い、低級
アルキルシラン化合物の沸点以下の温度で５から２０時
間反応を行う。
本発明において、液体クロマトグラフィーの条件として
は通常の逆相クロマトグラフィーにおける公知の諸条件
が適用できる。すなわち、前述の方法で得られた充填剤
を適当なりロマトグラフィー用のカラムに充填し、適当
な緩衝液と適当な有機溶媒を用いて、有機溶媒の濃度が
次第に高くなる勾配溶出法により分離を行う。有機溶媒
としては水溶性で核酸に対して不活性な広い範囲の有機
溶媒が適用可能であるが、通常、メタノール、エタ／
−ル、 ｎ−７’ロバノール、 １ｓｏ−クロハノルな
どの低級アルコール、アセトニトリル、テトラヒドロフ
ランなどが用いられる。
は通常の逆相クロマトグラフィーにおける公知の諸条件
が適用できる。すなわち、前述の方法で得られた充填剤
を適当なりロマトグラフィー用のカラムに充填し、適当
な緩衝液と適当な有機溶媒を用いて、有機溶媒の濃度が
次第に高くなる勾配溶出法により分離を行う。有機溶媒
としては水溶性で核酸に対して不活性な広い範囲の有機
溶媒が適用可能であるが、通常、メタノール、エタ／
−ル、 ｎ−７’ロバノール、 １ｓｏ−クロハノルな
どの低級アルコール、アセトニトリル、テトラヒドロフ
ランなどが用いられる。
液体クロマトグラフィーにおいてカラムの分離能を表す
指標の一つに理論段相当高さがあり次の式で定義される
。
指標の一つに理論段相当高さがあり次の式で定義される
。
理論段相当高さ−Ｌ／Ｎ−（Ｌ／１６）ｘ（Ｗ／Ｖｅ）
ここに Ｌ はカラム長（輻） Ｎ は理論段数 Ｗ はピーク幅（ｒｎｔ） Ｖθは溶出容量（、ｔ） 理論段相当高さは数値が小さいほどピークのひろがりが
小さく（ピークが鋭く）カラムの性能が優れていること
を示す。但し、理論段相当高さは粒子の大きさに依存す
る（粒子径が小さいほど大きくなる）ため、なるべく同
一粒子径で比較することが必要である。
ここに Ｌ はカラム長（輻） Ｎ は理論段数 Ｗ はピーク幅（ｒｎｔ） Ｖθは溶出容量（、ｔ） 理論段相当高さは数値が小さいほどピークのひろがりが
小さく（ピークが鋭く）カラムの性能が優れていること
を示す。但し、理論段相当高さは粒子の大きさに依存す
る（粒子径が小さいほど大きくなる）ため、なるべく同
一粒子径で比較することが必要である。
塩基数２６の合成核酸で測定した理論段相当高さは、通
常の市販の５ミクロンのオクタデシルシリル化シリカゲ
ル（ＯＤＳシリカ）ではα０１龍から１１錫の範囲であ
ったが、本発明の充填剤ではα００１ａｓからα００５
騙程度と啄めて小さい優れた値を示した。
常の市販の５ミクロンのオクタデシルシリル化シリカゲ
ル（ＯＤＳシリカ）ではα０１龍から１１錫の範囲であ
ったが、本発明の充填剤ではα００１ａｓからα００５
騙程度と啄めて小さい優れた値を示した。
以下、本発明を実施例により具体的に説明する。
実−例１
還流冷却器、攪拌装置およびチッソ導入管を具えた５
００ＩＩＬｔの三つロフラスコに、減圧下８０°Ｃで１
６時間乾燥した平均細孔径２５０オングストローム、比
表面積２８０？Ｆ？／９、平均粒子径１０ミクロンのシ
リカゲル１０９を入れ、これに９０−の乾燥トルエンを
加え、超音波槽で約５分間脱気スる。これにトリアコン
チルジメチルクロロシラン６．４ｇを加え、８０℃で１
０時間反応させた。
００ＩＩＬｔの三つロフラスコに、減圧下８０°Ｃで１
６時間乾燥した平均細孔径２５０オングストローム、比
表面積２８０？Ｆ？／９、平均粒子径１０ミクロンのシ
リカゲル１０９を入れ、これに９０−の乾燥トルエンを
加え、超音波槽で約５分間脱気スる。これにトリアコン
チルジメチルクロロシラン６．４ｇを加え、８０℃で１
０時間反応させた。
反応中に生成する塩化水素はチッソを導入して水酸化す
） ＩＪウム溶液の入ったガス吸収管に導入して吸収さ
せる。反応後、ゲルをグラスフィルターで口過し、つい
で未反応のトリアコンチルジメチルシランを除くため、
８０℃のトルエン３００ｍｌを３から５回に分けてゲル
をリンス洗浄した。その後、アセトンｓａｏｍｔでトル
エンを除き、続いて水３００ＩＬｔで塩化水素を除く。
） ＩＪウム溶液の入ったガス吸収管に導入して吸収さ
せる。反応後、ゲルをグラスフィルターで口過し、つい
で未反応のトリアコンチルジメチルシランを除くため、
８０℃のトルエン３００ｍｌを３から５回に分けてゲル
をリンス洗浄した。その後、アセトンｓａｏｍｔでトル
エンを除き、続いて水３００ＩＬｔで塩化水素を除く。
さらに、アセトン３００−で洗浄した後、減圧下６０℃
で１６時間乾燥した。このよう圧して得られたアルキル
シリル化シリカゲルを前述の装置に移し、乾燥トルエン
９０成を加え、超音波槽で約５分間脱気した後、１０９
のトリメチルクロロシランを加え、４０℃で１０時間反
応する。反応後、ゲルをガラスフィルターでろ過し、ト
ルエン、アセトン、水。
で１６時間乾燥した。このよう圧して得られたアルキル
シリル化シリカゲルを前述の装置に移し、乾燥トルエン
９０成を加え、超音波槽で約５分間脱気した後、１０９
のトリメチルクロロシランを加え、４０℃で１０時間反
応する。反応後、ゲルをガラスフィルターでろ過し、ト
ルエン、アセトン、水。
アセトンの順に洗浄し減圧下６０℃で１６時間乾燥した
。このような表面改質反応で得られたトリアコンチル基
導入シリカゲルの元素分析値は炭素１７．０％、水素五
１％であった。
。このような表面改質反応で得られたトリアコンチル基
導入シリカゲルの元素分析値は炭素１７．０％、水素五
１％であった。
このゲルの液体クロマトグラフィーにおける核酸の分離
能についての評価を行うため、内径４．６１＋５ 。
能についての評価を行うため、内径４．６１＋５ 。
長さ１５ｃｒｎのステンレスカラムに充填し、検出りに
紫外吸収分光光度計を用い、１１Ｍ酢酸アンモニウム水
溶液からアセトニトリルの０−２５％直線勾配（リニヤ
−グラジェント）溶出法忙より、塩基数７．９．２５お
よび２６の合成核酸混合物を分離したクロマトグラムを
第１ＦｙＪＫ示ス。
紫外吸収分光光度計を用い、１１Ｍ酢酸アンモニウム水
溶液からアセトニトリルの０−２５％直線勾配（リニヤ
−グラジェント）溶出法忙より、塩基数７．９．２５お
よび２６の合成核酸混合物を分離したクロマトグラムを
第１ＦｙＪＫ示ス。
塩基数２６の核酸のピークから算出した理論段相当高さ
はα００１６．であり極めて鋭いピークであることがわ
かる。
はα００１６．であり極めて鋭いピークであることがわ
かる。
実施例２
シリカゲルとして平均細孔径１５０オングストローム、
比表面積３５（ｌｙ／／ｌ；ｌ、平均粒子径５ミクロン
のシリカゲルを用い、トリアフンチルジメチルクロロシ
ランの使用量をａ０９にするほかは実施例１と同様に表
面改質反応および液体クロマトグラフィーによる評価を
行った。得られたゲルの元素分析値は炭素１′１３％、
水素五５％であった。また塩基数２６の核酸のピークの
理論段相当高さはα００１９．であった。
比表面積３５（ｌｙ／／ｌ；ｌ、平均粒子径５ミクロン
のシリカゲルを用い、トリアフンチルジメチルクロロシ
ランの使用量をａ０９にするほかは実施例１と同様に表
面改質反応および液体クロマトグラフィーによる評価を
行った。得られたゲルの元素分析値は炭素１′１３％、
水素五５％であった。また塩基数２６の核酸のピークの
理論段相当高さはα００１９．であった。
実施例５
シリカゲルとして平均細孔径５００オングストローム、
比表面積２２０ｄ／９、平均粒子径１０ミクロンのシリ
カゲルを用い、トリアコンチルジメチルクロロシランの
使用量を５．０９にするほかは実施例１と同様に表面改
質反応および液体クロマトグラフィーによる評価を行っ
た。得られたゲルの元素分析値は炭素９．８％、水素λ
１％であった。また、塩基数２６の核酸のピークの理論
段相当高さはα００１５．であった。
比表面積２２０ｄ／９、平均粒子径１０ミクロンのシリ
カゲルを用い、トリアコンチルジメチルクロロシランの
使用量を５．０９にするほかは実施例１と同様に表面改
質反応および液体クロマトグラフィーによる評価を行っ
た。得られたゲルの元素分析値は炭素９．８％、水素λ
１％であった。また、塩基数２６の核酸のピークの理論
段相当高さはα００１５．であった。
実施例４
アルキルシラ／化合物としてエイコシルトリクロロシラ
ンを用いることのほかは実施例１と同様に表面改質反応
および液体クロマトグラフィー忙よる評価を行った。得
られたゲルの元素分析値は炭素１５．８％、水素五〇％
であった。また、塩基数２６の核酸のピークの理論段相
当高さは［ＬＯ０２０１Ｉｊであった。
ンを用いることのほかは実施例１と同様に表面改質反応
および液体クロマトグラフィー忙よる評価を行った。得
られたゲルの元素分析値は炭素１５．８％、水素五〇％
であった。また、塩基数２６の核酸のピークの理論段相
当高さは［ＬＯ０２０１Ｉｊであった。
実施例５
アルキルシラン化合物としてトコシルメチルジメトキシ
シランを用いることのほかは実施例１と同様に表面改質
反応および液体クロマトグラフィーによる評価を行った
。得られたゲルの元素分析値は炭素１６０％、水素五１
％であった。また、塩基数２６の核酸のピークの理論段
相当高さはαＯＯ１８ｓｕであった。
シランを用いることのほかは実施例１と同様に表面改質
反応および液体クロマトグラフィーによる評価を行った
。得られたゲルの元素分析値は炭素１６０％、水素五１
％であった。また、塩基数２６の核酸のピークの理論段
相当高さはαＯＯ１８ｓｕであった。
実施例６
トリメチルクロロシランを用いる残存するシラノール基
の除去反応を省略することのほかは実施例１と同様に表
面改質反応および液体クロマトグラフィーによる評価を
行った。得られたゲルの元素分析値は炭素１４５％、水
素五〇％であった。
の除去反応を省略することのほかは実施例１と同様に表
面改質反応および液体クロマトグラフィーによる評価を
行った。得られたゲルの元素分析値は炭素１４５％、水
素五〇％であった。
また、塩基数２６の核酸のピークの理論段相当高さはα
００２０゜であった。
００２０゜であった。
比較例１
アルキルシラン化合物としてオクタデシルトリクロロシ
ランを用いることのほかは実施例２と同様に表面改質反
応および液体クロマトグラフィーによる評価を行った。
ランを用いることのほかは実施例２と同様に表面改質反
応および液体クロマトグラフィーによる評価を行った。
得られたゲルの元素分析値は炭素１９１％、水素五５％
であった。また、塩基数２６の核酸のピークの理論段相
当高さは１０３５、であった。
であった。また、塩基数２６の核酸のピークの理論段相
当高さは１０３５、であった。
比較例２
シリカゲルとして平均細孔径１００オ／グストローム、
比表面積４０ＯＦＦ／／９、平均粒子径５ミクロンのシ
リカゲルを用いるほかは実施例１と同様に表面改質反応
および液体クロマトグラフィーによる評価を行った。得
られたゲルの元素分析値は炭素１９．７％、水素五６％
であった。また、塩基数２６の核酸のピークの理論段相
当高さはα０８３．であった。
比表面積４０ＯＦＦ／／９、平均粒子径５ミクロンのシ
リカゲルを用いるほかは実施例１と同様に表面改質反応
および液体クロマトグラフィーによる評価を行った。得
られたゲルの元素分析値は炭素１９．７％、水素五６％
であった。また、塩基数２６の核酸のピークの理論段相
当高さはα０８３．であった。
（効 果）
以上述べたように、本発明で得られる充填剤はいわゆる
逆相クロマトグラフィー用充填剤として従来の充填剤に
比べて核酸、特に、今後遺伝子工学において重要な塩基
数が１０から１００程度の大きさの核酸に対して優れた
分離能を示す極めて有用な充填剤であり、分析や分離精
製に利用することができる。
逆相クロマトグラフィー用充填剤として従来の充填剤に
比べて核酸、特に、今後遺伝子工学において重要な塩基
数が１０から１００程度の大きさの核酸に対して優れた
分離能を示す極めて有用な充填剤であり、分析や分離精
製に利用することができる。
第１図は、核酸混合物を分離したクロマトグラムを示す
。
。
Claims (1)
- １）平均細孔径が１５０オングストローム以上の大きい
細孔径を有するシリカゲルに炭素数２０以上のアルキル
基を有するシラン化合物を反応させて得られる逆相クロ
マトグラフィー用充填剤を用いることを特徴とする液体
クロマトグラフィーによる核酸の分離方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22022185A JPH0637510B2 (ja) | 1985-10-04 | 1985-10-04 | 核酸の分離方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22022185A JPH0637510B2 (ja) | 1985-10-04 | 1985-10-04 | 核酸の分離方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS6281400A true JPS6281400A (ja) | 1987-04-14 |
| JPH0637510B2 JPH0637510B2 (ja) | 1994-05-18 |
Family
ID=16747773
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP22022185A Expired - Lifetime JPH0637510B2 (ja) | 1985-10-04 | 1985-10-04 | 核酸の分離方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0637510B2 (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63150294A (ja) * | 1986-11-22 | 1988-06-22 | キアゲン・ゲーエムベーハー | 長鎖核酸を分離する方法 |
| JP2002506425A (ja) * | 1997-04-25 | 2002-02-26 | トランスジエノミツク・インコーポレーテツド | ポリヌクレオチド分離のための改良された液体クロマトグラフィー媒体 |
| KR20030072652A (ko) * | 2002-03-06 | 2003-09-19 | 이호재 | 이온교환관능기의 도입방법 |
| US11628381B2 (en) | 2012-09-17 | 2023-04-18 | W.R. Grace & Co. Conn. | Chromatography media and devices |
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| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
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| JP2021054922A (ja) * | 2019-09-30 | 2021-04-08 | 富士フイルム株式会社 | 熱伝導材料形成用組成物、熱伝導材料、熱伝導シート、熱伝導層付きデバイス |
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1985
- 1985-10-04 JP JP22022185A patent/JPH0637510B2/ja not_active Expired - Lifetime
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH0637510B2 (ja) | 1994-05-18 |
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